P. 1
Guias Bioquimica 2012.docx

Guias Bioquimica 2012.docx

|Views: 194|Likes:

More info:

Published by: Claudia Paz Zuñiga Avello on May 28, 2012
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as DOCX, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

05/19/2013

pdf

text

original

Universidad de Santiago de Chile

Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
1



















Laboratorio de Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
1 Semestre 2012












Profesor:
Marlen Gutiérrez



Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
2


Evaluación

En el presente laboratorio se evaluará de la siguiente forma:

Inform
1. Informes 50%
- Se deben entregar en el laboratorio al termino de cada práctica y son
individuales.
- Los atrasos en la entrega implica descuentos de 1 punto por día de
atraso.
- La no entrega de algo de los informes es causa de reprobación del curso.


2. Pruebas de Ciclo 50%
Fecha 9 de Mayo
20 de Junio

En cada sesión de laboratorio es OBLIGATORIO

1. Asistir con delantal blanco, gafas de seguridad y cuadernos de laboratorio.
2. Respetar el horario de entrada
3. Respetar las normas básicas de comportamiento y convivencia dentro de un
laboratorio(no comer, no beber, no fumar , no gritar, no hacer bromas)
4. Evitar el uso de zapatos descubiertos, pantalones cortos, vestidos, faldas y pelo
suelto.
5. Justificar Inasistencia (Certificado)






Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
3

CALENDARIO ACTIVIDADES

Modulo 5 – 6 – 7 - 8

Introducción 04/04/12

Fecha
Laboratorio
1
Laboratorio
2
Laboratorio
3
Laboratorio
4
11 Abril I II III IV
18 Abril IV I II III
25 Abril III IV I II
2 Mayo II III IV I


Grupo I Nicole Rojas – Claudia Zúñiga
Grupo II Raisa Manzor – Cyndia Salgado
Grupo III Romina Díaz – Camilo Tapia
Grupo IV Matías Toro – Ana Guajardo
Grupo V Daniela Valenzuela – Macarena Quiroz
Grupo VI Karin Jerez – Javiera Astudillo
Grupo VII Felipe Feliu - Pablo Seura
Grupo VIII Camila Zamorano



Grupo I = Grupo V
Grupo II = Grupo VI
Grupo III = Grupo VII
Grupo IV = Grupo VIII





Prueba de Laboratorio 9 de Mayo TODOS LOS GRUPOS


Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
4

CALENDARIO ACTIVIDADES

Modulo 9 – 10 – 11 - 12

Introducción 04/04/12

Fecha
Laboratorio
1
Laboratorio
2
Laboratorio
3
Laboratorio
4
11 Abril I II III IV
18 Abril IV I II III
25 Abril III IV I II
2 Mayo II III IV I


Grupo I José Ignacio Salinas - Yerko Canales
Grupo II
Grupo III
Grupo IV
Grupo V
Grupo VI
Grupo VII
Grupo VIII



Grupo I = Grupo V
Grupo II = Grupo VI
Grupo III = Grupo VII
Grupo IV = Grupo VIII





Prueba de Laboratorio 9 de Mayo TODOS LOS GRUPOS


Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
5

Fecha
Laboratorio
5
Laboratorio
6
Laboratorio
7
Laboratorio
8
16 Mayo I II III IV
23 Mayo IV I II III
30 Mayo III IV I II
6 Junio II III IV I



Recuperativos 13 de Junio


Prueba de Laboratorio 20 de Junio TODOS LOS GRUPOS


























Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
6
LABORATORIO N
º
1

ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE. APLICACIÓN DE LA LEY DE BEER

INTRODUCCIÓN

La espectrofotometría, especialmente en la región visible se utiliza a menudo
como método de análisis. Muchas sustancias pueden convertirse en derivados
coloreados y, por lo tanto, pueden ser analizados en la región visible del espectro
electromagnético.

La radiación electromagnética se puede considerar como una forma de energía
radiante que se propaga como onda transversal con un movimiento ondulatorio. La
distancia entre las ondas se describe en términos de longitud de onda (ì). La región
visible es una parte muy pequeña del espectro electromagnético y se extiende desde el
ultravioleta cercano, 380 nm hasta aproximadamente 780 nm.

La cantidad de radiación absorbida por una especie química se puede relacionar
con la concentración de la sustancia que se analiza, mediante la Ley de Beer.

A= k b C (1.1)

Donde:
A = absorbancia
C = concentración del analito
b = el paso óptico
k = la constante de proporcionalidad.


La constante de proporcionalidad k se denomina absortividad (a) si la
concentración de la sustancia a analizar se expresa en gramos/litro y absortividad molar
( c ) si la concentración del analito se expresa en moles/litro.

Es posible realizar cálculos cuantitativos cuando dos especies absorbentes de la
solución tienen espectros que se superponen. De acuerdo con la ley de Beer, la
absorbancia total de una mezcla a determinada longitud de onda, será igual a la suma
de las absorbancias individuales de las especies que absorben.







Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
7


Figura 1.1. Espectro de adsorción de dos componentes y mezcla de ambos


Cuando se trata de dos componentes, M y N, cuyos espectros de absorción
están superpuestos a todas las longitudes de onda, la forma de proceder es medir las
absorbancias A
1
y A
2
a las longitudes de onda λ
1
y λ
2
respectivamente, y planteando las
ecuaciones siguientes:

A
1
=εM
1
bCM +εN
1
bCN (aλ
1
) (1.2)
A
2
=εM
2
bCM +εN
2
bCN (aλ
2
) (1.3)

Esto es posible porque la ley de Beer establece que la absorbancia es una
propiedad aditiva, de forma que la absorbancia total de una disolución a una longitud de
onda dada es igual a la suma de las absorbancias de los componentes individuales
presentes.

En las ecuaciones anteriores, b representa el camino óptico y εM
1
, εM
2
, εN
1
y εN
2

las absortividades molares de M y N a las longitudes de onda λ
1
y λ
2
, que deben ser
determinadas previamente a partir de disoluciones patrón, o mejor, a partir de las
pendientes de sus representaciones de la ley de Beer.


Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
8
OBJETIVOS

- Estudiar los principios de la espectofotometría visible
- Conocer las características de operación de un espectrofotómetro.
- Determinar la concentración de Co (II) y Cr (III) en una mezcla.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.- A partir de las soluciones estándar y mediante una dilución apropiada prepare el set
de soluciones indicado en la Tabla 1, volumen 50 mL aforando con agua destilada
homogenice.

Tabla 1
Concentración de soluciones de Co y Cr (mol L
-1
)

Solución
Co (II) 0.20 mol L
-1
Cr (III) 0.04 mol L
-1

1 0.04 0.008
2 0.06 0.012
3 0.08 0.016
4 0.10 0.020

2.- Del espectro de absorción de Co y del espectro de Cr seleccione 2 longitudes de
onda de tal forma que:

a.-Absorbancia máxima para Co, absorbancia mínima para Cr
(Razón A
Co
/ A
cr
= máxima)

b.- Absorbancia máxima para Cr, absorbancia mínima para Co
(Razón A
Cr
/ A
Co
= máxima)

3.- Grafique A en función de concentración para cada solución a cada una de las
longitudes de onda utilizadas.

4.-De los gráficos de la ley de Beer, calcule el valor de la pendiente y el coeficiente de
absortividad molar (c)

5.- Calcule la concentración de cada componente en la solución problema, aplicando la
Ley de Beer y la propiedad de aditividad de la absorbancia en una mezcla.

Exprese sus resultados en gramos / litro (g/L), moles / litro (M) y mg / L (ppm).

LABORATORIO Nº 2
Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
9


POTENCIOMETRÍA ÁCIDO-BASE

INTRODUCCIÓN

Los métodos potenciométricos de análisis se basan en las medidas del potencial
de las celdas electroquímicas en ausencia de corrientes apreciables. Para ellos se
necesita un electrodo de trabajo, un electrodo de referencia y un instrumento para la
medida.

El potencial de un electrodo indicador adecuado se puede utilizar para establecer
el punto de equivalencia de una valoración (valoración potenciométrica). El punto final
potenciométrico es ampliamente aplicable y proporciona datos más precisos que los
métodos que utilizan indicadores. Este tipo de valoraciones es muy útil en la valoración
de soluciones coloreadas, turbias y para detectar la presencia de especies
insospechadas en solución.

La utilidad del pH como una medida de la acidez a basicidad de un medio acuoso
y la amplia disponibilidad de electrodos indicadores de pH (electrodos de vidrio), han
hecho que las medidas potenciométricas sean una de las medidas más utilizadas en el
análisis químico.

VALORACIONES POTENCIOMÉTRICAS
Dentro de los métodos potenciométricos de análisis nos encontramos con las
valoraciones potenciométricas, entendiendo por valoración potenciométrica, una
valoración basada en medidas de potenciales de un electrodo indicador adecuado en
función del volumen de agente valorante adicionado.

Una valoración potenciométrica implica dos tipos de reacciones:
Una reacción
química clásica, base de la valoración y que tiene lugar al reaccionar el reactivo
valorante añadido a la solución, o generado culombimétricamente, con la sustancia a
valorar.
Una o varias reacciones electroquímicas indicadoras de la actividad,
concentración, de la sustancia a valorar, del reactivo o de los productos de reacción.
De esta forma, el valor del potencial medido por el electrodo indicador varía a lo
largo de la valoración, traduciéndose el punto de equivalencia por la aparición de un
punto singular en la curva: potencial v.s. cantidad de reactivo añadido. La detección de
este punto, punto final, puede establecerse de
distintas formas:


Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
10
Método Directo

Consiste en graficar los datos de potencial en función del volumen de reactivo. El
punto de inflexión en la parte ascendente de la curva se estima visualmente y se toma
como punto final.


Método de la Primera Derivada
Implica calcular el cambio de potencial
por
unidad de volumen de
titulante (∆E/∆V).
El
grafico de estos datos
en función del
volumen
promedio V
produce una curva con un máximo
que corresponde al punto de inflexión. Si la curva
es simetría, el punto máximo de la pendiente
coincide con el de equivalencia. Las curvas
asimétricas dan un pequeño error de titulación si el
punto máximo se toma como el final. Estas curvas
son comunes cuando el número de electrones
transferidos es diferente en las semireacciones del
analito y titulante.

Método de la Segunda Derivada
En este caso se grafica ∆
2
E/∆
2
V de la
figura puede verse que la segunda derivada de
los datos cambia de signo en el punto de
inflexión. Este cambio de signo es tomado en
algunos casos como punto final. El punto final
de la titulación se toma en el punto de
intersección de la segunda derivada con cero.
Este punto puede ser ubicado con mucha
precisión.



Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
11
Método de Gran
Consiste en graficar AV/AE en función del
volumen promedio de
titulante. Antes y
después
del punto de equivalencia
AV/AE
varia linealmente con el volumen, las dos
líneas se interceptan y el punto de
equivalencia es el punto de intersección.
Este método no requiere datos muy cercanos
al punto de equivalencia es muy preciso. Este
procedimiento alternativo es más preciso ya la
ventaja de requerir menos puntos
experimentales que un gráfico convencional, y
proporcionan puntos finales más precisos en
aquellos casos que la variación del potencial medido sea pequeña en la región del
punto equivalente.

OBJETIVOS

- Calibrar un medidor de pH y aprender el uso y cuidado de un electrodo

- Valorar potenciométricamente una solución de:
1. Mezcla de HCI - H
3
PO4 con NaOH valorado.
2. Determinar el contenido de H
3
PO
4
en Coca Cola.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

I. Calibración de pH

1.- Calibre el medidor de pH con soluciones buffer estándares (pH 4 y pH 7). Siga
cuidadosamente las instrucciones señaladas en el manual.

II. Valoración potenciométrica de mezcla de HCI - H
3
PO
4


- Tome una alícuota de 10 mL de mezcla de HCI - H
3
PO
4
y transfiera a un vaso de
250 mL. Introduzca una barra magnética e instale el vaso sobre un agitador,
agite suavemente.

- Sumerja el electrodo en el vaso y agregue agua destilada suficiente como para
cubrirlo.

- Realice una primera valoración estimativa para ubicar los puntos de
equivalencia, agregando incrementos de 0.5 mL de NaOH de concentración
conocida (0.1 M) y registre el valor del pH después de cada adición de titulante.
Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
12

Repita el procedimiento agregando esta vez, en las zonas cercanas al punto de
equivalencia, incrementos de 0.2 mL de titulante.

III. Valoración de H
3
PO
4
en bebidas tipo cola

Realice el procedimiento indicado en el punto anterior, tomando exactamente 50 mL de
bebida (Coca- Cola) Sonicada.

TRATAMIENTO DE DATOS

1.- Informe tablas que contengan

a) pH medido v/s Volumen
b) A pH / AV v/s Volumen (primera derivada)
c) A
2
pH / A
2
V v/s Volumen (segunda derivada)
d) Metodo de Gran

Grafique los datos de cada tabla

2.- Calcule el volumen final (punto de equivalencia) para cada muestra

3.- Calcule las concentraciones Molares de HCl y del H
3
PO
4
en la mezcla y H
3
PO
4
en la
bebida valorada que contienen las muestras valoradas, además calcule la masa de
H
3
PO
4
en la bebida.

CUESTIONARIO

1.- Indique que características debe cumplir un electrodo para ser utilizados como
electrodo indicador.

2.- Cuales son las características de un electrodo de referencia ideal y de ejemplos.

3. Describa y explique la función de un electrodo de vidrio y electrodo de calomelano
saturado . E indique cual es la diferencia entre un electrodo de vidrio simple y uno
combinado.

4. Establezca los equilibrios involucrados y las constantes respectivas para el H
3
PO
4


5. Explique por que las Bebidas Cola deben desgasarse antes de titular.




LABORATORIO N
º
3
Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
13

TITULACIÓN POTENCIOMÉTRICA ACIDO – BASE.
DETERMINACIÓN DE FÓSFORO EN BEBIDAS GASEOSA



Introducción
Las bebidas de cola, son muy populares, su consumo es muy frecuente sobre
todo en la población juvenil.
Actualmente sé esta prestando atención a las posibles
consecuencias del consumo excesivo de estas bebidas que puedan afectar a la salud
humana; para ello se están haciendo esfuerzos intensivos como la evaluación del
potencial erosivo en los dientes debido a la acidez de las bebidas; los efectos
secundarios adversos a la ingesta de altas concentraciones de cafeína (hipertensión,
reacciones alérgica, las perturbaciones gastrointestinales) y los efectos adversos en el
metabolismo del Ca debido al alto volumen del H
3
PO
4
, él cual si se combina con el Ca
necesario para el organismo ( en bajas proporciones) puede aumentar el riesgo de
sufrir enfermedades de los huesos, tal como la osteoporosis.
La concentración de H
3
PO
4
en bebidas colas previamente desgasificadas, es
bastante grande que incluso puede ser determinada, por lo menos aproximadamente
por titulación con una base , tal como KOH o NaOH. Los puntos de equivalencia deben
ser determinados por métodos potenciométricos, ya que la intensidad de color de las
muestras disimulará cualquier indicador de ácido-base. Esta parte del experimento
señala un uso importante del pH en la titulación.
Electrodos de pH
El electrodo de pH pertenece al grupo de electrodos de membrana sólida, siendo
el mejor de los electrodos selectivos y es sensible a H
+
. La composición de los
electrodos de vidrio usados para la medida del pH corresponde a, silicatos con
modificadores iónicos. La naturaleza del vidrio usado para la construcción de los
electrodos es un factor muy importante, como veremos más adelante. Existen dos
grandes tipos:

• Membrana T : Na
2
O – CaO - SiO
2
(22:6:72)%
• MembranaU : Li
2
O - Cs
2
O
2
– BaO - La
2
O
3
- SiO
2
(28:2:4:3:63)%

Estos modificadores iónicos retardan la hidrólisis del silicato.

Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
14
Cuando se sumerge el electrodo en agua, en la capa superficial existe un
proceso de intercambio iónico entre el H
+
de la disolución externa y el Na
+
ó Li
+
de la
membrana.
La actividad del agua en la disolución juega un papel muy importante en la
respuesta del pH en la membrana de vidrio. Por ello, todos los electrodos de vidrio
deben ser acondicionados durante un tiempo en agua, tampón diluido ó KCl,
formándose un gel sobre la membrana. Con ésta capa sobre la membrana disminuyen
los errores cuando medimos el pH en disoluciones de fuerza iónica extremadamente
alta, ó cuando puedan estar presentes disolventes no acuosos.
El electrodo de pH
tiene un electrodo de referencia interna (Ag/ AgCl) sumergido en un buffer de Cl
-

(pH=7), con una membrana de vidrio.



Figura 3.1 Esquema Electrodo de Vidrio

En los electrodos de vidrio sensibles a H
+
, la estabilidad química y la resistencia
eléctrica están siempre ligadas. La resistencia eléctrica de los electrodos de pH, en
función de la composición de la membrana, tamaño y forma, puede variar entre 5 - 500
MW. Así los electrodos con buena estabilidad química a elevadas temperaturas, tienen
una resistencia eléctrica excesiva para bajas temperaturas. Contrariamente, electrodos
con buena respuesta a bajas temperaturas degeneran rápidamente a altas
temperaturas.
Debido a ésta contraposición, los electrodos son diseñados de forma específica
para ciertos rangos de temperatura y pH.

Error Alcalino Positivo

El error alcalino es debido al intercambio de otros cationes, distintos al H
+
,
presentes en las disoluciones de análisis. El error puede ser grande con muestras que
contienen cationes monovalentes comunes a los existentes en la membrana de vidrio.
La influencia de estos iones interferentes en el potencial del electrodo es descrita por la
ecuación de Nikolsky. Esta ecuación es una extensión de la ecuación de Nersnt:

Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
15
E=E
o
+S.log(ai +Sk
ij
ajz)(z=ni /nj) (3.1)

Para un electrodo ideal k
ij
= 0, cuando responde únicamente a un ión. El
coeficiente de selectividad k
H, Na
es aproximadamente 10
-13
. Por ejemplo, el pH de una
muestra que tenga las siguientes concentraciones:
pH=12a
H+
=10-12 mol / L (3.2)
a
Na+
=1mol / L (3.3)
pH=-log(10
-12
+1.10
-13
)=11.96 (3.4)

Para muchos trabajos, el potencial medido fijándonos en la actividad, sería
erróneo un 10% de error: a
H+
= 1.1*10
-12
mol / L frente al real a
H+
= 1*10
-12
mol / L. Para
valores de pH inferiores a 11, el error alcalino es prácticamente despreciable:
pH=11a
H+
=10-11 mol/L (3.5)

a
Na+
=1mol/L (3.6)
pH=-log(10
-11
+1.10
-13
)=10,996 (3.7)

Estaríamos leyendo a
H+
= 1.01*10
-11
mol / L frente al real de a
H+
= 10
-11
mol / L.
Para cometer errores de un 10% para valores de pH = 11, tendríamos que tener una
a
Na+
= 10 mol / L.
Existen electrodos de pH que tienen una composición en la
membrana para que el error alcalino lo tengamos que tener en cuenta pero a valores
más altos, a partir de pH de 13. La membrana de estos electrodos se le designa como
Membrana del Tipo U, frente a la Membrana de Tipo T cuyo error alcalino empieza a pH
de 11.
Error Acido Negativo
En disoluciones fuertemente ácidas, ( H
+
) > 1 M, la actividad del agua en la
disolución se reduce afectando a la capa hidrata sobre la membrana, ya que se
disminuye la zona donde verdaderamente tiene lugar las reacciones de intercambio
iónico.
Objetivos
- Análisis de un sistema ácido base mediante titulaciones potenciométricas.


- Evaluación del punto de equivalencia utilizando los métodos analíticos de la
primera derivada, segunda derivada y método de Gran.


- Determinar cuantitativamente el fósforo y la concentración de ácido fosfórico, en
bebidas de cola.

Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
16
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

I. Calibración de pH

1.- Calibre el medidor de pH con soluciones buffer estándares (pH 4 y pH 7). Siga
cuidadosamente las instrucciones señaladas en el manual.

II. Valoración potenciométrica de una bebida Cola


- Tome una alícuota de 25 mL de muestras de una bebida Cola y transfiera a un
vaso de 250 mL. Introduzca una barra magnética e instale el vaso sobre un
agitador, agite suavemente.

- Sumerja el electrodo en el vaso y agregue agua destilada suficiente como para
cubrirlo.

- Realice una primera valoración estimativa para ubicar los puntos de
equivalencia, agregando incrementos de 0.5 mL de NaOH de concentración
conocida (0.02 M) y registre el valor del pH después de cada adición de titulante.

Repita el procedimiento agregando esta vez, en las zonas cercanas al punto de
equivalencia, incrementos de 0.2 mL de titulantes. (repetir 3 veces)

TRATAMIENTO DE DATOS

1.- Informe tablas que contengan

a) pH medido v/s Volumen
b) A pH / AV v/s Volumen (primera derivada)
c) A
2
pH / A
2
V v/s Volumen (segunda derivada)
Grafique los datos de cada tabla

2.- Calcule el volumen final (punto de equivalencia) para cada muestra.

CUESTIONARIO


1.- Defina: Electrodo indicador, Electrodo de referencia.

2.-Explique las diferentes curvas que se utilizan para determinar el punto de
equivalencia y dibuje la respuesta que usted espera observar en cada una de ellas.

3.-¿Cuales son los criterios para seleccionar esta técnica?
¿Cuál es el límite de
detección de la potenciometría?
Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
17

LABORATORIO Nº 4

CONDUCTOMETRÍA: VALORACIÓN DE UNA MEZCLA DE ÁCIDO FUERTE Y
DÉBIL

INTRODUCCIÓN

Las mediciones conductimétricas ofrecen un medio adecuado para la
determinación de puntos finales en titulaciones. Para establecer un punto final
conductimétrico, se necesitan suficientes mediciones experimentales para definir la
curva de titulación. Luego de corregir el cambio de volumen, se grafican los datos de
conductancia en función del volumen de reactivo titulante. Posteriormente se extrapolan
las dos porciones lineales y se obtiene el punto de equivalencia en la intersección de
ambas.
Debido a que las reacciones no son absolutamente completas, las curvas de
titulación conductimétrica muestran invariablemente desviaciones con relación a la
linealidad rigurosa en la región del punto de equivalencia. Las regiones curvas se
vuelven más pronunciadas cuando la reacción en cuestión se hace menos favorable y
cuando la solución resulta más diluida. Las porciones lineales de la curva se definen
mejor a través de mediciones suficientemente alejadas del punto de equivalencia para
que el efecto de los iones comunes impulse la reacción más cerca de completarse; las
mediciones en la proximidad del punto de equivalencia, a diferencia de los métodos
potenciométricos, no tienen ningún significado. Ciertamente, debido a la hidrólisis,
disociación, o solubilidad del producto de reacción, los valores de la conductividad
medida en las cercanías del punto de equivalencia no tienen sentido en la construcción
del gráfico, dado que la curva será redondeada en una o ambas ramas. En contraste
con los métodos potenciométricos o con indicador, que dependen de observaciones en
condiciones en las que la reacción es menos completa, el análisis conductimétrico
puede emplearse con éxito para titulaciones basadas en equilibrios relativamente
desfavorables. En estos casos, la técnica conductimétrica es la más ventajosa.
El punto final conductimétrico es completamente inespecífico. Aunque el método
es potencialmente adaptable a todos los tipos de reacciones volumétricas, el número de
aplicaciones útiles a sistemas de oxidación-reducción es limitado; el exceso sustancial
de ion hidronio típicamente necesario para tales reacciones tiende a enmascarar los
cambios de conductividad asociados con la reacción volumétrica.
Titulaciones Ácido-Base
Las titulaciones de neutralización se adaptan particularmente bien al punto final
conductimétrico, debido a la conductancia muy alta de los iones H
3
O
+
y OH
-
comparada
con la conductancia de los productos de reacción.

Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
18

Tipos de Curvas de Titulación Conductométricas
Figura 4.1. Curva de titulación conductimétrica de HCl 10
-3
M con NaOH.
La conductancia primero disminuye, debido al reemplazo del ion hidronio por un
número equivalente de iones sodio de menor movilidad y luego del punto de
equivalencia, aumenta rápidamente con el agregado de base fuerte debido al aumento
de las concentraciones de iones sodio y oxhidrilo (este último de alta conductividad). En
la práctica, con excepción de la región inmediata al punto de equivalencia, hay una
excelente linealidad entre conductancia y volumen; por lo tanto, sólo se necesitan dos o
tres mediciones a cada lado del punto de equivalencia para trazar las rectas en cuya
intersección se encuentra el punto final. Esta titulación es de interés práctico cuando las
soluciones son oscuras o muy coloreadas.
La Figura 4.2 muestra la titulación de un ácido fuerte HCl con una base débil,
NH
4
OH. La primera rama del gráfico refleja la desaparición de los iones hidrógeno
durante la neutralización pero luego del punto final, el gráfico se vuelve casi horizontal,
dado que el exceso de amoníaco no se ioniza en presencia de NH
3
.






Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
19


Figura 4.2. Curva de titulación conductimétrica de HCl 10
-3
M con NH
4
OH.
Las Figuras 4.3 y 4.4 son típicas de la titulación de una mezcla de dos ácidos
que difieren en el grado de disociación. La titulación conductimétrica de tales mezclas
es frecuentemente más precisa que con un método potenciométrico. En la Figura 4.3 se
muestra la titulación empleando NaOH, mientras que en la Figura 4.4, es utilizado
NH
4
OH.

Figura 4.3 Curva de titulación conductimétrica de una mezcla de HCl (10
-3
M) HAc
(10
-3
M) con NaOH.


Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
20


Figura 4.4 Curva de titulación conductimétrica de una mezcla de HCl (10
-3
M) HAc
(10
-3
M) con NH
4
OH.

OBJETIVOS

- -Determinar conductométricamente el punto final en la valoración de una mezcla de
un ácido fuerte y un ácido débil.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.- Mida exactamente 10.0 mL de solución problema, vierta en vaso de 150 mL y
agregue 90 mL de agua. Anote el volumen final.

2.- Instale el vaso sobre el agitador magnético. Coloque la celda de conductividad de
modo que quede totalmente sumergida. Ajuste la velocidad de la agitación de forma tal
que no produzca turbulencias.

3.- Encienda el equipo y espere a que se estabilice. Con ayuda de su profesor
seleccione la escala apropiada.

4.- Tabule volumen en mL vs Conductancia Corregida. Anote la lectura inicial. Valore
adicionando alícuotas de 0.5 mL de valorante, hasta completar 10-12 mL agregados.

5.- Retire la celda y lave los electrodos. Valore una nueva alícuota con incrementos de
0.1 mL de valorante.


Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
21

TRATAMIENTO DE DATOS

Tome en cuenta la dilución y corrija los valores de conductancia obtenidos multiplicando
cada valor leído por su correspondiente factor de corrección:

( )
V
v V +


V: Volumen inicial (volumen muestra problema + volumen de agua)
v : Volumen de solución de NaCl

adicionado

1.- Tabule: Volumen, Conductancia leída, Conductancia corregida.
2.- Grafique Conductancia corregida vs volumen de NaOH. Defina los puntos de
equivalencia de forma gráfica.

3.- Calcule la concentración de la especie en la solución valorada en Molaridad.


CUESTIONARIO

1.- ¿En qué casos es conveniente la utilización de este método?

2.- ¿Qué factores influyen en la conductividad de una solución?

3.- ¿Por qué razón es necesario realizar la corrección por efectos de dilución?

4.- ¿Qué es la Conductancia Equivalente?















Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
22



















CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN
(HPLC)

INTRODUCCIÓN

La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) consiste en un sistema
cerrado que funciona a altas presiones, se puede distinguir una fase estacionaria al
interior de la columna y una fase móvil líquida que fluye ayudada por bombas de alta
presión. El fundamento principal de la separación de los analitos de una mezcla es la
diferencia del coeficiente de partición de los diversos componentes condicionado por la
diferencia de polaridad de ellos en la fase móvil. Se pueden realizar separaciones
“isocráticas” si la composición de la fase móvil permanece constante en tiempo o
separaciones en” gradiente” si la composición de la fase móvil cambia en el transcurso
del análisis.

OBJETIVOS

- Conocer y manejar un equipo HPLC
- Determinar el contenido de cafeína en una muestra problema

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
23
1.- Prepare una solución de 1000 mg/L (solución I) de cafeína, utilice agua grado HPLC
como disolvente.

2.- A partir de la solución I prepare un conjunto de 5 soluciones con concentraciones de
50 a 500 mg/L.

3.- Prepare una taza de té (Anotar marca comercial) y determinar la humedad y la
masa de te a utilizar.

4.- Desgasifique 5,0 mL de Coca Cola normal y/o Coca Cola Diet utilizando un
sonicador

5.- Filtre el té y la bebida mediante un micro filtro de 0,45 µm. Para el te prepare una
solución diluida 2 veces.

6.- Seleccione las condiciones del equipo; fase móvil CH
3
CN/Agua 15:85; flujo 1,0
ml/min.; detector UV a 270 nm, columna Lichrosfer RP-100 C
18
. Justifique y explique
la elección de éstas condiciones.

7.- Inyecte CH
3
CN para chequear la línea base


8.- Inyecte las soluciones preparadas, el té y sus diluciones, la bebida y su muestra
problema.

9.- Confeccione una curva de calibración absoluta

10.- Determine la concentración de cafeína en su muestra

11.- Determine los mg de cafeína en una taza de té (200 mL) y en la bebida (350 mL)

CUESTIONARIO

1.- Calcule los platos teóricos de su columna, utilizando el estándar más concentrado

2.- ¿Qué condiciones debe cumplir una fase móvil?

3.- ¿Por qué se debe filtrar y desgasar las muestras y la fase móvil?

4.- Mencione las partes de un cromatógrafo líquido y la función de cada una de ellas

Nota:

Recuerde que todos lo cromatogramas deben ser incluidos en el Informe en
forma ordenada y clara en la sección de resultados.

Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
24



Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
25

LABORATORIO N
º
4

CROMATOGRAFÍA GAS-LÍQUIDO

INTRODUCCIÓN

La cromatografía de gases es un método de separación de una mezcla de
analitos, en un sistema cerrado en el cual se puede distinguir una fase estacionaria que
se encuentra al interior de la columna y una fase móvil gaseosa que fluye a través de la
columna.
El fundamento de la separación está relacionado con el coeficiente de partición
de los analitos el cual está condicionado por la volatilidad de los componentes de la
mezcla. Por esto la columna se encuentra en un horno de temperatura programada en
las décimas de grado. Una vez que los componentes son separados por la columna,
estos son detectados por detectores de diversa naturaleza.

OBJETIVOS

- Conocer y manejar un cromatógrafo de gases
- Utilizar el método de “estándar interno” para la cuantificación de los analitos
- Determinar la composición de una muestra problema.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.- Prepare las siguientes mezclas de tolueno y benceno, utilizando etilbenceno como
estándar interno.

Solución Benceno (µ L) Tolueno (µ L) Etilbenceno (µ L)

1 100 500 400
2 200 400 400
3 300 300 400
4 400 200 400
5 500 100 400

2.- Seleccione las condiciones experimentales adecuadas de temperatura del inyector,
detector, columna, flujo del gas de arrastre, velocidad del papel del registrador.
Encienda el equipo. Encienda el detector de ionización de llama (FID). Indique estas
condiciones en le Informe y cuando es pertinente justifíquelas.

3.- Realice sus mediciones en condiciones "Isocráticas" y de "Temperatura
Programada"

4.- Inyecte 2µ L de cada estándar, por separado, incluya el estándar interno
Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
26


5.- Inyecte 5µ L de su muestra problema

6.- Inyecte 2 µL de cada unas de las soluciones preparadas anteriormente

8.- Una vez obtenido el cromatograma correspondiente a cada solución mida el tiempo
de retención e identifique los constituyentes de su muestra problema.

9.- Mida el área bajo la curva de cada componente.

10.- Construya una curva de calibración absoluta y una curva de calibración
relativa

11.- Cuantifique los componentes de su muestra problema, utilizando las dos curvas.

CUESTIONARIO

1.- Indique las características de un buen estándar interno

2.- Describa los componentes de un cromatógrafo de gases y las funciones de cada
uno de ellos

3.- Señale las situaciones en que se recomienda utilizar un estándar interno

Nota:
Recuerde que todos lo cromatogramas deben ser incluidos en el Informe en
forma ordenada y clara en la sección de resultados



Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
27

LABORATORIO N
º
5

ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA

INTRODUCCIÓN

La característica especial de la Espectroscopia de Absorción Atómica, (EAA) es
que la muestra debe atomizarse. Esto se hace normalmente con una llama, horno
calentado eléctricamente o un plasma de radiofrecuencia. La sensibilidad y los efectos
de interferencia que se observan en la espectroscopia de Absorción Atómica dependen
de los detalles del método de calentamiento.

En la atomización de la muestra mediante una llama la combinación más común
de combustible y oxidante es la de acetileno/aire. Cuando se requiere de mayor
temperatura puede utilizarse una combinación de acetileno/óxido nitroso. Los hornos
calentados eléctricamente, (hornos de grafito) presentan una mayor sensibilidad y
necesitan un menor volumen de muestra.

La medición de Absorbancia en espectroscopia de Absorción Atómica se rige por
la Ley de Beer. Aunque en la práctica, a menudo se encuentran desviaciones de la
linealidad, esto no constituye un obstáculo para trabajar con curvas de calibración
empíricas.

Cuando no es posible eliminar las interferencias de matriz es posible utilizar el
método de adición estándar, técnica que permite trabajar en presencia de un
interferente, realizando una determinación correcta del analito. Con esta técnica es
posible determinar más de 60 elementos.



OBJETIVOS

- Conocer el funcionamiento de un equipo de absorción atómica
- Determinar la concentración de Fe en una muestra
- Analizar los métodos de curva de calibración y de adición estándar
- Comprobar la influencia de un solvente orgánico en la determinación

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

I.- Curva de calibración

1.- Averigüe el rango de respuesta lineal para Fe (puede utilizar el manual del equipo)

2.- A partir de la solución estándar de 1000 ppm prepare una solución de 100 ppm
Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
28


3.- Prepare un conjunto de 5 soluciones de Fe de: 0; 1; 2; 3 y 4 (mg/L), agregar una
gotita de n-octanol y enrasar con agua destilada.

4.- Lea la Absorbancia de las soluciones

5.- Mida la Absorbancia de una solución de:

a) 3 mg/L de Fe disuelta en acido nítrico (5 % p/v)
b) 3 mg/L de Fe disuelto en metanol.

6.- Determine el contenido de Fe en una muestra problema

7.- Grafique A vs C y determine el rango lineal

II.- Adición de Estándar


En 5 matraces aforados de 50 mL se coloca 10 mL de muestra problema. Añadir
a continuación a cada uno de ellos 0, 5, 10, 15 y 20 mL de una solución de Fe de 10
mg/L. Seguidamente se añade una gotita de n-octanol a cada matraz, se enrasan con
agua destilada y se mide absorbancia.


TRATAMIENTO DE DATOS

Grafique para la adición estándar y determine la concentración de la cobre en agua
potable de acuerdo a esta técnica. Considere el factor de dilución. Aplique la forma
gráfica y el cálculo con la formula |1| utilizada para la absorción atómica.


x st
x
st x
x
A
A
C C
C
+
=
+
|1|

Donde
C
x
: concentración de la muestra problema
C
st
: concentración del estándar
A
x
: Absorbancia de la muestra problema

A
x+st
: Absorbancia de la muestra problema + estándar

Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química de Materiales
Análisis Instrumental
Ingeniería Ejecución Química
29



CUESTIONARIO

1.- Defina: Sensibilidad y límite de detección

2.- Comente los resultados obtenidos en las soluciones analizadas

3.- Comente el efecto, del disolvente orgánico en la lectura de Absorbancia.

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->