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FACULTAD DE TECNOLOGA MDICA ESCUELA DE LABORATORIO Y ANATOMA PATOLGICA BIOQUMICA

TEMA: DOCENTE: GRUPO: INTEGRANTES:

BIOSEGURIDAD HUBERT ANCHANTE SEGURA I Barreto Huamn, Flor Luna Yabarrena, Kelly Ocaa Garca, Lady Quispe Garrido, Gustavo Salazar Perez, Jorge 3er AO.

AO:

2010

INTRODUCCIN
Los profesionales de salud, en nuestro caso, los tecnlogos mdicos, se encuentran diariamente expuestos a un riesgo de infeccin, debido al contacto con muestras para realizar diagnsticos. As tambin, sin las medidas de seguridad adecuadas los pacientes y otro personal ajeno al de salud pueden infectarse o contraer una enfermedad. Por eso en esta oportunidad nos referiremos al tema de bioseguridad, un concepto que se estableci con el fin de reducir el riesgo de transmisin de microorganismos de fuentes reconocidas, o no de infeccin, en servicios de salud vinculados a accidentes por exposicin a sangre y fluidos corporales. Este tema de bioseguridad abarca varios captulos. Trataremos, por ejemplo, sobre los niveles de bioseguridad. Los cuales presentan reas y medidas de seguridad distintas de acuerdo a la necesidad y severidad del caso. Haremos mencin sobre las medidas adecuadas que se deben cumplir dentro de un ambiente de salud. De la misma manera, describiremos las diferentes reas que deben tener un laboratorio y los implementos que deben presentar para que se cumplan las normas de bioseguridad.

BIOSEGURIDAD Es el conjunto de medidas preventivas que tienen como objetivo proteger la salud y la seguridad del personal, de los pacientes y de la comunidad frente a diferentes riesgos producidos por agentes biolgicos, fsicos, qumicos y mecnicos. Es una doctrina de comportamiento encaminada a lograr actitudes y conductas que disminuyan el riesgo del trabajador de la salud de adquirir infecciones en el medio laboral. Conjunto de medidas preventivas orientadas a proteger la salud y la seguridad del personal que trabaja en salud y su entorno. Complementariamente se incluye normas contra riesgos producidos por agentes fsicos, qumicos, ergonmicos y mecnicos. Modernamente se incorporan tambin las acciones o medidas de seguridad requeridas para minimizar los riesgos derivados del manejo de un organismo modificado genticamente (OMG), sus derivados o productos que los contengan, y utilizacin de la tecnologa del ADN recombinante (ingeniera gentica) y otras tcnicas moleculares ms recientes. La bioseguridad es la aplicacin de conocimientos, tcnicas y equipamientos para prevenir a personas, laboratorios, reas hospitalarias y medio ambiente de la exposicin a agentes potencialmente infecciosos o considerados de riesgo biolgico.

FACTORES AMBIENTALES QUE PUEDEN AFECTAR LA SALUD FACTORES FSICOS: ruido, clima, radiacin, iluminacin, posicin FACTORES BIOLGICOS: bacterias, virus, parsitos FACTORES QUMICOS: sustancias, polvos, frmacos, irritantes cutneos FACTORES PSICOLGICOS: estrs turnos, rrhh FACTORES ACCIDENTALES: situaciones de riesgo, velocidad, influencia de alcohol, drogas. FACTORES SOCIALES: Educacin e instruccin general, relaciones laborales y extralaborales, costumbres y hbitos particulares, modelos macro y microeconmicos, migraciones voluntarias y forzadas. FACTORES ERGONMICOS Y DE SEGURIDAD: Los factores o variables ergonmicos estn relacionados con la adaptacin del individuo a la tarea y/o a su adecuacin al instrumento, por ejemplo, mquina o asiento donde la desempea. Los espacios donde se desarrollan las tareas tambin estn relacionados en especial si son excesivamente pequeos o demasiado amplios. La seguridad general de las tareas dentro del trabajo se encuentra asimismo codificada en varias instituciones.

CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLGICOS POR GRUPO DE RIESGO Los niveles de bioseguridad son estndares internacionales y su clasificacin est dada en funcin del grado de letalidad de las enfermedades. Son virus, bacterias, hongos o parsitos capaces de causar infeccin, enfermedad o muerte en el ser humano, animales o plantas con inclusin de los genticamente modificados y ectoparsitos susceptibles de originar cualquier tipo de infeccin, alergia o toxicidad. Agente biolgico del grupo 1. Se refiere a aqul que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre. Ejemplos: B. Subtilis, Naegleria, E. Coli K 12, Saccharomyces sp. Agente biolgico del grupo 2. Es aqul que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Ejemplos: Actinomyces sp, Bacteroides sp, Enterobacterias, Shigella sp, Candida sp, Cryptococcus neoformans. Agente biolgico del grupo 3. Aqul que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo frente a l generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Ejemplos: Mycobacterium tuberculosis y bovis, Histoplasma capsulatum, Neisseria meningitidis, Coccidioides inmitis, Chlamydia trachomatis. Agente biolgico del grupo 4. Se refiere a aqul que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista generalmente frente a l profilaxis o tratamiento eficaz. Ejemplos: Virus de Lassa, Machupo y Ebola. Maburg, Fiebre de Junin.

TABLA DE NIVELES DE BIOSEGURIDAD

(BSL: BIOLOGICAL SAFETY LEVELS)


BSL Equipamiento de seguridad. (Barreras Primarias) Infraestructura. ( Barreras Secundarias) Mesadas con bachas y agua corriente

Agentes Prcticas Infecciosos No causales de enfermedad en adultos sanos Trabajos microbiolgicos estndares BSL-1 ms: Acceso limitado, Sealizacin de peligro biolgico, Manual de bioseguridad disponible, decontaminacin rutinaria de desechos seleccionados

Nivel 1

No se requieren Gabinetes de seguridad Clase I o II para todas las manipulaciones de agentes que puedan causar aerosoles o derrames. Guardapolvos, guantes y mascarillas cuando se requieran

Asociados conenfermedades en adultos, peligro de Nivel infeccin por: herida 2 percutnea, ingestin, exposicin de membranas mucosas

BSL-1 ms: autoclave dedicada

Nivel 3

Exticos con potencial de transmisin por aerosoles, causales de enfermedades serias o letales

BSL-2 ms: Acceso controlado, Decontaminacin de todos los desechos, Decontaminacin de ropa de trabajo, Controles serolgicos peridicos

BSL-2 ms: Separacin fsica de pasillos y laboratorios, BSL-2 para todas las Puertas de acceso manipulaciones, doble con respiradores cerradura autnomos cuando automtica, Aire se requieran viciado no recirculado, Flujo de presin negativa en el laboratorio Todos los BSL-3 ms: procedimientos Edificio aislado o llevados a cabo en zona caliente. gabinetes Clase III, o Sistema de gabinetes Clase I y II circulacin de aire, en combinacin con vaco y traje completo de decontaminacin presin positiva dedicados

Nivel 4

Exticos peligrosos con alto riesgo de enfermedad letal, infecciones transmisibles por aire y por vas desconocidas

BSL-3 ms: Cambio de ropa antes de entrar al recinto, Ducha decontaminante al salir del mismo, todos los materiales decontaminados para salir del mbito

PRINCIPIOS BSICOS DE LA BIOSEGURIDAD El trmino Contencin se utiliza para describir mtodos seguros para manejar materiales infecciosos en el medio ambiente de laboratorio donde son manipulados o conservados. El objetivo de la contencin es reducir o eliminar la exposicin de quienes trabajan en laboratorios u otras personas y del medio ambiente externo a agentes potencialmente peligrosos.
1) Universalidad: Asumir que toda persona est infectada y que sus fluidos y

todos los objetos que se han utilizado en su atencin son potencialmente infectantes, ya que es imposible saber a simple vista, si alguien tiene o no alguna enfermedad. Estas precauciones, deben ser aplicadas para TODAS las personas, independientemente de presentar o no patologas. 2) Uso de barreras: Comprende el concepto de evitar la exposicin directa a sangre y otros fluidos orgnicos potencialmente contaminantes, mediante la utilizacin de materiales adecuados que se interpongan al contacto de los mismos .La utilizacin de barreras (ej. guantes) no evitan los accidentes de exposicin a estos fluidos, pero disminuyen las consecuencias de dicho accidente. BARRERA PRIMARIA: Consiste en la proteccin del personal y de medio ambiente contra la exposicin a agentes infecciosos y/o productos qumicos de riesgo. La proteccin personal, incluye una vestimenta adecuada a la actividad que se va a realizar (ejemplo: guantes, mascarillas, batas, etc.). El uso de vacunas aumenta el nivel de proteccin personal. El uso apropiado de equipos y dispositivos en el laboratorio garantizan una buena seguridad (ejemplo: cabinas de seguridad biolgica). Constituyen la primera lnea de defensa cuando se manipulan materiales biolgicos, qumicos y/o fsicos. Se considera que las barreras de proteccin primaria son: a.1 Equipos de proteccin personal (EPP) Es la proteccin del trabajador mediante el empleo de equipos o prendas de proteccin personal (EPP). El EPP se seleccionar en funcin del mximo nivel de riesgo que se espera encontrar al desarrollar la actividad. Cualquier EPP exige una limpieza y un mantenimiento adecuados. El personal debe utilizar rutinariamente los elementos de proteccin de barrera apropiados cuando deban realizar actividades que los pongan en contacto directo con agentes biolgicos.

Proteccin de las manos y los brazos (guantes): Los guantes tienen un amplio uso en el laboratorio pues, se utilizan para evitar riesgos biolgicos y qumicos, tambin se emplean como proteccin frente a riesgos fsicos, como el calor o el fro en determinadas manipulaciones. Se deben las siguientes normas elementales de uso: 1. Es preciso escoger el modelo segn el riesgo al que se est expuesto. 2. El uso de los guantes debe quedar restringido para las operaciones frente a las que es necesario protegerse, de manera que no se debe abrir puertas con los guantes puestos, ni coger el telfono. 3. Las manos han de lavarse obligatoriamente al quitarse los guantes. 4. El uso de guantes no siempre ser obligatorio: Mascarillas: Proteccin ocular y Proteccin respiratoria Se emplearn en aquellos casos en los que, por la ndole del procedimiento a realizar, se prevea la produccin de salpicaduras de sangre u otros fluidos corporales que afecten las mucosas de ojos, boca o nariz. Los anteojos para la correccin de problemas de visin no proporcionan proteccin alguna a los ojos. En el caso de que una persona necesitara llevarlas por prescripcin facultativa, estar obligada a llevar tambin, siempre que estuviera expuesta a un riesgo biolgico y/o qumico, unas gafas de seguridad. Las pantallas faciales, que ofrecen proteccin frente a impactos y salpicaduras. Son elementos indispensables para protegerse frente a radiaciones, como es el caso de la luz ultravioleta. Las mascarillas en general tienen utilidad en el Laboratorio especialmente para proteccin frente a polvo (partculas), aerosoles txicos o infecciosos, gases y vapores qumicos. La mscara, ya sea media mscara o mscara facial, puede resultar til en caso de proteccin a accidentes de consideracin. Los diferentes filtros que se pueden acoplar hay que desecharlos como material contaminado. Proteccin auditiva Es la menos considerada en el ambiente de un Laboratorio, siendo habitual que el personal acepte como normal un nivel de ruido, procedente de aparatos y/o determinadas operaciones, por encima de los lmites tolerables. Una reduccin importante de estos niveles se consigue con un buen mantenimiento de los equipos. Mandiles y Vestuario como equipo de proteccin En principio es imprescindible hacer una clara distincin entre la ropa que es parte de un uniforme y las prendas del vestuario que actan como elementos de proteccin individual. El usuario debe llevar la prenda de manera que se beneficie por su uso; pero que no resulte un elemento peligroso que arrastre contaminacin fuera del laboratorio.

a.2. Tcnicas de laboratorio estndar y Normas de higiene personal Las tcnicas de laboratorio estndar se refieren al seguimiento estricto de las buenas prcticas de laboratorio y tcnicas de laboratorio. Como parte de estas prcticas esta el desarrollo en cada laboratorio de procedimientos escritos de rutina, en el que se especifiquen los procedimientos para minimizar riesgos biolgicos, qumicos y fsicos. A continuacin se resume un conjunto de normas de higiene personal: El lavado de manos debe realizarse al comenzar y terminar la jornada y despus de realizar cualquier tcnica que puede implicar el contacto con material infeccioso. Dicho lavado se realizar con agua y jabn lquido.

En situaciones especiales se emplearn sustancias antimicrobianas. Tras el lavado de las manos, stas se secarn con toallas de papel desechables o corriente de aire.

No comer, beber, fumar, aplicarse cosmticos ni guardar o almacenar alimentos o bebidas en el rea de trabajo del laboratorio.

No pipetear con la boca.

Desarrollar el hbito de mantener las manos lejos de la boca, nariz, ojos y cara. Esto puede prevenir el auto inoculacin.

El ingreso a las zonas restringidas deben efectuarse nicamente a travs de las instalaciones de cambio de ropa y ducha.

a.3. Inmunizacin (vacunacin) El personal de laboratorio est sometido a numerosos riesgos biolgicos, producidos por bacterias, hongos, virus o parsitos frente a algunos de los cuales se dispone de vacunas que hacen posible su prevencin.

La inmunizacin activa frente a enfermedades infecciosas ha demostrado ser junto con las medidas generales de prevencin una de las principales formas de proteger a los trabajadores.

Deber vacunarse todo el personal que desarrolle su labor en ambientes que tengan contacto, tanto directo como indirecto, con la sangre u otros fluidos biolgicos de otras personas infectadas o en los cuales se desconoce si estn enfermas o portadoras de algn microorganismos que puede ser prevenible por vacunacin.

Es necesario destacar que las vacunas pueden aumentar el nivel de proteccin del trabajador de laboratorio, pero no previenen por completo la contaminacin o infeccin, por lo cual la vacunacin no debe ser un sustituto a unas buenas prcticas de laboratorio. TIPO DE VACUNA Personal que pueda tener contacto directo o Vacuna contra la Hepatitis indirecto con sangre o fluidos corporales de B pacientes. Personal que trabaja con muestras que pueda Vacuna contra la rabia contener virus de rabia que trabaja con muestras que pueda contener virus de rabia Personal que trabaja en el laboratorio de tuberculosis Vacuna contra la rabia Vacuna BCG RIESGO

a.4. Esterilizacin y desinfeccin de instrumentales y superficies Desinfeccin El empleo de productos qumicos permite desinfectar a temperatura ambiente los instrumentos y superficies que no resisten el calor seco o la temperatura elevada. Para llevar a cabo una desinfeccin del tipo que sea, es necesario tener en cuenta: o La actividad desinfectante del producto. La concentracin que ha de tener para su aplicacin. o El tiempo de contacto con la superficie que se ha de descontaminar. o Las especies y el nmero de grmenes que se han de eliminar. Una correcta aplicacin de los desinfectantes ser, en general, aquella que permita un mayor contacto entre el desinfectante y la superficie a desinfectar. En el manejo de desinfectantes se debern adoptar las medidas de proteccin y prevencin adecuadas y seguir siempre las instrucciones para su aplicacin, contenidas en la etiqueta y en las fichas de seguridad. Los desinfectantes que se utilicen deben estar adecuadamente etiquetados, tanto si se han adquirido comercialmente, como si son de preparacin propia. Al adquirir productos qumicos, debe exigirse siempre la entrega de la ficha de seguridad correspondiente (MSDS). La eficacia de los desinfectantes est limitada por la presencia de materia orgnica, por lo que los tiempos de aplicacin de los mismos disminuirn cuando el instrumental que se deba desinfectar est limpio. Se debe tener en cuenta que las frmulas de los productos desinfectantes comerciales presentan grandes diferencias, por lo que es esencial seguir las indicaciones del fabricante. Esterilizacin Proceso que elimina toda forma de vida. Existen diferentes tipos de esterilizacin los cuales a continuacin se explican: Esterilizacin por calor hmedo bajo presin (autoclave):

Es el mtodo de eleccin ms fiable de utilizar y eficaz. Se introduce el material a esterilizar en bolsas adecuadas y cerradas, dejndose durante 20 minutos a 121C (para algunos agentes pueden ser necesarias otras condiciones), teniendo la precaucin de que la atmsfera del autoclave est a saturacin y desprovista de aire.

En este sentido es recomendable disponer de un manual de procedimiento para el trabajo con el autoclave siguiendo las instrucciones del fabricante. Si no se dispone de autoclave para instrumental de pequeo volmen recurrir a ebullicin del agua, preferentemente conteniendo bicarbonato sdico durante 30 minutos o bien al empleo de una olla a presin al nivel mximo de presin de trabajo. Esterilizacin por calor seco: Debe mantenerse por una hora a partir del momento en que el material ha llegado a los 170C. Radiaciones ionizantes: Basan sus efectos en la capacidad de destruccin celular. Debido a su poder de penetracin, la radiacin es la empleada en la esterilizacin del material sanitario, sobre todo en el mbito industrial. Esterilizacin con vapores qumicos: Los agentes gaseosos, tales como el formaldehdo o el xido de etileno, tienen una actividad bactericida y esporicida en el intervalo de 30 - 80C. Esterilizacin por xido de etileno: Este tipo de esterilizacin slo debe aplicarse a aquel material que no pueda ser esterilizado al vapor y debe llevarse a cabo por personal calificado, informado de los riesgos que presenta su utilizacin, disponiendo de un protocolo de uso bien establecido y cuando el caso lo requiera, de los equipos de proteccin individual adecuados.

BARRERA SECUNDARIA La magnitud de las barreras secundarias depender del tipo de agente infeccioso que se manipule en el laboratorio, implica la proteccin del medio ambiente externo contra la exposicin de material infeccioso. Se logra por una combinacin de las caractersticas de la edificacin y prcticas operacionales. El propsito de la contencin es reducir la exposicin del personal de los laboratorios y de otras personas a agentes potencialmente peligrosos, y prevenir el escape de stos al exterior. Dentro de ellas se incluyen la separacin de las zonas donde tiene acceso el pblico, la disponibilidad de sistemas de descontaminacin (autoclaves), el filtrado del aire de salida al exterior, el flujo de aire direccional, etc. El diseo y construccin de un laboratorio, lo que en seguridad biolgica se conoce como contencin o barrera secundaria, contribuye a la proteccin del personal de laboratorio, personas que se localizan fuera del laboratorio y protege a las personas de la comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes infecciosos.

En la evaluacin de riesgo se debe tener en cuenta las siguientes consideraciones generales: Localizacin Es aconsejable que el laboratorio se localice fuera del rea de trnsito que no sea un lugar de paso para otras dependencias en las que no exista restriccin para su acceso. El rea contaminada debe estar ubicado en un lugar alejado de la puerta de entrada al laboratorio y de los lugares donde se producen corrientes de aire, disponer de los medios necesarios para la comunicacin necesaria, como por ejemplo en el laboratorio de rabia se debe realizar por cmara de seguridad (air lock). Acceso de personal En general, debe ser restringido al personal autorizado y formadas para el manejo de agentes infecciosos. No deben entrar en el mismo personal administrativo, familiares ni amigos. Para un nivel 2 de contencin es suficiente que la puerta del laboratorio pueda cerrarse con llave, mientras que para el nivel 3 la puerta ha de ser doble, adems de recomendarse un cambio de ropa. Lavatorios Debe existir uno en el mismo laboratorio. Estar dotado de grifos que puedan accionarse sin utilizar las manos y situado preferiblemente cerca de la puerta de salida. Deben existir instalaciones para cambiarse de ropa y ducharse. Lavaojos Se recomienda que exista uno dentro del laboratorio como equipo de emergencia.

Superficies interiores Los techos, paredes y suelos deben ser lisos y fciles de lavar, impermeables a los lquidos y resistentes a las acciones de las sustancias qumicas y productos desinfectantes utilizados de ordinario en el laboratorio de forma que permitan una limpieza a fondo y una posterior descontaminacin. Superficies de trabajo. Las mesas y bancos de trabajo deben ser resistentes al calor moderado, a disolventes orgnicos, cidos y lcalis. Sealizacin. Todas las reas estarn debidamente marcadas con la seal de riesgo biolgico y su nivel de contencin. Siempre que el trabajo est en marcha, debe colocarse en la puerta del laboratorio la seal reglamentaria de peligro biolgico. Presin negativa Se recomienda que el laboratorio se mantenga a una presin negativa con respecto al exterior del mismo, es decir, con respecto a los pasillos u otras zonas del edificio, de manera que exista un flujo de aire desde las zonas menos contaminadas hacia las de mayor riesgo de contaminacin. Las puertas y ventanas del laboratorio han de permanecer cerradas si se quiere mantener esa presin negativa. No es aconsejable la recirculacin de aire. Filtros HEPA No existe legislacin en cuanto a sistema y frecuencia para su comprobacin pero, siguiendo directrices de otros pases, parece aconsejable hacerla cada 6 meses o, al menos, no dejar pasar ms de 14 meses. Deber ser revisada siempre por personal especializado. Residuos Adems de la normativa general establecida, en funcin de la legislacin vigente, en materia de residuos biosanitarios, en un nivel 3 se recomienda que en el mismo laboratorio (o dentro de la instalacin) exista algn sistema (por ejemplo, esterilizacin por autoclave) para el tratamiento de los residuos producidos. De no ser as, el transporte de estos residuos ha de realizarse en envases sellados.

3)

Medios de eliminacin de material contaminado: Comprende el conjunto de dispositivos y procedimientos adecuados a travs de los cuales los materiales utilizados en la atencin de pacientes, son depositados y eliminados sin riesgo. Objetos cortopunzantes En un medio hospitalario son eliminados en dispositivos rgidos, stos pueden ser reemplazados por botellas plsticas rgidas con tapa, debidamente rotulados como riesgo biolgico. Las agujas deben ser eliminadas, no se deben doblar, romper o reencapsular. Objetos no cortopunzantes Elementos se desechan en bolsas de riesgo biolgico, debidamente rotulado. Los dispositivos rgidos y las bolsas luego de ser utilizadas reciben un tratamiento, por lo general se queman en hornos que alcanzan altas temperaturas y aseguran la destruccin total de los microorganismos.

REAS DE LABORATORIO ZONA I: (rea limpia). Esta zona incluye las reas administrativas y de logstica, donde se encuentran las oficinas de personal, biblioteca, comedor, depsito y mantenimiento, e inclusive, las reas de preparacin de medios y reactivos. ZONA II: (reas moderadamente peligrosas). Esta zona est restringida al trabajo con agentes biolgicos de baja virulencia o a actividades que implican riesgos controlables, asociadas a la realizacin de tcnicas convencionales y al uso de equipos e implementos de seguridad. ZONA III: (reas peligrosas). Se analizan y estudian agentes muy virulentos y/o re-transmisibles, relacionados con el diagnstico o con la investigacin. Debe incluir uno o ms gabinetes de seguridad biolgica, un autoclave automtico de buen tamao y el crematorio de animales o el incinerador de desechos contaminados. En los laboratorios ms pequeos, esta zona puede incluir el trabajo de tuberculosis y micologa.

EQUIPAMIENTO DE UN LABORATORIO Un laboratorio debe contar con las siguientes instalaciones generales: Debe contar con instalacin de ventilacin. Tambin debe tener una instalacin elctrica que le permita tener los contactos elctricamente polarizados y aterrizados en nmero suficiente y distribuido adecuadamente para los equipos que se necesiten. Adems instalaciones apropiadas de agua potable y sistema de drenaje para los tipos de aparatos, materiales y reactivos. Las tuberas de agua, aire y electricidad, deben estar visibles y pintadas con colores de tal manera que cumplan con la norma. Sealizacin adecuada. Un ambiente adecuado de salud debe tener, por lo menos: Un ambiente destinado a sala de espera. Un ambiente destinado a sala de extracciones. Un ambiente para laboratorio propiamente dicho. Un cuarto de bao.

SEALIZACIN EN EL LABORATORIO
En los laboratorios, la sealizacin contribuye a prevenir aquellos riesgos que por su naturaleza y caractersticas no han podido ser eliminados. A continuacin se incluyen algunas de las seales cuyo uso debera ser habitual. Seales de advertencia de un peligro Tienen forma triangular y el pictograma negro sobre fondo amarillo. Las que con mayor frecuencia pueden ser necesarias en un laboratorio son: Riesgo elctrico. Debe utilizarse en todos los armarios y cuadros elctricos del laboratorio, as como en aquellos equipos o lugares donde pueda haber zonas en tensin. Materiales inflamables. Se utilizar para sealizar los almacenamientos de este tipo de sustancias. Materias txicas. En aquellos laboratorios en los que se manipulen sustancias clasificadas como muy txicas,txicas, cancergenas o mutgenas, se colocar en los lugares donde se guarden tales sustancias. Riesgo biolgico. En cumplimiento de lo dispuesto en el anexo III del Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, se colocar esta seal a la entrada de todos los laboratorios en los que se manipulen agentes biolgicos de los grupos 2, 3 4. Radiaciones no ionizantes. Esta seal deber situarse junto a aquellos equipos que generen campos electromagnticos de elevada intensidad o radiaciones pticas peligrosas. Riesgo de radiaciones ionizantes. En los laboratorios en que manipulen istopos radiactivos, se utilizar la seal indicada.

Seales de prohibicin Tienen forma redonda con pictograma negro sobre fondo blanco. Presentan el borde del contorno y una banda transversal descendente de izquierda a derecha de color rojo, formando sta con la horizontal un ngulo de 45. Prohibicin de encender fuego. Siempre que en el laboratorio se utilicen materiales inflamables deber utilizarse esta seal. Seales de obligacin Son tambin de forma redonda. Presentan el pictograma blanco sobre fondo

azul. Atendiendo al tipo de riesgo que tratan de proteger, cabe sealar las siguientes: Proteccin obligatoria de la cara. Se utilizar siempre y cuando exista riesgo de salpicaduras a la cara y los ojos, como consecuencia de la manipulacin de productos corrosivos o irritantes. Proteccin obligatoria de vas respiratorias. Esta seal se colocar en aquellas reas de trabajo donde se manipulen productos txicos o nocivos susceptibles de ser inhalados, sin perjuicio de que deban ser manipulados bajo campana extractora, siempre que sea posible. Proteccin obligatoria de las manos. Esta seal debe exhibirse en aquellos lugares de trabajo donde se manipulen productos corrosivos, irritantes, sensibilizantes por contacto cutneo o txicos y nocivos, con posibilidad de ser absorbidos por la piel. Seales relativas a los equipos de lucha contra incendios Son de forma rectangular o cuadrada. Presentan el pictograma blanco sobre fondo rojo. Las ms frecuentes en los laboratorios son las que indican el emplazamiento de extintores y de mangueras para incendios, es decir: Seales relativas a los equipos de autoproteccin Son de forma rectangular o cuadrada. Presentan el pictograma blanco sobre fondo verde. Se utilizan para sealizar las salidas de emergencia y elementos de primeros auxilios (botiqun, duchas de emergencia, lavaojos, etc.). Otras seales Por ltimo, otra sealizacin no menos importante es aquella que permite identificar las tuberas por el color con que estn pintadas, en funcin del fluido por ellas transportado. Laboratorios bsicos niveles de bioseguridad1y2 Las orientaciones y recomendaciones que se ofrecen en el presente manual a ttulo de requisitos mnimos para los laboratorios de todos los niveles de bioseguridad ataen a los microrganismos de los grupos de riesgo 1 a 4. Aunque algunas precauciones pueden parecer innecesarias para algunos

organismos del grupo de riesgo 1, son convenientes con nes de capacitacin, para fomentar el uso de tcnicas microbiolgicas apropiadas (es decir, seguras). Todos los laboratorios de diagnstico y de atencin de salud (de salud pblica, clnicos o de hospital) deben estar diseados para cumplir, como mnimo, los requisitos del nivel de bioseguridad 2. Dado que ningn laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las muestras que recibe, el personal puede verse expuesto a organismos de grupos de riesgo ms altos de lo previsto. Esa posibilidad debe tenerse presente en la elaboracin de los planes y las polticas de seguridad. En algunos pases se exige que los laboratorios clnicos estn acreditados. En general, siempre deben adoptarse y aplicarse las precauciones normalizadas (2). Las directrices para laboratorios bsicos (niveles de bioseguridad 1 y 2) que aqu se exponen son completas y detalladas, ya que son fundamentales para todo tipo de laboratorios. Las directrices para los laboratorios de contencin (nivel de bioseguridad 3) y los laboratorios de contencin mxima (nivel de bioseguridad 4) que se ofrecen ms adelante (captulos 4 y 5) son modicaciones y adiciones a estas directrices y estn concebidas para trabajar con los agentes patgenos ms peligrosos (de mayor riesgo). Cdigo de prcticas Este cdigo es una enumeracin de las prcticas y los procedimientos de laboratorio esenciales que constituyen la base de las tcnicas microbiolgicas apropiadas. En muchos laboratorios y programas nacionales, este cdigo puede utilizarse para elaborar una gua escrita de prcticas y procedimientos para el trabajo de laboratorio en condiciones de seguridad. Cada laboratorio debe adoptar un manual de seguridad o de trabajo en el que se identiquen los riesgos conocidos y potenciales y se especiquen las prcticas y los procedimientos encaminados a eliminar o reducir al mnimo esos riesgos. Las tcnicas microbiolgicas apropiadas son fundamentales para la seguridad en el laboratorio y no pueden sustituirse por equipo de laboratorio especializado, que no pasa de ser un complemento. A continuacin se exponen los conceptos ms importantes. Acceso 1. El smbolo y signo internacional de peligro biolgico (gura 1) deber colocarse en las puertas de los locales donde se manipulen microorganismos del grupo de riesgo 2 o superior. 2. Slo podr entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el personal autorizado. 3. Las puertas del laboratorio se mantendrn cerradas. 4. No se autorizar ni permitir la entrada de nios en las zonas de trabajo del laboratorio. 5. El acceso a los locales que alberguen animales habr de autorizarse especialmente. 6. No se permitir el acceso al laboratorio de animales que no sean objeto del trabajo del laboratorio. Proteccin personal

1. Se usarn en todo momento monos, batas o uniformes especiales para el trabajo en el laboratorio. 2. Se usarn guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que puedan entraar contacto directo o accidental con sangre, lquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos o animales infectados. Una vez utilizados, los guantes se retirarn de forma asptica y a continuacin se lavarn las manos. 3. El personal deber lavarse las manos despus de manipular materiales y animales infecciosos, as como antes de abandonar las zonas de trabajo del laboratorio. 4. Se usarn gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de proteccin cuando sea necesario proteger los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiacin ultravioleta articial. 5. Estar prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio, por ejemplo en cantinas, cafeteras, ocinas, bibliotecas, salas para el personal y baos. 6. No se usar calzado sin puntera. 7. En las zonas de trabajo estar prohibido comer, beber, fumar, aplicar cosmticos o manipular lentes de contacto. 8. Estar prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo humano en las zonas de trabajo del laboratorio. 9. La ropa protectora de laboratorio no se guardar en los mismos armarios o taquillas que la ropa de calle. Procedimientos 1. Estar estrictamente prohibido pipetear con la boca. 2. No se colocar ningn material en la boca ni se pasar la lengua por las etiquetas. 3. Todos los procedimientos tcnicos se practicarn de manera que se reduzca al mnimo la formacin de aerosoles y gotculas. 4. Se limitar el uso de jeringuillas y agujas hipodrmicas, que no se utilizarn en lugar de dispositivos de pipeteo ni con ningn n distinto de las inyecciones por va parenteral o la aspiracin de lquidos de los animales de laboratorio. 5. Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se comunicarn al supervisor del laboratorio. Se mantendr un registro escrito de esos accidentes e incidentes. 6. Se elaborar y seguir un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames. 7. Los lquidos contaminados debern descontaminarse (por medios qumicos o fsicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Puede ser necesario un sistema de tratamiento de euentes, segn lo que indique la evaluacin de riesgos del agente con el que se est trabajando. 8. Los documentos escritos que hayan de salir del laboratorio se protegern de la contaminacin mientras se encuentren en ste. Zonas de trabajo del laboratorio 1. El laboratorio se mantendr ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.

2. Las supercies de trabajo se descontaminarn despus de todo derrame de material potencialmente peligroso y al nal de cada jornada de trabajo. 3. Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados debern ser descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar. 4. El embalaje y el transporte de material debern seguir la reglamentacin nacional o internacional aplicable. 5. Las ventanas que puedan abrirse estarn equipadas con rejillas que impidan el paso de artrpodos.

Gestin de la bioseguridad 1. Incumbir al director del laboratorio (la persona que tiene responsabilidad inmediata respecto del laboratorio) garantizar la elaboracin y la adopcin de un plan de gestin de la bioseguridad y de un manual de seguridad o de operacin. 2. El supervisor del laboratorio (que depender del director) velar por que se proporcione capacitacin peridica en materia de seguridad en el laboratorio. 3. Se informar al personal de los riesgos especiales y se le exigir que lea el manual de seguridad o de trabajo y siga las prcticas y los procedimientos normalizados. El supervisor del laboratorio se asegurar de que todo el personal los comprenda debidamente. En el laboratorio estar disponible una copia del manual de seguridad o de trabajo. 4. Habr un programa de lucha contra los artrpodos y los roedores. 5. Se ofrecer a todo el personal en caso de necesidad un servicio apropiado de evaluacin, vigilancia y tratamiento mdico, y se mantendrn los debidos registros mdicos. Diseo e instalaciones del laboratorio Al disear el laboratorio y asignarle determinados tipos de trabajo, se prestar especial atencin a aquellas condiciones que se sepa que plantean problemas de seguridad. Entre ellas guran: 1. La formacin de aerosoles. 2. El trabajo con grandes cantidades o altas concentraciones de microorganismos. 3. El exceso de personal o de material. 4. La infestacin por roedores y artrpodos. 5. La entrada de personas no autorizadas. 6. El circuito de trabajo: utilizacin de muestras y reactivos concretos. Caractersticas de diseo 1. Se dispondr de espacio suciente para realizar el trabajo de laboratorio en condiciones de seguridad y para la limpieza y el mantenimiento. 2. Las paredes, los techos y los suelos sern lisos, fciles de limpiar, impermeables a los lquidos y resistentes a los productos qumicos y desinfectantes normalmente utilizados en el laboratorio. Los suelos sern antideslizantes. 3. Las supercies de trabajo sern impermeables y resistentes a desinfectantes, cidos, lcalis, disolventes orgnicos y calor moderado.

4. La iluminacin ser adecuada para todas las actividades. Se evitarn los reejos y brillos molestos. 5. El mobiliario debe ser robusto y debe quedar espacio entre mesas, armarios y otros muebles, as como debajo de los mismos, a n de facilitar la limpieza. 6. Habr espacio suciente para guardar los artculos de uso inmediato, evitando as su acumulacin desordenada sobre las mesas de trabajo y en los pasillos. Tambin debe preverse espacio para el almacenamiento a largo plazo, convenientemente situado fuera de las zonas de trabajo. 7. Se prevern espacio e instalaciones para la manipulacin y el almacenamiento seguros de disolventes, material radiactivo y gases comprimidos y licuados. 8. Los locales para guardar la ropa de calle y los objetos personales se encontrarn fuera de las zonas de trabajo del laboratorio. 9. Los locales para comer y beber y para descansar se dispondrn fuera de las zonas de trabajo del laboratorio. 10. En cada sala del laboratorio habr lavabos, a ser posible con agua corriente, instalados de preferencia cerca de la salida. 11. Las puertas irn provistas de mirillas y estarn debidamente protegidas contra el fuego; de preferencia se cerrarn automticamente. 12. En el nivel de bioseguridad 2 se dispondr de una autoclave u otro medio de descontaminacin debidamente prximo al laboratorio. 13. Los sistemas de seguridad deben comprender medios de proteccin contra incendios y emergencias elctricas, as como duchas para casos de urgencia y medios para el lavado de los ojos. 14. Hay que prever locales o salas de primeros auxilios, convenientemente equipados y fcilmente accesibles. 15. Cuando se planique una nueva instalacin, habr que prever un sistema mecnico de ventilacin que introduzca aire del exterior sin recirculacin. Cuando no se disponga de ventilacin mecnica, las ventanas debern poder abrirse y, a ser posible, estarn provistas de mosquiteras. 16. Es indispensable contar con un suministro regular de agua de buena calidad. No debe haber ninguna conexin entre las conducciones de agua destinada al laboratorio y las del agua de bebida. El sistema de abastecimiento pblico de agua estar protegido contra el reujo por un dispositivo adecuado. 17. Debe disponerse de un suministro de electricidad seguro y de suciente capacidad, as como de un sistema de iluminacin de emergencia que permita salir del laboratorio en condiciones de seguridad. Conviene contar con un grupo electrgeno de reserva para alimentar el equipo esencial (estufas, CSB, congeladores, entre otros), as como para la ventilacin de las jaulas de los animales. 18. Es esencial un suministro able y adecuado de gas. La instalacin debe ser objeto del debido mantenimiento. 19. Tanto los laboratorios como los locales destinados a los animales son a veces objeto de actos de vandalismo. Hay que prever sistemas de proteccin fsica y contra incendios. Cabe mejorar la seguridad reforzando las puertas, protegiendo las ventanas y limitando el nmero de llaves en circulacin. Se podrn estudiar y aplicar otras medidas, segn proceda, para incrementar la seguridad (vase el captulo 9). Material de laboratorio

Junto con los procedimientos y prcticas correctos, el uso de material de seguridad ayudar a reducir los riesgos cuando se trabaje con agentes biolgicos que entraen peligro. En la presente seccin se exponen los principios fundamentales relacionados con el material apropiado para los laboratorios de todos los niveles de bioseguridad. Los requisitos en relacin con el material de laboratorio correspondiente a niveles de bioseguridad ms altos se detallan en los captulos pertinentes. Tras consultar con el funcionario de bioseguridad y el comit de seguridad (en caso de que se haya designado), el director del laboratorio debe velar por que el material sea apropiado y se utilice debidamente. Para elegir el material de laboratorio habr que cerciorarse de que responda a los siguientes principios generales: 1. Que su diseo permita limitar o evitar los contactos entre el trabajador y el material infeccioso. 2. Que est construido con materiales impermeables a los lquidos, resistentes a la corrosin y acordes con las normas de resistencia estructural. 3. Que carezca de rebabas, bordes cortantes y partes mviles sin proteger. 4. Que est diseado, construido e instalado con miras a simplicar su manejo y conservacin, as como a facilitar la limpieza, la descontaminacin y las pruebas de certicacin; siempre que se pueda, se evitar el material de vidrio y otro material rompible.

Material de bioseguridad indispensable 1. Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca. Existen muchos modelos diferentes. 2. CSB, que se utilizarn en los siguientes casos:
Siempre que se manipule material infeccioso; ese material puede ser centrifugado en el laboratorio ordinario si se utilizan vasos de centrifugadora con tapas hermticas de seguridad y si stos se cargan y descargan en una CSB. Cuando haya un alto riesgo de infeccin transmitida por va area. Cuando se utilicen procedimientos con grandes posibilidades de producir aerosoles, como la centrifugacin, trituracin, homogeneizacin, agitaciones o mezcla vigorosa, desintegracin ultrasnica, apertura de envases de materiales infecciosos cuya presin interna pueda diferir de la presin ambiental, inoculacin intranasal a animales y recoleccin de tejidos infecciosos de animales y huevos.

3. Asas de siembra de plstico desechables. Tambin pueden utilizarse incineradores elctricos de asas dentro de la CSB para reducir la formacin de aerosoles. 4. Frascos y tubos con tapn de rosca. 5. Autoclaves u otros medios apropiados para esterilizar el material contaminado. 6. Pipetas de Pasteur de plstico desechables, cuando estn disponibles, en sustitucin del vidrio. 7. Los aparatos como las autoclaves y las CSB deben ser validados con

mtodos apropiados antes de usarlos. A intervalos peridicos deben ser nuevamente certicados, de acuerdo con las instrucciones del fabricante Vigilancia mdica y sanitaria La entidad que emplea al personal del laboratorio tiene la obligacin de cerciorarse, por medio del director de ste, de que la salud de dicho personal est sometida a la debida vigilancia. El objetivo de esa vigilancia es detectar posibles enfermedades contradas durante el trabajo. Entre las actividades apropiadas para alcanzar ese objetivo guran las siguientes: 1. Proporcionar inmunizacin activa o pasiva cuando est indicada. 2. Facilitar la deteccin temprana de infecciones adquiridas en el laboratorio. 3. Excluir a las personas muy susceptibles (por ejemplo, embarazadas o personas inmunodecientes) de las tareas de laboratorio que entraen mucho riesgo. 4. Proporcionar material y procedimientos ecaces de proteccin personal. Normas para la vigilancia de los trabajadores microorganismos en el nivel de bioseguridad 1 que manipulan

La experiencia indica que estos microorganismos tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades humanas o enfermedades animales de importancia veterinaria. No obstante, lo ideal es someter a todo el personal a un reconocimiento mdico previo a la contratacin en el que se anoten los antecedentes mdicos de cada persona. Conviene que se notiquen rpidamente las enfermedades o accidentes de laboratorio y que todos los miembros del personal comprendan la importancia de aplicar tcnicas microbiolgicas apropiadas.

Normas para la vigilancia de los trabajadores microorganismos en el nivel de bioseguridad 2

que

manipulan

1. El reconocimiento mdico previo al empleo o a la asignacin de un puesto es indispensable. Debe registrarse el historial mdico de la persona y realizar una evaluacin de la salud ocupacional para los nes del laboratorio. 2. El director del laboratorio debe mantener un registro de enfermedades y bajas laborales. 3. Las mujeres en edad fecunda debern ser informadas de los riesgos que supone para el feto la exposicin profesional a ciertos microorganismos, como el virus de la rubola. Las medidas concretas que se adopten para proteger al feto dependern de los microorganismos a los que pueda estar expuesta la mujer. Capacitacin Los errores humanos y las tcnicas incorrectas pueden poner en peligro incluso las mejores medidas destinadas a proteger al personal de laboratorio. Por esta razn, el elemento clave para prevenir las infecciones adquiridas, los

incidentes y los accidentes en el laboratorio es un personal preocupado por la seguridad y bien informado sobre la manera de reconocer y combatir los peligros que entraa su trabajo en ese entorno. En consecuencia, la formacin continua en el servicio acerca de las medidas de seguridad es primordial. El proceso empieza por el personal directivo, que debe velar por que los procedimientos y prcticas de seguridad en el laboratorio formen parte de la capacitacin bsica de los empleados. La formacin en medidas de seguridad siempre debe estar integrada en la capacitacin inicial de los nuevos empleados. Deben ponerse a disposicin del personal el cdigo de prcticas y las directrices locales, incluido el manual de seguridad o de operaciones. Se adoptarn medidas para garantizar que los empleados hayan ledo y comprendido las directrices, como pueden ser las pginas de rmas. Los supervisores del laboratorio deben desempear el papel principal en la formacin de sus subordinados inmediatos acerca de las tcnicas correctas de laboratorio. El funcionario encargado de la bioseguridad puede colaborar en esa formacin y contribuir a la elaboracin de materiales y documentos de capacitacin. La capacitacin del personal debe comprender siempre la enseanza de mtodos seguros para utilizar procedimientos peligrosos que habitualmente afectan a todo el personal de laboratorio y que entraan los siguientes riesgos: 1. Riesgo de inhalacin (es decir, formacin de aerosoles): uso de asas, siembra de placas de agar, pipeteo, preparacin de frotis, apertura de recipientes de cultivo, toma de muestras de sangre/suero, centrifugacin, entre otros. 2. Riesgo de ingestin al manipular muestras, frotis y cultivos. 3. Riesgo de inoculacin cutnea al emplear jeringuillas y agujas. 4. Riesgo de mordeduras y araazos en la manipulacin de animales. 5. Manipulacin de sangre y otros materiales patolgicos potencialmente peligrosos. 6. Descontaminacin y eliminacin de material infeccioso. Manipulacin de desechos Se considera desecho todo aquello que debe descartarse. En los laboratorios, la descontaminacin y la eliminacin de desechos son operaciones estrechamente relacionadas. En el trabajo cotidiano, son pocos los materiales contaminados que es preciso retirar del laboratorio o destruir. La mayor parte de la cristalera, los instrumentos y la ropa del laboratorio vuelve a utilizarse o se recicla. El principio bsico es que todo el material infeccioso ha de ser descontaminado, esterilizado en autoclave o incinerado en el laboratorio. Las principales preguntas que hay que hacerse antes de eliminar cualquier objeto o material de un laboratorio que trabaja con microorganismos o tejidos animales potencialmente infecciosos son las siguientes: 1. Se han descontaminado o desinfectado realmente los objetos o el material por un procedimiento aprobado? 2. De lo contrario, se han embalado con un mtodo aprobado para ser incinerados inmediatamente in situ o transferidos a otro laboratorio que tenga capacidad para incinerar? 3. Entraa la eliminacin de los objetos o materiales descontaminados algn

otro peligro, biolgico o de otra clase, para quienes realizan las operaciones de eliminacin inmediata o para quienes puedan entrar en contacto con los objetos o materiales desechados fuera del recinto del laboratorio?

Descontaminacin El tratamiento en autoclave de vapor constituye el mtodo de eleccin para todos los procesos de descontaminacin. El material destinado a la descontaminacin y eliminacin debe introducirse en recipientes (por ejemplo en bolsas de plstico resistentes al tratamiento en autoclave) que tengan un cdigo de color para indicar si el contenido ha de pasar a la autoclave o a la incineracin. Slo se recurrir a otros mtodos si stos eliminan o destruyen los microorganismos. Procedimientos de manipulacin y eliminacin de material y desechos contaminados Deber adoptarse un sistema de identicacin y separacin del material infeccioso y sus recipientes. Se seguirn las normas nacionales e internacionales y se tendrn en cuenta las siguientes categoras: 1. Desechos no contaminados (no infecciosos) que puedan reutilizarse o reciclarse o eliminarse como si fueran basura en general. 2. Objetos cortantes y punzantes contaminados (infecciosos): agujas hipodrmicas, bisturs, cuchillas, vidrio roto; se recogern siempre en recipientes a prueba de perforacin dotados de tapaderas y sern tratados como material infeccioso. 3. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave que despus pueda lavarse y volverse a utilizar o reciclarse. 4. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave y a la eliminacin. 5. Material contaminado destinado a la incineracin directa. Objetos cortantes y punzantes Las agujas hipodrmicas no se deben volver a tapar, cortar ni retirar de las jeringuillas desechables despus de utilizarlas. El conjunto completo debe colocarse en un recipiente de eliminacin especco. Las jeringuillas desechables, utilizadas con o sin aguja, se introducirn en recipientes de eliminacin apropiados y se incinerarn, esterilizndolas previamente en autoclave si fuera necesario. Los recipientes de eliminacin de objetos cortantes y punzantes sern resistentes a la perforacin y no se llenarn por completo. Cuando estn llenos en sus tres cuartas partes se colocarn en un recipiente de desechos infecciosos y se incinerarn, esterilizndolos primero en autoclave si la prctica del laboratorio lo exige. Los recipientes de eliminacin de objetos cortantes y punzantes no se desecharn en vertederos. Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser tratado en autoclave y reutilizado

No se efectuar limpieza alguna de ningn material contaminado (potencialmente infeccioso) que vaya a ser tratado en autoclave y reutilizado. Cualquier limpieza o reparacin que se revele necesaria se realizar siempre despus del paso por la autoclave o la desinfeccin. Material contaminado (potencialmente infeccioso) para ser eliminado Aparte de los objetos cortantes y punzantes mencionados ms arriba, todo el material contaminado (potencialmente infeccioso) debe ser introducido en recipientes impermeables (por ejemplo en bolsas de plstico que resistan el tratamiento en autoclave marcadas con un cdigo de color) y tratado en autoclave antes de proceder a su eliminacin. Despus de pasar por la autoclave, el material puede colocarse en recipientes apropiados para ser transportado al incinerador. Si es posible, el material procedente de actividades relacionadas con la atencin sanitaria no debe desecharse en vertederos, ni siquiera despus de haber sido descontaminado. Si se dispone de un incinerador en el laboratorio, no es necesario el tratamiento en autoclave: el material contaminado se coloca en recipientes especialmente marcados (por ejemplo, bolsas con un cdigo de color) y se transporta directamente al incinerador. Los recipientes de transporte reutilizables deben ser impermeables y tener tapas que ajusten debidamente. Se desinfectarn y limpiarn antes de devolverlos al laboratorio para un uso ulterior. En cada puesto de trabajo deben colocarse recipientes, tarros o cubetas para desechos, de preferencia irrompibles (por ejemplo, de plstico). Cuando se utilicen desinfectantes, los materiales de desecho deben permanecer en contacto ntimo con stos (es decir, sin estar protegidos por burbujas de aire) durante el tiempo apropiado, segn el desinfectante que se utilice. Los recipientes para desechos habrn de ser descontaminados y lavados antes de su reutilizacin. La incineracin de desechos contaminados deber contar con la aprobacin de las autoridades encargadas de la salud pblica y la contaminacin del aire, as como la del funcionario de bioseguridad del laboratorio. Seguridad qumica, elctrica y radiolgica, proteccin contra incendios y material de seguridad Los incendios o los accidentes de origen qumico, elctrico o radiolgico pueden tener como consecuencia indirecta un fallo de las medidas de contencin de organismos patgenos. As pues, en cualquier laboratorio de microbiologa es indispensable mantener un nivel elevado de seguridad en esos aspectos. La promulgacin de normas y reglamentos sobre cada una de estas formas de proteccin incumbe normalmente a las autoridades nacionales y locales competentes, cuya ayuda debe recabarse siempre que sea necesario.

El laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3

El laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 est concebido e instalado para trabajar con microorganismos del grupo de riesgo 3, as como con grandes volmenes o concentraciones de microorganismos del grupo de riesgo 2, por entraar un mayor riesgo de difusin de aerosoles. Este nivel de contencin exige fortalecer los programas de trabajo y de seguridad correspondientes a los laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2. Las directrices que se ofrecen en este captulo se presentan en forma de adiciones a las enunciadas para los laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2, que por ello debern aplicarse antes de las destinadas especcamente al laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3. Las principales adiciones y modicaciones se reeren a los siguientes aspectos: 1. Cdigo de prcticas. 2. Diseo e instalaciones del laboratorio. 3. Vigilancia mdica y sanitaria. Los laboratorios de esta categora deben gurar en un registro o una lista que establecern las autoridades sanitarias nacionales u otra autoridad competente. Cdigo de prcticas El cdigo de prcticas de los laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2 tambin se aplica en este caso, con las siguientes modicaciones: 1. El smbolo y signo internacional de advertencia de peligro biolgico expuesto en las puertas de acceso al laboratorio debe especicar el nivel de bioseguridad y el nombre del supervisor del laboratorio que controla el acceso a ste, as como indicar cualquier condicin especial de entrada en la zona, como puede ser la inmunizacin. 2. En el laboratorio se debe llevar ropa protectora apropiada (batas sin abertura delantera o envolventes, trajes de dos piezas de tipo pijama, monos, gorros y, si corresponde, proteccin para el calzado o calzado especial). No son apropiadas las batas de laboratorio abotonadas por delante, ni las mangas que no cubran por completo los antebrazos. La ropa de laboratorio no debe usarse fuera de ste y debe descontaminarse antes de enviarla a la lavandera. En ciertos casos, como cuando se trabaja con agentes agrcolas o zoonticos, est justicado quitarse la ropa de calle y utilizar ropa de laboratorio especial. 3. Toda manipulacin abierta de material potencialmente infeccioso debe realizarse dentro de una CSB u otro dispositivo de contencin primaria. 4. Puede ser necesario utilizar equipo de proteccin respiratoria para ciertos procedimientos de laboratorio o para el trabajo con animales que estn infectados con ciertos agentes patgenos. Diseo e instalaciones del laboratorio Las directrices sobre diseo e instalaciones del laboratorio correspondientes a los laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican tambin en este caso, con las siguientes modicaciones: 1. El laboratorio debe estar separado de las zonas del edicio por las que se puede circular sin restricciones. Puede conseguirse una separacin

suplementaria habilitando el laboratorio al fondo de un pasillo o instalando un tabique con puerta o un sistema de acceso que delimite un pequeo vestbulo (por ejemplo, entrada de doble puerta o laboratorio bsico nivel de bioseguridad 2) destinado a mantener la diferencia de presiones entre el laboratorio y el espacio adyacente. El vestbulo debe contar con una zona para separar la ropa limpia de la sucia, y tambin puede ser necesaria una ducha. 2. Las dobles puertas de acceso al laboratorio deben ser de cierre automtico y disponer de un mecanismo de interbloqueo, de modo que slo una de ellas est abierta al mismo tiempo. Para uso en caso de emergencia es posible colocar una mampara que se pueda romper. 3. Las supercies de las paredes, suelos y techos deben ser impermeables y fciles de limpiar. Todas las aberturas existentes en esas supercies (por ejemplo, para tuberas de servicio) deben estar obturadas para facilitar la descontaminacin de los locales. 4. La sala del laboratorio debe poderse precintar para proceder a su descontaminacin. Los sistemas de conduccin de aire han de estar construidos de modo que sea factible la descontaminacin con gases. 5. Las ventanas deben estar cerradas hermticamente y llevar cristales resistentes a la rotura. 6. En las inmediaciones de todas las puertas de salida del laboratorio habr un lavabo que no necesite ser accionado con la mano. 7. Debe haber un sistema de ventilacin que establezca un ujo direccional hacia el laboratorio. Se instalar un dispositivo de vigilancia visual, con o sin alarma, para que el personal pueda comprobar en todo momento que la corriente de aire circula en el sentido deseado. 8. El sistema de ventilacin del edicio debe estar construido de modo que el aire del laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 no se dirija a otras zonas del edicio. El aire puede ser ltrado por un sistema HEPA, reacondicionado y recirculado dentro del laboratorio. Cuando el aire del laboratorio (no de las CSB) se expulsa directamente al exterior del edicio, debe dispersarse lejos de los edicios ocupados y de las tomas de aire. Segn los agentes con los que se est trabajando, ese aire puede evacuarse a travs de ltros HEPA. Puede instalarse un sistema de control de la calefaccin, la ventilacin y el aire acondicionado para impedir una presin positiva sostenida en el laboratorio. Cabe estudiar la posibilidad de instalar alarmas audibles o claramente visibles para alertar al personal de posibles fallos del sistema de calefaccin, ventilacin y aire acondicionado. 9. Todos los ltros HEPA debern estar instalados de modo que permitan la descontaminacin con gases y la realizacin de pruebas. 10. Las CSB deben estar alejadas de las zonas de paso y de los lugares de cruce de corrientes procedentes de puertas y sistemas de ventilacin (vase el captulo 10). 11. El aire que sale de las CSB de las clases I o II (vase el captulo 10), y que habr pasado por ltros HEPA, deber expulsarse de manera que no se perturbe el equilibrio del aire en la cmara ni en el sistema de evacuacin del edicio. 12. Dentro del laboratorio de contencin debe haber una autoclave para descontaminar el material de desecho infectado. Si hay que sacar ese material de desecho del laboratorio de contencin para su descontaminacin y eliminacin, habr que transportarlo en recipientes hermticos, irrompibles e

impermeables de acuerdo con las normas nacionales o internacionales, segn proceda. 13. El sistema de abastecimiento de agua debe estar dotado de dispositivos contra el reujo. Los tubos de vaco deben estar protegidos con sifones con desinfectante lquido y ltros HEPA o su equivalente. Las bombas de vaco alternativas tambin deben estar debidamente protegidas con sifones y ltros. 14. El diseo de las instalaciones y los procedimientos de trabajo del laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 deben estar documentados. Material de laboratorio Los principios aplicables a la seleccin del material, incluidas las CSB son los mismos que se enunciaron para el laboratorio bsico nivel de bioseguridad 2, con la excepcin de que todas las actividades de manipulacin de todo el material potencialmente infeccioso deben realizarse dentro de una CSB u otro dispositivo de contencin fsica primaria. Debe tenerse en cuenta que si se utilizan aparatos como centrifugadoras, stas necesitarn accesorios de contencin suplementarios como cubetas de seguridad o rotores de contencin. Algunas centrifugadoras y otro material, como los separadores de clulas, destinados al trabajo con clulas infectadas pueden necesitar sistemas suplementarios de ventilacin y evacuacin local con ltros HEPA para una contencin eciente. Vigilancia mdica y sanitaria Los objetivos de los programas de vigilancia mdica y sanitaria enunciados para los laboratorios bsicos niveles de bioseguridad 1 y 2 se aplican tambin a los laboratorios de contencin nivel de bioseguridad 3, con las siguientes modicaciones: 1. El reconocimiento mdico de todo el personal que trabaja en el laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 es obligatorio y debe comprender una historia clnica detallada y un reconocimiento fsico orientado a la actividad laboral. 2. Una vez pasado el reconocimiento mdico con un informe favorable, se entregar a la persona examinada una tarjeta de contacto mdico

El laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad 4


El laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad 4 est concebido para trabajar con microorganismos del grupo de riesgo 4. Antes de construir y poner en funcionamiento un laboratorio de contencin mxima se requiere una labor intensiva de consulta con instituciones que tengan experiencia en la utilizacin de instalaciones de este tipo. Los laboratorios de contencin mxima nivel de bioseguridad 4 en funcionamiento deben estar sometidos al control de las autoridades sanitarias nacionales, u otras apropiadas. La

informacin que sigue tiene como propsito servir solamente como material de presentacin. Las entidades que tengan intencin de poner en funcionamiento un laboratorio de este nivel deben ponerse en contacto con el programa de Bioseguridad de la OMS para obtener ms informacin. Cdigo de prcticas El cdigo de prcticas correspondiente al nivel de bioseguridad 3 se aplica tambin a este nivel con las siguientes modicaciones: 1. Hay que aplicar la regla del trabajo realizado por dos personas, en virtud de la cual ninguna persona debe trabajar sola en el interior del laboratorio. Esto es particularmente importante si el trabajo se realiza con ropa especial del nivel de bioseguridad 4. 2. Al entrar y al salir del laboratorio es imprescindible un cambio completo de ropa y calzado. 3. El personal debe recibir capacitacin en procedimientos de evacuacin de emergencia en caso de que un miembro del personal sufra lesiones o caiga enfermo. 4. Debe establecerse un mtodo de comunicacin entre el personal que trabaja dentro del laboratorio del nivel de bioseguridad 4 y el personal de apoyo que se encuentra fuera del laboratorio para la comunicacin ordinaria y de emergencia. Diseo e instalaciones del laboratorio Los requisitos del laboratorio de contencin nivel de bioseguridad 3 se aplican tambin a los laboratorios de contencin mxima nivel de bioseguridad 4, con la adicin de los siguientes: 1. Contencin primaria. Debe existir un sistema eciente de contencin primaria que comprenda uno o ms de los siguientes elementos: Laboratorio con CSB de clase III. Se exige el paso a travs de un mnimo de dos puertas antes de acceder a la sala que contiene la CSB de clase III (sala de la cmara). En este diseo de laboratorio la CSB de clase III proporciona la contencin primaria. Es necesaria una ducha personal con vestuarios interior y exterior. Los utensilios y materiales que no ingresan en la sala de la cmara a travs de la zona de vestuario se introducen por una autoclave o una cmara de fumigacin de doble puerta. Una vez debidamente cerrada la puerta exterior, el personal que se encuentra dentro del laboratorio puede abrir la puerta interior para recoger los materiales. Las puertas de la autoclave o la cmara de fumigacin estn diseadas de tal modo que la puerta exterior no pueda abrirse a menos que la autoclave haya completado un ciclo de esterilizacin o la cmara de fumigacin haya sido descontaminada.. Laboratorio diseado para trabajar con trajes especiales. El diseo y las instalaciones de un laboratorio destinado al trabajo con trajes protectores con respirador autnomo diere considerablemente de un laboratorio de nivel de bioseguridad 4 con CSB de clase III. Las salas de este tipo de laboratorio estn dispuestas de tal manera que se dirige al personal a travs de las zonas de vestuario y descontaminacin antes de entrar en las

zonas donde se manipula el material infeccioso. Debe existir una ducha de descontaminacin de trajes, que ser utilizada por el personal antes de abandonar la zona de contencin del laboratorio. Habr otra ducha personal con vestuarios interior y exterior. El traje especial ser de una pieza, dotado de presin positiva y con suministro de aire ltrado por HEPA. El aire del traje ser suministrado por un sistema que tenga una capacidad redundante del 100% con una fuente de aire independiente, para utilizarla en caso de emergencia. La entrada en la zona del laboratorio destinada al trabajo con trajes especiales se realizar por una cmara dotada de puertas de cierre hermtico. Estos laboratorios dispondrn de un sistema apropiado de alarma que el personal pueda utilizar en caso de fallo del sistema mecnico o de aire. 2. Acceso controlado. El laboratorio de contencin mxima nivel de bioseguridad 4 debe estar situado en un edicio independiente o en una zona claramente delimitada en el interior de un edicio protegido. La entrada y la salida del personal y de los suministros se harn a travs de cmaras de cierre hermtico o sistemas de caja de paso. Al entrar, el personal se mudar por completo de ropa y al salir se duchar antes de volver a ponerse la ropa de calle. 3. Sistema de ventilacin controlada. Debe mantenerse la presin negativa dentro de las instalaciones. Tanto el aire de entrada como el de salida debe pasar por ltros HEPA. Existen diferencias considerables entre los sistemas de ventilacin de los laboratorios con CSB de clase III y los laboratorios donde hay que trabajar con trajes especiales: Laboratorio con cmara biolgica de clase III. El aire suministrado a las CSB de clase III puede proceder del interior de la sala y atravesar un ltro HEPA montado en la cmara o directamente del sistema de entrada de aire. El aire evacuado de la CSB de clase III debe atravesar dos ltros HEPA antes de salir al exterior del edicio. La cmara debe funcionar en todo momento a presin negativa respecto del laboratorio circundante. Se requiere un sistema de ventilacin exclusivo que no haga recircular el aire para el laboratorio. Laboratorio diseado para trabajar con trajes especiales. Se requieren sistemas exclusivos de suministro y evacuacin del aire de la sala. Los componentes de suministro y evacuacin del sistema de ventilacin estarn equilibrados de tal forma que el ujo de aire dentro de la zona de trabajo con traje protector vaya desde las zonas de menos peligro a las de mayor peligro. Se necesitan ventiladores extractores redundantes para garantizar que las instalaciones se mantienen en todo momento a presin negativa. Deben vigilarse las diferencias de presin dentro del laboratorio y entre el laboratorio y las zonas adyacentes, as como el ujo del aire en los componentes de suministro y evacuacin del sistema de ventilacin, y debe utilizarse un sistema de control apropiado para impedir la presurizacin del laboratorio. El aire suministrado a la zona de trabajo con trajes especiales y a la ducha y a las cmaras de descontaminacin con cierre hermtico debe pasar por ltros HEPA. El aire evacuado del laboratorio debe atravesar dos ltros HEPA antes de salir al exterior. Otra posibilidad es que, tras una doble

ltracin por HEPA, el aire se recircule, pero slo dentro del laboratorio; en ninguna circunstancia el aire evacuado del laboratorio de nivel de bioseguridad 4 diseado para trabajar con trajes especiales se reciclar a otras zonas. Debe obrarse con la mxima precaucin si se elige el sistema de recirculacin de aire dentro del laboratorio. Deben tenerse en cuenta los tipos de investigacin que se realicen, el equipo, las sustancias qumicas y otros materiales utilizados, as como las especies de animales que puedan intervenir en la investigacin. Todos los ltros HEPA sern probados y certicados una vez al ao. Los ltros HEPA estarn instalados de tal modo que permitan su descontaminacin in situ antes de retirarlos. Otra posibilidad es retirar el ltro y colocarlo en un recipiente primario cerrado y hermtico para su ulterior descontaminacin y/o destruccin por incineracin. 4. Descontaminacin de euentes. Todos los euentes de la zona de trabajo con trajes especiales, la cmara y la ducha de descontaminacin o la CSB de clase III sern descontaminados antes de su eliminacin denitiva. El mtodo de eleccin es el tratamiento trmico. Ser necesario corregir el pH de algunos euentes antes de evacuarlos. El agua de la ducha personal y los retretes se puede verter directa- mente al alcantarillado sin tratamiento previo. 5. Esterilizacin de los desechos y materiales. La zona del laboratorio debe contar con una autoclave de doble puerta. Debe disponerse de otros mtodos de descontaminacin para aquellos elementos del equipo que no soporten la esterilizacin por vapor. 6. Accesos con entrada de cierre hermtico para muestras, materiales y animales. 7. Deben existir lneas de suministro elctrico exclusivas y de emergencia. 8. Se instalarn sumideros de contencin. Dada la gran complejidad de las caractersticas tcnicas, el diseo y la construccin de las instalaciones del nivel de bioseguridad 4, tanto en la modalidad de CSB como en la de trajes especiales, no se han incluido representaciones esquemticas de esas instalaciones. Del mismo modo, la gran complejidad del trabajo que se lleva a cabo en los laboratorios del nivel de bioseguridad 4 hace necesario elaborar un manual de trabajo detallado y aparte que se ensayar en los ejercicios de capacitacin. Adems, se elaborar un programa de emergencia (vase el captulo 13). En la preparacin de este programa habr que contar con la colaboracin activa de las autoridades sanitarias nacionales y locales, y la participacin de otros servicios de emergencia (por ejemplo bomberos, polica y servicios hospitalarios).

Conclusiones En el laboratorio se debe conocer y ser consiente de cada una de las normas de bioseguridad con el fin de evitar accidentes. Cuando estamos trabajando dentro del laboratorio, debemos tener las prendas adecuadas para la labor que estamos realizando. La higiene es un factor importante, del cual depende el buen desempeo de las actividades que se realizan durante la prctica. El conocimiento de soluciones para realizar limpieza antes y despus de la prctica, nos concientiza del peligro que podemos correr si no lo hacemos de la forma correcta. Prestar la debida atencin a cada experimento o prcticas que se llevara a cabo, estar concentrados. Recomendaciones Al realizar los experimentos: Tomar nota de los datos, observaciones y sobre todo de los resultados en que momento en el que se obtiene. Se sugiere la anotacin de los procedimientos el mismo dia que fue realizado ya que al postergarlo el informe no seria del todo verdico pues contara con muchas inexactitudes, por eso al realizar los experimentos debemos tomar nota inmediatamente. Consultar con el profesor o asistente en caso de duda. Leer cuidadosamente las etiquetas de los frascos de reactivos y sustancias peligrosas antes de usarlas, prestar la debida atencin. Regresar los frascos de reactivos, tapados y colocados correctamente a su lugar. Para extraer una cantidad determinada de algn reactivo slido de un frasco, se emplea la esptula de acero inoxidable o de plstico. De igual manera es importante devolver y colocar correctamente los materiales que fueron usados en su lugar. Al requerir pesar unas determinada cantidad de reactivos slido se debe extraer del frasco original una cantidad aproximadamente menor de la requerida e ir midiendo poco a poco hasta obtener la cantidad deseada apoyndonos con la esptula De esta manera evitamos tener una cantidad sobrante del reactivo porque de ser asi el reactivo tendr que ser desechado. Mantener el rea de trabajo limpio y ordenado El material de vidrio deber ser limpiado con detergente haciendo uso de la escobilla y enjuagado varias veces Cuando se prepara una solucin de cido, tener la precaucin de ir aadiendo el cido sobre el agua que se encuentra en el matraz o tambin en un vaso de precipitacin

No dirigir los vapores de una sustancia desconocida en direccin a la nariz, sino abanicar con la mano un poco de vapor hacia otras direcciones. Usar la campana o cmara de vidrio cuando se realiza experimentos con grandes desprendimientos de gases. Tener precaucin cuando se utilizan sustancias inflamables. Nunca tener lquidos inflamables como alcohol, cetona, etc cerca de un mechero. Nunca flamear la boca de los frascos que contengan lquidos inflamables. Al finalizar el experimento cerrar la llave del mechero de bunsen. Mantener las llaves de los caos cerrados mientras no se utilizan. Al terminar los papeles, materiales desechables sustancias solidas debern ser colocados en el tacho de basura, mientras que los lquidos a depsitos rotulados con este fin. No desechar sustancias directamente al desage.