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TECNICAS DEL DIAGNOSTICO DE LOS ENTEROPARASITOS

1. Examen directo
Materiales • • • • Suero fisiológico Aplicador (baja lengua) Pinza de metal Coladera de metal o de plástico

Procedimiento • En la coladera encima se le pone las heces y luego se le agrega suero fisiológico y se homogeniza con pinzas de metal.

Objetivo • Observar las características anormales de las heces como: color, moco, sangre, alimentos sin digerir, presencia de gusanos redondos o aplanados enteros o partes de ellos.

2. Examen directo microscópico
Materiales • • • • • • • Laminillas cubreobjetos Laminillas portaobjetos Aplicador de vidrio o de madera Marcador de vidrio Suero fisiológico Solución Lugol Colorante verde brillante

Agregar 1 a 2 miligramos de heces. homogenizar y agregar los colorantes vitales verde brillante al 0. 3. Colocar en el otro extremo de la lamina portaobjetos. en un extremo de la lamina una gota de suero fisiológico.2% y rojo neutro al 0.01%. . emulsionarla y cubrirla con la laminilla cubreobjetos. una gota de Lugol y proceder a la aplicación de las heces.• • Colorante rojo neutro Heces Procedimiento • • • Colocar. Heces. • Objetivo • Observar los parasitos de tamaño microscopicosy su estadio evolutivo. Métodos de Concentracion 3. Luego con el suero fisiológico..1 . hervida o de lluvia Gasa recortada en trozos de 9 x 9 cm.Metodos de Concentracion por Sedimientacion Materiales • • • • • • • • Tubos de vidrio o plástico Laminas portaobjetos Cloruro de Sodio o Sal de Cocina Laminilla de celofan Pipetas de vidrio o plástico Agua destilada.

Dejar en reposo por 45 min. Colocar la gasa hundiéndola en la abertura del tubo y sujetándola con una liga alrededor de ella. Aspirar con la pipeta la parte media del sedimento y colocar unas 4 gotas en la lamina portaobjetos.Metodo de sedimentación Rapida Materiales • • • • • Copa o vaso de vidrio Coladera de malla metalica o de plástico Placas petril Aplicador de madera Agua corriente o filtrada . Agregar el suero fisiológico hasta 1cm por debajo del borde del tubo. Ocluir la abertura del tubo con el papel celofan. llenando el tubo hasta la cuarta parte de su contenido. Agitar enérgicamente el contenido por 15 segundos. Filtrar el homogenizado atravez de la gasa.. Cubrir ambas preparaciones con laminillas de celofan y luego observar en el microscopio. 3. Objetivo • Observar las formas móviles del parasito antes de echar el Lugol y luego observar las heces (estructuras) después de echar el Lugol.Procedimento • • • • • • • • • • Tomar una porción de heces y homogenizarla con suero fisiológico en un recipiente limpio.2. Aspirar nuevamente con la pipeta el fondo del sedimento y agregar 1 o 2 gotas de solución Lugol.

3. hasta que el sobre nadante quede limpio Transferir el sedimento a una placa petril Observar al microscopio a menor aumento Objetivo • Observar la presencia de huevos y de parasitos en las heces 3.Metodo de sedimentación: técnica de FAUST Materiales • • • • • • • Gradillas para tubos de ensayo Tubos de prueba de 15 x 150 cm y de 13 x 100 cm Lugol Laminas portaobjetos Embudo de vidrio Laminillas cubreobjetos Gasa . Decantar las 2/3 partes del contenido del vaso y agregar nuevamente agua Repetir los pasos anteriores por 4 veces cada 5 minutos..• • Gasa Pipeta pasteur Procedimiento • • • • • • • • Homogenizar 4 a 6 gr de heces con agua filtrada Colocar la coladera en la abertura del vaso y atravez de ella filtrar la muestra Retirar la coladera y llenarla con agua filtrada hasta 1cm del borde del vaso Dejar sedimentar la muestra durante 20 a 30 min .

• • • • • • • • • • Objetivo • Observar los quistes y los huevos. larvas del parasito los cuales se valorizan por las cruces.3 %.500 r.500 r. adicionar el agua al sedimento y repetir la centrifugación 1 o 2 veces mas hasta que quede limpio el sobre nadante Eliminar el sobre nadante y agregar la solución del sulfato de zinc Homogenizar y completar con la misma solución hasta 1 cm del borde del tubo Centrifugar por 2 minutos de 2.m durante 2 a 3 minutos Decantar el sobre nadante.00 a 2.00 hasta 2. Retirar el embudo y centrifugar a 2. Depositar 1 gota de Lugol en la lamina portaobjetos Retirar la laminilla cubreobjetos y tomar con el asa de platino la superficie del meñisco y colocarla en la lamina portaobjetos y observar al microscopio. Colocar una laminilla cubreobjetos sobre el meñisco y dejar en reposo por 30 minutos. 2 cruces = 5 a 11 x campo y 3 cruces = mayor de 11 x campo .p. una cruz = escaso o nulo. densidad 1.180 Procedimentos • Colocar 1 o 2 gr de heces en el tubo de prueba y agregar e agua filtrada hasta los 8 mililitros y hacer una buena homogenización Colocar el tubo de 13 x 100 cm debajo del embudo de vidrio con dos capas de gasas y filtrar la muestra homogenizada hasta alcanzar 1 cm del bode del tubo .p.m Colocar el tubo en la gradilla con la ayuda de un gotero agregar sulfato de zinc hasta formar un meñisco en la boca del tubo.• • Bajalenguas de madera Sulfato de zinc al 33.

Metodos de flotación: SHEATHER SUGAR Materiales • • • • • • • • • • • • Tubo de ensayo Laminas portaobjetos Laminillas cubreobjetos Aplicador Solución saturada de azúcar Asa de platino Gradillas para tubo de ensayos Suero fisiológico Embudo de vidrio Gasa Lugol Heces Procedimiento • • • • • Homogenizar 1 a 2 gramos de heces con suero fisiológico Colocar el embudo de vidrio en la abertura del tubo de ensayo con una gasa doblada Filtrar el material homogenizado..4.p.500 r.m durante 2 a 5 minutos. Eliminar el sobre nadante y agregar la solución de azúcar hasta 1 centimetro del borde del tubo .3. Centrifugar el tubo con el material homogenizado a 1.

tomarlas con el asa de platino y prepararla con el teñido ZIEHL – NEELSEN. • • Objetivo • Observar los estadios evolutivos de los parasitos como: isospora. 4. en caso de ver cocideas.• Agitarlo hasta disolver el sedimento. Método de PARODI ALCARAZ Materiales • • • • • • • Formol Tubo de ensayo Laminas portaobjetos Laminillas cubreobjetos Solucion sobresaturada de azúcar (azúcar rubia) Lugol Aplicador de madera Procedimiento • • Colocar 1 a 2 gr de heces en el tubo de ensayo Agregar 3 a 5 mililitros de la solución sobresaturada de azúcar y homogenizar . esperar 5 minutos. centrifugar y completar con la solución de azúcar hasta el borde y formar el menisco. cyclospora y sarcocystis. crypptosridium. tomar una muestra de la superficie del menisco Colocar la lamina portaobjetos y agregar Lugol en caso sea necesario cubrir con la laminilla y observar en el microscopio. Con la ayuda del asa de platino.

Método de BAERMANN Materiales • • • • • • • • Copas conicas Rejilla o coladera metalica Pipeta pasteur Laminas escavadas Gasa Suero fisiológico Laminas portaobjetos Heces Procedimiento • Verter la solución salina caliente en la copa. Colocar en contacto con el menisco la abertura del tubo una laminilla cubreobjetos que va a permitir la adherencia por viscosidad de los quistes y huevos. • • • • Objetivo • Observar los estados evolutivos de parasitos como: nematodos y tenias.• Completar el contenido del tubo con la solución de azúcar hasta formar un menisco en la abertura del tubo. dejar en reposo 30 minutos. En la lamina portaobjetos colocar una gota de solución de Lugol . 5. Retirar la laminilla con sumo cuidado y colocar sobre la lamina portaobjetos Examinar al microscopio. cantidad suficiente que apenas toque la coladera o rejilla .

sacar la rejilla y con la ayuda de la pipeta pasteur obtener 1 mililitro de sedimento Colocar el sedimento en la luna de reloj Observar al microscopio • • Objetivos • • Se observa trofozoitos y larvas en movimiento de nematodos Observar las formas adultas de E.• • • Colocar la rejilla metalica con la base doblada dentro de la copa y gasa 2 a 3 capas Colocar 4 a 6 gr de muestras de heces en fresco sobre la gasa Dejar todo el sistema a temperatura ambiente durante 30 a 50 minutos.5 gr de la muestra de heces atravez de la malla metalica. Método cualitativo de KATO Materiales • • • • • Aplicador Laminas portaobjetos Papel celofan Malla metalica Solución de glicerina con verde de malaquita Procedimiento • • • • Tamizar 0. El tamizado se extiende sobre la lamina portaobjetos Cubrir la laminilla impregnada con glicerina Envolver con papel filtro y por 30 min sacar el exceso de glicerina . Vermicularis macho 6.

Métodos de coloración: ZIEHL – NEELSENN Materiales • • • • • • • • • Lamina portaobjetos Laminillas cubreobjetos Soporte de varillas de vidrio Estiletes o pinzas curvas Fucsina fenicada Azul de metileno acuoso Metanol Hidróxido de sodio al 4 % Alcohol acido Procedimiento • • • • • • Colocar lamina portaobjetos sobre el soporte de la varilla de vidrio Con el estilete hacer un frotis en la lamina portaobjetos y dejar secar Fijar la lamina con alcohol acido por 2min y dejar secar Agregar hidroxido de sodio por 1min. eliminar el exceso Cubrir con la fucsina fenicada Lavar solamente la lamina portaobjetos con agua corriente .• Observar al microscopio Objetivos • • Observar los huevos de helmintos Observar los protoozoarios como : izospora belli. 7.

• • • • • • Decolorar con alcohol acido cubriendo el portaobjetos por unos segundos hasta quitar el colorante Lavar suavemente el portaobjetos con agua y enjuagarlo a chorro de agua Colocar como colorante de contraste verde malaquita. 8. geotropismo. stercolaris. azul de metileno durante 5 min Lavar suavemente con agua corriente Realizar el montaje con bálsamo de canada y laminilla cubreobjetos Observar al microscopio Objetivos • • Observar los ooquistes de crystosporidium. terinotropismo e Inotropismo de los trofoitos. Evidenciar tropismos positivos. izospora y cyclospora. de los protozoos y larvas de helmintos especialmente de valatidium coli y larvas de strongiloides. Método de RITCHE Materiales • • • • • • • • • Gradilla de tubo de ensayo Tubo de ensayo Pipeta pasteur Lamina portaobjetos Laminillas cubreobjetos Izopo Formol al 10 % Eter etílico Lugol .

Observar la presencia de cristales de charcot – Leyden .p. luego de las cuales se agrega 3mililitros de eter. tomar una porción del sedimento y mezclar con la gota de Lugol Cubrir una laminilla cubreobjetos Observar al microscopio • • Objetivos • • Observar los quistes y huevos de parasitos.m por 2 a 3 min Descartar el sobrante y repetir el paso anterior hasta que se observe el sobre nadante limpio Decantar el sobre nadante Agregar al sedimento 6 mililitros de formol Homogenizar y reposar por 5 min. Taponar el tubo y agitar cuidadosamente para evitar la salida del material Retirar la tapa y centrifugar el tubo a 2 – 3.• • Solución fisiológica Bajalenguas descartables Procedimiento • • • • • • • • • • • Colocar en un tubo de ensayo 2 gr de muestra de heces Agregar 8 mililitros de solución fisiológica Homogenizar y centrifugar a 2.000 r.p.000 r.m por 3 minutos Eliminar las capas formadas de sobrenadante con la ayuda del izopo Depositar el sobre nadante con la gota de Lugol en la lamina portaobjetos con la ayuda de la pipeta pasteur.

Colocar la laminilla de glicerina y con la ayuda del tapon de jebe extender el material sobre toda la laminilla.9. Método cuantitativo de KATO – KATZ Materiales • • • • • Aplicador Papel celofan Molde de plástico Malla metalica Laminas portaobjetos Procedimiento • • Con un aplicador se transfiere la muestra fecal 5 a 10 miligramos sobre el papel absorvente. Dejar a temperatura ambiente por 30 min Observar los huevos sobre toda la laminilla • • • Objetivos • Observar y contar el numero de huevos parasitarios encontrados en la lamina y multiplicarlos por 24 en las heces (Nhpgh). Transferir el molde sobre la lamina portaobjetos. comprimir la muestra con el aplicador y llenar el molde perforado. Colocarlo la malla sobre la muestra que esta sobre el papel absorvente. dejar la muestra del cilindro. .