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Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas

ESCUELA SALUD

GUIA REALIZACION DE FROTIS SANGUINEO Y TINCION DE LÁMINAS

DIRIGIDO A ALUMNOS DE:
Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Banco de Sangre

PRE-REQUISITO:
Laboratorio Clínico I (LCS 2100) .

Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Eliana Escudero DuocUC

Biólogo. Bioquímico. OBJETIVOS Al finalizar el taller el alumno será capaz de:  Realizar frotis sanguíneos  Realizar las tinciones hematológicas corrientes  Manipular con seguridad material contaminado REALIZADO POR Tecnólogo Médico. se obtienen los datos gráficamente desde el equipo y es opcional el uso del frotis ( lectura total . Químico Farmacéutico. DURACIÓN 90 minutos NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE Máximo 10 alumnos Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Esto dependerá del laboratorio y de la experiencia del profesional. y en algunos casos es esta observación la que entrega al Clínico la información que requiere para realizar su diagnóstico. ya sea que se realice en forma manual o automatizada. En este último sistema. parcial o nada).Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas INTRODUCCIÓN El frotis sanguíneo es realizado en forma rutinaria en todo hemograma. ya que un frotis mal hecho entrega muy poca información acerca de la morfología celular. Eliana Escudero DuocUC . cuando hay normalidad en todos los elementos. La importancia de un buen extendido y su correcta tinción son fundamentales a la hora de la observación al microscopio.

trastornos genéticos de la forma de los eritrocitos. ya sea en forma manual o automatizado. Eliana Escudero DuocUC . Este preparado entrega valiosa información en casos como las leucemias. deficiencias de hierro. al microscopio. se obtienen los datos gráficamente y es opcional verificarlo. Observación microscópica de un frotis ya teñido 1. En este último caso. cuando hay normalidad en todos los elementos sanguíneos. esto dependerá de cada laboratorio. Observación microscópica de un frotis teñido 2 Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas MARCO TEÓRICO Frotis sanguíneo: es la extensión de sangre realizada sobre un portaobjeto y a partir de la cual se observarán. posibles deficiencias de vitamina B12. las características de las células sanguíneas. Usos: Es un análisis rutinario que acompaña a todo hemograma.

bien extendidas y bien coloreadas. Eliana Escudero DuocUC . En algunos laboratorios prefieren que éste sea hecho por personal capacitado y lo realizan al recibir la muestra. Para esto. cuando el tamaño de los hematíes es variable y poiquilocitosis cuando hay variaciones en su forma. pero si es mayor puede empezar a adulterarse el estado de las células. se reconoce fácilmente en estudio panorámico. las extensiones deben ser delgadas. ya que si es menor a dos horas la calidad de un frotis se conserva. Se dice que hay anisocitosis. La tecnica será revisada en detalle en el taller.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Una leucemia o leucopenia acentuada. Foto 3 Realización Frotis sanguíneo Habitualmente éste se realiza al momento de tomar el hemograma al paciente. Esto estará relacionado con el tiempo de traslado del hemograma al laboratorio. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. En laboratorios de países desarrollados y sólo en algunos laboratorios de Chile existen equipos automatizados que realizan los frotis y esto implica disminuir el riesgo de la manipulación y aumentar las medidas de bioseguridad.

tampón fosfato pH 7. Esperar a que se seque la lámina. ( lo ideal es una gota sin mezcla de anticoagulante) 2. 1 set de tres cubetas por cada alumno (o recipientes plásticos de 15 x 15 x15 cm).5 mL de Giemsa)  Cubetas para tinción.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas INSUMOS Y EQUIPOS REQUERIDOS  Portaobjetos (10 por alumno)  Tinciones para hematología. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos muy limpio (libre de pelusas y grasa). dejarla sobre una rejilla o toalla de papel. 1 por alumno  Pizetas con agua destilada  Toalla de papel  Guantes  Cubreobjetos 1 caja  Tubos con muestras de sangre con EDTA DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO Técnica para la realización de un frotis: 1.  Carros de tinción (para poner portaobjetos en las cubetas de tinción). El inicio del frotis se denomina cabeza y la parte final del frotis se denomina cola. 1 set por alumno (solución May-Grunwall en solución alcohólica. tampón fosfato pH 7. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU.2 con 3 mL de solución MayGrunwall. ( observe la foto 3) 4.2 con 12. Con un cubreobjetos (tomarlo lateralmente entre las yemas de los dedos) deslizarlo sobre toda la superficie del porta de manera que se pueda obtener una fina película de sangre. 3. Eliana Escudero DuocUC . Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar o utilizar una gota de sangre del tubo de hemograma. con la zona donde está la muestra mirando hacia arriba.

Dejar por 1 minuto. Trasladar los frotis a una bandeja para su secado. 7. 2. Procedimiento de Tinción: 1. Dejar reposar la solución por 24 horas. Proteger las soluciones de la evaporación. Desechar las otras dos soluciones. Sacar el carro y ponerlo sobre papel absorbente.2 con 12. 4. 5. Eliana Escudero DuocUC . para esto mantener tapado mientras no se utilice (contiene May-Grunwall en solución alcohólica). con papel suave. Transcurrido este tiempo. 2. Limpiar los frotis por el reverso.  3º cubeta: 300 mL de tampón fosfato pH 7. Tinción de Giemsa: Pesar 3. Tinción May-Grunwall: Para preparar 1000 ml de solución. Sacar el carro de la tinción y lavar con agua corriente por 1 minuto. Pasadas las 24 horas filtrar la solución y guardar. La preparación está lista para la observación microscópica. Dejar sobre papel absorbente. Pasar el carro de tinción a la 2º cubeta. 3. Hematóloga Laboratorio. guardar la primera solución en un frasco. Vida Integra) (sólo informativo. 8. Preparación de las cubetas de tinción: En las cubetas de tinción realizar el siguiente procedimiento:  1º cubeta: poner solución May-Grunwall suficiente para cubrir el nivel de los frotis. Poner este carro en la 1º cubeta por 4 minutos.8 gramos de Giemsa y agregar 200 ml de glicerina. sacar la solución del baño y agregar 300 ml de metanol. antes estilar el colorante de la primera cubeta.  2º cubeta: 300 mL de tampón fosfato pH 7. pesar 1.3 gramos de May Grunwald y enrasar en matraz aforado a 1000 ml con metanol. Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Agitar y dejar a 37º C por 3 días. con la preparación seca. no se realiza el procedimiento) 1.2 con 3 mL de solución MayGrunwall. Al finalizar el proceso.5 mL de Giemsa. 6. en el carro de tinción. Poner en la 3º cubeta por 12 minutos. Pasados los tres días filtrar la solución y guardar. Mezclar y llevar a baño María a 56º C por una hora. Poner los frotis.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Preparación de tinciones (modificadas por TM Ruth Córdova.

hasta tener seguridad y un resultado adecuado. Actividad 2: El docente realiza una simulación de la tinción de un frotis explicando en detalle la técnica. Actividad 4: Cada alumno realiza la técnica de tinción de a lo menos 5 frotis.joseacortes.com/index. de los realizados en la actividad anterior.uv.es/gueb/%20practicas/sangre/elige. Eliana Escudero DuocUC . en detalle los pasos del procedimiento para BIBLIOGRAFÍA http://www.html (visita 10/02/2005) METODOLOGÍA DE EVALUACIÓN El taller se evalúa a través de una pauta de competencias logradas de acuerdo a los objetivos planteados: Autores: BQ Cecilia López Reyes EU. Actividad 3: Cada alumno realiza la tecnica de realización de frotis.htm (visita 10/02/2005) http://mavortis.Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas ACTIVIDAD PARA EL ALUMNO Actividad 1: El docente explica y muestra realizar frotis.

............lavado de manos .............Nota...................Guía: Realización de Frotis Sanguíneo y Tinción de Láminas Nombre del alumno:... cumpliendo los pasos en orden 3...........Respeta técnicas de asepsia y antisepsia ... Realiza técnica de tinción de frotis adecuadamente 6. Muestra habilidad manual con los materiales de laboratorio 5.Demuestra interes preguntando y/ o repitiendo las técnicas hasta lograr resultado frotis tinción C: competente MC: medianamente competente NC: no competente C MC NC Autores: BQ Cecilia López Reyes EU..uso de guantes ........................................... Realización de frotis sanguíneo y tinción de laminas 1.. Eliana Escudero DuocUC ....... Trabaja en orden y silencio 4...elimina lo corto punzante según norma 2 Realiza la técnica para frotis.... Fecha:.