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Laboratorio de Técnicas Citológicas

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE BIOANÁLISIS
REGIÓN VERACRUZ

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

CATEDRÁTICA:

Dra. Martha Elva Díaz Viveros
ALUMNO: FECHA:

Facultad de Bioanálisis, Región Veracruz.

Laboratorio de Técnicas Citológicas

Práctica No. 1 DESCRIPCION, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO COMPUESTO E ILUMINACIÓN DE KÖHLER * FUNDAMENTO:

El microscopio como su nombre lo indica, es un instrumento óptico que amplifica la imagen de un objeto pequeño, las imágenes microscópicas pueden aumentar de 100 a 2000 veces el tamaño original. No obstante, la función más importante del instrumento no es solo ver los objetos pequeños sino interpretar lo que se ve, debido a esto, el empleo del microscopio exige más que en ningún otro caso, un gran conocimiento del instrumento y su adecuado manejo para lograr imágenes amplificadas con la menor cantidad posible de defectos ópticos y el logro de contraste adecuado. El microscopio es el instrumento que más se usa en los laboratorios que estudian imágenes pequeñas. Actualmente existen dos tipos de microscopios: el óptico y el electrónico. En el microscopio óptico el aumento del objeto se consigue usando un sistema de lentes que manipula el paso de los rayos de luz entre el objeto y los ojos. El microscopio electrónico utiliza un rayo de electrones controlado por un campo magnético. A nivel del laboratorio, en donde el Químico Clínico desempeña su principal función, el microscopio es un instrumento fundamental de trabajo, por lo anterior, se considera necesario que en la formación del Químico Clínico se ponga principal interés en su enseñanza. El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado por tres sistemas: a. El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque. b. El sistema óptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que produce el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas c. El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a través del microscopio. La parte mecánica del Microscopio
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La parte mecánica del microscopio comprende: el pie, el tubo, el revólver, el asa, la platina, el carro, el tornillo macrométrico y el tornillo micrométrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación, además permite los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto. El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular El tubo. Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares. El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el ruido de un piñón que lo fija. La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie. La platina. Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares. Carro. Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la preparación con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda. El tornillo macrométrico. Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación. El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nitido de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos. Sistema Óptico El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Los oculares. Los oculares están constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar en forma abreviada los aumentos.

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Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imágenes de los objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersión. Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica y otros datos. Así por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromático, su aumento 40 y su abertura numérica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X y 60X. El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 1 OOX y se distingue por uno o dos círculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior. Los objetivos se disponen en una pieza giratoria denominada revólver. Sistema de Iluminación Dirige la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio. Comprende los siguientes elementos: El espejo. Tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con iluminación artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar). Modernamente se prescinde del espejo en la fabricación de microscopios, ya que éstos traen incorporada una lámpara colocada en el eje del microscopio. Condensador. El condensador está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación. El condensador se halla debajo de la platina. Puede deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o descendente. Diafragma. Generalmente, el condensador está provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a través del condensador. Trayectoria del Rayo de Luz a través del Microscopio El haz luminoso procedente de la lámpara pasa directamente a través del diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee

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donde es captado por el ojo del observador * MATERIAL: Microscopio Compuesto de campo claro. 1. las que son necesarias conocer para su buen funcionamiento. óptico y de iluminación del microscopio. lo que hace posible. Limpiar el sistema óptico y el de iluminación. Subir el condensador hasta el tope y cerrar el diafragma iris aproximadamente a la mitad. 5. 4. 3.Laboratorio de Técnicas Citológicas el condensador. * METODOLOGÍA: El microscopio es un instrumento óptico de precisión que proporciona la amplificación de las imágenes de los objetos. ver con detalles y claridad sus estructuras pequeñas o invisibles a la vista humana. Facultad de Bioanálisis. 2. Identifique las partes del sistema óptico del microscopio. facilitando de esta manera su estudio. óptico. Colocar el microscopio en una mesa que permita una cómoda observación a través del ocular. Esta integrado por tres sistemas. 1. Describa las principales características de cada uno de los componentes que integran el sistema mecánico. Región Veracruz. Identifique las partes del sistema de iluminación del microscopio. 3. 2. Identifique las partes del sistema mecánico del microscopio. Describa la función que tienen cada una de las partes que integran los sistemas antes mencionados. El haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar el ocular. a su vez cada sistema esta constituido por varios componentes y cada uno tiene funciones especificas. la luz es concentrada sobre la preparación a observar. . 4. mecánico y de iluminación. Seleccionar con el revolver el objetivo de menor aumento (10 X).

Afinar los detalles de la imagen moviendo el tornillo micrométrico. Normalmente los microscopios convencionales poseen un tope que impide su ascenso por arriba de cierta marca. hasta apoyarlo levemente sobre la preparación. . 6. Sin embargo. Mirando por los extremos subir la platina hasta el tope. 9. puede darse el caso que tal tope no exista. y que el cubre objetos y el objeto estén situados hacia arriba) acomodando la porción de la preparación que se va examinar en la apertura central de la platina 5. Región Veracruz. Ajustar la distancia interpupilar ( distancia entre los ojos). 7. si no hay tope acercar la platina lo más cerca posible a la lente objetiva. o bien con el ocular enfocable izquierdo Facultad de Bioanálisis. 8. Ajustar dioptrías (agudeza visual) en el porta ocular izquierdo.Laboratorio de Técnicas Citológicas Bajar la platina y colocar la preparación (fijarse que quede firmemente sujeta al carro. (este tope solo existe en la lente objetiva de 10X) Mirando por los oculares bajar la platina con el tornillo macrométrico hasta que empiecen a distinguirse los detalles de la preparación.

o la conformación celular de una estructura. Aleje la platina del objetivo. Región Veracruz. y sus relaciones (función importante al inicio del estudio que ahorrará tiempo dedicado al análisis de la muestra). recordar que el objetivo de 10X permite ver la visión panorámica del preparado. Retire la laminilla y limpie las lentes objetivas y la platina. permiten ver detalles de una célula. 11 Cambiar a un objetivo de más aumento (sin bajar la platina con el tornillo macrométrico) y enfocar únicamente con el tornillo micrométrico. 13 Recordar que los objetivos de 40X y 100X. Observe por el ocular y mueva ligeramente el tornillo micrométrico hasta encontrar la imagen. aspecto que permite analizar la muestra de manera eficiente.Laboratorio de Técnicas Citológicas Una vez conseguido el enfoque correcto. acerque la lente de 100 lentamente hasta que esta se encuentre en contacto con el aceite (observar lateralmente éste movimiento). apague la fuente de luz. aleje la lente de la muestra. deposite una gota de aceite de inmersión en el portaobjetos (sin quitar la laminilla de la platina) en el punto de mayor concentración luminosa. los tejidos. a fin de ir reconociendo imágenes que le sean familiares. Es decir. Se puede observar la forma y tamaño de células o grupo de ellas. 12 Para usar el objetivo de 100X. su ubicación. 10 14 Al finalizar su observación. . MICROSCOPIO COMPUESTO Facultad de Bioanálisis. colocar la lente de menor aumento. recorra todo la preparación.

mantengan al instrumento en buenas condiciones. El microscopio es un instrumento óptico de precisión. que ayudarán al correcto diagnóstico. que para su manejo. Las lentes de un microscopio óptico se encuentran en el condensador. es uno de los instrumentos de uso más frecuente en los laboratorios clínicos.Laboratorio de Técnicas Citológicas * OBSERVACIONES Y RESULTADOS: El microscopio. facilitando de esta manera su estudio. muchos de los errores diagnósticos no tienen su base en el preparado. no obstante este aumento varia de acuerdo a su medida. Por lo tanto. tubo óptico y de su ocular. El aumento primario del objeto es producido por la lente objetivo y la imagen se transmite al ocular. . donde se realiza el aumento final. Elevando o bajando el condensador puede alterarse el plano del foco de luz y elegirse una posición que consiga el foco preciso. Facultad de Bioanálisis. sino en la errónea manipulación del instrumento. En los microscopios modernos el tubo óptico tiene una medida estándar y produce aumentos de 1x. el aumento total de un microscopio compuesto se debe calcular tomando en cuenta el producto del aumento de su objetivo. es por eso importante. el objetivo y el ocular. Región Veracruz. El objetivo es la lente situada cerca del objeto que se observa. lo que hace posible. mediante un sistema de lentes y fuentes de iluminación puede hacer visible un objeto microscópico y proporciona la amplificación de las imágenes de los objetos. se cuente con técnicas adecuadas que permitan obtener imágenes claras en el menor tiempo posible y que además. ver con detalles y claridad sus estructuras pequeñas o invisibles a la vista humana. El uso adecuado de los recursos ópticos del microscopio permitirá reconocer detalles y variaciones tintoriales. El condensador se utiliza para enfocar la luz sobre la preparación.

además de describir las características morfológicas de las células exfoliadas. quien. En su honor se denomina. endometrio y ovario. Región Veracruz.Laboratorio de Técnicas Citológicas Práctica No. especialmente a la proveniente del cuello uterino. en algunos países del mundo. La citología hormonal puede ser empleada para evaluar ciertos aspectos de la condición hormonal en la mujer. reducir la incidencia y. El estudio de la citología exfoliativa del aparato genital de la mujer fue especialmente desarrollado por George Papanicolaou. 2 TOMA DE ESTUDIO CITÓLOGICO CÉRVICO-VAGINAL PARA DOC * FUNDAMENTO: El cáncer cérvico-uterino es la neoplasia maligna más frecuente en México. examen de Papanicolaou (PAP) al estudio de la citología exfoliativa diagnóstica del aparato genital femenino. desarrolló una técnica de fijación y tinción de los extendidos que se mantiene hasta hoy y que permite un adecuado estudio citológico. prácticamente en todo el mundo. Mediante la organización de programas de detección masiva en mujeres asintomáticas. se ha logrado. . En la actualidad ya está Facultad de Bioanálisis. La citología exfoliativa también puede tener utilidad en el diagnóstico de tumores de la vagina. con el procedimiento de Papanicolaou y el tratamiento y control adecuado de los casos diagnosticados. El estudio citológico cérvico-vaginal anual es la forma más adecuada. La principal utilidad de la citología exfoliativa ginecológica es la detección precoz de lesiones precursoras del carcinoma de cuello uterino. sencilla y de bajo costo para detectar este tipo de cáncer. El estudio al microscopio de las células exfoliadas del aparato genital femenino es un complemento diagnóstico de primordial importancia en ginecología y obstetricia. Para un diagnóstico correcto es fundamental abarcar la zona escamocolumnar. la mortalidad por cáncer invasor del cuello uterino.

Una espátula de madera tipo Ayre deberá ser usada y rotada alrededor del cervix dos veces con presión firme. inmediatamente colocada en el orificio externo. . La paciente debe ser instruida a no usar ducha o lavado vaginal y no tener coito por 24 horas antes de la obtención de la muestra. La muestra es inmediatamente fijada y etiquetada con el nombre de la paciente. Región Veracruz. A pesar de la probada efectividad de los frotis de PAP en la reducción de la incidencia del cáncer cervical. Posteriormente la citología cervical ha sido aprobada como el método más eficaz y efectivo para la detección del cáncer y sus precursores. pero es mucho menos específica para diagnosticar NIC de bajo grado. Las células obtenidas con ambos métodos son colocadas en la misma lámina. En contraste a su alta especificidad para detectar alto grado de NIC y cáncer invasor el PAP no es muy sensitivo. Estudios que usan una combinación de espátula de madera y escobilla endocervical reportan alrededor de 20% de falsos negativos. Cuando los frotis de PAP fueron introducidos por Papanicolaou las muestras eran tomadas solo del fondo de saco vaginal y prontamente pareció que este método era inadecuado resultando una proporción alta de falsos negativos. Ayre en 1947 reportó el uso de espátula de madera para raspar la superficie del cervix para obtener las células del área en que se inician y desarrollan las NIC y cánceres muy conocida como la Zona de Transformación. George Papanicolaou en 1941 propuso por primera vez la evaluación citológica de células obtenidas del cervix y vagina como método para detectar cáncer cervical y sus precursores. Es necesario cumplir simples lineamientos. El Dr. Con esta última se obtiene 10 veces más células endocervicales que con el hisopo de algodón. mejorando la eficacia del PAP. rotada 180º solamente y retirada. Facultad de Bioanálisis. La citología es extremadamente específica para detectar cáncer cervical y NIC de alto grado. pues los resultados falsos negativos ocurren entre el 8 y 50%. muchos se han preocupado de la precisión de esta prueba diagnóstica. la cual depende de su especificidad y sensibilidad para detectar. Ácido acético no debe ser aplicado al cervix antes de tomar el frotis. la muestra puede ser tornada con un aspirador endocervical. El PAP no debe ser obtenido durante la regla o menos de una semana después de cesar antibióticos intravaginales o agentes antimicóticos. Otros factores importantes para reducir la proporción de falsos negativos son la fijación rápida de células para prevenir cambios secundarios artificiales debidos a la sequedad por aire y también el uso de un laboratorio citológico con normas rigurosas de control de calidad. un hisopo de algodón humedecido con solución salina o con escobilla endocervical (citobrush).Laboratorio de Técnicas Citológicas demostrado que el uso del PAP no sólo es útil en la detección del cáncer en la citología ginecológica sino en otros tipos de patologías. Debe ser tomado antes del examen bimanual usando una pequeña cantidad o no de lubricante. Una escobilla endocervical.

* ESQUEMAS Facultad de Bioanálisis. * OBSERVACIONES: Se debe tratar de localizar el cerviz siempre. Se coloca la muestra sobre el portaobjetos previamente identificado con los datos de la paciente poniéndola a continuación de la muestra o la toma exocervical. Citobrush. Región Veracruz. Se fija con el citospray rociándola a 30 cm de distancia. puede usarse el abatelenguas junto con el hisopo sin algodón. Se debe procurar que no pasen más de 10 segundos entre la toma y la fijación.Laboratorio de Técnicas Citológicas * MATERIAL: • • • • • • • Mesa de exploraciones. introduciendo la parte convexa dentro del orificio cervical y rotándola 360º. * RESULTADOS: Se obtendrán así las laminillas con material celular adecuado y fijado. se introduce el espejo vaginal cerrado verticalmente cabía adentro y ligeramente hacia abajo. Citospray o alcohol de 96º. con el mínimo de molestias para la paciente. Espejo vaginal estéril y sin lubricantes. Laminillas portaobjetos. espátula de Ayre o hisopo sin algodón. Se abre el espejo. En caso de carecer del citospray puede sustituirse por alcohol de 96º. listas para ser teñidas y observadas al microscopio. Guantes estériles. En caso de no contar con material adecuado. * METODOLOGÍA: Con la paciente en posición ginecológica. Lápiz diamante. rotándolo hasta quedar dentro y horizontal. . se observa el cerviz y se procede a la toma del estudio mediante el citobrush o espátula de Ayre.

Con este procedimiento se obtienen fundamentalmente células exfoliadas del epitelio pavimentoso cervicovaginal y del epitelio cilíndrico endocervical.Laboratorio de Técnicas Citológicas Frotis de Papanicolaou El examen de Papanicolaou es un procedimiento simple y relativamente económico que puede detectar con facilidad condiciones cancerosas o precancerosas. células del epitelio de la trompa y del ovario. Además Facultad de Bioanálisis. excepcionalmente. en ocasiones también se encuentran células endometriales y. . Región Veracruz. 4 OBSERVACIÓN DE CÉLULAS CERVICOVAGINALES NORMALES * FUNDAMENTO: La muestra citológica habitual se obtiene del cuello uterino de la unión escamocolumnar y del fondo de saco posterior de la vagina para diagnóstico oncológico y de pared lateral de la vagina para diagnóstico hormonal. Práctica No.

Células exfoliadas del epitelio pavimentoso estratificado. descamarse en la superficie.2 mm de espesor y está formado por estratos histológicamente bien diferenciables: El estrato basal está formado por una sola capa de células de tipo cilíndrico dispuestas en empalizada sobre la membrana basal. El epitelio escamoso tiene la capacidad de exfoliar diversos tipos celulares según el grado de maduración alcanzado. Este método emplea hematoxilina para teñir el núcleo de color azul oscuro o violeta oscuro y un conjunto de substancias que colorea el citoplasma en forma diferente según la maduración celular. que es un colorante básico. Mide aproximadamente 0. El proceso de regeneración del epitelio se efectúa a partir de esta capa celular. Los tipos celulares del epitelio escamoso que se reconocen en el extendido citológico son los siguientes: Facultad de Bioanálisis. Las células que contienen gránulos de queratina tienen avidez por el colorante Orange G. de núcleo central. El citoplasma de las células inmaduras y en general de las metabólicamente activas. centrales y vesiculosos. .Laboratorio de Técnicas Citológicas pueden encontrarse eritrocitos. Región Veracruz. se tiñe de color azul pálido o azul verdoso porque capta el light green. El Frotis Citológico se tiñe generalmente con el método de Papanicolaou. Las células con citoplasma acidófilo toman el color rosado de la eosina y se denominan eosinófilas. con núcleo grande. que ocupa gran parte de la célula. ovalado y central. células inflamatorias. por numerosas capas de células aplanadas. Habitualmente las células que se exfolian provienen de los estratos superiores. estas células se denominan basófilas o cianófilas.El epitelio que reviste la vagina y porción vaginal del cuello uterino de la mujer sexualmente madura es un epitelio pavimentoso estratificado.. con puentes intercelulares (estrato espinoso profundo). microorganismos y elementos de contaminación. También es eosinófilo el nucleolo. llamado también epitelio escamoso. citoplasma grueso. que tiñe el citoplasma de color anaranjado o amarillo. de forma poligonal. finalmente. sin puentes intercelulares y con núcleo picnótico central. El estrato intermedio también presenta puentes intercelulares (estrato espinoso superficial) y está formado. el resto de los estratos representan etapas del proceso de maduración y diferenciación celular para. Las células germinativas (aquellas cuya función es producir células de la especie) son redondas u ovaladas. con citoplasma rico en glucógeno. Aquí se describen los rasgos morfológicos esenciales de los componentes del extendido cervicovaginal. El estrato parabasal está compuesto de varias capas de células redondeadas o poliédricas. núcleos relativamente pequeños. de citoplasma delgado y claro. a menos que existan úlceras o que la muestra se tome con excesiva energía. El estrato superficial consta de varias capas de células aplanadas grandes. como se observan con la tinción de Papanicolaou.

cuando se observan lateralmente presentan un característico aspecto en "empalizada". su citoplasma puede aparecer vacío y el núcleo desplazado hacia un borde. por su contenido de glucógeno. . el citoplasma es algo más grueso que el de las células superficiales. El núcleo es central. redondo o elíptico. Cuando las células endocervicales descamadas en grupos se observan desde el polo superior. Miden 15 a 25 micrones. denso. pero puede ser cianófilo. El núcleo es central. Células parabasales: En el frotis normal de una mujer en edad fértil no constituyen más del 5% de las células exfoliadas del epitelio pavimentoso. de forma hexagonal. que tienen un contorno más ovalado. Las células naviculares presentan dos extremos aguzados que le confieren la forma de un bote. Las células aisladas observadas de perfil. son generalmente redondeadas. de contorno generalmente poligonal. Son aplanadas.Laboratorio de Técnicas Citológicas Células superficiales: Las células exfoliadas del estrato superficial miden 40 a 60 micrones de diámetro. la cromatina nuclear tiene disposición reticular. Tienen forma redondeada o poligonal. Células exfoliadas del epitelio endocervical: La mucosa endocervical está revestida por epitelio cilíndrico simple muco secretor. Existen algunas variedades de células intermedias. En este extremo se reduce el diámetro de la célula a manera de un tallo. Región Veracruz. la cromatina se dispone en forma de finos gránulos. con citoplasma grueso cianófilo. pudiendo ser eosinófilo. Las células intermedias superficiales son más grandes y poligonales que las células intermedias profundas. circular y pequeño. Estas células cilíndricas pueden descamarse aisladamente o en grupos. generalmente basófilo. con un diámetro mayor que el de las células intermedias. redondo y mide alrededor de 8 micrones. presentan el núcleo cerca de uno de los extremos que corresponde al polo basal. La mayoría de ellas tienen citoplasma eosinófilo. Las células básales prácticamente no aparecen en los frotis. algunas con el borde plegado. Células exfoliadas del endometrio: Facultad de Bioanálisis. El núcleo es redondo u ovalado. Células intermedias: Las células exfoliadas del estrato intermedio son del mismo tamaño o ligeramente menores que las superficiales. delgadas. mide menos de 6 micrones de diámetro. Es picnótico. El núcleo es central. porque muestran su borde citoplasmático nítido. con la cromatina granular fina y dispersa. homogéneo y no se reconoce en él estructura cromatínica. presentan un aspecto semejante a un panal de abejas.

según el estado funcional. Región Veracruz. . También es excepcional observar células de la decidua o del trofoblasto (postaborto. en el post parto y en los procesos inflamatorios del endometrio. Las células endometriales recogidas habitualmente en el frotis cervicovaginal suelen presentar signos de degeneración. Los leucocitos polimorfonucleares pueden encontrarse en el frotis normal. * METODOLOGÍA: Una vez fijada y teñidas (tinción modificada de Papanicolaou) nuestras muestras de estudio citológico cérvico-vaginal. finamente vacuolado o con grandes vacuolas restos de células fagocitadas. el cual deberá estar limpio y con la iluminación regulada. Los histiocitos se presentan comúnmente alrededor del período menstrual. * MATERIAL: * Microscopio * Aceite de inmersión * Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou. pueden ser confundidas con células endocervicales. Son redondeados u ovalados. En los procesos inflama torios pueden llegar a ser tan abundantes que impiden ver las células epiteliales. se procede a la observación de las mismas. tienen citoplasma poco definido y a menudo transparente. la cual debe realizares de manera sistemática y precisa para dar un resultado preciso. después. el nucléolo es pequeño. cuando ello ocurre.Laboratorio de Técnicas Citológicas Aproximadamente el 2% de los frotis obtenidos por aspirado endocervical contienen células endometriales. en el embarazo. se procede a la observación con el objetivo seco fuerte (40 X). Miden alrededor de 10 micrones.. Los histiocitos o macrófagos generalmente se encuentran aislados. En algunos procesos inflamatorios y en la menopausia se pueden observar histiocitos gigantes multinucleados. el citoplasma es semitransparente. son considerados como componentes anormales. Los linfocitos y plasmocitos se observan en las inflamaciones crónicas cervicovaginales. Es frecuente observar eritrocitos. El núcleo es oval o reniforme con la cromatina fina y granular. * OBSERVACIONES: Facultad de Bioanálisis. Miden entre 10 y 25 micrones de diámetro. para lo cual se requiere de un microscopio óptico. posteriormente se coloca la laminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X . placenta previa). Otros tipos de células: Rara vez aparecen en el frotis células epiteliales cilíndricas exfoliadas del epitelio tubárico.

El conocimiento detallado de la morfología celular normal nos ayuda para que un momento dado podamos establecer la diferencia entre una célula normal y una célula maligna. La intensidad de la displasia puede ser leve. en donde las displasias leves (NIC 1) están dentro del grupo de Lesiones Escamosas Intraepiteliales de Bajo Grado. Dado que los patólogos no pueden distinguir la reproducibilidad entre displasia severa y carcinoma in situ. el NIC se divide en tres grupos: NIC 1 corresponde a displasia leve. NIC 2 corresponde a displasia moderada. NIC 3 abarca ambas lesiones. NIC 2) y cáncer in situ se encuentran en las Lesiones Escamosas Intraepiteliales de Alto Grado. presentan límites netos. Facultad de Bioanálisis. los límites celulares de los grupos exfoliados son menos distinguibles. las que se descaman en grupos. lo cual es muy importante para poder diferenciar entre las células normales y las células malignas. En diciembre de 1988. 6 OBSERVACIÓN DE DISPLASIAS: LEVE. Práctica No. severa (NIC 1.Laboratorio de Técnicas Citológicas Células parabasales superficiales Células superficiales Células RESULTADOS: Se observó la morfología cervicovaginal normal. Región Veracruz. el Instituto Nacional de Cáncer (NCI) propuso un nuevo sistema de nomenclatura. el Sistema Bethesda (TBS). moderada o avanzada. cambios en la relación núcleo/citoplasma y de las características citoplasmáticas de una célula cualquiera. . A mayor diferenciación de la lesión. En la displasia del epitelio escamoso las células se exfolian generalmente aisladas. La forma y tamaño de las células depende del grado de maduración que alcanza el epitelio. MODERADA Y GRAVE * FUNDAMENTO: La displasia se puede definir como la presencia de alteraciones nucleares. y las displasias moderada. incluyendo displasia y carcinoma in situ. de acuerdo a las características morfológicas de las células. En 1973 fue propuesto el término de Neoplasia Intraepitelial Cervical (NIC) para incluir todas las formas de lesiones precursoras de cáncer cervical.

Lesión Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LIE AG). La buena salud también puede prevenir o disminuir la displasia. En la actualidad los cambios citopáticos producidos por la infección por VPH son considerados dentro de este grupo. Existe mayor hipercromatismo.Laboratorio de Técnicas Citológicas Displasia Leve. Neoplasia Intraepitelial Cervical 3 (NIC III). Existe leve variación del tamaño y forma de los núcleos. Las mujeres con la infección del VIH tienen más probabilidades de desarrollar displasia. También se pueden encontrar células fusadas y de formas bizarras. Displasia Moderada. Generalmente el núcleo ocupa menos de 1/3 del área celular. . Nucléolos ausentes. siendo posible reconocer células poligonales y aun. signo de que persiste tendencia a la diferenciación del epitelio. Las células exfoliadas de una displasia leve corresponden a células poligonales de tipo intermedio o superficial. El núcleo es hipercromático. La displasia es más común en mujeres que: * Fuman * Presentan infecciones por VPH. En el extendido obtenido de una displasia moderada las células corresponden en general a células intermedias profundas. Un sistema inmunológico sano puede ayudar a prevenir la displasia. algunos de los cuales pierden su contorno perfectamente redondo u ovalado al ser observados al microscopio de luz. * Tienen más de un(a) compañero(a) sexual * Tienen relaciones sexuales por primera vez a una edad muy temprana * Tienen deficiencias de vitaminas y mala nutrición * MATERIAL: * Microscopio Facultad de Bioanálisis. Puede haber nucléolos eosinofílicos. con núcleo levemente aumentado de tamaño y discreto aumento de la relación núcleo/citoplasma. en la que se observan numerosas células de tipo parabasal. con mayor variación en la forma celular. La relación núcleo/citoplasma es mayor a 2/3. otras presentan características citoplasmáticas de metaplasia inmadura. Algunas células son poligonales u ovaladas. Lesión Escamosa Intraepitelial de Bajo Grado (LIE BG). Las alteraciones descritas son más marcadas en la displasia avanzada. Neoplasia Intraepitelial Cervical 1 (NIC I). Displasia Severa. en ocasiones. aunque generalmente están oscurecidos por la cromatina densa. Región Veracruz. Neoplasia Intraepitelial Cervical 2 (NIC II). con la cromatina dispuesta en forma reticular o finamente granular. pero la cromatina aún se dispone en gránulos finos uniformes. células aplanadas queratinizadas de citoplasma anaranjado. Lesión Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LIE AG). La variación en la forma y tamaño de los núcleos y la alteración de la relación núcleo/citoplasma es mayor que en la displasia leve.

* OBSERVACIONES: Displasia leve Displasia grave Displasia moderada RESULTADOS: Después de haber hecho una revisión y observación detallada de las muestras. se obtuvieron los siguientes resultados: Displasia leve: Flora bacteriana cocoide (+ +). LIE Bajo grado. * METODOLOGÍA: Una vez fijada y teñidas (tinción modificada de Papanicolaou) nuestras muestras de estudio citológico cérvico-vaginal. NIC I. después. Papanicolaou Negativo Clase III. posteriormente se coloca la laminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X . se procede a la observación de las mismas. se procede a la observación con el objetivo seco fuerte (40 X). . Reacción inflamatoria (+ +). la cual debe realizares de manera sistemática y precisa para dar un resultado preciso. Facultad de Bioanálisis.Laboratorio de Técnicas Citológicas * Aceite de inmersión * Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou. para lo cual se requiere de un microscopio óptico.. Eritrocitos (+ +). el cual deberá estar limpio y con la iluminación regulada. Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de Displasia Leve. asociada a infección por VPH y Gardnerella vaginalis. Región Veracruz.

Papanicolaou Negativo Clase III. NIC III. Facultad de Bioanálisis. NIC II.Laboratorio de Técnicas Citológicas Displasia moderada: Flora bacteriana cocoide (+ +). Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de discariosis. Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de displasia moderada. es indispensable precisar que no existe un signo morfológico patognomónico de cáncer. Por otra parte. Displasia grave + VPH: Flora bacteriana bacilar (+ +). Sin embargo. Por estos hechos la citología. 1979). Reacción inflamatoria (+). requiere de gran experiencia y ponderación. como método de colaboración diagnóstica. Papanicolaou Negativo Clase III. que en conjunto caracterizan a las células tumorales malignas. no siempre todos los signos de malignidad se encuentran en cada célula cancerosa. 7 OBSERVACIÓN DE CÁNCER IN SITU Y CÁNCER INVASOR * FUNDAMENTO: Existen alteraciones morfológicas. Estas alteraciones se conocen como criterios de malignidad (Frost. Lectura hormonal no fue posible. . Practica No. asociada a infección por VPH. Región Veracruz. Lectura hormonal no fue posible. pleomorfismo y coilocitosis que integran el diagnóstico de Displasia Grave. LIE Alto grado. Reacción inflamatoria (+ + +).

y lo conecta con la vagina (canal de nacimiento). El aumento del núcleo es proporcionalmente mayor que el de la célula. células endometriales dispuestas en forma de papilas. *Alteraciones del núcleo Son las de mayor valor en la estimación de malignidad.Laboratorio de Técnicas Citológicas Los criterios de malignidad se clasifican en: alteraciones de la célula. generalmente son mayores que los de las células normales. El cuello uterino es la abertura del útero. pero poco frecuente. Se observan también alteraciones en la forma del núcleo (polimorfismo): el borde nuclear puede tener angulaciones y pliegues y la membrana nuclear presentar grosor irregular. Región Veracruz. La densidad de la cromatina puede estar aumentada (hipercromatismo). El cáncer cervicouterino. ya sea en forma difusa o en gruesos grumos que alternan con espacios ópticamente vacíos Los nucléolos pueden estar aumentados en número y tamaño. Antes de que se encuentre células cancerosas en el cuello uterino. por eso en general se exfolian abundantes células y una gran proporción de ellas se desprenden aisladas o en grupos pequeños. estos grupos son irregulares. pudiendo presentar características de diferenciación anómala (queratinización intensa o gran acumulación de mucus en una gran vacuola que desplaza al núcleo hacia la periferia). el extendido se observa superposición de núcleos y pueden no observarse los bordes celulares. Puede haber multinucleación. que se desprenden. el órgano hueco en forma de pera donde se desarrolla el feto. . es una enfermedad en la cual se encuentra células cancerosas (malignas) en los tejidos del cuello uterino. la que en ocasiones puede ser muy anormal. por ejemplo. El cáncer cervicouterino suele crecer lentamente por un período de tiempo. *Alteraciones de la célula: Las células cancerosas exfoliadas presentan variaciones en el tamaño (anisocitosis) y en la forma (polimorfismo). por lo cual. las células forman estructuras que normalmente no existen en el órgano de origen. las mitosis atípicas. por lo que la relación núcleo/citoplasma está aumentada. que sólo se ve con los mayores aumentos del microscopio. En algunas células tumorales el citoplasma es reducido a una delgada banda alrededor del núcleo. A diferencia de los conjuntos de células normales. *Alteración de la relación entre las células La cohesión entre las células es menor en los tumores malignos. Pueden presentar numerosas mitosis. Los núcleos presentan variaciones de tamaño (anisocariosis). Cáncer se define como crecimiento desordenado de un tejido. sus tejidos experimentan cambios y empiezan a aparecer células anormales Facultad de Bioanálisis. a menudo de contorno irregular y angulado. siendo el hallazgo más importante. alteraciones del núcleo y alteraciones de la relación entre las células. En algunos frotis obtenidos de tumores malignos. El citoplasma puede ser cianófilo (signo de menor diferenciación). como en las células en forma de fibra o de raqueta.

para lo cual se requiere de un microscopio óptico. Ya que en general no hay síntomas asociados con el cáncer cervicouterino. * MATERIAL: * Microscopio * Aceite de inmersión * Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou. las células cancerosas comienzan a crecer y se diseminan con mayor profundidad en el cuello uterino y en las áreas circundantes. Región Veracruz. un cepillo o una espátula de madera pequeña para raspar suavemente el exterior del cuello uterino con el fin de recoger células. el médico debe hacer una serie de pruebas para buscar el cáncer. posteriormente se coloca la laminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X . que se lleva a cabo usando un pedazo de algodón.Laboratorio de Técnicas Citológicas (proceso conocido como displasia). el médico tendrá que extraer una muestra de tejido (este procedimiento se conoce con el nombre de biopsia) del cuello uterino y lo observará a través del microscopio para ver si hay células cancerosas. Posteriormente. La primera prueba es la de Papanicolaou. * METODOLOGÍA: Una vez fijada y teñidas (tinción modificada de Papanicolaou) nuestras muestras de estudio citológico cérvico-vaginal. Si se encuentra células anormales.. * OBSERVACIONES: Facultad de Bioanálisis. . el cual deberá estar limpio y con la iluminación regulada. después. El pronóstico (posibilidades de recuperación) y la selección del tratamiento dependen de la etapa en que se encuentra el cáncer (si se encuentra en el cuello uterino o si se ha diseminado a otros lugares) y el estado de salud en general de la paciente. se procede a la observación de las mismas. se procede a la observación con el objetivo seco fuerte (40 X). la cual debe realizares de manera sistemática y precisa para dar un resultado preciso. La prueba de Papanicolaou generalmente encuentra estas células.

pleomorfismo. pérdida de la relación núcleo-citoplasma. Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de Cáncer epidermoide invasor de células pequeñas. Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia. Cáncer Invasor de células pequeñas: Flora bacteriana cocoide (+). Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia. Papanicolaou Positivo Clase V. Lectura hormonal no posible. Papanicolaou Positivo Clase V. Reacción inflamatoria (+ +). Cáncer invasor: Flora bacteriana mixta (+ +). OBSERVACIONES: Se recomienda toma de biopsia por colposcopía para iniciar tratamiento. Reacción inflamatoria (+ +). que integran el diagnóstico de Cáncer Epidermoide In situ asociado a infección por VPH. Papanicolaou Positivo Clase IV. . LIE Alto grado. Región Veracruz. Facultad de Bioanálisis. células fibroideas y células en raqueta. Eritrocitos (+ +). NIC III. Reacción inflamatoria (+ + +).Laboratorio de Técnicas Citológicas * RESULTADOS: Después de haber hecho una revisión y observación detallada de las muestras. se obtuvieron los siguientes resultados Cáncer In situ: Flora bacteriana cocoide (+ +). que integran el diagnóstico de Cáncer Epidermoide invasor. pérdida de la relación núcleo-citoplasma.

Patrón clínico en la infección por VPH: * Coliocitosis * Macronucleosis * Binucleación * Anfofilia * Distribución irregular de la cromatina. Virus de Papiloma Humano (VPH): Los papilomavirus son virus DNA y de los 41 tipos identificados. . perinatal y neoplásico. Herpes. Ejemplos: Herpes. citomegalovirus. Vacuolización en células basales (grandes burbujas en el citoplasma). Gardnerella vaginalis. presencia de células indicio (clue). Presenta imagen citológica en “Vidrio esmerilado”. Cuadro clínico vulvovaginitis. apariencia en bolsa de canicas. varicela. VIRUS: La identificación de estas infecciones tiene implicaciones de tipo venéreo. BACTERIAS: Facultad de Bioanálisis. HONGOS Y PARÁSITOS * FUNDAMENTO: Mediante el examen citológico podemos diagnosticar enfermedades infecciosas como las ocasionadas por: virus.. relaciones prolongadas después de 7 años.Interviene de manera importante en la etiología de cervicitis mucopurulenta. Periodicidad de 1 a 3 meses. núcleo con aumento de tamaño y multinucleación. No se puede establecer un diagnóstico certero mediante la técnica de Papanicolaou. en la enfermedad pélvica inflamatoria aguda y LGV. Región Veracruz. mientras que el 16 y el 18 se relacionan con lesiones premalignas de alto grado de cáncer invasor. 18. 5 AGENTES BIOLÓGICOS VIRUS. BACTERIAS. condiloma. Entre las bacterias que más frecuentemente causan infecciones del tracto genital femenino.. 45. hongos y parásitos.. bacterias.Puede aparecer en forma de cocos o bacilos. 56. se encuentran: Chlamydia trachomatis.Es un virus de DNA transmitido habitualmente por relación sexual. se relacionan con el cáncer cervicouterino. el 16.Laboratorio de Técnicas Citológicas Práctica No. El 6 y el 11 se encontraron en el condiloma acuminado y neoplasia leve.

En el frotis se observan como hifas o esporas.. que toman anticonceptivos orales.. se procede a la observación con el objetivo seco fuerte (40 X). PARÁSITOS: * MATERIAL: * Microscopio * Aceite de inmersión * Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou.Grandes bacilos que se entrelazan y dan una apariencia de madejas de cabellos. Candida albicans. Entre los protozoarios que infectan al aparato reproductor femenino se encuentran las Tricomonas y las amebas. * METODOLOGÍA: Una vez fijada y teñidas (tinción modificada de Papanicolaou) nuestras muestras de estudio citológico cérvico-vaginal.. el cual deberá estar limpio y con la iluminación regulada. se procede a la observación de las mismas. para lo cual se requiere de un microscopio óptico.Más frecuente en mujeres embarazadas. posteriormente se coloca la laminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X . * OBSERVACIONES: VPH HERPES Facultad de Bioanálisis. que se tiñen en color pardo rojizo y se ven refringentes al microscopio.. la imagen citologica es de color gris o verde con núcleo oval o redondo excéntrico.Laboratorio de Técnicas Citológicas Lepthrotrix actinomyces.tiene forma oval o de pera. la cual debe realizares de manera sistemática y precisa para dar un resultado preciso. Trichomonas vaginalis. . diabéticas. después. Región Veracruz.

Laboratorio de Técnicas Citológicas CHLAMYDIA TRACHOMATIS GARDNERELLA VAGINALIS CANDIDA ALBICANS LEPTHOTRIX ACTYNOMICES Facultad de Bioanálisis. Región Veracruz. .

DIGIRIENDO * RESULTADOS: Se observaron laminillas que presentan diversas alteraciones celulares debida a agentes biológicos tales como: virus. Clase II Gardnerella vaginalis Flora bacteriana mixta ++ Rx. Inflamatoria ++ Lectura hormonal no posible CECV con alteraciones inflamatorias específicas por VPH Papanicolaou negativo. LIE bajo grado. se obtuvieron los siguientes resultados: VPH Flora bacteriana mixta +++ Rx. Inflamatoria +++ Lectura hormonal no posible CECV con alteraciones inflamatorias específicas por infección viral (herpes) Papanicolaou negativo. hongo y parásitos. Región Veracruz. Después de haber hecho una revisión y observación detallada de las muestras. HERPES Flora bacteriana mixta ++ Rx. . Clase II.Laboratorio de Técnicas Citológicas CÁNDIDA ALBICANS ERITROCITOS ENTAMOEBA HISTOLYTICA. bacterias. Inflamatoria ++ Índice de Frost 0/70/30= 68 de valor estrogénico CECV con alteraciones inflamatorias específicas por infección viral (herpes) Facultad de Bioanálisis.

sin manipular. El citograma será diferente de acuerdo con el órgano del cual se obtuvo el material a examinar. y sin medicamentos.Laboratorio de Técnicas Citológicas Papanicolaou negativo. sin lavar. .Manejo del material obtenido 4. Clase II Trichomonas vaginalis Flora bacteriana cocoide +++ Rx. Inflamatoria ++ Índice de Frost 0/100/0= 55 de valor estrogénico CECV con alteraciones inflamatorias específicas por Leptothrix actynomices Papanicolaou negativo. Además la recolección del material a examinar será diferente para cada órgano.. Clase II Práctica No.. Clase II Cándida albicans Flora bacteriana bacilar ++ Rx. Facultad de Bioanálisis. Región Veracruz..Recolección del material 2. vaginalis Papanicolaou negativo. Clase II Leptothrix actynomices Flora bacteriana mixta ++ Rx.Preparación de los extendidos 3. 3 TINCIÓN DE PAPANICOLAOU * FUNDAMENTO: La constante exfoliación de células de los estratos tisulares mas superficiales del epitelio de revestimiento mezclados con otros elementos celulares de la sangre y liquido intersticial o moco secretado. Inflamatoria + Índice de Frost 0/80/20= 64 de valor estrogénico CECV con alteraciones inflamatorias específicas por Cándida albicans Papanicolaou negativo.Tinción de los extendidos 5. Se deben considerar: 1. Inflamatoria ++ Índice de Frost 0/40/60= 82 de valor estrogénico CECV con alteraciones inflamatorias específicas por T..Interpretación microscópica Recolección del material: El órgano que se va a estudiar debe estar en condiciones fisiológicas. es la base del método.. si esto no se puede evitar debe informarse por escrito en la solicitud de estudio.

El 50% del éxito en el diagnostico dependerá de la toma y fijación de la muestra. ya que resulta ser mas útil tanto para el diagnostico de alteraciones tisulares como para la valoración hormonal. * MATERIAL: Facultad de Bioanálisis. No obstante. Es tricrómica a base de: hematoxilina. hallazgos durante el examen clínico. Orange G y EA 50. El medico solicitante debe conocer las posibilidades y limitaciones de la citología para que pueda aprovechar en su diagnostico y tratamiento los datos proporcionados por el citólogo. La toma del producto puede hacerla el citóloga o el medico en el consultorio. edad. la segunda los citoplasmas transparentes y la tercera los citoplasmas mas densos. la mas utilizada es la tinción de Papanicolaou modificada.Laboratorio de Técnicas Citológicas Preparación de los extendidos: El material que será objeto de estudio debe llegar al laboratorio de citología lo más pronto posible para ser procesado debidamente. se sumerge en alcohol etílico de 96 o se rocía con líquido fijador a base de polietileglicol e isopropil (spray normal). de tal manera que el circulo luminoso del ocular corresponda al principio del circulo del campo siguiente a observar. Tinción de los extendidos: Existen varias coloraciones. el clínico debería conocer los primeros pasos y llevarlos a efecto en el momento de la toma. una vez fijado. Y se basa en la reacción química de los colorantes con los elementos celulares. su captación varía de acuerdo con el pH del medio intracelular. tratamiento previo y diagnostico citológico anterior. puede ser transportado a cualquier distancia en estuches que prevean su destrucción. El material a examinar se toma sobre una laminilla portaobjeto limpia y seca. La evaluación de los extendidos requiere experiencia. . Las laminillas deben identificarse con nombre. se hace un extendido delgado y uniforme de la muestra representativa. Manejo del material obtenido: El material. fecha o número en un extremo utilizando lápiz diamante. no deberá pasarse sin observar ningún campo de la preparación. órgano del cual se obtuvo el material. Interpretación microscópica: Todo citólogo antes de revisar una laminilla debe conocer los datos aportados por el clínico en la solicitud. En forma ideal. sexo. Se puede utilizar plomo si las láminas tienen extremo mate. Región Veracruz. diagnostico clínico probable. siempre que este conozca perfectamente las técnicas y posibles causas de error. La primera tiñe los núcleos. El envío de ella puede hacerse en el fijador o bien sacando la laminilla y cubriéndola con una gota de glicerina y otro portaobjeto. La laminilla debe observarse a seco débil recorriéndola en zigzag. Si se usa el alcohol las laminillas deben permanecer dentro del fijador durante 10 minutos como mínimo.

..Se introduce en una tina con el colorante EA-50 durante minuto y medio.Se introduce en una tina con alcohol (10 baños) 9. OG-6 y EA-50.Se introduce en alcohol (10 baños) 14.. se debe realizar el extendido e introducir en alcohol de 96°.. Los colorantes utilizados dentro de la tinción de Papanicolaou son: Facultad de Bioanálisis.Se introduce en alcohol de 96° (10 baños) 7..Se introduce en xilol (10 baños) 17.Se introduce en xilol (10 baños) 16.Se deja secar.Se lava con agua corriente.Se introduce dentro del colorante OG-6 durante 30 segundos y no se enjuaga.... Y se procede con la tinción: 1..Se introduce en alcohol (10 baños) 15. no se debe esperar a que seque la muestra. se introduce dentro de alcohol de 96°. Alcohol de 96° Alcohol ácido Xilol Alcohol absoluto Resina sintética * METODOLOGÍA: Inmediatamente que se toma la muestra. Región Veracruz. 5... 3. y se extiende sobre el portaobjetos..Se le coloca resina sintética y se le pone un cubreobjetos. 2.. * OBSERVACIONES: Inmediatamente se toma la muestra..Se introduce en alcohol ácido (un baño).Laboratorio de Técnicas Citológicas * * * * Portaobjetos Aplicadores y espatulas Cubreobjetos Microscopio * REACTIVOS: * * * * * * Los siguientes colorantes: hematoxilina de Harris.Se introduce en alcohol de 96° (10 baños) 6..Se introduce en alcohol (10 baños) 13. 8. 12. es decir.. 18.Se introduce en una tina con alcohol (10 baños) 11.. 4.Se introduce en una tina con alcohol (10 baños) 10...Se enjuaga con agua corriente.Se introduce en una tina con hematoxilina de Harris durante 3 minutos.

lista para ser leída al microscopio. EA-50: tiñe los citoplasmas de las células basales y parabasales. .Laboratorio de Técnicas Citológicas Hematoxilina de Harris: tiñe los núcleos de las células. Facultad de Bioanálisis. Región Veracruz. * RESULTADOS: Se obtiene una lámina perfectamente teñida por Papanicolaou. OG-6: tiñe los citoplasmas de las células superficiales e intermedias.

Laboratorio de Técnicas Citológicas Un cáncer incipiente y no invasivo (carcinoma in situ) puede ser tratado con una operación mínima. En este lugar.-El cáncer cervical o de cérvix uterino es uno de los más comunes. Los principales factores de riesgo identificados en la aparición del cáncer cervicouterino son: Clase I: negativa Clase II: atipias Clase III: sospechoso Facultad de Bioanálisis. se sitúa en el cérvix uterino. las células del cérvix se malignizan originando el cáncer. El cáncer cervical se desarrolla en cualquier lugar del cérvix o en la porción inferior del útero. Conización.-El desarrollo del cáncer cervical es gradual y se inicia como una condición pre-cancerosa que se denomina displasia. En el pasado era una de las mayores causas de muerte por cáncer. pero gracias a los nuevos conocimientos sobre la enfermedad y a los avances hechos para detectarlo en su primera etapa. • • Colposcopía: Técnica para estudiar el cérvix o cuello del útero mediante la visión) para examinar las células cervicales más detalladamente con aparatos de aumento especiales. CÁNCER CERVICAL. Región Veracruz. es hoy uno de los más curables. Por lo general. una forma más extensiva de biopsia en la cual se extrae una cuña del cérvix. mientras que un cáncer invasivo suele requerir una histerectomía (extirpación de cérvix y útero y posiblemente de otros órganos de la pelvis. como su nombre indica. porción inferior y estrecha del útero que desemboca en la vagina. . SIGNOS Y SÍNTOMAS Hemorragia anormal Aumento de flujo vaginal Dolor en el pubis Dolor durante el coito Cáncer cervical . El cáncer cervical. La realización de exámenes rutinarios de Papanicolaou puede detectar en forma temprana los cambios celulares en el cuello uterino. es un cáncer de lento crecimiento y si se detecta de manera temprana puede tratarse con éxito. lo que permite una detección a tiempo del cáncer cervical. y en México es el más frecuente.

Las siguientes etapas se usan en la clasificación del cáncer cervicouterino: Etapa 0 o carcinoma in situ El carcinoma in situ es un cáncer en su etapa inicial. Este proceso se conoce como clasificación por etapas. • Descripción de las anormalidades epiteliales de las células escamosas. Las células anormales se encuentran sólo en la primera capa de células que recubren el cuello uterino y no invaden los tejidos más profundos del cuello uterino. etapa IA: una cantidad muy pequeña de cáncer que sólo es visible a través del microscopio se encuentra en el tejido más profundo del cuello uterino etapa IB: una cantidad mayor de cáncer se encuentra en el tejido del cuello uterino Facultad de Bioanálisis. que se reporta así: NIC I: displasia leve NIC II: displasia moderada NIC III: displasia severa – Carcinoma in situ Carcinoma de células escamosas Luego aparece el sistema Bethesda que se reporta así: Normal Normal inflamatorio LIE bajo grado LIE alto grado Células sospechosas de cáncer invasor Un informe citológico debe contener: • Descripción de la muestra como adecuada o inadecuada • Descripción de cambios reparativos o reactivos • Diagnóstico de la flora microbiana como hongos. moderada o severa PAP IV: carcinoma in situ PAP V: carcinoma invasor En el año 1966 R. Región Veracruz. Etapa I El cáncer afecta el cuello uterino. virus. El médico necesita saber la etapa de la enfermedad para planear el tratamiento adecuado. protozoos. Richart propuso adoptar el sistema NIC (Neoplasia Intraepitelial Cervical).Laboratorio de Técnicas Citológicas Clase IV: muy sugestivo de malignidad Clase V: conclusivo de malignidad Con el paso de los años la clasificación evolucionó y el reporte se informaba como: PAP I: negativo PAP II: atipias benignas – Atipias severas o metaplasia escamosa PAP III: displasia ligera. bacterias. se harán más pruebas para determinar si las células cancerosas se han diseminado a otras partes del cuerpo. Etapas del cáncer cervicouterino Una vez detectado (diagnosticado) el cáncer cervicouterino. pero no se ha diseminado a los alrededores. .

000 habitantes. óxidos de hierro. contaminación ambiental y hábitos personales. Para los casos con tumor extirpable quirúrgicamente puede aumentar a 35% a los 5 años. Etapa IV El cáncer se ha diseminado a otras partes del cuerpo. Sin embargo. formaldehído. La mortalidad por cáncer bronquial ha aumentado en las últimas décadas y en Chile se estima en 18 hombres y 5 mujeres por 100. hidrocarburos aromáticos y alifáticos.12-benzoperileno. En el aire contaminado de las grandes ciudades se encuentran además de los irritantes comunes. estos factores Facultad de Bioanálisis. etc tienen mayor incidencia de cáncer bronquial. Los trabajadores de industrias convencionales y nucleares en que se utilizan sustancias químicas para la manufactura de materiales. etapa IIA: el cáncer se ha diseminado fuera del cuello uterino a los dos tercios superiores de la vagina etapa IIB: el cáncer se ha diseminado al tejido alrededor del cuello uterino Etapa III El cáncer se ha diseminado a toda la región pélvica. La sobrevida a un año del diagnóstico es de 20% y a los 5 años de 5%. Las células también pueden haberse diseminado para bloquear los tubos que conectan los riñones a la vejiga (los uréteres). instrumentos. etc. óxido de nitrógeno. ozono. trazas de elementos radiactivos. asbesto. Región Veracruz. Las células cancerosas pueden haberse diseminado a la parte inferior de la vagina. arsénico. cromo. maquinarias. Puede volver al cuello uterino o a otro lugar. PRACTICA No. óxido arsenioso. etapa IVA: el cáncer se ha diseminado a la vejiga o al recto (órganos cercanos al cuello uterino) etapa IVB: el cáncer se ha diseminado a órganos distales como los pulmones Recurrente La enfermedad recurrente significa que el cáncer ha vuelto (reaparecído) después de haber sido tratado. La frecuencia ha aumentado especialmente en mujeres y en estrecha relación con el hábito de fumar. polvo de asbesto. hereditarios. gas de mostaza. Afecta con mayor frecuencia a hombres de edad promedio 60 años. . sales de cromo. berilio. ETIOLOGIA hay que considerar factores ocupacionales. 1. En estas condiciones los trabajadores están expuestos a radiaciones y sustancias tales como uranio. hierro metálico.Laboratorio de Técnicas Citológicas Etapa II El cáncer se ha diseminado a regiones cercanas. sustancias carcinógenas tales como 3. gases de aceite de petróleo. níquel. 10 CANCER BRONQUIAL El cáncer bronquial constituye el 30% de todas las neoplasias del ser humano. compuestos de arsénico. trazas de níquel. pero aún se encuentra en la región pélvica.4benzopireno.

displasia y carcinoma in situ. En la mucosa adyacente al carcinoma in situ hay frecuentemente signos de displasia y metaplasia. El humo del cigarrillo contiene benzopireno y otros cancerígenos. con irregularidades y discontinuidades evidentes de la membrana basal. siendo los más frecuentes los carcinomas. Todo el espesor del epitelio está reemplazado por células atípicas. así como irritantes. según la intensidad de las atipias y la extensión de la distorsión arquitectural del epitelio. espesor irregular. acroleína. En la hiperplasia el epitelio esté engrosado (más de 50 µm). son: Carcinoma epidermoide o escamoso. En la metaplasia epidermoide el epitelio respiratorio normal está reemplazado por uno plano estratificado maduro. Se origina aparentemente en los bronquios mayores y medianos. según la clasificación de la OMS. Histológicamente son carcinomas sólidos con diferenciación córnea (perlas córneas y disqueratosis) o presencia de Facultad de Bioanálisis. moderado y avanzado. displasia en alrededor del 40% y carcinoma in situ en 20-30%. Se distinguen tres grados de displasia: leve. que reemplazan al epitelio respiratorio destruído por los irritantes del humo del cigarrillo. El epitelio bajo y el metaplásico. son más sensibles a la acción de los carcinógenos y la ausencia de factores defensivos mecánicos y funcionales favorece la penetración de los carcinógenos y el contacto de éstos con las células en fase proliferativa. Es más frecuente en el hombre y la sobrevida a los 5 años es de 22%. Es el tipo histológico más frecuente en las biopsias (cerca del 45% de todas las biopsias bronquiales positivas). de células caliciformes o de ambas. en las zonas vecinas se encuentran la hiperplasia y la metaplasia casi en el 90% de los casos. Los tipos histológicos de este grupo. LESIONES PRECURSORAS Se consideran lesiones precursoras (precancerosas) de la mucosa bronquial : hiperplasia de células basales y de células caliciformes. El tiempo de transformación calculado citológicamente para la fase displasia moderadacarcinoma invasor es de 3. . debido a un aumento en el número de células basales. metaplasia epidermoide. Las alteraciones estructurales son estratificación. tales como cianuro. formaldehído y óxido nitroso. Existiría una relación entre daño epitelial y el efecto de los irritantes.Laboratorio de Técnicas Citológicas representan una proporción infinitesimal de causas cuando se comparan con el cigarrillo Está comprobada la relación causal entre humo de cigarrillo y cáncer bronquial (pipa y cigarro también). CLASIFICACIÓN HISTOLÓGICA DEL CÁNCER BRONQUIAL Existe una gran variedad de tumores. habitualmente es un foco pequeño. En el carcinoma in situ las alteraciones citológicas e histológicas mencionadas alcanzan su máxima expresión. Región Veracruz. En casos de carcinoma bronquial manifiesto.-Es el prototipo del carcinoma bronquial. reemplazo total o parcial de las células normales por las atípicas y discontinuidades de la membrana basal.2 años.

La sobrevida a los 5 años es de 2%. El carcinoma bronquíoloalveolar es una variedad de adenocarcinoma. Las células tumorales pueden ser argentafines. Es el tipo más frecuente en no fumadores. Los criterios histológicos son presencia de secreción mucosa. Adenocarcinoma .Corresponde a un tumor en cuya masa coexisten un carcinoma epidermoide y un adenocarcinoma. constituido por células uniformemente grandes (20 µm o más). Región Veracruz. o ambas. estructuras glanduliformes o papilares y vacuolas citoplasmáticas con mucus. . de cromatina fina y en grumos regulares. no presentan ninguno de los caracteres histológicos mencionados en los otros tipos. Sobrevida a los 5 años es de 10%.3% de los casos. núcleos pequeños.-Representa alrededor del 10% de los carcinomas en el hombre y el 50% en las mujeres. Afecta predominantemente a hombres en proporción de 19 : 1. multinodular. tuberculosis y otros granulomas. Se asocia en 45-65% de los casos a cicatrices de infarto. con o sin focos de diferenciación glandular o córnea. Carcinoma indiferenciado de células grandes . Es un tumor constituido por células uniformemente pequeñas (10-15 µm).Laboratorio de Técnicas Citológicas abundantes puentes intercelulares. de núcleos polimorfos y frecuente canibalismo celular. Es predominantemente periférico. Histológicamente. Al momento del diagnóstico mas del 80% tiene extensión extratorácica. Carcinoma combinado adeno-epidermoide o adeno-escamoso . Facultad de Bioanálisis. de escaso citoplasma.-Se presenta como un carcinoma sólido. Es un diagnóstico de exclusión. Carcinoma indiferenciado de células pequeñas. redondos o fusados.4 . que tiende a ser multicéntrico. Constituye el 0. Tiende a ser multifocal en un 20%.-Representa alrededor del 20% de todos los carcinomas bronquiales y el 40% de todas las biopsias positivas. de aspecto bronconeumónico.

Laboratorio de Técnicas Citológicas Facultad de Bioanálisis. Región Veracruz. .

. Región Veracruz.Laboratorio de Técnicas Citológicas Facultad de Bioanálisis.

Éstos afectan con mayor frecuencia ambas mamas. con frecuencia es necesaria una muestra de ese tejido para ser analizada bajo el microscopio. El tipo más frecuente de cáncer mamario nace en los ductos a partir de células ductales. que representan alrededor del 5-10% de todos los casos. bastante poco frecuente. el peso. La edad. un nódulo o retracción del pezón. Cada mama contiene entre 15 y 20 lóbulos. los que poseen secciones menores llamadas lobulillos. . El aspecto de la mama se parece a una inflamación o quemadura de sol. Por otro lado. y de si está comprometida una o las dos mamas. Lo más importante es no confundirlo con una mastitis. el estado menstrual y las condiciones generales de salud también afectan el pronóstico y el tratamiento necesario. que por lo general se presenta en mujeres. en donde no existe una alteración genética heredada que sea responsable de su aparición. del tipo de cáncer de que se trate. La muestra de tejido se puede obtener usando una aguja especial o mediante una pequeña operación. Tiende a avanzar con rapidez. Las probabilidades de mejoría (pronóstico) y la elección del tratamiento dependen del estado de avance de la enfermedad (si se ubica en la mama o se ha extendido fuera de la glándula). Se debe consultar a un especialista si se notan cambios de coloración en la piel de la mama. la mayoría de los casos corresponde al llamado cáncer esporádico de mama. Algunos estudios sugieren que el uso de terapia de sustitución hormonal se asocia a un riesgo un poco mayor de desarrollar cáncer mamario.Laboratorio de Técnicas Citológicas PRACTICA 9 CANCER MAMARIO El cáncer de mama. Una radiografía especialmente diseñada para la mama que es capaz de detectar nódulos que no son palpables. de algunas características de las células tumorales que tienen que ver con la agresividad del tumor. El cáncer inflamatorio de la mama es una clase especial de cáncer de mama.Estadio 0: Es la forma más temprana que puede tener un cáncer de mama. roja y caliente. Dependiendo de las características del nódulo. Se ve inflamada. . procedimiento que se llama biopsia. es una enfermedad en la que células malignas (cancerosas) crecen dentro del tejido mamario. Existen formas hereditarias de cáncer mamario. También hay otros factores relacionados con el cáncer de mama como nuliparidad. Existen dos Facultad de Bioanálisis. Los lóbulos y lobulillos están conectados por conductos llamados ductos. entre otros. Región Veracruz. a diferencia de otros tipos de tumores. primera menstruación precoz y menopaucia tardía. Los que surgen en los lóbulos o lobulillos son llamados cánceres lobulillares.

y existen metástasis en los ganglios de la axila.Estadio I: El tumor se encuentra confinado a la mama y es menor de 2 cms. Esta condición si se limita a la mama puede ser tratada con muy buenos resultados.Estadio II: Incluye las siguientes situaciones: . con o sin metástasis en los ganglios de la axila.El tumor mide menos de 5 cms. sin que aumente la mortalidad. .Estadio III: Se divide en IIIA y IIIB. . Esta reaparición o recurrencia puede ser en la mama.Estadio IV: El cáncer se ha extendido lejos de la mama y la axila. IIIB .El tumor ha invadido la piel o la pared del tórax (músculos o costillas). .El tumor mide más de 5 cms. . Región Veracruz.El tumor mide entre 2 y 5 cms.Laboratorio de Técnicas Citológicas tipos: carcinoma in situ ductal (carcinoma intraductal) y el carcinoma in situ lobulillar. puede afectar a cualquiera de las dos mamas). El cáncer mamario se puede clasificar como: Inicial (in situ): Este comienza en las células que revisten los conductos que conectan las glándulas productoras de leche como el pezón. . o a estructuras vecinas.Cáncer de Mama Recurrente Es cuando el tumor vuelve a aparecer después de haber sido tratado. comprometiendo otros órganos. . Facultad de Bioanálisis. . en alguna otra parte de la pared torácica o en cualquier otra zona del cuerpo. IIIA .Existen metástasis en los ganglios que se encuentran detrás del esternón. pulmones.. . frecuentemente los huesos. y NO existen metástasis en los ganglios de la axila. .El tumor mide menos de 2 cms. . de diámetro máximo. El cáncer que se detecta en esta etapa es curable en más del 95% de los casos. El carcinoma lobulillar in situ NO es realmente un cáncer sino más bien un indicador del riesgo de desarrollarlo (25% de probabilidades de tener un cáncer en un plazo de 25 años. hígado o cerebro. y existen metástasis en los ganglios de la axila que provocan que se adhieran unos con otros. Pero existen metástasis en los ganglios de la axila.El tumor mide más de 5 cms..

se da en el 80% de los casos. aunque no es un verdadero cáncer. que no se ha extendido a otras zonas ni ha producido metástasis. El carcinoma lobular infiltrante (o invasivo) comienza en las glándulas mamarias pero se puede extender y destruir otros tejidos del cuerpo. como ganglios linfáticos distantes. Los tipos de cáncer de mama se clasifican en: El carcinoma ductal in situ se origina en las células de las paredes de los conductos mamarios. Entre el 10% y el 15% de los tumores de mama son de este tipo. Es el más frecuente de los carcinomas de mama. Este carcinoma es más difícil de detectar a través de una mamografía. Una vez que es detectado. Metastásico: Este cáncer se ha diseminado a otras regiones del organismo. Por este motivo esta enfermedad 'premaligna' puede extirparse fácilmente. Es un cáncer muy localizado. . Se suele dar antes de la menopausia. Región Veracruz. La tasa de curación ronda el 100%. Facultad de Bioanálisis. Este tipo de tumor se puede detectar a través de una mamografía. El carcinoma lobular in situ se origina en las glándulas mamarias (o lóbulos) y. hígado o cerebro. El carcinoma ductal infiltrante (o invasivo) es el que se inicia en el conducto mamario pero logra atravesarlo y pasa al tejido adiposo de la mama y luego puede extenderse a otras partes del cuerpo.Laboratorio de Técnicas Citológicas Invasivo: El cáncer se ha diseminado más allá de los conductos y ha llegado al tejido circundante y más tarde a los ganglios linfáticos contiguos. pulmones. es importante que la mujer se realice una mamografía de control al año y varios exámenes clínicos para vigilar el posible desarrollo de cáncer. huesos. aumenta el riesgo de que la mujer pueda desarrollar un cátumor en el futuro.

Estos síntomas se deben al bloqueo que producen las células cancerosas sobre los vasos linfáticos. como la de una naranja. La apariencia de la piel se vuelve gruesa y ahuecada.Laboratorio de Técnicas Citológicas El carcinoma inflamatorio es un cáncer poco común. Región Veracruz. . y pueden aparecer arrugas y protuberancias. Facultad de Bioanálisis. Es agresivo y de rápido crecimiento. Hace enrojecer la piel del seno y aumentar su temperatura. tan sólo representa un 1% del total de los tumores cancerosos de la mama.