UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR CIENCIAS DE LA SALUD

MICROBIOLOGIA ENTOMOLOGIA

CONTROL MICROBIOLGICO DE INSECTOS

PREPARADO POR: HERNANDO DARO SUREZ GOMEZ INGENIERO AGRNOMO MSc ENTOMLOGO

Valledupar 2012

CONTENIDO

I. CONTROL MICROBIOLGICO DE INSECTOS INTRODUCCIN 1.1 HISTORIA DE LA PATOLOGA DE INSECTOS 1.2 DESARROLLO DEL CONTROL MICROBIOLGICO EN COLOMBIA 1.2.1 HONGOS 1.2.2 BACTERIAS 1.2.3 VIRUS 1.2.4 NEMATODOS 1.3 VENTAJAS DEL CONTROL MICROBIOLGICO 1.3.1 ESPECIFICIDAD 1.3.2 MULTIPLICACIN Y DISPERSIN 1.3.3 EFECTOS SECUNDARIOS 1.3.4 CONTROL MS DURADERO 1.3.5 CONTROL ASOCIADO 1.3.6 APLICACIN 1.3.7 POLUCIN Y TOXICIDAD 1.3.8 RESISTENCIA 1.4 DESVENTAJAS DEL CONTROL MICROBIOLGICO 1.4.1 ECONOMA 1.4.2 PLANEACIN DE LAS APLICACIONES 1.4.3 CONDICIONES FAVORABLES 1.4.4 ALMACENAMIENTO 1.4.5 COMERCIAL 2. PENETRACIN DEL PATGENO AL CUERPO DEL INSECTO 2.1 VA TEGUMENTO 2.2 VA RESPIRATORIA 2.3 VA ORAL 3. EFECTO DE PATGENOS EN INSECTOS 3.1 INMUNIDAD Y RESISTENCIA EN INSECTOS 3.1.1 RESISTENCIA O INMUNIDAD NATURAL 3.1.2 INMUNIDAD CELULAR 3.1.2.1 FAGOCITOSIS 3.1.2.2 ENCAPSULACIN 3.1.2.3 NODULACIN 3.1.2.4 COAGULACIN Y CICATRIZACIN 3.1.3 INMUNIDAD HUMORAL 3.1.3.1 PREEXISTENTES O INNATOS 3.1.3.2 ADQUIRIDOS O INDUCIDOS 4. MICROORGANISMOS ASOCIADOS A INSECTOS

6 6 7 8 8 8 9 9 9 9 10 10 11 11 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 13 13 13 14 14 14 15 15 15 15 15 16 16 16 16

4.1 RELACIONES DE MICROORGANISMO INSECTOS 4.1.1 MICROORGANISMO QUE SIRVEN DE ALIMENTO A LOS INSECTOS 4.1.2 MICROORGANISMOS ACTUANDO SOBRE SUSTRATOS QUE SERVIRN DE ALIMENTO A INSECTOS 4.1.3 MICROORGANISMOS CULTIVADOS PARA ALIMENTACIN DE INSECTOS 4.1.4 MICROORGANISMOS CASUALMENTE PRESENTES EN EL INTERIOR O SUPERFICIE DEL CUERPO DEL INSECTO. 4.1.5 INSECTOS COMO VECTORES DE MICROORGANISMO EN ANIMALES Y PLANTAS 4.2 CLASIFICACIN DE LAS ENFERMEDADES 4.2.1 CLASIFICACIN ETIOLGICA 4.2.2 CAUSAS U ORIGEN DE LAS ENFERMEDADES 4.2.2.1 FACTORES FSICOS 4.2.2.2 FACTORES QUMICOS 4.2.2.3 DEFICIENCIAS NUTRICIONALES O METABLICAS 4.3 SINTOMATOLOGA 4.3.1 CLASIFICACIN DE SNTOMAS 4.3.2 CLASIFICACIN DE LOS SIGNOS 4.4 DIAGNOSTICO 4.5 MTODO DE EMPLEO DE LOS MICROORGANISMOS 4.5.1 COLONIZACIN 4.5.2 APLICACIN ENE EL CULTIVO COMO PRODUCTO MICROBIOLGICO 4.5.3 CEBOS 4.5.4 METABLICOS TXICOS 4.5.5 MANEJO INTEGRADO 5 EPIZOOTIOLOGA 5.1 FACTORES BITICOS 5.1.1 CONDICIONES DEL HOSPEDERO 5.1.1.1 DENSIDAD DE INSECTOS SUSCEPTIBLE Y HBITOS 5.1.1.2 HBITOS 5.1.1.3 MIGRACIONES DE INSECTOS 5.1.1.4 PREDISPOSICIN DEL HOSPEDERO 5.1.1.5 HOSPEDEROS INTERMEDIARIOS 5.1.2 CONDICIONES DE LOS PATGENOS 5.1.2.1 VIRULENCIA Y AGRESIVIDAD 5.1.2.2 ALTA CAPACIDAD DE REPRODUCCIN 5.1.2.3 CAPACIDAD DE SOBREVIVENCIA DE LOS PATGENOS 5.1.2.4 DISEMINACIN O DISPERSIN DEL INOCULO 5.1.2.5 VAS DE INFECCIN 5.1.2.6 POTENCIAL DEL INOCULO 5.1.3 INTERACCIONES ENTRE ORGANISMOS 5.1.3.1 INTERACCIN ENTRE PATGENOS 5.2 FACTORES CLIMTICOS 5.2.1 TEMPERATURA

16 16 16 16 17 17 17 17 19 19 19 19 20 20 20 21 21 22 22 22 22 24 24 24 24 24 25 25 26 26 27 27 27 28 28 29 30 30 30

5.2.2 HUMEDAD, LLUVIA Y RADIACIN SOLAR 5.3 FACTORES NO CLIMTICOS 5.3.1 EL FOLLAJE 5.3.2 EL SUELO 5.3.3 EL AGUA 5.3.4 SUSTANCIAS QUMICAS 6 SEGURIDAD EN EL EMPLEO DE PATGENOS 6.1 BACTERIAS 6.2 HONGOS 6.3 VIRUS 6.4 OTROS PATGENOS 7 BIBLIOGRAFA

31 33 33 33 33 33 33 34 34 34 35 35

PRESENTACIN

El siguiente trabajo es una revisin realizada con el inters de disponer de informacin bsica, til en la comprensin y anlisis de la accin desarrollada por los diferentes agentes patgenos involucrados en el control microbiolgico de insectos considerados plagas, particularmente en la regin agrcola de los departamentos del Cesar, Magdalena y del pas. Con el rpido desarrollo de la investigacin Entomolgica en los ltimos aos y la necesidad de buscar nuevas alternativas de control de los insectos plagas, se destaca con mucho xito el control microbiolgico, los agentes involucrados deben hacer parte de un conjunto de prcticas dentro de planes de Manejo Integrado de Plagas, buscando que con su aplicacin resulten en el mantenimiento de una poblacin de plagas a niveles que no provoquen daos econmicos, solo as el control microbiolgico podr alcanzar sus objetivos mximos. Este trabajo contiene informacin bsica para todo los interesados en la materia, especialmente tcnicos de campo, estudiantes de Agronoma, Microbiologa, Biologa, Agricultores y otros.

Hernando Daro Surez Gmez Docente Entomologa Universidad Popular del Cesar

RESUMEN

Los insectos plagas son un problema agrcola, forestal y de salud pblica, su control se realiza con insecticidas qumicos que si bien los eliminan parcial o totalmente, al mismo tiempo causan contaminacin ambiental, con riesgo de sensibilizar a la poblacin a cncer y malformacin congnita (teratognesis) en consecuencia el control microbiolgico es una alternativa ecolgica para evitar el impacto negativo de los insectos plagas, no obstante hasta que no haya un mejor entendimiento de su forma de aplicacin y funcionamiento en muchos pases, su implementacin llevar tiempo, con la esperanza de que los sistemas de educacin y las polticas pblicas favorezcan en esos sitios, formas sanas de Control Microbiolgico en la produccin agrcola y prevencin de enfermedades causadas por insectos plagas y vectores.

I.

CONTROL MICROBIOLGICO DE INSECTOS

1. INTRODUCCIN

La patologa de insectos es la ciencia que estudia las enfermedades de los insectos, considerando la etiologa, sintomatologa y epizootiologa, buscando utilizarlas para el control de plagas o con el objetivo de controlarlas cuando las mismas ocurren en insectos tiles. La enfermedad es una entidad abstracta y no puede ser confundida con el insecto enfermo, ni con el patgeno. Segn Gaumann (1950) Enfermedad es un proceso dinmico en el cual hospedero y patgeno en intima relacin con el medio se influencian mutuamente originando modificaciones morfolgicas y fisiolgicas La patologa de insectos es una ciencia que no existe aisladamente, ella da y recibe ayudas de otras reas del conocimiento como Microbiologa, que ofrece los elementos bsicos para la etiologa y diagnosis; La Morfologa, Anatoma y Fisiologa que dan ayudas para el estudio de la Sintomatologa e Histologa; Agro-meteorologa, Ecologa, Fitotecnia, Bioqumica, Qumico, Fsica, Bioestadstica y Gentica. El control microbiolgico es la meta principal de la Patologa de insectos y representa una rama en el control biolgico de insectos, ese control trata de la utilizacin racional de los patgenos buscando mantener las poblaciones de plagas a niveles no econmicos. Actualmente es grande el avance cientfico de la Patologa de insectos con la repercusin en el campo del control microbiolgico, existen productos comerciales a base de patgenos en el mercado nacional e internacional.

1.1 HISTORIA DE LA PATOLOGA DE INSECTOS

Los Egipcios 2.200 A.C. hicieron algunas referencias a disturbios presentados por abejas. Aristteles (384-322) describi en su libro Historia Animalium, algunas enfermedades de abejas. -Reaumur (1726), determin el primer patgeno de insectos, un hongo del gnero Cordyceps en un Lepidoptera. -Agostino Bassi (1834) , considerado el padre de la Patologa, demostr que el hongo Beauveria bassiana, era el causante de una enfermedad llamada muscarina, importante para el gusano de seda.

-Pasteur (1865) determin que el gusano de seda era atacado por un protozoario Neosema bombycis Control microbiolgico 8

-El primer trabajo sobre el control de plagas con patgenos fue realizado por el ruso Metschnikoff (1879), quien aplico Metarhizium anisopliae para el control de larvas del Coleoptera Anisoplia austriaca. -Una fecha marcante de la Patologa de insectos, fue el descubrimiento del Bacillus thuringiensis por Berliner en 1906. -En 1945, se mont el primer laboratorio de Patologa de insectos en la Universidad de California. -Algunos patlogos de insectos reconocidos en el mundo son: Steinhaus, considerado el patlogo mas brillante en los tiempos actuales, Ignoffo, Shapiro, Kurstak, Roberts, Maddox En Colombia Bustillo y Rodrguez.

1.2

DESARROLLO DEL CONTROL MICROBIOLGICO EN COLOMBIA

1.2.1 HONGOS Los hongos son los principales patgenos de insectos utilizados en el control microbiolgico. Cerca del 80% de las enfermedades de los insectos tienen como agentes etiolgicos los hongos pertenecientes a cerca de 90 gneros y mas de 700 especies. Dentro de los gneros mas importantes se encuentran Metarhizium, Beauveria, Nomuraea, Ascheronia y Entomophtora, Verticillum, Hirsutella, Ascheronia, Aspergillus, Paecilomyces y Cordyceps. Entre los principales hongos encontrados en Colombia se registran Metarhizium spp. en larvas y adultos de chizas de pastos, gusano blanco de la papa, picudo del pltano, palomillas y afidos en papa y afidos en cebada. Paecilomyces spp. en chizas y cucarro en pastos y arroz. Beauveria spp. en gusano blanco de la papa, chizas y larvas del taladrador de la caa de azcar y comedores de follaje de palma africana. Lecanicillium lecanii, en escamas, mosca blanca, lorito verde y afidos en caf, crisantemo y papaya. 1.2.2 BACTERIAS No obstante que se conocen centenas de bacterias asociadas a insectos, son pocas aquellas que poseen caractersticas que permitan su uso en el control de insectos perjudiciales. Las especies de mayor importancia se encuentran en las familias Enterobacteriaceae y Bacillaceae, adems de algunos gneros del orden Pseudomonales. La familia Bacillaceae envuelve dos gneros de alta importancia, Bacillus y Clostridium. Entre los patgenos del gnero Bacillus tenemos las siguientes especies: Bacillus cereus Frqankland y Frankland, Bacillus thuringiensis Berliner, Bacillus thuringiensis var. israelensis (H-14), Bacillus sphaericus Neide, Bacillus larvae White, Bacillus alvei Cheshire y Cheire, Bacillus popilliae y Bacillus lentimorbus

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En Colombia el uso de bacterias se ha generalizado desde hace ms de 30 aos contra plagas de Lepidoptera en algodn, maz, palma africana y otros cultivos. 1.2.3 VIRUS Existen ms de 700 virus que infectan insectos y acaros. Muchos de esas enfermedades ocurren naturalmente sobre insectos de grande importancia agrcola. Los Baculovirus son los mas interesantes por ser altamente especficos para invertebrados adems de presentar buena estabilidad y eficiencia cuando aplicados en el campo para el control de plagas. Los principales grupos de virus son: Virus de la Poliedrosis Nuclear NPV, Virus de la Granulosis GV y Virus de la Poliedrosis Citoplasmtica. Los virus ocupan el primer lugar entre los organismos causantes de enfermedades de insectos por la frecuencia de epizootias que provocan en los estados larvales de Lepidoptera plagas de los cultivos. Entre los virus mas frecuentes estn los de la Poliedrosis nuclear, los de la Poliedrosis citoplasmtica comn en larvas de Lepidoptera nocturnas, Los Entomopox especficos para larvas de cucarrones, los de la desonucleosis y los iridiscentes que atacan principalmente larvas de mosquitos transmisores de enfermedades en humanos. En Colombia se han registrado estos virus en plagas de Lepidoptera de algodn, arroz, soja, maz, palma africana y otros. 1.2.4 NEMATODOS Las especies ms comunes en el pas, son el pos. Steinernema sp. en larvas de gusano blanco y chizas en pasto y papa y el Mermis sp sobre mion de los pastos. En el pas no se ha investigado ampliamente en el campo de la patologa de insectos, solo en la medida que se estimule y financie la investigacin en el rea, se entrene personal y se conformen grupos multidisciplinarios de investigacin e entomopatogenos se podr disponer de resultados para resolver problemas basados en la conservacin del equilibrio de los diferentes agro- ecosistemas. 1.3 VENTAJAS DEL CONTROL MICROBIOLGICO

La utilizacin de patgenos para el control de insectos presenta una serie de ventajas entre las que se destacan las siguientes: 1.3.1 Especificidad

Algunos patgenos como los virus son especficos, otros, no presentan grandes especificidad como en el caso de bacterias, hongos y nematodos, pero son altamente patognicos. Aplicados en dosis elevadas no consiguen provocar alteraciones biolgicas en el agro-ecosistema. No afectan parasitoides, predadores y polinizadores, siendo as, los patgenos presentan una gran ventaja cuando comparados con los qumicos de amplio espectro. Eso sucede con el B.th cuando se aplica para controlar plagas Lepidoptera de la soya, algodn. etc., el hongo M .anisopliae cuando se aplica en caa de azcar ha demostrado selectividad a los

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enemigos naturales. Las ventajas de la accin selectiva de los patgenos en relacin a los qumicos de amplio espectro se puede verificar a travs de un modelo hipottico (Knipling, 1979).

Tabla 1. Estimativa del % de mortalidad natural de los estados de Heliothis sp (Knipling 1979). Poblacin Inicial Progenie potencial ESTADO Huevos Larvas Pupas Adultos % mortalidad acumulada Progenie de adultos 2 (hembra+ macho) 500 (huevos/hembra) Formas Remanentes 175,00 26,25 13,125 5,25 98,90 6 (5,25)

Mortalidad Potencial % 65 85 50 60

La tabla 1 trata de mostrar las ventajas de la accin selectiva de los patgenos en relacin al uso de pesticidas de amplio espectro. Cuando se emplea un patgeno especfico para el control de una plaga, el principal blanco alcanzado es el insecto plaga y el control natural ejecutado por parasitoides, predadores y patgenos se desarrolla normalmente, no siendo afectado. Por otro lado cuando se hace control con insecticidas no selectivos, los agentes naturales de control son eliminados directamente por el insecticida y su accin es perjudicada indirectamente debido a la drstica reduccin del hospedero principal y secundario. Segn la tabla, sin la ocurrencia del los enemigos naturales, se tornara imposible el control del Heliothis sp. 1.3.2 Multiplicacin y dispersin

Los patgenos poseen la capacidad de multiplicarse y dispersarse en el ambiente a travs de individuos de la poblacin. De los focos primarios de la enfermedad, resultan focos secundarios, as mismo, de una generacin a otra, los patgenos pueden permanecer en el rea, en el suelo, o en los cadveres o como sucede con los virus y protozoarios que pueden pasar de una generacin a otra a travs de los huevos de los insectos. La figura 1, muestra el ciclo de las relaciones de Baculovirus con el insecto husped. 1.3.3 Efectos secundarios Adems de la mortalidad directa, los patgenos pueden afectar las generaciones siguientes disminuyendo la oviposicin, viabilidad de huevos y aumentando la sensibilidad de la poblacin a otros agentes biolgicos y qumicos.

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1.3.4 Control ms duradero Despus del establecimiento del patgeno en una determinada rea, la enfermedad asume carcter enzootico, el insecto difcilmente alcanza niveles de dao econmico, eso puede ser ms comn en cultivos perennes o semiperennes.

Figura 1. Ciclo de las relaciones de Baculovirus con el insecto husped.

1.3.5 Control asociado Se puede emplear conjuntamente con insecticidas selectivos o subdosis, buscando accin sinergtica, es por lo tanto un control ms rpido y eficaz de la plaga, sin los inconvenientes de las sobredosis de los insecticidas qumicos. 1.3.6 Aplicacin Loa patgenos pueden aplicarse con los equipos convencionales usados para aplicacin de qumicos

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1.3.7 Polucin y toxicidad. No contaminan el ambiente, no son txicos para el hombre y otros animales. 1.3.8 Resistencia Difcilmente los insectos podrn tornarse resistentes a los patgenos 1.4 1.4.1 DESVENTAJAS DEL CONTROL MICROBIOLGICO Economa

La especificidad puede ser considerada como una desventaja econmica comparada con los qumicos que actan sobre varias plagas al mismo tiempo. Sin embargo existen algunos patgenos que pueden actuar sobre mas de una plaga al mismo tiempo, el Metarhizium anisopliae puede actuar sobre plagas de las hojas y tallo en caa de azcar. 1.4.2 Planeacin de las aplicaciones Las aplicaciones microbiolgicas deben ser planeadas de acuerdo con el periodo de incubacin del patgeno, de modo que el insecto pueda ser eliminado antes de perjudicar econmicamente al cultivo. 1.4.3 Condiciones favorables Determinados patgenos, necesitan de condiciones favorables de temperatura, humedad, luminosidad etc. para que se tornen epizoticos 1.4.4 Almacenamiento Los insecticidas microbiolgicos exigen mayores cuidados en almacenamiento, buscando mantener la viabilidad y patogenicidad. 1.4.5 Comercial Algunos patgenos pueden provocar la adherencia de los insectos muertos a la planta o en los frutos tratados y eso puede afectar el comportamiento del consumidor. 2. PENETRACIN DEL PATGENO AL CUERPO DEL INSECTO

Existe una ciencia llamada Fisiopatologa, que estudia los problemas funcionales relacionados entre rganos, sistemas y aparatos de los insectos cuando son atacados o colonizados por los patgenos; tambin estudia los procesos que conducen a las condiciones patolgicas.

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La penetracin o invasin de los insectos por los patgenos puede ocurrir por diversas vas:

2.1 VA TEGUMENTO La mayora de los hongos, algunas bacterias y algunos grupos de nemtodos son capaces de penetrar por esa va. El tegumento de los insectos es una barrera fsico-qumica eficiente para bacterias, virus, protozoarios y rickettsias; la temperatura, humedad y heridas pueden tornar ineficiente esa barrera. Algunos microorganismos saprofitos solo consiguen penetrar al cuerpo del insecto a travs de heridas en el tegumento. Los hongos patognicos poseen la capacidad de producir enzimas denominadas lipasas, proteasas, amilasas y quitinasas, las cuales conjuntamente con la presin ejercida por el organismo mismo, les permite penetrar el tegumento. La penetracin del patgeno depende bsicamente de su capacidad enzimtica y fsica, de la temperatura y humedad del ambiente ya que la susceptibilidad de una especie de insecto puede ser mayor o menor en funcin de esas condiciones. 2.2 VA RESPIRATORIA Micronidias de hongos y algunas bacterias pueden iniciar la colonizacin del hospedero en las traqueas que normalmente son hmedas o poseen el fluido traqueolar irrigando directamente las clulas. 2.3 VA ORAL Bacterias, virus, protozoarios, rickettsias, algunos hongos y nematodos se sirven de esa va de inoculacin para colonizar el hospedero. La reaccin alcalina o cida del contenido intestinal de los insectos puede ser una de las causas de la seleccin de la flora intestinal de los insectos y de la eliminacin de muchos microorganismos potencialmente patognicos. La reaccin presentada por el tubo digestivo en las especies de insectos puede dar elementos importantes al estudio de la susceptibilidad a los patgenos; un ejemplo lo da el Bacillus cereus y el B. thuringiensis; la primera bacteria produce Lecitinasa en P.H. de 6,6 a 7.4 siendo patognica para larvas de Pristiphora erichsonii un Himenptera plaga de forestales que tiene el P.H. del intestino medio variando entre 7,0 a 8,0 esa bacteria no provoca enfermedad en larvas de Malacosoma disstria un Lepidoptera que presenta P.H. intestinal de 9,2 a 10,3 (alcalino). El B. thuringiensis, secreta la delta-endotoxina que acta en medio alcalino, siendo patognica a M. disstria e infectiva a P. erichsonii. Las enzimas secretadas por las bacterias actan a nivel de membrana peri trfica y epitelio intestinal, tornndolos permeables al paso de microorganismos que atacan la hemolinfa (Septicemia) La mayora de los virus polidricos penetran va oral, esos poliedros posteriormente son disueltos en el medio alcalino del intestino (P.H. 7,5), liberando enseguida los viriones que en contacto con las clulas epiteliales liberan los capsidios, se multiplican sin producir cristales y despus migran para otras clulas o tejidos donde producen infeccin secundaria.

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Los Protozoarios despus de ser ingeridos, penetran en el epitelio intestinal auxiliados por estmulos qumicos, atacan inicialmente el tejido epitelial pasando despus para otros tejidos y rganos. Las larvas y huevos de nematodos son ingeridos por el insecto y posteriormente pasan a alimentarse y a reproducirse en la cavidad del cuerpo del insecto. Otros factores que facilitan la inoculacin va oral son: Condicin nutricional del insecto, disponibilidad y calidad de los alimentos y, variacin de las condiciones fsicas como temperatura, humedad, aireacin etc.

EFECTOS DE PATGENOS EN LOS INSECTOS

Los problemas nutricionales provocan la ocurrencia de enfermedades y las enfermedades pueden provocar disturbios de alimentacin o nutricin. El B. thuringiensis puede provocar problemas digestivos, lo que lleva a la perdida de apetito y atraso del crecimiento. Toxinas de Beauveria bassiana pueden provocar Knock down en hormigas Atta spp. y Musca domestica Pueden provocar parlisis en larvas de coleoptera, los insectos enfermos cambian su comportamiento; algunas virosis provocan cambios de hbitos en larvas. La mayora de los patgenos puede afectar directa o indirectamente el aparato reproductor, provocar esterilidad y reducir la produccin de huevos, pueden destruir el sistema nervioso de los insectos afectando como consecuencia la locomocin, respiracin, circulacin y digestin Los virus y protozoarios encuentran en el tejido graso de los insectos que atacan condiciones para reproducirse, provocando desorganizacin del tejido lo que se refleja directamente en su funcin e indirectamente en el funcionamiento de otros rganos. 3.1 INMUNIDAD Y RESISTENCIA EN INSECTOS

Inmunidad es el estudio de las causas que llevan a los insectos a resistir a los patgenos. La inmunidad y la resistencia estn relacionadas a la capacidad del insecto a resistir a una enfermedad o ser inmune a un agente infeccioso. Los insectos no poseen linfocitos e inmunoglobulinas, siendo por lo tanto su sistema inmunolgico diferente de los vertebrados. La inmunidad puede ser: 3.1.1 Resistencia o inmunidad natural

Es la capacidad del insecto de resistir naturalmente la invasin de un agente patognico. Los factores responsables por ese tipo de resistencia pueden ser fsicos, mecnicos, qumicos (P.H). Ocurre tambin la resistencia Filogentica o inmunidad de las especies. de un modo general los animales no son susceptibles a los microorganismos que atacan las plantas y viceversa. Tambin dentro de la misma especie puede haber individuos resistentes a un determinado patgeno. La resistencia Filogentica puede estar relacionada a la edad, estado de desarrollo, factores, fisiolgicos y mecnicos (tegumento, epitelio, intestinal etc.)

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3.1.2

Inmunidad celular

Despus que el patgeno vence las barreras naturales de los insectos y penetra en la cavidad general, sufre la accin del sistema de defensa celular desencadenado por los hemocitos presentes en la hemolinfa. Los hemocitos tienen varias funciones, las mas importantes es la proteccin de los insectos a las infecciones por los diferentes tipos de patgenos. Las reacciones de defensa ocurren probablemente de dos maneras. En el primer caso los Granulocitos y coagulocitos localizan la partcula extraa y liberan factores de reconocimiento, en el segundo caso esos factores conducen a los plasmatocitos en direccin a las partculas invasoras o heridas. Existen cuatro reacciones de defensa celular en los insectos que son: 3.1.2.1 Fagocitosis Proceso por el cual los hemocitos forman seudpodos y engloban las partculas extraas existentes en la hemolinfa. Los hemocitos ms importantes en la Fagocitosis son los plasmatocitos y granulocitos. Un microorganismo cuando es fagocitado puede ser destruido o puede multiplicarse en el hemocito, provocar su liberacin y retornar al hemocele donde genera una septicemia. Ya se demostr que algunas bacterias pueden ser eliminadas por fagocitosis de la hemolinfa de pupas de Lepidoptera y algunos Blattodea como la cucaracha. 3.1.2.2 Encapsulacion

Se trata de una reaccin donde un conjunto de clulas se aglomeran para cubrir y eliminar grandes estructuras representadas por hongos, bacterias, protozoarios, nematodos y parasitoides. Inicialmente granulocitos y coagulocitos son depositados sobre la superficie del cuerpo extrao, despus, la cpsula va aumentando de espesor, se torna oscura debido a la mecanizacin y posteriormente ocurre una deposicin de plasmatocitos sobre esa estructura que anula la partcula extraa, el proceso puede durar 24 horas. 3.1.2.3 Nodulacion Es el proceso por el cual granulocitos, coagulocitos y plasmatocitos actan rpidamente sobre grandes cantidades de partculas que invaden la hemoloinfa. Inicialmente se forman masas necrticas, melanizadas, compuestas de hemocitos granulares mas bacterias, los cuales posteriormente son cubiertos por plasmatocitos. 3.1.2.4 Coagulacin y cicatrizacin Esos fenmenos ocurren en grados variables en los insectos y sirven para evitar perdida de la hemolinfa y la penetracin de patgenos por las heridas. Inicialmente ocurre la coagulacin en la cual estn presentes los coagulocitos y granulocitos y posteriormente entran en accin los plasmatocitos que participan en la formacin de nueva cutcula.

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3.1.3

INMUNIDAD HUMORAL

La reaccin de defensa humoral es evidentemente no celular y corresponde a la produccin de anticuerpos en los mamferos, siendo su existencia aun muy discutida en los insectos y se acepta como un complemento de la inmunidad celular. Los principales factores de defensa humoral son: 3.1.3.1 Prexistentes o innatos La hemolinfa de algunos insectos contiene la enzima Fenoloxidasa, considerada de importancia primaria en el proceso de encapsulacin. Tambin protenas y poli-fenoles pueden ser depositados en la superficie de patgenos presentes en la hemolinfa y llevan a una menor proliferacin de los mismos. 3.1.3.2 Adquiridos o inducidos La inmunidad puede ser inducida, como sucede en pupas de Lepidoptera de la familia Saturnidae a travs de la inyeccin de bacterias Gram.-negativas y positivas. Ya se constat que la actividad antibacteriana inducida presenta un amplio espectro de actividad. 4 MICROORGANISMOS ASOCIADOS A INSECTOS

4.1

RELACIONES DE MICROORGANISMOS-INSECTOS

4.1.1 Microorganismos que sirven de alimento a los insectos Larvas de mosquitos, necesitan microorganismos vivos o muertos ya que les ofrecen vitaminas y protenas necesarias para el crecimiento. Tambin el metabolismo microbiano provoca la disminucin de la concentracin de oxigeno en los pozos de agua, favoreciendo la eclosin de los huevos de los mosquitos 4.1.2 Microorganismos actuando sobre sustratos que servirn de alimento a insectos

Microorganismos saprofitos actan sobre materia orgnica liberando sustancias que son aprovechadas por insectos (polipptidos, cidos grasos, productos voltiles). Larvas de un Dptera de la familia Antomiidae, plaga de la cebolla, abren galeras en los bulbos, contaminndolos con gran numero de bacterias, all se alimentan de un caldo de tejidos desintegrados y bacterias. 4.1.3 Microorganismos cultivados para alimentacin de insectos

La hormiga Atta sexdens rubropilosa, cultiva el hongo Lentinus atticolus y A. texana esta asociada a Cunninghamella achinulata Interesante que las hormigas mantienen sus cultivos esterilizados con sustancias antibiticas (cido actico) en un medio altamente contaminado como lo es el suelo.

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Comejenes de la familia Macrotermitidae, cultivan el hongo Lenzites trabia que colabora en la descomposicin de la celulosa y lignina. Algunos colepteros de la familia Scolitidae, son conocidos como colepteros de las ambrosas estn asociados al hongo Monilia candida (hongo de la ambrosia). 4.1.4 Microorganismos casualmente presentes en el interior o superficie del cuerpo del insecto Los insectos pueden llevar en la superficie externa del tegumento una serie de microorganismos que reflejan el pasado inmediato del artrpodo. Los insectos que viven en suelos ricos en materia orgnica poseen mayor cantidad. Los microorganismos son mas abundantes en el interior del cuerpo que en la superficie, all se encuentran mejores condiciones, se localizan en canales genitales, ojos, espirculos, traqueas, bolsas gstricas etc. 4.1.5 Insectos como vectores de microorganismos en animales y plantas Los insectos normalmente son resistentes a los Microorganismos que diseminan, sin embargo ocurren algunos excepciones y son afectados por daos directos (en el epitelio intestinal) e indirectos (bloqueo mecnico del aparato digestivo y reduccin de longevidad). Ejemplos de vectores afectados por sus patgenos. Rickettsia prowazekii, agente del tifo epidmico es patognica al vector Pediculus humanus La bacteria Pasteurella pestis afecta a la pulga vector, la Salmonella sp responsable de la gastroenteritis en el hombre afecta a los caros vectores. El virus X del durazno, reduce la longevidad de los grillos vectores. El protozoario Plasmodium sp responsable de la malaria, afecta las hembras de los mosquitos vectores. Puede ocurrir simbiosis mutualista, la cual puede ser extra e intracelular como en el caso de Protozoarios en el tubo digestivo de comejenes y cucarachas. Insectos hospederos de Microorganismos patognicos, es en esta relacin donde ocurren las enfermedades importantes en el control microbiolgico y en los insectos tiles. (Figura 2) 4.2 CLASIFICACION DE LAS ENFERMEDADES De acuerdo a la forma de presentacin las enfermedades pueden ser clasificadas en: 4.2.1 Clasificacin etiolgica

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Comprende las enfermedades no infecciosas e infecciosas, entre estas podemos relacionar, La calcinosis del gusano de seda Bombix mori producida por Beauveria bassiana, La pudricin del barrenador de la caa de azcar Diatraea saccharalis por Bacillus thuringiensis y la pudricin

negra de la larva de la soya Anticarsia gemnatalis por Bculo-virus, micoplasmosis del gusano de seda por micoplasmas. Las no infecciosas no presentan gran importancia a nivel de control microbiolgico en condiciones de campo

Figura 2. Aspergillus sp. en adultos de Atta spp.

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Se dan otras clasificaciones segn el hospedero y la fase de desarrollo Enfermedades de colepteros, de lepidpteros, de larvas, de adultos etc. 4.2.2 Causas u origen de las enfermedades Las enfermedades pueden ser causadas u originadas por los siguientes factores y/o agentes. Factores Fsicos: Fracturas, contusiones, heridas, radiaciones, temperatura Factores Qumicos: Agroqumicos, toxinas producidas por microorganismos Deficiencias Nutricionales o Metablicas: Son las que causan mayor nmero de enfermedades en insectos. Los grupos ms importantes son: hongos, bacterias, virus, protozoarios, nematodos, rickettsias y micoplasmas, que actan aisladamente o asociados. Existen algunas enfermedades que solo ocurren gracias a la presencia de un agente microbiolgico secundario, ese agente secundario acta sobre el insecto creando condiciones favorables para el desarrollo del patgeno. Ejemplo de ese tipo de enfermedad es la pudricin Europea de la cra de las abejas dicha enfermedad es causada por la bacteria Streptoccocus plutn (agente primario) que solo se desarrolla en ambientes de baja oxigenacin producidos por los agentes secundarios Bacillus alvei y Bacterium eurydice. Otro ejemplo lo constituye el nematodo Neoaplectana carpocapsae, siempre asociado con la bacteria Xenorhabdus nematophilus, provoca una enfermedad de doble etiologa en un gran nmero de insectos. 4.3 SINTOMATOLOGIA Es la parte de la patologa de insectos que estudia los sntomas y signos con la finalidad de efectuar el diagnstico de las enfermedades Son considerados sntomas, cualquier aberracin fsica que se manifieste a travs del cambio en la estructura o en el comportamiento del insecto: diarrea, vmito, prdida de apetito, anormalidad en la morfologa de cualquier sistema, malformacin de apndices, tegumentos, cambios de color etc. Son considerados signos: las estructuras del patgeno asociadas al tejido del insecto enfermo, (micelios y esporas de hongos). El cuadro sintomatologico de una enfermedad es el conjunto de sntomas y seales que la caracterizan 4.3.1 CLASIFICACION DE SINTOMAS Los sntomas pueden ser clasificados conforme a su localizacin en relacin al patgeno o con relacin a las alteraciones provocadas en los insectos enfermos. S. primarios, resultan de la accin directa del patgeno sobre un determinado rgano del hospedero S. secundarios: Aparecen en rganos del insecto aparentemente libres del patgeno

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S. fisiolgicos: La presencia de un patgeno atacando un insecto puede inducir modificaciones fisiolgicas importantes tanto en el patgeno como en el insecto S. histolgicos: Alteraciones observadas en las clulas o tejidos de un insecto colonizado por un patgeno S. morfolgicos: Alteraciones que pueden ocurrir en la forma y estructura de los rganos de los insectos S. de comportamiento: Pueden ser reconocidos a travs del comportamiento anormal del insecto. 4.3.2 CLASIFICACION DE LOS SIGNOS Pueden ser considerados signos o seales los productos originados de la interaccin patgeno/insecto o las estructuras del patgeno asociado al insecto enfermo. Olores Vmitos oscuros Heces lechosas Micelios, esporas etc. 4.4 DIAGNOSTICO Actualmente el diagnstico de enfermedades humanas y de animales puede ser realizado con precisin utilizando los sntomas y seales coleccionadas a travs de programas de computador. Los siguientes pasos deben ser considerados en el diagnostico: A. Coleccin de los hechos Historia de la enfermedad Examen microscpico Aislamiento de los patgenos asociados Pruebas de patogenicidad Observacin del curso de la enfermedad Ensayos de factores no microbianos Estudios del hospedero a travs de pruebas bioqumicas y biofsicas. B. Anlisis de los hechos Disposicin de los datos en orden de importancia, mostrando el cuadro sintomatologico Seleccin de las principales caractersticas de la enfermedad Seleccin de todas las enfermedades que presentan las principales caractersticas encontradas, Seleccin de la enfermedad que presente el mayor nmero de caractersticas encontradas y relacionadas en el cuadro sintomatologico Presentar el diagnostico final

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Revisar y confirmar el diagnostico final. Para el diagnostico de las enfermedades, los sntomas de alteraciones fisiolgicas a nivel celular son de poca utilidad. La tabla 2 muestra los cuadros sintomatologicos de dos enfermedades cuando ocurren sobre una plaga determinada.

4.5 METODOS DE EMPLEO DE LOS MICROORGANISMOS Los patgenos y sus subproductos pueden ser empleados usando los siguientes procedimientos: Tabla 2. Cuadros sintomatolgicos observados en dos enfermedades Cuadro Sintomatologico A Sntomas y seales a. actividad reducida b. rpida perdida de apetito c. tegumento oscuro y firme d. salida de lquido marrn por boca y ano e. presencia de bacterias en hemolinfa Diagnostico: Bacteriosis Bacillus thuringiensis Cuadro Sintomatologico B Sntomas y seales a. actividad reducida b. lenta perdida de apetito c. tegumento amarillento y blando llegando a desintegrar se posteriormente d. salida de liquido lechoso por boca y ano e. presencia de poliedros en hemolinfa Diagnostico: Virosis Virus de la Poliedrosis Nuclear

4.5.1

Colonizacin

Es la introduccin de entomopatogenos como agentes naturales de control, se busca que insectos contaminados transfieran el inculo a poblaciones sanas. El tiempo necesario para que el patgeno se establezca es generalmente largo, un ejemplo es la diseminacin de Baculovirus por los adultos de Oryctes rhynocerus, otro ejemplo lo constituye la introduccin de Bacillus popilliae en los EE.UU. para control de Popilla japnica. Las condiciones del cultivo tienen que ser estables lo que favorece las introducciones en campo de plantas perennes y semiperennes. 4.5.2 Aplicacin en el cultivo como producto microbiolgico Igual que insecticidas qumicos, los patgenos pueden ser formulados y aplicados buscando proteccin inmediata al cultivo en ese caso el patgeno es empleado en concentraciones elevadas superiores a 10-13 propagulos/Ha dependiendo del agente patognico. Los productos mas utilizados son a base de B. thuringiensis, Metharizium anisopliae, Beauveria bassiana, Hirsutilla thompsonii. La figura 2, muestra un esquema general para la utilizacin de virus en el control de insectos a partir de un inoculo obtenido en el campo.

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4.5.3 CEBOS Se han utilizados para controlar plagas como Diatraea saccharalis con B. thuringiensis. El protozoario Nosema locustae para controlar langostas. Esporas del hongo M. anisopliae se estn utilizando en formulaciones de aceite contra grillos de la familia Acrididae, abre nuevas posibilidades de control (Brasil, frica, Australia), el biopesticida mata 70-90 % de los adultos tratados dentro de 14-28 das despus de aplicado y no tiene efectos en otros organismos.

4.5.4

METABOLITOS TXICOS

Los patgenos producen toxinas que en el futuro, podrn ser usadas para controlar los insectos plagas, ya se han estudiado parcialmente diversas toxinas de patgenos con accin insecticida, sin embargo no hay posibilidad de ser empleados a corto plazo en el control de plagas.

4.5.5

MANEJO INTEGRADO

Junto a otras medidas, los patgenos pueden ser aplicados en los agroecosistemas en planes de Manejo Integrados de Plagas. El objetivo principal del control Microbiolgico a travs de cualquier procedimiento, es el establecimiento enzootico del patgeno, buscando que las poblacin de insectos plagas dentro de un agro-ecosistema flucte de forma semejante a la poblacin de los mismos insectos en ambientes naturales. 5. EPIZOOTIOLOGIA Es el estudio de los factores que determinan y controlan la dinmica de enfermedades en poblaciones de insectos. L epizootiologa an es muy poco desarrollada, pues existen un nmero muy grande de insectos atacados por Patgenos, siendo estudiados por muy pocos entomopatologos. La Figura 3, muestra la llamada curva Epizotica segn Tanada, (1963) Esta curva puede presentar formas variadas dependiendo del tipo de patgeno, hospedero, agentes de diseminacin, condiciones de clima. Cuando la enfermedad aparece en pocos individuos de una poblacin de insectos sin asumir grandes proporciones, se dice que tiene carcter enzootico y se llama enfermedad enzootica. Las enfermedades que arrasan las poblaciones de insectos anualmente se llaman Epizoticas. Existen Factores que determinan una epizootia y pueden ser clasificados en biticos, climticos y no climticos

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Figura 2. Esquema general para la utilizacin de virus en el control de insectos a partir de inoculo obtenido en el campo o almacenado en nevera.

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5.1

FACTORES BIOTICOS

5.1.1 Condiciones del hospedero Para que ocurra una epizootia son considerados las siguientes condiciones del hospedero. 5.1.1.1 Densidad de insectos susceptibles y hbitos Una poblacin de insectos est compuesta de diversos tipos de individuos, los que pertenecen a las siguientes categoras (Steinhaus, 1949) -Insectos tpicamente enfermos -Insectos atpicamente enfermos -Insectos inmunes no infectados -Insectos susceptibles no infectados -Insectos con infeccin latente -Insectos portadores sanos 5.1.1.2 Hbitos -Insectos de vida libre -Barrenadores de plantas -Insectos chupadores de plantas y animales -Insectos del suelo -Insectos acuticos -Insectos sociales o con hbitos gregario 5.1.1.3 Migraciones de insectos La emigracin, inmigracin y la distribucin del hospedero sobre la planta tambin afectan las epizootias un ejemplo interesante es el que ocurre con las salivitas o miones (Cercopidae) que atacan la caa de azcar, cuando atacados por el M. anisopliae la enfermedad se inicia con la inmigracin de adultos contaminados, que despus de la muerte caen en la base de las hojas superiores, all el hongo esporula sobre los cadveres y las esporas son llevadas por el agua lluvia o el roco para las partes inferiores de la planta, en ese momento las ninfas nuevas que emergieron de los huevos colocados en la base de la planta y en la hojarasca seca del suelo suben por el tallo hacia la parte superior entrando en contacto con un elevado potencial de inculo, adems la espuma liberada por las ninfas crea un ambiente favorable al patgeno, muchas de las ninfas mueren o dan adultos contaminados que diseminan la enfermedad.

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Figura 3. Curva epizotica mostrando el nmero de adultos y ninfas de un Cercopidae, contaminado por M. anisopliae en condiciones de un rea en particular, mostrando diferentes fases de la enfermedad. 5.1.1.4 Predisposicin del hospedero -Condiciones fisiolgicas y morfolgicas -Micro hbitat intestinal favorable a un patgeno y desfavorable a otro - Calidad y cantidad de alimento -Estado de desarrollo del insecto (inicios de cada instar es mas susceptible y final mas resistente). 5.1.1.5 Hospederos intermediarios Debido a la inestabilidad de los campos cultivados es importante la ocurrencia de hospederos intermediarios, adems de favorecer los procesos de variabilidad de los patgenos, sirven para perpetuar el inculo dentro de los agro-ecosistemas. Un ejemplo lo da el M. anisopliae que tiene hospederos preferenciales en caa de azcar y hospederos intermediarios en pastos y otras gramneas, donde tambin estn los mismos insectos plagas. En el caso de los virus, ellos pueden persistir en los insectos hospederos como infecciones subletales en algunos casos pueden ser transmitidos por los huevos. Los parasitoides y predadores pueden transportar virus, los pjaros pueden transportar y diseminar el NPV de Trichoplusia ni. El virus de la granulosis de Pieris rapae puede ser diseminado por

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Cotesia (Apanteles) glomeratus La tabla 3 muestra el comportamiento de transmisin de un virus por un parasitoide. 5.1.2 CONDICIONES DE LOS PATOGENOS Las condiciones de los patgenos son muy importantes para que ocurran las epizootias. La fase favorable del patgeno debe coincidir con el periodo favorable del ambiente y con las condiciones de susceptibilidad del hospedero para el desarrollo de la enfermedad y la ocurrencia de las epizootias Tabla 3 Transmisin del virus de la granulosis de Pieris rapae por Cotesia (Apanteles) glomeratus (adaptado de Levin et al 1978, modificado por Suarez, 2005)) Horas despus infeccin larval 12 24 36 Testigo . 5.1.2.1 VIRULENCIA Y AGRESIVIDAD Apanteles de usados Apanteles con Hospederos virus expuestos Hospederos infectados Transmisin % 16 20 16 10 15 19 13 0 45 51 31 50 33 42 20 0 73 82 64 0

La patogenecidad es la capacidad de un organismo de provocar enfermedad. Los trminos virulencia y agresividad son empleados en patologa de insectos como sinnimos e indican niveles de enfermedades provocadas por los patgenos. Se dice entonces, que un patgeno es virulento cuando incide sobre un gran nmero de individuos produciendo una epizootia. Una raza virulenta es aquella que posee la capacidad de vencer la resistencia especfica del hospedero, conocida por resistencia vertical. La raza agresiva es aquella que afecta la resistencia horizontal del hospedero. Un patgeno que presenta alta virulencia y grande capacidad de diseminacin puede ser llamado Patgeno Epizotico y es sin duda el que debe ser seleccionado para el Control Microbiolgico La virulencia puede ser evaluada en el laboratorio a travs de bioensayos con insectos susceptibles y se puede expresar en ED50 (dosis efectiva media), LD50 (dosis letal media) y LT50 (tiempo letal medio) La virulencia de un patgeno puede ser aumentada a travs de estudios de Ingeniera gentica, provocando mutaciones y cruzamientos de patgenos. (Competencia de lneas mejoradas vs. razas naturales)

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La virulencia de un patgeno tambin se puede aumentar inoculando en una escala de hospederos de resistencia creciente o formulndolos con sustancias estresoras (insecticidas) qumicas compatibles. La virulencia de un patgeno puede ser aumentada por medio de estudios de Ingenieria gentica provocando mutacin y cruzamiento de patgeno. Tambin se puede aumentar la virulencia de los patgenos inoculndolos en una escala de hospederos creciente o formulndolos con sustancias estresoras, qumicas compatibles y con abrasivos. 5.1.2.2 Alta capacidad de reproduccin

Para producir epizootia, el patgeno debe tener alta capacidad de reproduccin. Todos los grupos de patgenos de modo general presentan elevada capacidad de reproduccin lo que los diferencia es la mayor o menor capacidad de diseminacin de los propagulos producidos, es decir, vstagos, estructuras, conidias, esporas etc. La cantidad de propagulo puede variar entre razas de un mismo patgeno, tambin depende del tamao del insecto. 5.1.2.3 Capacidad de sobrevivencia del los patgenos La capacidad de sobre-vivencia es variable en los diferentes grupos de patgenos y hasta entre las razas. Los patgenos pueden vivir asociados a insectos parasitoides, predadores y a otros animales, adems poseen fases de resistencia dentro de sus ciclos biolgicos. En el Bacillus thuringiensis, las esporas son mas resistentes que la clulas vegetativas. En el NPV, los poliedros son ms resistentes que las formas flageladas. El genero Entomopthora posee en su ciclo de vida la fase de Azigosporos (Clamidosporos) que son estructuras de resistencia responsables por el paso a travs de los inviernos rigurosos y de otras condiciones inadecuadas al hongo. 5.1.2.4 Diseminacin o dispersin del inoculo La alta capacidad de diseminacin de los propagulos producidos es una caracterstica favorable a la ocurrencia de las epizootias, el patgeno puede ser virulento pero si no tiene capacidad de dispersin difcilmente conseguir provocar epizootia en poblaciones de insectos. El B. thuringiensis es virulento para larvas de Lepidoptera pero difcilmente en condiciones naturales provoca epizootias. La mayora de los entomopatogenos son incapaces de alcanzar a los insectos hospederos por sus propios medios. Los agentes fsicos de diseminacin son muy importantes y son representados por: viento, agua, lluvia, roco etc. Los propagulos de los hongos B. bassiana, N. rileyi, M. anisopliae, Entomopthora spp. y otros son comnmente diseminados por los vientos. El agua lluvia adems de diseminar las conidias de

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hongos puede a travs de salpicaduras, llevar poliedros de virus de una planta a otra o del suelo para las plantas. De la misma manera clulas bacterianas, esporas de bacterias, protozoarios y larvas de nematodos tienen como vehculo importante ese medio fsico. Dentro de los agentes bioticos de diseminacin se citan los hospederos primarios y secundarios sanos y enfermos, insectos parasitoides y predadores, mamferos aves y el propio hombre. 5.1.2.5 Vas de infeccin

Es muy importante el conocimiento de las vas de infeccin de los patgenos. Normalmente los hongos penetran va tegumento a travs de actividad enzimtico. Los puntos frgiles para penetracin son loas regiones nter-segmntales del cuerpo , el tarso y los espirculos (por all penetran los micropropagulos existentes en suspensin en el aire o debido al contacto directo con el substrato contaminado). La infeccin oral es comn y casi obligatoria en los casos de virus, bacterias, nematodos y protozoarios, junto con el alimento los insectos ingieren las partculas infectivas. Todos los patgenos que consiguen contaminar hospederos por va oral, son menos susceptibles a las variaciones de clima y por tanto potencialmente epizoticos. La infeccin transovarica ocurre particularmente con virus y protozoarios, hembras enfermas dan huevos contaminados Infeccin debido a picadas de parasitoides y predadores, eso ocurre con el virus de la granulosis que es diseminado por Cotesia sp. en plagas forestales. Contaminacin indirecta, se da en el caso de la bacteria Xenorhabdus nematophilus que es ingerida por los insectos junto con larvas del nematodo Neoaplactena carpocapsae, provocando septicemia en el hospedero, posteriormente en asocio con el nematodo, provoca la muerte del insecto. 5.1.2.6 POTENCIAL DEL INOCULO Para que halla epizootia, es necesario un Potencial de Inoculo mnimo. El. Potencial. de Inoculo es el nmero de propagulos viables sobre los rganos susceptibles de los hospederos capaz de iniciar el proceso de enfermedad. En los campos cultivados, la cantidad de inculo va aumentando a medida que el nmero de insectos aumenta como consecuencia del nmero creciente de insectos enfermos. De acuerdo a Kish and Allen, (1976) la produccin de conidias de Neumorea rileyi por insecto puede ser obtenida a travs de la ecuacin Y = -0,07544+0,00586X+0,0000259X2 Donde, Y = numero de conidias 10 X = mm de rea superficial del hospedero

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La figura 4, muestra los niveles de infeccin relacionados a la densidad de conidias (Ignoffo et al, 1975)

Figura 4. Nivel de infeccin de Trichoplusia ni por N. rileyi como una funcin de la densidad de inculo por unidad de rea foliar.

La tabla 5 representa la importancia del potencial de inoculo mostrando la mortalidad acumulada del picudo del algodonero Anthonomus grandis por el hongo B. bassiana. El menor potencial de inoculo 9x10 fue incapaz de provocar mortalidad hasta 6 das depuse de inoculado. Estos datos sugieren que realmente existe un nmero mnimo de estructuras del patgeno necesarias para desencadenar la enfermedad en un insecto o en una poblacin. 5.1.3 INTERACCIONES ENTRE ORGANISMOS La presencia simultanea de patgenos, parasitoides, predadores y plagas en un agro-ecosistema puede llevar a que ocurran diferentes tipos de interacciones entre los organismos. Las interacciones pueden ser de tres tipos

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Sinergismo: Aumento de la virulencia del patgeno o de la efectividad del parasitoide. Antagonismo: Disminucin de la virulencia del patgeno o de la efectividad del parasitoide. Coexistencia: La eficiencia de los elementos de la combinacin no es afectada. 5.1.3.1 Interaccin entre patgenos Ya se conoce que el Bacillus thuringiensis es capaz de inducir elevadas mortalidades en insectos, cuando se asocian sus principales txicos representadas por esporas, cristal txico y clulas vegetativas. La asociacin de B. thuringiensis con otras bacteria como pseudomonas, serratia. enterobacter, adems de otros, no han tenido efectos sinrgicos o anatmicos, prevaleciendo siempre la accin del B. thuringiensis. Se han encontrado resultados prometedores, pero faltan muchos estudios.

Tabla 5. Porcentaje de mortalidad de A. grandis bajo diferentes potenciales de inculos de B. bassiana Conidias/insecto Das depuse de Inoculacin 9x10 8x10- 5,5x10-1/ 5 4 0,0 4,0 4,0 6 0,0 10,0 10,0 8 2,0 12,0 14,0 10 4,0 16,0 30,0 12 8,0 22,0 50,0 14 8,0 28,0 60,0 30 38,0 62.0 96,0 (LT50) 33,9 das 25,1 das 13,5 das

5.2 FACTORES CLIMATICOS La accin de los factores climticos es ms pronunciada durante las fases de diseminacin, germinacin y penetracin del patgeno, que durante la fase de colonizacin, de lo que se deduce, que la presencia del patgeno sobre el hospedero susceptible no es condicin suficiente por que halla colonizacin. Cada especie de patgeno debe ser influenciada de modo diferente frente a los factores ambientales. 5.2.1 Temperatura. Es uno de los factores de gran importancia y acta sobre los patgenos afectando principalmente su estabilidad, aplicacin y eficiencia en el campo de un modo general,

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los patgenos no poseen sistemas que regulan la temperatura, siendo por lo tanto afectados por ella. La figura 5, muestra la escala de temperatura para diversos organismos La tabla 8 presenta los efectos de baja temperatura sobre virus. 5.2.2 Humedad, lluvia y radiacin solar

La humedad es esencial, siendo importante para la fase de germinacin y penetracin y es limitante para la reproduccin de algunos patgenos. La humedad influye en la espesura de la camada de cera de los insectos tornndolos mas o menos resistentes a los patgenos, siendo as la humedad puede ser considerada mas importante que la temperatura, pues sta afecta principalmente la velocidad con que el proceso enfermedad se desarrolla.

Figura 5. Escala de temperatura para insectos y patgenos.

La lluvia disemina, fuertes lluvias pueden ser perjudiciales a patgenos, pues no permite la epizootia. La radiacin puede ser estimulante, no afectar o ser perjudicial a los patgenos.

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Tabla. 8 Efecto del almacenamiento a baja temperatura sobre la actividad de los virus (Jacques, 1977, citando varios autores).

VIRUS

HOSPEDERO

NVP ampollas NPV cadveres NPV suspensin NPV suspensin GP polvo GP suspensin Virus polvo

Bombix mori N. hercyniae L. fiscellaria Trichoplusia ni P. brassicae P. rapae P. citri

TEMPERATURA AMACENAMIENTO (C) 4 4 4 4 0 4 4

PERIODO ALMACENAMIENTO (aos) 20 6 6 4 4 4 6,5

PERDIDA ACTIVIDAD % -50 -25 +90 -10 -10 -10 -10

Tabla 9. Efecto de almacenamiento sobre esporas de M. anisopliae (varias condiciones) (Roberts y Campbell, 1977).

CONDICIONES -20 en aire CO2 N2 4C en aire CO2 N2 Laboratorio Puro Formulado Cmara frigorfica Puro Formulado Freezer-3C Puro Formulado

TIEMPO PRESERVADO 4 aos 4 4 4 180 das 240 180 das +287- 379 das 420 das 420 das

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La tabla 10 muestra la accin de la radiacin solar sobre una bacteria. Tabla 10. Inactivacin del B. thuringiensis en presencia de la radiacin solar (Cantwell and Franklin, 1966). Tiempo exposicin (minutos) 10 20 30 60 Inactivacin sol (%) 22,6 38,8 50,4 82,1 Inactivacin sombra (%) 9,5 13,7 23,7 -

5.3 FACTORES NO CLIMATICOS 5.3.1 El follaje El follaje de la plantas es ideal para los virus , las plagas susceptibles a los virus tienen que comer las hojas para que se inicie el proceso de enfermedad. 5.3.2 El suelo

Se constituye en un ambiente favorable para el desarrollo y preservacin de la mayora de patgenos, sin duda se constituye en un gran reservorio de virus de insectos, proporcionando inculo a travs del goteo de lluvia y partculas del mismo suelo. 5.3.3 Agua El agua pura es un medio en el que los virus son razonablemente estables, aunque el PH natural y la concentracin de sales pueden alterar sta estabilidad. 5.3.4 Sustancias qumicas

La susceptibilidad de los diversos grupos de patgenos a los agroqumicos varia ampliamente de acuerdo con la especie de patgeno, qumicos y dosis. Sustancias qumicas (insecticidas, herbicidas) permiten las mezclas con diferentes patgenos.

6.

SEGURIDAD EN EL EMPLEO DE PATGENOS

Los patgenos de insectos son organismos vivos que ocurren naturalmente sobre artrpodos a densidades variables en funcin de la poca del ao y del nivel de la enfermedad que provocan. Si en una hectrea de soya con 400.000 plantas tuviremos cinco larvas grandes atacadas por Nomuraea rileyi por planta podemos estimar un total de 2000.000 larvas produciendo cada una 3x10 conidias, resultando un inculo natural de 6x10-15 poliedros/Ha, la dosis que se recomienda comnmente para control de 80-90 % de las larvas, est en torno de 10-11 poliedros/Ha. o sea

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40.000 veces menos que la dosis natural. Es as, como la cantidad de patgeno que existe naturalmente en el ambiente supera en mucho la cantidad de patgeno que es aplicada.. Parece evidente que los patgenos producidos naturalmente no deben afectar cualquier elemento del ecosistema, pero las cosas no son tan simples cuando esos patgenos son incorrectamente manipulados por el hombre y tienden a acumular los problemas de contaminacin, variaciones y mutaciones genticas en el material producido y aplicado. Tampoco se conoce sobre los efectos indeseables que las aplicaciones continuas de patgenos pueden a largo plazo, provocar sobre la cadena alimenticia y en especial sobre las poblaciones de parasitoides obligatorios. 6.1 BACTERIAS Los principales bacterias entomopatognicas representadas por B. thuringiensis, B. popilliae, B. moritai y B. sphaericus, son considerados como razonablemente seguros en relacin a los mamferos. Sin embargo an es discutible la seguridad de B. thuringiensis, existiendo serias restricciones en su empleo, debido a la produccin de la B-exotoxina, txica para mamferos y aves. Con relacin a B. popilliae, la principal causa de la resistencia de los vertebrados es probablemente la temperatura inadecuada de su cuerpo. Tambin se conoce que esa bacteria pasa ilesa a travs del tubo digestivo de los animales. No han sido constatados alergias en personas que manipulan la bacteria. B. moritai, es tenido como un patgeno seguro, B. sphaericus, necesita ser mas estudiada bajo stos aspectos. Con relacin a las especies potencialmente importantes en el control microbiolgico representados por Pseudomonas aeruginosa y Serratia marcescens,, existen serias implicaciones de esos agentes en infecciones respiratorias, urinarias, intestinales y la ocurrencia de septicemia en el hombre. Por esos motivos esos agentes deben ser manoseados con mucho cuidado. 6.2 HONGOS

Los hongos entomopatogenos no son potencialmente perjudiciales al hombre y otros animales de sangre caliente. Difcilmente los hongos se desarrollan en la faja de temperatura de los diferentes mamferos que es de 34,5 a 44,0C. Pruebas con cerdos, conejos y ratones demostraron que los animales no presentan anormalidades patolgicos, clnicos o histolgicos. Una excepcin la constituye el hongo Conidiobolus coronatus, (Entomophtora coronata) que consigue crecer a 37,0C y se considera patognica para mamferos, por lo que su empleo en el control microbiolgico se debe evitar. Tambin, ya se observaron problemas alrgicos en personas debido al contacto con los hongos Beauveria, Metarhizium, Entomophtora e Hirsutella. En algunos pases se han observado formulaciones de M. anisopliae contaminadas con Aspergillus flavus lo que produce una micotoxina que es considerada cancergena para animales.

Control microbiolgico 6.3 VIRUS

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Los virus que atacan a los insectos naturalmente, son considerados como especficos y seguros para el hombre y vertebrados que poseen acidez en el tubo digestivo. Esta seguridad puede ser afectada debido a los problemas que podran ocurrir en la produccin masiva de stos agentes. Dentro de esos problemas se citan variaciones genticas del patgeno y contaminaciones por bacterias potencialmente peligrosas para el hombre tal como Salmonella spp y otras. Existe tambin un riesgo terico de que el DNA de los Baculovirus acte .sobre el genoma de los mamferos. 6.4 OTROS PATOGENOS

Los Protozoarios y Nematodos son los otros grupos comnmente empleados en el control microbiolgico cuyos estudios de seguridad no son muy frecuentes, pero no se tiene conocimiento de problemas provocados en vertebrados por la utilizacin de las especies ms comunes.

7. BIBLIOGRAFIA ALVES, B.S. 1986 Controle Microbiano de Insectos. Editora Manole Ltda. Sao Paulo (Brasil) 407p. DOBERSKY, J.W. 1981. Comparative laboratory studies on three fungal pathogens of the Beetle Scolytus . Effect of temperature and humidity on infection by Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae and Paecylomices farinosus. Journal of invertebrate Patology. New York 37: 195-200 GAUMANN, E. 1950 Principles of plant infection London- Corshy Lock and Son Ltda 543p. IGNOFFO, C.M. et al 1979. Laboratory of field studies with Boverin a microinsecticide preparation of B. bassiana produced in the Soviet Union Journal Of Econ. Entomol. College Park. JAQUES, R.P. 1977 Hability of entomopathogenic viruses. Misc. Publ. Entomol. Soc. Am. College Park. 10():89-116 KAYA, H.M. and HARA, H. 1981 Susceptibility of various species of Lepidoptera pupae to the entomogenous nematode Neoaplectana carpocapsae J. Nematology. Florida 13: 291-294 KUNO, G; MULLET R y HERNANDEZ, M. 1982 Patologa de Insectos. Centro de Publicaciones Divisin de Ciencias Universidad del Valle, Colombia 212p. KNIPLING, E.F. 1979 The basic principles of insect suppression and management. Agriculture handbook N 512 USDA pp192-218. RODRIGUEZ, D.A. 1990 Uso de patgenos para el manejo de insectos plagas. REVISTA Colombia Ciencia y Tecnologa Vol. 8 (3): 4-31 Jul-Sept. Bogota. Colombia.

Control microbiolgico

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