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1. Introducción 2. Evolucion de la enzimologia 3. Las enzimas 4. Importancia biomedica de las enzimas 5. Caracteristicas de las enzimas 6. La estructura enzimática 7.

Naturaleza química de las enzimas 8. Composición química de las enzimas 9. Nomenclatura y clasificacion de las enzimas 10.Partes del sistema enzimatico 11. Coenzima y grupos prostéticos 12. Activadores 13. Las enzimas son catalizadores estereoespecíficos 14. Especificidad enzimática 15. Preparación y purificación de las enzimas 16. Isoenzimas 17. Cinetica de las reacciones enzimaticas 18. Relaciones entre la enzima y el sustrato. 19. Accion de inhibidores. 20. Inhibicion por competencia 21. Inhibicion por no competencia 22. Antagonismo metaboloco (antimetabolitos) 23. Inhibicion alosterica 24. Enzimas: regulacion de actividades 25. Bibliografia 5.1 Función de las enzimas Las enzimas son proteínas que catalizan todas las reacciones bioquímicas. Además de su importancia como catalizadores biológicos, tienen muchos usos médicos y comerciales. Un catalizador es una sustancia que disminuye la energía de activación de una reacción química. Al disminuir la energía de activación, se incrementa la velocidad de la reacción. La mayoría de las reacciones de los sistemas vivos son reversibles, es decir, que en ellas se establece el equilibrio químico. Por lo tanto, las enzimas aceleran la formación de equilibrio químico, pero no afectan las concentraciones finales del equilibrio.

5.2 Clasificación de las enzimas

5.2.1 Clasificación de las enzimas de acuerdo a su complejidad De acuerdo a su complejidad las enzimas se clasifican como:

En las proteínas conjugadas podemos distinguir dos partes:
 

Apoenzima: Es la parte polipeptídica de la enzima. Cofactor: Es la parte no proteica de la enzima.

La combinación de la apoenzima y el cofactor forman la holoenzima. Los cofactores pueden ser: *Iones metálicos: Favorecen la actividad catalítica general de la enzima, si no están presentes, la enzima no actúa. Estos iones metálicos se denominan activadores. Ejemplos: Fe2+, Mg2+, Cu2+, K+, Na+ y Zn2+ *La mayoría de los otros cofactores son coenzimas las cuales generalmente son compuestos orgánicos de bajo peso molecular, por ejemplo, las vitaminas del complejo “B” son coenzimas que se requieren para una respiración celular adecuada. Regreso al incio de enzimas 5.2.2 Clasificación de las enzimas según su actividad.-

Tipo de enzimas Hidrolasas

Isomerasas Ligasas Liasas

Oxidorreductasas

Tansferasas

Actividad Catalizan reacciones de hidrólisis. Rompen las biomoléculas con moléculas de agua. A este tipo pertenecen las enzimas digestivas. Catalizan las reacciones en las cuales un isómero se transforma en otro, es decir, reacciones de isomerización. Catalizan la unión de moléculas. Catalizan las reacciones de adición de enlaces o eliminación, para producir dobles enlaces. Catalizan reacciones de óxido-reducción. Facilitan la transferencia de electrones de una molécula a otra. Ejemplo; la glucosa, oxidasa cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. Catalizan la transferencia de un grupo de una sustancia a otra. Ejemplo: la transmetilasa es una enzima que cataliza la transferencia de un grupo metilo de una molécula a otra.

Regreso al incio de enzimas

5.3 Actividad enzimática La sustancia sobre la cual actúa una enzima se llama sustrato. Los sustratos son específicos para cada enzima: La sacarosa es el sustrato de la sacarasa que actúa rompiéndola en sus componentes. Las enzimas actúan de acuerdo con la siguiente secuencia: La enzima (E) y el sustrato (S) se combinan para formar un complejo intermedio enzima sustrato (ES), el cual se descompone formando un producto y regenerando la enzima.

El grado de especificidad de las enzimas es muy alto, pueden distinguir incluso entre diferentes tipos de isómeros. Se cree que la especificidad de la enzima es debido a la forma particular de una pequeña parte conocida como sitio activo, la cual se fija a la contraparte complementaria en el sustrato. Regreso al incio de enzimas

5.4 Factores que afectan la actividad enzimática.Concentración del sustrato.- A mayor concentración del sustrato, a una concentración fija de la enzima se obtiene la velocidad máxima. Después de que se alcanza esta velocidad, un aumento en la concentración del sustrato no tiene efecto en la velocidad de la reacción. Concentración de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato disponible, un aumento en la concentración de la enzima aumenta la velocidad enzimática hacia cierto límite.

Presencia de cofactores. pH. o lugar donde se adhiere el sustrato. la enzima pierde su actividad. 2. y donde se realiza la reacción. . hasta ciertos límites.Muchas enzimas dependen de los cofactores.Un incremento de 10°C duplica la velocidad de reacción. excepto las enzimas del estómago cuyo pH óptimo es ácido.El pH óptimo de la actividad enzimática es 7. Una enzima y un sustrato no llegan a adherirse si sus formas no encajan con exactitud. En su estructura globular. químicamente son proteínas Como catalizadores.. El calor es un factor que desnaturaliza las proteínas por lo tanto si la temperatura se eleva demasiada. constituido por una serie de aminoácidos que interaccionan con el sustrato. Acción De Enzimas La acción enzimática se caracteriza por la formación de un complejo que representa el estado de transición. sino que aceleran su consecución. Las enzimas son grandes proteínas que aceleran las reacciones químicas. Lectura 4. Los enzimas son catalizadores muy potentes y eficaces. el centro activo. que aportan un pequeño grupo de aminoácidos para formar el sitio activo. la concentración del cofactor debe ser igual o mayor que la concentración de la enzima para obtener una actividad catalítica máxima. los enzimas actúan en pequeña cantidad y se recuperan indefinidamente.Temperatura. El sustrato se une al enzima a través de numerosas interacciones débiles como son: puentes de hidrógeno. Para las enzimas que tienen cofactores. se entrelazan y se pliegan una o más cadenas polipeptídicas.1 Lea el texto titulado "Enzimas de fuerza industrial" y realice un cuadro sinóptico que muestre los usos de las enzimas indicados en la lectura. sean activadores o coenzimas para funcionar adecuadamente. no modifican el sentido de los equilibrios químicos. Envíe su trabajo al correo electrónico del profesor. en un lugar específico .. Este centro es una pequeña porción del enzima.. No llevan a cabo reacciones que sean energéticamente desfavorables. electrostáticas. etc. hidrófobas.

Extrayendo dos átomos de hidrógeno. . cetonas. etc. que fue propuesto en 1867 por el fisiólogo alemán Wilhelm Kühne (1837-1900). Hidrolasas (Reacciones de hidrólisis) 4. fabricando también el ATP. Liasas (Adicisn a los dobles enlaces) 5. glucosilo.Con su acción. DPNH2. También este grupo de enzimas actúan sobre los sustratos mas diversos. Óxido-reductasas ( Reacciones de oxido-reduccisn).Oxido-reductasas: Son las enzimas relacionadas con las oxidaciones y las reducciones biológicas que intervienen de modo fundamental en los procesos de respiración y fermentación. En esta clase se encuentran las siguientes subclases principales: Deshidrogenasas y oxidasas. Isomerasas (Reacciones de isomerizacisn) 6. El hidrógeno y el oxidrilo resultantes de la hidrólisis se unen respectivamente a las dos moléculas obtenidas por la ruptura de los mencionados enlaces. citocromos. Simultáneamente se obtiene la hidrólisis (reacción de un compuesto con el agua)de una molécula de agua. Transferasas (Transferencia de grupos funcionales) 3. como receptores. La acción catalítica se expresa en la escisión de los enlaces entre átomos de carbono y nitrógeno (C-Ni) o carbono oxigeno (C-O). alcoholes. oxácidos aldehidos. 3. En la actualidad los tipos de enzimas identificados son más de 2.Las Transferasas: Estas enzimas catalizan la transferencia de una parte de la molécula (dadora) a otra (aceptora). como son la de glicógeno. El nombre de enzima. aminoácidos. sulfató. Las oxidoreductasas son importantes a nivel de algunas cadenas metabólicas.Las Hidrolasas: Esta clase de enzimas actúan normalmente sobre las grandes moléculas del protoplasma.000. Ligasas (Formacisn de enlaces. Clasificación de las enzimas 1. etc. que significa 'en fermento'. 2. Son más de un centenar de enzimas en cuyos sistemas actúan como donadores. 3. y muchos otros compuestos y. verdadero almacén de energía. sulfúrico. como la escisión enzimática de la glucosa. Su clasificación se basa en la naturaleza química del sustrato atacado y en la del aceptor. aldehído. 2. catalizan las oxidaciones de muchas moléculas orgánicas presentes en el protoplasma. La clasificación de estas enzimas se realiza en función del tipo de enlace químico sobre el que actúan. las grasas y las proteínas. regulan la velocidad de muchas reacciones químicas implicadas en este proceso. TPNH2. transfiriendo grupos metilo. las propias coenzimas DPN y TPN. los átomos de hidrógeno tomados del sustrato son cedidos a algún captor. con aporte de ATP) 1. O2. amina. deriva de la frase griega en zyme.

es decir. lo cual sucede simultáneamente a la degradación del ATP. estéricos y glucosídicos. Son las enzimas que catalizan diversos tipos de isomerización. 6. etc. en otros casos cambian de lugar dobles ligaduras.Las Liasas: Estas enzimas escinden (raramente construyen) enlaces entre átomos de carbono. como en el caso de la triosa fosfato isomerasa. como transformar compuestos aldehídos en compuestos cetona. Las primeras son en realidad pares de enzimas específicas para los dos isómeros y que producen un solo producto común.Las Ligasas: Es un grupo de enzimas que permite la unión de dos moléculas. Por fin las transferasas intramoleculares (o mutasas) pueden facilitar el traspaso de grupos acilo. 5. Algunas liasa actúan sobre compuestos orgánicos fosforados muy tóxicos. que. Estas ultimas desarrollan una oxidorreducción dentro de la propia molécula (oxido reductasa intramoleculares)sobre la que actúan. los hidroxácidos. en rigor. quitando hidrógeno. etc. o bien entre carbono y oxigeno. Los grupos separados de las moléculas que de sustrato son casi el agua. Desempeñan un papel esencial en los procesos digestivos. puesto que hidrolizan enlaces pépticos. otros separan el carbono de numerosos sustratos. a algunos grupos y reduciendo otros.Las isomerasas: Transforman ciertas sustancias en otras isómeras. como la lisolecitina acil mutasa que transforma la 2 – lisolecitina en 3 – lisolecitina. Se dividen en varias subclases. y carbono y azufre.A este grupo pertenecen proteínas muy conocidas: la pepsina. o viceversa. sea óptica. Las racemasas y las epimerasas actúan en la racemización de los aminoácidos y en la epimerización de los azúcares. libera la energía necesaria para llevar a cabo la unión de las . de posición. y el amoniaco. Algunas isomerasa actúan realizando inversiones muy complejas. y la tripsina y la quimiotripsina. presente en el proceso de la glucólisis. el anhídrido carbónico. presente en el jugo gástrico. actúan ampliamente sobre los aminoácidos. geométrica. Las isomerasas cis – trans modifican la configuración geométrica a nivel de un doble ligadura. 4. como en la (tabla) isopentenil fosfato isomerasa. Los óxidos – reductasas intramoleculares catalizan la interconversión de aldosas y cetosas. de idéntica formula empírica pero con distinto desarrollo. carbono y nitrógeno. escindiéndolos. o fosforilo de una parte a otra de la molécula. hidratos de carbono y sus derivados. indispensable en el cambio biosinético del escualeno y el colesterol. segregada por el páncreas. oxidando un grupo CHOH y reduciendo al mismo tiempo al C = O vecino. funcional.

que forma acetil coenzima. La parte adenosina de la molécula está constituida por adenina. una fosfocinasa. Los dos puentes entre los grupos fosfato son uniones de alta energía. Importancia del ATP (Trifosfato de adenosina) Es importante ya que es la principal fuente de energía de los seres vivos y se alimenta de casi todas las actividades celulares. la síntesis de proteínas. para fosforilar a una sustancia A (A + ATP A . las ácido-tiol ligasas. Se trata de un grupo de enzimas muy importantes y recién conocidas. 4. entre ellas el movimiento muscular.primeras. A sintetasa. Composición Del ATP El ATP se comporta como una coenzima. son relativamente débiles y cuando las enzimas los rompen ceden su energía con facilidad. con otra. pues antes se pensaba que este efecto se llevaba a cabo por la acción conjunta de dos enzimas. un compuesto que contiene nitrógeno (también uno de los componentes principales de los genes) y ribosa. está formada por un átomo de fósforo y cuatro de oxígeno y el conjunto está unido a la ribosa a través de uno de estos últimos. Con la liberación del grupo fosfato del final se obtiene siete kilocalorías (o calorías en el lenguaje común) de energía . Se origina por el metabolismo de los alimentos en unos orgánulos especiales de la célula llamados mitocondrias. Esta molécula se encuentra en todos los seres vivos y constituye la fuente principal de energía utilizable por las células para realizar sus actividades. las ligasas ácido – amoniaco (glutamina sintetasa). etc. y que forman uniones CO. Cada unidad de los tres fosfatos (trifosfato) que tiene la molécula. la división celular y la transmisión de señales nerviosas. B (A -℗ + B A – B + Pi ). es decir. y las ligasas ácido-aminoácido o sintetasas de péptidos. algunos de cuyos ejemplos más conocidos son la glutación sintetasa. ya que su función de intercambio de energía y la función catalítica (trabajo de estimulación) de las enzimas están íntimamente relacionadas.℗ + ADP) y una transferasa que pasaría y uniría esa sustancia A. A partir de ácido acético y coenzima A . un azúcar de cinco carbonos. A este grupo pertenecen enzimas de gran relevancia reciente. la carnosina sintetasa. un ejemplo típico de las cuales es la acetil coenzima. como las aminoácido –ARNt ligasas conocidas habitualmente con el nombre de sintetasas de aminoácidos – ARNt o enzimas activadoras de aminoácidos que representan el primer paso en el proceso biosintético de las proteínas.

La mayoría de las reacciones celulares que consumen energía están potenciadas por la conversión de ATP a ADP. ni formar . Una enzima y un sustrato no llegan a adherirse si sus formas no encajan con exactitud. la enzima vuelve a unirse con un nuevo sustrato. o lugar donde se adhiere el sustrato. se entrelazan y se pliegan una o más cadenas polipeptídicas. estas en su mayoría son de naturaleza proteica (algunas como la ribozima son formadas por RNA). La enzima misma no se ve afectada por la reacción. sin consumirse en ella.disponible para el trabajo y la molécula de ATP se convierte en ADP (difosfato de adenosina). En las células del músculo y del cerebro de los vertebrados. el movimiento de los músculos. Funciones de las enzimas En su estructura globular. proporcionando un depósito de energía de reserva. INTRODUCCIÓN Todas las reacciones metabólicas que ocurren en nuestro organismo se hayan mediados por enzimas. capaces de acelerar las reacciones químicas en ambos sentidos. el exceso de ATP puede unirse a la creatina. la síntesis de proteínas y la división de la célula. una proteína que se sintetiza utilizando la energía aportada por los alimentos. que aportan un pequeño grupo de aminoácidos para formar el sitio activo. 5. y donde se realiza la reacción. Este hecho asegura que la enzima no participa en reacciones equivocadas. Por lo general. Puede definirse a las enzimas (ez) como catalizadores. incluso la transmisión de las señales nerviosas. el ADP recupera con rapidez la tercera unidad de fosfato a través de la reacción del citocromo. Cuando los productos se liberan.

que tienen el poder de catalizar. La diferencia fundamental es que tienen gran especificidad de reacción o sea por el sustrato sobre el cual actúan. genes y enzimas pueden considerados como las unidades fundamentales de la vida. y agilizar determinados procesos sintéticos y analíticos. esto puede deberse por un aumento de la permeabilidad de las membranas . lo que comporta continuos cambios en su estado bioquímico. como la GOT (glutámico-pirúvico transaminasa) que está 60% en el citoplasma y 40% en mitocondria. se incrementa la velocidad de la reacción química y que no se altera de forma permanente por la reacción. Al disminuir la energía de activación. en la base de la cual están las enzimas. por tanto. 3. Los propios genes son reguladores de la producción de las enzimas. Las enzimas. Las enzimas Cada célula y cada tejido tienen su actividad propia. como catalizadores que son. Un catalizador es una sustancia que disminuye la energía de activación de una reacción química. En muchas enfermedades orgánicas está aumentada la salida de enzimas desde el interior celular. no modifican la constante de equilibrio y tampoco se transforman. Hay enzimas 100 % citoplasmáticas es decir que se encuentran solamente en el citosol. pero constantemente llegan al espacio extracelular pequeñísimas cantidades de muchas enzimas intracelulares. facilitar. recuperándose intactas al final del proceso. La rapidez de actuación de las enzimas y el hecho de que se recuperen intactas para poder actuar de nuevo es la razón de que se necesiten en pequeñísimas cantidades. las actividades catalíticas de las numerosas enzimas se mantienen muy constantes. Otras enzimas están en un cierto porcentaje en las organelas y otro porcentaje en el citoplasma. es decir que son biloculadas. Adheridas a las mitocondrias). MDH (malato deshidrogenasa) 50 % en citoplasma y 50% en mitocondria. a estas se las llama uniloculadas. ya que existe un equilibrio entre la síntesis y la degradación enzimática. En las células somáticas normales. Por ejemplo GPT (glutámico-pirúvico transaminasa) ó LDH (láctico deshidrogenasa). Distribución de las enzimas en los espacios extra e intracelular En la célula las ez pueden encontrarse en el líquido celular (citosol) o bien pueden estar fijadas a determinadas organelas (ej.parte de los productos.

cada organismo sufre mas o menos gravemente y el trastorno puede ser motivado tanto por la falta de acción como por un exceso de actividad de enzima. Nitrógeno (Ni). Cuando este orden y su sistema funcional son alterados de algún modo. Su importancia es tal que puede considerarse la vida como un "orden sistemático de enzimas funcionales". De esta manera se originan modificaciones del nivel enzimático en el plasma sanguíneo. las enzimas están formadas de carbono (C). . Hidrógeno (H).celulares. y Azufre (S) combinados. oxigeno (O). Caracteristicas de las enzimas Desde el punto de vista químico. pero siempre con peso molecular bastante elevado y común propiedades catálicas especificas. de indudable valor que ayudan a realizar un diagnóstico 5. o bien por disolución de la estructura celular.

asimétrico. En los sistemas biológicos se llevan a cabo diversas reacciones a partir de la misma sustancia. están dotados de las enzimas que les permiten aprovechar los alimentos con fines energéticos o estructurales. la irritabilidad. sin liberaciones bruscas de energía a temperaturas fijas en un medio de pH.. a su vez. por ejemplo. etc. la división celular. Las enzimas. no muestran la menor actividad sobre formas idénticas de dichos aminoácidos. la reproducción. concentración salina. Los animales. con estructura L-. la especificidad de las enzimas es tan marcadas que en general actúan exclusivamente sobre sustancias que tienen una configuración precisa. producidos por los organismos vivos. por lo tanto. las funciones del metabolismo interno y de la vida de relación. si solo atacan a los aminoácidos que tienen su carbono a . Esto quiere decir que la glucosa puede descomponerse en distintos productos y aunque todas las posibilidades son teóricas y prácticamente posibles la presencia de ciertas enzimas favorece uno de los caminos que llevan a la acumulación de determinados compuestos. La fijación de la energía solar y la síntesis de sustancias alimenticias llevadas a cabo por los vegetales dependen de las enzimas presentes en las plantas. En consecuencia. la excitabilidad. . pero que sean del tipo D-. se consideran como catalizadores altamente específicos que:  Modifican la velocidad de los cambios promovidos por ellas. en los sistemas biológicos constituyen las bases de las complejas y variadas reacciones que caracterizan los fenómenos vitales. como la locomoción. las deficiencias en la funcion enzimatica causan patologias. Las enzimas. prácticamente constante. A diferencia de un catalizador inorgánico que interviene en numerosas reacciones las enzimas producidas por los organismos vivos habitualmente solo catalizan un tipo de reacción o solo una reacción determinada. al paso que otros gérmenes la convierten en ácido láctico o ácido pirúvico o acetaldehido.Las enzimas son catalizadores de naturaleza proteínica que regulan la velocidad a la cual se realizan los procesos fisiologicos. etc. por ejemplo algunos microorganismos convierten la glucosa en alcohol y bióxido de carbono. Están regidas por la actividad de innumerables enzimas responsables de que las reacciones se lleven a cabo en condiciones favorables para el individuo.

mientras que en los lisosomas se producen enzimas hidrolíticos cuya misión escindir. de preferencia a otras distintas son las que van a sufrir los cambios. por tanto el trabajo de las células. etc. En las mitocondrias existe un sistema de transporte de electrones que determinan importantes fenómenos de oxidorreducción.  Determinan que sustancias particulares. en sustancias complejas adecuadas para ser entre otras cosas el alimento fundamental de los animales. Los cloroplastos vegetales contienen una amplia gama enzimas encargadas de la función clorofílica. se deduce. En los ribosomas tiene lugar concretamente todas la s síntesis de las sustancias proteicas. los cuales son en parte elaborados también en el citoplasma. estos aminoácidos son los que precisamente constituyen la base del edificio proteico. proceso que a través de reacciones químicas complejas y encadenadas transforman compuestos inorgánicos. ya que en una de ellas se encuentran varios miles de sustancias. que es un compuesto altamente energético del que depende la mayor parte de metabolismo. la presencia de varios miles de enzimas. 6. Es posible. oxidación. en las mitocondrias se produce el metabolismo enzimático de los ácidos grasos. cual de ellos en especial. como el agua. y el anhídrido carbónico. durante los cuales se forman notables cantidades de ATP. también. degradación. con la intervención del agua. La sede de las enzimas es el citoplasma. Impulsan dentro de los distintos cambios posibles que pueda seguir una sustancia. También en el laboratorio se ha intentado la síntesis de proteínas a partir de aminoácidos. características de la actividad vital de los distintos organismos. La estructura enzimática Por su estructura y composición química puede afirmarse que el origen de las enzimas esta vinculando al origen de las sustancias proteicas. será el utilizado. por lo tanto. encargadas de las diversas funciones de síntesis. Al hablar del origen de la vida se ha citado el éxito de los experimentos realizados en el laboratorio para la producción de aminoácidos. Las enzimas representan las sustancias encargadas de graduar la velocidad de una reacción determinada en el interior de las células. y coma. moléculas . como en las diversas células se realizan infinidad de reacciones. que la mayor parte de esta estructura proteínica celular esté formada por enzimas.

grandes en otras menores. los ácidos fuertes. d. alrededor de 60 a 70 ° C. por ejemplo con saltos bruscos desde temperaturas inferiores a 0° C hasta temperaturas mas elevadas con cambios de presión osmótica o mediante ultrasonidos. la cinética de la desnaturalización térmica de las enzimas da resultados muy parecidos a los de la desnaturalización térmica de las proteínas. que resulta del todo similares a las propiedades de este tipo que muestran las enzimas. La más importantes son las siguientes: a. en el casod e las enzimas. que pueden a su vez ser utilizadas por las células. y presenta un punto óptimo de ph donde su actividad es mayor. Todos los agentes que desnaturalizan a las proteínas también destruyen o inactivan a las enzimas. Las proteínas en su punto isoeléctrico. y. solubilidad. e. difución. c. Las enzimas son inactivadas a altas temperaturas y. ya sea el calor. La localización de las sedes de las distintas operaciones enzimáticas antes mencionadas ha sido posible a través del sistema de ruptura de las células y de la separación de los distintos componentes mediante centrifugación diferencial del homogeneizado de estas la ruptura celular y la subdivisión de los componentes subcelulares se realizan actualmente utilizando los tejidos. Naturaleza química de las enzimas Existen numerosas razones para afirmar que las enzimas son proteinas. Las enzimas son activadas en unas zona muy restringida de pH. b. en general. demuestra que son proteínas. son solubles en agua o . en geeral. en cambio.. 7. criatalizada. a temperaturas elevadas. por ejemplo el Q10 de la mayoría de las reacciones químicas es de 2 a 3. la actividad neta aumeta varios cientos. como sucede con la velocidad de la desnaturalización térmica de las proteínas. El análisis de las enzimas obtenidas en forma más pura. muestran propiedades parecidas desde el punto de vista de viscosidad. o los metales pesados que puedesn combinarse con ellas. las enzimas glucolíticos están difundidos en el citoplasma. Los problemas de solubilidad y de precipitación son comunes a las proteínas y las enzimas. etc.

Composición química de las enzimas con Los conocimientos sobre la composición química de las enzimas constituyeron materia de numerosas controversias hasta 1926.B Sumner (1887-1955) consiguió cristalizar la ureasa. y la gran cantidad de las enzimas que rápidamente se acumulaban determinaron la necesidad de utilizar una clasificación o .soluciones salinas. Después del descubrimiento de Sumner. A. 8. pueden distinguirse en el dos partes bien diferenciadas:   El grupo prosteico (Coenzima) La proteina (Apoenzima) En algunas enzimas oxidantes fue observada la presencia de la promoporteinas. por tanto el grupo proteico (coenzima) y el grupo proteico (apoenzima) han de estar íntimamente ligados entre si para ser operativos. el numero de la enzimas y el estudio de sus actividades químicas proporcionaron un notable impulso en la enzimología. de las enzimas pueden distinguirse los formados por:   Solo proteínas. etc. precipitan determinadas concentraciones de sales neutras. partir de entonces fueron aisladas otras enzimas en forma pura. y el análisis demostraba siempre la presencia de una proteina. 4en muchos casos resulta facil de separar de la molécula proteica. como la ureasa y las enzimas digestivas (la pepsina y la tripsina) Los conjugados. las dos unidades no muestran actividad enzimático. Cuando los analisi químicos demuestran que la enzima es una proteína conjugada. simple o conjugada. otras veces este grupo prostético es derivada de vitaminas (como la vitamina B). insolubles en alcohol. y demostrar que era una sustancia proteica. cuando J. en las cuales el grupo prospético esta representado por un compuesto que contiene Fe y otro elemento. cristalina. que difieren entre si por la secuencia con que los aminoácidos están combinados. el cual desmpeña un papel importante en la combinación de la proteina con el sustrato. Por consiguiente. enzima que transforma la urea en anhídrido carbonico y amoniaco. separados en dos entidades químicas bien definidas: la coenzima y la apoenzima. No obstante una vez separadas.

etc. tal es el caso de la ptialina de la saliva. Al descrubir nuevas enzimas y proceder a su caracterización estricta se aplicaron reglas de nomenclatura basadas en el nombre del sustrato atacado.) De la misma manera. pero en este caso. enzima proteolítica que se encuentra en la papaya y de las catepsinas. recibieron nombres ligados mas bien a su sitio de procedencia anatómica que no siguen ninguna regla ni sistema. 9. o en el tipo general de sustrato. Los ejemplos se pueden extender a todos los terrenos de la actividad enzimática. también proteasas. o triples. la plasmina. etc. las nucleasas. como la b glucosidasa que actúa sobre las uniones b -glucosídicas. el plasminógeno. de la papaina. catalizaban la hidrólisis de enlaces covalentes. etc. Las enzimas relacionadas con la cuagulación de la sangre. Por ejemplo: las lipasas (hidrolizan lipidos o grasas). toman su nombre del grupo vecino a la unión que van a atacar. de la renina. las proteasas (hidrolizan proteinas). se denominan de acuerdo con la unión atacada. como son la trombina. las carbohidrasas se denominan así genericamente. Nomenclatura y clasificacion de las enzimas Cien años atrás solo se conocian enzimas. muchas de estas. colesterol estrerasa (si la esterasa es específica de los esteres de colesterol) y acetilcolina esterasa (si la estersa de la acetilcolina). pero pueden comprender enzimas con nombres proveniente del sustrato particular sobre el que actuan como la amilasa que ataca al almidón y la celulasa que actúa sobre la celulosa y. como en las enzimas proteolíticas. en otras ocaciones. que cuagula la leche. de manera especial las que fueron descubiertas en un principio. Esta manera de llamarlas. la terminación -asa. que atacan proteínas. que se encuentran en las células. o en la reacción catalizada y se ha añadido convencionalmente. las fosforilasas. de manera que se denominan fosfatasas (cuando quitan una molécula de monofosfato). Algunas enzimas. reciben también nombres sistematizados. las amilasas (hidrolizan almidon). se demostro que era inadecuada porque al descubrirse varias enzimas. Otros ejemplos: Las fosfatasas son enzimas que atacan las uniones éster. las esterasas (basado en la unión general de tipo éster presentes en muchas sustancias). notaron que varias enzimas catalizaban .nomenclatura para evitar errores y facilitar la comprensión de futuros investigadores. que ataca al almidón de la pepsina del estómago y de la tripsina del páncreas. pirofosfatasas (cuando quitan el ácido fosfórico como esteres dobles (pirofosfatos).

Sin embargo. Informacion adicional. indica el tipo de reaccion catalizada. esta formada por la Union Internacional de Bioquimica (IUB) adopto. por ejemplo. reacciones de transferencia de grupo. la Comisión para el estudio de las enzimas. las enzimas reciben un nombre de acuerdo con el sustrato o los sustratos que participan en la reacción seguido por el tipo de reacción catalizada y. pero basante mas cortos persisten en libros de texto y en el laboratorio clinico. oxidacion o reduccion de la funcion alcohol de un azucar. Aunque el sufijo –asa continua en uso. nombres mas ambiguos. un sistema complejo pero inequivoco de la nomenglatura enzimatica basado en el mecanismo de reaccion. la terminación -asa. Para remediar esta deficiencia. la segunda. a continuacion solo se presenta principios generales del sistema IUB: 1. Aunque su claridad y carencia de ambigüedad recomiendan al sistema de nomenglatura IUB para trabajos de investigacion. surgieron ambiguedades y con frecuencia no estaba claro cual era la enzima que un investigador deseaba estudiar. se enfatiza el tipo de reaccion catalizada.reacciones diferentes del mismo sustrato. El sistema se basa en la reacción química catalizada que es la propiedad específica que caracteriza a cada enzima las cuales se agrupan en clases. con fines de sistematización. por lo que es muy dificil que en la práctica se pueda excluir el uso de los nombres triviales. preciso y descriptivo. porque catalizan procesos semejantes. En general. puede seguir el parentesis. se reconoce la necesidad de aceptar el nuevo sistema. en 1964. Con el descubrimiento de mas y mas enzimas. si es necesario aclarar la reaccion. consagrados por la costumbre. actualmente. Por ejemplo: las hidrogenasas catalizan la eliminacion de hidrogeno y las transferasas. con terminacion –asa. y en subclases que especifican con mayor exactitud la reacción particular considerada. 3. A menudo los nombres así obtenidos resultan largos y complejos. Por esta razon. cada una con 4 a 13 subclases. que constituye con respecto a los sistemas anteriores un punto de vista más uniforme. El nombre de la enzima tiene 2 partes: la primera es el nombre del o los sustratos. Por ejemplo: la enzima que cataliza L-malato + . al nombrar a las enzimas. 2. por fin. Las reacciones y las enzimas que las catalizan se dividen en 6 clases principales.

1. Al final de sus y trabajos. Oxidoreductasas Transferasas Hidrolasas Isomerasa Liasas 1.37 Lmalato:NAD+ oxidorreductasa (descarboxilante). subclase 7 (transferencia de fosfato). Extrayendo dos átomos de hidrógeno. se denomina como 1. O2.1. 4. sub-clase 1 (una funcion alcohol como aceptor de fosfato).Oxido-reductasas: Son las enzimas relacionadas con las oxidaciones y las reducciones biológicas que intervienen de modo fundamental en los procesos de respiración y fermentación. Estos grupos se subdividen en otro. aminoácidos.1. E. DPNH2. oxácidos aldehidos. Su clasificación se basa en la . etc. 2. citocromos. correspondientes por sus términos a las raciones que cada enzima ejerce sobre el sustrato. como receptores. catalizan las oxidaciones de muchas moléculas orgánicas presentes en el protoplasma. enzima que cataliza la transferencia de fosfato desde el ATP al grupo hidroxilo de carbono 6 de la glucosa. fabricando también el ATP. clasifico las enzimas en seis grupos principales. Las oxidoreductasas son importantes a nivel de algunas cadenas metabólicas.C.C.1 denota la clase 2 (una transferasa).NAD= = piruvato + CO2 NADH + H= . Son más de un centenar de enzimas en cuyos sistemas actúan como donadores. 5. Asi. 2.7. las propias coenzimas DPN y TPN. cetonas. según el tipo de sustrato y los átomos concretos que son sensibles a sus acciones. El cuarto digito es para la enzima especifica. 3. 2. subclase (segundo digito) y subclase (tercer digito). 4. TPNH2. verdadero almacén de energía. Estos seis grupos son los siguientes: 1. alcoholes. En esta clase se encuentran las siguientes subclases principales: Deshidrogenasas y oxidasas. los átomos de hidrógeno tomados del sustrato son cedidos a algún captor. y muchos otros compuestos y.) que caracteriza al tipo de reaccion según la clase (primer digito). Cada enzima tiene un numero clave (E.Las Transferasas: Estas enzimas catalizan la transferencia de una parte de la molécula (dadora) a otra (aceptora). como la escisión enzimática de la glucosa. El ultimo digito denota a la enzima hexocinasa o ATP: D-hexosa-6-fosforotransferasa.

como en la (tabla) isopentenil fosfato isomerasa. A este grupo pertenecen proteínas muy conocidas: la pepsina. geométrica. etc. Las óxido – reductasas intramoleculares cetalizan la interconversión de aldosas y cetosas. de idéntica formula empírica pero con distinto desarrollo. Estas ultimas desarrollan una oxidorreducción dentro de la propia . oxidando un grupo CHOH y reduciendo al mismo tiempo al C = O vecino. amina.naturaleza química del sustrato atacado y en la del aceptor. sulfató. funcional. como en el caso de la triosa fosfato isomerasa.Las Hidrolasas: Esta clase de enzimas actúan normalmente sobre las grandes moléculas del protoplasma. 3. estéricos y glucosídicos. presente en el proceso de la glucólisis . glucosilo. y la tripsina y la quimiotripsina. Las racemasas y las epimerasas actúan en la racemización de los aminoácidos y en la epimerización de los azúcares. como transformar compuestos aldehídos en compuestos cetona. de posición. o fosforilo de una parte a otra de la molécula. Se dividen en varias subclases. las grasas y las proteínas. sulfúrico. 4. Las isomerasas cis – trans modifican la configuración geométrica a nivel de un doble ligadura. Por fin las transferasas intramoleculares (o mutasas) pueden facilitar el traspaso de grupos acilo. etc. Simultáneamente se obtiene la hidrólisis (reacción de un compuesto con el agua)de una molécula de agua. Son las enzimas que catalizan diversos tipos de isomerización.Las isomerasas:Transforman ciertas sustancias en otras isómeras. El hidrógeno y el oxidrilo resultantes de la hidrólisis se unen respectivamente a las dos moléculas obtenidas por la ruptura de los mencionados enlaces. aldehído. etc. o viceversa. como son la de glicógeno. La clasificación de estas enzimas se realiza en función del tipo de enlace químico sobre el que actúan. segregada por el páncreas. como la lisolecitina acil mutasa que transforma la 2 – lisolecitina en 3 – lisolecitina. transfiriendo grupos metilo. Desempeñan un papel esencial en los procesos digestivos. Algunas isomerasa actúan realizando inversiones muy complejas. presente en el jugo gástrico. puesto que hidrolizan enlaces pépticos. La acción catalítica se expresa en la escisión de los enlaces entre átomos de carbono y nitrógeno (C-Ni) o carbono oxigeno (C-O). Las primeras son en realidad pares de enzimas específicas para los dos isómeros y que producen un solo producto común. sea óptica. es decir. indispensable en el cambio biosinético del escualeno y el colesterol. También este grupo de enzimas actúan sobre los sustratos mas diversos. en otros casos cambian de lugar dobles ligaduras.

que. y las ligasas ácido-aminoácido o sintetasas de péptidos. carbono y nitrógeno y carbono y carbono. una fosfocinasa. Algunas liasa actúan sobre compuestos orgánicos fosforados muy tóxicos.Las Ligasas: Es un grupo de enzimas que permite la unión de dos moléculas. el anhídrido carbónico. los hidroxácidos. hidratos de carbono y sus derivados. para fosforilar a una sustancia A (A + ATP A . quitando hidrógeno. Por consiguiente las enzimas de esta clase son los únicos que intervienen en reacción no espontánea desde un punto de vista termodinámico.molécula (oxido rreductasa intramoleculares)sobre la que actúan. en rigor. libera la energía necesaria para llevar a cabo la unión de las primeras. . escindiéndolos. actúan ampliamente sobre los aminoácidos. con otra.Las Liasas: Estas enzimas escinden (raramente construyen) enlaces entre átomos de carbono. que forma acetil coenzima. 6. 5. Se trata de un grupo de enzimas muy importantes y recién conocidas. las ligasas ácido – amoniaco (glutamina sintetasa). pues antes se pensaba que este efecto se llevaba a cabo por la acción conjunta de dos enzimas. Los grupos separados de las moléculas que de sustrato son casi el agua. para el proceso de reacción. a algunos grupos y reduciendo otros. carbono y nitrógeno. la carnosina sintetasa. etc. lo cual sucede simultáneamente a la degradación del ATP. Actúan sobre los sustratos más diversos y revisten particular importancia en el metabolismo de los ácidos nucleicos. o bien entre carbono y oxigeno. A partir de ácido acético y coenzima A . como las aminoácido –ARNt ligasas conocidas habitualmente con el nombre de sintetasas de aminoácidos – ARNt o enzimas activadoras de aminoácidos que representan el primer paso en el proceso biosintético de las proteínas. y el amoniaco.℗ + ADP) y una transferasa que pasaría y uniría esa sustancia A. B (A -℗ + B A – B + Pi ). algunos de cuyos ejemplos más conocidos son la glutación sintetasa. o bien entre carbono y azufre. y carbono y azufre. otros separan el carbono de numerosos sustratos. La acción de estas enzimas se manifiesta con la formación de enlaces entre átomos de carbono y oxigeno de diversas moléculas. las ácido-tiol ligasas. la energía proporcionada por el ATP o compuestos homólogos que son degradados. y que forman uniones CO. A este grupo pertenecen enzimas de gran relevancia reciente. un ejemplo típico de las cuales es la acetil coenzima. A sintetasa. Las ligasas utilizan siempre.

Hidrolasas 4. Oxidoreductasas Accion ejemplos Catalizan reacciones de Dehidrogenasas oxidorreducción. de aminoácidos. de 5. en el segundo utilizan la energía obtenida para realizar la reacción de síntesis. Transferasas Transfieren grupos activos Transaldolasas (obtenidos de la ruptura de ciertas moléculas)a otras Transcetolasas sustancias receptoras. Suelen actuar en procesos de Transaminasas interconversiones de azucares. etc Verifican reacciones de hidrólisis Glucosidasas con la consiguiente obtención de monómeros a partir de polímeros. Tras la acción catálica quedan modificados en su Aminooxidasa grado de oxidación por lo que debe ser transformados antes de Deaminasas volver a actuar de nuevo. Catalasas 2. Isomerasas Actúan sobre determinadas Isomerasas moléculas obteniendo de ellas sus azúcar isómeros de función o de posición. Grupo 1. Lipasas Suele ser de tipo digestivo. Liasas . Suelen actuar en Epimerasas procesos de interconversion Mutasas Realizan la degradación o síntesis Aldolasas (entonces se llaman sintetasas) de los enlaces denominados fuertes Decarboxilasas sin ir acoplados a sustancias de alto valor energético.Estas reacciones enzimáticas se desarrollan en dos tiempos: en el primero se forma un complejo intermedio con potencia energética muy alta-. por lo que normalmente actúan en Peptidasas primer lugar Esterasas Fosfatasas 3.

no dializable y termolábil. Solo en el caso de la lisozima (enzima presente en las lágrimas donde funciona como un antiséptico suave y que tiene la capacidad de atacar a los polisacáridos que forman la pared de diversas bactérias) se ha determinado la estructura tridimensional de una enzima. el sustrato o los sustratos un grupo proteico ( o coenzimas) y sustancias activadoras. por razones técnicas de peso molecular bajo. con una solución de dos Å. para este fin se aplican las técnicas de cristalografía de rayos x. osea el modo como la cadena peptídoica se dispone a lo largo de su eje mayor y el de la estructura terciaria. papaina. de naturaleza proteica formada por cadenas de polipéptidos. el orden en el que están dispuestos todos ellos en la cadena. es decir. pepcina. tienen una sola cadena polipeptídica (ribonucleasa.quimotripsina y aldolasa) que tienen dos. lo que demostró que la lisosima es una proteína con su cadena de 129 aminoácidos .Partes del sistema enzimatico Los sistemas enzimáticos en general. etc. Las estudiadas analíticamente hasta ahora. han sido. están formados por la enzima propiamente dicha (apoenzima). de hecho unos cuantos casos en los que se ha determinado su secuencia completa. osea la forma en que la cadena se pliega y se acomoda para formar una estructura tridimensional se conocen muy mal para todas las enzimas. con peso moléculas elevado.6. Apoenzima: concepto del centro activo La apoenzima es la enzima propiamente dicha. La estructura formada por la apoenzima y la coenzima se denomina boloenzima. con cierta frecuencia se reconocen sistemas enzimaticos que no tienen grupo prostético o activadores reconocidos.) excepto uno o dos casos (a . existen. El análisis de los aminoácidos que componen a diversas enzimas demuestran que tienen una estructura similar a la de cualquier proteína. 12 a 24 000. tripsina. Ligasas Realizan la degradación o síntesis Carboxilasas de los enlaces fuertes mediante el acoplamiento a sustancias ricas Peptidosintetasas en energía como los nucleosidos del ATP 10. El análisis de la estructura secundaria de la proteína.

en el espacio. sin embargo. que se recupera si vuelve a incluirse los aminoácidos en el orden original. etc. Un caso muy ilustrativo sobre lo que significa la estructura del centro activo desde el punto de vista de la composición de los aminoácidos es el de la triptofano pirrolasa. asiendo aparecer a dichos grupos muy distantes entre ellos si se considera el orden que guardan a lo largo de la cadena polipeptídica. iones. cofactores. la modificación de algunos aminoácidos produce perdida e la actividad enzimática. Se ha demostrado. En ella. se impide una desnaturalización que sin ellos se produciría. pues es posible que el propio sustrato . en este caso. Es muy posible que el centro activo esté formado por la contribución de grupos funcionales de aminoácidos situados en distintas cadenas o en diferentes repliegues de una cadena. y la enzima vuelve a ser totalmente activa. la transaminasa con ácido a -cetoglutárico). que es cierta regla general de que el modo como se ordenan y disponen los aminoácidos de termoina el arreglo espacial que permite a las otras partes del sistema enzimático – sustratos. enzima ampliamente estudiada en bacterias desde el punto de vista de la bioquímica genética. El concepto de arreglo tridimensional adecuado de los aminoácidos que forman la cadena polipeptídica de la enzima para lograr la actividad funcional correcta permite entender numerosos denómenos: la necesidad de que la molécula proteica íntegra esté preservada en su forma. que al calentar una enzima con su sustrato (por ejemplo. se pueden reemplazar dos de ellos por otros completamente distintos. Por lo tanto. conduce a la perdida de la actividad enzimática. Se acepta que el centro activo no es una parte muy grande de la enzima completa y. en ciertos sistemas estudiados por medio de bloqueos químicos no parece constituir una zona de más de 20 Å de diámetro. para que se lleve a cabo la acción catalítica. – adaptarse.ampliamente plegada y en la que se reconoce una hendidura representante del centro activo donde se acomodan muy bien los inhibidores – ciertos compuestos del tipo de carbohidratos – que nulifican su actividad enzimática. en forma adecuada. Es posible que con estos nuevos aminoácidos se consigan también las condiciones de distribución espacial de grupos funcionales y estructuras necesarias para la actividad enzimática. el hecho de que la desnaturalización de la enzima al permitir la separación de los pliegues. las estructuras indispensables que permiten la combinación con el sustrato y que confieren propiedades enzimáticas a la molécula se denomina "centro activo". la invertasa con sacaroza.

e inactiva el centro activo del que forman parte dicho aminoácido. haciendo un estudio de su ordenamiento en el centro activo. que la actividad de la enzima depende en parte de la disposición o arreglos de los aminoácidos y grupos prostéticos en determinada región de la proteína. se deduce. que se combina con el OH del aminoácido serina. También se entiende por que al atacar la ribonucleasa con pepsina y romper una sola unión peptídica que separa un tetrapéptido del extremo con grupo carboxilo libre se pierde la actividad. aún a concentraciones de 10-10 M. ninguno es activo. aunque un poco menor que la originalmente observada. Teniendo en cuenta estos hechos. Los aminoácidos que componen a las proteínas pueden tener moderadas . pero basta mezclarlos para que se unan en tal forma que se restablece la actividad. inhibe a la acetilcolinesterasa. por lo tanto. cuando menos para el caso de la quimotripsina. peptidasas. por lo tanto. para formar parte del propio centro activo. en rigor a su capacidad para destruir funcionalmente ciertas enzimas. El estudio detallado de la estructura del centro activo se hace por medio de inhibidores o de reactivos que se combinan de modo específico. que integra el centro activo.contribuya a sostener y reforzar la aproximación de los pliegues de la cadena. etc. y su utilidad se debe. etc. . y en distinto pliegue de la cadena. Si se parte la ribonucleasa entre los aminoácidos 20 y 21. La unión del DFP al aminoácido cedina es muy estrecha y a permitido el análisis de los aminoácidos vecinos a él. se trata. y se separan los dos fragmentos. alejado e otro. mucho de los derivados del DFP se utilizan como gases de guerra o como insecticidas (parathion). en diversas esterasas. este inhibidor. También se ha demostrado que la histidina. La secuencia de los centros activos de diversas enzimas hidrolíticas sensibles al DFP. mientras que si solo se quita los tres últimos disminuye su acción sugiriendo así la importancia del residuo de ácido aspártico para sostener el centro activo en condiciones de eficiencia. o lo que es más probable. de otro ejemplo de una aminoácido. forma parte del centro activo aún cuando el análisis de la secuencia no demuestra que exista cerca de la cerina ninguna histidina. con algunos de los aminoácidos del centro activo tales como el diisopropilfluorofosfato (DFP). se demuestran que la mayoría tienen cerina y a demás un aminoácido dicarboxílico (aspártico o glutámico) y en el otro un aminoácido neutro (alanina o glicina).

La propiedad catalítica de las enzimas parece depender de la facilidad con la que ayudan a que se pongan en contacto las sustancias reaccionantes para dar el producto o los productos de la reacción. cuando se les considera en forma aislada. ya que antes pueden tener diversas formas y disposiciones. Así las enzimas pueden sufrir un cambio en su estructura desde el momento en que entran en contacto con los reaccionantes. de la estructura también tridimensional. sustratos y cofactores. conocido clásicamente como de la "llave y la cerradura". cuando existen estos – y de las moléculas mismas de los sustratos que se unirán a aquellos y permitirán que se lleve a cabo la reacción química. Esto no significa que necesariamente. y es posible que todos ellos modifiquen el arreglo tridimensional de la enzima.actividades catalíticas. uno tras otro fragmentos de dos unidades de glucosa de los extremos de las ramificaciones. la enzima los recibe en un orden determinado y cada uno de ellos al unirse a la enzima modifica su estructura. . en cambio solo se desprenden. De hecho para muchos sistemas enzimáticos se han ideado modelos análogos. aunque de ninguna manera comparable en su magnitud. Sin embargo ha sido necesario reconsiderar esta situación y sugerir – de acuerdo con Koshland – la teoría de un "acomodo inducido". Así la enzima sería un molde tridimensional en negativo. y con la enzima. a base de piridoxsal que representan la parte activa de enzimas descarboxilantes y transaminantes. en el estado natural. una disposición adecuada de os grupos funcionales – aminoácidos de la apoenzima y grupos prostéticos. osea sustancias químicas sencillas que suelen reproducir los efectos ocasionados por la enzima. a las que muestran la gran molécula proteica. la hidrólisis del almidón lo mismo se logra con la adición del ácido que con la enzima específica amilasa. en positivo de los reaccionantes que se adaptarían perfectamente a ala disposición de la enzima. Este acercamiento de las sustancias reaccionantes de los grupos prostéticos y los grupos funcionales fue las razón del modelo de Ehrlich. aún cuando en el primer caso se atacan indiscriminadamente numerosas uniones glucosídicas. Esto implica que el sistema enzimático tenga una conformación especial osea. aquel no representa una estructura de negativo tridimensional mientras no se halla la mano en el. La nueva analogía es la del "guante y la mano". la enzima funcione como lo hace el análogo pues muchos sistemas pudieran tener otro mecanismo de operación.  Conformación de la enzima y propiedades del centro activo. tal es el caso de los análogos.

recién introducido. Los cambios conformacionales. proteína muscular contráctil. al paso que la enzima sola es rápidamente degradada. en presencia de ATP hace más notable su forma de espiral y permite el reconocimiento de aminoácidos previamente ocultos en sus pliegues. como son las modificaciones en la rotación óptica o en el patrón de sedimentación en el campo gravitacional de la ultracentrífuga. También permiten comprender porque un sustrato entra a una enzima y es atacado y uno que no lo es aún muy parecido a él.una vez que ha entrado la mano . Esta alteración múltiple y de tipo flexible. La entrada de un cofactor F1. Se ha preservado con esta nueva idea. se introduce en el sistema un nuevo arreglo a base de la reactividad de tipo electrónico entre la zona (+) y una parte del cofactor F1. puede quedar excluido del centro activo. debido a plegamientos que acercan o alejan diversos grupos colocados a lo largo del péptido que forma la enzima. Basten unos cuantos ejemplos: la transaminasa a cetoglutárica se pude calentar a 65° C. por fin la entrada de un nuevo reaccionate F2 modifica la parte terminal de la enzima de manera que permite la entrada del otro reaccionante (sustrato) que se acomoda en un lugar preparado previamente por los reaccionantes F1 y F2. con las partes reaccionantes. la D- . y los cofactores y la reacción en la que se participan. cambia de configuración y se precipita. modifica una parte del sistema (B). es decir. permite entender mejor el proceso de entrada ordenada de los sustratos. la miosina. osea los sustratos. El cambio en la disposición tridimensional puede hacerse a distancia y en muchas ocasiones la unión del sustrato a una parte de la enzima modifica otras zonas de ella y aún su estructura completa. el aspecto de la armonía estructural entre el sustrato y la enzima pero se introduce el nuevo concepto de que es necesario provocar un cambio en la estructura proteica que favorezca la colocación adecuada de todos los elementos que interviene en la reacción enzimática.que a su vez también puede adoptar distintas posiciones – se ponen en contacto todas las partes correspondientes. Se ejemplifican estas ideas en A se encuentra la enzima en una forma desplegada con ciertos grupos reactivos (+) y (-). y permite de esta manera echar a andar la reacción catalítica. se pueden demostrar con diversos métodos algunos de tipo físico. en presencia de su sustrato sin que se afecte. Los cambios de la estructura protéica se denominan "conformacionales". colocados en una zona de la superficie de la enzima. las partes reactivas del sistema enzimático. o químicos como el aumento o la disminución de la actividad enzimática bajo la influencia de cambios térmicos o la adición de agentes desnaturalizantes. en el caso de la enzima.

Algunos autores denominan cosustratos a estos agrupamientos coenzimáticos para hacer énfasis en su carácter reversible. el FAD. existe otra parte del sistema enzimático. Por ejemplo en las reacciones de oxido – reducción los hidrógenos desprendidos de un sustrato deben ser captados por una sustancia con lo que se expulsa al sustrato oxidado y es posible recibir una nueva molécula del sustrato con hidrógenos. suele cederlos a una tercera sustancia o. una segunda molécula orgánica conocida como coenzima sin la cual son inactivas. no catalítico y equimolecular con respecto al sustrato. el TPN. como por ejemplo el DPN y el TPN que asisten a las funciones de varias deshidrogenasas. de peso moléculas bajo y por lo tanto dializable. Una proporción de las vitaminas forman parte de moléculas mas complejas que funcionan como coenzimas en diversas reacciones. La mayor parte de las coenzimas se unen a las enzimas por fuerza no covalentes. a su vez. cuando las reacciones son reversibles los pasan al sustrato oxidado para reducirlo. 11. termostable y en general. adherida de mas o menos laxa a la apoenzima y a la cual se le llama grupo prostético. las reacciones de transferencia de grupo e . además de su sustrato. a una disposición irregular distribuida al azar. que. no protéica.. pasa de la forma espiral en a -hélice. el FAD. Entre las reacciones que requieren coenzimas están las oxidorreducciones. como el DPN. cuya transformación será condicionada por la enzima. al unirse a su cofactor. Las que forman enlace covalentes con las enzimas se denominan también grupos prostéticos.  Muchas enzimas requieren una coenzima Muchas enzimas que catalizan la transferencia de grupos y otras reacciones requieren. las coenzimas se definen como compuestos orgánicos termoestable. Tal sustancia es una coenzima. Es muy grande la importancia del grupo prostético o de la coenzima desde el punto de vista funcional pues suelen ceder y recibir alternadamente parte de los productos de la reacción. de peso molecular bajo. Para distinguirlas de iones metálicos activadores y de las enzimas mismas. requeridas para la actividad de las enzimas.amino oxidasa. etc. Coenzima y grupos prostéticos Aparte del sustrato. si está muy intimanente ligada a la apoenzima – como es el caso del núcleo porfirínico de numerosas oxidasas o la estructura flavínica de la deshidrogenasa succínica – o coenzima cuando la unión es débil y se separan fácilmente.

Otras reacciones pueden servir igualmente bien. los cambios químicos en la coenzima compensa exactamente a los que realizan en el sustrato.2. D-G. Por ejemplo. en las reacciones o oxidorreducción (deshidrogenasa). El esquema siguiente muestra el último concepto. Por ejemplo. Las reacciones líticas que comprenden reacciones hidrolíticas catalizadas por enzimas digestivas no requieren de coenzimas. este aspecto de la reacción es el que puede ser de significado fisiológico fundamental.  Las coenzimas pueden considerarse como segundo sustrato La coenzima puede considerarse como un segundo sustrato o cosustrato por dos razones. reacciones de transaminación). En primer lugar. Una segunda razón para dar igual énfasis a las reacciones de la coenzima es que. D-H CoE A-G D CoE-G A Aunque estos sugiere la formación de un complejo sencillo CoE-G. la reducción del piruvato en lactato reoxida al NADH y permite la síntesis de ATP. pueden intervenir varios . Por ejemplo. En condiciones anaerobias. el trabajo) tiene que cesar. una molécula de sustrato es oxidasa y una molécula de coenzima es reducida. Sin NAD+ la glucólisis no puede continuar y la síntesis anaerobias de ATP (y por tanto.isomerización y las reacciones que forman enlaces covalentes (claves 1. G es transferido de una molécula denadora. reacciones de dehidrogenación) o como portador intermediario del grupo (por ejemplo. A.  Las coenzimas funcionan como reactivos en la transferencia de grupos Las reacciones bioquímicas de transferencia de grupo del tipo. la importancia de la capacidad del músculo que trabaja en condiciones anaerobias para convertir el piruvato en lactato no residen en el piruvato ni en el lactato. por lo general comprende la participación de una coenzima como último aceptor (por ejemplo. en las bacterias o levaduras que crecen en medio anaerobio. durante el curso de la reacción global. algunos metabolitos derivados del piruvato son utilizados como oxidante para el NADH y son reducidos en el proceso. en realidad.IUB). a una molécula aceptora.5 y 6. D–G+A=A–G+D En la cual un grupo funcional. La reacción sirve solamente para oxidar la coenzima reducida NADH a NAD+.

riboflavina y ácido pantoténico son constituyentes esenciales de las coenzimas para las oxidaciones y las . Las vitaminas B. -Muchas coenzimas derivan de vitamina B y del monofosfato de adenosina Las vitaminas B forman parte de la estructura de numerosas coenzimas. tiamina. es costumbre representar sólo la "mitad izquierda de la reacción": D-H CoE D CoE-H Que esto representa en realidad sólo un caso especial de la transferencia general de grupos puede apreciarse mejor en términos de las reacciones que ocurren en las células intactas. transaminación). Se pueden representar de las siguientes manera: D-H CoE A-H D CoE-H A  Las coenzimas pueden clasificarse de acuerdo al grupo cuya transferencia facilitan Basándose en este concepto podría clasificarse a las coenzimas como sigue: Para la transferencia de grupos distintos del hidrógeno:              Fosfatos de azúcares CoASH Pirofosfato de tiamina. Fosfato de piridoxal Coenzimas del folato Biotina Coenzimas de cobamida (B12) Ácido lipoico Para la transferencia del hidrógeno: NAD+. FAD. DADP+ FMN. nicotinamida.complejos intermediarios CoE-G en una reacción particular (por ejemplo. Cuando el grupo transferido es el hidrógeno. Ácido lipoico Coenzima Q.

a un cuando con baja de la velocidad. A menudo el metal. la parte funcional activa del sistema. en rigor. Este proceso implica el trabajo necesario para poner a dos moléculas en un contacto lo suficientemente estrecho como para que reaccionen. Cualquier factor que permita por una parte atraer al sustrato a su centro activo se pude considerar como un activador. para la amilasa salival. o el propio radical fosfato que se requiere en reacciones de fosforilación. Asi se reconocen diversas posibilidades:  Activación iónica. Numerosos metales monodivalentes son necesarios para la actividad enzimática de diversos sistemas. el que puede sustituirse. etc. bien conocido es el caso del Cl-. garra. actúan a menudo como transportadores de electrones y no se les puede considerar activadores en el sentido estricto pues forman parte integral del grupo prostético. Destacan entre ellos los siguientes: K+. Mg++. sin grandes modificaciones de la velocidad de la reacción.reducciones biológicas y las coenzimas ácido fólico y cobamida funcionan en el metabolismo de compuestos de un solo carbono. ribosa y fosfato y se derivan del monofosfato de adenosina AMP. el trabajo debe realizarce sobre la unión química – una con covalencia en sentido estricto – para que pueda romperse y formar otros compuestos. y por tanto facilitan el que se inicie una reacción. Cu++. Las enzimas. Fe+++. además. Algunos aniones también son necesarios para la actividad de ciertas enzimas. Activadores Las enzimas son catalizadores orgánicos que disminuyen la barrera denominada energía de activación. Ca++. Mn++. el cobre y el molibdeno. son partículas de gran superficie y muestran que tienen capacidad para atraer y captar diversas moléculas. además algo que permita la rápida salida de los productos también pude considerarse como un activador. Cu+. complejos moleculares sostenidos por un metal) al unirse con grupos cargados electricamente. . En determinadas reacciones estos son indispensables para el trabajo de la enzima y constituyen. a estas condiciones. como muchos catalizadores. de la coenzima y de la misma apoenzima con la que forma quelatos (de chelos. Numerosas coenzimas contienen adenina. es el centro que permite la unión conjunta del sustrato.  Activación por el grupo prostético. por Br-. Los ejemplos incluyen NAD+ y NADP+ 12. Muy amenudo se demuestra que es posible sustituir los metales divalentes entre ellos. Los metales como el hierro.

siguiendo dichos cambios en el tiempo. bloquee u oxide a disulfuro. Como la actividad de un enzimas sólo rara vez se puede expresar en relación a su peso absoluto o a la molaridad de la enzima. . En otras ocaciones la destrucción de los grupos –SH. Sin embargo. las enzimas se cuantean siguiendo la actividad de la reacción que catalizan y se aceptan. Consisite en la obtención de una correcta estructura del centro activo de la proteina con actividad enzimática. los productos que aparecen suelen inhibir a la enzima o se presentan modificaciones del pH que afectan a la reacción. en tal caso estaría la acción de inhibidores o venenos enzimáticos. etc. Para evitar estos problemas se hace la medida de la velocidad inicial. lo habitual es expresarla en "unidades" fijadas de modo convencional con relación a la proteina presente en la preparación. ya referido anteriormente. tomando en cuenta solo el comienzo. -SH.   La actividad enzimática se mide por la desaparición del sustrato o la aparición de alguno de los productos de la reacción. -S-S-. en forma de línea recta de la gráfica. aunque puede lograrse por el efecto de sustancias que los ataquen y que combinen con ellos como la yodacetamida. En general. en principio que dicha actividad es proporcional a la cantidad de enzima presente. Cualquier alteración química que los destruya. Existen otros grupos funcionales cuyo bloqueo acaba por completo con la actividad enzimatica. Medida de la actividad enzimática. puede inactivar a las enzimas. las condiciones del sistema no son uniformes a lo largo del tiempo: el grado de saturación de la enzima con el sustrato cambia constantemente. Activación de la apoenzima. Integridad de los grupos funcionales del centro activo. lo que sucede en general cuando se ha consumido no más de una cuarta parte del sustrato. Esto puede suceder incluso en las suaves condiciones del trabajo celular por exposición a agentes oxidantes o al oxigeno mismo. aun la distancia del centro activo modifica de tal manera la estructura tridimencional de la enzima que el centro activo se deforma al grado de que no puede llevar a efecto su acción sobre las sustancias reaccionantes. Destaca la relacionada con los grupos sulfhidrilo. muy pocas de ellas poseen características químicas o espectroscópicas particulares que permita medirlas directamente. Aparte del problema de medir las pequeñísimas cantidades de enzimas presentes en los tejidos.

Esta adherencia en tres puntos pueden conferir asimetría a una molécula por otro lado simétrica. las fosfatasas y ciertas peptidasas a menudo solo son específicas para el tipo de unión atacada – éster. Hay ejemplo de especificidad doble: la xantina oxidasa. peptídica. pequeños cambios en cualquiera de ellos bastán para inactivar la reacción. 1/T) es una medida de la actividad enzimática. cuando los átomos 1 y3 sean idénticos. etc. 13. en relación con el tiempo empleado por la enzima para producir un cambio determinado.La actividad puede espresarce. Por tanto. En consecuencia. En otras ocaciones. que funciona con DPN como coenzima. Si el sitio puede ser alcanzado sólo desde un lado y únicamente los átomos complementarios y los silios pueden interactuar (ambos suposiciones válidas para las enzimas reales).y no D. la actividad de la enzima es menor. y por otro lado . la deshidrogenasa alcohólica. la molécula se unirá sólo en una forma. Algunas de ellas muestran requerimientos estrictos tanto para el sustrato (o los sustratos si se trata de reacciones bimoleculares) como para el tipo de unión química sobre el que van a actuar. un cambio químico puede afectar el átomo uno (pero no al átomo tres) o viceversa. Especificidad enzimática Los distintos grupos de enzimas muestran variaciones considerables en su grado de especificidad.L-lactato. – y no requieren estructuras definidas en el sustrato. próximos a adherirse en tres puntos a un sitio de la enzima. a ambos lados de la unión. los átomos 1 y 3 aunque sean idénticos viene a ser distintos cuando el sustrato está adherido a la enzima. altamente específica para la xantina a la que convierte en ácido úrico. Por lo tanto. representada como un átomo de carbono que tiene tres grupos diferentes. forma L. es absolutamente específica para el DPN. La reacción misma puede estar confinada a los átomos unidos en los sitios 1 y 2 aún. Girando mentalmente la molécula de sustrato en el espacio. Asi mismo. La figura * muestra una molécula de sustrato. Esto puede explicar el porqué la reducción. 14. la recíproca del tiempo (la inversa del tiempo osea el valor que resulta de dividir la unidad sobre el tiempo. tal es el caso de la mayoría de las enzimas. nótese que puede adherirse en tres puntos a un costado del sitio planar con una sola orientación. una vez determinada la reacción. mientras mayor sea el tiempo. las enterasas. pero pude actuar sobre diversos alcoholes aparte del etílico que es su sustrato característico. catalizada enzimáticamente de la molécula del piruvato ópticamente inactiva. Las enzimas son catalizadores estereoespecíficos Casi todos los sustratos forman por lo menos tres enlaces con las enzimas.

al actuar sobre el ácido pirúvico (simétrico) produce exclusivamente ácido D-láctico y no ácido L-láctico. El requisito de estereoespecificidad para los sustratos es muy importante. un método conveniente de separarlas. es el de dejar que actue sobre ellas una enzima que degradará exclusivamente a uno de los dos isómeros dejando al otro intacto. específicamente.so inactivas para los aminoácidos artificiales (o muy raros en los organismos vivos) de tipo D-. aquel para el que la enzima es activa. Por ejemplo. Las enzimas que habitualmente atacan a los azúcares naturales con configuración D-. las enzimas tan activas en la naturaleza sobre los aminoácidos comunes tipo L. y el de la deshidrogenasa glutámica que al atacar el ácido a -cetoglutárico produce solo ácido L-glutámico: CH3CH3 || C = O HCOH || COOH COOH Ácido pirúvico Ácido D-láctico Existen otras formas de isomerismo geométrico aparte del isomerismo D-. osea produce su fosforilación. la formación de uno solo de los productos asimétricos. son identicas.muy activa. L-. como compuestos químicos.y L-. La fumarasa introduce una molécula de agua en el ácido fumárico trans. no es atacado. la enzima provoca. H – C – COOH H – C – COOH HOOC – C – H H – C – COOH Ácido fumárico (trans) Ácido maléico (cis) Las enzimas también pueden distinguir moléculas que desde el puntod e vista estructural. convierte al glicerol en L-grlicerol – 3fosfato. tal es el caso de la deshidrogenasa láctica que. no lo hacen sobre sus isómeros artificiales L-. Tal es la situación de los isómeros cis – trans en que solo uno de los tipos del par es atacado. o sea el ácido maleico. pero exclusivamente en la posición . por medio de ATP. pero en forma inespecífica. Cuando el sustrato es simétrico y el producto es asimétrico. pero el isómero cis. suceptibles de ser reconocidas por enzimas. Esto es tan absoluto que cuando existen mezclas racémicas de isómeros D. al mostrar gran capacidad para mostrar la activación de gran variedad de aldehidos. la glicerol cinasa.

en las dos posiciones posibles 1 y 3. a menudo es necesario dividir finamente el tejido. hecho que se ha demostrado con glicerol marcado con C radiactio. C14. la autolísis . quimicamente simétrica. por ejemplo. está plenamente justificada la necesidad de tener preparaciones puras para hacer el estudio químico completo de su actividad. El desecado con acetona y la producción de los llamados polvos acetónicos constituyen un excelente ejemplo de rotura de la menbrana celualr y la obtención de un material rico en enzimas y de fácil concervación. 15. Cuando las enziams están asociadas a lípidos. En la actualidad se han cristalizado o purificado de manera adecuada cerca de unas 200 enzimas (del posible total de unas 5000 ) y quizas en los próximos años aumente de modo considerable este número.3. el cambio de pH quita las nucleoproteínas y el material grueso. es ventajoso el tratamiento con sustancias de tipo detergente o con butanol que disgregan la estructura lipoprotéica y permiten la salida de las enzimas. de modo que se adapte perfectamente a su centro activo. en uno de los lados de la molécula. Los mismo sucede con el ácido cítrico que al ser oxidado y descarboxilado hasta producir ácido a -cetoglutárico adquiere un grupo –C=O. los procesos alternados de congelamiento y descongelamiento. Preparación y purificación de las enzimas Aun cuando se sabe que las propiedades de las enzimas in situ puden ser muy diferentes a las de las enzimas puras estudiadas en el laboratorio. solo puede adaptarse por completo a la enzima en una sola posición. el desecado con calor o el emmpleo de solventes como la caetona. los tratamientos más enérgicos comprenden la molienda del tejido con arena el empleo de vibraciones ultrasónicas. como sucede con als enzimas mitocondriales. Esta capacidad de la enzima para reconocer el sustrato obedece a que debe tener por lo menos tres grupos químicos orientados en el espaciod e tal modo que el sustrato. La purificación de las enzimas con método de precipitación fraccionada recurre a diversos procedimientos. aunque en apariencia simétrico. Con el empleo del calor a veces se logra la desnaturalización de material protéico inactivo. mientras mayor y más complejo sea este requerimiento mayor será la especificidad de la enzima. por medio de un homogeneizador o una licuadora. Para extraer las enzimas de las células que las contienen. el éter y el tolueno. De todo esto se desprende por el sustrato a los sustratos necesitan tener un patrón peculiar de grupos químicos. con lo que se facilitan los pasos siguientes. en la purificación de la . específicos para cada enzima particular.

de intercambio iónoco o de una verdadera "filtración molecular". como el sulfato de amonio. . lo que no sucede con la transaminasa así protegida. etc. A pesar de esto. por lo que se puede manejar a elevadas concentraciones.cetoglutárico – al homogenado y se calienta hasta 65° C. cada vez más concentradas o con distinto pH. la absorción fraccional tiene gran utilidad para absorver gran material indeseable o para absorber la enzima y luego desprenderla del material absorbente en una forma más pura. como las Amberlitas o las Dowex (aunque tienen el inconveniente de desnaturalizar a las proteínas y de tener poca superficie útil) y diversos derivados de la celulosa. y se recogen los lavados en fracciones de volúmenes determinadas. Sin embargo. . Se agraga a una columna con el material activo la solución de la enzima que queda fijada a dicho material. el Sephadex. Ejemplos de los filtros moleculares lo constituye el material que está compuestod e un polisacárido que forma una rejilla tridimensional. es solo obtención de una actividad específica de un valor constante ante las recristalizaciones repetidas la que ofrece la seguridad de su pureza. etc. El paso final de la purificación es el de la cristalización de la enzima que debe repetirse varias veces pues los primeros cristales suelen estar contaminados con otras enzimas. resians de intercambio iónico. En los últimos años se han logrado adelantos notables en materia de fraccionamiento protéico con el empleo de técnicas coromatográficas en columnas que se basan en fenómenos de absorción. o las sales. Los materiales más usados para este fin son ciertas formas de fosfato de calcio – hidroxiapatita -. con lo que muchas enzimas se desnaturalizan y precipitan. se lava la columna con soluciones de sales. en forma más pura. y en general no ataca la estructura de las enzimas.transaminasa se añade el sustrato de la enzima – ácido a . el análisis por ultracentrífuga. tales como la dietilaminoetil celulosa (DEAE – celulosa) y la carboximetil celulosa (CM – celulosa). la obtención de cristales no demustra que la enzima esté 100% pura. que puede retener proteínas con peso molecular aproximado de 25 000 hasta 200 000 según el tipo que se emplee. muy utilizado para separar diversas proteínas del suelo sanguíneo y la caetona. en alguna porción sale la enzima en estudio. El estudio de la pureza de una enzima comprende la aplicación de las técnicas empleadas para el estudio de la pureza de las porteínas. En otros casos se emplean solventes orgánicos como el etanol. muy usado con este fin en el gel de aluminio C. que es muy soluble en agua. el análisis el electroforético.

II. III. una es de origen mitocondrial. pero que por tener propiedades físicas o estructurales diferentes se deben considerar como isoenzimas. su solubilidad no aumenta al elevar la cantidad de cristales de la proteína problema que se pone en solución. este concepto tiene sus limitaciones. además.aún es podsible. algunas de las cuales tienen la misma actividad enzimática. se llegó así al concepto que es posible que en un tipo de tejido existan diversas y múltiples formas moleculares de una enzima. o de acrilamida demostrar que la enzima en cuestión puede estar formada por varias proteínas. En general las enziams se consideran especies químicas homogéneas y puras cuando llenan requisitos como los siguientes: su actividad no debe aumentar después de que se la recristaliza repetidas veces. por ejemplo. inmunológica. Isoenzimas Al hacer el estudio electroforético del suero humano normal y hacer un revelado de la actividad de la deshidrogenasa láctica se encontró distribuida en cinco bandas diferentes. en el corazón dominan el I y la II. su molécula se fragmenta en cuatro porciones. el caso de la deshidrogenasa láctica es muy ilustrativo. En otras ocaciones la diferencia eside en las propiedades cinéticas. o H (de "heart". al tratar la enzima –que pesa 135 000 – con úrea o guanidina. actuan de modo distinto cuando se les pone en contacto con los análogos artificiales del DPN y. como losd e la electroforésis en gel de agar. sin embargo. si se somete la enzima a fraccionamientos más sensitivos. la otra se encuentra en el sobrenadante celular. cada una de las cuales tiene un peso molecular de unos 35 000. el higado tiene un predominio de la V. etc. estructural. etc. y otras que son proteinas que se han procesado a lo largod e todas las etapas de purificación. IV y V que parecen ser características de distintos tejidos. tanto en el análisis realizado con la ultracentrífuga como en los diversos métodos electroforéticos se encuentra un patrón de mobilidad único y persistente. Sin embargo. 16. a las que se denominan isoenzimas. existen dos deshidrogenásas málicas que catalizan la misma reacción. Son por lo tanto proteínas con actividad catalítica que favorece la misma reacción pero que pueden distinguirse por alguna característica física. Las cinco isoenzimas comunes de la hidrogenasa láctica parecen sermezclas de dos tipos básicos A y B. de almidón. En el ejemplo antereior sus diferencias se rejistraron en la velocidad de migración electroforética. corazón) y de m (músculo) de la siguiente manera: . Esta enzima se diferencia en 5 isienzimas denominadas I.

Lo mismo sucede con músculos de un mismo animal. este tipo. La actividad de las deshidrogenasas lácticas ante sus sustratos normales. características cineticas y otras . si tienen que trabajar constantemente muestran grandes proporciones de la forma H (I). quizá aun más importante sea el aspecto funcional. H HHHM Tipo II HHMM Tipo III HMMM Tipo IV MMMM Tipo V. lactato. muestran diferencias considerables en su composición de aminoácidos. funcionalmente. para lograr una mayor exidación del lactato a ácido pirúvuco. regulan funciones celulares importantes. composición de aminoácidos. la enzima tipo M o V funciona más bien como una reductasa del piruvato. que a su vez. en cambio tiene menos del uno por ciento de ella. No solo las características fisicoquímicas son diferentes. y ante los análogos del DPN indican el papel de la enzima en la regulación de las relaciones DPN/DPNH2. M Se ha confirmado inmunológicamente su presencia. Por el contrario la tipo H (I) funcionan preferentemente en músculos que deben realizar un ejercicio sostenido y en los que las necesidades energéticas se satisfacen por medio de un metabolismo aeróbico intenso. La distribución de la enzima con respecto a la aerobiosis (o anaerobiosos) del tejido se ha comprobado en varios casos: la de tipo H (I) es más abundante en la corteza renal (cerca de 100%) que en la médula (50%) en las papilas (10%). esfuerzoz extraordinarios. en los pectorales de las aves migratorias que deben sostener por horas y aun días. como el dorsal ancho de las gallinas que casi en el 100% muestran dicha forma. en rigor. el pectoral. está capacitado. en razón directa con el grado deaerobiosis de esas zonas renales. Es muy notable la diferencia en la inhibición producida por un exceso de piruvato sugerente de que.HHHH Tipo I. o en tejidos con poco oxígeno (anaerobiosis). miocárdico. los anticuerpos preparados contra ambas moléculas originales H o M nomuestran reacción cruzada entre si. Del mismo modo. muscular. por lo tanto. en cambio. piruvato. Es obio que cuando son muy marcadas las diferencias de pesos moleculares. aparece nuevamente la forma H (I) de preferencia a la M (V). pero si reaccionan con los híbridos formados de H y de M. Esta forma (M o V) es muy útil en los músculos voluntarios que presentan demandas bruscas de energía proporcionadas por la glucólisis.

es dificil hablar de isoenzimas. como la temperatura y las concentraciones de las sustancias reaccionantes que. y un acceptor de hidrógeno adecuado. Además intervienen el PH medio donde se realiza la reacción.propiedades físicas. su tamaño coloidal puede causar fenómenos de adsorción o diversas reacciones debidas a sus numerosas cargas eléctricas. la presencia de los productos de la reacción. de tamaño coloidal y de composición difícil de precisar. 18. Es universalmente aceptado. aparece una nueva distribución de las bandas. estuvo acorde con los datos experimentales obtenidos una vez vencidos los enormes obstáculos de . Relaciones entre la enzima y el sustrato. automáticamente desaparecen las bandas nuevas y reaparecen las originales de peroxidasa. impide la aplicación de dichas leyes de una manera estricta. sobre la base de la información de un compuesto de la enzima con el sustrato (complejo enzima – sustrato). como todo catalizador. El desarrollo matemático que permitió a Michaelis formular su hipótesis. participa de una manera activa en la reacción. produce la reducción del H2O2. por ejemplo. más conveniente es considerarlas entonces como enzimas distintas que simplemente catalizan la misma reacción reservando el término de isoenzima para aquellas situaciones como la de la deshidrogenasa láctica que representan agregados híbridos de composición relativamente parecida. de alto peso molecular. 17. los factores que afectan la velocidad de la reacción enzimática son los ya señalados a propósito de las reacciones químicas en general. Si se permite el paso de los hidrógenos a un acceptor. en presencia de peróxido de hidrógeno. La peroxidasa en ausencia de H2O2 muestras unas bandas de absorción características en el espectro visible. son la enzima el sustrato. H2O2. Se acepta corrientemente una hipótesis propuesta por Michaelis para explicar la actividad enzimática. No obstante. Cinetica de las reacciones enzimaticas Aunque las leyes generales de la catálisis debieran ser válidas para las enzimas. pero sin que exista el acceptor de los hidrógenos. Existen pruebas experimentales de esta situación cuando menos para algunos. y otros factores secundarios como las radiaciones y los efectos óxido – reductores. . cuando se combina con el H2O2 . previamente al ataque del sustrato por la enzima y a la liberación de los productos de la reacción. en este caso particular. que la enzima. el hecho de que éstas sean sustancias complejas. Un ejemplo bien conocido es el de la peroxidasa que.

5. si la concentración de sustrato que se requiere para alcanzar la mitad de la velocidad es muy pequeña (KM pequeña). la cual tiene algunas propiedades interesantes. la cantidad creciente de sustrato y. en la enzima. actuando sobre albúmina.4 por ciento . sobre la hipótesis de formación de un complejo enzima – sustrato. la sacarasa es 16 veces más activa para atacar a la sacarosa que a la rafinosa. está señalada con la línea V. por ejemplo.016 a 0. que la afinidad por la enzima y sustrato es pobre. fijado arbitrariamente. que expresa. la misma enzima puede ser más afín a un sustrato que a otro. esta concentración de sustrato se representa habitualmente como KM. las relaciones de afinidad entre el sustrato y la enzima. en la figura. etc. sobre la sacarosa : KM 0. o sea. es el valor que trata de alcanzar la curva a medida que se aumenta el sustrato y que. la cantidad de uno de los productos de la reacción liberada de un tiempo dado. La curva obtenida es la de una hipérbola rectangular. es la concentración de sustrato con la cual se alcanza la mitad de la velocidad límite o velocidad máxima de la reacción. En ella se registran. La explicación de la curva hiperbólica que implica la formación del complejo enzima – sustrato parece depender de la existencia física. quiere decir que el sustrato tiene una gran afinidad por la enzima. por ejemplo. de huevo: KM de 4. la amilasa sobre el almidón en presencia de Cl – : KM de 0. Existe un punto. con los siguientes: la pepsina. Si se hace el estudio de la actividad de una enzima en relación con la concentración de sustrato. La constante de Michaelis. produzca la mitad de la velocidad máxima. en las abscisas. Se conocen con exactitud los valores de KM para muchos sustratos y enzimas. por lo tanto. en las ordenadas. la sacarasa de levadura. valor característico para un par – enzima – sustrato y que. y se denomina constante de Michaelis. indica en términos generales. implica la necesidad de una alta concentración de sustrato que.04 M. un KM. la actividad de la enzima. Los resultados obtenidos experimentalmente concuerdan con los derivados de modo matemático.orden técnico para llevar a cabo la confirmación de la teoría en el laboratorio. la velocidad límite o velocidad máxima. la tripsina sobre la caseína :KM de 2 por ciento. en rigor. por el contrario. de determinados sitios donde se absorbe el sustrato para ser . en el que la mitad de la velocidad límite corresponde a una concentración específica del sustrato. En ocasiones. al combinarse con una enzima. por ciento. KM.

a 38º C. De acuerdo con los términos ligados a la velocidad de reacción. tiene un número de recambio de 1.. expresados en la página 36. tiene un número de recambio de 2. la curva alcanza una meseta. la carboxialasa a 30º C. Accion de inhibidores. metal y sustrato en la que os iones metálicos pueden actuar como catalizadores ácidos generales o facilitar la aproximación de los reactantes. se dice que el sistema ha sido inhibido. la reacción avanza a través de los fenómenos alternos de adición de sustrato y liberación de producto . Otra característica en relación con la finalidad de la enzima por el sustrato es la comprendida en el llamado número de recambio. la reacción es independiente de la cantidad de sustrato y.activado. generalmente un minuto. Cuando la cantidad de sustrato ha sobrepasado la capacidad física de la enzima para recibirlo y poder transformarlo. y en vista de la cantidad creciente del sustrato. 19.5 millones. al principio del experimento. al final de ella. Este número de recambio. la línea obtenida no es una recta. Mecanismo Ping Pong En la transaminación. cuando hay un exceso de sustrato. pero como una vez activado el sustrato se separa en forma de los productos. Iones sustrato Estos facilitan la fijación del sustrato y la catálisis por creación de varias de complejo de puente constituidos por un enzima. y la velocidad con la que éstos se separan no es igual a la velocidad con la que captado el sustrato.4 X 103 . el citrocomo c. y la sustancia usada con estos fines se denomina inhibidor. como sucede con la catalasa que a 0º C. el cual representa los moles de sustrato atacados por un mol de enzima en una unidad de tiempo determinada. Si a un sistema enzimático se añaden sustancias que impidan la realización de la actividad propia de la enzima. etc. de desdoblar dos y medio millones de moles de H2O2 . es muy elevado. es decir. la reacción depende exclusivamente de la concentración del sustrato y se trata de una reacción de primer orden. independientemente de la cantidad de sustrato adicionada. da un número de recambio de 1 X 103 . es de orden cero.. en un minuto. sino la curva señalada. un mol de enzima es capaz. . Al principio de la curva se puede aumentar la concentración del sustrato y la enzima es capaz de activarlo con toda eficiencia. se encuentra que. lo que significa que la reacción prosigue a la misma velocidad. en algunas ocasiones. por lo tanto.

que sólo cierto sustrato y cierta enzima son los susceptibles. los cuales forman parte de una gran variedad de enzimas. y no se lleva a cabo la . Diversas sustancias parecidas al ácido succínico. como aniones complejos o metales pesados. la actividad enzimática se restablece por completo. un fenómeno de competencia entre el sustrato natural y el inhibidor para ocupar el sitio activo de la enzima. a su vez. ya que éstas son moléculas proteínicas. de esta manera. lo que demuestra que su acción no es específica. Al añadir el inhibidor. De acuerdo con esto. en el sitio de la reacción . en presencia de ácido succínico en ácido fumárico. El sustrato no puede entrar al lugar activo. ya que se forma un complejo enzima – inhibidor . al acceptor de H. no se separa. y cuando las cantidades de ácido succínico añadido sobrepasan considerablemente a las presentes del inhibidor. Esta situación representa. simultáneamente. la enzima queda bloqueada por éste. aparentemente. sino que afectan a tosa molécula proteínica . susceptibles a una diversidad de agentes. si se añaden cantidades mayores del sustrato natural de la enzima (en el ejemplo anterior. como el ácido malónico. especialmente químicos. se impide la acción enzimática. es posible clasificar los fenómenos de inhibición enzimática en diversos grupos : inhibición por competencia e inhibición por no competencia y ésta. en un momento dado. en la debida a agentes desnaturalizantes y a agentes inespecíficos. el oxálico y el glutárico. Tal es el caso de los inhibidores de sufhidrilos. si hay más inhibidor. que está ocupado por el inhibidor y. Pb ++. Inhibicion por competencia En este caso el inhibidor no permite la formación del complejo enzima – sustrato normal. 20.Muchos inhibidores son agentes que desnaturalizan a las enzimas. la actividad enzimática disminuye sin embargo. Otras sustancias bloquean específicamente determinadas reacciones enzimáticas y su especificidad es tal. Ag ++. se pueden combinar con la enzima e impiden su acción sobre el ácido succínico. Zn ++. reduciendo. -SH. El ejemplo clásico de inhibición competitiva es el de la enzima deshidrogenasa succínica que. A menudo estos agentes que impiden la actividad enzimática actúan sobre casi todas las enzimas. la cantidad presente de una sustancia o de otra . por lo tanto. en vista de que la enzima no tiene acción sobre el inhibidor y. una vez que el inhibidor ocupa el lugar activo de la enzima. queda bloqueada la parte activa de la enzima. de ácido succínico) nuevamente empieza a aparecer actividad enzimática. determina si se dirige en un sentido o de otro. el complejo enzima – inhibidor. etc.

la lewisita. Esta inhibición se denomina metabolitos las sustancias presentes o producidas en el curso del metabolismo celular. se ven afectadas por igual todos o cuando menos varios tipos de enzimas. en ocasiones se trata de la desnaturalización de la enzima.reacción enzimática . y otras sustancias de tipo arsenical que deben sus efectos letales a su combinación con los grupos sulfhidrilo de proteínas y enzimas de gran importancia fisiológica. como expresó en el caso del ácido malónico y el ácido succínico con respecto a la deshidrogenasa succínica. Antagonismo metaboloco (antimetabolitos) Las enzimas pueden ser inhibidas por diversos compuestos. En otros casos la combinación irreversible se hace con sustancias que actúan de manera específica sobre ciertos grupos activos de la enzima. Hay enzimas que contienen iones metálicos indispensables para su actividad y que son susceptibles a la acción inespecífica de agentes que afectan dichos iones. éste domina al inhibidor y llega a desplazarlo introduciéndose en los sitios activos de la enzima para permitir que se reanude la actividad catalítica. De la misma manera. Entre los inhibidores de sulfhidrilos más conocidos se encuentran el ferricianuro. el yodacetato. se trata de inhibición por no competencia. En este caso. en estas circunstancias. sin embargo. común a todas las moléculas proteínicas y. el inhibidor bloquea loas sitios activos de la enzima de modo irreversible . y antimetabolitos las sustancias parecidas a aquéllos. e impedir la actividad de enzimas que los requieren. Inhibicion por no competencia Cuando las sustancias inhibidoras actúan independientemente de la calidad del sustrato natural presente. el famoso gas usado con fines bélicos. como cuando se añaden aniones o cationes que precipitan las proteínas. por lo tanto. a las enzimas. 21. o sobre la conformación o estructura completa de ella . presente en las cadenas laterales del aminoácido cisteína. tal es el caso de las enzimas con hierro que son intoxicadas por medio del cianuro o el H2S. -SH. Existen algunos inhibidores no competitivos que muestran cierta especificidad. especialmente los que presentan una estructura parecida al sustrato natural. como los agentes bloqueadores del radical sulfhidrilo. y que impiden su aprovechamiento y . 22. la adición de oxalato a un sistema puede precipitar el calcio o el magnesio. si aún en presencia de importantes cantidades de inhibidor existen mayores cantidades del sustrato natural.

la estreptomicina contiene glucosamina. siempre que se añadieran grandes cantidades de ácido p-aminobenzoico. es posible que de esta manera ejerza su acción de antibiótico. etc. bacterias. sustancias que tienen amplio campo de acción de diversas infecciones producidas por bacterias grampositivas o gramnegativas.. El ácido piridín – 3 sulfónico impide la acción de la vitamina natural parecida a él. la estreptomicina. producen sustancias que muestran actividad contra otros microorganismos. que normalmente es un inhibidor de su crecimiento. una vitamina necesaria para la nutrición celular. en principio. estreptosa y estreptidina. o ácido nicotínico y perturba numerosas reacciones de . Químicamente. cuando éstos son del tipo de las vitaminas. Numerosos hongos. como la penicilina. en general. actinomicetos. son sustancias complejas formadas por distintos grupos :por ejemplo. Algunos antibióticos son péptidos. Estas sustancias se han denominado antibióticos y. Entre los antibióticos. de antivitaminas . muy comunes en las del grupo B. el crecimiento de determinadas formas microbianas. se aceptó que los fenómenos de inhibición tenían una base estructural. ya que en ciertas condiciones se usan para reprimir el desarrollo de gérmenes patógenos para los seres humanos. la sulfanilamida y el ácido p-aminobenzoico. a nivel enzimático. con los metabolitos naturales. en estos casos. existen algunos de gran utilidad terapéutica. la tiamina modificada en su estructura química para formar piritiamina o oxitiamina. En vista del parecido estructural entre las dos moléculas. proveniente de cultivos de Streptomyces griseus. se deben considerar como antimetabolitos que impiden. Muchos antimetabolitos suelen intervenir de modo específico a nivel de las coenzimas o de los grupos prostéticos. aislada de diversos hongos Penicillium . por razones de competencia . por lo tanto. de tipo básico. y las tetracilinas. Se trata. en vista de su parecido estructural. El estudio de los antimetabolitos probablemente se inició al observar que numerosas bacterias podían crecer en un medio que tuviera sulfanilamida. idéntica a la enzima glucosa oxidasa que ataca a la glucosa permitiendo su conversión a gluconolactona y ácido glucónico . no participa en los procesos de descarboxilación. Así. aislados de bacterias.utilización . Un ejemplo peculiar de antibiótico producido por el hongo Pemicillium notatum es la notatina. En medicina ha resultado del mayor interés el aislamiento y la actividad de los antibióticos. tales como la gramicidina y las tirocidinas. se trata de sustancias que compiten.

estos trabajos se han planeado para deprimir la velocidad de desarrollo de células cancerosas.alguna sustancia llamada efector alostérico . 23. pueden existir dos (o cuando menos dos) sitios diferentes desde el punto de vista estereo.deshidrogenación. que puede ser común a un gran número de sustancias con estas propiedades : en el tumor falta la enzima que destruye el antimetabolito. pero ocurre también en animales superiores. Parte de la explicación de este efecto (pág. es la regla que el metabolito formado al final de un camino metabólico. que modifica la actividad biológica de la proteína. de la misma manera. que produce inhibición tumoral por el siguiente mecanismo.alimentación" o "por producto final" . en las proteínas. resulte un poderoso inhibidor de su propia síntesis. Se han preparado numerosas sustancias parecidas a las bases púricas y pirimidínicas con la finalidad de bloquear los sistemas de formación de proteína. que dependen de la presencia de ácidos nucleicos que contienen dichas bases.específico y que. dicha sustancia es menos tóxica para el tejido normal que sí está en posibilidad de destruirlo. Entre las sustancias obtenidas en fechas recientes se puede señalar el grupo del 5 – fluorouracilo. por su características. Inhibicion alosterica De gran importancia en el fenómeno de la actividad enzimática es el hecho de que. donde el sustrato es atacado para dar origen a los productos de la reacción y por lo tanto donde reside el aspecto funcional de la proteína. en este caso el 5 – fluorouracilo. En rigor. fue denominado "por retro. Un de estos sitios es el centro activo. en el interior de la células. 535) se debe a que dicho metabolito inhibe específicamente a una sola enzima localizada en el camino metabólico que forma a dicha . al efectuarse esta unión se produce una alteración discreta de la estructura de la proteína. porque altera la distancia. La piridoxina es antiorganizada por la desoxipiridoxina y la biotina. en cambio. por la destiobiotina. El efecto alostérico se ha estudiado de manera especial en bacterias. estén en lugares distintos. la transición alostérica. las propiedades del sitio activo. además. el cual se vuelve muy agresivo hacia el tumor ya que no es degradado por él.pero reversible . en las bacterias. El otro sitio denomina sitio alostérico y en él puede acomodarse de manera complementaria . Es muy importante que el efector alostérico normal no tiene relación química o metabólica alguna con el sustrato de dicha enzima y que su acción tan específica se debe a que altera de tal modo la conformación de la proteína que modifica su centro activo. En un principio se reconoció como un efecto inhibidor que.

ADP. la estructura inactiva está formada por 2 unidades y la activa por 4. que es activada por la adición de citrato. con ejes de simetría definidos. por una parte. siendo muy específicas para ambos. o sea la molécula pasa a forma de polímero activo a partir de monómeros inactivos. siendo E el metabolismo final. éste inhibiría a la primera enzima la que forma B a partir de A. Enzimas: regulacion de actividades La regukacion del metabolismo logra la homeostacia La regulación de la actividad enzimática contribuye en gran parte a preservar la homeostasia que. Las proteínas alostéricas pueden corresponder a polímeros. hace susceptibles a la enzima a los inhibidores. al demostrarv que es factible modificar la acción de las enzimas por cambios en la estructura cuaternaria de las proteínas. a recibir (fig. Más aún.unidades idénticas. con el inhibidor. o por el contrario. con peso molecular de cerca de 1 millón puede partirse en subunidades de 250 000 por diversos agentes : DPN. Un caso ya clásico es el de la fosforilasa inactiva que se convierte en activa cuando se fosforila. basados en la asociación y disociación de subunidades. El hecho de que se agreguen las subunidades. se acepta que la unión con la enzima debe efectuarse en sitios diferentes. Como químicamente el sustrato y el efector alostérico son muy distintos. distinta. Otro ejemplo es la carboxilasa de la acetil coenzima. 3-10) al sustrato y llevar a efecto su acción característica.sustancia. Estos fenómenos adquieren una importancia de tipo general. lo que ha demostrado con mutantes bacterianas no sensibles al efector alostérico . para el caso de la transcarbamilasa aspártica se ha demostrado que una subunidad se combina con el sustrato y otra. a moléculas compuestas de sub. Además. En este capítulo en que se estudia la regulación metabólica se analizan con detalle algunos de estos ejemplos y las reacciones químicas individuales afectadas. y de manera curiosa. En un ejemplo de camino A B C D E. estrógenos tiroxina y ciertos aminoácidos . la enzima sensible al metabolito final es la primera de este camino metabólico. A. el cual cambia el coeficiente de sedimentación de la enzima de 18 S a 43 S. mantiene un entorno intracelular e . Algunos ejemplos particulares son los siguientes : la deshidrogenasa glutámica. La inhibición alostérica demuestra la alta especialización de las enzimas que reconocen tanto al sustrato como al inhibidor. 24. es decir. no hay interacción directa entre el sustrato y el inhibidor puesto que los sitios receptores están muy separados. y el que al estar en forma polimérica adopten diversas situaciones conformaciones.

a la enzima regulada en general a sitios ( alostéricos ) bastantes separados del sitio catalítico . Km y Vmax. presencia o ausencia de agua o tipos específicos de alimentos.intraorgánico relativamente constante en presencia de fluctuaciones amplias en al medio ambiente externo. las alteraciones rápidas y mínimas en la actividad catalítica de enzimas reguladas clave tienen funciones importantes en la canalización selectiva de metabolitos hacia uno u otro proceso metabólico . como cambios de temperatura. Bibliografia . por ende la ecuación de Michaelis Menten no se aplica. A menudo las curvas de saturación de sustrato para la inhibición alostérica son sigmoideas. Como conservar la homeostasia Las concentraciones locales de sustrato . Las enzimas reguladoras Tienden a ser aquellas que catalizan una reacción temprana única ( con frecuencia la primera ) de una secuencia determinada de reacciones metabólicas . La modulación se logra cuando matabolitos específicos se unen en forma covalente y no covalente. Tres mecanismos generales regulan la actividad enzimatica Por ejemplo el flujo neto de carbono en una reacción catalizada en una reacción enzimática podría ser influido 1. La modulación de actividad enzimática por cambios en la conformación del sitio catalítico puede incluir la alteración de Km para un sustrato de Vmax para la reacción global o para efectos sobre los dos. 2. 3. cuando no hay síntesis proteínica nueva ni degradación proteínica . Alterando la eficacia catalítica de la enzima (estas tres opciones son utilizadas e casi todas las formas de vida). Alterando el tamaño del conjunto de sustancias reaccionantes distintas de la enzima. Cambiando la cantidad absoluta de enzima presente .cambios repetidos entre estados bajo y alto de actividad catalítica . 25. compartición de enzimas y secreción como proenzimas o cimogenos ( como por ejemplo la quimiotripsina ) sin actividad catalítica contribuyen a la regulación de los procesos metabólicos . La actividad catalítica de las enzimas reguladas puede modularse por ejemplo . Además .

contiene la evolucion de la enzimologia caracteriasticas como actuan en el organismo . Rodwel... Jose Bioquimica. et alli Bioquimica de Harper. II. etc .A. 1969.d.. Facultad de Medicina. Laguna.F. Fournier S. y agilizar determinados procesos sintéticos y analíticos de la vida . 2ª ed. UNAM. facilitar.. s. Mexico D.I. 13ª ed. que tienen el poder de catalizar. Tema : Enzimas Curso : Química Año:1999 Resumen: trata de las enzimas.