EXAMEN GENERAL DE ORINA

El anlisis de la orina es probablemente uno de las mejores exmenes no invasivos de los que se dispone actualmente. Este anlisis puede dar informacin acerca de problemas renales o incluso sobre el funcionamiento general del organismo. El uroanlisis es en realidad un conjunto de pruebas que dan una idea general acerca de la orina desde el punto de vista fsico, qumico y microscpico y de este modo permite obtener una idea general del estado de salud del organismo. Tanto as que algunos mdicos han llamado al uroanlisis una biopsia lquida y siempre es uno de las pruebas ms solicitadas al laboratorio clnico1. Definicin del Examen General de Orina. Un examen general de orina est constituido por un conjunto de pruebas que detectan y miden de manera semicuantitativa distintos componentes eliminados por la orina, incluyendo productos intermediarios del metabolismo as como tambin clulas, bacterias, y fragmentos celulares 1,2. La orina es producida por los riones, localizados a ambos lados de la columna vertebral por debajo de la caja torcica. Los riones filtran productos de desecho y productos metablicos intermediarios eliminndolos de la sangre, a la vez que ayudan a regular la cantidad de agua del organismo; todo ello, conservando protenas, electrolitos y otros compuestos que el organismo puede reutilizar 3. En general la orina est constituida por urea y otras sustancias qumicas organicas e inorgnicas disueltas en agua. Suele contener 95% de agua y 5 % de sulutos, aunque puede haber variaciones considerables debido a diferentes factores externos o internos.

Todo lo que no es necesario se elimina por la orina, siendo transportada la orina desde los riones hasta la vejiga urinaria, y excretndose al exterior a travs de la uretra4. El anlisis de sedimento urinario se puede valorar mediante mtodos manuales y automatizados. Funcin del Anlisis General de Orina. Son muchos los trastornos de salud que pueden detectarse de manera precoz a travs del hallazgo de anomalas en la orina. Entre estos hallazgos se incluyen la presencia de concentraciones elevadas de ciertos constituyentes que no se encuentran normalmente en orina en cantidades significativas como: glucosa, protenas, bilirrubina, clulas sanguneas (hemates y leucocitos), cristales y bacterias
4,5.

Es posible que estas sustancias se hallen en orina porque se

encuentran a concentraciones elevadas en la sangre y el organismo intenta disminuir los niveles sanguneos eliminndolos por la orina, o bien porque en la enfermedad renal la capacidad de filtracin de los riones sea menos efectiva, o porque existe una infeccin bacteriana 4,5. Cuando se padecen sntomas de infeccin del tracto urinario, como dolor abdominal, dolor lumbar, emisiones de orina frecuentes o dolorosas, o cuando aparece sangre en la orina; tambin formando parte de una revisin durante un embarazo, o de un ingreso hospitalario, o del estudio preoperatorio antes de una intervencin quirrgica es recomendable este tipo de estudios.

Parmetros que se miden en el Examen General de Orina. El Examen General de Orina consiste de tres pruebas que se le realiza a la muestra de orina: Examen Fsico Dentro de los diferentes aspectos fsicos de la orina, el laboratorio clnico debe evaluar el aspecto y color. Aspecto. El aspecto normal de la orina es transparente o lmpido y cualquier variacin a este criterio debe ser analizado y comprobado por estudios complementarios, incluso en el microscopio. Muchas causas pueden ser responsables de orinas turbias, ante este hallazgo debe investigarse la posibilidad de que est causado por el uso de medios de contraste utilizados en radiologa, de lociones, de talcos y de cremas o estar en presencia de clulas epiteliales, moco, espermatozoides, lquido prosttico, materia fecal o menstruacin. Color. La orina normal tiene un color mbar (amarillo claro) caracterstico. El color de la orina depende de los urocromos, que normalmente se encuentran all presentes, como porfirinas, bilirrubina y uroeritrina. Es importante aclarar que un color diferente al normal no necesariamente indica enfermedad pues esta situacin puede presentarse por algunas drogas o alimentos4.

Examen Qumico. En la actualidad, y gracias a los avances logrados con las tiras para orina, el laboratorio clnico est en capacidad de medir, con alto grado de sensibilidad y especificidad, dentro de un uroanlisis de rutina los siguientes parmetros se pueden determinar: densidad, pH, protenas, glucosa, cuerpos cetnicos,

urobilingeno, bilirrubina, nitritos, leucocitos y eritrocitos. Densidad. Principios de la Prueba. Valores de referencia: 1.016 a 1.022. A diferencia de la osmolaridad, que depende slo del nmero de partculas en la orina, la gravedad especfica depende tanto del peso como del nmero de ellas. Es as como sustancias de alto peso molecular pueden aumentar significativamente la gravedad especfica sin mayor modificacin de la osmolaridad. Utilidad clnica de la prueba. Como parmetro de laboratorio, la gravedad especfica ofrece al mdico informacin importante sobre el estado de hidratacin y de la capacidad de concentracin de los riones de un paciente. La gravedad especfica de la orina se aumenta en presencia de glucosuria, en el sndrome de secrecin inapropiada de la hormona antidiurtica y puede estar disminuida por el uso de diurticos, en la diabetes inspida, en el hiperaldoste. pH urinario. Principio de la prueba. La prueba se basa en la combinacin de tres indicadores: el rojo de metilo, el azul de bromotimol y la fenolftalena, que reaccionan con los iones de hidrgeno, presentes en la muestra de orina. Las reacciones producen cambios

cromticos, que van del naranja al verde amarillo y al azul, mediante una tabla de comparacin puede leer o el lector de tiras detectar para determinar el pH de la orina. Antes de interpretar el pH de la orina vale la pena recordar que los riones normales producen orina con pH de 4,6 a 8,0, usualmente ste se encuentra alrededor de 5,5 a 6,5 3,5,6,7. Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: 4,8 a 7,4 a lo largo del da y 5,5 a 6,5 en la orina de la primera muestra de la maana. En trminos generales, a excepcin de los pacientes con acidosis tubular renal, el pH de la orina refleja el pH srico. La incapacidad para acidificar la orina a un pH menor de 5.5, a pesar de un ayuno prolongado y de la administracin de una carga de cido, es considerado como el sello caracterstico de la acidosis tubular renal 6 Protenas. Principio de la prueba. La prueba se basa en el denominado error de protena de los indicadores de pH. En la zona de reaccin de la tira hay una mezcla tampn y un indicador que cambia de color amarillo a verde en presencia de protenas en la orina, aunque el pH se mantenga constante. Estos cambios cromticos pueden ser detectados para determinar la presencia de protenas en la orina. La reaccin es particularmente sensible a la albmina, siendo positiva a partir de concentraciones de albmina mayores de 6 mg/dL.

Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: negativo (< 10 mg/dL). En personas sanas, la pared capilar glomerular es permeable slo a sustancias con un peso molecular menor de 20.000 daltons. Desde el punto de vista prctico, la proteinuria detectada por la tira reactiva cualitativamente, en cruces, se correlaciona cuantitativamente en la siguiente escala: 1+ (una cruz) corresponde aproximadamente a 30 mg/dL de protena, ++ corresponden a 100 mg/dL, +++ a 300 mg/dL y ++++ a 1.000 mg/dL. Glucosa. Principio de la prueba. La deteccin de la glucosa se basa en una reaccin especfica de la glucosa oxidasa/peroxidasa (mtodo GOD/POD), en la cual la D-glucosa se oxida enzimticamente por el oxgeno del aire y se convierte en D-gluconolactona. El perxido de hidrgeno resultante, oxida, bajo la catlisis de la peroxidasa, al indicador (TMB: tetra-metil-bencidina) para dar una coloracin azul-verdosa sobre el papel amarillo reactivo de la tira, para determinar la presencia de glucosa en la orina. La reaccin es especfica para glucosa y no depende del pH ni de la gravedad especfica de la orina, ni se ve afectado significativamente por la presencia de cuerpos cetnicos. Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: negativa (< 30 mg/ dL). Normalmente la glucosa es filtrada por el glomrulo, pero sta es reabsorbida casi completamente en el tbulo proximal. La glucosuria ocurre cuando la carga de glucosa filtrada excede la capacidad de reabsorcin

Cetonas. Principio de la prueba. La prueba se basa en el principio de la prueba de Legal. El cido acetoactico y la acetona reaccionan con nitroprusiato sdico y glicina en un medio alcalino para formar un complejo color violeta para determinar la presencia de cetonas en la orina. La reaccin es especfica para el cido acetoactico y la acetona. No es interferida por el cido beta-hidroxibutrico ni por la presencia de glucosa, protenas y cido ascrbico en la muestra. Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: negativo (< 5 mg/ dL). Las cetonas (cido acetoactico, beta-hidroxibutrico y acetona) aparecen en la orina cuando en el organismo se produce un aumento de la degradacin de las grasas por un aporte energtico insuficiente de hidratos de carbono. Urobilinogeno. Principio de la prueba. Es una sal de diazonio estable presente en la tira reactiva, la cual reacciona casi inmediatamente con el urobilingeno, dando lugar a la formacin de un colorante azoico rojo. Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: negativo (<1 mg/ dL). Normalmente la orina contiene slo pequeas cantidades de urobilingeno, producto final de la bilirrubina conjugada luego de haber sido excretada por los conductos biliares y metabolizada en el intestino por la accin de las bacterias all

presentes. El urobilingeno es reabsorbido a la circulacin portal y eventualmente una pequea cantidad es filtrada por el glomrulo. La prueba de tira es especfica para el urobilingeno y no se afecta por los factores interferentes como ocurre en la prueba de Ehrlich. Bilirrubina. Principio de la prueba. La prueba se basa en la unin de la bilirrubina con una sal de diazonio estable (2,6-diclorobenceno-diazoniofluoborato) en un medio cido del papel reactivo. La ms leve coloracin rosada indica un resultado positivo. Interpretacin de la prueba y utilidad clnica. Valores de referencia: negativo (< 0,2 mg/ dL). Las reacciones que se presentan en la tira son muy sensibles y pueden detectar cantidades tan pequeas como 0,05 mg/dL de bilirrubina en la orina. La bilirrubina conjugada es soluble en agua y en consecuencia puede encontrarse en la orina de pacientes con ictericia obstructiva, dao heptico y cncer de pncreas o de conductos biliares, en tanto que la bilirrubina no conjugada, la que resulta de procesos hemolticos, es insoluble en agua y no pasa a travs del glomrulo y por lo tanto no aparece en la orina8. Por consiguiente, en ictericias hereditarias, como en la enfermedad de Dubin-Johnson y en el sndrome de Rotor es positiva y es negativa en el sndrome de Gilbert y en la enfermedad de Crigler-Najjar Nitritos. Principio de la prueba. La prueba se basa en el principio del ensayo de Griess y es especfica para el nitrito.

La reaccin revela la presencia de nitrito y por lo tanto, indirectamente, la existencia de bacterias formadoras del mismo en la orina, coloreando el tampn de la prueba de color rosa rojizo, que determina la presencia de nitritos en la orina Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: negativo. Los nitritos normalmente no se encuentran en la orina, se producen cuando las bacterias reducen los nitratos urinarios a nitritos. La mayora de los organismos Gram negativos y algunos Gram positivos son capaces de realizar esta conversin, por lo que un resultado positivo indica que estos microorganismos estn presentes en una cantidad considerable (ms de 10000/mL). Leucocitos. Principio de la prueba. La tira tiene una zona que contiene un ster de indoxilo que es disociado por la esterasa leucocitaria. El indoxilo libre reacciona con una sal de diazonio para formar una tincin violeta. Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: negativo (<10 leucocitos por mL). Los leucocitos excretados en la orina son casi exclusivamente granulocitos (polimorfonucleares neutrfilos y eosinfilos) y la tira reactiva detecta su presencia mediante la actividad de la estearasa que poseen. La prueba de estearasa detecta la presencia de leucocitos a niveles tan bajos como 5 clulas por campo de alto poder, tanto ntegras como lisadas, situacin que explica porqu un resultado positivo en la tira puede ser negativa para leucocitos en el sedimento.

Sangre. Principio de la prueba. La prueba detecta sangre completa (eritrocitos), sangre lisada (hemoglobina) y mioglobina. Para lograr el objetivo, la prueba se basa en la accin peroxidativa de la hemoglobina o la mioglobina que cataliza la oxida-cin del indicador cromtico (TMB: tetrametil- bencidina) mediante un hidroperxido orgnico, el 2,5dimetilhexano-2,5-dihidroperxido, para producir un color azul verdoso que sobre el papel amarillo de la tira para determinar la presencia de hemoglobina (en forma de eritrocitos o hemoglobina libre) o mioglobina en la orina. Interpretacin de la prueba. Valores de referencia: negativo (0 a 2 eritrocitos por mL). La prueba de la tira detecta la actividad peroxidasa de los eritrocitos. Sin embargo, la mioglobina y la hemoglobina tambin pueden catalizar esta reaccin, por lo que un resultado positivo de la prueba puede indicar hematuria, hemoglobinuria o mioglobinuria. Examen Microscpico Sedimento urinario. El examen microscpico es una parte indispensable del uroanlisis, la identificacin de cilindros, de clulas, de cristales y de microorganismos ayuda a dirigir el diagnstico en una variedad de condiciones. Para preparar una muestra de orina para el examen microscpico, se toman de 10 a 15 mL de orina fresca que debe ser centrifugada a 1.500 por 5 minutos. El supernadante es decantado y el sedimento es resuspendido en el lquido remanente, de este se transfiere una gota a una placa de vidrio limpia y se aplica un cubre objetos9

Constituyentes del sedimento urinario. En individuos sanos se excretan algunos eritrocitos, leucocitos, clulas y cilindros en la orina. Su nmero puede aumentar en individuos normales despus de ejercicios fuertes o de exposicin al fro intenso. Muchas sustancias exgenas pueden contaminar el sedimento urinario, como fragmentos de algodn, gotas de aceite provenientes de lubricantes, bacterias o levaduras procedentes de recipientes sucios y grnulos de almidn 9, 8,7. Ocasionalmente si el enfermo padece diarrea o tiene una fstula rectovesical, la orina puede estar contaminada con materia fecal e incluso pueden hallarse Giardia lamblia o Entamoeba histolytica. Las clulas epiteliales que provienen de las vas urinarias se pueden observar en gran cantidad en la orina, y generalmente tienen poco significado, ocasionalmente se encuentran tambin clulas del epitelio vaginal. Es posible identificar dos tipos de clulas en el sedimento urinario de acuerdo con su origen: las que proceden (de la descamacin) del tracto urinario y las que proceden de la sangre.

Procedimiento
1. Cuando la muestra llega al laboratorio debe verificarse que llegue con su hoja de envi en la cual vienen los datos del paciente: Edad, Nombre, Sexo y Medico Solicitante. 2. Anotar la muestra en la libreta de registro de muestras y darle el nmero que corresponde 3. Evaluar el aspecto, color. pH y densidad. (Examen fsico). 4. Homogenizar la muestra y colocarla en un tubo de ensayo. 5. Tomar una tira reactiva y colocarla en el tubo por 2 segundos aproximadamente, retirar secar el exceso, leer contra el frasco o introducirla en el equipo automatizado de lectura. (Examen Qumico). 6. Nivelar los tubos y centrifugar a 1500 revoluciones por 5 minutos. 7. Decantar, mezclar y colocar el sedimento en un portaobjetos. 8. Colocar el cubreobjetos y leer en el microscopio. (Examen microscopio). 9. Lavar material, desinfectar rea de trabajo y apagar equipos utilizados.

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