RECUENTO DE ESPORAS DE CLOSTRIDIUM SULFITO REDUCTOR

INTEGRANTES: NELSY GARCIA CERVANTES YEINIS CORREA GARRIDO VANESSA DAZA COLLAZOS PEDRO TRIANA CATAÑO LUIS MIGUEL GUILLEN LEINIKER QUINTERO JESSICA CARRERO SANDRA IRIARTE JOSE ALTAMAR JOSE DURAN

DOCENTE: YUMAR RUIDIAZ

FACULTAD DE INGENIERIAS Y TECNOLOGICAS PROGRAMAS DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR VALLEDUPAR CESAR 2012

Son ubicuos pudiendo ser encontrados en el suelo y aguas residuales así como también en la flora intestinal de hombres y animales. crecer rápidamente y producir toxinas histolíticas. Los medios de cultivo empleados para el recuento de anaerobios (por ejemplo Clostridium sulfito reductor).INTRODUCCION El género Clostridium está formado por más de cien especies con limitada relación genética y propiedades bioquímicas diversas. es particularmente útil para el recuento de microorganismos anaerobios. Este método. colitis asociada a antibióticos e intoxicaciones alimentarias. es otro método que permite la determinación del número de microorganismos viables presentes en muestras de alimentos. La capacidad para provocar enfermedad está vinculada a la posibilidad de sobrevivir en condiciones ambientales adversas mediante la formación de esporas. . El método de recuento en tubo. o el medio Sulfito Polimixina Sulfadiacina Agar (SPS Agar). pero los patógenos pueden causar graves enfermedades como gangrena gaseosa. esporulados. tétanos. En este laboratorio utilizaremos el agar SPS como medio de cultivo para determinar esporas de Clostridium sulfito reductor. siempre y cuando se utilice el medio adecuado y las correctas condiciones de incubación. enterotoxinas y neurotóxicas. tales como los Clostridium sulfito reductores. son el medio Triptona Sulfito Neomicina Agae (TSN Agar). botulismo. infecciones de piel y partes blandas. En su mayoría son saprofitos. anaerobios. Comprende a bacilos grampositivos.

Existen dentro de la especie cinco tipos llamados A.000 daltons de peso molecular) que se comporta como un superantígeno promoviendo la liberación de . Produce una enterotoxina (polipéptido de 35. C. perfringens A es el responsable de la mayoría de los procesos infecciosos. heridas infectadas de hombre y animales.OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL: Determinar la presencia de esporas de Clostridium sulfito reductor a partir de productos embutidos (salchichas. D y E. formando un precipitado oscuro de sulfuro de hierro. ya que producen malos olores y. butifarra entre otros). (salchicha cunit). Clostridium perfringens Es agente etiológico de muchas enfermedades y es la tercera causa de toxinfección alimentaria bacteriana después Salmonella spp y Staphylococcus aureus. vegetación en descomposición. que están normalmente en las heces. especialmente cuando las condiciones de higiene en la elaboración son deficientes. con mucha frecuencia. aguas superficiales. Tomar conciencia de los peligros que ocasionan la presencia de estos microorganismos en los alimentos. anaeróbicos. El origen de los anaerobios sulfito-reductores no es exclusivamente fecal. como también en los alimentos. Analizar la calidad microbiológica del alimento salchicha cunit. Estos microorganismos tienen la capacidad de reducir los sulfitos a sulfuros a partir de aminoácidos y compuestos azufrados y para su detección se utiliza la evidente coloración negra dada por la formación del precipitado. B. MARCO TEORICO Clostridium spp son organismos Gram positivos. sedimentos marinos. ya que pueden proceder de otras fuentes ambientales como suelo. ennegrecimiento del producto cuando éste tiene hierro. C. salchichón jamón. su representante más característico es Clostridium perfringens. Determinar el número de microorganismos viables (anaerobios sulfito reductores) presentes en la muestra de alimento. OBJETIVOS ESPECÍFICOS:     Identificar la presencia sulfito reductor en la muestra de alimento (salchicha cunit) mediante el color y el número de las colonias. Son deteriorantes. formadores de esporas.

vísceras de cangrejos y bivalvos y en el tracto intestinal de mamíferos. agua. la enterotoxina se une a un receptor de membrana del ribete en cepillo e induce una alteración de la permeabilidad calcio dependiente resultando en una pérdida de iones y metabolitos. Es un bacilo gram positivo largo. anaerobio. C. Produce una potente neurotoxina de la que existen siete tipos: A. alfa. Es posible dividir a los organismos en cuatro tipos (I a IV) según la toxina que producen y su actividad proteolítica. . pollo. D. La enterotoxina es susceptible a pronasa pero no a tripsina niquimiotripsina.mediadores de inflamación en forma masiva. Los del grupo II producen toxinas B E o F y no son proteolíticos. en este caso SPS que permite el crecimiento de diferentes especies de esporas de Clostridium sulfito reductor. Las esporas son altamente resistentes pudiendo sobrevivir en alimentos incorrectamente procesados. Los pertenecientes al grupo I producen toxinas A. E. suelos. B o F y son proteolíticas en los cultivos. B. que forma esporas subterminales. Esta ampliamente distribuidos en la naturaleza. F y G. Clostridium botulinum. La enfermedad humana está vinculada a los tipos I y II y ala toxina A principalmente. Los alimentos que pueden estar contaminados son carnes vacuna. La enfermedad se produce cuando el individuo ingiere alimento contaminado con un elevado número de organismos productores de enterotoxinas. El método de recuento de esporas de Clostridium sulfito reductores consiste en determinar la presencia de esporas de los mismos mediante un medio de cultivo. Esta pérdida electrolítica altera la función metabólica intracelular provocando daño morfológico y eventual lisis. En el intestino delgado. salsas cocinadas y no refrigeradas. Cuando los alimentos llegan al intestino delgado se produce la esporulación y la liberación de enterotoxinas.

MATERIALES               Papel graff estéril. Agar SPS. Balanza analítica. Micropipeta de 1ml. 3 tubos de ensayo estéril. 3 tubos de ensayo con 9ml de agua peptonada. 11 g de salchicha cunit 1 Erlenmeyer con 99ml de agua peptonada. Alcohol Algodón Gradilla Mortero . Espátulas estériles. Puntas azules.

y adecuadamente la muestra. Se Incubo a 37°C durante 72 horas. De las tres diluciones anteriores se tomaron 1 ml y fueron adicionados en tubos de ensayos tapa rosca previamente rotulados. Luego preparamos la dilución 10-2 trasfiriendo 1 ml de la dilución 10-1 a un tubo de ensayo que contenía 9 ml de agua peptonada y agitamos cuidadosamente. luego se calentaron a 80°C durante 10 minutos en baño de maría y pasado el tiempo se dejo enfriar. Abrimos asépticamente (con el mechero en medio).PROCEDIMIENTO            Se Desinfectó con alcohol al 75% el sitio por donde se tomó la muestra. y se observo cada 24 horas Hacer recuento de colonias negras al contar tubos que contengan menos de 50 colonias. sobre una caja de petri estéril y se macero en un mortero. Los 11 g de muestra macerados se añadieron a un recipiente de dilución que contenía 99 ml de agua peptonada para obtener la dilución de 10-1. Después preparamos la dilución 10-3 trasfiriendo 1 ml de la dilución 10-2 a un tubo de ensayo que contenía 9 ml de agua peptonada y agitamos cuidadosamente. . Dejamos solidificar y se agregó otra capa de SPS. Luego pesamos adecuadamente11 gramos de la muestra (salchicha cunit) en una balanza analítica. Se agito vigorosamente el recipiente para homogenizar. no logramos observar ninguna colonia de color negro en el medio de cultivo. es decir hubo ausencia de microorganismos de Clostridium sulfito reductor. RESULTADOS Luego de incubar los tubos durante 24 horas 48 horas 72 horas obtuvimos: Al pasar las 72 horas de incubación. INFORME: < 10 UFC/g de esporas de Clostridium sulfitos reductoras en 11 g de salchicha cunit. luego se adicionaron 12 ml de agar SPS (Sulfito Polimixina Sulfadiacina).

.ANALISIS DE RESULTADO El género Clostridium por ser productor de esporas. Según los datos obtenidos fue posible reportar la ausencia de esporas de Clostridium sulfito reductor debido a que no se presentaron colonias de color negro. al no llevarse a cabo la reducción del sulfito de sodio que contenía el medio ni la producción de sulfuro de hierro. tiene una mayor resistencia a las condiciones ambientales. por esta razón su identificación en alimentos embutidos no es muy común.

. ya que de acuerdo a los estudios realizados se observó la ausencia de Clostridium sulfito reductor tanto de esporas como de colonias. Se considera que el alimento presentó una adecuada calidad microbiológica.CONCLUSIONES Con la realización del anterior trabajo se logró determinar que en la muestra del producto embutido analizado (salchicha cunit) no se observó la presencia de esporas de Clostridium sulfito reductor.

pdf 3. Guerra laura14 oct 2011 – Clostridium sulfitos reductoras. Saez M.BIBLIOGRAFIA 1. Aislamiento e Identificación de Clostridium perfringens. Chile.com/doc/8536988/microbiologia-de-alimentosLaboratorios4. Disponible en:http://es.com/doc/6674027/Microbiologia-de-Alimentos-Practican14Aislamiento-e-identificacionde-Clostridium-perfringens 2. Alayo G.blogspot. Gesche E.uach.clostridiumreductor. Disponible en:http://mingaonline. Recuento en tubo de anaerobios Sulfito Reductores. P 99105. 2008. recuento de anaerobios Clostridium sulfito reductores.pdf . Disponible en: http//www. Aycachi R. Perú Universidad Nacional de Trujillo. Lambayeque.Eficiencia de Anaerobios sulfitoreductores como indicadores de calidad sanitaria de agua. 2008.scribd. Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.scribd. 2003.cl/pdf/amv/v35n1/art11.com. Vallejos A. Universidad Austral de Chile. Disponible en:http://es. Método de Número Más Probable (NMP).