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UNIVERSIDAD POLITECNICA DE TLAXCALA

INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA 4° “A”

MATERIA: BIOQUIMICA MICROBIANA

NOMBRE DEL PROF. (A): RAQUEL GARCÍA BARRIENTOS NOMBRE DE LA PRÁCTICA: DETERMIANCION DE PROTEINA

NOMBRE DE LOS INTEGRANTES: DULCE SUSANA CUAPIO SALDAÑA EDUARDO CUATECONTZI NEZAHUALCÓYOTL ADOLFO CONDE NEZAHUALCÓYOTL CRISTIAN YOVANNY GALICIA SOLIS LUCIA BÁEZ RODRÍGUEZ

SAN PEDRO XALCALTZINCO TLAXCALA, 08 DE DICIEMBRE DEL 2011

REVICION BIBLIOGRAFICA: Espectrofotometría: Son métodos.4. Se conocen como métodos espectrofotométricos y según sea la radiación utilizada como espectrometría de absorción visible (colorimetría). También existe analbuminemia hereditaria. hormonas. Proteinas: Son macromoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos. glomerulonefritis o nefrosis.5. Su concentración de de 3. algunos lipidos y carbohidratos son aceptables de formar complejos con el ion coordinado. con dos amida adyacentes.Introducción: Existen varios metodos para la cuantificacion de proteinas. fármacos y vitaminas. aunque se trata de un proceso. La albumina constituye más de la mitad de todas las proteínas séricas y gran parte de la presión oncótica depende de ella.0 g/dL. algunos prigmentos absorben a la misma longitud de onda. es posible que el color se desarrolle por la formacion de un ion coordinado. de análisis químico que utilizan la luz para medir la concentración de las sustancias químicas. El desarrollo del color es diferente para cada proteina y su intensidadse puede determinar espectroscópicamente a 540 nm. infrarroja. Las sustancias que contienen dos o mas enlaces peptidos forman un complejo purpura-violeta. calcio.tetracúprico. Transporta sustancias menos solubles como ácidos grasos. entre ellas. bilirrubina. la presencia del ion amonio altera el desarrollo del colo. ultravioleta. El metodo de biuret es la tecnica mas simple para la determinacion de proteinas solubles. afectaciones gastrointestinales e inanición. Sufre una reducción en procesos como afecciones hepáticas. pero la mayoria tiene como principio alguna reaccion quimica de los grupos alquilo o arilo de los diferentes aminoacidos. . La cuantificacion. cuantitativos. metales.

Reacción del Biuret Curva Patrón: Es un marco de referencia que se construye de cantidades conocidas de una sustancia (por ejemplo la albúmina sérica bovina) que se utiliza para determinar la cantidad de proteínas presente en una muestra incógnita Objetivos Gral:  Determinación de proteinas solubles mediante el metodo de biuret. .Método de Biuret: El nombre de la reacción procede del compuesto coloreado formado por la condensación de dos moléculas de urea con Eliminación de amoníaco.

Material:            12 tubos de ensaye de 15 x 160 mm 1 gradilla 1 pizeta Vaso de precipitado de 100 ml 1 varilla de vidrio 1 espatula 1 micropipeta Puntas azules Piepta de 10 ml Propipeta Espectrometro Albumina de huevo “comercial”  Procedimiento: .

6 0.8 0.2 0.4 0. .5 0.5 0.4 0.7 0. (ml) 0 0.9 0 µ 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 mg/ml [P] 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10  Posteriormente se agregaron 3ml de reactivo de biuret.3 0. conforme se le iba agregando dicho reactivo obtenian un color desde un lila a un violeta.6 0.  Despues se enumeraron los tubos de ensaye del 0 al 11  Despues se adicionaron de 100µl al 1000µl de agua a los tubos enumarados y de igual manera de 1000µl a 100µl de albumina de huevo como se muestra en la tabla a continuacion: N°de tubo 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 H2O ml 1 0.7 0.1 0.1 0 ∑ 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 [Albunima] Sol.8 0.3 0. Se peso 70 mg de albumina de huevo y se disolvio en 70 ml de agua.2 0.9 0.

 Finalmente se espero 20 min y se leyo en el espector para conocer la concentracion de la proteina.1 0 .0 9 0 9 .0 9 0 6 .5 0.4 y =0.9407 S eries1 Line (Se s1 ar rie ) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 [] P s b A 0.2 0.3 8 C rv p tro d a u in d u a a n e lb m a e h eo uv 0.044x+0.2 6 0 0 .3 5 0 9 . Resultados: [P] 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Abs 0 0 7 .2 3 0 0 .3 0.2 4 0 6 .02 R = ² 0.1 1 0 5 .

Eduardo Cuatecontzi Nezhualcoyotl .Conclusiones: Dulce Susana Cuapio Saldaña En la práctica realizada aprendí que existen diversos métodos que permiten cuantificar la concentración de proteína presente en las muestras de albumina de huevo. Cristian Yovanni Galicia Solis En esta práctica pudimos cuantificar la concentración de proteína la proteína que utilizamos fue la albumina y utilizamos el método de lowry. por el método de espectrometría para realizar una curva patrón. con la ayuda de espectrofotómetro construimos una curva patrón ya que la proteína tiene una banda de absorción. ya que la absorbancia fue aumentando por la mayor concentración de proteína. Lucía Báez Rodríguez En la practica realizada pudimos determinar la concentración de proteina a partir de una sustancia soluble que fue la albumina de huevo comercial la cual se midio la obsorbancia en el espectro siguiendo el metodo de biuret.

mx/books? id=8VpJ8foyDiIC&pg=PA36&lpg=PA36&dq=curva+patron+de+una+proteina+met odo+de+biuret&source=bl&ots=q0sIkRak0i&sig=nJ0HFVxMT9Kwf7zQWlfZ5hfb0U&hl=es&ei=q2bdTtWpJ6mEsALA2OTgDQ&sa= X&oi=book_result&ct=result&resnum=5&ved=0CD8Q6AEwBDgK#v=onepage&q &f=false  http://www.pdf  http://bioquimexperimental.es/organiza/departamentos/bioquimica-biolmol/pdfs/28proteinas.wordpress.com.uco. Adolfo Conde Nezahualcoyotl En esta práctica pudimos aprender la cuantificación de la proteína llamada albumina de huevo con la técnica de lowry así mismo pudimos observar como por medio de algunas diluciones la muestra iba cambiando su concentración y con esto obtuvimos una curva patrón.files.google.Al realizar esta práctica pudimos ver la importancia de la curva patrón así como la manera de realizarla. Referencias Bibliograficas:  http://books. También podemos ver que la albumina es una proteína muy importante al ser la principal proteína de la sangre y la albumina de huevo es derivada del mismo (clara deshidratada).com/2009/08/metodosespectroscopicos-y-curva-patron .