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IMPORTANCIA DE LA ACLIMATIZACIN DE LAS PLANTAS OBTENIDAS A TRAVS DE CULTIVO DE TEJIDOS O IN VITRO

Ing. MSc. Sunshine Florio, Ing. Francisco Real e Ing. Gustavo Florio La aclimatizacin es un proceso es de gran importancia, ya que el uso exitoso del mtodo de micropropagacin de especies vegetales depende, en gran manera, de una adecuada aclimatizacin (Riquelme et al., 1991). Las palabras aclimatizacin y aclimatacin se han venido utilizando a manera de sinnimos. Conover y Poole (1984) sealaron que en el Horticultural Research Institute Environmental Conditioning Symposium de 1977, se acord como trmino preferido aclimatizacin y no aclimatacin. La decisin fue sustentada por The American Heritage Dictionary of the English Lenguaje, el cual describe como aclimatacin, la adaptacin de un organismo a condiciones naturales, es decir, que es un proceso natural y la aclimatizacin como la adaptacin climtica de un organismo, especialmente una planta, que a sido movida a un ambiente nuevo bajo condiciones controladas por el hombre. Hoyos y Palma (1995) conceptualizaron la aclimatizacin y la aclimatacin como la adaptacin de una planta a un rea o zona climtica de la cual no es nativa, o a un microclima distinto al que ha tenido lugar en una fase previa al cultivo, por ejemplo, la aclimatacin de las plantas in vitro a las condiciones de invernadero y/o umbrculo. As mismo,

indicaron que el endurecimiento es un proceso de aclimatacin donde se reduce gradualmente la temperatura y la cantidad de agua a las plantas para hacer ms resistentes sus tejidos, de tal manera que puedan sobrevivir a condiciones adversas. Aclarados ambos trminos, en esta investigacin se adopt el de aclimatizacin, indicado por Conover y Poole (1984). La aclimatizacin de las vitroplantas o plantas cultivadas in vitro es un proceso crtico, ya que las estas pasan de un ambiente de baja transpiracin a otro que exige una mayor demanda hdrica, que eventualmente puede ocasionar estrs hdrico. Igualmente, pasan de un estado hetertrofo a un estado auttrofo con diferentes niveles de nutrientes y finalmente, de un ambiente asptico a uno donde pueden estar expuestas al ataque de microorganismos saprofitos y/o

fitopatgenos. En el proceso normal de micropropagacin los brotes y plantas son cultivados en medios de cultivos con azcares, vitaminas y otras sustancias orgnicas, lo que determina el desarrollo hetertrofo o mixtropo de los mismos (nula o baja capacidad fotosinttica). Sin embargo, durante la fase de adaptacin estas plantas estn forzadas a ser completamente auttrofas y sintetizar los compuestos orgnicos necesarios a partir de minerales, agua, CO2, y luz. Este cambio en las

plantas

as

como

la

morfologa

de

las

mismas,

determina

la

susceptibilidad durante las etapas iniciales del proceso de aclimatizacin. Las condiciones in vitro, como la alta humedad, baja intensidad luminosa, temperatura constante y bajo o nulo intercambio gaseoso en el frasco, favorecen los cambios en la morfologa de las plantas y que a su vez influyen en la capacidad de sobrevivencia y crecimiento de las plantas. Estos cambios son: Hojas con estomas que no cierran normalmente y desarrollo deficiente de la cutcula. Esto hace que las plantas sean ms susceptibles al estrs por prdida de agua y por lo tanto pueden desarrollar nuevas hojas adaptadas a las nuevas condiciones. El mantener una alta humedad en los primeros das del trasplante a condicin ex vitro, es un factor crtico para la sobrevivencia de las vitroplantas, ya que por sus condiciones fisiolgicas y anatmicas, son altamente sensibles a presentar desequilibrio en el mecanismo estomtico y en consecuencia, las clulas de las regiones ms tiernas manifiestan estrs hdrico. Tallo con escaso tejido de soporte (colnquima y esclernquima). Races poco funcionales. En ocasiones existe una conexin

vascular incompleta entre tallo y races que impide el trasporte eficiente de agua y nutrientes. Como resultado de esto, prcticamente

las plantas deben desarrollar todo el sistema radical nuevo durante la etapa de aclimatizacin. Durante la etapa de aclimatizacin se produce un retorno gradual de las plantas a sus caractersticas morfolgicas normales, despus del cultivo in vitro. La eficiencia de la aclimatizacin es trascendental para la propagacin comercial, pues de los resultados de esta, depender en gran medida, la eficiencia total del proceso, la calidad y la tecnologa. Su eficiencia est dada por el grado de sobrevivencia de las plantas durante el tiempo de aclimatizacin. Generalmente, las tcnicas de adaptacin permiten que las vitroplantas se adapten a condiciones de baja humedad relativa, altos niveles de luz, ambientes spticos y que alcancen un crecimiento autotrfico, para lo cual pueden requerirse varias semanas de aclimatizacin. Es importante resaltar, que en los invernaderos, umbrculos y especialmente en el campo, la radiacin es mucho ms alta y la humedad del aire ms baja que en los recipientes de cultivo; as como el potencial de agua en el sustrato es superior al de los medios nutritivos usados en la micropropagacin. Una de las principales tcnicas utilizadas para la aclimatizacin de las vitroplantas son los sistemas que proporcionen una alta humedad relativa y que permitan su reduccin gradual hasta el final del proceso. La mayora de los laboratorios disponen de sistemas como son: los nebulizadores (mist, fog), humificadores o ambientes cerrados

que retienen vapor de agua (tneles, tiendas, cmaras hmedas, cmaras de endurecimiento, entre otros). Las plantas in vitro crecen a bajos niveles de luz, desarrollan hojas muy delgadas, semejantes a aquellas que crecen bajo sombra. Por tal motivo, si se colocan en altos niveles de luminosidad, sufren clorosis y quemaduras. De all que las vitroplantas son generalmente aclimatizadas durante 4 semanas en ambiente con 80 90 % de restriccin de luz. Esta reduccin de la intensidad luminosa en condiciones de invernadero o umbrculo, es un factor fundamental en los procesos de aclimatizacin. Adicionalmente, algunos laboratorios incrementan los niveles de luz en la etapa de enraizamiento para darle un preacondicionamiento, antes de su transferencia a condiciones in vivo. Por otra parte, el sustrato y los recipientes donde son colocadas las plantas enraizadas in vitro, se consideran importantes para obtener una alta sobrevivencia. Los sustratos ejercen una influencia significativa en la arquitectura del sistema radical de las plantas y en las asociaciones biolgicas de este con el suelo. Uno de los requisitos fundamentales que debe cumplir el sustrato para su utilizacin es la sanidad. Cuando estos no se elaboran, almacenan o manejan correctamente, pueden

contaminarse y provocar serios daos a las plantas durante la aclimatizacin; por esta razn son preferidos como componentes para su elaboracin materiales inertes o aquellos en los cuales el proceso de

obtencin garantice la mayor desinfeccin posible como el aserrn de coco, la cscara de arroz, el humus de lombriz, vermicompost, entre otros. LITERATURA CITADA Conover, C. y R. Poole. 1984. Acclimatization of indoor foliage plants. In: Janick, J. (ed.). Horticultural Reviews. Vol 6. Avi Publishing Company, INC. pp: 119 154. Hoyos, V. y N. Palma. 1995. Diccionario de Floricultura. Ball Publishing. Batavia, Illinois. USA. 414 p. Riquelme, C., M. Guiaz y R. Tizio. 1991. Preacondicionamiento y aclimatacin en condiciones de invernculo de pantas micropropagadas de frutilla, menta, papa y vid YTON 52(1): 73 82.