UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIASN AGROPECUARIAS ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

EXTRACCIÓN DE ADN
GERARDO MORALES RAMBAY
QUINTO AÑO MEDICINA VETERINARIA 21/01/2013

Por eso que en este informe de laboratorio mostramos. citosina. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. carecen de uracilo. Es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados. y también contiene la práctica de laboratorio que realizamos y los cálculos correspondientes. constituye el material genético de los organismos. H. Es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados. permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula. O. timina.Extracción de ADN INTRODUCCIÓN ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés. . N y P. unidos mediante enlaces covalentes fosfodiester. guanina. su definición y algunos conceptos y conocimientos que debemos tener y están relacionados a este tema. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. DNA). • La extracción de ADN de una muestra celular: Se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN. Relacionados con la conservación. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. Se componen de un pequeño grupo de unidades monomericas denominadas nucleótidos. Constituye el material genético de los organismos. Tenemos: • • ARN ADN El ADN: Esta formado por dos cadenas de polinucleotidos complementarios y dispuestos en doble hélices sus bases nitrogenadas son adenina. MARCO TEÓRICO ÁCIDOS NUCLEÍDOS Son moléculas constituidas por C. La complementación de bases se debe a la formación de enlaces tipo puente de hidrogeno.

MATERIALES Y MÉTODOS MATERIALES Y REACTIVOS: Para la siguiente determinación se utilizo lo siguiente: 3.2 Muestra • Tomate 3. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN.1 Materiales • • • • Gradilla Colador o Centrífuga Rallador mortero 3. 3.. .3 Material de vidrio • • Tubos de ensayo Varillas de vidrio • Vasos de precipitado de 150 – 250 ml (12 unidades) • Pipetas 3. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN.5 Equipos • • Nevera Balanza analítica METODOLOGìA: La extracción de ADN requiere una serie de métodos básicos. 4 Reactivos • • • Agua (destilada o mineral) Sal de mesa Bicarbonato sódico • champú • Detergente líquido o Alcohol isoamílico a 0ºC.Para esto tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula.

No usar agua del grifo. 5 ml de detergente líquido o champú. AGUA DESTILADA: 120ml SAL DE MESA: 1. si es posible destilada y si no mineral. preferiblemente pura. 1.5g BICARBONATO DE SODIO: 5g .5 g de sal de mesa. 5 g de bicarbonato sódico.DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA • Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado: 120 ml de agua.

tomates. ajo. Tomate • Triturar la muestra con un mortero.) y cortarla en cuadraditos. .CHAMPU: 5ml La solución TAMPON • Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber (cebolla. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente. etc.

Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a . Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente. El alcohol quedará flotando sobre el tampón. ALCOHOL ISOAMÍLICO: • Se añade 10ml de alcohol isoamílico a 0ºC a cada caldo molecular… TOMATE: • Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible.• Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante. teniendo éste inclinado.

es decir. Tomate RESULTADOS Y DISCUSIONES Describir lo encontrado en la experiencia realizada 1. . Tubo de ensayo (Tomate): la coloración presenta rojiza. explica aquello que podemos ver a simple vista como lo que no lo podemos ver tan fácilmente. • .poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Resultados finales de la Practica de la Extracción de ADN CONCLUSIONES • A modo de conclusión podemos decir que este informe ha dado a conocer aspectos de la vida natural perceptible como imperceptible a muestras sentidos. permite purificar en un grado relativamente alto (porque depende con la precisión de la toma de muestras y de procedimiento su éxito) y pudimos determinar que es factible utilizarlo en posteriores ocasiones ya que es muy fácil de utilizar y se presta para varias aplicaciones. fragmentos de ADN en la parte Central. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado. El método utilizado para la extracción de DNA.

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