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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronomía

PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM.

BIOQUIMICA METABOLICA PREINFORMES DE PRACTICAS 3, 4 Y 5

MARIA MAGDALENA BOTERO GALVIS C.C 43.102.838 PAULA ANDREA MONTOYA GOMEZ C.C 43. 837.800 MARIA DE LOS ANGELES OÑATE LÓPEZ C.C. 26871741

TUTOR NIDIA CARREÑO GRUPO: 352001_66

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE. PROGRAMA DE INGENIERIA AGROFORESTAL SEMESTRE 2013

Se espera que al diluir sustancias como concentrado pulverizado y agua destilada. RESULTADOS ESPERADOS:  1. se espera que el concentrado sea mayor en la sangre y en la orina. Homeóstasis: Homeostasis es el conjunto de fenómenos de autorregulación que llevan al mantenimiento de la constancia en las propiedades y la composición del medio interno de un organismo. MATERIALES Y MÉTODOS 1. El objeto de su empleo.1. es la característica de un organismo vivo.3. Materiales y equipos requeridos Material / Equipo Erlenmeyer Pipetas Graduadas Espátula Metálica Agitador De Vidrio Probeta Graduada Bureta Soporte Universal Beaker Potenciómetro Equipo De Titulación Balanza Muestras Biológicas Digital Concentrado . y que este sea mayor en comparación con la leche. por eso. suele decirse que sirven para mantener constante el Ph. Mentefacto o diagrama conceptual 1. Pecuarias y del Medio Ambiente. con pinza para bureta Vaso precipitado De 250ml Características De 125ml De10ml Se espera que la capacidad amortiguadora sea mayor con la sangre que con el buffer. es precisamente impedir o amortiguar las variaciones de pH y. por la cual mediante la absorción de alimentos y vitaminas (metabolismo) puede regular las funciones que . PRÁCTICA 2: Capacidad Amortiguadora INTRODUCCIÓN La capacidad amortiguadora se usa para comparar soluciones amortiguadoras y es igual a las mili-equivalencias de ácido o base fuerte que puede neutralizar la solución amortiguadora sufriendo así un cambio de PH en su unidad.Orina. GLOSARIO  Soluciones amortiguadoras: Son aquellas soluciones cuya concentración de hidrogeniones varía muy poco al añadirles ácidos o bases fuertes. tanto en técnicas de laboratorio como en la finalidad funcional del plasma. la sal o acido es próxima a la unidad. Sangre Y Forraje De 100ml De 25ml Metálico. igualmente con harina y forraje picado para comparar su PH (potencial bufferante). TABLA DE DATOS Valores Evaluados Vm (mL) Ph1 MUESTRAS Concentrad o Harina Forraje Sangre Orina Wm (g) Ph2 3.3. Tal capacidad depende de las concentraciones absolutas del sistema y la proporción relativa de las formas disociadas y sin disociar y da como máxima cuando el cociente. Diagrama de Flujo Rotular Alistar titulacion Evaluar el PH final Registrar PH Adicionar concentrados 2.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM. es decir.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas.

ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM. Si representáramos el ácido con la fórmula general HA. Clorhídrico. en una disolución acuosa una cantidad significativa de HA permanece sin disociar. Escuela De Ciencias Agrícolas Pecuarias Y Del Medio Ambiente.1. Acido débil: es aquel ácido que no está totalmente disociado en una Reactivo Hidróxido de Sodio Ácido Clorhídrico Fenolftaleína Rojo De Metilo Agua Destilada Solución Buffer Fosfato Fórmula NaOH HCl 2 4 C 0H14O 15 15 3 2 C H NO 2 HO HPO4 2− Concentración 0. pero también es capaz de aceptarlos. Forraje picado (5gr). E Módulo de Bioquímica metabólica.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas.1N 0. sangre (20mL) de acuerdo a los protocolos establecidos para tal efecto.Qué es. harina (5gr).2 Reactivos a utilizar existen dentro de él.de/homeostasis/#ixzz2RuVsvh9Q   1. http://www. solución buffer y leche.itescam. Significado y Concepto http://definicion. J. Aporta iones al medio. formando un equilibrio ácido-base.3. Técnica potenciométrica: con agua destilada.2 En Laboratorio Método de titulación volumétrica: con agua destilada. 1. Pecuarias y del Medio Ambiente. Ácido .3.3 Procedimiento 1. La homeostasis es posible gracias a los múltiples ajustes dinámicos del equilibrio y los mecanismos de autorregulación. mientras que el resto del ácido se disociará en iones positivos negativos .1N disolución acuosa.PDF Definición de homeostasis . las cuales se rotularán con los datos de origen. ECAPMA. y 1.  BIBLIOGRAFIA Granados M.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r5 5275. En campo: Recolectar en campo las muestras de Leche (20mL). para mantener una condición estable y constante. harina y forraje picado. las muestras se empacarán en bolsas negras.edu.

‘‘n’’. como son estos compuestos activos en el metabolismo de las plantas. Datos para la cuantificación de CNE Planta Almacenados Raíces Tallos Coronas Fermentación Rápida y total 1. se les llama así al no hacer parte de la pared celular.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas. Los carbohidratos pueden ser vistos como los hidratos de carbono.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM. hidrógeno y oxígeno. RESULTADOS ESPERADOS:  Se espera aprender mediante el método de Fenol –acido Sulfúrico determinar la cantidad de carbohidratos totales No estructurales. Pecuarias y del Medio Ambiente.3. MATERIALES Y MÉTODOS 1. de .1. PRÁCTICA 3: CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES INTRODUCCIÓN Los carbohidratos no estructurales se dan debido a la acumulación de carbohidratos solubles en los tejidos de las plantas. TABLA DE DATOS Mentefacto o diagrama conceptual CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES Son Formados por Carbono Compuestos Activos En el No Forman Parte Hidrogeno Oxigeno Posee Metabolismo De la de la Pared Celular En Tabla.200 . que consta sólo de carbono. extraerlos basándose en su contenido de almidones hidrolizables y azúcares solubles y medir por medio de la lectura espectrofotométrica. Materiales y equipos requeridos Material / Equipo Características 3.400 ml  Se espera adquirir conocimientos suficientes sobre los carbohidratos no estructurales. están muy activos y representan azucares libres que se almacenan en los órganos de reserva. GLOSARIO Carbohidrato: es un compuesto orgánico con la fórmula general C’’M’’ (H 2 O). los dos últimos en la relación atómica 2:1.3. es decir. 1. En esta práctica se determinaran los carbohidratos no estructurales. Diagrama de Flujo Compuestos Carbohidratos No Estructurales Activos Planta Raiz-Tallo-Corona Metabolismo 1. Balanza Analítica Baño Termostático Beaker Varilla de vidrio Papel de filtro Tubos de Ensayo Con gradilla De 100 . se produce cuando la tasa de formación de glucosa durante el proceso de fotosíntesis supera la cantidad necesaria para el crecimiento y la respiración.

Pecuarias y del Medio Ambiente. colocar en baño de hielo y adicionar los reactivos indicados en la tabla 1. Es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haz de Radiación Electromagnética. J. E Módulo de Bioquímica metabólica.slideshare. Se define también como la fracción de luz incidente. es decir. ECAPMA.net/LINEYANDREA/carbohidratos4402131    . 1. y es una aldosa. 1. Cuantificación Agronómica: •Mezcla reactiva: Rotular 7 tubos de ensayo así 1.org/docrep/field/008/AB489S/AB488S00. Dejar enfriar completamente.3 Procedimiento Extracción Depositar en el vaso de precipitados y agregar 50ml de solución de HCl. que contiene 6 átomos de carbono. 3. BIBLIOGRAFIA  Granados M. agitar por 3 minutos y llevar al Beaker con la solución al baño termostático a 90°C por 20 min. Y llevar al baño maría por 3 min. que pasa a través de una muestra. 2. B. Sacar y agitar 10 seg.carbo hidratos no estructurales. Espectrofotómetro: instrumento de análisis químico utilizado para medir en función de la longitud de onda la relación entre dos valores de la misma magnitud fotométrica. esto es. Escuela De Ciencias Agrícolas Pecuarias Y Del Medio Ambiente. Transmitancia: se define como la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en determinada cantidad de tiempo.2 Reactivos a utilizar Reactivo Glucosa Agua destilada Fenol Fórmula C6H12O6 H2O C6H5OH Concentración ahí su nombre. Glucosa: La glucosa es un monosacárido con fórmula molecular C6H12O6.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM. Cuantificación: Rotular 3 tubos de ensayo así B (blanco).fao. Dejar enfriar por 5 min y filtrar. agitar por 20 seg.6.org/wiki/Carbohidratos http://www.htm http://www. St (estándar). a una longitud de onda especificada. Es una hexosa.es. una gran familia de los hidratos de carbono naturales que llenan numerosos papeles en los seres vivos. Es esencialmente un sinónimo de sacárido.wikipedia. 5. Tapar y rotular así FCNE (filtrado para carbohidratos NE). la misma que la fructosa pero con diferente posición relativa de los grupos -OH y O=. m (muestra y adicionar los reactivos en el orden que se indica en la tabla 1. 4. el grupo carbonilo está en el extremo de la molécula.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas. medir el volumen filtrado y llevar 5ml de este a un tubo de ensayo en el cual se adicionara 5 ml de NaOH y agitar por 15 seg. http://www.

Se espera cuantificar la actividad enzimática de la catalasa en muestras de origen vegetal y animal. 2 H2O2 2 H2O + O2 La catalasa como biocatalizador de origen proteíco. un compuesto tóxico. es una enzima óxido . necesaria para descomponer el peróxido de hidrógeno. Pecuarias y del Medio Ambiente. está presente en peroxisomas y mitocondrias de células animales y vegetales. Diagrama de Flujo Catalizar Enzima Presente en Celulas vivas Animal de vegetal descomposicion rapida peróxido de hidrogeno en agua oxigeno 2.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM. MATERIALES Y MÉTODOS 1. que se produce durante el metabolismo  . con pinza para bureta De10ml De 400 ml De 125ml De 100ml De 25ml Con gradilla 3. Materiales y equipos requeridos Material / Equipo Soporte Universal Pipetas Graduadas Beaker Erlenmeyer Probeta Graduada Bureta Tubos de Ensayo Características Metálico.3. hasta Oxígeno molecular (O2) y agua (H2O). Dicha biomolécula. protegiéndolas de la toxicidad de los radicales libres peróxido.1. Mentefacto o diagrama conceptual 1. RESULTADOS ESPERADOS:  Se espera determinar la actividad de catalasa por medio del método permanganométrico.reductasa que participa en la degradación del peróxido de hidrógeno (H2O2). impidiendo su acumulación y beneficiando el metabolismo celular.01N Vs (mL) enzimas reacciones químicas responsables sin ser de la destruidas o alteradas Actividad química tienen En intervalo de temperatura El H2O2 es toxico para la mayoría de los 1.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas. TABLA DE DATOS que Organismos Vivos Tabla 1 Datos para Actividad Catalítica de Catalasa (ACAT) Animales Pueden Vegetales descomponer peróxido de hidrogeno por actúan como catalizadores son sustancias que aceleran las TUBOS B 1 2 3 4 5 6 mL de KMnO40. enzima que se puede encontrar en todos los seres vivos catalasa.3. PRÁCTICA 4: Actividad de Catalasa INTRODUCCIÓN La catalasa es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua.

Para detección de Peróxido residual en rehúso de filtros Este procedimiento permite una rápida determinación de la ausencia de Peróxido en el agua de enjuague del filtro de diálisis.3. registrarlo como : Vs y tomar 5 mL de éste para depositarlo en un tubo de ensayo . rotular: SOCAT (solución de orina para catalasa). representando estos. Orina y Sangre. mezclar 4 mL de muestra con 6 mL de buffer frío. J. En el caso de la orina.5. colocarlos en baño de hielo y adicionar los reactivos en el orden dado. colocarlos inmediatamente en baño de hielo. ECAPMA. pasarlo a una probeta. y cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno.enzima catalasa | La Guía Química http://quimica.taparlo.wikipedia.2 Reactivos a utilizar Reactivo Peróxido de Hidrogeno Ácido Sulfúrico Permanganato de Potasio Extractos de Catalasa (ECAT) Fórmula H2O2 H2SO4 KMnO4 Concentración 0.0.durante 5min Sacar el sobrenadante. Peróxido de hidrógeno: H2O2.1 % y 0. http://www. frutas o verduras. sobre todo anaerobios. conformada espacialmente en su estructura cuaternaria como una proteína homotetramérica de peso molecular que oscila entre 210 a 280 Kilodaltons(kD) con 4 subunidades idénticas. Peróxido de hidróxido.es. Muestras Biológicas Concentrado.3.2 mL de sangre y 10 mL de buffer fosfato frío. Escuela De Ciencias Agrícolas Pecuarias Y Del Medio Ambiente. tapar. Pecuarias y del Medio Ambiente.8-7. 4. Sangre y orina En un tubo de ensayo. un 1. es por esta razón que el oxígeno producido por esta enzima tiene efecto bactericida sobre estos microorganismos.2 Cuantificación BIBLIOGRAFIA  Agronómica Mezcla Reactiva  Alistar 7 tubos de ensayo y rotularlos así: B.05 M 2N 0. La catalasa cumple una función protectora contra determinados microorganismos patógenos. verduras ó concentrados Pesar 2g de muestra picada ó pulverizada y colocarla en un tubo de centrifuga .  Granados M. con una solución de permanganato de potasio (KMnO4) de concentración conocida.05M.3. agitar vigorosamente hasta obtener mezcla completa.También se genera por la oxidación de ácidos grasos (AG) en los peroxisomas.  Se espera aprender y familiarizarse con las propiedades de los enzimas y observar la actividad de la catalasa 1. el que no participó en la RBE. agitar. rotular: SSCAT (Solución sanguínea para catalasa) y guardar en refrigeración ó baño de hielo. 1.3 Procedimiento 1. Se produce durante la oxidación de las coenzimas FAD y FMN. medir su volumen. ó ECCAT (extracto de concentrado para catalasa).1Extracción Frutas .laguia2000. 2.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas. colocar 0. constituídas por un grupo prostético de protoporfirina y el grupo hemo (Fe-III). rotularlo como :EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) ó EFCAT(extracto de fruta para catalasa). agitar. celular. es uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos. pH=6.org/wiki/Catalasa de . biomoléculas importantes en la oxidación de sustratos a partir del oxígeno molecular .luego adicionar 10mL de solución fría de buffer fosfato 0. pero dada su potencial toxicidad. es decir. colocar en baño de hielo.01 M GLOSARIO Enzima Catalasa: La catalasa es en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos. 1.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM.com/conceptosbasicos/enzima-catalasa#ixzz2S4klkgGo http://www. Método permanganométrico: el cual se titula el peróxido residual. 1. es transformado enseguida por la enzima catalasa. E Módulo de Bioquímica metabólica. Las bacterias anaerobias.09 % respectivamente del peso molecular total de la Enzima. mueren al estar en contacto con oxígeno. tapar. con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm . 6.

Pecuarias y del Medio Ambiente. agitando. por 30 segundos. colocar el Erlenmeyer debajo de la bureta y titular adicionando lentamente el KMnO4. Titulación permanganométrica Montaje de titulación.www.acienciasgalilei. hasta que aparezca y permanezca un color rosado ó violeta pálido. .UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas. en la solución reactiva. registrar los mL de permanganato gastados en este proceso.htm Zootecnia Mezcla reactiva Cinco tubos de ensayo para los reactivos que se indican para la realización de esta práctica.com/qui/formulacion/peroxid os.  http://www.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM.

MATERIALES Y MÉTODOS 3. Se espera cuantificar el nitrógeno no proteíco (NNP) denominado también fracción A de Van Soest. ya que el nitrógeno también proviene de componentes no proteicos. esto se realiza mediante la lisis de polipéptidos. el nitrógeno no proteico (NNP).3. En el laboratorio. Pecuarias y del Medio Ambiente. Porcelana Vidrio De 100ml Con gradilla  Se espera aprender y familiarizar con las propiedades del NNP y Aplicar técnicas instrumentales analíticas de Lectura Agite . Diagrama de Flujo INTRODUCCIÓN Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoníaco. que está incluido en: úrea.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM. el Biuret o el ácido úrico.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas.3. de tal forma que son metabólicamente más cercanos a la proteína soluble(PS) 4. para separar el nitrógeno insoluble del soluble (NNP). amoníaco y péptidos. Materiales y equipos requeridos Material / Equipo Papel Filtro Capsula de Porcelana Vaso de Precipitado Probeta Graduada Tubos de Ensayo Características 3. Mentefacto o diagrama conceptual Nitrogeno No Proteico Son Compuestos Excretado Nitrógeno Amoniacal Urea En forma de Orina Utilizado por Bacterias TABLA DE DATOS NITROGENO NO PROTEICO Son Utilizado Nitrógeno Amoniacal Urea Compuestos que Pueden ser Convertidos en Proteínas por Bacterias Para Fabricar Aminoácidos Tabla: Datos para Nitrógeno no proteíco (NNP) Tubos Wm (g) Vf (mL) Estándar (st) A Excretado En forma de orina m Tipo y origen de la muestra 3. RESULTADOS ESPERADOS:  Se espera determinar con el resultado del análisis una buena aproximación al contenido de proteína en el alimento. PRÁCTICA 5: CUANTIFICACIÓN DE NITRÓGENO NO PROTEICO (NNP) (Fracción A de Van Soest) 1.1. mediante el reactivo: ácido Tricloroacético. es tradicionalmente aquel que pasa en el filtrado después de la precipitación con un reactivo específico para proteína. hasta péptidos der menor peso molecular . nitritos y nitratos y otros como la urea.

3 Procedimiento 1. lograr claridad sobre como tener suficientes fuentes de energía para que éstas lo puedan utilizar y así puedan biosintetizar aminoácidos.. St (estándar). Y deje reposar 5 min. m (muestra). se cortan a la altura del pastoreo evitando lugares donde se pueda alterar la muestra como orillas de camino zonas próximas alambrados. Pesar +/-1. Filtre sobre probeta y mida el volumen del filtrado. Amoniaco: es un compuesto químico cuya molécula consiste en un átomo de nitrógeno (N) y tres átomos de hidrógeno (H) de acuerdo con la fórmula NH3. Péptidos: Son un tipo de moléculas formadas por la unión de varios aminoácidos mediante enlaces peptídicos. Cuantificación: Cuantificación de N por método espectrofotométrico de Biuret Lowry Rotular 3 tubos de ensayo así.2. Cada célula en el cuerpo humano contiene proteína. Escuela De Ciencias Agrícolas Pecuarias Y Del Medio Ambiente.es. com/conceptos-básicos/Nitrogeno#ixzz2S4klkgGo http://www. luego deje reposar 15 min y adicione 20 mL de solución de ATA y agite por 1 min. Proteína: son macromoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos. Se espera adquirir conocimientos suficientes sobre El NH3 que es el principal nutriente nitrogenado para las bacterias del rumen. De muestra pulverizada y registrar como (Wm). etc. coloque 5 mL del filtrado en un tubo de ensayo y rotule así FNNP (filtrado para nitrógeno no proteico.25 1% vigorosamente por 15 seg. y calibrarlo con el tubo de ensayo blanco. http://www. dejar secar a la sombra si está muy húmeda. los músculos. E Módulo de Bioquímica metabólica. Agua Destilada Cloruro de mercurio Fosfato pH 7 Indicador de tashiro Cloruro de hidrogeno H2O HgCl2 H3PO4  C15H14N3O2Na HCL 1. A temperatura ambiente. 1.1.org/wiki/Nitrogeno   .Nitrogeno no proteico/ Guía de Química 2000. St y m. GLOSARIO Nitrógeno no proteico: se denominan así a los compuestos de nitrógeno que pueden ser convertidos en proteínas por algunos organismos vivos.. Y registrar valores en la tabla de datos. BIBLIOGRAFIA  Granados M. deje reposar a temperatura ambiente por 15 min. J. agitar por 1 min. retirando la capa vegetal de la superficie y retirando de la muestra los residuos guardando en una bolsa plástica. órganos y glándulas. Adicionar reactivos según orden indicado en el cuadro número 2.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas. leer absorbancia de las demás soluciones.wikipedia.  Kjeldhal y espectrofotométricas para determinar el contenido de NNP y Proteína verdadera (PV) en forrajes y concentrados. Pecuarias y del Medio Ambiente.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM.2 Reactivos a utilizar Reactivo Ácido Tricloroacético Urea Fórmula Cl3COOH CO(NH2)2 Concentración 10% 0.0 gr. ECAPMA. adicionar en vaso de precipitado y agregar 30 mL de agua destilada fría. Suelo: se toman mínimo 10 submuestras de suelo a profundidad de 20 cm. El término proteína proviene de la palabra francesa protéine. B (blanco). Forraje: se toman 15 submuestras de 250 gr cada una. La proteína es una parte muy importante de la piel.3. Se guarda preferiblemente en una bolsa de papel o plástico en un lugar con baja temperatura y etiquetar con todos los datos concernientes al lugar de la toma de la muestra. el papel filtro con el residuo ponerlo en una capsula de porcelana y secar a 105°c por 30 min. Extracción con ácido Tricloroacético (ATA). Espectrofotométrica: alistar el espectrofotómetro a una longitud de onda (I) de 540 nm. 1.3.

Pecuarias y del Medio Ambiente.UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas.ECAPMA Programa: Agronomía PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM. .