2/2/13

NIH Annual Report DA000569

NIH Annual Intramural Research Report DA000569­03 Report Title Endocannabinoid roles in neurochemical and reinforcing effects of abused drugs 2012 Fiscal Year October 01, 2011 ­ September 30, 2012 Principal Investigator Jonathan L. Katz; PhD  Research Organization Psychobiology Section, NIDA Lab Staff Gianluigi Tanda; PhD Maddalena Mereu Takato Hiranita Jessica Patricia Lopez Keywords Cannabinoid receptors and addiction, cannabinoids, dopamine, Nucleus Accumbens Goals and Objectives The main goal of this proposal is to provide a better understanding of the involvement of the brain endocannabinoid system in the effects of drugs abused by humans tested in preclinical procedures. The focus is on behavioral and neurochemical effects of drugs acting at cannabinoid receptors, or that modulate brain endocannabinoid levels. We are also testing the involvement of the endocannabinoid system in the behavioral and neurochemical effects produced by selected drugs of abuse, cocaine, amphetamine, methamphetamine, heroin, delta­9­tetrahydrocannabinol (THC), ethanol, and nicotine. These studies will provide valuable information about cannabinoid brain functions related to drug abuse and addiction, and cannabinoid­based pharmacological interventions/strategies against drug dependence. Cannabinoids, initially thought to act through non­specific interactions related to cell membrane fluidity, were shown to activate specific cannabinoid receptors. Two types of these receptors exist, CB1, most expressed in the brain, and CB2 mostly expressed in the periphery. Cannabinoids have been shown to activate other receptors, for example, TRPV1, PPAR, and GPR55. Different endogenous compounds bind to cannabinoid receptors, among them, anandamide (AEA), and 2­arachidonyl­glycerol (2AG). These compounds are not stored in vesicles, like other transmitters, but are released on demand by cleavage of membrane precursor components. The recent availability of natural and synthetic ligands, and drugs that block the metabolism or the uptake of endocannabinoids, has facilitated the study of the role of cannabinoids in physiological functions, for example in synaptic plasticity. Dysfunctions of the endocannabinoid system could also result in neurological disorders, including drug addiction. Summary We have shown that the endocannabinoids AEA (and its metabolically stable analogue methAEA) and 2AG share with drugs abused by humans the ability to acutely stimulate DA levels in the rat NAC shell, suggesting endocannabinoids may possess reinforcing effects. Indeed, AEA promotes and maintains intravenous self­administration behavior in monkeys. These effects are blunted by pretreatment with a selective CB1 antagonist, indicating a direct
nidb.nih.gov/search/searchview.taf?ipid=75507 1/3

 compared to saline treated animals in nidb. Compounds known to increase brain endocannabinoid levels may also elicit DA release. DA D2 receptor activation stimulates AEA levels. in rats trained to discriminate THC from saline (a behavior selectively mediated by CB1 receptors). While anadamide has both CB1 and PPAR­alpha receptor activities. URB597 alone does not elevate DA levels. low doses of cocaine that do not induce behavioral sensitization might become effective when animals are pretreated with enhancers of endocannabinoid levels. as well as anandamide. AEA produced full THC­like effects. and its degree of abuse liability appears low. AEA levels are magnified by blockade of its metabolism.gov/search/searchview. Sensitization can be viewed as a type of synaptic plasticity. OEA and PEA are selective ligands for PPAR receptors. URB­597) might be mediated not only by the endocannabinoid system. but not with AM404. In addition. can activate DA D2 receptors. measured as increased stimulation of behavioral activities before and after sensitizing doses of cocaine. increase AEA levels. another endocannabinoid enhancer. So. like abused drugs. We have suggested that AEA is released by these drugs in specific brain areas by a D2 receptor mediated mechanism. AM404. using self­administration and reinstatement behavioral models of nicotine dependence. injected before the sensitizing dose of cocaine. We started this project studying cocaine sensitization in mice. and in turn.taf?ipid=75507 2/3 . drugs that increase DA levels in the brain. even after FAAH blockade. AEA alone did not produce full THC­like effects (likely due to its rapid metabolism). larger stimulation of DA levels. cocaine­induced sensitization was paralleled by a sensitized. supporting the hypothesis of low levels of AEA in animals at rest. a CB1 antagonist.2/2/13 NIH Annual Report DA000569 CB1 receptor involvement in elevation of DA and reinforcing effects. Nicotine and quinpirole also potentiated the effects of THC. in agreement with negative findings of self­ administration in monkeys. URB597 inhibits the enzyme Fatty Acid Amide Hydrolase (FAAH) that metabolizes AEA. but in our experiments it did not alter DA levels. and its concentration could thus activate CB1 receptors producing THC discriminative effects.  Recently it has also been shown that brain actions of anandamide and blockers of anandamide metabolism (e. believed to mediate behavioral and reinforcing effects of cocaine. Cocaine. administered alone these drugs do not stimulate AEA levels sufficiently to provide CB1­mediated THC­like effects. and place preference in rats. produces cannabinoid­like behaviors in rodents. Our results have confirmed that a single exposure to cocaine induces behavioral sensitization in mice. reduced the sensitization produced by cocaine. Based on our original hypothesis. and amphetamine injected alone did not produce effects significantly different from vehicle. with negligible activity at CB1 receptors. in animals at rest. This drug alone (at doses that fully block FAAH) did not produce DA stimulation. We showed that drugs acting specifically at brain PPAR­alpha receptors can block the addictive actions of nicotine in rats and monkeys. suggesting that.g. when the same drugs are administered in combination with URB­597. will also be measured before and after cocaine sensitization. but potentiated the THC­like effects of THC. and suggesting that URB597 can block AEA metabolism resulting in increased levels of AEA in areas related to DA transmission. However. thus. and can be reversed by CB1 receptor blockade. Alternatively. We have tested the effects of abused drugs in producing CB1­receptor mediated generalization in THC­discrimination tests. However. but also by PPAR­alpha receptors. but potentiate ineffective small doses of THC. We are testing the hypothesis that the development of cocaine sensitization requires release of endocannabinoids. which is also related to alterations in the cannabinoid system. did not enhance the effect of AEA on NAC shell DA. Nicotine and the D2/3 DA receptor agonist quinpirole alone did not generalize to the THC cue.nih. URB597 enhanced the effects of exogenous AEA on DA levels. and surprisingly. It has also been demonstrated that blockade of anandamide metabolism through fatty acid amide hydrolase enzymes by URB­597 might lead to increased levels of oleoylamide (OEA) or palmytoilamide (PEA). FAAH might not be sufficiently expressed in areas related to DA transmission. and even a single exposure to psychostimulants could produce long­term sensitization by increasing strength of excitatory synapses in midbrain dopaminergic regions. We hypothesized that development of psychostimulant sensitization might involve stimulation of brain endocannabinoid levels that can bind to and activate CB1 receptors. levels of AEA are not high enough to activate CB1 receptors. but both drugs did so in animals pretreated with the inhibitor of FAAH that metabolizes AEA. while after pretreatments with URB597. DA transmission. Rimonabant. In agreement. Psychostimulant sensitization might play a role in the path to abuse and addiction.

 Piomelli D. food consumption decreases. As the number of required responses is increased. To test the validity of these suggestions. 1. and has been validated as a behavioral index of reinforcing efficacy. Luchicchi A. Lecca S. Publications Generated during the 2012 Reporting Period Ordered by author name. but not in the NAC shell. Fratta W. we could test some behavioral/ reinforcing effects of cocaine under conditions in which CB1 receptors have been deleted. Pistis M. Yasar S. Mascia P. Justinova Z. Studies are underway to evaluate the role of CB1 receptors in the value of specific reinforcers using these genetically engineered mice. Scherma M. Le Foll B. we are going to test drugs like JHW007. in preclinical procedures that would evaluate the cocaine antagonist effects of drugs when administered together with cocaine. [PMID 20801430] [PMC 2994947] nidb. Biol Psychiatry 69:633­41. It has been recently suggested that selected blockers of the dopamine transporter might possess the ability to negatively interact with an allosteric site of the cannabinoid CB1 receptors.2/2/13 NIH Annual Report DA000569 the nucleus accumbens core.  Our results suggest also that blockade of endocannabinoid metabolism (obtained by pretreatment with URB­597 in mice) enhances the extracellular levels of endocannabinoids released by cocaine. Mice are trained to emit operant responses to get a food reward. and this enhancement could be related to the induction of behavioral sensitization by doses of cocaine otherwise not effective in inducing behavioral or neurochemical sensitization. Fadda P. Tanda G. thus ruling out any possible interference of allosteric CB1 modulation induced by the test compounds. Goldberg SR (2011) Blockade of nicotine reward and reinstatement by activation of alpha­type peroxisome proliferator­activated receptors.nih. Panlilio LV. This study uses genetically modified CB1­receptor KO mice and their wild­type littermates.  We are also studying the role of CB1 receptors on the reinforcing effects of food.taf?ipid=75507 3/3 . Redhi GH. We have also found that the enhancement of cocaine­induced anandamide levels in the brain will also result in a specific related neurochemical sensitization of DA stimulation in the core but not in the shell of the nucleus accumbens. Barnes C. For example. This demand function is derived from behavioral economic theory.gov/search/searchview. It has also been suggested that this negative allosteric modulation of CB1 receptors might be important in these DAT blockers for expressing antagonism to the behavioral/reinforcing effects of cocaine. a DAT blocker that also show allosteric CB1 activity.