Biotecnologia aplicada

Mariana de Oliveira Diniz e Lus Carlos de Souza Ferreira

ao desenvolvimento de vacinas

causados pela revoluo biotecnolgica moderna foi uma mudana significativa na maneira como pensamos e desenvolvemos novas vacinas. Tais mudanas refletem avanos na descoberta de novos antgenos, adjuvantes, vetores ou sistemas de entrega. Embora boa parte das vacinas atualmente administradas em crianas e adultos ainda seja fruto de metodologias desenvolvidas em meados do sculo XX, espera-se que os prximos anos tragam um nmero cada vez maior de novas vacinas mais seguras e eficazes geradas a partir de tcnicas de manipulao gentica e produo de protenas recombinantes em sistemas heterlogos. Neste breve relato, discutiremos alguns aspectos dessa mudana de prticas e conhecimentos aplicados ao desenvolvimento de vacinas. Em particular, enfatizaremos pesquisas voltadas para gerao de vacinas teraputicas para o controle de tumores e sua aplicao em tumores induzidos pelos vrus do papiloma humano. A histria das vacinas e sua aplicao na preveno de doenas infecciosas acumulam mais de 200 anos de dedicao e muito trabalho. Iniciada pela genialidade e pelo empirismo direcionados de mdicos e pesquisadores, como Edward Jenner e Louis Pasteur, observa-se nessa rea um belo exemplo do reducionismo aplicado prtica mdica. Desde as primeiras vacinas baseadas em patgenos, sejam eles bactrias ou vrus, atenuados ou inativados, muito reativos e, em alguns casos, pouco eficientes, a pesquisa vacinal moveu-se na direo de empregar fraes cada vez menores desses patgenos na busca de aumentar a segurana sem comprometimento da eficcia. Dessa forma, comum classificarmos as vacinas em trs grandes grupos (ou geraes) em razo das estratgias ou dos conceitos utilizados na preparao do princpio ativo, os antgenos vacinais. As vacinas de primeira gerao representam aquelas que empregam na sua composio o agente patognico na sua constituio completa, mas submetido a tratamentos que levam inativao ou atenuao dos micro-organismos. Nessa categoria, tambm deve ser destacada a estratgia em que micro-organismos no patognicos derivados de outros hospedeiros so utilizados como antgenos para vacinas voltadas para o controle de doenas causadas por patgenos assemelhados. Essa abordagem bem exemplificada pelas vacinas da varola, baseada em vrus vaccnia isolados de bovinos, e da vacina contra a tuberculose que tambm emprega uma bactria originalmente obtida em bovinos, o Mycobacterium bovis (BCG).
m dos impactos

estudos avanados

24 (70), 2010

19

Nesse grupo, destacam-se tambm as vacinas voltadas para a preveno da coqueluche ou pertssis (vacinal celular), as vacinas contra varola, poliomielite, sarampo, rubola, adenovrus, entre outras. A segunda gerao surgiu com a noo de que, em alguns patgenos, a proteo vacinal pode ser obtida aps a induo de anticorpos voltados para um nico alvo, como uma toxina, responsvel pelos sintomas da doena, ou acares de superfcie que permitem ao sistema imune do hospedeiro neutralizar e eliminar bactrias que de outra forma se propagariam rapidamente antes de serem notadas por nossas principais linhas de defesa imunolgica. Nesse grupo, destacam-se vacinas acelulares que empregam toxoides (toxinas purificadas e inativadas por tratamento qumico), protenas e polissacardeos purificados, como as antitetnica, antidiftrica, hepatite B e as vacinas voltadas para o controle da meningite meningoccica e da pneumonia. Por fim, a terceira e mais recente gerao de vacinas parte de um conceito inovador que a diferencia de uma forma radical das outras geraes vacinais. Nessas vacinais, emprega-se a informao gentica do patgeno responsvel pela codificao de protenas que representem antgenos relevantes para a proteo. Em geral chamadas de vacinas de DNA ou gnicas, as vacinas de terceira gerao foram descobertas de forma emprica no comeo da dcada de 1990 em testes inicialmente voltados para a pesquisa de terapias genticas em que se introduzem no hospedeiro genes que substituiro a informao gentica defeituosa originalmente presente no indivduo. O conceito vacinal surgiu da observao de que animais inoculados com plasmdeos que transportam genes que so expressos em clulas tranfectadas, ou seja, clulas em que o DNA injetado conseguiu penetrar as membranas citoplasmtica e nuclear e utilizar o maquinrio enzimtico necessrio transcrio e traduo, produzem o antgeno, que ir desencadear uma srie de respostas imunolgicas como anticorpos, fundamentais para garantir a proteo contra patgenos que circulam na corrente sangunea, clulas citotxicas, com potencial de identificar e destruir clulas infectadas mesmo na ausncia de patgenos circulantes, e memria, fundamental para um efeito profiltico duradouro. Embora as perspectivas iniciais depositadas nas vacinas de DNA tenham sido frustradas pela baixa imunogenicidade de diversas vacinas submetidas a testes clnicos, os resultados indicam que essas vacinas podem ser instrumentos excelentes para a ativao de respostas imunolgicas citotxicas e, consequentemente, controle de patgenos de replicao intracelular como os vrus, algumas bactrias e certos tipos de cncer. O advento da biotecnologia moderna, em particular a disseminao das tcnicas de manipulao gentica, alterou de diferentes maneiras a pesquisa e o desenvolvimento de vacinas, sejam elas de primeira, segunda ou terceira gerao. Por meio de estratgias de clonagem gnica e mutagnese, podemos gerar micro-organismos atenuados (vrus e bactrias) de forma precisa e com mais segurana. Patgenos atenuados empregados nas vacinas de primeira gerao
estudos avanados

20

24 (70), 2010

podem reverter ao estado nativo virulento. Como, em muitos casos, no se conhece a natureza da alterao gentica sofrida pelo microrganismo durante a atenuao, a possibilidade de reverso virulncia, embora pouco provvel, uma realidade. As tcnicas atualmente disponveis para manipulao gentica permitem obter, com relativa facilidade, mutantes atenuados nos quais genes envolvidos com a patogenicidade ou metabolismo primrio so inativados de forma a no comprometerem a viabilidade do organismo, mas torn-los incapazes de causar doena. No entanto, os custos elevados envolvidos nos testes clnicos e o uso consagrado de determinadas formulaes, como os vrus da poliomielite, sarampo, febre amarela, a bactria Mycobacterium tuberculosis, entre outros, diminuem o interesse de indstrias e laboratrios em investir nessas novas formulaes vacinais (Tabela 1). A biotecnologia revolucionou as vacinas de segunda gerao. Em uma fase inicial, essas vacinas se restringiam utilizao de toxinas inativadas, como na vacina para ttano e difteria, e em um segundo momento, polissacardeos purificados. A utilizao de protenas purificadas a partir de vrus ou bactrias se limitava a situaes em que era possvel cultivar e purificar antgenos especficos, como algumas toxinas, ou obt-los a partir do soro de pacientes infectados, como no caso do vrus da hepatite B. Com o aprimoramento das tcnicas de produo de protenas recombinantes por meio de sistemas de expresso heterloga, bactrias, leveduras, clulas de mamferos e insetos so usados como fonte para os antgenos a serem incorporados nas formulaes vacinais. De fato, a fronteira da vacinologia que hoje recebe mais investimentos e desperta interesses tanto pela segurana de uso como no retorno financeiro est calcada na gerao de vacinas de subunidades que utilizam antgenos recombinantes: a vacina voltada para o controle da hepatite B e, mais recentemente, a vacina preventiva para infeces com vrus do papiloma humano (HPV) (Tabela 1). As vacinas de DNA surgiram como resultado dos avanos biotecnolgicos em DNA recombinante. A informao gentica, responsvel pela codificao de antgenos com aplicao vacinal, clonada e propagada em linhagens de Escherichia coli, um habitante inofensivo de nossa microbiota intestinal. O procedimento de produo relativamente simples e menos oneroso do que aquele envolvido na obteno de protenas recombinantes. Alm disso, algumas caractersticas de modulao de resposta imune das vacinas de DNA tornaram-nas um instrumento valioso para o desenvolvimento de vacinas com caractersticas teraputicas. Sem dvida, mais do que uma vacina especfica, as vacinas DNA representam uma forma alternativa de desenvolver imunoterapias viabilizadas graas introduo das tcnicas de DNA recombinante pesquisa vacinal (Tabela 1).

Vacinas com propriedades teraputicas

Vacinas teraputicas tm como objetivo controlar infeces crnicas ou doenas degenerativas instaladas no indivduo a ser tratado. Nesse aspecto, a definio de vacina teraputica se confunde com o conceito de terapia gnica,

estudos avanados

24 (70), 2010

21

particularmente quando se lana mo de vacinas de DNA ou vetores vivos que, em ltima instncia, introduzem informao gentica nas clulas do hospedeiro que se encarregaro de produzir as protenas que iro desencadear uma resposta imunolgica capaz de reverter o quadro infeccioso ou degenerativo instalado. A base de qualquer vacina teraputica , portanto, reverter situaes nas quais o sistema imunolgico do indivduo no foi capaz de ativar uma resposta imune na intensidade ou na qualidade adequada, o que, em geral, resulta na instalao de um quadro de tolerncia imunolgica. Evidentemente, a relevncia do conceito vacinal teraputico traz sentido apenas nos casos em que no existam opes teraputicas disponveis mais eficientes. Alm disso, para que uma vacina teraputica possa ter sucesso, deve haver evidncias de que a doena e, consequentemente, o patgeno que a causou possam ser controlados pelo sistema imunolgico do indivduo, uma vez que ativado corretamente, como no caso de doenas crnicas como aquelas causadas pelos vrus da imunodeficincia adquirida (HIV), herpes humano (HSV), da hepatite B (HBV) e do papiloma humano (HPV). Avanos no conhecimento dos mecanismos da imunidade permitiram estabelecer parmetros importantes para uma vacina com propriedades teraputicas. Particularmente, a caracterizao do papel funcional de linfcitos T citotxicos, assim como de outras clulas minoritrias do sistema imunolgico com funes semelhantes, representou um passo importante para o avano de pesquisas voltadas para o desenvolvimento de vacinas teraputicas. Ao reconhecerem e destrurem clulas infectadas ou alteradas na sua composio antignica, os linfcitos CD8+ T citxicos representam uma formidvel barreira contra patgenos que evadem outros mecanismos de defesa imunolgica, como os anticorpos e o complemento, ao penetrarem e se multiplicarem no interior de clulas do hospedeiro. Nos ltimos anos, diversos grupos de pesquisa tm se dedicado busca de formulaes vacinais capazes de ativar de forma eficiente e duradoura linfcitos T CD8+ citxicos, capazes de reconhecer e destruir clulas que expressem na sua superfcie fragmentos de antgenos derivados de patgenos virais, bacterianos ou parasitrios que se multiplicam em seu interior. De forma semelhante, vacinas com propriedades anticncer tm sido investigadas h vrias dcadas na esperana de se encontrarem alternativas mais eficazes e menos invasivas para o tratamento de alguns tipos de cncer. Em alguns casos, o tratamento de alguns tipos de cncer se torna mais propcio para uma abordagem vacinal teraputica em funo de uma origem infecciosa, como tumores associados infeco com os vrus HBV e HPV. Nos dois casos, a disponibilidade de vacinas com caractersticas profilticas voltadas para o controle da infeco pelos vrus torna a questo da viabilidade e relevncia das vacinas teraputicas mais complexa e, em determinadas situaes, gera polmicas interessantes sobre o papel de cada uma no controle de determinadas doenas. Nesse aspecto, a recente comercializao de vacinas profilticas para o controle do HPV e a busca por uma alternativa vacinal com caractersticas teraputicas para tumores associados infeco por esse vrus representam um exemplo que merece ser analisado.
22

estudos avanados

24 (70), 2010

Tabela 1 Principais contribuies da biotecnologia no desenvolvimento de vacinas

Tipo vacinal Vacinas de subunidades Patgenos atenuados bivalentes Vacinas de DNA Estratgia biotecnolgica Produo de protenas recombinantes em sistemas heterlogos Manipulao gentica para insero de genes que codifiquem antgenos Imunizao com plasmdeos recombinantes Vacinas Hepatite B, pertssis acelular, HPV Dengue,* BCG,* Salmonella Typhi,* Adenovrus* Vacina contra melanoma#

* Vacinas ainda no disponveis para uso em humanos; # vacina para uso em ces.

A busca por uma vacina teraputica para o controle de tumores associados ao HPV-16
Atualmente, est bem estabelecido que o vrus do papiloma humano (HPV) o principal agente etiolgico do cncer cervical, alm de outros tipos de cncer como tumores anogenitais e de cabea e pescoo. Em relao ao cncer cervical, o vrus HPV est associado a praticamente todos os casos observados. Esse tipo de cncer apresenta grande relevncia epidemiolgica, representando a segunda causa de morte por cncer em mulheres no mundo, causando, aproximadamente, 270 mil mortes por ano, e cerca de 500 mil novos casos so diagnosticados anualmente (Zur Hausen, 2009). Mais de 100 tipos de HPV foram descritos e podem ser classificados de acordo com seu potencial oncognico. Alguns tipos de HPV podem causar verrugas genitais e leses benignas de baixo grau, e so chamados de gentipos de baixo risco, sendo os HPV-6 e HPV-11 os mais prevalentes. Os tipos de HPV associados ao desenvolvimento de tumores do colo do tero so chamados de alto risco e os mais frequentemente encontrados so os HPV-16, HPV-18, HPV-31, HPV-33 e HPV-45. Os vrus HPV-16 e HPV-18 so os tipos mais comumente associados ao cncer cervical, somando 75% da incidncia dos casos desse tipo de cncer, sendo o HPV-16 o mais prevalente no Brasil e na maioria dos pases (Bosch et al., 1995). Consequentemente, esses dois tipos de HPV, particularmente o HPV-16, tm sido usados como modelo para o desenvolvimento de estratgias vacinais, sejam elas profilticas ou teraputicas. Compreender a biologia molecular do vrus HPV essencial ao desenvolvimento de vacinas. Os HPV no so envelopados e seu genoma representado por uma dupla fita de DNA. O genoma desse vrus codifica para duas protenas de expresso tardia, L1 e L2 (L, do ingls late), que compem o capsdeo viral, e seis protenas com funes reguladoras: E1, E2, E4, E5, E6 e E7 (E, do ingls early). Em particular, as protenas E6 e E7 dos HPV de alto risco atuam na malignizao celular por ligao ou inativao dos produtos de genes supressores de tumores, as protenas p53 e pRb, respectivamente (Dyson, 1998). Dessa forma, clulas infectadas por HPV de alto risco podem desenvolver instabilidade genmica e replicao descontrolada que podem progredir para um cncer.
estudos avanados
23

24 (70), 2010

Como o cncer cervical causado por um tipo de infeco viral, h uma expectativa de que uma vacina capaz de gerar anticorpos neutralizantes dirigidos contra as protenas do capsdeo viral L1 e/ou L2 bloqueie a entrada do vrus e, com isso, reduza a incidncia de cncer em longo prazo. Duas vacinas profilticas baseadas em VLP (Virus Like Particles) formados pelas protenas L1 de HPV6, -11, -16 e 18 (Gardasil) ou HPV-16 e -18 (Cervarix) esto disponveis no mercado. Essas vacinas tm se mostrado extremamente eficientes na induo de anticorpos neutralizantes para os vrus. Espera-se, portanto, que indivduos imunizados com essas vacinas estejam protegidos contra a infeco pelos tipos virais usados no preparo das VLP e, consequentemente, no venham a desenvolver cncer de colo uterino no futuro. No entanto, em razo da grande variabilidade natural, a imunidade especfica para os vrus utilizados para gerar as VLP. Mulheres que possuem leses de alto grau ou tumores induzidos por HPV no geram partculas virais e, portanto, no seriam beneficiadas pela estratgia vacinal baseada em VLP. Ao penetrar na clula epitelial, o vrus se integra ao genoma celular e deixa de se replicar. A sntese das protenas L totalmente bloqueada, mas a sntese de algumas protenas reguladoras, particularmente as oncoprotenas E6 e E7, permanece inalterada. Para esses casos, mostra-se necessria a busca de vacinas voltadas para o controle das leses induzidas pelo HPV. Tais vacinas com caractersticas teraputicas devem privilegiar a induo de respostas citotxicas, de forma a levar ao reconhecimento e morte de clulas infectadas. Os principais alvos para esse tipo de vacina so as protenas E6 e E7, expressas constitutivamente nas clulas do carcinoma cervical. Ainda no existem vacinas teraputicas para tumores induzidos por HPV disponveis no mercado, mas diversas formulaes so investigadas em modelo animal e algumas j se encontram na fase de testes clnicos. Diversas abordagens foram empregadas para o desenvolvimento de uma vacina com tais caractersticas, como aquelas baseadas em peptdeos sintticos, protenas purificadas, vetores virais ou bacterianos, e mesmo clulas dendrticas ou tumorais, entre outras. Nesse contexto, as vacinas de DNA surgem como uma estratgia interessante para a gerao de respostas imunes antgeno-especficas que, por sua capacidade de induo de respostas citotxicas, atuariam somente sobre as clulas tumorais, evitando efeitos colaterais como os observados nos tratamento de radio e quimioterapia atualmente empregados. Alguns grupos que pesquisam vacinas de DNA para o controle de tumores induzidos por HPV buscam estratgias que aumentem a imunogenicidade das formulaes vacinais. Nesse contexto, o uso de adjuvantes ou construes que expressem protenas hbridas em que as oncoprotenas de HPV so fusionadas a antgenos que aumentem a imunogenicidade para respostas citotxicas tem recebido particular ateno. Uma alternativa promissora representada por vacinas de DNA que codificam protenas de HPV geneticamente fusionadas glicoprotena D (gD) do vrus herpes simplex tipo I (HSV). A protena gD possui uma regio transmembrana, e, dessa forma, as oncoprotenas do HPV-16 a
24

estudos avanados

24 (70), 2010

ela fusionadas so direcionadas membrana das clulas transfectadas, reduzindo drasticamente os riscos de interao com protenas de ciclo celular e as expondo ao sistema imunolgico de forma mais eficiente. Outros papis adjuvantes atribudos protena gD foram descritos e esto associados capacidade de ligar-se ao receptor HVEM (Herpes Vrus Entry Mediator), pertencente famlia dos receptores de fatores de necrose tumoral (TNFR). Pela interao com esse receptor, foi demonstrado que a protena gD gera sinais de estmulo para clulas do sistema imune por meio da ativao de um fator transcional, o NF-B (Cheung et al., 2009). Alm disso, a protena gD aumenta a imunogenecidade de protenas a ela fusionadas por exercer uma competio com outra protena de membrana denominadas BTLA (B and T Lymphocyte Attenuator), um fator inibidor que suprime a ativao de linfcitos B e T por clulas apresentadoras de antgeno, para um mesmo stio de ligao que as duas protenas possuem em um outro receptor celular denominado HVEM (Herpes Vrus Entry Mediator). Como resultado final, clulas que expressam a protena gD na superfcie reduzem os efeitos inibitrios de BTLA e promovem uma ativao mais eficiente de linfcitos B e T (Lasaro et al., 2008). O uso de vacinas de DNA que codificam para oncoprotenas do HPV16 fusionadas protena gD do HSV-1 foi proposto pelo nosso grupo como estratgia para o controle de tumores induzidos pelo HPV-16 (Lasaro et al., 2005). Essas vacinas foram testadas em camundongos ante sua capacidade de ativar clulas T CD8+ antgeno-especficas e evitar a formao de tumores aps o implante de clulas epiteliais modificadas para expressar as protenas E6 e E7 de HPV-16, chamadas de clulas TC-1. Os animais imunizados com essas vacinas apresentaram induo de clulas CD8+ E7 especficas e 40% de efeito antitumoral teraputico formao de tumores aps receberem quatro doses das vacinas. Nesses ensaios, as clulas tumorais so implantadas no animal, e, algum tempo depois, inicia-se o tratamento com a vacina de DNA, caracterizando, dessa forma, o efeito vacinal teraputico. A estratgia vacinal contra os tumores causados por HPV-16 foi aprimorada com a construo de uma nova vacina de DNA que expressa as oncoprotenas E5, E6 e E7 do HPV-16 fusionadas gD do HSV-1 (Diniz et al., 2010). Os ensaios para verificao da ativao de clulas T CD8+ especficas para as oncoprotenas do HPV-16 mostraram que apenas uma dose da vacina foi suficiente para gerar ativao significativa de clulas CD8+ especficas para E6 e E7(Figura 1A). A vacina foi capaz de gerar 100% de proteo contra tumores em animais que primeiramente foram imunizados e, subsequentemente, desafiados com as clulas TC-1. O efeito antitumoral da vacina foi associado participao de clulas T CD8+, mas no o de clulas T CD4+, em ensaios nos quais essas populaes celulares foram removidas diferencialmente com anticorpos (Figura 1B). Alm disso, com esse vetor foi possvel obter 70% de proteo em camundongos desafiados com clulas TC-1 e, posteriormente, imunizados com trs doses da vacina.
estudos avanados
24 (70), 2010

25

Figura 1 Ativao de precursores de clulas T CD8+ E7-especficas e proteo preventiva contra tumores formados por clulas TC-1 em camundongos imunizados por via parenteral (intramuscular) com o vetor pgD-E7E6E5. (A) Ativao de precursores de clulas T CD8+ em camundongos imunizados com uma dose dos vetores pgD, pE7E6E5 ou pgD-E7E6E5 pela via i.m. (100 g/dose). As porcentagens de clulas CD8+ IFN-+ / CD8+ total foram determinadas duas semanas aps a ltima dose da vacina. A deteco de clulas T CD8+ E7-especficos foi feita com PBMC estimuladas com peptdeo sinttico derivado da protena E7 (49RAHYNIVTF57) especfico para MHC-I e marcadas com anticorpos anti-CD8 (FITC) e IFN- intracelular (PE). (B) Proteo vacinal preventiva para o desenvolvimento de tumores em camundongos imunizados com uma dose do pgDE7E6E5, com depleo de clulas CD4 ou CD8 atravs da inoculao de anticorpos especficos. Os camundongos foram desafiados com 5 x105 clulas TC-1 tumorais duas semanas aps a administrao da vacina.

26

estudos avanados

24 (70), 2010

Citocinas relacionadas ativao ou proliferao de clulas do sistema imune podem ser empregadas como estratgia alternativa para aumentar a resposta induzida por uma vacina de DNA. Tomando por base estudos anteriores, desenvolvemos uma terceira verso das vacinas de DNA para tumores induzidos por HPV-16, que emprega a coadministrao de plasmdeos que expressam as citocinas IL-12 ou GM-CSF em combinao com os plasmdeos que expressam a E7 ou E7E6E5 de HPV-16 fusionados gD de HSV-1. Utilizando esse sistema de imunizao combinado, foi possvel obter um efeito protetor teraputico mximo, ou seja, 100% de camundongos livres de tumor, com a coadministrao do plasmdeo que expressa IL-12 ou GM-CSF com o plasmdeo que expressa o antgeno alvo (Figura 2). De forma marcante, o aumento do efeito antitumoral da vacina permitiu a reduo do nmero de doses da vacina necessria eliminao completa dos tumores, e, com apenas uma dose, foi possvel conferir proteo teraputica a todos os animais implantados com clulas tumorais.

Figura 2 Coadministrao do vetor pgDE7 e de plasmdeos que codificam para IL-12 ou GM-CSF confere proteo teraputica a desafios de clulas TC-1. Os camundongos foram imunizados com trs doses (100 g) de pgDE7 combinado com 100 g de pcDNA3.1 (vetor vazio), os vetores pGM-CSF ou pIL-12. As vacinas foram administradas 8 horas aps o desafio com 5 x 105 clulas TC-1. O crescimento tumoral foi monitorado at 60 dias aps o desafio.

As evidncias geradas por esses estudos demonstram que a estratgia vacinal proposta se mostra muito promissora como uma alternativa imunolgica para o controle de tumores induzidos por HPV-16, com resultados superiores aos publicados na literatura para outras formulaes testadas em modelo animal. Estudos adicionais esto sendo realizados no sentido de viabilizar o teste das formulaes em condies clnicas. Para isso, modificaes adicionais sero
estudos avanados

24 (70), 2010

27

necessrias de forma a permitir aumento de imunogenicidade em seres humanos e reduo de reaes inflamatrias pelo uso de material obtido em condies de boas prticas de produo.

Consideraes finais
A biotecnologia tem contribudo de forma decisiva para o aprimoramento de processos relacionados ao desenvolvimento e produo de novas vacinas ou ao aprimoramento de vacinas j existentes para que se tornem mais seguras e eficazes. A disponibilizao de vacinas profilticas e a perspectiva de desenvolvimento de vacinas com efeito teraputico para tumores associados ao HPV ilustram de forma clara o impacto que a biotecnologia moderna traz para o campo da pesquisa vacinal. Dados epidemiolgicos divulgados pelo Instituto Nacional do Cncer (Inca) revelam que, no Brasil, a cada 100 mil mulheres cerca de 20 desenvolvem cncer de colo uterino. Ao todo so diagnosticados 20 mil novos casos por ano, uma incidncia duas vezes maior do que a registrada em pases mais desenvolvidos. Esses dados destacam o impacto que vacinas voltadas para o controle de tumores associados ao HPV podem ter no pas. A disponibilizao de vacinas profilticas para a infeco com dois tipos de HPV criou uma grande expectativa sobre uma futura reduo no nmero de vidas perdidas para a doena e na reduo do custo econmico associado ao tratamento de pessoas com leses em estgios mais avanados do cncer. A realidade, no entanto, demonstra que o maior impacto das formulaes vacinais lanadas no mercado tem sido econmico, mas para as companhias farmacuticas que as produzem. O custo elevado da vacina (aproximadamente US$ 1.000,00) por pessoa tem permitido aos fabricantes obter lucros superiores a US$ 3 bilhes anuais, fato que tem despertado o interesse de muitos laboratrios em investir em vacinas capazes de conferir retornos financeiros elevados. Por sua vez, a real contribuio dessas vacinas para a reduo do impacto da doena no mundo ainda uma dvida, pois as pessoas atendidas so as menos propensas a sentir os desdobramentos mais srios da doena. O desenvolvimento de uma vacina com propriedades teraputicas para controle do cncer associado infeco pelo HPV traz perspectivas interessantes em relao ao real benefcio em termos de controle da doena. Ao contrrio das vacinas profilticas, espera-se que as vacinas teraputicas confiram proteo a diversos tipos de HPV e previnam o surgimento de tumores em indivduos j infectados. A disponibilizao do tratamento, assim que comprovada sua eficcia teraputica em ensaios clnicos, para o sistema pblico de sade poder ter um impacto imediato na reduo no nmero de mortes associadas doena, alm de reduzir drasticamente o custo e os traumas associados ao tratamento de tumores em estgios avanados de crescimento. No entanto, como toda pesquisa em estgio inicial de desenvolvimento, o aporte de recursos necessrios comprovao dos efeitos clnicos fundamental para que tais perspectivas possam ser concretizadas.

28

estudos avanados

24 (70), 2010

Referncias
BOSCH, F. X. et al. Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer: a worldwide perspective. International biological study on cervical cancer (IBSCC) Study Group. J. Natl. Cancer Inst., v.87, p.796-802, 1995. CHEUNG, T. C. et al. Unconventional ligand activation of herpesvirus entry mediator signals cell survival. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, v.106, p.6244-9, 2009. CROFT, M. The evolving crosstalk between co-stimulatory and co-inhibitory receptors: HVEM-BTLA. Trends Immunol., v.26, p.292-4, 2004. DINIZ, M. O. et al. Immune responses and therapeutic antitumor effects of an experimental DNA vaccine encoding human papillomavirus type 16 oncoproteins genetically fused to herpesvirus glycoprotein D. Clin. Vac. Immunol., v.17, p.1576-83, 2010. DYSON, N. The regulation of E2F by pRB-family proteins. Genes Dev., v.12, n.15, p.2245-62, 1998. LASARO, M. O. et al. Anti-tumor DNA vaccines based on the expression of human papillomavirus-16 E6/E7 oncoproteins genetically fused with the glycoprotein D from human herpes virus-1. Microb. Infection, v.7, p.1541-50, 2005. ____________. Targeting of antigen to the herpesvirus entry mediator augments primary adaptive immune responses. Nat. Med., v.14, p.205-12, 2008. ZUR HAUSEN, H. Papillomaviruses in the causation of human cancers a brief historical account. Virology, v.384, p.260-5, 2009.

As vacinas representam a estratgia de interveno com a melhor relao custo-benefcio at hoje aplicada em sade pblica. Avanos biotecnolgicos em diversas reas de pesquisa tm contribudo para o desenvolvimento de formulaes mais seguras e eficazes. Alm disso, a aplicao de ferramentas biotecnolgicas no desenvolvimento de vacinas tem provocado mudanas na maneira como pensamos e produzimos esses reagentes tanto para uso em humanos como em animais. Essas tecnologias trazem perspectivas de que, em futuro prximo, vacinas para o controle de doenas infecciosas e degenerativas ainda no passveis de preveno possam estar disponveis. Em particular, vacinas com efeitos teraputicos, embora representem um enorme desafio a ser vencido, tornam-se cada vez prximas da realidade e, certamente, tero um impacto enorme no tratamento de diversas doenas, como em algumas formas de cncer.
resumo palavras-chave:

Vacinas, Biotecnologia, HPV, Cncer, Vacinas teraputicas.

abstract Vaccines represent the intervention strategy with the best cost-benefit ratio so far applied in public health. Biotechnological advances in various areas of vaccine research have contributed to the development of safer and more effective formulations. Moreover, application of biotechnology tools to vaccine development has caused changes in the way we think and produce these reagents both for use in humans and animals. Such technologies bring renewed perspectives that, in the near future, vaccines for the control of several non-preventable infectious and degenerative diseases will be available. In particular, the development of vaccines with therapeutic effects, although represen-

estudos avanados

24 (70), 2010

29

ting a huge challenge, are getting closer to reality and will have a tremendous impact in the treatment of several diseases such as some cancer forms.
keywords:

Vaccines, Biotechnology, HPV, Cancer, Therapeutic vaccines.

Mariana de Oliveira Diniz professora no Departamento de Microbiologia do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo. @ mdiniz@usp.br Lus Carlos de Souza Ferreira professor no Departamento de Microbiologia do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo. @ lcsf@usp.br. Recebido em 6.10.2010 e aceito em 13.10.2010.

30

estudos avanados

24 (70), 2010