CICLO DEL CIDO CTRICO Y REACCIONES ANAPLERTICAS

El ciclo del cido ctrico o ciclo de Krebs o ciclo de los cidos tricarboxlicos (TCA) es el ltimo paso del catabolismo oxidativo de la glucosa (las 2 molculas de Acetil-CoA resultantes de la descarboxilacin oxidativa de la gluclisis aerobia ingresan en l) y en general de todos los principios inmediatos. - Es una ruta cclica. - A diferencia de la gluclisis transcurre con intermediarios libres no fosforilados (en la gluclisis sus intermediarios no se podan mover porque estaban fosforilados). - Es intramitocondrial (todas las enzimas estn en el interior de la mitocondria, a diferencia de la gluclisis anaerobia, que se suceda en el citosol). - Totalmente dependiente de oxgeno. - Muchas de sus reacciones necesitan tambin magnesio (presente en todo el metabolismo). Consiste en resumen en la conversin del Acetil-CoA (oxidacin) hasta 2 molculas de CO2. - Su finalidad principal es producir energa (va catablica), pero tambin, aporta metabolitos para otras rutas metablicas de una manera mucho ms llamativa que otra va catablica, por tanto tambin es una va anablica. De aqu que se le conozca como una va anfiblica (va que posee principalmente una funcin catablica pero tambin anablica, aunque sea en un segundo plano).

Reacciones del ciclo:

1. Partimos de oxalacetato que reacciona con Acetil-CoA de forma irreversible, formando citrato (que da nombre al ciclo) y liberando el CoA 1 reaccin irreversible del ciclo. citrato sintasa (no gasta ATP) 1 enzima irreversible Las siguientes 2 reacciones (2 y 3) producen en su conjunto la isomerizacin del citrato a isocitrato y estarn catalizadas por la misma enzima, producindose ambas de manera sucesiva: 2. El citrato pierde 1 molcula de H2O dando lugar a un cido intermediario de poca importancia, el cis-aconitato. 3. El cis-aconitato reincorpora la molcula de H2O en una posicin distinta a la original, dando lugar al isocitrato. aconitasa Las siguientes 2 reacciones (4 y 5) estn destinadas a la oxidacin y descarboxilacin del isocitrato para obtener -cetoglutarato y estarn catalizadas por la misma enzima, aunque no se producen a la vez: 4. El isocitrato se oxida a oxal-succinato (intermediario poco importante), empleando como CoE al NAD+, que se reduce a NADH + H+.

5. El oxal-succinato se descarboxila, *perdiendo la 1 molcula de CO2* y dando lugar al cetoglutarato 2 reaccin irreversible isocitrato deshidrogenasa (DH) 2 enzima irreversible . 6. El -cetoglutarato se descarboxila a succinil CoA (similar a la descarboxilacin oxidativa del piruvato), reducindose una molcula de NAD+ y *liberndose la 2 molcula de CO2* 3 reaccin irreversible complejo multienzimtico -cetoglutarato-deshidrogenasa 3 enzima irreversible A partir de aqu el resto de reacciones van a cerrar el ciclo porque ya hemos perdido las 2 molculas de CO2, es decir, ya hemos descarboxilado. 7. El succinil CoA es un compuesto rico energticamente, por lo que se rompe el enlace que une el succinato con la CoA, liberndose CoA-SH y formndose GTP y dando lugar a succinato. succinil CoA sintetasa (gasta ATP) Antes de este paso podamos distinguir los carbonos procedentes del Acetil-CoA hasta el succinil CoA incluido o 6 reaccin - (encuadrados en bolgrafo azul), pero a partir de ste paso ya no nos es posible hacerlo. 8. El succinato da lugar al fumarato por deshidrogenacin, empleando como CoE al FAD que se reduce a FADH2. succinato deshidrogenasa 9. El fumarato da lugar al malato mediante la incorporacin de 1 molcula de H2O. fumarasa 10. ltima reaccin: el malato da lugar al compuesto inicial del ciclo, el oxalacetato, por oxidacin y empleando la CoE NAD+ que se reduce a NADH + H+. malato deshidrogenasa

BALANCE DEL CICLO DE KREBS - Material: 1 Acetil-CoA 2 CO2 (Todo lo dems se recicla) - Energtico: Por fosforilacin a nivel de sustrato: 1 GTP/ATP

Por fosforilacin oxidativa: + cada una genera 3 ATP CR 9 ATP 2 cada una genera CR 2 ATP - Final: 12 ATP x cada molcula de Acetil CoA que entra en el ciclo junto a la cadena respiratoria

Balance Energtico Total del Metabolismo de Carbohidratos (recopilatorio) G CO2 + H2O (reaccin simplificada) Gluclisis (anaerobia): G 2 pir = 6-8 ATP Gluclisis (aerobia) descarboxilacin oxidativa: 2 pir 2 Acetil-CoA = 6 ATP Ciclo de Krebs (TCA) en combinacin con CR: 2 Acetil-CoA 4 CO2 + H2O = 24 ATP - Total: 36-38 ATP REGULACION DEL CICLO DE KREBS (puntos clave en la regulacin)
El Ciclo de Krebs estar regulado en base a sus 2 funciones (produccin de energa y de metabolitos para otras vas), es decir, cuando haga falta energa o metabolitos se producir. Hay que tener en cuenta que el Ciclo es totalmente dependiente del O2 (totalmente aerobio). Aunque no veamos al O2 en el Ciclo, ste depende totalmente de l, porque si no tenemos un nivel adecuado de NAD y FAD, y por tanto un buen funcionamiento de la cadena respiratoria, el Ciclo no se podr producir. Por qu el O2 es importante para el Ciclo de Krebs? Porque el oxgeno permite la regeneracin de las CoE de poder reductor mediante fosforilacin oxidativa. Por tanto, tendr 3 puntos de control: (1) Energtico (2) De Intermediarios metablicos Citrato: hace falta para la sntesis de AG y lpidos en general -Cetoglutarato: es necesario para la sntesis de glutmico (glutamina bases nitrogenadas) Succinil CoA: requerido para sintetizar grupos hemos porfirinas (hemoglobina, mioglobina, citocromos) OAA (cido oxalactico o oxalacetato su forma ionizada): necesario para la sntesis de glucosa y a Parte de ellos se escapa para nutrir a otras vas; de ah a que haya que reponerlos en algn momento. (3) De suministro de NAD y FAD (buen funcionamiento de la CR)

ENZIMAS REGULADAS (sern las que catalizan reacciones irreversibles) 1) CITRATO SINTASA: Inhibidores (-) competitivos (por analoga estructural al sustrato): - Citrato (debido a su semejanza con el OAA; 4 de sus C son idnticos) - Succinil CoA

Inhibidores (-) alostricos: - Desde el punto de vista energtico: (-) ATP - Desde el punto de vista de sustrato metabolitos: (-) un nivel alto de metabolitos (significar que el ciclo est bien nutrido) No tiene Activadores (+). 2) ISOCITRATO DESHIDROGENASA (DH) = alostrica. Es la enzima limitante ms importante por ser la 1 enzima especfica del Ciclo que cataliza una reaccin irreversible (ser tambin la ms lenta). Inhibidores (-) alostricos: - Desde el punto de vista energtico: ATP, NADH No tiene inhibicin alostrica desde el punto de vista de metabolitos. Activadores (+) alostricos: ADP, AMP y NAD+ 3) COMPLEJO MULTIENZIMTICO = alostrico Inhibidores (-) alostricos: Desde el punto de vista energtico: ATP y NADH Desde el punto de vista de metabolitos: Succinil CoA (es su producto final, por lo que cuando ste aumenta, la enzima disminuye) Activadores (+) alostricos: ADP, AMP, NAD+ Los inhibidores y los activadores son casi todos alostricos salvo los competitivos de la citrato sintasa. En resumen, si la ruta enzimtica est bien nutrida de ATP y metabolitos, el Ciclo se bloquear. Si en cambio existe la necesidad de energa o metabolitos, el Ciclo se activar (controles metablicos lgicos). Las enzimas limitantes son siempre las ms lentas y las que limitan la velocidad de la ruta.

REACCIONES ANAPLERTICAS Si en el ciclo no vamos reponiendo los metabolitos secundarios que se desvan, el ciclo se detiene. Tiene que haber reacciones que los repongan; estas son las REACCIONES ANAPLERTICAS (reacciones de relleno). Van encaminadas a formar intermediarios del ciclo de Krebs para que ste no se detenga (citrato, succinil CoAtodos los que se van perdiendo). - Cul ser el metabolito ms interesante de reponer?
Para que se inicie se necesita suficiente Acetil-CoA (el cual procede de la sntesis de HC, lpidos, protenas por lo que no habr problemas en cuanto a su cantidad) y OAA (forma algn a, glucosa por lo que habr ms problemas en cuando a su cantidad que con el Acetil-CoA, pues ya hay pocos y estamos desviando una parte). En condiciones normales los niveles de Acetil-CoA ya son mayores que los de OAA (pues procede de cualquier principio inmediato), es decir, ya existe una descompensacin a favor del Acetil-CoA, por lo que en perodos de ayuno (nocturno) o durante el ejercicio intento (o cualquier situacin que incremente el requerimiento energtico porque el organismo est haciendo un esfuerzo) el hgado repondr la glucosa, con lo que aumentar sus niveles, produciendo an ms Acetil-CoA

(ms descompensacin), y el poco OAA que hay se destinar tambin a la sntesis de glucosa; Incluso si el ayuno llega a ser prolongado se fuerza la degradacin de lpidos AG para obtener energa, que aumentarn todava ms los niveles de Acetil-CoA. Laura del Olmo 5

Conclusin: El OAA es el metabolito ms importante que hay que reponer. Las reacciones anaplerticas van a reponer cualquiera de los metabolitos del Ciclo, pero el ms interesante ser el OAA pues a partir de l se puede conseguir cualquier metabolito ya que est al inicio. En condiciones de ayuno o ejercicio intenso habr mucho menos OAA (sintetizar glucosa) y mucho ms Acetil-CoA (degradar grasa), por lo que estas reacciones se producirn cuando la relacin OAA/Acetil-CoA est muy descompensada.

Principales reacciones anaplerticas 1) Piruvato o Pirvico OAA por carboxilacin - Se produce en las mitocondrias. - Es totalmente irreversible (hgado, rin.. importante). - Necesitamos energa para formarlo (hidrlisis de ATP).
Enzima: piruvato carboxilasa (alostrica), dependiente de la CoE biotina -CoA Es como formarlo a travs del Acetil-CoA (directamente o metablicamente no es posible AcetilCoA OAA) ya que el piruvato forma Acetil-CoA. 2) Fosfoenolpiruvato (PEP) paso previo al piruvato en la gluclisis - OAA por carboxilacin - Se produce en el citosol. - Es reversible. - Como el PEP es un compuesto rico en energa libera/sintetiza GTP = ATP (energticamente iguales). GDP GTP Enzima: PEP carboxiquinasa 3) Piruvato Malato por carboxilacion y reduccin del grupo ceto a al grupo alcohol (sntesis indirecta de OAA, pues el Malato sintetiza OAA) - Se produce en el citosol. - Es reversible. - Se oxida NADPH + H+ NADP+. Enzima: Mlica (regulador: niveles de NADPH) - Sintetiza malato a partir de piruvato