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Agrobiotecnología

Curso 2007

Biotecnología en reproducción animal
Lino Barañao

Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Universidad de Buenos Aires

Sumario
Introducción Inseminación artificial Superovulación / Transferencia de embriones Producción de embriones in vitro Micromanipulación Criopreservación Aplicación a diferentes especies animales
Agrobiotecnología
Biotecnología en reproducción animal

Conclusiones Referencias

Introducción

Agrobiotecnología
Biotecnología en reproducción animal

• • • • Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .4 ovulaciones por año y 261 ovulaciones en 15 años.000 y 500. El ciclo estral en bovinos tiene una duración de 21 días.000 ovocitos por ovario en el momento del nacimiento. La biotecnología de la reproducción está fundamentalmente orientada a aumentar la capacidad reproductiva de las hembras.La capacidad reproductiva de las hembras es limitada • En la mayoría de las especies domésticas existen entre 300. La capacidad reproductiva de la hembra bovina es menor en comparación a su potencial. En bovinos se producirían 17.

Ovogénesis y desarrollo folicular Ovario Folículo Primario Folículo Terciario Epitelio germinal Folículo Te rciario Folículo Secundario Folículo a tré sico Cuerpo blanco Cuerpo hemorrágico Cue rpo lúte o Crecimiento Folicular Independiente de gonadotrofinas Folículo preantral Folículo en crecimiento Folículo antral temprano Reclutamiento inciado por FSH Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal Control intraovárico Control gonadotrofinas Folículo ovulatorio Folículos primordiales Adaptado de: Senger. . 1997. Pathways to pregnancy and parturition.

Folículo antral Células de la granulosa Zona pelúcida Ovocito Núcleo Esquema de un folículo antral Células de la granulosa Ovocito Microscopía electrónica de barrido de un folículo antral Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

Control hormonal del ciclo estral El ciclo estral está regulado por el eje hipotálamo-hipófiso-gonadal Hipotálamo GnRH Progesterona Hipófisis FSH LH Inhibina Estradiol CL Folículo Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal Ovario .

Prostaglandina F2 alfa .Ciclo estral y sincronización de celos CL • Sincronización de celos .Progestágenos CL Atresia Ovulación Progesterona CA Estradiol PGF2α Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal FSH LH Ciclo estral .

estradiol Diámetro de los folículos (mm) Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 2 4 GnRH PF2α Folículo ovulatorio 6 8 10 12 14 16 18 20 22 Días del ciclo estral .Dinámica folicular durante el ciclo estral y control de las ondas foliculares Dinámica folicular Diámetro de los folículos (mm) 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 2 Onda anovulatoria Luteólisis Folículo ovulatorio Onda ovulatoria 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 Días del ciclo estral Sincronización de onda folicular y ovulación: GnRH.

Inseminación artificial Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

Efectiva Oviducto 102 Vagina Cervix Útero Unión útero-tubal Sitio de fertilización Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal 107 105 103 Gradiente en el número de espermatozoides viables después del servicio en el tracto genital de la hembra .La inseminación artificial es la técnica reproductiva mas difundida Técnica de inseminación artificial en el ganado bovino: .De bajo costo .Simple .

Uso intensivo de un macho de alto valor genético .Rápida difusión de la genética superior • • • • Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal Control de enfermedades venéreas Eliminación de costos asociados al toro Uso de machos incapacitados Transporte y conservación prolongada de material genético Utilización de semen sexado • .Ventajas y aplicaciones de la inseminación artificial • Aumento del progreso genético . genético (ensayo de progenie) .Aumento de la eficiencia de estimación del valor .

785 232.627 530 9.204 0 0 8. .270.917.803 40.920 16.027 2.176. Theriogenology.794 2.850 43.821 Dosis producidas congeladas 1.938.269 63.903 11.Producción de semen en el ganado bovino Región África Norteamérica Sudamérica Lejano Oriente Oriente Medio Europa Total Centros de colección de semen 18 69 71 188 17 239 602 Toros 646 9.641.500 5.694. 2003.228 268 19.559.484.071 Adaptado de: Vishwanath.640 115.102 Dosis producidas frescas 55.347.874.

Theriogenology. .Inseminación artificial con semen sexado Especie Humana Porcina Equina Bovina Canina Ovina Diferencia X-Y (%) 2.8 3.7 3.8 3.6 3.2 Adaptado de: Johnson and Welch. 1999.9 4.

Enfermedades genéticas ligadas al sexo . caballos) • Investigación • Animales transgénicos • Medicina humana Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .Posibles usos del semen sexado • Producción animal • Animales de compañía • Deportes (perros.Elección del sexo .

Equipamiento costoso • Menor fertilidad .Separación de 1x107 espermatozoides de cada sexo por hora con una pureza de 90% .Test de progenie .Dosis de inseminación reducidas (2x106) .Aumento de la presión de selección .Espermatozoides con reducida fertilidad • Utilización de semen sexado Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal . fertilización in vitro) .Asociado con otras tecnologías (superovulación y transferencia de embriones.El uso de semen sexado para inseminación artificial de bovinos es aún limitado • Alto costo de la tecnología .Utilización de semen fresco (no criopreservado) .

Superovulación / Transferencia de embriones Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

La superovulación y transferencia de embriones permite incrementar la tasa reproductiva de hembras de alto valor genético Donante Receptoras Crías de la donante Superovulación Transferencia de embriones Sevicio natural o inseminación artificial Recuperación de embriones .

Alto costo Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .Vida media corta.Riesgo de Encefalopatía Espongiforme Bovina (EEB) • Gonadotrofina de yegua preñada (eCG) . múltiples aplicaciones .Alto costo • FSH y LH recombinante .Las respuestas a los tratamientos superovulatorios son muy variables Hormonas utilizadas: • Gonadotrofinas extraídas de la hipófisis de porcinos u ovinos (pFSH y oFSH) . anticuerpos anti-eCG • Gonadotrofina de la menopausia humana (hMG) .Vida media larga.Relación FSH/LH variable .

Desarrollo y tránsito embrionario en el tracto genital Día 0 = Celo Día 2 Día 3 Día 4 Día 5 Día 1 Día 6-8 .

Reprod. .. 2003. Biol.Morfología embrionaria Embriones bovinos día 4 Embriones bovinos día 8 Tomado de: Lattanzi et al..

La recolección de embriones se realiza por medios no quirúrgicos • Circuito cerrado con flujo continuo • Catéter de 3 vías Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

Instrumental utilizado para la recolección no quirúrgica • Catéter de 3 vías: flujo continuo Entrada de fluido Cérvix Entrada de fluido (1o vía) Entrada de aire (2o vía) Salida de fluido Vagina Salida de fluido (3o vía) • Catéter de 2 vías: flujo discontinuo Entrada y salida de fluido Entrada y salida de fluido (1o vía) Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal Balón con aire Entrada de aire (2o vía) .

Búsqueda y evaluación de los embriones en el laboratorio Filtro para retener embriones Lavado de los filtros Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal Búsqueda de embriones Blastocistos en diferentes estadios .

Manejo sanitario de los embriones A A B Interacción patógenoembrion zona pelúcida C patógeno Lavado de embriones Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal A B C Embriones no aceptables .

Transferencia no quirúrgica de embriones
Catéter y puntas plásticas estériles descartables. (Minitüb, Alemania)

Catéter de transferencia metálico (Mintüb, Alemania) Cargado de la pajuela empleada para la transferencia
Algodón Aire

Pajuelas (0,25 ml) empleadas para la transferencia (Mintüb, Alemania).

Aire

Medio de cultivo

Embrión en medio de cultivo

Medio de cultivo

Aplicaciones de la transferencia de embriones

• Aumento del progreso genético
- Aumento de la presión de selección - Reducción del intervalo generacional - Difusión de la mejora genética

• Control de enfermedades • Importación-exportación
Agrobiotecnología
Biotecnología en reproducción animal

• Conservación de especies en peligro de extinción

Producción de embriones in vitro

Agrobiotecnología
Biotecnología en reproducción animal

Producción de embriones in vitro Ovarios de matadero Recolección de ovocitos Animales vivos (OPU) Maduración in vitro Fertilización in vitro Descongelado y capacitación de los espermatozoides Cultivo in vitro Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal Criopreservación Transferencia de embriones .

Recolección de los ovocitos • Obtención de ovocitos a partir de animales sacrificados para consumo .Uso en Investigación Lavado de ovarios Aspiración de los folículos antrales Complejos cúmulus-ovocito .Garantía sanitaria escasa .Progreso genético mínimo .

Maduración nuclear y maduración citoplasmática • Expansión del cúmulus 24 h 24hs • Reinicio de la meiosis Vesicula germinal 10-12 h Metafase I 10-12 h Metafase II CP .

Maduración nuclear: reinicio de la meiosis Inhibidor de la meiosis Inhibidor de la meiosis .

1er Cuerpo Metafase I polar Metafase II MPF MAPKinasa Vesícula Ruptura de la germinal vesícula germinal Pico preovulatorio de LH Remoción del ovocito del folículo Ovulación Fertilización .Evolución de los niveles de MPF y MAP-quinasa.

Fertilización in vitro Gradiente de Percoll Antes de la centrifugación Después de la centrifugación Coincubación de ovocitos y espermatozoides Diluyente Semen 45% Percoll Espermatozoides no motiles Espermatozoides motiles 90% Percoll .

Activación del ovocito y bloqueo espermático Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

descondensación de la cromatina y formación de pronúcleos Pronúcleos 2do CP 1er CP 1er CP 2do CP 1er CP Segregación de cromosomas homólogos Descondensación de la cabeza del espermatozoide Espermatozoide descondensándose en el citoplasma Formación de pronúcleos y singamia. 1er y 2do CP 1er CP Espermatozoide que no penetró la zona pelúcida Pronúcleos .Fertilización.

8 células Mórula Blastocisto expandido Blastocisto protruído .Los ovocitos fertilizados se cultivan in vitro por 8 días • Desarrollo de embriones in vitro Estadio pronuclear Embrión de 2 células Embrión de 4 .

Sistemas para el cultivo de embriones in vitro • Co-cultivo: relacionado a altos índices de anormalidades . . malformaciones).Concentración de O2: 5% . + aminoácidos + seroalbúmina bovina (BSA) .Cultivos primarios: células de la granulosa. bovino (SFB) . al nacimiento (mayor tamaño. . células . Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .Concentración de O2: 20% . menor .Medio de cultivo: TCM-199 o Menezo´s B2 + suero fetal . distocia. . mortalidad perinatal y porcentaje de malformaciones. BRL . Mayor reproducibilidad. oviductales • Medios Definidos: mayores tasas de desarrollo.Líneas celulares: Vero.Medio de cultivo: SOF (Synthetic Oviductal Fluid) .

Menor viabilidad .Mayor cantidad de lípidos .Mayor sensibilidad al enfriamiento y criopreservación .Mayores pérdidas fetales durante la gestación .Menor número de células .Mayor incidencia de anormalidades cromosómicas Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .Los embriones producidos in vitro son menos viables que los producidos in vivo • Características de los embriones producidos in vitro: .Menor proporción de células en el macizo celular interno .Uniones intercelulares anormales .Menor tasa de preñez después de la transferencia .

. Theriogenology. OPU) • Obtención de ovocitos a partir de animales vivos Dispositivo de OPU Tubo de acero Bomba de vacío Ecógrafo Transductor Tubo interno de acero del sistema de guía Mango Aguja 19-G Conector de acero Tubo de silicona Tubo de acero Transductor Fijación del ovario Ovario Aguja Pared rectal Pared vaginal Dispositivo de OPU Cervix Adaptado de: Bols et al.Punción folicular (Ovum Pick-Up. 1995..

Aplicaciones de la producción de embriones in vitro • Investigación básica: .Obtención de embriones de animales muertos Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal • Base para el desarrollo y/o aplicación .Obtención de embriones de vacas preñadas (OPU) . sacrificados para consumo • Aplicaciones comerciales: .Producción de embriones en diferentes estadios de .Obtención de embriones de vacas que no pueden ser . prepúberes (OPU) .Producción de mayor número de embriones . superovuladas y/o con problemas reproductivos (OPU) . de otras técnicas: . desarrollo a bajo costo a partir de ovarios de animales .Menor intervalo generacional por uso de animales .Producción de animales transgénicos .Clonación .

Micromanipulación Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

Mellizos idénticos producidos por microcirugía . Tomado de: Palma. División de una mórula fuera de la zona pelúcida. Hemiembriones después de la división. Arg. Unidad de micromanipulación Tomado de: Palma et al.1991. 2001.. Vet. Med.. Rev.Producción de mellizos por microcirugía Apertura de la zona pelúcida para extraer al embrión. INTA (Argentina). Biotecnología de la Reproducción.

Biopsia y sexado Blastómero PCR .

Inyección intracitoplasmática de espermatozoide (Intracitoplasmic Sperm Injection. ICSI). Ovocito maduro (metafase II) Micropipeta .

Inyección pronuclear Ovocito fecundado Micropipeta Pronúcleo .

Transplante nuclear Ovocito en MII Enucleación Célula donante Transplante nuclear .

Producción de quimeras por agregación de células a un blastocisto Blastocisto Micropipeta Células inyectadas .

Criopreservación Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

6 oC/min -196 15 25 Tiempo (minutos) 90 Adaptado de: Palma.500 – 20.Tasas de enfriamiento para diferentes sistemas de criopreservación Vitrificación Estabilización Congelamiento gradual Seeding 25 Temperatura (oC) -7 -30 2. 2001.000 oC/min 0. INTA (Argentina).3 – 0. Biotecnología de la Reproducción. .

No hay formación de cristales de hielo .Formación de cristales de hielo .Alta concentración de crioprotector: mayor . probabilidad de daño osmótico y por toxicidad .Bajo costo: enfriamiento directo en N2 líquido • Refrigeración .Baja concentración de crioprotectores: mayor .Alto costo: equipo para el descenso controlado . de la temperatura Equipo para enfriamiento controlado • Vitrificación .Enfriamiento a 4 oC por 24 a 72 h Termo de nitrógeno líquido . probabilidad de daño por enfriamiento .Características de los métodos de criopreservación • Congelamiento Gradual .

Etilenglicol Solución extractora del crioprotector • Crioprotectores impermeables: .Propilenglicol .Trealosa .Rafinosa Embrión en solución con crioprotectores .Sacarosa .Descongelamiento: método de transferencia directa Tapón algodón Aire Aire Sellado Solución extractora del crioprotector Tapón algodón Embrión en solución con crioprotectores Solución extractora del crioprotector • Crioprotectores permeables: .Glicerol .Dimetilsulfóxido (DMSO) .Glucosa .

952 39.472 73.631 267.Embriones bovinos transferidos en el año 2002 Embriones producidos in vivo Continentes Africa América del Norte América del Sur Asia Europa Oceanía Total Frescos 5.143 94 83.342 (2.2%) 90.4%) 538.037 48.557 89.7%) 189.670 22.375 41.827 11.312 Embriones producidos in vitro Frescos 4 464 46.618 15.8%) 32.166 53.314 270.191 52 16.2%) 92.572 (52%) Total 14.378 Total 101 494 48. IETS. 2003.952 42 66.124 (34.371 (16.753 17.329 Adaptado de: Data Retrieval Committee Annual Report.951 Congelados 97 30 2.968 5.040 8.7%) 119.945 (6.740 (48%) Congelados 8.785 99.859 5.412 (17.118 (22.630 13.652 45. .

(ensayos de progenie) • Sincronización e inducción de la ovulación .Aumento de la eficiencia del manejo productivo y reproductivo • Superovulación. variedad de especies mamíferas .Sanidad Animal: importación de embriones libres de patógenos Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .Recuperación mas eficaz de individuos exóticos y razas en .Uso intensivo de un macho de alto valor genético . peligro de extinción .Aumento de la eficiencia de estimación del valor genético .Aumento de la eficiencia de la producción de terneros .Conservación in vitro por tiempo indefinido de una amplia . transferencia y criopreservación de .Control de enfermedades de transmisión sexual . comercialización alrededor del mundo a bajo costo . embriones .Uso intensivo de hembras de alto valor genético .Conclusiones: aplicaciones biotecnológicas a la reproducción de animales • Inseminación artificial y congelación de semen .Rápida difusión de genética superior: transporte y .

Inyección intracitoplasmática de espermatozoides en especies .Clonación por transferencia nuclear.Utilización de hembras que no pueden ser superovuladas . la eficiencia de los programas de transferencia de embriones .Uso mas intensivo de hembras de alto valor genético .Conclusiones: aplicaciones biotecnológicas a la reproducción de animales • Sexado de espermatozoides y embriones . producción de quimeras para generar organismos transgénicos Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .Producción de mellizos idénticos para investigación o aumentar .Producción de descendencia del sexo deseado • Producción in vitro de embriones . inyección pronuclear o . en las que no es factible la fertilización in vitro .Producción de embriones con ovarios de matadero • Micromanipulación .

Aplicaciones a diferentes especies animales Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .

IIUP 2. IA Instrumental para inseminación intrauterina Adaptado de: Belstra. 2002.IA: Inseminación artificial convencional en el cervix (3x109 espermatozoides) . IIU Unión úterotubal (UUT) Tracto reproductivo de una cerda Ovario 13-15 cm Canal cervical 1.IIUP: Inseminación intrauterina profunda a 2/3 de la distancia entre el cervix . . Annual Swine Report.) Cuerpo del útero Cuerno uterino 25 cm de la UUT 18-20 cm del cervix 3.Biotecnología aplicada a la reproducción de porcinos • Inseminación artificial .IIU: Inseminación intrauterina en el cuerpo del útero . y la unión útero-tubal (UUT) (50x106 esperm.

Por cirugía o posterior al sacrificio Detección de celo Transferencias de embriones en cerdos en 2002 Países Canada Corea Europa USA Total Inseminacion artificial Lavajes 129 30 105 ---264 Embriones transferibles 2. 2003.No quirúrgico: trasncervical • Colecta de embriones: quirúrgica .008 Hembras recipientes 43 12 85 80 176 Adaptado de: Data Retrieval Committee Annual Report.Disponibles: PG600 (Intervet .Quirúrgico .Inc.Una sola inseminación por hembra . IETS. eCG.Endoscopía . . hCG • Transferencia de embriones: . GnRH.) .Inseminación a tiempo fijo .405 505 2.098 ---5.No aprobados: Progestagenos.Biotecnología aplicada a la reproducción de porcinos • Control hormonal de estro y ovulación .

• Fertilización in vitro: . • Cultivo in vitro: .Maduración citoplasmática: EGF. . .Modified Whitten’s medium . xenotransplante de tejidos/órganos. transgénicos.Iowa State University medium .Formación de pronúcleo masculino.Biotecnología aplicada a la reproducción de porcinos •Sistemas de producción de . transporte del material genético . cisteína. a bajo costo y con bajo riesgo sanitario. cúmulus. mTBM) • Problemas del sistema: .North Carolina State University 23 medium .Tamaño de los folículos . .Variabilidad del semen: fresco. .Uso comercial: aumento del progreso . criopreservado .Factores para reducir poliespermia.Investigación con propósitos biomédicos: .Formulación de medio de FIV (TALP.Poliespermia. embriones in vitro .Beltsvile Embryo Culture Medium 3 • Origen de los ovocitos . . genético.Ovarios . • Maduración in vitro: .Contenido de glutatión. . células del . LH .Maduración nuclear: FSH.Investigación básica.

Biotecnología aplicada a la reproducción de porcinos • Criopreservación de embriones .Alta sensibilidad a la hipotermia (15oC) debido al alto contenido lipídico .Vitrificación: “open pulled straw. OPS” Microscopía confocal de un embrión porcino después de la criopreservación para examinar el daño en el citoesqueleto .

Países líderes: Estados Unidos. GnRH y .No existe producto comercial para superovular yeguas: Las hormonas eCG. Argentina y Brasil (Australia.Recolección de embriones de yeguas que ovulan espontáneamente: 0. yeguas en .5-1 embrión . . . polo. . . competencia (carrera.Aplicaciones de la superovulación: TE. Extracto de pituitaria equina (EPE) aumenta 3-4 veces . FSH porcina no son activas. Italia.Semen refrigerado (5 oC por 24-48 h) o congelado (gran variabilidad individual en . criopreservación. por hembra .Aplicaciones de la TE: Yeguas viejas con pobre historial reproductivo. ICSI. Alemania y Francia utilizan la TE en menor medida) .) • Superovulación . cuanto a tolerancia la congelación) • Transferencia de embriones (TE) . la tasa de ovulación. fertilización in vitro.Biotecnología aplicada a la reproducción de equinos • Inseminación artificial . punción folicular. etc. Canadá.Limitante para la difusión de la TE: Asociaciones de Criadores .

Limitantes de la criopreservación de embriones: cápsula del embrión . sin perder viabilidad .Congelación y vitrificación de ovocitos Blastocisto temprano Blastocele en formación Detritos celulares Blastocisto expandido Blastocele Macizo celular interno Trofoblasto Zona Pelúcida 100 µm Cápsula 100 µm . (membrana proteica acelular).Refrigeración y transporte de embriones: se pueden mantener a 5 oC por 24 h . asociaciones de criadores .Biotecnología aplicada a la reproducción de equinos • Criopreservación .

000 30 15 10.500 3. 1997.000 62 71 47 5. . Adaptado de: Data Retrieval Committee Annual Report. Current Therapy in Large Animal Theriogenology.Biotecnología aplicada a la reproducción de equinos Recolección no quirúrgica de embriones Medio de lavaje Ovario Cervix Oviducto Balón inflable Utero Aire Vagina Vejiga Embriones equinos transferidos en 2002 Países Argentina Brasil Frescos 2.725 234 200 20 11 3 Congelados Recto Entrada medio Canadá Europa Sudáfrica Estados Unidos Australia Filtro Salida medio Nueva Zelanda Total Adaptado de: Aguilar and Woods. 2003. IETS.

Limitantes de la FIV: maduración del ovocito y capacitación espermática .Biotecnología aplicada a la reproducción de equinos • Producción in vitro de embriones: fertilización in vitro (FIV).Disponibilidad de ovarios de matadero para investigación limitada: información limitada . congelado. estudios sobre . o durante el diestro . GIFT) . padrillos con bajo recuento espermático).Transferencia de ovocitos y espermatozoides (200.Aplicaciones de la transferencia de gametas: En casos de semen limitante (semen sexado. . . como alternativa a la FIV • Transferencia de gametas (Gamete Intrafallopian Tube Transfer. como alternativa a la FIV . (maduración in vitro) .ICSI es utilizada como alternativa a la FIV: La inyección del espermatozoide evita las .Aplicaciones de la transferencia de ovocitos: Infecciones uterinas persistentes. deficiencias de los sistemas de FIV • Transferencia de ovocitos . fertilización y cultivo in vitro .Recolección de ovocitos: De folículos preovulatorios (madurados in vivo). maduración de ovocitos in vitro. sobre sistemas de maduración.000) al oviducto. intracitoplasmática de espermatozoide (ICSI) . inyección .

.Alta variabilidad de la respuesta al tratamiento superovulatorio y de . intrauterina Inseminación transcervical Inseminación transcervical con endoscopio Inseminación intrauterina por laparoscopía • Superovulación y transferencia de embriones .Recolección de embriones y transferencia: procedimiento quirúrgico . las tasas de fertilización.Método de inseminación: vaginal.Biotecnología aplicada a la reproducción de ovinos y caprinos • Inseminación Artificial . cervical. transcervical.

004 52.Ovarios de matadero . IETS.784 Adaptado de: Data Retrieval Committee Annual Report.Biotecnología aplicada a la reproducción de ovinos y caprinos • Producción de embriones in vitro .921 Embriones Transferidos: Frescos Congelados 83. 2003.Punción folicular laparoscópica de animales vivos • Criopreservación .234 Almacenados 21.433 9. .214 6.Congelación gradual o vitrificación .453 7.496 17.Embriones producidos in vitro son mas sensibles Embriones de oveja y cabra transferidos en 2002 Embriones recolectados Ovinos Caprinos 100.457 7.843 Exportados 19.

reproductiva.687 ---989.811. que es mas marcada en los .776. • Estacionalidad de la actividad .907 Vicuña 23.569 70.336 27.912 2.585 ---100 ---2.000 12. Transferencia de embriones y biotecnología.022.612 Vicuña (Vicugna vicugna) Guanaco (Lama guanicoe) Total Tomado de: Larocca.000 165.793 Alpaca 400 324.510.000 2.000 ------53 1.363 200 9.600 602. camélidos silvestres (vicuña y guanaco) • Ovulación inducida: 22 a 46 h después de . 2001.700 54 25.593 3. la cópula • Alta mortalidad embrionaria .000 30.Biotecnología aplicada a la reproducción de camélidos sudamericanos Llama (Lama glama) Alpaca (Lama pacos) Población de camélidos sudamericanos en los países andinos (número estimado) País Argentina Bolivia Chile Colombia Ecuador Paraguay Perú Guanaco 578.482 Llama 135.000 ---482 ---100.

baja motilidad. (2000) • Híbridos . . nuclear (2003) .Dificultosa colecta de semen .Punción folicular guiada por ultrasonografía .Mórulas producidas in vitro por transferencia . baja concentración .Folículos dominantes por largos períodos • Sistema de producción de embriones in vitro: poco desarrollado .Alta viscosidad.Biotecnología aplicada a la reproducción de camélidos sudamericanos Blastocistos bovinos día 7 Embrión de llama día 7 • Inseminación artificial: 30 h después de estímulo ovulatorio .Ausencia de fase luteal .Preñez de un embrión vitrificado (2002) . espermática.Criopreservación poco eficiente de semen • Superovulación y transferencia de embriones: respuestas muy variables Blastocistos reexpandidos 72 h post-descongelación .

la punción folicular • En India 124 embriones fueron recolectados in vivo. donde es irremplazable • Baja eficiencia de superovulación y recolección de embriones Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal • Desarrollo de sistemas de producción de embriones in vitro a . transferidos frescos y 19 congelados en el 2002. Además 265 . . partir de ovarios de matadero o de animales vivos a través de .Biotecnología aplicada a la reproducción de búfalos (Bubalus bubalis) • Población mundial: 163 millones de cabezas • Producción importante en regiones pantanosas y anegadizas. embriones de búfalo están almacenados . 78 fueron .

cerca de .000 embriones. otoño. para el uso eficiente del semen recuperado. se colectaron más de 1.4 millones de cabezas en 4. los partos están sincronizados en el verano. • En 2002. embriones producidos in vitro.Biotecnología aplicada a la reproducción de ciervos (Cervus elaphus) • Existen 2. • Altamente estacionales: La actividad ovulatoria comienza en . 800 fueron transferidos.500 establecimientos. Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal • La producción in vitro de embriones sería la mejor alternativa . Canadá reportó preñeces de . .

Aumento de la eficiencia de estimación del valor genético .Sanidad Animal: importación de embriones libres de patógenos Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal .Aumento de la eficiencia de la producción de terneros .Conclusiones: aplicaciones biotecnológicas a la reproducción de animales • Inseminación artificial y congelación de semen .Control de enfermedades de transmisión sexual . peligro de extinción .Rápida difusión de genética superior: transporte y . comercialización alrededor del mundo a bajo costo . (ensayos de progenie) • Sincronización e inducción de la ovulación . embriones . variedad de especies mamíferas .Conservación in vitro por tiempo indefinido de una amplia . transferencia y criopreservación de .Uso intensivo de un macho de alto valor genético .Recuperación mas eficaz de individuos exóticos y razas en .Aumento de la eficiencia del manejo productivo y reproductivo • Superovulación.Uso intensivo de hembras de alto valor genético .

Conclusiones: aplicaciones biotecnológicas a la reproducción de animales • Sexado de espermatozoides y embriones .Utilización de hembras que no pueden ser superovuladas .Producción de descendencia del sexo deseado • Producción in vitro de embriones . en las que no es factible la fertilización in vitro .Producción de mellizos idénticos para investigación o aumentar . inyección pronuclear o .Uso mas intensivo de hembras de alto valor genético . producción de quimeras para generar organismos transgénicos Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal . la eficiencia de los programas de transferencia de embriones .Clonación por transferencia nuclear.Producción de embriones con ovarios de matadero • Micromanipulación .Inyección intracitoplasmática de espermatozoides en especies .

S. Stringfellow. Agrobiotecnología Biotecnología en reproducción animal . Facultad de Veterinaria. 2001. D. Academic Press. 1996. Centre for Agriculture and Biosciences International (CABI). Controlled reproduction in cattle and buffaloes.Referencias 1. Palma. A. 2001. 4. Gordon. J. and Seidel. 2.M.A. Universidad de la República. 1997. Reproductive tissue banking. and Critser. Libro electrónico. Biotecnología de la Reproducción. Transferencia de embriones y biotecnología Área de Biotecnología de la Reproducción Animal. República Oriental del Uruguay.A. Karow. Montevideo.M.K. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA. Manual of the International Embryo Transfer Society. 5. 3. IETS. Argentina). 1998. G. C. I. Larocca.