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CBTIS 113

MANUAL DE PRACTICAS DE VALORACION CLINICA

BIOMETRIA HEMATICA

Especialidad de: LABORATORIO CLINICO

Prctica: Alumno:

Titulo de la Prctica: Fecha de realizacin BIOMETRIA HEMATICA Nombre del docente: Q.F.B.HERMINIA GARCIA ALVAREZ

BIOMETRIA HEMATICA
OBJETIVO DE LA PRCTICA:
Observar los elementos formes de la sangre.

INTRODUCCIN:
La biometra hemtica es un auxiliar en el diagnostico y seguimiento de anemias, leucemias, pacientes con quimioterapias, sndrome febril e infecciones. La Biometra Hemtica tambin denominada Hemograma, es uno de los estudios de rutina de mayor importancia, ya que la informacin que de aqu se deriva nos proporciona una idea muy confiable del estado general de la salud del paciente, consta de 2 bloques: Formula Roja: Determina los parmetros relacionados con el eritrocito. Formula Blanca: Determina los parmetros relacionados con los leucocitos.

Prctica: Alumno:

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FUNDAMENTO:
Es una prueba de deteccin bsica y constituye la tcnica de laboratorio que se pide con ms frecuencia. Los datos que proporciona constituyen informacin diagnstica muy valiosa sobre el sistema hematolgico y otros aparatos del cuerpo, pronstico, respuesta al tratamiento y recuperacin. Consta de una serie de pruebas que determinan el nmero, variedad, porcentaje, concentracin y calidad de las clulas sanguneas

MATERIAL A UTILIZAR:
CANTIDAD
-------------------------

DESCRIPCIN
Jeringa de 5 ml. Tubos de ensaye de 13X100. Portaobjetos. Pipeta de Thoma para cuenta de glbulos rojos. Pipeta de Thoma para cuenta de glbulos blancos. Pipeta de Sal Tubos capilares Mechero Pipeta de 5 ml. Gradilla Gasa Boquilla

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EQUIPO A UTILIZAR:
CANTIDAD
---------

DESCRIPCIN
Microscopio Microcentrfuga Espectrofotmetro Escala para leer microhematcrito.

MATERIAL BIOLOGICO:
CANTIDAD
---

DESCRIPCIN
Sangre con anticoagulante

REACTIVOS A UTILIZAR:
CANTIDAD
-------------

DESCRIPCIN
Solucin de Drabkin Anticoagulante (sol. EDTA) Colorante de Wright Solucin de Hayem Lquido de Turck Oxalato de Calcio al 1% (diluyente) con azul de cresil brillante Azul de cresil brillante Aceite de inmersin

RECOLECCION DE MUESTRA:
Extraer sangre venosa extrada en tubo con anticoagulante

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TCNICA:
*FORMULA ROJA: La determinacin de la frmula roja se compone de los siguientes parmetros: A. Hematocrito (Ht): Es el porcentaje de la sangre que est compuesta por eritrocitos. 1. Mezcla en forma homognea y en forma lenta la sangre, para evitar hemlisis. 2. Llena un tubo capilar con la sangre hasta las tres cuartas partes del mismo. 3. Con ayuda del mechero sella el tubo en el extremo que se encuentra libre de sangre. 4. Centrfuga el capilar sellado en la microcentrfuga durante 5 minutos. 5. Lee el microhematcrito en una placa de escala de valores. B. Hemoglobina (Hb): Determina la cantidad de esta protena expresada en g. /dl. 1. Coloca en un tubo de ensaye 5 ml. De reactivo de Drabkin. 2. Con una pipeta de Sal mide 0.02 mm de sangre y adiciona sta al tubo que contiene el reactivo de Drabkin. 3. Dejar en reposo durante 10 minutos. 4. Leer en % de transmitancia a 540 nanmetros de longitud de onda. 5. Calibra el aparato a 100% de transmitancia utilizando el blanco de reactivo. 6. Lee la muestra problema.

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C. Recuento eritroctico (Eri): Es la cantidad total de eritrocitos circulantes por microlitro de sangre. 1. Aspira sangre hasta la marca 0.5 en la pipeta de toma para glbulos rojos. 2. Contina aspirando con el lquido de Hayem hasta la marca de 101. 3. Agitar vigorosamente. 4. Elimina las tres primeras gotas de la dilucin que se encuentra en la pipeta. 5. Llena la cmara de Neubauer 6. Dejar reposar durante 1 minuto. 7. Lleva la cmara cuenta glbulos al microscopio, cuenta las clulas en objetivo de 10x. 7. Realiza los clculos correspondientes D. ndices eritrocticos: Determinados mediante clculos matemticos. 1. Volumen Globular Medio (VGM): (Ht. x 10 / Eri), Es el tamao eritroctico expresado en femtolitros. 2. Hemoglobina Globular Media (HGM): (Hb. x 10 / Eri.), Se refiere a la cantidad de hemoglobina depositada en el eritrocitos expresada en picogramos. 3. Concentracin de Hemoglobina Globular Media (CHGM): (Hb x 100 / Ht) Es la cantidad de hemoglobina que est relacionada directamente con el eritrocito. Es el ndice ms preciso, ya que no requiere del conteo total de eritrocitos circulantes.

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E. Reticulocitos: 1. Realizar la toma de muestra correspondiente. 2. En el tubo de ensayo colocar dos gotas de sangre total con anticoagulante. 3. Inmediatamente adicionar con la ayuda de una pipeta Pasteur la misma cantidad de colorante. 4. Mezclar la solucin. 5. Se coloca luego en bao mara por espacio de 10 a 15 minutos. 6. Se realizan frotis sanguneos. 7. Se mira con objetivo de 100x. 8. Se cuentan aproximadamente 1.000 hemates 9. Se saca el promedio de Reticulocitos. F. Morfologa eritroctica: Determinada en el frotis sanguneo. Rouleaux Anisocitosis Esferocitos Policromasia Hipocroma Poiquilocitosis Leptocitos Estomatocitos Clulas en diana Cuerpos de Howell-Jolly Cuerpos de Heinz Eritrocitos nucleados (Rubrocitos y Metarrubrocitos)

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*FORMULA BLANCA: A. Recuento de leucocitos. 1. Llenar la pipeta de glbulos blancos hasta la marca de 0.05, limpia el extremo de la pipeta con una gasa. 2. Con el liquido de Turck termina de llenar la pipeta hasta la marca de 11 .1 3. Mezcla durante un minuto. 4. Desecha las 3 primeras gotas y carga la cmara de Neubauer. 5. Deja reposar 1 minuto despus de haber llenado la cmara. 6. Coloca la cara en el microscopio y lee con el objetivo de 10x. 7. Cuenta los leucocitos en los cuadros grandes de los extremos de la cuadricula de la cmara de Neubauer. 8. Realiza los clculos correspondientes. B. Recuento diferencial. Realiza un frotis de la siguiente manera: 1. Mezcla la sangre del tubo. 1. Coloca una gota en un extremo del porta objetos. 2. Con ayuda del extremo de otro porta objeto distribuye de manera uniforme 3. Deja secar el frotis. 4. Tie con colorante de Wright. 5. Deja secar 6. Observa al microscopio con el objetivo de inmersin.

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C. Recuento plaquetario. 1. Llenar la pipeta de Thoma hasta la marca de 0.5 de muestra, limpia el extremo de la pipeta con una gasa. 2. Con el liquido diluyente termina de llenar la pipeta hasta la marca de 11 .1, limpia cuidadosamente esl extremo de la pipeta nuevamente. 3. Mezclar de 3-5 minutos 4. Tirar las primeras 3-5 gotas 5. Dejar reposar 10- 15 minutos aproximadamente, en una caja petri con un papel filtro hmedo 6. Cargar la cmara cuenta de Neubauer 7. Dejar reposar la cmara 8. Colocar la cmara en el microscopio y lee con el objetivo de 40x. 9. Cuenta la cuadricula central contando solo las 4 esquinas y el cuadro central.

*Las plaquetas aparecen como cuerpos coloreados en


todo el cuadro central

CALCULOS:
*Clculos para eritrocitos: Cuenta los eritrocitos en los 5 cuadros pequeos (80 cuadritos pequeos) asignados para su conteo de la cmara cuenta glbulos. N: nmero de eritrocitos contados. 200: titulo de dilucin 10: correccin de profundidad de la cmara para llevar a 1 mm.

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400:total de cuadritos de la cmara. 80:total de cuadritos contados. Por lo tanto la cantidad de glbulos rojos ledos en los 5 cuadros y adicionada de 4 ceros da la cifra correspondiente al total de eritrocitos en 1 mm3 de sangre. *Clculos para ndices eritrocitarios: -Volumen corpuscular medio:

Expresado en 3 (micras cbicas) -Hemoglobina corpuscular media:

Expresado en picogramos. -Concentracin de Hemoglobina Globular Media:

Expresado en % *Reticulocitos: En casos en que el hematocrito sea bajo se debe corregir el nmero total de reticulocitos as :

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*Clculos para leucocitos: Cuenta los leucocitos en los 4 cuadros asignados para su conteo de la cmara cuanta glbulos. N: nmero de leucocitos contados en los 4 cuadros. 20: titulo de dilucin 10: correccin de profundidad de la cmara para llevar a 1 mm3 4: total de cuadros. *Clculos para plaquetas: Cuenta las plaquetas en los 5 cuadros asignados para su conteo de la cmara de Neubauer. N x 2000= N de plaquetas x mm

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
1. Volumen Globular Medio (VGM): (Ht. x 10 / Eri), Es el tamao eritroctico expresado en femtolitros y se comporta de la siguiente forma: *Valor aumentado: Se presenta en anemia. *Valor disminuido: Se presenta en casos de deficiencia de hierro. 2. Hemoglobina Globular Media (HGM): (Hb. x 10 / Eri.), Se refiere a la cantidad de hemoglobina depositada en los eritrocitos expresada en picogramos. *Valor aumentado: En los casos de hemlisis tanto in vivo como in Vitro; la hemoglobina extracelular tambin est implcita, aunque el ndice asume que toda la hemoglobina es intracelular por lo que se debe interpretar con reservas. Durante la reticulocitosis permanece normal o ligeramente elevado.

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*Valor disminuido: En los casos de deficiencia de hierro. 3. Concentracin de Hemoglobina Globular Media (CHGM): (Hb x 100 / Ht) Es la cantidad de hemoglobina que est relacionada directamente con el eritrocito. Es el ndice ms preciso, ya que no requiere del conteo total de eritrocitos circulantes. Valor aumentado: En los casos de hemlisis tanto in vivo como in Vitro, as mismo puede incrementarse en los casos de esferocitosis marcada. Valor disminuido: En los casos de reticulocitosis y deficiencias de hierro.

NOTAS IMPORTANTES:
Algunos factores que afectan hematocrito, hemoglobina y conteo eritroctico son: 1. Cambios que inciden directamente en la circulacin de eritrocitos: *Valor disminuido: Se denomina anemia. Los tres parmetros disminuyen aunque este decremento puede ser desproporcionado cuando existen cambios en el tamao eritroctico y/o la cantidad de hemoglobina contenida en ellos. *Valor aumentado: Denominado policitemia. Aumento del nmero de eritrocitos circulantes. 2. Cambios en el volumen plasmtico: Valor aumentado: Se presenta en estados de deshidratacin. Valor disminuido: Se presentan en sobrehidratacin con fluidos administrados parenteralmente dando una lectura que simula anemia.

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VALORES DE REFERENCIA:
PARMETROS Hematocrito Hemoglobina Recuento de eritrocitos Reticulocitos VGM HGM CHGM Recuento de leucocitos Neutrfilos: En banda: Segmentados: Metamielocitos: Eosinfilos: Basfilos: Monocitos: Linfocitos: Recuento de plaquetas VALORES DE REFERENCIA H 40- 52 % M 37-47% H 13.2 g M 12-16 g H 4.2-5.9 M 4.2-5.4 millones/

N : Hasta 2.6 % A : Hasta 2.0 % ndices eritrocitarios: 89 a 95 micras cbicas 27 a 33 picogramos 32 a 34% 4,500 10,000 mm3 Recuento diferencial: 40 a 85 % 0 a 11 % 40 a 46% 0a2% 0a7% 0a3% 1 a 13 % 12 a 46% 150 mil- 450 mil /mm

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PREGUNTAS GUIA:
Cmo se prepara el diluyente para glbulos rojos? R=

Cmo se prepara el diluyente para glbulos blancos? R=

Cul es funcin de la hemoglobina? R=

De qu color se tien los Eosinfilos y por qu? R=

De qu color se tien los Basfilos y por qu R=

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ESQUEMA:

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GLOSARIO DE TERMINOS:
Rouleaux: Es el agrupamiento de eritrocitos a manera de monedas amontonadas, es debido a una tendencia de sedimentacin en forma paralela, trastorno que se relaciona con el incremento en la concentracin de fibringeno y/o el cambio en las concentraciones de globulinas. Anisocitosis: Es la variacin en el tamao de los eritrocitos donde aparecen macrocitos y/o microcitos a lado de clulas de tamao normales, se presenta como respuesta en anemias de tipo regenerativo. Macrocitos: Son eritrocitos de gran tamao que provocan incremento en el VGM, (reticulocitos) aparecen generalmente en anemias regenerativas. Microcitos: Son pequeos eritrocitos con un VGM disminuido que son observados en casos de anemias dadas por deficiencia de hierro. Esferocitos: Son considerados microcitos que cuentan con una membrana celular reducida, lo que incrementa la permeabilidad hacia el sodio, se presentan generalmente en anemias de tipo autoinmune y en anemias hemolticas isoinmunes as como despus de una transfusin.

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Policromasia: Es una variacin en la afinidad eritroctica hacia el colorante, donde existe un tono azuloso en las clulas que contienen residuos de ARN, eritrocitos que generalmente son grandes y se consideran reticulocitos. La presencia de policromasia est asociada con el incremento de la actividad eritropoyetica como respuesta a una anemia catalogada como regenerativa cuando est presente. Hipocromia: Se refiere a la presencia de palidez marcada en la regin central del eritrocito dado por la disminucin en la concentracin de hemoglobina dentro de la clula, la causa ms comn en la que se presenta es la deficiencia de hierro. Poiquilocitosis: Son clulas anormales en su forma comnmente encontradas en anemias debidas a la prdida crnica de sangre o a enfermedades caracterizadas por fragmentacin eritroctica, clulas que son retiradas prematuramente de la circulacin agudizando el estado anmico. Los acantocitos, son un tipo de poiquilocitosis. Leptocitos: Son clulas delgadas que cuentan con una membrana celular grande observadas en enfermedades crnicas debilitantes que producen anemia. Estomatocitos: Son eritrocitos con una forma oval hacia el centro que se observa en enfermedades hepticas.

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Clulas en diana: Son clulas con forma de tiro al blanco que se presentan en anemias de tipo regenerativo junto con policromasia, aunque cuando se presentan y no existe policromasia se pueden relacionar con enfermedad renal, heptica o esplnica. Cuerpos de Howell-Jolly: Son remanentes nucleares observados frecuentemente como consecuencia de un estado anmico en procesos regenerativos, no obstante si son numerosos pueden indicar hipoesplenismo. Cuerpos de Heinz: Son estructuras localizadas en la membrana eritroctica producto de la desnaturalizacin de la hemoglobina causada por la accin oxidante de ciertas drogas o qumicos, estos cuerpos desorganizan la membrana eritroctica y se asocian con hemlisis intravascular. Eritrocitos nucleados (Rubrocitos y Metarrubrocitos): Se deben a la liberacin de clulas eritroides inmaduras hacia la circulacin sangunea en los casos de anemia aunque pueden ser observadas en casos de enfermedad de la mdula sea donde existe dao en el parnquima que afecta la barrera capilar, as como en casos de leucemia.

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RESULTADOS:
PARMETROS Hematocrito Hemoglobina Recuento de eritrocitos Reticulocitos VALORES DE REFERENCIA H 40- 52 % M 37-47% H 13.2 g M 12-16 g H 4.2-5.9 M 4.2-5.4 millones/ N : Hasta 2.6 % A : Hasta 2.0 % ndices eritrocitarios: 89 a 95 micras cbicas 27 a 33 picogramos 32 a 34% 4,500 10,000 mm3 Recuento diferencial: 40 a 85 % 0 a 11 % 40 a 46% 0a2% 0a7% 0a3% 1 a 13 % 12 a 46% 150 mil- 450 mil /mm RESULTADOS DEL PACIENTE

VGM HGM CHGM Recuento de leucocitos Neutrfilos: En banda: Segmentados: Metamielocitos: Eosinfilos: Basfilos: Monocitos: Linfocitos: Recuento de plaquetas

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RESULTADOS:
PARMETROS Hematocrito Hemoglobina Recuento de eritrocitos Reticulocitos VALORES DE REFERENCIA H 40- 52 % M 37-47% H 13.2 g M 12-16 g H 4.2-5.9 M 4.2-5.4 millones/ N : Hasta 2.6 % A : Hasta 2.0 % ndices eritrocitarios: 89 a 95 micras cbicas 27 a 33 picogramos 32 a 34% 4,500 10,000 mm3 Recuento diferencial: 40 a 85 % 0 a 11 % 40 a 46% 0a2% 0a7% 0a3% 1 a 13 % 12 a 46% 150 mil- 450 mil /mm RESULTADOS DEL PACIENTE

VGM HGM CHGM Recuento de leucocitos Neutrfilos: En banda: Segmentados: Metamielocitos: Eosinfilos: Basfilos: Monocitos: Linfocitos: Recuento de plaquetas

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RESULTADOS:
PARMETROS Hematocrito Hemoglobina Recuento de eritrocitos Reticulocitos VALORES DE REFERENCIA H 40- 52 % M 37-47% H 13.2 g M 12-16 g H 4.2-5.9 M 4.2-5.4 millones/ N : Hasta 2.6 % A : Hasta 2.0 % ndices eritrocitarios: 89 a 95 micras cbicas 27 a 33 picogramos 32 a 34% 4,500 10,000 mm3 Recuento diferencial: 40 a 85 % 0 a 11 % 40 a 46% 0a2% 0a7% 0a3% 1 a 13 % 12 a 46% 150 mil- 450 mil /mm RESULTADOS DEL PACIENTE

VGM HGM CHGM Recuento de leucocitos Neutrfilos: En banda: Segmentados: Metamielocitos: Eosinfilos: Basfilos: Monocitos: Linfocitos: Recuento de plaquetas

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RESULTADOS:
PARMETROS Hematocrito Hemoglobina Recuento de eritrocitos Reticulocitos VALORES DE REFERENCIA H 40- 52 % M 37-47% H 13.2 g M 12-16 g H 4.2-5.9 M 4.2-5.4 millones/ N : Hasta 2.6 % A : Hasta 2.0 % ndices eritrocitarios: 89 a 95 micras cbicas 27 a 33 picogramos 32 a 34% 4,500 10,000 mm3 Recuento diferencial: 40 a 85 % 0 a 11 % 40 a 46% 0a2% 0a7% 0a3% 1 a 13 % 12 a 46% 150 mil- 450 mil /mm RESULTADOS DEL PACIENTE

VGM HGM CHGM Recuento de leucocitos Neutrfilos: En banda: Segmentados: Metamielocitos: Eosinfilos: Basfilos: Monocitos: Linfocitos: Recuento de plaquetas

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RESULTADOS:
PARMETROS Hematocrito Hemoglobina Recuento de eritrocitos Reticulocitos VALORES DE REFERENCIA H 40- 52 % M 37-47% H 13.2 g M 12-16 g H 4.2-5.9 M 4.2-5.4 millones/ N : Hasta 2.6 % A : Hasta 2.0 % ndices eritrocitarios: 89 a 95 micras cbicas 27 a 33 picogramos 32 a 34% 4,500 10,000 mm3 Recuento diferencial: 40 a 85 % 0 a 11 % 40 a 46% 0a2% 0a7% 0a3% 1 a 13 % 12 a 46% 150 mil- 450 mil /mm RESULTADOS DEL PACIENTE

VGM HGM CHGM Recuento de leucocitos Neutrfilos: En banda: Segmentados: Metamielocitos: Eosinfilos: Basfilos: Monocitos: Linfocitos: Recuento de plaquetas

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OBSERVACIONES:

CONCLUSIONES:

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BIBLIOGRAFIA:
Diagnostico y Tratamiento Clnico por el Laboratorio. Marcus A. Krupp, Diagnostico clnico Norman J.Sweet Integral Klusek Hamilton. Manual de Browen Rose Diagnostico Clnico Faust, Ernest, Parasitologa Carroll Clnica Mc Faddin F. Jean Pruebas bioqumicas para la identificacin de bacterias. Rapaport S.J Introduccin a la Hematologia Cowan T. Steels Manual para identificacin de bacterias de importancia mdica AUTOR Lynch, Raphael, Mellor, Spare, Inwood. Todo-Sanford TTULO Mtodos de Laboratorio EDITORIAL Interamericana Salvat.

El Manual Moderno. Interamericana.

Salvat Panamericana

Salvat C.E.C.S.A