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ARTICLE IN PRESS
Reumatol Clin. 2010;6(4):224–230

www.reumatologiaclinica.org

´ n me ´ dica continuada Formacio

Anticuerpos antinucleares$
´ lvarez à ´n ˜ ez-A Javier Cabiedes ~ y Carlos A. Nu
´n, Me ´a, Departamento de Inmunologı ´a y Reumatologı ´a, Instituto Nacional de Ciencias Me ´dicas y Nutricio ´n Salvador Zubira ´xico DF, Me ´xico Laboratorio de Inmunologı

´ N D E L A R T´ INFORMACIO ICULO

R E S U M E N

´culo: Historia del artı Recibido el 24 de julio de 2009 Aceptado el 1 de octubre de 2009 On-line el 30 de diciembre de 2009 Palabras clave: Anticuerpos antinucleares Inmunofluorescencia indirecta Enfermedades autoinmunes

´ logos Los anticuerpos antinucleares son inmunoglobulinas que reconocen componentes celulares auto ´ ticos). Adema ´ s de los ANA autoinmunes, pueden estar en circulacio ´ n ANA (nucleares y citoplasma infecciosos y naturales. ´ n de ANA debe realizarse mediante inmunofluorescencia indirecta (IFI) en lı ´neas celulares La deteccio como prueba de tamizado inicial debido a su alta sensibilidad. Una muestra positiva para ANA, detectados ´ cnicas ma ´ s sensibles y especı ´ficas como ELISA, electromediante IFI, debe confirmarse mediante te inmunotransferencia (Western blot) u otras. ´ n y al tı ´tulo. La deteccio ´ n especı ´fica de Los ANA detectados por IFI deben ser evaluados en base al patro ´ til en el diagno ´ stico y seguimiento de pacientes diversos autoanticuerpos (anti-ENA, ADNcd, etc.) resulta u ´ n debe realizarse de manera ordenada y con enfermedades autoinmunes. Por tal motivo, su deteccio ´as o estrategias enfocadas al buen uso e interpretacio ´ n de la presencia de razonable, empleando las guı ´ n es presentar una recopilacio ´ n de la literatura y nuestra autoanticuerpos. El objetivo de la revisio ´ n y estudio de los ANA. experiencia en la deteccio ˜ a, S.L. Todos los derechos reservados. & 2009 Elsevier Espan

Antinuclear antibodies
A B S T R A C T

Keywords: Antinuclear antibodies Indirect immunofluorescence Autoimmune diseases

Anti-nuclear antibodies (ANA) are immunoglobulin directed against autologous cell nuclear and cytoplasmic components. Besides the autoimmune ANA there are other ANA that can be detected in circulation, like natural and infectious ANA. Because of its high sensibility, detection of the ANA must be done by indirect immunofluorescence (IIF) as screening test and all of those positive samples are convenient to confirm its specificity by ELISA, western blot or other techniques. Positive ANA detected by IIF must be evaluated taking in to account the pattern and titer. The following recommended step is the specificity characterization (reactivity against extractable nuclear antigens [ENA], dsDNA, etc.) which is useful for the diagnosis and follow up of patients with autoimmune diseases, and by such reasoning, its detection must be performed in an orderly and reasonable way using guides or strategies focused to the good use and interpretation of the autoantibodies. The objective of this review is to present a compilation of the literature and our experience in the detection and study of the ANA. ˜ a, S.L. All rights reserved. & 2009 Elsevier Espan

´n Introduccio ´ con El estudio de los anticuerpos antinucleares (ANA) se inicio ´ n en pacientes con lupus eritematoso generalizado la identificacio ´ lulas LE, descrito por Hargraves en 19481. La (LEG) de las ce ´ n de las ce ´ lulas LE fue durante mucho tiempo una prueba deteccio ´ stico de LEG. Sin embargo, an ˜ os utilizada para confirmar el diagno ´ s se demostro ´ su baja especificidad, ya que pueden estar despue ´ndrome de presentes en pacientes con artritis reumatoide (25%), sı

$ ´ n acreditada por el SEAFORMEC con1,7 cre ´ ditos. Consultar Nota: Seccio ´culo en: URL: http://www.reumatologiaclinica.org. preguntas de cada artı Ã Autor para correspondencia. ´ lvarez). ´nico: nuac80df@yahoo.com.mx (C.A. Nu ´n ˜ ez-A Correo electro ~ In memoriananuestromaestroyamigo

´ tica (33%), hepatitis cro ´ nica ¨ Sjogren (15–20%), cirrosis pancrea activa (50–70%) y en otras enfermedades (1–2% miastenia gravis y ´ rpura trombocitopenia idiopa ´ tica). En 1959, Holman mostro ´ pu ´ meno de las ce ´ lulas LE se debı ´a a la presencia de que el feno ´ ´genos nucleares2. Lo anterior llevo anticuerpos que reconocen antı ´ ´ n (doble difusio ´n al desarrollo de tecnicas como la inmunodifusio radial u Ouchterlony y contrainmunoelectroforesis), hemoagluti´ n, fijacio ´ n de complemento, etc. y de te ´ cnicas de micronacio ´a, empleando anticuerpos conjugados con mole ´ culas fluoscopı rescentes (inmunofluorescencia indirecta [IFI]) que aumentaron la ´ n. Actualmente, la especificidad y sensibilidad para la deteccio ´ cnica ma ´ s utilizada para la deteccio ´ n de los ANA es la IFI, la cual te fue desarrollada en 1950 por Conns et al3 y, posteriormente, modificada por Tan4 en 1966, que empleaba como sustratos cortes ´gado o rin ´ n de rato ´ n. Diez an ´ s tarde, publicaron los ˜o ˜ os ma de hı

˜ a, S.L. Todos los derechos reservados. 1699-258X/$ - see front matter & 2009 Elsevier Espan doi:10.1016/j.reuma.2009.10.004

Se asocian a manifestaciones clı autoinmunidad 4. La deteccio ´ n de ANA su facilidad de crecimiento la ma ´neas celulares se considera la prueba inicial de mediante IFI en lı ´ stico de las enfermedades autolaboratorio que apoya al diagno inmunes debido a su alta sensibilidad. Jornadas Me ´ dicas de Actualizacio ´ n en comunicacio ´ xico DF). Desde la ´perspectiva de laboratorio. ADNcd. rentes componentes auto ´nas del centro ´ mero.). la identificacio ´nas por los ANA fue originalmente estudiada purificando proteı ´ cnicas de extraccio ´ n con soluciones salinas. diagno ´ nico (ce ´ lulas HEp-2) y ambos se reportan como sustrato antige ´ n nuclear y citopla ´ smico). ANA (patro ´ n de los antı ´genos reconocidos Por otra parte. son antı ´ n como ANA6. cambios hormonales. dada su ´ cnicas ma ´s relativa baja especificidad. ´pidos. ´ n de los ANA Clasificacio ´ n pueden estar presentes tres tipos de ANA. 2010. Son producidos por linfocitos B CD5+ 2. nos referiremos a ellos citoplasma sin importar su ubicacio como ANA. Reconocen componentes ubicuos (ADN. Principalmente de isotipo G pero tambie pueden ser IgA y/o IgM ´nicas de 3. nucleares mediante te ´ surgio ´ el nombre de antı ´genos extraı ´bles del nu ´ cleo o mejor de ahı ´ s. etc. Reconocen componentes ubicuos (ADN. Uno de En circulacio ´ presente en todos los individuos a tı ´tulos relativamente ellos esta bajos y forman parte del repertorio de los ANA naturales7. Principalmente de isotipo IgM 5. medio multifactorial. para aumentar la sensibilidad y especificidad de los ANA para el ´ stico de las enfermedades autoinmunes.10 (tabla 1). etc.) fosfolı ´tulos fluctu ´ an a lo largo del curso de la 5. interaccio ´ n con el medio (pe ambiente. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. Sin embargo.) fosfolı ´tulos disminuyen cuando desaparece el 5. g. ´mulo antige ´ nico que origina su sı ´ntesis No se conoce el estı ´tulos relativamente altos ˜ os y adultos mayores pueden estar presentes a tı En nin Infecciosos ´mulos antige ´ nicos externos (infecciones) Producidos en respuesta a estı 1. el valores normales de ANA tomando en cuenta el grupo e ´ n observado y los tı ´tulos de los anticuerpos9. Depuracio ´ n idiotipo3. Si bien existe reconocen son referidos tambie ´ n a si es correcto o no llamar a los patrones controversia en relacio ´ smicos como ANA para simplificar la forma de referirse a citopla ´genos ubicuos del nu ´ cleo o los autoanticuerpos que reconocen antı ´ n. En un trabajo nes e realizado en el 2005 mostramos la importancia de establecer los ´tnico. Son polirreactivos ´nicas 6. pero Enfermedades Autoinmunes. Son de baja avidez ´nea germinal 3.org el 14/07/2010. Primera lı ´ n de mole ´ culas propias dan ˜ adas 2.reumatologiaclinica. Ignacio Garcı ´ n personal. IgA e IgM ´nicas de 3. C. Copia para uso personal. Por ello. sensibles y especı electroinmunotransferencia (EIT) o Western blot. Los tı ´mulo antige ´ nico estı 1. no tRNA sintetasa o Jo-1. g. es necesario emplear te ´ficas como: radioinmunoana ´ lisis (RIA). llamen anticuerpos )anticelulares* (Dr. ARTICLE IN PRESS ´ lvarez / Reumatol Clin.A. los ANA cuyo origen son los procesos infecciosos no ´nicas de enfermedad autoinmune y se asocian a manifestaciones clı ´tulos bajan en cuanto se resuelve el proceso infeccioso que les sus tı dio origen7. Nu 225 ´ n para la deteccio ´ n de los ANA en resultados de la estandarizacio ´ ticos5. Isotipos IgG. RNP-U1/ los ma Sm. Existe una propuesta interesante que sugiere que se ´a de la Torre. etc. ya que existen antı ´ n de ANA y ENA Definicio Los ANA son inmunoglobulinas que reaccionan contra dife´ logos nucleares (v. Los tı enfermedad Autoinmunes ´mulo que origina su sı ´ntesis es endo ´ geno o exo ´ geno Son de origen multifactorial El estı ´ rdida de tolerancia inmunolo ´ gica. SSA/Ro. El tercer tipo es el de los ANA autoinmunes. Scl70 y Jo-16. mitocondrias.6(4):224–230 ´n ˜ez-A J.) y citopla ´ smicos (v. No se asocian a manifestaciones clı autoinmunidad 4. carga gene ´ tica. de conocidos como ENA (del ingle ´ s de 100 antı ´genos conocidos.Documento descargado de http://www. Estos u ´genos citopla ´ smicos y los anticuerpos que los obstante. Codificados por genes de lı 4. Participan en la red de regulacio antiidiotipo. aminoacil proteı ´ ltimos. No se asocian a manifestaciones clı Funciones: ´nea de defensa contra pato ´ genos 1. los anticuerpos que reconocen antı genos en ambos compartimentos son detectados en un solo Tabla 1 ´ n de los ANA Clasificacio ANA Naturales Origen ´sticas Caracterı 1. etc. es importante establecer valores de referencia ajustados a las poblacio´tnicas que los van a usar como referencia7–9. ELISA. ´pidos. etc. Sin embargo. pacientes con padecimientos reuma ´ n de los ANA se hace empleando como Actualmente. Cabiedes. la deteccio ´neas celulares HEp-2 y HeLa. Me requiere ser aceptado en consenso internacional. Son de alta avidez 2. etc. Sm. En este sentido. Su produccio ambiente. extractable nuclear antigens). siendo la primera por sustratos las lı ´ s utilizada. Un segundo tipo de patro ANA son los que se producen como resultado de procesos infecciosos. ´ cnicas utilizadas para la deteccio ´ n de ANA Te ´ n de los ANA es muy El sustrato utilizado para la deteccio ´genos cuya concentracio ´ n en las importante. otros) . los cuales ´rdida de la tolerancia inmunolo ´ gica y su origen es reflejan la pe ´ n depende de carga gene ´tica. los cuales existen ma ´ s estudiados y mejor caracterizados son: SSA/SSB. junio de 2009. Son de alta avidez ´n 2.

es importante confirmar la relativamente fa especificidad de los autoanticuerpos detectados mediante ELISA. B. que reconocen epı ´ n empleando otras te ´ cnicas para la deteccio ´n Actualmente se esta ´ ticos y te ´ cnicas de ANA11 como microinmunoensayos enzima ´ tricas de deteccio ´ n mu ´ ltiple (tecnologı ´a xMAP). en Otra te el cual las placas de poliestireno son recubiertas con macerados ´ cleos) de las lı ´neas celulares HEp-2 o HeLa. que por ser una lı ´nea celular epitelial su en las ce ´ n esta ´ aumentada. sensibilidad. Sin embargo. su interpreuna gran cantidad de autoantı ´ n no es sencilla. CENP-B. modificacio Patrones de ANA detectados mediante IFI ´ n se describen las caracterı ´sticas de los patrones A continuacio ´ lulas HEp-2 en que con mayor frecuencia se detectan por IFI en ce sueros de pacientes con enfermedades autoinmunes14–19. ´ cnica utilizada para la deteccio ´ n de ANA es el ELISA. Copia para uso personal. el patro ´genos de la cromatina (nuclesomas. Es altamente sensible y especı ´ n del ensayo. se deben considerar antı ´ n los puntos mencionados anteriormente: antı ´genos especı ´tambie ficos purificados y/o recombinantes. y su uso (debido a su costo. E y F) y en el ELISA el componen los centro ´ nico antı ´geno que esta ´ presente es la proteı ´na CENP-B. C. ´ neos: A) con metafase compacta y tincio ´ n de los nucleolos negativa. la especificidad es mı ´genos que esta ´n resultado positivo no se sabe el o los autoantı dando la positividad o reactividad.14. En (principalmente nu ´nima ya que si se obtiene un este caso. metafase difusa y tincio . C. Por ejemplo. La deteccio ´ n de ANA mediante EIT permite identificar diagno ´genos. ARTICLE IN PRESS 226 ´ lvarez / Reumatol Clin.reumatologiaclinica. D. Cabiedes. Sin embargo. Estos u ´topos12. proteı Es importante resaltar que en os ELISA de tercera y cuarta ´ n. tienen una gran ser ce ´ cleo es ma ´ s grande que el de cantidad de mitocondrias. etc. En las dos citadas. ma ´ s de dos nucleolos y. B) con metafase delineada y tincio ´ n de los nucleolos negativa y C) con Figura 1. tiempo de preparacio ´ mero de muestras que se tiempo de desarrollo del ensayo y nu ´ enfocado principalmente a pueden correr al mismo tiempo) esta ´ n.Documento descargado de http://www. las placas esta ´ n sensibilizadas con antı ´genos purificados generacio ´ ltimos presentan un reducido nu ´ mero de o recombinantes. Un ejemplo de mediante otras te ´n lo anterior es cuando el suero de un paciente da un patro ´ rico mediante IFI en ce ´ lulas HEp-2 y el ELISA que detecta centrome actividad anti-CENP-B resulta negativo. Por el contrario.org el 14/07/2010. u ´ n conocida como Western blot. Patrones homoge ´ n de los nucleolos positiva. Nu ´ lulas de los tejidos es muy baja en contraste con lo que sucede ce ´ lulas HEp-2. Sin embargo. recientemente algunas compan ´as ˜ı investigacio ´ n comercializando equipos para uso en laboratorios de esta ´ stico. ADNcd. 2010. contra componentes celulares. Lo anterior implica que se debe ser muy cauto al epı ´n interpretar los resultados del tamizado inicial y en la confirmacio ´ cnicas ma ´ s sensibles y especı ´ficas. Otra caracterı ´stica de estas ce ´ lulas concentracio ´ s de 46 cromosomas. tambie ´ ltiples usos. los patrones ´ lulas HEp-2 permiten sospechar la especificidad obtenidos en ce ´ n homoge ´ neo sugiere reactividad de los ANA. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. por ello la observacio ´ n de cualquier ce ´ smicos se convierte en una tarea patrones nucleares y citopla ´ cil. es una te ´ cnica La EIT. CENP-C. ADNcs y/o contra antı ´ n centrome ´ rico sugiere reactividad contra las histonas). Su nu ´ lula epitelial normal. entre luminome ´ ltiples otras. Lo anterior se explica porque ´ lulas HEp-2 esta ´ n presentes todos los antı ´genos que en las ce ´ meros (CENP-A. se tiene la ventaja de detectar mu ´genos en un solo ensayo. Sin embargo. ´ cnicas con sensibilidad y especificidad similares o EIT o te mayores11. por es que tienen ma ´ lulas muy activas metabo ´ licamente. Resultados obtenidos en nuestro laboratorio tacio muestran que existen autoanticuerpos que reconocen solo la ´nas del centro ´ mero en ce ´ lulas HEp-2 y forma nativa de las proteı no las formas desnaturalizadas o modificadas obtenidas con frecuencia en la EIT.6(4):224–230 ´n ˜ez-A J. el patro ´nas del centro ´ mero CENP-A. entre ellos esta ´ la deteccio ´ n de actividad que tiene mu ´fica. especificidad y ´ n de la conformacio ´ n nativa de las proteı ´nas.A. Lo anterior confirma que existen anticuerpos ´topos conformacionales de los antı ´genos13.

Patro ´ n centrome ´ rico. Nu 227 ´ n perife ´ rico. cuya intensidad puede variar dependiendo de la en el nu ´ n de los anticuerpos presentes en el suero. Esta definicio ´ n de los patrones moteado grueso en divisio ´ s fa ´ cil de entender e interpretar. es decir. delineada (fig. 2). en puntos intermedios la interpretacio ´ n moteado grueso se debe Nuestra propuesta es que el patro ´ n en el nu ´ cleo con gra ´ nulos finos o gruesos. C.6(4):224–230 ´n ˜ez-A J. el centro de este patro ´ n muestra menos tincio ´ n (fig. Figura 5. no hay reconocimiento de los divisio componentes de la cromatina (fig. finos. Cabiedes. ARTICLE IN PRESS ´ lvarez / Reumatol Clin. 1C) y ˜ idos20. tanto fino como grueso. este se caracteriza por En cuanto al patro ´ n del nu ´ cleo con gra ´ nulos finos o gruesos. en el sentido de que varios patrones ha generado confusio ´ n moteado grueso como aquel en el que el autores definen el patro ´ cleo se observa ten ´ nulos gruesos y el patro ´n ˜ ido con gra nu ´ cleo ten ´ nulos finos. Patro ´ n homoge ´neo se caracteriza por una tincio ´ n homoge ´ nea El patro ´ cleo. La descripcio ´ n. 3). tiene y fino es ma ´ n moteado grueso. Patro ´ n moteado fino. 1A). La placa de la cromatina se tin Los patrones de ANA que se observan con mayor frecuencia ´ n de estos son los moteados. Figura 4. los nucleolos pueden o no estar ten ´ n perife ´rico se caracteriza por tincio ´ n regular alrededor El patro ´ cleo.A. Adema ´ s. Figura 6. Figura 3. ˜ ido con gra moteado fino lo definen como nu ´ nulos son muy gruesos o muy No hay problema cuando los gra ´ n es subjetiva.org el 14/07/2010. La placa concentracio ´ lulas en divisio ´ n puede estar ten ˜ ida de de la cromatina en ce ´ n nucleolar. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. los definir como tincio ´ n ten ´ lulas en ˜ idos y la placa de la cromatina en ce nucleolos esta ´ n no se tin ˜ e. 1B) o difusa (fig. del nu ˜ e de forma delineada o compacta. Patro manera compacta (fig.Documento descargado de http://www.reumatologiaclinica. los nucleolos no se tincio ´ como tampoco se tin ´ lulas ˜ en ası ˜ e la placa de la cromatina en ce tin ´ n (fig. ´ n moteado fino. Figura 2. Patro . 2010. Copia para uso personal. 4).

Las estructuras ten ˜ idas se centriolos en ce pueden identificar desde la fase G2.reumatologiaclinica. Cuando se tin ˜ en los centriolos. 7). y en metafase. 8A). ´ n centrome ´rico tiene como caracterı ´sticas que los El patro ´ cleos se tin ˜ en con puntos finos distribuidos de manera nu ´ nea en el nucleoplasma de las ce ´ lulas en interfase (fig. placa de la cromatina en las ce ´ n centriolar se identifica por la tincio ´ n intensa de los El patro ´ lulas en divisio ´ n.A.Documento descargado de http://www. 8B). A diferencia del patro ´ lulas en divisio ´ n es negativa. El reconocimiento de los componentes del citoesqueleto ´ bulos. ´mina nuclear o laminar es aquel en el que se ´ n de la la El patro ´ n concentrada alrededor del nu ´ cleo y no se extiende observa tincio ´ n perife ´ rico. ´ n nucleolar tiene como caracterı ´stica una tincio ´n El patro intensa de los nucleolos (fig. ce ´smico se define como tincio ´ n homoge ´ nea que ´ n citopla El patro ´ n mitocondrial se cubre todo el citoplasma (fig.org el 14/07/2010. donde se ven dos puntos muy juntos. la hacia el citoplasma (fig. 10).6(4):224–230 ´n ˜ez-A J. Copia para uso personal. Cabiedes. El patro ´ n granular en hileras punteadas que caracteriza por una tincio ´ cleo y se extienden hacia el citoplasma sin cubrirlo rodean al nu por completo. los filamentos del ce ´ tico y las ce ´ lulas en interfase tienen un patro ´n huso acroma ´ n se define como NuMA-1(del ingle ´ s. La placa de la cromatina en las ´ n de la la ´ mina nuclear o laminar. 6). donde se localizan en los polos de la ´ lula (fig. y C) patro ´ n NuMA-2. Patrones de anticuerpos que reconocen antı ´ n NuMA-1. se describen a continuacio ´ n los ma ´ s frecuentes. moteado fino. El patro ´ n de los centriolos y nuclear mitotic apparatus) (fig. homoge ´ n en las ce ´ lulas en divisio ´ n muestra un punteado fino 5). Un patro ´tulo mayor a 1:160. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 8C). de acuerdo a los valores de intermedios con tı ´genos del aparato mito ´ tico: A) anticuerpos anticentriolo (la fotografı ´a muestra ce ´ lulas HEp-2 en diferentes fases del Figura 8. ciclo celular. La tincio localizado en la placa de la cromatina. ARTICLE IN PRESS 228 ´ lvarez / Reumatol Clin. 9). Figura 7. B) patro . microfilamentos y filamentos intermedios) da un (microtu ´ n citopla ´ smico que se conoce como patro ´ n de filamentos patro ´ sculo liso y se caracteriza por tincio ´ n en forma intermedios o de mu ´ n de filamentos de hilos en el citoplasma21 (fig. ´ n a los patrones citopla ´ smicos identificados en En relacio ´ lulas HEp-2. La tincio ´ tico sin tincio ´ n del nucleoplasma en ce ´ lulas en del huso mito interfase se define como NuMA-2 (fig. G2 = Fase G2. C. 2010. Nu sustento en la diferencia de reactividades que muestran los sueros que dan los patrones14. M =Metafase). Patro ´ lulas en divisio ´ n se tin ˜ e de manera difusa debido a reactividad ce cruzada de los anticuerpos dirigidos contra los RNA nucleolares con el ADN de la cromatina.

sı enfermedad mixta del ´ mica y otras. Patro referencia previamente reportados en mestizos mexicanos9. ´ smicos descritos anteriormenLos patrones nucleares y citopla te son patrones puros. nucleosomas y ADN de cadena simple (ADNcs). ´ n entre patrones Si bien no se ha observado una clara asociacio ´tulos de ANA con manifestaciones clı ´nicas de las diferentes y tı ´as autoinmunes. 2). ´ lulas PCNA.A. histonas tina esta (H1. como se mencionara ´ n de guı ´as para la deteccio ´ n de ANA Uso y aplicacio ´ n homoge ´ neo en ce ´ lulas HEp-2 sugiere la presencia de El patro autoanticuerpos contra componentes de la cromatina. Un ejemplo de ANA y el reconocimiento de antı ´ n del patro ´ n homoge ´ neo o perife ´ rico a tı ´tulos esto es la asociacio altos ( 4 1:5120) y el reconocimiento de ADNcd y/o nucleosomas. es importante resaltar que ´ s del 90% de los ANA detectados en ce ´ lulas HEp-2 se presentan ma combinados con al menos 2 patrones diferentes nucleares y/o ´ smicos.) que pueden ser identificados en ce ´ stico esta ´ en HEp-2. ARTICLE IN PRESS ´ lvarez / Reumatol Clin. sugerimos que el uso y/o especı ´ n de autoanticuerpos se haga de manera ordenada. H3. Posteriorsustrato ce mente. Na. Sin embargo. su tejido conectivo. Los ANA no caracterizan a una enfermedad autoinmune en particular. histonas ´ n nuestra experiencia (trabajos (20–40%) y ADNcs (60–80%). para y especı ´geno reconocido por los ANA presentes en la confirmar el antı muestra del paciente. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. debido a su alta sensibilidad. etc. se detectan tambie ´ n y bu ´ squeda de especificidad Interpretacio ´nicas de Cuando un paciente presenta manifestaciones clı enfermedad autoinmune. lisosomal. 3). radioinmunoana ´ lisis. por lo que sugerimos confirmar el patro ´ n de la reactividad contra: 1). Sin embargo. antimu Se han reportado otros patrones de ANA (v. sugerimos apoyados en reportes de otros grupos de investigacio ´ squeda de las especificidades de los autoanticuerpos se que la bu debe realizar de forma ordenada y racional. En un trabajo reciente evaluamos la especificidad de dichos componentes en muestras de pacientes con LEG que dieron ´ n homoge ´ neo mediante IFI23. teniendo en cuenta la ´ n del paciente y la actividad. Patro ´ n de filamentos intermedios o del citoesqueleto. Si la reactivienfermedad. ADNcs. mediante la deteccio nucleosomas. Apoyados en lo anterior. H2b. Cabiedes. pero son poco frecuentes y su valor diagno estudio. La croma´ formada por ADN de cadena doble (ADNcd). Segu ´ n). Figura 9. C. En base a nuestros resultados y ´ n. patro ´ n citopla ´ smico. Sin embargo. se debe interpretar como un resultado positivo para anticuerpos ´ sculo liso. En nin ˜ os y adultos mayores bajos. Figura 10. en estudios realizados en nuestro laboratorio. la ´ n inmunoquı ´mica mediante EIT de los sueros que caracterizacio ´ n moteado fino en la IFI. nucleosomas (95%). es frecuente tener muestras de pacientes con LEG en preparacio ´tulos altos de anticuerpos contra un solo componente de la con tı ´ n homoge ´ neo cromatina.6(4):224–230 ´n ˜ez-A J. citopla ´nica Anticuerpos antinucleares y su relevancia clı ´nica de los ANA en las enfermedades autoLa relevancia clı ´n inmunes ha sido ampliamente estudiada. a tı ´ n mexicana sana9. histonas y 4). peroxisomas. evolucio dad contra los componentes de la cromatina es negativa. etc. la primera prueba que se debe solicitar ´ n de ANA por la te ´ cnica de IFI utilizando como es la deteccio ´ lulas HEp-2.reumatologiaclinica.Documento descargado de http://www. el 5% contra reacciono SSB/La y el 32% contra CENP-B14. Nu 229 ´nica muestran un mayor Los patrones cuya relevancia clı ´ stico son el patro ´ n homoge ´ neo y el centrome ´significado diagno ´topes rico. H2a. 2010. deteccio ´as propuestas por el colegio americano de siguiendo las guı .org el 14/07/2010. ADNcd. En la presente revisio ´ de manera general. los diferentes patrones de ANA y su intensidad (expresada ´ n) debera ´ n ser cuidadosamente evaluados para pasar al en dilucio ´ n mediante pruebas ma ´ s sensibles segundo nivel de caracterizacio ´ficas como ELISA. es clara la asociacio ´ n entre patrones de patologı ´genos especı ´ficos. seguida del reconocimiento contra la mole Sm en el 10%. el 36% ´ contra SSA/Ro recombinante de 52 kDa. EIT. Copia para uso personal. g. en poblacio ´ n. el muestra puede presentar actividad contra otros antı mejor estudiado es Scl-70. ¨ inmunes como: LEG.22. pacientes. tomando como base el ´ n y el tı ´tulo de ANA observado en ce ´ lulas HEp-2. muestran reactividad contra dan patro SSA/Ro nativa y SSA/Ro de 52 kDa en el 55% de las muestras y SSB/ ´ cula RNP/ La en el 5%. la ´genos. Por otro lado. esclerosis siste ´nica au ´ n no ha sido bien establecida7. relevancia clı ´tulos relativamente Los ANA tienen una alta prevalencia. la reactividad es principalmente contra RNP/Sm en el 65% de las muestras. es importante confirmar el o los epı reconocidos por los autoanticuerpos presentes en el suero de los ´ posteriormente. pero a tı ´tulos altos. pero grupos de autoanticuerpos se encuentran presentes con mayor frecuencia en enfermedades autoinmunes ´ficas. En cuanto al moteado grueso. H4). Los ANA detectados mediante IFI se abordara se encuentran con una alta frecuencia en enfermedades auto´ndrome de Sjogren. Los resultados mostraron patro reactividad contra ADNcd (60–80%).

Prevalencia de ANA en tres ´ n mestizo-mexicana sana: donadores de sangre. 12. el cual revelo ´ n de guı ´as para el diagno ´ stico utilizando la que la aplicacio ´ n de ANA previamente validadas26 reduce de manera deteccio ´ mero de inmunoensayos o pruebas de )segundo importante el nu nivel* realizadas. Hugues RG. The reaction of the lupus erythematosus (L. 1997. Kavanaugh A. Am J Clin Pathol. Pub Academic Press Inc. debido a que se esta ´ n de autoanticuerpos. Localization of antigen in tissue cells II: Improvements in a method for the detection of antigen by means of fluorescent antibody. et al. Morrone LF. lo cual proporcionara ´ corte ajustados o establecidos por patro ´ s al clı ´nico para el diagno ´ stico y el resultados que ayudan ma seguimiento de los pacientes. Shoenfeld Y. 15. Evidence-based guidelines for the use of immunologic test: antinuclear antibody testing. Cachafeiro Vilar A. ´ stico de 13. C. 3. pueden ser naturales o infecciosos. en auto ´ n original se llamaba ası ´ solo a los que estaban su descripcio ´ cleo. Antinuclear antibody testing. En este sentido. 2002. Conrad K. ´ n de los diferentes patrones de ANA determinados La definicio ´ lulas HEp-2 debe incluir el ana ´ lisis de ce ´ lulas en mediante IFI en ce ´ lulas en divisio ´ n. Tesina de Especialidad en Bioquı INCMNSZ. Prevalencia de autoanticuerpos en pacientes con diagno ´mica Clı ´nica.E cell. Hiepe F. Martı ´n ´nez Castillo A. 1977. No obstante.reumatologiaclinica. 26. Application of a combined protocol for rational request and utilization of antibody assays improve clinical diagnostic efficacy in autoimmune rheumatic disease. Tampoia M. Marin GG. Rev. Deteccio Navarro F. Meroni PL. 1959. Cornejo H. 10. 2003:181–3. 2002. Surmacz MJ. Tampoia M. Reichlin M. Nu ´n ˜ ez A 9. Sin embargo. Go Prevalencia de anticuerpos antinucleares (ANA) en donadores sanos del ´ dicas y Nutricio ´ n Salvador Zubira ´ n. 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Smolen JS. ´n Es importante resaltar que cuando se tiene una determinacio de ANA detectados mediante IFI negativa y el paciente tiene ´nicas de enfermedad autoinmune. Arthritis Rheu. debido a que existen antı ´genos que interfase y ce solo son expresados en ciertas fases del ciclo celular. Edi. Guidelines for the laboratory use of autoantibody test in the diagnosis and monitoring of autoimmune rheumatic diseases.38:2059–72. 16. 2004. 25. Los ANA se deben interpretar en base a valores de referencia o ´ n de tincio ´ n y en el grupo puntos de corte establecidos por patro ´ tnico con el que se van a comparar. Zucano A. Clin Lab Med.19. Con relacio ´ n a co ´ mo proceder para la solicitud pato ´ s preguntas que respuestas. me Reumatol Clin. econo Conflicto de intereses ´ n conflicto de intereses. Holman HR. Validacio 24. sino tambie ´n ANA tienen impacto no solo a nivel clı ´ mico. Arch Pathol Lab Med. ´ lvarez CA. Conclusiones Los ANA son inmunoglobulinas que reconocen componentes ´ logos tanto del nu ´ cleo como del citoplasma. Meroni PL. Arthritis Rheu. Por ello. se puede manifestaciones clı ´ n de autoanticuerpos por ELISA pasar al segundo nivel de deteccio ´ aumentando la sensibilidad y o EIT. Deicher HR. Laboratory testing in autoimmune rheumatic diseases. 1999. Morton R. 2nd Ed. Autoantibodies in systemic autoimmune disease. 2008. Holman H. especificidad para la deteccio ´ s. 2007. Homburger HA. et al. Characteristics of a soluble nuclear antigen precipitating with sera of patients with systemic lupus erythematosus. Mimori T.91:1–13. 2007 UNAMautoinmunes. Nu ´rez DF. Maggiolini P.6(4):224–230 ´n ˜ez-A J. ´ ndez A. Tampoia et al en 2007 ´ publicaron un estudio realizado en 685 pacientes27. Elsevier. Garcı ´a Herna ´ ndez JL. Enviado.A. 1982.5:10–7. estudios cuyo costo tiene un impacto importante en ´a de los pacientes. Nu ´ n del ELISA caotro ´ pico. et al. in: advances in immunology. Cardiel MH. Fontana A. la presencia de ANA puede no ser necesariamente de origen autoinmune. ´n Ramı Caracterizacio ´mica de los patrones de inmunofluorescencia (IFI) moteado fino y inmunoquı moteado grueso en pacientes con enfermedades autoinmunes. Application of a diagnostic algorithm in autoantibody testing: assessment of clinical effectiveness and economic efficiency.117:316–24. LTD. Fontana A. Presentation of two bone marrow elements. 4. Feltkamp TEW. Tan EM. Gabilondo 23. Tan EM. ¨ 7. 1950. cadena doble por cuatro. Karim AR. Proc Mayo Clin.124:71–81. enfatizamos la importancia la economı ´ n adecuada de las guı ´as y/o algoritmos desarrode la aplicacio ´ n de ANA. Rosas I. Martı actividad de los anticuerpos anticromatina en pacientes con enfermedades ´mica Clı ´nica.47: 434–44.23:25–8.20:72. Cabral AR. Damoiseaux JGMC. 21. Autoantigens. Si bien algunos de los ANA. 2. adema importante en la cantidad de estudios de segundo nivel solicitados.131:112–6. 2007. Kunkel HG.22:447–74. 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