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PRODUCCIÓN DE ÁCIDO CÍTRICO A ESCALA DE LABORATORIO A PARTIR DE ASPERGILLUS NIGER EMPLEANDO UN MEDIO DE CULTIVO OPTIMIZADO A PARTIR DE DESECHOS VEGETALES

GENERADOS EN EL MERCADO MUNICIPAL DE VALENCIA

UNIVERSIDAD DE CARABOBO FACULTAD DE INGENIERÍA ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA TRABAJO ESPECIAL I

PRODUCCIÓN DE ÁCIDO CÍTRICO A ESCALA DE LABORATORIO A PARTIR DE ASPERGILLUS NIGER EMPLEANDO UN MEDIO DE CULTIVO OPTIMIZADO A PARTIR DE DESECHOS VEGETALES GENERADOS EN EL MERCADO MUNICIPAL DE VALENCIA

Tutor Académico: Prof: MSc. Carlos Alvarado Almarza Asesores Metodológicos: Prof(a): Viky Mujica Prof(a): Olga Martínez

AUTORES:

FIGUEREDO, Deivis C.I.: 19.723.612 HERNÁNDEZ, Stephany C.I.: 18.563.009

Valencia, Julio de 2012.

CONSTANCIA DE APROBACIÓN Se hace constar por medio de la presente, que el plan de Trabajo Especial de Grado titulado:

“PRODUCCIÓN DE ÁCIDO CÍTRICO A ESCALA DE LABORATORIO A PARTIR DE ASPERGILLUS NIGER EMPLEANDO UN MEDIO DE CULTIVO OPTIMIZADO A PARTIR DE DESECHOS VEGETALES GENERADOS EN EL MERCADO MUNICIPAL DE VALENCIA”

Realizado por el bachiller HERNÁNDEZ, STEPHANY C.I.: 18.563.009

Ha sido revisado por el profesor de la asignatura y reúne los requisitos exigidos por la Cátedra Trabajo Especial de Grado I.

_____________________________________ Profa. Viky C, Mujica F

Valencia, Marzo de 2012.

I. que el plan de Trabajo Especial de Grado titulado: “PRODUCCIÓN DE ÁCIDO CÍTRICO A ESCALA DE LABORATORIO A PARTIR DE ASPERGILLUS NIGER EMPLEANDO UN MEDIO DE CULTIVO OPTIMIZADO A PARTIR DE DESECHOS VEGETALES GENERADOS EN EL MERCADO MUNICIPAL DE VALENCIA” Realizado por el bachiller FIGUEREDO. _____________________________________ Profa. DEIVIS C. . Olga Martínez Valencia. Marzo de 2012.612 Ha sido revisado por el profesor de la asignatura y reúne los requisitos exigidos por la Cátedra Trabajo Especial de Grado I.CONSTANCIA DE APROBACIÓN Se hace constar por medio de la presente.: 19.723.

2008). acidulante y conservante) para la elaboración de bebidas y otros productos (Adarme. 2007). los cuales contienen micronutrientes que aportan importantes beneficios a través de la aplicación de algunos pretratamientos y procedimientos. la situación actual y deseada. también está presente en gran cantidad de frutas como el limón. . es muy frecuente en la naturaleza ya que es un compuesto intermedio en el ciclo de Krebs. varios gobiernos de todo el mundo han generado medidas para reducir los costos económicos y ambientales.1. Hoy en día las prioridades de la humanidad están centradas en tres fenómenos generales. principales causantes de la degradación del medio. 1. que acaparan su atención y constituyen los escenarios de las principales preocupaciones con que se vivirá en el futuro. éstas son: la alimentación. la cual mediante acción controlada de agentes biológicos logra convertir los residuos en materia prima para la obtención de importantes productos de consumo. son unos de los establecimientos que producen gran cantidad de estos residuos orgánicos de característica contaminante. La industria alimenticia y comercios en general. Debido a ello y a los altos índices de contaminación. la biotecnología es una excelente alternativa en la biodegradación de los desechos. y es usado principalmente en la industria de la alimentación (como saborizante. Además de definir el motivo que justifica la realización del presente trabajo y sus limitaciones. en este sentido. Descripción del problema. que trae consigo la generación de desechos. entre los cuales se encuentra el ácido cítrico (C6H8O7) (Sánchez. la energía y la conservación del ecosistema. así como el objetivo general y los objetivos específicos de la investigación. Este ácido orgánico tricarboxílico de sabor agrio y soluble en agua. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA En este apartado se presentará la descripción del problema.I.

en el cual se pueden distinguir las etapas del mismo (Bu`lock. batatas.A principios del siglo XX el ácido cítrico era obtenido a partir del néctar de limón. por la producción mediante fermentación a partir de un microorganismo como el Aspergillus niger. el cual es de gran utilidad debido a sus propiedades y por los beneficios que aporta a la sociedad. el cual es uno de los más estudiados e implementados industrialmente debido a los grandes beneficios y características como su crecimiento en forma de esfera. 2007). con una producción de más de 600. sin embargo.000 toneladas al año y un valor de mercado de más de dos billones de dólares. optándose posteriormente. la purificación y conformado del producto. producción o crecimiento del microorganismo hasta su completo desarrollo. cada vez más. y el alto valor añadido de éste. En la Figura 1 se muestra un esquema de un proceso en cultivo sumergido de ácido cítrico utilizando melazas. que no aumenta la viscosidad del medio. luego el pre-cultivo se alimenta al reactor de cultivo donde el objetivo es producir poca biomasa y mucho ácido cítrico. aprovechando además los residuo de alta producción como papas. zanahorias entre otros como medio de cultivo para fermentaciones. 1991). 2007). hacen pensar que la construcción de una planta de producción de ácido cítrico generará grandes beneficios económicos y sociales. Este proceso de obtención constituye cuatro etapas claramente diferenciadas: primeramente. demuestran que la demanda de ácido cítrico crece anualmente en un 7%. yuca. Estudios recientes (Sánchez. seguidamente la separación de los componentes del caldo postfermentativo mediante el proceso denominado cal-sulfúrico donde se obtiene la sal de calcio del ácido y. debido al aumento de la solicitud. lo que favorece la agitación y la aireación además de menos problemas de crecimiento en paredes y tuberías (Llano. a parte de ser una efectiva forma de reproducción. . esto se hace en un reactor de pre-cultivo con el fin de producir biomasa y desarrollar al microorganismo. a lo largo del tiempo este proceso se hizo cada vez menos rentable. por último.

Proceso a escala de laboratorio de producción de ácido cítrico en cultivo sumergido. Es por ello que el CENTRO DE INVESTIGACIONES QUIMICAS (CIQ) bajo la línea de investigación de Biotecnología Industrial (LABIOT). 1991). Instituto de Investigaciones Biomédicas (BIOMED UC). la creciente solicitud de ácido cítrico. entre otros). toma la iniciativa de recuperar estos desechos vegetales manteniendo una visión ambientalista para su mayor aprovechamiento y disminución de los costos de producción. ha permitido que está limitada valoración quede atrás. (Bu`lock. sin embargo. Facultad de Ciencias y Tecnología (Facyt). la cual nace en el año 2011 con el apoyo de la Fundación CIEPE. adscrito al Decanato de la Facultad de Ingeniería de la Universidad de Carabobo. El empleo de desechos vegetales presenta gran .Figura 1. ya que por espacio de varias décadas en la mayoría de los supermercados y comercios municipales los residuos han sido sobrantes de escasa utilización e indeseables por sus efectos contaminantes del medio.

2008). la cual presenta composiciones variadas según las fuentes. y el jarabe de glucosa de maíz purificado son a veces utilizados. también existen otros procesos que emplean n-parafinas como material inicial durante la fermentación. y entre un 8% y un 12% de cenizas. de acuerdo con la accesibilidad y el precio. se pretende desarrollar un estudio de un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de los desechos vegetales del Mercado Municipal de Valencia. sin embargo. y su gran requerimiento a nivel mundial las hace poco favorable (Rivada. y en la búsqueda de generar mayores alternativas que vayan en pro de la calidad humana. Por otro lado la sacarosa.2 Formulación del problema. aunque todas aceptan que poseen aproximadamente un 50% de azúcares fermentables. No obstante. 1. el CENTRO DE INVESTIGACIONES QUIMICAS (CIQ) bajo la línea de investigación de Biotecnología Industrial (LABIOT). estos últimos se hicieron no rentables con la subida de precios de los productos del petróleo. La industria alimenticia genera una gran cantidad de residuos orgánicos. más económicos y que su comportamiento y resultados sean semejantes o mejores que la materia prima usual (Bu`lock. Es por ello que se hace necesario y conveniente buscar otras alternativas de sustratos fermentativos. tomando en cuenta que tradicionalmente la materia prima fundamental para la producción del mismo es la miel final de la caña de azúcar o las melazas de remolacha. entre un 16% y un 36% de agua. el costo elevado de adquisición. por consiguiente. se plantea desarrollar un estudio para la producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir del microorganismo Aspergillus niger . 1991). además de ser un excelente medio de cultivo a base de carbohidratos que permite el crecimiento de gran variedad de microorganismos. de carácter contaminante.importancia por ser una materia prima cercana y abundante. Partiendo de lo antes mencionado. los cuales pueden ser aprovechados para generar importantes productos de consumo y al mismo tiempo evitar la degradación del medio ambiente.

es la gran cantidad de desechos o subproductos orgánicos. .2. 1. El ácido cítrico es el ácido orgánico más importante producido en toneladas y se utiliza ampliamente en los alimentos y en la industria farmacéutica.1 Situación actual. 1. Uno de los principales problemas a nivel mundial en las agroindustrias. que se obtienen del procesamiento de la materia prima. Se produce principalmente por fermentación sumergida con Aspergillus niger. que pueden ser utilizados para la obtención biotecnológica de sustancias de alto valor comercial.2 Situación deseada. con miras a su aprovechamiento y a la reducción del impacto ambiental que generan los mismos. como la melaza y los medios a base de almidón. en diferentes fuentes de carbohidratos. éstos residuos representan una fuente muy amplia de contaminación y rica en nutrientes.2. Esto representa un gran aporte ya que contribuye al desarrollo de procesos menos contaminantes. principalmente carbohidratos. Un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir del microorganismo Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de los desechos vegetales generados por el Mercado Municipal de Valencia.empleando un medio de cultivo optimizado a partir de los desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. constituyéndose en un estudio preliminar que conlleve al desarrollo o adaptación de tecnologías acordes al medio para la producción industrial de diferentes insumos de alto valor agregado.

4.3. 1. 1. . Caracterizar de forma fisicoquímica el ácido cítrico producido. mediante fermentación sumergida. 1. Producir ácido cítrico a partir de la cepa de Aspergillus niger.3. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. Diseñar un proceso a escala de laboratorio para la obtención de ácido cítrico por fermentación en cultivo sumergido con el hongo Aspergillus niger a partir de un medio de cultivo optimizado. 3. a fin de saber la disponibilidad de materia prima. 6. Caracterizar morfológicamente la cepa del hongo Aspergillus niger.1 Objetivo general. con el fin de conocer sus principales características y poder identificarla. 2.3 Objetivos. 5. con el objeto de garantizar las condiciones óptimas para el desarrollo del microorganismo Aspergillus niger.1. Formular un medio de cultivo optimizado a partir de los desechos vegetales para la producción de ácido cítrico. Determinar la frecuencia y composición promedio de la fracción de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. para así asegurar la factibilidad del medio de cultivo.2 Objetivos específicos. con el fin de hacer una comparación con un patrón.

los desechos vegetales de uno de los mercados más importante de la ciudad. Esta investigación tiene como propósito fundamental producir ácido cítrico a partir de los desechos vegetales originados por los distintos establecimientos ubicados en el Mercado Municipal de Valencia. además de la obtención de un producto de alto valor se aprovecharán como medio de cultivo para la fermentación.7.4 Justificación. permite estudiar la factibilidad de diseñar una proceso de producción de ácido cítrico mediante fermentación con el hongo Aspergillus niger. por unos residuos de alta producción. 1. cuya ubicación de la fuente representa un factor limitante en cuanto al manejo y transporte oportuno de la materia prima y su utilización en los distintos ensayos. Este trabajo especial de grado es de gran importancia a nivel industrial y ambiental. Determinar los costos asociados al proceso de producción de ácido cítrico. con la finalidad de definir la factibilidad de su puesta en práctica. Con este proyecto. utilizando como materia prima los desechos vegetales generados por el Mercado Municipal de Valencia. producto de la industria azucarera y de gran demanda por su utilización en la fabricación de alimentos y energía convencional. sustituir la materia prima fundamental del mundo (la miel final). ya que. De igual forma se debe resaltar el plazo de .5 Limitaciones. Asimismo está investigación representa un material de referencia de gran significado al poder ser utilizados como consulta durante el desarrollo de otros trabajos y proyectos que se elaboren en la Universidad de Carabobo u otras instituciones universitarias. logrando de esta manera. que permita disminuir la degradación del medio ambiente. 1. de bajo costo.

Una fermentación en estado sólido fue desarrollada para la producción de ácido cítrico a partir de residuos de piña por Aspergillus niger KS-7. lo cual es un aporte ya que en el desarrollo de nuestra investigación se plantea llevar a cabo. En Mayo del año 2010 Velásquez et al. En el año 2009. entre ellas. En esta sección se muestra una referencia a investigaciones ya realizadas con relación al presente trabajo los cuales sirven de sustento para conocer los diferentes enfoques que se han dado respecto al problema planteado así como el aporte de soluciones al mismo. 2. realizaron una investigación publicada en la revista de microbiología de Malasia de la Universidad de agricultura que lleva por titulo: “Producción de ácido cítrico por Aspergillus niger utilizando los residuos de piña”.0 y 150 g/L de azúcar reductores. a las 192 horas del proceso fermentativo.tiempo que se tiene para realizar esta investigación como una gran limitante ante el desarrollo de las diferentes etapas. titulado: “Obtención de ácido cítrico por fermentación con Aspergillus niger utilizando sustrato de plátano dominico hartón (musa aab simmonds) maduro”. publicaron un estudio en la revista Tumbaga. a pesar de que este medio es un sustrato complejo y no convencional. El medio fue . ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN. La presente investigación muestra el estudio de los procesos metabólicos de una cepa del hongo Aspergillus Niger. utilizando un pH 5. especialmente el montaje y preparación de los equipos necesarios para realizar las pruebas correspondientes.5 g/L de acido cítrico.. así como la evaluación de la influencia de la concentración de los metales en el crecimiento del microorganismo. Kareem et al. utilizando un inóculo al 5% de suspensión de esporas y 2 litros de sustrato para alcanzar un mejor rendimiento.. del cual concluyeron que el sustrato de plátano Dominico Hartón no es tóxico para el crecimiento del hongo filamentoso Aspergillus niger y la producción de ácido cítrico. Obteniendo la máxima concentración de 13.

determinación de biomasa. nitrato de amonio y fosfato de amonio.61 g/kg) en presencia de metanol (2 % v/v) cuando se fermentan durante 5 días a 30 °C con el contenido de humedad inicial del 65 %. El rendimiento fue más del 90 % basado en la cantidad consumida de azúcar fermentable.suplementado con diferentes concentraciones de glucosa. están dentro de los intervalos recomendados para la producción de ácido cítrico con Aspergillus niger. pudiendo ser de gran utilidad para la aplicación de la metodología de caracterización de crecimiento microbiano. aunque el medio utilizado no sea el mismo.001. Estos resultados presentan el uso de la cáscara de la piña como un medio barato para la producción de ácidos orgánicos con alto valor comercial por A. Se encontró que los residuos de piña con 15 % p/v de sacarosa y nitrato de amonio 0. niger. 0. en el cual el proceso fermentativo se realizó en cultivo sumergido discontinuo agitado y a las mejores condiciones nutricionales se hizo un seguimiento de las variables del proceso en el tiempo. titulado: “Producción de ácido cítrico con Aspergillus niger NRRL 2270. a partir de suero de leche”.25 % p/v dio la secreción óptima de ácido cítrico (60. azúcares residuales y pH. pudiendo concluir que el Aspergillus niger NRRL 2270 es un buen microorganismo para la producción de ácido cítrico a partir de suero de leche ya que asimila fácilmente la lactosa sin necesidad de una hidrólisis previa. sacarosa. el zinc y el hierro que se encuentran en concentraciones de 0.. realizaron una investigación publicada en la revista Dyna de la Facultad de Minas de la Universidad Nacional de Colombia. . La remoción de metales divalentes o utilización de agentes quelantes en el suero de leche no es necesaria ya que los elementos de mayor influencia como el manganeso. En Marzo de 2006 López et al. respectivamente.2 y 1 ppm. En la etapa de hidrólisis. el uso de enzimas es la mejor alternativa ya que no presenta pardeamiento que es un indicio de la formación de subproductos más difíciles de asimilar que la glucosa y la galactosa. La semejanza con nuestra investigación se halla en que en ambos se plantea lograr la producción de ácido cítrico mediante el uso del microorganismo Aspergillus niger.

realizaron una investigación publicada en la revista de la Universidad EAFIT.. carbonarius no presentaban diferencias significativas en la formación del ácido. Al evaluar la biosíntesis del ácido cítrico a partir del suero de leche modificado mediante diferentes tratamientos. Mediante un diseño experimental se evaluó la producción a diferentes concentraciones con lo que se pudo concluir que la cepa nativa de Aspergillus niger AL01 es muy baja productora de ácido cítrico al compararla con otras cepas usadas en la producción de altas cantidades. mientras A. evaporado y con lactosa hidrolizada con β-galactosidasa. Morfológicamente se obtuvo que la cepa AL01 se trata de un Aspergillus niger Van Tieghem. realizaron una investigación. el cual arrojó las siguientes conclusiones: el hongo A. sin embargo. publicada en la revista Colombiana de Biotecnología de la Universidad Nacional de Colombia. esta investigación se centró en la obtención a partir del lactosuero en calidad de sustrato. aunque.. Sáez et al. su hidrólisis y la concentración del suero por evaporación representa una estrategia válida para aumentar la disponibilidad de sustratos fermentables e incrementar los rendimientos del producto. La similitud con la presente investigación se presenta en la producción de ácido cítrico. el cual aplicaremos en nuestra investigación. a cerca de la “Producción del ácido cítrico a partir de suero de leche por fermentación con Aspergillus SPP”. el cual se logro al hidrolizar el disacárido que en nuestra investigación es de sumo interés para lograr un excelente aprovechamiento de la materia prima. Y que al usar almidón . basada en la caracterización de una cepa de Aspergillus niger y evaluación de la producción de ácido cítrico en diferentes medios de cultivo: un medio estándar usando como base sacarosa y en un medio a base de almidón.La semejanza con la presente investigación se presenta en el desarrollo de un proceso fermentativo realizado en cultivo sumergido discontinuo agitado. dio como resultado que las dos cepas de A. En Colombia en el año 2004 Sánchez et al. niger NRRL3 alcanzó mayores concentraciones cuando se utilizó suero de leche desproteinizado. (2002). niger no asimila adecuadamente la lactosa del suero de leche.

la mayor concentración de ácido cítrico se logro cuando el medio contenía 100 g/L de almidón y 0. llevaron a cabo una investigación publicada en la revista técnica de ingeniería de la Universidad del Zulia. fermentación en superficie (LSC). (1992). La necesidad de algún tratamiento previo de las materias primas puede aumentar la eficiencia de la fermentación. o el hidrolizado de celulosa utilizada en la SmF. y en la actual investigación la utilización de desechos vegetales.. Esta investigación nos sirve de gran aporte ya que desarrollan un estudio reciente en cuanto a medios alternativos. acerca de la producción microbiana de ácido cítrico. las técnicas de producción.145 g/L de nitrato de amonio. Mármol Pérez et al. teniendo como diferencia la metodología a desarrollar. y los sustratos. Sin embargo. permitiendo así. disminuir el impacto ambiental debido al elevado contenido de materia orgánica. en el año 1999. por ejemplo. Vandenberghe et al.. que describe los microorganismos. titulada: “Producción de ácido cítrico por fermentación”. entre otros. Un área que necesita atención es el desarrollo de técnicas de cultivo continuo.como fuente de carbono. que se han intentado. realizaron una investigación en la Universidad de Paraná. La semejanza con nuestra investigación es que se plantea evaluar la producción de ácido cítrico. y fermentación en estado sólido (SSF) parece ser una posibilidad adecuada. Para así de esta manera ampliar los conocimientos acerca de las mejores condiciones y medios para la producción de ácido cítrico. Este trabajo tuvo por objeto estudiar la producción de ácido cítrico por fermentación sumergida con Aspergillus niger 4396. técnicas de producción. utilizando como fuente de carbono y energía harina de yuca (sustrato no convencional) y . es necesario adaptar el tipo de materia prima a la técnica correcta. pero sólo a escala de laboratorio. en la cual revisan los acontecimientos recientes en la producción de ácido cítrico al presentar un breve resumen de la materia. En donde pudieron concluir que el uso de materias primas alternativas para producir ácido cítrico por fermentación sumergida (SmF). el bagazo de yuca se emplea como sustrato en la SSF.

Se observaron bajas productividades para el cultivo continuo debido a la poca concentración de ácido en el medio al iniciar el flujo continuo.azúcar refinada en procesos discontinuos y continuos respectivamente. Así como el análisis de la cinética de producción del ácido. ya que el mismo forma parte de los desechos vegetales en estudio.81 %. .94 % y 16. alcanzando un valor de 29. aproximadamente a las 72 horas. lo que disminuyó el rendimiento (112. Esta investigación tiene como semejanza la producción de ácido cítrico mediante un medio no convencional. el cual es de gran importancia en nuestro estudio. Los resultados indican que con harina de yuca no se requiere la adición de la fuente de nitrógeno.89 el rendimiento fue superior. A pH 5. niger 4396 fue capaz de producir sus propias enzimas. Su contenido es suficiente para garantizar la producción de ácido cítrico.0 se produjo hidrólisis ácida con la formación de dextrinas y otros productos no fermentables. A pH inicial de 2. las cuajes hidrolizan el almidón a azúcares disponibles. Encontraron que durante la fermentación de ácido cítrico la cepa de A.92 %).

3. 2006) En cuanto a la estrategia que se va a utilizar para responder al problema planteado. Por otra parte. el nivel de profundidad de la siguiente investigación es de tipo proyecto factible ya que durante el desarrollo del mismo se espera implementar un proceso de producción de ácido cítrico a escala de laboratorio por fermentación de los desechos vegetales generados por el Mercado Municipal de Valencia utilizando el microorganismo Aspergillus niger (Baray. En cuanto al propósito se puede clasificar como una investigación mixta. donde se mantienen las mismas condiciones de operación y los resultados que se obtendrán serán aplicados posteriormente a escala industrial. para finalmente obtener un análisis global del proceso y así realizar el diseño del mismo (Arias. 1993). debido a que la misma se basa fundamentalmente en la manipulación y control de variables así como en la recolección de datos experimentales empleando un sistema con una escala menor que la industrial. . con la finalidad de construcción de la planta a futuro. en función del tiempo obedece al tipo de investigación prospectiva. obedece al tipo investigación experimental aplicada a escala de laboratorio. Los datos recolectados se manejan con diferentes herramientas metodológicas.1 Tipo de investigación. basándose en condiciones operacionales similares y evaluando las condiciones en la realidad del medio alternativo (Zorrilla. las herramientas metodológicas y las actividades que se realizaran para el logro de los objetivos. A partir de los objetivos planteados. 2006). METODOLOGÍA En esta sección se describe el tipo de investigación. ya que esta busca proyectarse a partir de una metodología.3. ya que la misma se desarrollara a partir de la investigación documental y de la investigación de campo.

2. Producción de ácido cítrico a partir de la cepa de Aspergillus niger.3.2 Fases de la investigación. Caracterización morfológica de la cepa del hongo Aspergillus niger. mediante fermentación sumergida a escala de laboratorio. . 7. Determinación de la frecuencia y composición promedio de la fracción de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. Formulación de un medio de cultivo optimizado a partir de los desechos vegetales para la producción de ácido cítrico con Aspergillus niger. Determinación de los costos asociados al proceso de producción de ácido cítrico a escala de laboratorio. Las fases o etapas a desarrollar en esta investigación son: 1. Diseño de un proceso a escala de laboratorio de ácido cítrico por fermentación en cultivo sumergido con el hongo Aspergillus niger a partir de un medio de cultivo optimizado. 5. Caracterización de forma fisicoquímica del ácido cítrico producido. 4. 3. 6.

.5 Clasificación de la cepa como Aspergillus niger. color. 1. laboratorio morfológica a escala macroscópica y microscópica de la cepa del hongo. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. Caracterizar morfológicamente la cepa del hongo. Objetivos específicos Herramienta metodológica Actividades 1. 1. 1.3 Análisis de las muestras en el especializado en microorganismos.3.3 Desarrollo sistemático de la investigación Objetivo general.2  1. Aplicación de pruebas fisiológicas como: forma y presencia de flagelos. se determinan las características fisiológicas del mismo. diámetro de las colonias. Mediante la realización de la tipificación 1.1 Preparación de la muestra a analizar. entre otros.4 Observación de las muestras al microscopio para realizar la tipificación del mismo. .

de los 2. entre otros. recabar la información necesaria para la determinación de la frecuencia de los desechos. metales.  Mediante encuestas al personal que labora en el 2. Determinar la frecuencia y composición promedio de la fracción de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia.Objetivo general.1 Revisión bibliográfica acerca de los tipos de desechos vegetales y sus composiciones.3 Visita al Mercado Municipal de Valencia. Objetivos específicos Herramienta metodológica Actividades 2.5 Realización de la clasificación y selección de cada uno de los desechos: papa. zanahoria.  Mediante el empleo de modelos matemáticos la composición promedio (contenido de 2. frecuencias determinar la frecuencia de cada tipo de desechos. entre 2.4 Aplicación de la entrevista.2 Preparación de la encuesta a realizar. 2. 2. proteínas. entre otros) desechos vegetales. pulpa. 2.7 Revisión bibliográfica de la composición de los diferentes desechos (papa. Tipo de desecho: concha. .8 Aplicación de los modelos matemáticos necesarios para calcular el valor de la composición promedio (teórica y experimentalmente).7 Realizar el análisis de los resultados obtenidos. Mercado Municipal de Valencia. bagazo. batata. otros. batata. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. 2. y efectuar la descripción del estado en el cual se encuentran: descompuestos o no descompuestos. yuca.6 Análisis de resultados de la entrevista y construcción de histogramas de frecuencia. determinar humedad.  Mediante el empleo de histogramas de 2. entre otros) a utilizar.

Objetivo general.6 Establecimiento de los tratamientos previos como: eliminación de agentes contaminantes. base a las normas y marcas comerciales (COVENIN.3 Selección de acuerdo al estudio realizado.4 Preparación del medio de cultivo para la producción de ácido cítrico. los desechos vegetales como: papa. 3. 3. . zanahoria. MERCK. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. 3. que proporcionen las características producción de ácido cítrico y selección del método apropiadas para el cultivo. batata. entre otros).  Aplicación de tratamientos tradicionales para la 3. pasteurización. Formular un medio de cultivo optimizado a partir de los desechos vegetales para la producción de ácido cítrico. entre otros. Objetivos específicos Herramienta metodológica Actividades 3.5 Revisión bibliográfica de los tratamientos tradicionales para la producción de ácido cítrico y selección del método. 3. que nos proporcionen un medio de cultivo con las condiciones apropiadas para la fermentación. entre otros. 3.1 Revisión bibliográfica de los medios de cultivo convencionales para la producción de ácido cítrico.2 Comparación de los diferentes medios de cultivo convencionales para así conocer la composición del  Selección y formulación del medio de cultivo en medio más apropiado para la producción de ácido cítrico.

4.Objetivo general. equipos y condiciones de operación de los mismos.5 Proceso de purificación del ácido cítrico. reactivos.4 Proceso de separación del ácido cítrico. realizar el 4. 500 mL 0 1000 mL).3 Selección de las etapas del proceso. 4. Mediante los datos recolectados. tamaño de fiolas (250 mL.7 Resultados y conclusiones . involucrados en el proceso de producción de ácido cítrico.1 Selección de los equipos necesarios. 4. diseño a escala de laboratorio.6 Diseño experimental del proceso. 4.  4. Objetivos específicos Herramienta metodológica Actividades 4. indicando cada uno de los materiales. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia.2 Selección de las condiciones de operación de cada equipo. Diseñar un proceso a escala de laboratorio de ácido cítrico por fermentación en cultivo sumergido con el hongo Aspergillus niger a partir de un medio de cultivo optimizado. 4.

métodos de recuperación del producto. Producir ácido cítrico a partir de la cepa de Aspergillus niger. 5.  y Mediante la aplicación de la matriz de selección cuadros comparativos establecer las mejores 5. . Objetivos específicos Herramienta metodológica Actividades 5.3 Producción de biomasa en placas Petri en Agar Papa Dextrosa o Sabouraud.4 Fermentación con el hongo en el medio optimizado a partir de desechos vegetales en cultivo sumergido discontinuo a escala de laboratorio en fiolas.2 Elaboración de cuadros comparativos que contengan: medios de cultivo convencionales. 5. producto (exo o intracelular).5 Análisis de resultados. rendimientos esperados en medios convencionales.Objetivo general. fermentación. 5. producir ácido cítrico. tiempos de condiciones para la obtención de ácido cítrico. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. mediante fermentación sumergida.1 Revisión bibliográfica de cultivos con Aspergillus niger y producción de ácido cítrico.  Mediante la aplicación de fermentación 5. sumergida.

6. químico y siguiendo las normas establecidas. Caracterizar de forma fisicoquímica el ácido cítrico producido. 6.1 Realización de un estudio de los métodos de análisis químico para caracterizar el ácido cítrico.2 Toma de muestra del ácido cítrico producido luego del proceso de fermentación. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia.Objetivo general.  Mediante el empleo de métodos de análisis 6.5 Discusión de resultados. realizar la identificación y caracterización del ácido cítrico. Objetivos específicos Herramienta metodológica Actividades 6. establecer las propiedades y características de pureza del ácido producido con un patrón.  6.3 Realización de análisis químico de la sustancia generada.4 Comparación de los resultados emitidos en el Mediante el empleo de cuadros comparativos laboratorio con los establecidos en la bibliografía. . 6.

7. Objetivos específicos Herramienta metodológica Actividades 7.5 Análisis y discusión de resultados.1 Investigación de costos de mercado de materias primas y reactivos en la base de datos del instituto nacional de estadística (INE). 7. 7.2 Estimación de los costos de los equipos requeridos 7. producción de ácido cítrico.3 Estimación de los costos de mano de obra e infraestructura.4 Estimación de los costos totales. . 7. Determinar los costos asociados al proceso de  A través de los modelos de cálculos financieros para la producción de ácido cítrico.Objetivo general. Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. se estima los costos asociados al proceso de producción a escala de laboratorio.

Objetivo general: Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. 09/04 4 Clasificación de la cepa como Aspergillus niger. 02/04 2 2sem. Preparación de la muestra y observación al microscopio. 1 sem. 02/04 3 2 sem. 16/04 . Semana 1 02/04 Semana 2 09/04 Semana 3 16/04 Id. 1 sem. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES En esta sección se presentan las actividades que se realizaran para el logro de los objetivos con sus fechas estimadas de ejecución.4. Objetivo específico: Caracterizar morfológicamente la cepa del hongo. Realización de ensayos de laboratorio con los métodos seleccionados para determinar las características fisiológicas del hongo. Nombre de tarea Duración Comienzo 1 Preparación de la muestra a analizar.

23/04 6 1 sem. Nombre de tarea Duración Comienzo 5 Preparación de la encuesta Visita y aplicación de la encuesta al personal que labora en el Mercado Municipal Clasificación de los desechos vegetales Análisis de resultados de la encuesta y construcción de histogramas de frecuencia. 07/05 .Objetivo general: Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. 23/04 7 1 sem. 30/04 8 1 sem. 30/04 9 1 sem. Semana 4 23/04 Semana 5 30/04 Semana 6 07/05 Id. Análisis de los resultados obtenidos 1 sem. Objetivo específico: Determinar la frecuencia y composición promedio de la fracción de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. Aplicación de los modelos matemáticos para calcular el valor de la composición promedio (teórica y experimentalmente). 07/05 10 1 sem.

Objetivo general: Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. 28/05 16 1 sem. 04/06 . Objetivo específico: Formular un medio de cultivo optimizado a partir de los desechos vegetales para la producción de ácido cítrico. Semana 7 14/05 Semana 8 21/05 Semana 9 28/05 Semana 10 04/06 Id. 21/05 15 2 sem. 21/05 14 2 sem. 14/05 13 1 sem. 14/05 12 1 sem. Nombre de tarea Elaboración de tablas comparativas de los diferentes medios de cultivos convencionales Selección de los desechos vegetales a emplear Revisión bibliográfica de los tratamientos previos aplicados a los desechos Selección de los métodos para el tratamiento previo de los desechos Aplicación de los tratamientos previos a los desechos Formulación del medio de cultivo en base a las normas y componentes estudiados Duración Comienzo 11 1 sem.

25/06 20 Resultados y discusiones 1 sem.Objetivo general: Desarrollar un proceso de producción a escala piloto de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. Nombre de tarea Duración Comienzo 17 Selección de los equipos y las condiciones de operación. 02/07 . 2 sem. 18/06 19 Diseño experimental 2 sem. Semana 11 11/06 Semana 12 18/06 Semana 13 25/06 Semana 14 02/07 Id. 11/06 18 Etapas del proceso. 1 sem. proceso de separación y purificación. Objetivo específico: Diseñar un proceso a escala de laboratorio de ácido cítrico por fermentación con el hongo Aspergillus niger a partir de un medio de cultivo optimizado.

Objetivo general: Desarrollar un proceso de producción a escala piloto de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. Objetivo específico: Producir ácido cítrico a partir de la cepa de Aspergillus niger. 30/07 . 09/07 22 1 sem. Nombre de tarea Revisión bibliográfica y elaboración de cuadros comparativos que contengan: medios de cultivos convencionales. métodos de recuperación del producto y rendimiento esperados Producción de biomasa en placas Petri en Agar Papa Dextrosa o Sabouraud Fermentación con el hongo en el medio optimizado en cultivo sumergido discontinuo a escala de laboratorio y monitoreo de la reacción Análisis y discusión de resultados Duración Comienzo 21 1 sem. 23/07 24 1 sem. Semana 15 09/07 Semana 16 16/07 Semana 17 23/07 Semana 18 30/07 Id. tiempos de fermentación. mediante fermentación sumergida. 16/07 23 2 sem.

Objetivo específico: Caracterizar de forma fisicoquímica el ácido cítrico producido. 06/08 26 1 sem. 13/08 28 1 sem. Id. 13/08 27 1 sem. 20/08 29 Discusión y análisis de resultados 1 sem.Objetivo general: Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. 20/08 . Nombre de tarea Duración Comienzo Semana 19 06/08 Semana 20 13/08 Semana 21 20/08 25 Realización de un estudio de los métodos de análisis químicos para caracterizar el ácido cítrico Toma de muestra del ácido cítrico producido luego del proceso de fermentación Realización del análisis químico de la sustancia generada Realización de un cuadro comparativo entre los resultados obtenidos y los datos bibliográficos 1 sem.

Semana 22 27/08 Semana 23 03/09 Semana 24 10/09 Semana 25 17/09 Id. 27/08 31 equipos requeridos para la 2 sem. Estimación de los costos de los 1 sem. Estimación de los costos totales. Análisis y discusión de resultados. 1 sem. 03/09 10/09 17/09 . 1 sem. 27/08 producción de ácido cítrico. Estimación de los costos de mano 32 33 34 de obra e infraestructura.Objetivo general: Desarrollar un proceso de producción a escala de laboratorio de ácido cítrico a partir de Aspergillus niger empleando un medio de cultivo optimizado a partir de desechos vegetales generados en el Mercado Municipal de Valencia. 1 sem. Objetivo específico: Determinar los costos asociados al proceso de producción de ácido cítrico. Nombre de tarea Investigación de costos de mercado de materias primas y Duración Comienzo 30 reactivos en la base de datos del instituto nacional de estadística (INE).

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