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XV Congresso de Iniciao Cientfica da UFPE 29 a 31 de outubro de 2007

30116 - DESENVOLVIMENTO E VALIDAO DE CONDIES ANALTICAS PARA ANLISE DO ALQUILBENZENO LINEAR SULFONATO EM DIVERSAS MATRIZES AMBIENTAIS POR CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA
Luiz Galdino da Silva1; Mario Takayuki Kato2
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Estudante do curso de Lcenciatura em qumica CCEN UFPE; luizufpe@hotmail.com, 2Docente/pesquisador do Departamento de Engenharia Civil CTG UFPE, kato@ufpe.br

Resumo: O presente trabalho apresenta condies analticas para a determinao de LAS utilizando a SPE para isolar o composto das matrizes analisadas e posterior separao e quantificao dos componentes presentes na mistura pela HPLC RP e deteco por fluorescncia. Aps a determinao das melhores condies de separao o mtodo foi submetido ao processo de validao, que teve como objetivo avaliar se a metodologia fornece resultados confiveis para seu propsito. Palavras chave: HPLC RP; LAS; Produtos de limpeza; SPE; Validao INTRODUO Alquilbenzeno linear sulfonato (LAS) o surfactante aninico mais empregado como componente ativo de alguns produtos de limpeza, como detergentes e sabes em p. Devido ao uso demasiado destes produtos na limpeza de residncias e estabelecimentos comerciais acabam se tornando um dos componentes das estaes de tratamento de esgotos (ETEs) e consecutivamente de rios, lagos e mares. presena de surfactante aninico linear nos cursos dagua tem sido atribudo alguns impactos ambientais, como a formao de espumas nas superfcies das guas, o que ocasiona a diminuio do contato oxignio/gua, que pode diminuir a capacidade de autodepurao das guas devido ao estabelecimento de uma condio anaerbia4,6. O mtodo comumente utilizado para a quantificao de surfactantes aninicos totais em guas o mtodo colorimtrico das substncias ativas ao azul de metileno (MBAS)3. Entretanto, foram desenvolvidas metodologias especficas para a extrao do LAS das matrizes aquosas e slidas, baseando - se na tcnica da extrao em fase slida4 e para a identificao e quantificao foi utilizada a cromatografia lquida de alta eficincia com fase reversa (HPLC RP). Para avaliar se a metodologia implantada eficiente e fornece resultados coerentes com relao concentrao ou massa de analito medida, este foi submetido ao processo denominado de validao, que consiste em avaliar se o mtodo fornece resultados coerentes para o qual foi desenvolvido5,6,7. MATERIAIS Foram utilizados no desenvolvimento deste trabalho um cromatogrfo lquido Agilent series 1100, com amostrador automtico, sistema de bombas quaternrias e detectores de Uv visvel e fluorescncia. Coluna analtica C18 ChromSep 250 x 4.6 mm, 5 m VARIAN. Cartuchos de extrao em fase slida dos tipos C18 e SAX de 500 mg/L / 3 mL da Agilent. Sistema de vcuo mltiplo da Supelco. Acetonitrila grau HPLC Carlo Erba, Metanol grau HPLC J.T. Backer, cido

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actico e trietilamina da Merck, Padro comercial de LAS e padro interno C8 adquirido da petroqumica espanhola PETRESA. MTODO O mtodo aqui apresentado uma adaptao da metodologia proposta por Incio Lopes (PETRESA) no qual foi alterado o percentual da fase mvel e o tipo de coluna, o que proporcionou um menor tempo de anlise e economia de solventes analticos e consecutivamente reduo de rejeitos gerados. Aps a determinao das melhores condies de separao foi construda uma reta analtica a partir da injeo de oito concentraes e por fim, realizado o processo de validao seguindo as recomendaes sugeridas pelos protocolos existentes7,8,9. A preparao das amostras aquosas para anlise consistiu de passos de centrifugao, filtrao e tratamento em cartucho de SPE do tipo C18. Quanto as amostras de sedimento, o LAS foi extrado utilizando um sistema Soxhlet seguido da utilizao dos cartuchos de SPE SAX e C18. RESULTADOS E DISCUSSO A Tabela 1 mostra as condies analticas adotadas para a separao e posterior quantificao do LAS em amostras aquosas e de sedimentos de diversas matrizes. Os resultados obtidos foram excelentes uma vez que os picos homlogos esto totalmente separados, como mostram as Figuras 1 e 2. Tabela 1: Condies analticas utilizadas na separao dos homlogos do LAS. Parmetro do mtodo Volume de amostra injetada Fluxo da fase mvel Eluio isocrtica Detector de fluorescncia Sensibilidade do detector Temperatura da coluna Tempo de anlise Condies adotadas 20 L 1.0 mL/min 55%A e 45%B Excitao = 230 nm e Emisso = 290 nm 14 40oC 15 minutos

A seletividade do mtodo foi garantida pela utilizao da SPE e deteco por fluorescncia, a qual especfica para a estrutura do composto. As Figuras 1 e 2 mostram os cromatogramas obtidos pela anlise de uma amostra padro e de uma amostra oriunda do sedimento do rio Jaboato, respectivamente.

Figura 1: Cromatograma do padro

Figura 2: Cromatograma de amostra

O mtodo se mostrou linear em toda a faixa de concentrao estudada, a Figura 3 mostra que todos os pontos da curva do homlogo C10 (Figura 4) esto dentro da faixa linear, a qual deve estar numa faixa de incerteza de 5%. Este comportamento tambm foi observado para os

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demais homlogos. Para todas as curvas foram observados coeficientes de correlao iguais ou superiores a 0.9999, o que indica um bom ajuste dos pontos reta mdia.
Determinao da linearidade da faixa de trabalho para o homlogo C10 0,00075 Razo rea sob o pico/concentrao 0,00074 0,00073 0,00072 0,00071 0,0007 0,00069 0,00068 0,00067 0,00066 0,00065 2 2,5 3 3,5 4 4,5 LOG da concentrao

Figura 3 Avaliao da faixa Linear

Figura 4 Curva de Calibrao

A preciso do mtodo foi avaliada pela injeo em triplicata de seis concentraes distintas e a preciso associada a cada medida foi expressa com base no RSD (Tabela 1). Os resultados obtidos foram excelentes uma vez que o RSD para a concentrao total de LAS foi de 0.4% para o mnimo e 1% para o mximo. Tabela 2: Avaliao da preciso do mtodo entre ensaios distintos Homlogo RSD (1) RSD (2) RSD (3) RSD (4) RSD (5) RSD (6) 2.2 0.5 0.4 1.1 1.7 0.8 C10 2.0 0.3 0.1 1.1 1.5 0.3 C11 1.3 0.6 0.7 1.0 1.3 0.7 C12 3.5 3.3 2.0 1.0 1.6 1.6 C13 1.0 0.7 0.5 0.5 0.8 0.4 Total Amostra 1, 2, 3, 4: preparadas por um mesmo operador; Amostra 5: preparadas por um segundo operador; Amostra 6: Tratada por SPE. A exatido do mtodo foi avaliada, assim como a preciso, pela injeo de quatro concentraes distintas, mas no foi realizada em triplicata, uma vez que a exatido a concordncia entre os resultados de um ensaio individual com um valor de referncia ou aceito como verdadeiro7,8,9. A Tabela 2 mostra a exatido do mtodo. Tabela 3: Avaliao da exatido do mtodo Homlogo Exatido (%) 1 Exatido (%) 2 Exatido(%) 3 Exatido(%) 4 99 97 99 99 C10 96 95 96 97 C11 99 99 98 98 C12 98 91 99 96 C13 99 99 98 99 Total Para avaliar a robustez do mtodo foi injetada, em triplicata, uma mesma concentrao na qual foi variada inicialmente a temperatura do compartimento da coluna em 5OC. Neste teste no foram observadas mudanas significativas no tempo de reteno dos componentes da mistura. Os resultados quantitativos, obtidos com esta mudana, no foram afetados. Tambm, foi modificada a concentrao do reagente on par e o fluxo dos solventes eluentes em 2%.

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CONCLUSO A metodologia aqui apresentada mostrou se adequada a seu propsito, uma vez que foi garantida sua seletividade, linearidade, preciso, exatido e robustez. Com a utilizao da padronizao interna foi possvel obter resultados mais precisos e exatos j que esta vem a corrigir erros de preparao da amostra. A utilizao da extrao em fase slida e deteco por fluorescncia foi fundamental para a seletividade do mtodo e quantificao do LAS AGRADECIMENTOS A todos do LSA, CNPq/PROPESQ, DETEN (Bahia) e PETRESA (Espanha). REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1. Akyuz, M., Roberts, D. J. (2002). Determination of Linear Alkylbenzene Sulphonates and their Biodegradation Intermediates by Isocratic RP HPLC. Turk J. Chem 26: 669 679. 2. Berna, J. L., Ferrer, J., Moreno, A. (1989). The fate of LAS in the environment. Tenside Surfactants Detergents 26 , 2. 3. Clessceri, L.S.; Greenberg, A.E.; e Trussell, R.R. 1989. Standard Methods For Examination of Water and Wastewater, Am. Public Health Assc.; Washington, DC, 17th ed., p. 559. 4. Comellas, L; Portillo, J.L. e Vaquero, M.T. 1993. Development of an analytical procedure to study linear alkilbenzenesulphonate (LAS) degradation in sewage sludge amended soils. Journal of chromatography A 657: 25 31. 5. Penteado, J. C. P.; El Seoud, O. A. e Carvalho, L. R. F. 2006. Alquilbenzeno Linear Sulfonato linear: Uma abordagem ambiental e analtica. Qumica Nova Vol. 29 N05: 1038 1046 6. Reemtsma, T. 1996. Methods of analisys of polar aromatic sulfonates from aquatic environments. Journal of chromatography A 733: 473 489. 7. Ribani, M et al. (2004). Validao em mtodos cromatogrficos e eletroforticos. Qumica Nova, Vol. 27, N0 5, 771 780. 8. Snyder, L. R.; Kirkland, J. J.; Glajch, J. J (1997). Practical HPLC Method Development, 2a ed., Wiley: New York, cap. 15. 9. Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade Industrial Orientaes sobre validao de mtodos de ensaios qumicos DOQ CGCRE 008, Reviso: 01 maro/2003