You are on page 1of 10

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN C-1


Av. 1 de Mayo s/n, colonia Sta. Mara las Torres, Cuautitln Izcalli, Estado. De Mxico.

SECCIN DE BIOQUMICA Y FARMACOLOGA HUMANA LABORATORIO FARMACOLOGA II

EVALUACIN DE LA Equisetum hyemale (COLA DE CABALLO) RESPECTO A UN FRMACO DE REFERENCIA (FUROSEMIDA) POR MEDIO DEL TEST DE LIPSCHITZ EN RATAS WISTAR HEMBRA
M. en C. Rangel Trujano Lidia, Q.F.I. Koizumi Castro Mara Guadalupe Crdenas Montero. A., Gonzlez Rodrguez. J., Isidro Morales M., Lozano Garca L., Nava Maldonado C. Ramrez Lynn Rodrigo Octubre 2012 sistema urinarioi, adems de que la especie Equisetum Hyemale contiene una enzima (tiaminasa) que desnaturaliza protenas. Keywords. Diuretics, abstract digestive Hyemale Equisetum (horsetail), equisetonin, Flavonoids, Furosemide, Medicinal plants. Abstract We conducted an experimental study on Wistar rats, with the aim of assessing the potential diuretic effect of the extract obtained by digestion of horsetail (Equisetum Hyemale). The results were compared with those obtained by furosemide (diuretic reference) at the dose of 5 mg / kg and with common water used as control. Urinary excretion was measured over a period of 2.5 hours, to determine the final volume concentration of Na +, Cl-. Checking the diuretic and digestive extract, and in turn compared with the effect of furosemide. After investigation of extracts with a dose of 100 mg / kg and 200 mg / kg, obtained by digestion is checked mayir effectiveness of the first dose by the presence of

Palabras Clave. Diurticos, Extractos Digestivo, Equisetum Hyemale (Cola de caballo), Equisetonina, Flavonoides, Furosemida, Plantas medicinales. Resumen Se realiz un estudio experimental en ratas lnea Wistar, con el objetivo de valorar el posible efecto diurtico del extracto obtenido por digestin de cola de caballo (Equisetum Hyemale). Los resultados fueron comparados con los obtenidos por la furosemida (diurtico de referencia), en la dosis de 5 mg/kg de peso y con agua comn utilizada como control. La excrecin urinaria se midi en un lapso de 2.5 horas, para determinar en el volumen final la concentracin de Na+, Cl-. Comprobando as la accin diurtica del extracto digestivo, y a su vez comparndolo con el efecto de la furosemida. Tras la investigacin con extractos a dosis de 100 mg/kg y 200 mg/kg, obtenidos por digestin, se comprueba mayor efectividad de la primera dosis por la presencia de flavonas glucosidicas como la equisetonina, y las saponinas. Sin embargo a dosis elevadas puede causar un efecto toxico, provocando efectos irritativos en el

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2

glycosidic as equisetonin flavones, and saponins. But high doses can cause a toxic effect, causing irritating effects into the urinary system, and that the species Equisetum Hyemale contains an enzyme (thiaminase) that denatures proteins.

INTRODUCCIN Por definicin los diurticos son frmacos que estimulan la excrecin renal de agua y de electrolitos por lo que son utilizados para regular tanto el volumen como la composicin del medio interno en diferentes afecciones, lo que los hace un objeto de investigacin dentro de la rama de la farmacoterapia. Los trabajos de investigacin, dividen a estos frmacos en una clasificacin que ha sido variada, considerndose en ello: el sitio de accin (diurticos de asa), eficiencia (diurticos de techo alto), estructura qumica (diurticos tiazida), similitud de accin con otros diurticos (diurticos parecidos a tiazidas), efectos sobre la excrecin de potasio (diurticos ahorradores de potasio) osmticos y otros. Los diurticos osmticos aumentan la osmolaridad de la orina. Son filtrados por el glomrulo, no son secretados y no son reabsorbidos, actan en todo el Nern pero principalmente en TCP y en asa de Henle delgada). Son diurticos potentes usados para diuresis forzada en intoxicaciones. Preventivos de insuficiencia renal aguda. Edema cerebral. Glicerina o isosorbida va oral: reduccin de la presin intraocular previa a intervenciones oftalmolgicas. Los efectos que tienen son el de extraer agua del liquido intracelular; expandir el liquido extracelular, mientras que disminuyen la viscosidad sangunea y aumentan el FSR, para as producir "lavado osmtico", diuresis acuosa que impide la reabsorcin en lugares permeables al agua y disminuyen el volumen tisular. A pesar del gran desarrollo alcanzado por la sntesis qumica, en la actualidad las plantas

llamadas medicinales continan siendo un valioso arsenal de sustancias o de precursores de las mismas, ya sea en forma de medicamento vegetal o de materia prima para la industria farmacutica. Las posibilidades de encontrar nuevos medicamentos que alivien las diferentes enfermedades, han hecho que las plantas constituyan uno de los recursos teraputicos de mayor uso. Hoy nos vemos beneficiados con esta experiencia que ha contribuido al desarrollo de la actual fitoterapia, sin embargo no existe la suficiente evidencia documentada de la eficacia de estos productos naturales, esperando cumplir un importante papel en la teraputica del futuro. Entre las plantas usadas en los tratamientos mdicos como remedios herbolarios encontramos la Equisetum Hyemale (cola de caballo), la cual pertenece a una clase propia, la Equisetacae, que no tiene afinidad directa con ningn otro grupo de plantas. Son una especie cercana a los Helechos, pero con muy distintas propiedades fotoqumicas. La clase incluye nicamente un solo gnero, Equisetum, cuyo nombre deriva de la palabra latina equus (un caballo) y seta (una cerda), de la cual se conoce la peculiar apariencia notable de los tallos articulados. La especie E. hyemale, perteneciente al genero Equisetum, es una hierba de origen americano, habita en climas semisecos, seco y templado entre los 1000 a los 2600m sobre la superficie del mar, normalmente se encuentra asociada a la vegetacin acutica, a la orilla de los ros, o en las barrancas de bosque mesfilo de montaa y bosques de pino. En Mxico se localiza en los climas correspondientes en los Estados de: Nayarit, Jalisco, Aguascalientes, Michoacn, Estado de Mxico, Quertaro, Distrito Federal. Sus caractersticas fisiolgicas la hacen ver como una hierba erecta en forma de junco, generalmente no ramificada, de tallos acanalados, de hasta 10 mm de dimetro; los tallos se encuentran unidos en la base formando una vaina tan larga como ancha que presenta un anillo oscuro en la base; presenta articulaciones llamadas estrbilos (partes donde se producen esporas; no tiene

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2


flores) terminados en una puntita negra. El anillo oscuro en la base de las vainas es caracterstico de esta especie, pero a veces este es irregular o no se presenta. La cola de caballo (Equisetum Hyemale) constituye una de las plantas mas diurticas usadas en la actualidad, pues posee una gran capacidad para eliminar agua del cuerpo en grandes cantidades, al extremo de aumentar en un 30% el volumen de orina. Esta propiedad se debe a la accin de varios componentes; es rica en sales minerales, taninos y flavonoides, que contribuyen al mantenimiento del colgeno, y aumentan la elasticidad de los tejidos, as como las defensas inespecficas del organismo. Tambin contiene equisetonina y saponinas que son responsables de su efecto diurtico moderado, pues stos tienen la capacidad de aumentar la circulacin sangunea a nivel renal, con lo que la filtracin glomerular se ve aumentada y, por tanto, se da un efecto diurtico, haciendo que la planta se use para enfermedades relacionadas con problemas de retencin de lquidos. Adems de Vitamina C, potasio, calcio, silicio, lo que la hace un remedio diurtico y astringente, antidiarreico, depurativo y cicatrizante. Sin embargo pese a su efectividad como diurtico, se ha reportado que esta planta es txica. Entre los sntomas que se le atribuyen estn los de prdida de condicin fsica, afectaciones en el ritmo del pulso que se torna dbil y rpido, as como decaimiento, pues contiene alcaloides que llegan a ser txicos, tales como la palustrina, palustrinina y nicotina. Como frmaco de comparacin de la actividad de la Equisetum Hyemale se usa la Furosemida que es un diurtico de asa, cuya efectividad puede ser medida en gran escala, por lo que es usado para reducir la inflamacin y retencin de liquido causados por diversos problemas a nivel de corazn e hgado. Tambin se usa para tratar la hipertensin, insuficiencia cardaca congestiva, hipertensin y edema. Funciona al hacer que los riones eliminen el agua mediante la salida de iones a travs de la orina. Junto con otros muchos diurticos, la furosemida est incluida dentro de la lista de sustancias prohibidas de la Agencia Mundial Antidopaje, debido a que puede enmascarar la presencia de otras sustancias en el organismo. Para el motivo de experimentacin: La actividad diurtica de los frmacos y sustancias que se pueden tener esta accin, se puede proceder a evaluacin a travs de diferentes mtodos, los que permiten de una forma u otra, determinar las potencialidades que tiene una sustancia de estimular la eliminacin renal de agua y electrlitos. Para nuestro estudio se utiliza uno de estos mtodos, el Test de Lipschitz, pues se ha considerado hasta ahora como el modelo estndar, que ha sido ampliamente utilizado en el tamizaje de frmacos con potencial actividad diurtica. Este mtodo se basa en la comparacin de la excrecin de agua y electrlitos, usando como blanco de estudio a ratas previamente tratadas con la sustancia en experimentacin, que para este caso es la Equisetum Hyemale tratada a dos diferentes dosis, la primera de 100mg/Kg y la segunda de 200mg/Kg, en contraste con una sustancia de referencia o control positivo que en el ensayo es la Furosemida a 5mg/Kg. Algunos de los parmetros que se evalan en la experimentacin son la Accin Diurtica, que es el grado de efectividad de cada tratamiento. Y la Actividad Diurtica, que es un comparativo entre los tratamientos a prueba contra el frmaco de referencia. HIPTESIS. Si se administra Equisetum Hyemale (cola de caballo) a dosis de 100mg/Kg y 200mg/Kg, en presencia de un testigo (Furosemida) a ratas wistar, entonces se obtendr un efecto diurtico dependiente de las dosis, manifestado por el aumento en el volumen de orina de los animales.

METODOLOGA. En primer lugar se seleccionaron los medicamentos y las plantas medicinales sobre los que centrar la bsqueda bibliogrfica:

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2


diurticos habitualmente empleados en la prctica clnica y plantas medicinales relacionados con ellos. Como fuente de informacin bsica se utilizaron artculos cientficos de la revista Scielo, fuentes informatizadas de la red peruana de alimentacin y nutricin y el Vademcum en Espaol. La muestra se colecto en el mercado del bosque, ubicado en Xochimilco, Mex. D.F. la identificacin taxonmica de la planta se realizo en la FES-Iztacala por la M en C. MA. Edit Lopes Villafranco, responsable del herbario Iztacala, el ejemplar de la taxonoma se almacen en la coleccin del herbario con nmero de referencia 2132IZTA avalado por el Herbario de la Facultad de Estudios Superiores Iztacala (UNAM) (ANEXO 1). Se utilizaron tallos estriles para realizar la digestin de la E. hyemale (cola de caballo), los cuales fueron fraccionados mecnicamente empleando tijeras y cortndolos en pedazos muy pequeos. Se llevaron a cabo 4 extracciones, donde se peso inicialmente 1.6 g de planta que se colocaron en un vaso de precipitados y se les adicion 20ml de agua destilada y se procedi a calentar con el mechero sobre un trip, manejndose una temperatura de 70C a 80C, durante un periodo de 15 minutos; el extracto obtenido se filtro y se almacen en un frasco mbar. Se adicion de nueva cuenta 20mL de agua destilada al vaso que contena los restos de planta y se procedi de la misma manera hasta completar las 4 extracciones obtenindose un volumen final de 40ml con una concentracin de 200mg/mL. Posterior mente se hace una dilucin (1:1) tomando 20mL del extracto digestivo colocndolos en un matraz y aforando a 40 mL con H2O destilada, para as tener una concentracin de 100mg/mL. Teniendo el extracto, se procede a la bsqueda de los metabolitos que puedan estar presentes en la planta, a los que se atribuyen las propiedades diurticas, como por ejemplo los saponsidos, cuya principal propiedad fsica es que en solucin acuosa son agentes tensoactivos, es decir, son capaces de formar espuma (poder afrgeno) y formar emulsiones; As, para identificar aceites esenciales se calienta el extracto a ebullicin en un vaso de precipitados tapado con un vidrio de reloj, si hay presencia de gotas de consistencia aceitosa, se considera positiva la prueba. Para identificar la presencia de flavonoides se llev a cabo la reaccin de Shinoda; en el caso de alcaloides se prob el extracto con los reactivos de Mayer, Wagner y Dragendorf respectivamente, en cuyo caso un cambio de coloracin variado y la formacin de un precipitado, denota una prueba positiva. Se empleo una agitacin vigorosa del extracto en un tubo de ensaye para la observacin de espuma producida por saponinas, en cuyo caso, si se observa la presencia de espuma, la prueba es positiva. Por ltimo, para identificar la presencia de esteroides y triterpenos, el extracto digestivo de Equisetum hyemale se pone a reaccionar con el reactivo de Liebermann-burchard, en cuyo cambio de coloracin del naranja claro l verde azulado, dan un resultado positivo. Por su parte, la furosemida se trato a partir de tabletas de 40mg que fueron trituradas en un mortero para obtener un polvo fino de donde se pesaron 25mg que se aforaron a 25ml con agua destilada, obteniendo una solucin concentracin de 1mg/mL. Tras distribuir 19 ratas de la lnea Wistar hembra procedentes del Bioterio de la Facultad de Estudios Superiores Cuautiln Campo Cuatro (UNAM) en 4 lotes, de 5 animales para el lote control, el lote 1 (E. hyemale 100mg/Kg) y el lote 2 (E. hyemale 200mg/Kg); y 4 animales para el lote testigo de Furosemida; se dej en ayuno y sin lquidos al total de los animales durante 24 horas antes del tratamiento experimental. DOSIS ADMINISTRADAS DE LOS DIFERENTES TRATAMIENTOS:: Lote control 5.7mg/Kg Lote 1 100mg/Kg Lote 2 200mg/Kg Lote testigo 5mg/Kg

Tras la administracin y dejar un tiempo de espera de 30 min, se hace recoleccin de la

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2


orina con una jeringa y cuantificacion del volumen de orina por lote, repitiendo esta cuantificacion cada 30 minutos, hasta los 150min y recolectando toda la orina en un vaso de precipitados para su cuantificacin final. Del volumen final de orina se realizan pruebas de identificacin usando tiras reactivas para humano y as llevar a cabo el examen general de orina y la identificacin de los metabolitos presentes. Tambin se realizaron cuantificaciones de los iones sodio y cloro; para lo cual se tom 1mL de cada lote y se coloc en un tubo de ensaye respectivamente a cada tuvo se agreg 2 gotas de Dicromato de potasio y gota a gota se adicion nitrato de plata hasta un cambio de coloracin marrn, se reportan el nmero de gotas gastadas y se procede a calcular los mg de sodio presentes. Dado que la relacin entre sodio y cloro es de 1:1, la concentracin de Cl- sera la misma que la de Na+. Al final se procedio a sacrificar a los animales por sobredosis de anestesia con cloroformo. RESULTADOS

Resultados del volumen de orina obtenido en los diferentes tratamientos.


Vol a 30min (mL) control testigo 100mg/Kg 200mg/Kg 7.5 3.5 6.3 1.4 Vol a 60min (mL) 3.6 2.8 8.7 2.15 Vol a 90min (mL) 0 0.7 1.7 0 Vol a 120min (mL) 1.4 0 0.2 0 Vol a 150min (mL) 1.2 0 0 0..1 Vol final (mL) 13.7 7 16.9 3.65

Resultados del volumen promedio de orina obtenido en los diferentes tratamientos.


Vx a 30min (mL) control testigo 100mg/Kg 200mg/Kg 1.5 0.875 1.26 0.28 Vx a 60min (mL) 0.72 0.7 1.74 0.43 Vx a 90min (mL) 0 0.175 0.34 0 Vx a 120min (mL) 0.28 0 0.04 0 Vx a 150min (mL) 0.24 0 0 0.02 Vx final (mL) 2.74 1.75 3.38 0.73

Volumen promedio de orina obtenida por tiempo de experimentacion


10 9 8 Volumen de orina (mL) 7 6 5 4 3 2 1 0 -1 0 20 40 60 80 100 Tiempo (min) 120 140 160 100 mg/Kg 200mg/Kg control testigo

Figura 1: en esta figura se pueden observar las eliminaciones de orina de cada uno de los lotes experimentados de acuerdo al tiempo de experimentacin transcurrido, observando que el lote 1 tiene mayor eliminacin de orina al minuto 60 al igual que el lote 2, sin embargo el lote 2 elimina una cantidad mucho menor de orina en el mismo tiempo. Por su parte el lote control y el testigo obtienen mayor excrecin de orina en el minuto 30.

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2

Volumen total promedio de orina obtenida al final de la experimentacin


18 16 14 Volumen (mL) 12 10 8 6 4 2 0 control testigo Lote 100 mg/Kg 200mg/Kg

Figura 2: se puede observar que hay un incremento notable de el volumen de eliminacin de orina en el lote 1 que fue administrado con 100mg/Kg de E. Hyemale, incluso en mayor cantidad que el lote testigo administrado con Furosemida (5mg/Kg), por su parte en el lote 2 (200 mg/Kg de E. Hyemale), en lugar de obtener un incrementos en la eliminacin, se logra observar que disminuye el volumen de orina respecto incluso al lote control.

CLCULOS DE EFICIENCIA RENAL POR PARMETROS DE LIPSCHITZ

) ( )

( ) ( )

Escala: Alta: AD > 0,90, Moderada: AD (0,70 -, 0.87), Baja: AD (0.50 -,0.69), Nula: AD<0.50

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2 RESULTADOS DE PARMETROS DE ACCIN Y ACTIVIDAD DIURTICA DE LOS TRATAMIENTOS
Lote Vol.Final (ml) Excrecin urinaria (%) Accin diurtica Actividad diurtica Control 2.74 54.48 Tratamiento testigo Furosemida 1.75 35 0.64 Lote 1 100mg/Kg 3.3 66 1.21 1.89 Lote 2 200mg/Kg 0.73 14.6 0.27 0.42

Actividad diuretica de la E. Hyemale respecto ala Furosemida.

2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 100mg/Kg 200mg/Kg Dosis de E. Hyemale

Accin Diurtica de los tratamientos

1.4 1.2 1 Grados de accin 0.8 0.6 0.4 0.2 0 furosemida 100mg/Kg Tratamiento 200mg/Kg

Figura 4: En ste histograma se observa que el tratamiento con mayor actividad diurtica de E. Hyemale a 100 mg/kg est por encima del tratamiento de furosemida. En la dosis de 200 mg/kg de E. Hyemale, tiene una accin muy baja.

RESULTADOS OBTENIDOS DEL EXAMEN GENERAL DE ORINA REALIZADO A LOS DIFERENTES LOTES:
ANALITO Glucosa Bilirubina Cetonas. Gravedad especfica Sangre pH LOTE CONTROL NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.005 ALTO 6.5 NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 2 gotas 10mg LOTE TESTIGO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.005 TRAZAS 6 TRAZAS NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1 gotas 5mg LOTE 1 NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.005 TRAZAS 6 TRAZAS NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1 gotas 5mg LOTE 2 NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO 1.01 TRAZAS 6.5 TRAZAS NORMAL NEGATIVO NEGATIVO 2 gotas 10mg

Figura 3: en este histograma podemos observar que el tratamiento con mayor accin diurtica es el de E. Hyemale a una dosis de 100mg/Kg aun por encima del tratamiento con Furosemida. Por su parte se puede observar que la E. Hyemale a dosis de 200mg/Kg tiene una accin muy pobre; debido a la toxicidad de la planta.

Protenas Urobilingen Nitritos Leucocitos #NaCl

Grado de Actividad diuretica

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2


Metabolito Aceites esenciales Flavonoides Alcaloides Prueba Vidrio de reloj Reaccin de shinoda R.mayer R. Wagner R. Dragendorf Agitacin R. Liebermannburchard Resultado Negativo Negativo Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo minutos cuando hubo una mayor excrecin hdrica. Por lo tanto se puede constatar que se tiene un diurtico, que entrara en la clasificacin de osmtico pues aumenta la osmolaridad de la orina. Tambin se demuestra que es un diurtico potente, que por su rpida accin podra ser usado para diuresis forzada en intoxicaciones; ya que extraen agua del liquido intracelular, mientras que disminuyen la viscosidad sangunea y aumentan el Flujo Sanguneo Renal, para as producir "lavado osmtico", diuresis acuosa que impide la reabsorcin en lugares permeables al agua y disminuyen el volumen tisular. Por su parte la furosemida es un diurtico de asa que incrementa notablemente la diuresis, especialmente por la excrecin de Na+ y Cl- motivo de su eleccin para ii este estudio como control positivo , cabe destacar, que este lote era el que tenia menor cantidad de ratas, por ello al momento de evaluar la cantidad de iones presentes, se relaz sobre el volumen final. De acuerdo a los resultados obtenidos, hay una menor eliminacin de iones en la orina, explicando as que hay una menor concentracin de iones en la orina. De acuerdo a los resultados obtenidos, hay una menor eliminacin de iones en la orina en el lote 1 del tratamiento por la mayor cantidad de volumen de orina excretado. La excrecin de sodio en orina para la mayora de los grupos experimentales tratados con el extracto acuoso no superan la excrecin que para este in manifestaron los grupos experimentales control negativo y el control positivo furosemida. Tambin se obtuvo un menor volumen de orina en este lote; sin embargo, tuvo una mayor rapidez en iniciar su efecto diurtico a comparacin del lote 1 y 2 (grfico 2), al iniciar rpidamente significa que este frmaco es mas potente que el tratamiento herbolario. Los resultados obtenidos en los tratamientos de la planta se dan gracias a la composicin de la planta de cola de caballo, entre las que se destacan el slice, magnesio, calcio, fsforo, potasio, aluminio y cobalto, calcio, vitamina C y resina. Esteroles, incluyendo iii iv colesterol y otros . Entre 5 y 10 % de cido silcico. Sustancias diversas, incluyendo un equisitonino de la v saponina, dimetil sulfona, tiaminasa y cido acontico. Los estudios en ratones indican que la cola de caballo puede cambiar la actividad de los riones, con un control anormal de la cantidad de agua que se elimina, pues contiene alcaloides que llegan a ser txicos a dosis elevadas, como la palustrina, palustrinina y vi nicotina . Esto se observa en la dosis de 200mg/Kg, ya que al aumentar la misma, en lugar de causar un efecto

Saponinas Esteriodes y triterpenos

DISCUSIN DE RESULTADOS La cola de caballo es una de las plantas ms utilizadas en la medicina popular. Posee un rizoma central del cual salen dos clases de tallos: los frtiles, y los tallos estriles, que son de gran inters para la Fitoterapia, y por consiguiente para nuestra investigacin, ya que en ellos se encuentran los principios activos que confieren a la planta sus propiedades medicinales. Tas la experimentacin, los resultados obtenidos por el Test de Lipschitz nos demuestran que la accin diurtica de la E. Hyemale, no aumenta al aumentar la dosis administrada, sino por el contrario disminuye en un 80%, al duplicar la dosis. Respecto a nuestra evaluacin en el frmaco de comparacin se puede observar que la E. Hyemale es mas efectiva, a una dosis de 100mg/Kg que incluso la Furosemida a dosis teraputica recomendada de 5mg/Kg. El segundo parmetro evaluado es la Actividad Diurtica (AD) donde de acuerdo a la escala AD, el lote1 con tratamiento presento una AD catalogada como alta(1.89) en comparacin con el lote2 que presento una AD catalogada como nula (0.42). Lo cual indica que la dosis en ratas ms apropiada para poder ejercer su efecto diurtico es la de 100mg/Kg, mientras que a dosis mas alta como la de 200mg/Kg llega a ser toxica. En estudios anteriores se ha encontrado que la dosis ix letal media es de 500mg/Kg.) . Las modificaciones de la eliminacin hdrica, sdica y de cloro constatadas en la rata, muestran los efectos sobre los iones urinarios, teniendo as un ligero pero notable aumento de la eliminacin hdrica. El efecto diurtico del extracto acuoso qued demostrado en el presente proyecto al existir una respuesta diurtica positiva en la dosis ensayada: 100mg/kg, comparadas con el grupo control y con la furosemida. Se demostr que el extracto acuoso de 100mg/kg produjeron un mayor volumen de orina en 150minutos siendo a los 90

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2


diurtico, provoca un efecto toxico. Se ha demostrado que sus flavonas glucosidicas como la isoquercetina, vii equisetonina y equicetrina, y las saponinas son viii responsables de su efecto diurtico moderado. Por lo tanto uno de los componentes de la Cola de caballo (Equisetum Hyemale) al que se le atribuyen sus actividades diurticas en la experimentacin son los saponsidos (equisetonina); encontrados por la prueba fsica de formacin de espuma. Los azcares ms frecuentes constituyentes de los dos tipos de ix saponsidos son la glucosa, arabinosa. stos tienen la capacidad de aumentar la circulacin sangunea a nivel renal, con lo que la filtracin glomerular se ve aumentada y, por tanto, se da un efecto diurtico. Esto se observa en el lote 1 con la menor dosis administrada (grfico 2). Sin embargo, hay que tener en cuenta que, por va oral y en dosis altas, las saponinas irritan la mucosa bucofarngea y digestiva, causando xviii dolor abdominal, vmitos y diarrea . Puede provocar efectos irritativos, sobre todo en el sistema urinario. La especie Equisetum Hyemale contiene una enzima (tiaminasa) que destruye a la tiamina, un componente importante de muchas protenas del cuerpo, por lo tanto puede causar toxicidad (solo en animales que no tienen rumen, p.ej. caballos, ratas Por otra parte, los saponsidos en contacto con la sangre son hemolticos, ya que interaccionan con el colesterol de la membrana de los eritrocitos. El poder hemoltico es caracterstico de los saponsidos triterpnicos, pero es variable segn los sustituyentes de la estructura. Debido a su poder hemoltico resultan muy txicos si se administran por va intravenosa, ya que de esta manera contactan directamente con la sangre, mientras que por va oral su toxicidad es muy x baja; por lo que son de eleccin en esta va.
v

Grandes cantidades de cola de caballo pueden producir los sntomas de sobredosis de la nicotina, entre los que se incluyen fiebre, manos y pies fros, ritmo cardiaco anormal, dificultad para caminar, debilidad muscular y prdida de peso. Las personas que fuman o quienes usan los parches de nicotina o goma de mascar de xi nicotina deben evitar la cola de caballo. Experimentalmente en cuanto al el examen general de orina, cabe destacar que existi la presencia de sangre en la orina de todos los lotes y eliminacin de protenas en los lotes tratados tanto con el extracto de la planta como como en el lote testigo y por ende, el pH se ve alterado tratndose de un pH cido, aunque se encuentra dentro de lo normal. CONCLUSIONES Se valor el efecto diurtico de la cola de caballo en dos dosis 100mg/Kg y 200 mg/Kg, comparndola con un diurtico de asa (furosemida) obteniendo que la primera dosis tiene mayor actividad diurtica (AD= 1.89) que la segunda (AD= 0.42), reflejado tambin en el volumen de excresin promedio. Siendo sta de eleccin para su uso como diurtico. El mtodo de Lipchitz tiene gran utilidad para poder evaluar el efecto diurtico de el extracto de Equisetum hyemale, empleado en el presente trabajo experimental, ya que proporciona parmetros como la actividad diurtica. Es necesario realizar en estudios posteriores una evaluacin del efecto txico de Equisetum hyemale, ya que en el presente trabajo experimental, no se encuentran bien definidos, ya que nicamente se evalu su efecto diurtico. Wren, R. C. Enciclopedia de Medicina Herbolaria y Preparados Botnicos. Grijalbo. Mxico, 1994. II Tomos, 782 pginas. Referencia sobre E. arvense, en la pgina 200 vi http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico /equisetaceae/equisetumhyemale/fichas/ficha.h m vii Drogenkunde, 8a. ed. Heinz A., Hoppe (ed.), Berln W. De Gryter, 1975. Ref. R.C. Wren. Op. cit. p: 200 y 741 viii http://www.natureperu.com/product_info.ph p?products_id=176&language=es ix LPEZ LUENGO, TRNSITO (2001) Saponsidos Fititerapia.OFFARM pg.124-125.

Alonso, Jorge R. Tratado de Fitomedicina. Bases Clnicas y Farmacolgicas. ISIS Ediciones SRL. Buenos Aires, Argentina, 1973 ii Jackson EK. Diuretics. In: Hardman JG, Limbird LE, Good-man GA, editors. Goodman & Gilmans the Pharmacological Basis of Therapeutics. New York: McGraw- Hil; 2001.p. 755-88 iii Pahlow, Mannfried. El Gran Libro de las Plantas Medicinales. Ed. Everest. Len, Espaa. 1982. 459 pginas.Pgina 166 iv http://www.botanicalonline.com/medicinalseq uiseto.ht

Octubre 2012 Farmacologa UNAM FES-C 2


x

http://saludbio.com/articulo/plantasmedicinales/cola-de-caballo xi http://salud.univision.com/es/hierbas-ysuplementos-a-z/cola-de-caballo-equisetumarvensel Xviii Henderson JA, Evans EV, McIntosh RA. The antithiamine action of Equisetum. J Amer Vet Med Assoc 1952;120:375-378. Joksic G, Stankovic M, Novak A. Antibacterial medicinal plants Equiseti herba and Ononidis radix modulate micronucleus formation in human lymphocytes in vitro. J Environ Pathol Toxicol Oncol 2003;22(1):41-48. xix Dos Santos JG Jr, Blanco MM, Do Monte FH, et al. Sedative and anticonvulsant effects of hydroalcoholic extract of Equisetum arvense. Fitoterapia 2005 Sep;76(6):508-13. xx Fabre B, Geay B, Beaufils P. Thiaminase activity in Equisetum arvense and its extracts. Plant Med Phytother 1993;26:190-197. xxi Gibelli C. The hemostatic action of Equisetum. Arch Intern Pharmacodynam 1931;41:419-429. xxii Graefe EU, Veit M. Urinary metabolites of flavonoids and hydroxycinnamic acids in humans after application of a crude extract from Equisetum arvense. Phytomedicine 1999;6(4):239-246. xxiii Prez Gutirrez RM, Laguna GY, Walkowski A. Diuretic activity of Mexican Equisetum. J Ethnopharmacol. 1985 Nov-Dec;14(2-3):269-72. PubMed PMID: 4094471. xxiv LPEZ LUENGO, TRNSITO (2001) Saponsidos Fititerapia.OFFARM pg.124-125. xxv HABIB INTERSIMONE, Natalia; DAUD THOENE, Adriana y SANCHEZ RIERA, Alicia. Efecto diurtico de extractos acuosos y alcohlicos de flores de Phrygilanthus acutifolius (corpo) en ratas. Rev Cubana Plant Med [online]. 2005, vol.10, n.3-4 [citado 2012-11-08], pp. 0-0 . xxvi <http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_art text&pid=S102847962005000300003&lng=es&nrm=iso>. ISSN 1028-4796.

10