Dissertação Biospeckle Batata

ANDERSON GOMIDE COSTA
PREDIO E IDENTIFICAO DE DANOS INTERNOS EM BATATAS POR MEIO DO BIOSPECKLE LASER
LAVRAS - MG 2011
Dissertao apresentada Universidade Federal de Lavras, como parte das exigncias do Programa de PsGraduao em Engenharia Agrcola, rea de concentrao em Instrumentao, para a obteno do ttulo de Mestre.
Orientador Dr. Roberto Alves Braga Jnior
Coorientador Dr. Eduardo Valrio de Barros Vilas Boas
LAVRAS - MG 2011
Ficha Catalogrfica Preparada pela Diviso de Processos Tcnicos da Biblioteca da UFLA Costa, Anderson Gomide. Predio e identificao de danos internos em batatas por meio do biospeckle laser / Anderson Gomide Costa. Lavras : UFLA, 2011. 81 p. : il. Dissertao (mestrado) Universidade Federal de Lavras, 2011. Orientador: Roberto Alves Braga Jnior. Bibliografia. 1. Internal bruising. 2. Impactos mecnicos. I. Universidade Federal de Lavras. II. Ttulo. CDD 621.366
Dissertao apresentada Universidade Federal de Lavras, como parte das exigncias do Programa de PsGraduao em Engenharia Agrcola, rea de concentrao em Instrumentao, para a obteno do ttulo de Mestre. APROVADA em 15 de Julho de 2011. Dr. Roberto Alves Braga Jnior Dr. Eduardo Valrio de Barros Vilas Boas Dr. Incio Maria dal Fabro UFLA UFLA UNICAMP
Dr. Roberto Alves Braga Jnior Orientador
Dr. Eduardo Valrio de Barros Vilas Boas Coorientador
LAVRAS - MG 2011
A minha me, Lucemar, ao meu pai Lcio e minha av Glria os quais estiveram ao meu lado em todos os momentos.
DEDICO.
AGRADECIMENTOS
A Deus por sempre me guiar e mostrar ao caminhos corretos a seguir, por me dar tranquilidade nos momentos conturbados e inteligncia nos momentos difceis. minha av Glria pelos cuidados, carinho e dedicao em todos estes anos. Ao meu pai Lcio e minha me Lucemar pela dedicao e luta para que se tornasse possvel o alcance de mais um objetivo da minha vida. Obrigado! Aos meus irmos, Otvio, Lucinho e Tamara, pela convivncia e amizade. Ao Paulinho pela amizade e ajuda nos momentos difceis. Aos demais familiares pela fora, torcida e oraes. Ao professor Roberto Braga pela amizade, pacincia, confiana e dedicao em minha orientao desde os tempos de iniciao cientfica. Com certeza uma referncia como profissional para a minha vida. Ao professor Giovanni Rabelo pela ajuda nos trabalhos desenvolvidos e pela confiana durante estes anos. Aos professores Eduardo Vilas Boas e Bruno Barbosa, pelas dicas e sugestes que ajudaram muito no desenvolvimento e melhoria deste trabalho, explicaes e apoio ao longo de todo o mestrado. Ao professor Fbio Moreira pela disponibilidade em resolver os eventuais problemas ocorridos durante o mestrado. Greice, secretria da ps, por sempre estar disposta a ajudar e pela sua pacincia comigo.
Ao
Programa
de
Ps-Graduao
de
Engenharia
Agrcola
da
Universidade Federal de Lavras e ao departamento de Engenharia por me propiciar a oportunidade de realizao do mestrado. CAPES e ao CNPq pela concesso das bolsas durante o perodo de mestrado. Aos meus amigos de CEDIA, Kleber, Tampico, Nozela, Michel, Mrcio Canela, Sr. Antnio, Rodrigo, Yakut, Isis, Layza e demais amigos, pela ajuda, pelas conversas, pelos cafs na cantina e por tornar o nosso laboratrio um lugar muito bom de trabalhar. Valeu mesmo. Ao companheiro de trabalho e amigo Shan, agora Sr. Cardoso, pela parceria em todos estes anos, pelas dicas nos projetos e por me ajudar a comandar diversos trabalhos. Aos meus grandes amigos da Engenharia Agrcola, da ps em Recursos Hdricos, s meninas dos alimentos, s meninas do Matisse e todos os outros que fizeram este perodo muito mais divertido, com grandes momentos de descontrao. Cissa Zambiassi por ser uma grande amiga e mesmo longe dividir comigo as vitrias e os momentos difceis durante nosso perodo de mestrado. Agradeo, tambm, a todos os professores e tcnicos que de alguma forma estiveram presentes nesta jornada.
A todos, o meu sincero obrigado!
RESUMO Injrias provocadas em alimentos em virtude de impactos mecnicos ocorridos nas etapas da ps-colheita so um dos grandes problemas enfrentados para a indstria alimentcia. Em batatas, as perdas por danos fsicos na produo podem chegar at 40% durante as fases de beneficiamento, armazenamento, transporte e comercializao. Injrias internas, conhecidas como internal bruising, so um dos grandes responsveis pelas perdas por danos mecnicos na produo de batatas. Estas injrias internas se caracterizam pelo escurecimento da superfcie danificada por um impacto e proveniente de reaes de oxidao associadas acelerao metablica de algumas enzimas. Tcnicas que permitam mensurar e predizer se um impacto capaz de gerar uma injria interna em batatas so fundamentais para o auxlio na tomada de deciso sobre o uso de medidas preventivas do controle que possibilitar uma reduo de perdas na produo e valorizao do produto. A tcnica do biospeckle laser baseada em um fenmeno ptico de interferncia gerado a partir da interao de uma luz coerente com materiais biolgicos ou sistemas dinmicos. Por meio de mtodos de tratamento digital nos padres de interferncia gerados possvel identificar e quantificar diferentes nveis de atividades em um tecido, como tumores em clulas animais ou danos em alimentos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade da tcnica do biospeckle laser em predizer a ocorrncia de injrias internas ainda em momentos de no identificao visual do escurecimento causado em batatas aps impactos mecnicos controlados. Os padres de interferncia foram coletados a partir da configurao experimental baseada back-scattering e processados por tcnicas de abordagens nmericas e grficas. Um pndulo foi utilizado como instrumento para gerar de forma controlada os impactos nas batatas. Foram analisados os padres de atividades nas regies de desenvolvimento dos danos, em regies prximas ao local do impacto e em regies consideradas isentas de impactos localizadas em amostras saudveis. O teste de Scott-Knott foi o utilizado para a anlise estatstica dos dados. As anlises estatsticas realizadas constataram a capacidade da tcnica do biospeckle laser em predizer a ocorrncia do internal bruising em batatas a partir de 2 horas aps a ocorrncia do impacto. A anlise da comparao entre reas demonstrou a capacidade de se predizer a ocorrncia das injrias mesmo observando regies fora da rea exata do impacto. Por meio das tcnicas grficas foram gerados os mapas de atividades em diferentes estgios de desenvolvimento do dano, que ao contrrio da abordagem numrica, no apresentou os resultados esperados. Palavras-chave: Internal bruising. Impactos mecnicos. Speckle.
ABSTRACT Food damages due to mechanical impacts at post harvest different phases are one of the biggest issues faced by food industry. In potatoes, productivity decrease due to impacts and physical damages can get to 40% during processing, storage, transportation and commercialization phases. Intern injuries, or bruising, are one of the biggest factors losses at potato production due to mechanical damages. Internal bruising is the surface damage darkening due to impact and it is a result of oxidation reactions associated to metabolic activities of some enzymes. There are techniques to measure and predict if an impact will be capable to generate an intern injury at potatoes, so that they are fundamental to define about adopt preventive control methods that can provide a loss production decrease and consequently product appreciation. The biospeckle laser technique is based in an interference optical phenomenon generated of a coherent light interaction with biological materials or dynamical systems. Digital treatment methods of the interference patterns can identify and quantify different activity levels in a tissue, such as tumors at animal cells or food damages. The biospeckle laser was adopted this work to predict bruising occurrence in nonvisual moments of potato surface darkening due to controlled mechanical damages. Interference patterns were collected from an experimental configuration base on back-scattering and processed by numerical and graphical approaches. A pendulum was used as a device to create controlled impacts in potatoes samples. The activities in the regions next to local impacts, in the local damages and s well as in control samples without impacts were analyzed. ScottKnott test was utilized to analyze data statistical and it was noted that capability of biospeckle laser technique to predict bruising in potato after 2 hours from impact occurrence. Comparison analysis between areas demonstrated the capacity to predict bruising occurrence even at regions out of the impact area. Techniques such as approaches graphical allowed creating maps of activities that unlike numerical approach, did not presented good results. Keywords: Internal bruising. Mechanical Impacts. Speckle.
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Figura 2
Internal bruising em batatas ........................................................... 24 Imagem da atividade da regio imediatamente aps impacto obtidos pelos mtodos Diferenas Generalizadas (a) e Fujii (b) (Paluejo et al., 2003) ...................................................................... 25 Figura 3 Comportamento fsico do Biospeckle .............................................. 29 Figura 4 Construo do THSP: A linha central registrada em momentos sucessivos ...................................................................................... 31 Figura 5 THSPS e suas respectivas matrizes de co-ocorrncia ...................... 33 Figura 6 THSP de um morango com alta atividade (a) e de um objeto sem atividade (b)................................................................................... 36 Figura 7 Pndulo utilizado para produzir os impactos nas amostras .............. 40 Figura 8 Configurao Experimental: (a)croqui , (b) set up real.................... 41 Figura 9 Histograma gerado pelo ajuste experimental da iluminao de uma das amostras analisadas .................................................................. 48 Figura 10 Anlise Fujii para batatas usadas como testemunha (a) e para as batatas desenvolvimento do dano interno (b). A rea circulada mostra a regio exata de ocorrncia do impacto .............................. 65 Figura 11 Anlise das diferenas generalizadas para batatas usadas como testemunha (a) e para as batatas desenvolvimento do dano interno (b). A rea circulada mostra a regio exata de ocorrncia do impacto .......................................................................................... 67
LISTA DE GRFICOS
Grfico 1
Escurecimento da regio do dano. Escala: 0 (escuro total) 100 (claro total) .................................................................................. 47 Grfico 2 Comportamento mdio dos valores de momento de inrcia das amostras e regies analisadas no experimento .............................. 49 Grfico 3 Novo comportamento mdio dos valores de momento de inrcia do lote de batata saudvel, usados como testemunhas ................... 50 Grfico 4 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Regio do dano x Regio fora do dano............................ 54 Grfico 5 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Regio do dano x Testemunha ....................................... 55 Grfico 6 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Regio fora do dano x Regio fora do dano.................... 56 Grfico 7 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Amostras com danos x Testemunhas.............................. 58 Grfico 8 Modelagem matemtica do comportamento da atividade nas regies de desenvolvimento do internal bruising .......................... 61 Grfico 9 Modelagem matemtica do comportamento da atividade fora das regies de desenvolvimento do internal bruising .......................... 62 Grfico 10 Modelagem matemtica do comportamento da atividade em batatas que desenvolveram o internal bruising ............................. 63
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Tabela 2 Tabela 3 Tabela 4 Tabela 5 Tabela 6
Tabela 7
Tabela 8 Tabela 9
Principais estimativas de perda ps-colheita em batata realizados no Brasil........................................................................................ 19 Percentual de batatas com ausncia e presena de danos superficiais e interno...................................................................... 45 Relao de peso e firmeza das amostras analisadas ........................ 45 Teste de mdias para a varivel momento de inrcia das amostras utilizadas como testemunha nos perodos de anlises ..................... 51 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia obtidos na regio de desenvolvimento do dano durante o perodo de anlise ... 52 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia obtidos na regio fora do dano em batatas que sofreram impactos durante o perodo de anlise.......................................................................... 52 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia das batatas que sofreram impactos e desenvolveram injrias internas durante o perodo de anlise.......................................................................... 59 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia das amostras utilizadas como testemunha nos perodos de anlises....... 59 Ajuste para a escala no linear do tempo de anlise........................ 64
SUMRIO
1 2 2.1 2.2 3 3.1 3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.1.4 3.2 3.3 3.4 3.4.1 3.4.2 3.4.3 3.5 3.6 4 4.1 4.2 4.3 5 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.5 5.6 5.7 6
INTRODUO ................................................................................ 13 OBJETIVOS ..................................................................................... 16 Objetivo geral ................................................................................... 16 Objetivos especficos ......................................................................... 16 REFERENCIAL TERICO ............................................................ 17 Perdas de alimentos na fase de ps-colheita..................................... 17 Aspectos gerais .................................................................................. 17 Perdas por danos mecnicos ............................................................. 19 Caracterizao das reaes qumicas causadas por danos mecnicos .......................................................................................... 22 O Intenal Bruising esmagamento celular interno ......................... 23 O uso do laser no estudo de materiais biolgicos ............................. 27 O Biospeckle Laser............................................................................ 28 Mtodos de anlise do Biospeckle Laser........................................... 30 Histria temporal dos padres do speckle ....................................... 30 Matrizes de co-ocorrncia e o momento de inrcia .......................... 31 Mtodos de Fujii e das diferenas generalizadas ............................. 34 Anlises em alimentos por meio do Biospeckle Laser ...................... 36 Anlise em frequncia do biospeckle laser........................................ 37 MATERIAIS E MTODOS ............................................................. 38 Caracterizao das amostras ............................................................ 38 Simulao dos impactos .................................................................... 39 Obteno dos dados .......................................................................... 40 RESULTADOS E DISCUSSO....................................................... 45 Caracterizao das amostras ............................................................ 45 Anlise dos histogramas gerados pela iluminao ........................... 47 Comportamento geral das amostras ................................................ 48 Anlise estatstica e comparaes das atividades nas diferentes regies ............................................................................................... 50 Capacidade de predio do desenvolvimento do bruising ............... 52 Anlise sem distino de reas ......................................................... 56 Modelagem matemtica do comportamento das batatas com danos ................................................................................................. 60 Mapas de intensidade anlise grfica ............................................ 64 CONCLUSES................................................................................. 68 REFERNCIAS ............................................................................... 69
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1 INTRODUO
Segundo o relatrio da Organizao das Naes Unidas para Agricultura e Alimentao (FAO) em 2009, a populao mundial deve passar de 6,8 bilhes a 9,1 bilhes em 2050. Estima-se que at 25% da produo mundial de alimentos pode ser perdida em 2050 em razo do impacto conjunto das mudanas climticas, da degradao do solo, da escassez de gua e das pragas. Alm do mais, o desperdcio e a reduo da qualidade dos produtos colhidos so aumentados durante a fase de ps-colheita em funo de fatores como a colheita em estdio de maturao inadequado e poucos cuidados com o manuseio nas operaes de embalagem, transporte e armazenagem. A perda de qualidade e conseqente aumento no desperdcio de produtos perecveis, so acumulativos a cada incidente durante todo o processo de manuseio. Tcnicas que possibilitem o aumento da produo e da produtividade agrcola, e que auxiliem a indstria no sentido de reduzir as perdas de alimentos, durante as etapas de produo, tornam-se fundamentais na dinmica do mundo atual. A perda de alimentados est relacionada diretamente com a reduo de disponibilidade de alimentos para consumo em razo da depreciao da qualidade dos produtos, pela deteriorao, causada por fatores patolgicos, fisiolgicos ou mecnicos como impactos, cortes, rachaduras e compresses. Como exemplo de perdas por danos mecnicos pode-se citar a cultura da batata (Solanum tuberosum). A batata uma das hortalias de grande expresso econmica no Brasil, sendo depois do trigo, arroz e milho, a maior em produo. As perdas em decorrncia dos impactos e dos danos fsicos em batatas podem chegar at 40% na ps-colheita e ocorrem durante o manuseio dos tubrculos nas fases de seleo, embalagem, transporte e exposio para o consumo. Dentre as leses ocorridas em batatas em razo de impactos fsicos, as injrias provocadas pelo esmagamento celular interno que resultam em um
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escurecimento na regio do impacto so uma das principais responsveis pela elevada porcentagem de perdas da cultura desde o campo at a mesa. Estes danos internos, tambm, so denominados pelo termo ingls internal bruising e so provocados por um impacto fsico, como uma queda, coliso ou impactos durante a colheita e transporte. A regio de ocorrncia do impacto, mesmo sem nenhum dano aparentemente visvel, desenvolve uma ruptura celular interna nos tecidos que, por sua vez, torna-se opaca e de colorao escura, acarretando a queda da qualidade nutricional e desvalorizao do produto. Tcnicas que permitam a identificao e monitoramento de danos no visveis, como o internal bruising em seu primeiro estgio e que gerem meios capazes de seleo dos tubrculos so fundamentais para minimizar perdas e reduzir custos da produo. A utilizao de anlise de imagens por meio de Tomografia de Ressonncia Magntica, por exemplo, uma das formas de avaliar o grau de deteriorao e desenvolvimento de danos atualmente. Estudos relatam o uso de espectroscopia como uma ferramenta para determinao da estrutura de alimentos, sendo utilizada em pesquisas com sensores on-line para o monitoramento do processo de produo traando um perfil do produto relacionado sua mudana de qualidade. O uso de esferas instrumentadas, tambm, um mtodo bastante utilizado para a medio do estresse sofrido pelos alimentos durante os processos na ps-colheita. Os mtodos citados tm como objetivo identificar e monitorar a ocorrncia de injrias nos produtos e buscam predizer em tempo real se um impacto ocorrido em um dado instante poder ou no acarretar na reduo qualidade destes produtos, em funo do escurecimento na regio do dano. Esta informao de suma importncia para a indstria alimentcia, pois, uma vez que se tem informao sobre a tendncia de um alimento em relao ao desenvolvimento do escurecimento, pode-se prevenir ou retardar a ao das enzimas responsveis por este fato, reduzindo, assim, a chance de depreciao do produto. O armazenamento em atmosfera modificada,
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o controle da temperatura e o uso de agentes qumicos so os principais mtodos utilizados para a preveno deste escurecimento. Desta forma, tcnicas que permitam uma anlise preditiva eficiente sobre um impacto sofrido por um produto perecvel tornam-se fundamentais no processo de ps-colheita, proporcionando uma reduo no desperdcio de produtos durante esta fase e o aumento da qualidade dos produtos que chegam at o consumidor. A tcnica ptica conhecida como biospeckle laser, aparece como uma alternativa na anlise do desenvolvimento de danos em alimentos por se tratar de um mtodo no invasivo, no destrutivo, de grande preciso e que permite inferir sobre as alteraes metablicas em alimentos por diversos fatores, como a ocorrncia de impactos mecnicos. A Tcnica Biospeckle laser, tambm conhecida como Speckle Dinmico, baseia-se em um fenmeno ptico gerado a partir da interao de uma luz coerente, como a do laser, com materiais biolgicos ou sistemas dinmicos. O fenmeno ptico gerado um padro de interferncia aparentemente aleatrio, todavia relacionado diretamente com os espalhadores da luz presentes no material iluminado e este padro se modifica com a mudana de posio dos espalhadores da luz presentes, por exemplo, no tecido vegetal. Por meio de mtodos de tratamento digital dos padres de interferncia gerados pelos diversos processos biolgicos possvel identificar e quantificar diferentes nveis de atividades em um tecido. O biospeckle vem sendo cada vez mais aplicado como um mtodo de quantificao da atividade em materiais biolgicos como sementes, fungos, smen animal e determinao de danos em frutos. Alm de tcnicas de processamento de imagens e tratamento estatstico no domnio do tempo, os dados provenientes do biospeckle permitem uma anlise no domnio da frequncia. Desta forma possvel filtrar os sinais das histrias temporais do biospeckle e isolar em bandas de frequncias fenmenos de padres de interferncias relacionados aos processos biolgicos em monitoramento.
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2 OBJETIVOS
2.1 Objetivo geral Avaliar a capacidade da tcnica do Biospeckle Laser em predizer a ocorrncia do internal bruising em batatas aps impactos mecnicos controlados, nos primeiros momentos de desenvolvimento do dano, onde no h manifestao aparente do escurecimento.
2.2 Objetivos especficos
a) monitorar e identificar reas de injrias internas, perceptveis ou no, em batatas comerciais; b) acompanhar, por meio do Biospeckle Laser, as alteraes metablicas provocadas por um impacto mecnico nas primeiras horas aps o impacto provocado; c) descrever, por meio de modelos matemticos, as alteraes de atividade ocorridas durante o processo de desenvolvimento de injrias internas (internal bruising); d) comparar as atividades ocorridas na regio de impacto e em uma regio prxima da rea de injria em diversos instantes.
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3 REFERENCIAL TERICO
3.1 Perdas de alimentos na fase de ps-colheita
3.1.1 Aspectos gerais Segundo um documento publicado pela Organizao das Naes Unidas para Agricultura e Alimentao FAO (2009) no frum denominado How to Feed the World 2050, realizado em setembro de 2009 na Itlia, at 2050 haver um tero a mais de pessoas para alimentar no mundo (2 bilhes e 300 milhes de pessoas) e a produo de alimentos ter que aumentar em 70%. O documento afirma:
necessrio produzir 70 por cento a mais de alimentos para 2,3 bilhes de pessoas que sero acrescentadas populao mundial at 2050, ao mesmo tempo em que se combate a fome e a pobreza, buscar-se usar de forma mais eficiente os escassos recursos naturais e adaptar-se s mudanas climticas, sero os principais desafios da agricultura mundial nas prximas dcadas (FAO, 2009, p. 2).
Algumas alternativas para a soluo deste problema seriam o aumento na produo mundial de alimentos, acompanhado por uma distribuio justa da produo e a implantao de polticas que permitam a limitao do crescimento populacional. Essas alternativas, no entanto, so precedidas de altos investimentos financeiros, alm de serem medidas de longo prazo. Uma das alternativas de curto prazo seria a reduo nas perdas que ocorrem nas etapas da produo dos alimentos. A reduo de perdas dos alimentos pode apresentar vantagens como o aumento da disponibilidade de alimentos, sem o aumento de reas de cultivo e a reduo da energia gasta para produo. Para que os alimentos possam chegar ao alcance de todas as pessoas necessrio no apenas
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aumentar a produo global, mas tambm garantir que os alimentos sejam distribudos de forma justa para toda a populao mundial (MARTINS; FARIAS, 2002). Capucho (2010) relata em pesquisa realizada em supermercados no estado de So Paulo que so gerados cerca de 6,5 toneladas de perdas mensalmente, o que equivale a cerca de 217 quilogramas de perdas dirias por supermercado. Os maiores responsveis pelas perdas, em termos de massa, so os legumes juntamente com as batatas e cebolas com 51,5%. Em seguida esto as perdas das frutas, com 26,2% e dos folhosos com 22,2%. Em batatas as perdas representam um desafio para o setor produtivo, uma vez que os danos afetam o aceite do produto tanto pela indstria como pelo consumidor. Esta rejeio acarreta na reduo do preo do produto e no descarte de parte da produo. Ferreira e Henrique Netto (2007) demonstram em seus estudos que as perdas decorrentes do ferimento fsico, tais como cortes e injrias, podem chegar at a 40% da produo bruta A maior parte do custo dos danos representa prejuzos ao produtor na forma de preos mais baixos e restrio dos compradores. A Tabela 1 apresenta os dados das principais estimativas de perda ps-colheita em batata realizados no Brasil. O Estudo foi publicado pela Embrapa em 2004 por meio de uma circular tcnica (HENZ; BRUNE, 2004).
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Tabela 1 Principais estimativas de perda ps-colheita em batata realizadas no Brasil (HENZ; BRUNE, 2004)
3.1.2 Perdas por danos mecnicos A identificao da origem dos fatores causadores de perdas de alimentos tem como objetivo auxiliar instituies de pesquisas e de extenso rural para que possam atuar de forma mais direcionada objetivando a reduo dos ndices de perda na cadeia de produo (CHITARRA; CHITARRA, 2005). A dificuldade est em distinguir o alimento danificado do alimento perdido. A perda se refere ao desaparecimento do alimento que deve ser medido diretamente em termos econmicos, qualitativos e quantitativos. J o termo dano reflete a deteriorao aparente do alimento, no podendo ser medido subjetivamente, visto que a aceitao ou rejeio do alimento danificado influenciada por fatores econmicos e culturais (VILAS BOAS, 2002). Mtodos de avaliao e
interpretao de perdas de diferentes produtos perecveis so vistos em diversos estudos com a finalidade de monitorar a qualidade dos produtos e colaborar na tomada de medidas necessrias para se aumentar o tempo de consumo do alimento sem perder valores comerciais e nutricionais. Baritelle et al. (2000), por exemplo, descreve um sistema para classificar injrias de batatas. Cada tipo
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de dano descrita, ilustrada, e relacionadas condio de deteriorao do tubrculo. Essas informaes so utilizadas por produtores,
processadores, operadores de armazenamento e empacotadores para tomar decises sobre como ajustar fatores modificveis tais como temperatura, nvel de hidratao e velocidade de impacto para reduzir o impacto de defeitos relacionados com a colheita e manuseio de batatas. Outro exemplo o estudo proposto por Qing, Ji e Zude (2008), onde a maturao de mas foi monitorada por meio do espalhamento da luz laser com o intuito de inferir sobre a qualidade dos frutos, quanto ao teor de slidos solveis e firmeza das polpas. Foram coletadas imagens de diferentes regies do fruto iluminados por diferentes intensidades de luz. Assim, realizou-se uma anlise espectral em diferentes bandas de frequncias que permitiu avaliar em frequncia os slidos solveis e firmeza da polpa de mas cultivadas sob diferentes condies ambientais propiciando informaes teis para o controle da qualidade das frutas na produo. Em batatas, a conservao aps a colheita depender em grande parte da maturidade fisiolgica do tubrculo. A periderme do tubrculo imaturo pouco resistente e as paredes celulares, so mais finas que em um tubrculo maduro. Isso pode aumentar a incidncia de danos nos tubrculos colhidos imaturos (FERREIRA; HENRIQUE NETTO, 2007; FINGER; FONTES, 1999). Aps a retirada dos tubrculos do campo, a quantidade total do produto reduzida at chegar ao consumidor. Ocorrem perdas na prpria colheita, no beneficiamento, no transporte, nos pontos de venda e, tambm, no consumo. Durante a secagem inicial em campo, j ocorre perda de peso. Em seguida, no beneficiamento, ocorre o descarte de solo aderido aos tubrculos, assim como o descarte da batata no-comercial, ou seja, tubrculos com defeitos graves detectados visualmente e eliminados manualmente. A lavagem dos tubrculos, apesar de ser prtica predominante, questionvel, pois pode acentuar os seus defeitos e,
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ainda, torn-los mais suscetveis deteriorao, alm de aumentar a porcentagem de descarte (FERREIRA; HENRIQUE NETTO, 2007). Henz e Brune (2004) relatam que as perdas ps-colheita para batata avaliadas em estudo em Braslia (DF) foram 10,3% para a batata no lavada e 93% para a batata lavada, constatando, portanto que o processo de lavagem aumenta a incidncia de deteriorao. As alteraes na batata durante o processo da colheita at o consumo so, principalmente, do tipo mecnica, fisiolgica ou patolgica. Os danos fisiolgicos e patolgicos se do principalmente, na fase de produo, transporte e exposio, enquanto que os danos mecnicos ocorrem durante praticamente, em todas as etapas de manuseio dos tubrculos (colheita, seleo, embalagem, transporte e exposio) e so provocados em razo de impactos, compresso, vibrao e cortes sendo relacionadas com alteraes fisiolgicas, metablicas, de aroma, sabor e qualidade dos produtos tais como mas, pepinos, batatas e tomates (MORETTI; SARGENT, 2000). O dano mecnico pode ser ocasionado por uma pequena fora, presso, e por impacto em uma superfcie dura (MOHSENIN, 1970). A incidncia e a severidade da desordem fisiolgica dependem da energia e do nmero de impactos e do estdio de vida do alimento. Como so acumulativas, durante as prticas de manuseio ps-colheita, as vrias etapas de manuseio do produto, desde o campo at o consumidor, devem ser cuidadosamente coordenadas e integradas para maximizar a qualidade do produto (ZEEBROECK et al., 2008). Em geral, danos por impacto na pscolheita podem ocorrer quando os frutos recebem quedas altas ou colidem com superfcies no protegidas ou com outros frutos. A severidade dos danos causados por impactos em uma linha de classificao, por exemplo, pode ser reduzida diminuindo-se a altura de elevao de queda entre as etapas ou por meio da utilizao de protetores, os quais podem dissipar a fora de impacto. As leses externas provocadas por impactos caracterizam-se pela descolorao da
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superfcie danificada, causada pelo aumento da pigmentao produzida, proporcionando o escurecimento na regio do impacto (EXPIDO; BUENO; CANNEYT, 2005).
3.1.3 Caracterizao das reaes qumicas causadas por danos mecnicos Os estresses mecnicos causados pelo processamento dos alimentos aumentam a taxa de reaes bioqumicas responsveis pelas mudanas na cor, sabor, textura e qualidade nutricional dos produtos (ROCHA; COULON; MORAIS, 2003). Um dos principais desafios ao processamento de batatas a grande susceptibilidade dos tubrculos ao escurecimento, oriundo de reaes catalisadas por enzimas, sendo as mais importantes as polifenoloxidases (PPO). O escurecimento iniciado pela oxidao de compostos fenlicos pela PPO. O produto inicial da oxidao a quinona, que rapidamente se condensa, formando pigmentos escuros insolveis, denominados melaninas, ou reage no enzimaticamente com outros compostos fenlicos, aminocidos e protenas, tambm formando a melanina (ESEAGHBEYGI; BESHARATI, 2009). Os fatores mais importantes na evoluo da taxa do escurecimento enzimtico provocado pela PPO so a concentrao de PPO ativa e de compostos fenlicos, o pH, a temperatura e o oxignio disponvel no tecido. A enzima peroxidase (POD) tambm promove a oxidao de compostos fenlicos na presena de perxido de hidrognio (DUNDFORD; STILLMAN, 1976). Vrios mtodos para prevenir o escurecimento enzimtico podem ser aplicados em batatas. Porm, a eficcia dos tratamentos, combinados ou de forma isolada, deve ser verificada. A aplicao de atmosfera modificada ativa ou passiva com baixas concentraes de O2 e altas concentraes de CO2 contribuem para o controle do escurecimento e outros processos degradativos do
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produto, uma vez que reduz a velocidade dos processos aerbicos diminui a disponibilidade de O2 para a atividade da PPO e da POD (FERNANDES et al., 2010; GUNES; LEE, 1997). Nveis reduzidos de O2 reduzem a taxa respiratria de frutas e hortalias frescas na proporo da concentrao de O2, o que se deve, provavelmente, reduo da atividade de oxidases, tais como polifenoloxidases, cido ascrbico oxidase e cido gliclico oxidase com baixa afinidade com o O2, em benefcio da citocromo oxidase, que tem alta afinidade com o O2 (KADER, 1986; PINELLI et al., 2005). Alm da atmosfera modificada, o controle da temperatura, a utilizao de agentes qumicos, o uso da irradiao e modificaes genticas so metodologias aplicadas na preveno do escurecimento enzimtico e detalhadas por Silva, Rosa e Vilas Boas (2009) e por Fernandes et al. (2010) onde so realizadas revises de literatura sobre o controle do escurecimento enzimtico.
3.1.4 O Intenal Bruising esmagamento celular interno
Os impactos fsicos geradores de danos mecnicos associados com o amadurecimento irregular dos frutos conduzem ao desenvolvimento de desordens fisiolgicas internas em alimentos. O fruto ou tubrculo, submetido a impactos, mesmo sem nenhum dano aparente, desenvolve ruptura celular interna nos tecidos, como apresentado na Figura 1. Esses tecidos, por sua vez, tornam-se opacos e colapsam, apresentando uma colorao amarelo esverdeada. Esses danos so conhecidos como internal bruising (CHITARRA; CHITARRA, 2005).
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Figura 1 Internal bruising em batatas
Em tubrculos, as injrias internas so as grandes responsveis pelas perdas, visto que os produtos devem possuir uma boa textura, cor, ausncia de defeitos e estar em ponto de maturao adequado para que no ocorra a
depreciao comercial do produto (MITSUHASHI-GONZALEZ et al., 2010; SILVA et al., 2008). A ocorrncia do bruinsing leva produo de melanina, resultando em um pigmento escuro na sub superficie do tubrculo. Este processo iniciado quando um tubrculo sofre um impacto que causa ruptura das membranas celulares. As membranas danificadas permitem a oxidao enzimtica de fenis que iro provocar a produo da melanina, podendo chegar at a subsuperfcie do tubrculo (FREITAS et al., 2005). Diversos estudos aparecem com a finalidade de identificar a existncia do bruising em alimentos, porm poucos estudos apontam no sentido de predizer se um determinado impacto resultar na formao de um injria interna. Blahovec, Mare e Paprtein (2004), procuram determinar por meio de diferentes ensaios dinmicos a sensibilidade a impactos em pras. Bentini, Caprara e Martinelli (2006) estudaram os efeitos dos impactos gerados no processo de colheita das batatas em relao aos danos produzidos. Os resultados demonstram a influncia da velocidade de avano da colhedora de batatas e da umidade do solo sobre a intensidade do impacto e os danos sofridos
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pelos tubrculos. Colheitas realizadas no solo seco propiciaram impactos de maior intensidade e, consequentemente, maiores danos aos tubrculos. Pajuelo et al. (2003) utilizaram a tcnica conhecida como do biospeckle para o estudo de danos em mas causado por impacto mecnico. Os resultados numricos da evoluo do biospeckle se mostraram consistentes e demonstraram variao na atividade em virtude das mudanas internas causadas por injrias. No mesmo trabalho ainda foi realizada uma anlise da imagem da atividade onde a regio machucada pode ser identificada por meio de tcnicas grficas (Figura 2).
Figura 2 Imagem da atividade da regio imediatamente aps impacto obtidos pelos mtodos Diferenas Generalizadas (a) e Fujii (b) (PAJUELO et al., 2003) Uma vez que se capaz de prever se um impacto mecnico poder acarretar em um dano fsico ao alimento, podem-se aplicar metodologias de preveno do escurecimento, minimizando o efeito do impacto em um lote de um determinado produto. Atualmente a utilizao de esferas instrumentadas nas etapas de colheita, beneficiamento e transporte, vem sendo uma das principais ferramentas para dimensionar a magnitude das foras e energias de impactos nessas etapas e relacion-las com os danos provocados. Esferas instrumentas so equipamentos constitudos de um registrador de acelerao que permite a
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avaliao da magnitude de impactos (FERREIRA; HENRIQUE NETTO, 2007). Alm de Bentini, Caprara e Martinelli (2006) que fez uso das esferas instrumentadas para promover estudos sobre os impactos provocados durante a fase de colheita da batata, pode-se citar, tambm, o trabalho realizado por Ferreira e Henrique Netto (2007) que, por meio das esferas, determinaram que os pontos criticos de impactos em uma linha de beneficamento de batatas so obtidos na entrada do lavador e durante a etapa de ensaque do produto. O uso das esferas instrumentadas porm proporciona apenas uma dimenso de magnitude do impacto, sendo utilizadas principalemente como auxiliar para o dimensionamento de equipamentos relacionadas com as etapas de colheita e pscolheita A relao da intensidade do impacto em um dado instante e sua
consequncia futura para o produto, ainda, pouco abordada estes trabalhos. Outra tcnica utilizada em estudos do comportamento fsico qumico dos alimentos a espectroscopia infravermelho. Nos ltimos anos, a espectroscopia no infravermelho se tornou ferramenta analtica que pode ser usada para estudar a vida de prateleira de alimentos, dado que a absoro nos intervalos espectrais pode ser relacionada com os principais componentes qumicos dos alimentos, tais como protenas, carboidratos, gorduras e gua. Em particular, na regio do infravermelho prximo (entre 750 e 2500 nm), a vibrao e a combinao overtones das bandas fundamentais, como O-H, C-H e N-H so os principais fenmenos (WILLIANS; NORRIS, 2001), enquanto que as medidas em bandas mais intermedirias fornecem informaes sobre as freqncias de ligaes qumicas em grupos funcionais (COATES, 2000). A espectroscopia se apresenta como um mtodo rpido e de baixo custo para determinar a estrutura de alimentos e tm sido fundamental em pesquisas com sensores on-line para o monitoramento do processo de produo (NICOLA et al., 2007; OZAKI; MCCLURE; CHRISTY, 2006). Todavia, poucos estudos tm abordado a
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aplicao da espectroscopia em estudos de vida til de frutas e hortalias e injrias de alimentos. Como observado, atualmente, os mtodos mais utilizados no estudo do controle de qualidade dos alimentos pouco relaciona os impactos e efeitos sofridos por alimentos durante as etapas de colheita e ps-colheita com as condies finais que estes produtos chegam ao consumidor. Pesquisas que
permitam monitorar e predizer o efeito de um impacto mecnico no desenvolvimento e surgimento de um dano, seja interno ou aparente, so importantes para minimizar perdas e reduzir custos na produo. Na agricultura, o uso da tcnica conhecida como biospeckle laser ganha cada vez mais destaque e aplicaes visto que esta tcnica possibilita a quantificao da atividade em materiais biolgicos (RABAL; BRAGA, 2008). Os conceitos e a aplicabilidade da tcnica do biospeckle laser ser discutida nos tpicos a seguir.
3.2 O uso do laser no estudo de materiais biolgicos
Uma das reas da aplicao das tcnicas pticas em estudos com materiais biolgicos pode ser atribuda ao uso do laser e seus fenmenos. A palavra laser uma sigla oriunda do termo ingls, Light Amplification by the Stimulated Emission Radiation (Amplificao da Luz por Emisso Estimulada de Radiao). O laser consiste de uma fonte de luz com caractersticas nicas como a quase-monocromaticidade e a coerncia, que segundo Bagnato (2001), essas propriedades especiais tornam o laser um excelente instrumento de uso cientfico e tecnolgico. A combinao da aplicao da luz de um laser com sistemas de aquisio e processamento digital de imagens se constituiu ao longo dos anos em uma importante ferramenta aplicada a diversos setores. Nas cincias agrrias, muitas aplicaes do laser j esto relatadas na literatura, em particular aquelas relacionadas ao seu uso para o monitoramento
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da evoluo ou da intensidade da atividade biolgica. Neste caso especfico, o monitoramento da mudana de posio dos elementos dispersores da luz de um laser no interior dos tecidos biolgicos conhecido como speckle laser dinmico, ou biospeckle. Esse um fenmeno que tem se apresentado como ferramenta muito sensvel para o monitoramento de pequenas mudanas em material biolgico e no biolgico (RABAL; BRAGA, 2008).
3.3 O Biospeckle Laser A tcnica baseia-se em um fenmeno ptico de interferncia que ocorre quando o feixe incide sobre uma superfcie rugosa se comparada com o comprimento de onda de um feixe laser. De acordo com conceitos apresentados por Rabal e Braga (2008), esse fenmeno bem conhecido em estudos de ptica e ocorre, quando o laser se dispersa sobre uma superfcie e que exibe algum tipo de atividade. Se o objeto difusor se move os gros individuais formados no padro de speckle tambm se movem e alteram sua forma. Isso permite supor que os padres de speckle dinmicos contm informaes sobre o movimento do objeto. A Figura 3 representa um esboo esquemtico do espalhamento aleatrio de uma luz coerente, como o laser, em uma superfcie despolida.
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Figura 3 Comportamento fsico do Biospeckle Observado ao longo do tempo, o biospeckle propicia o
monitoramento do fervilhamento dos gros que constituem o padro de interferncia. O fervilhamento monitorado permite, desta forma, a
correlao da atividade de um material com o grau de mudana do padro de interferncia que pode ser aplicado, por exemplo, na qualificao do smen animal (CARVALHO et al., 2009), na atividade de frutos durante seu amadurecimento (RABELO et al., 2005) e de bruising em frutos (PAJUELO et al., 2003). Outra aplicao do biospekcle pode ser na anlise de sementes (BRAGA et al., 2003) , ou em materiais no biolgicos como no caso da evaporao de lquidos ou secagem de pinturas (AMALVY et al., 2001). Por ser dinmico, o Biospeckle deve ser analisado com tcnicas de processamento de imagem e tratamento estatstico, uma vez que a observao visual permite apenas a identificao da existncia do fenmeno, mas no permite quantific-lo (RABAL et al., 1998).
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3.4 Mtodos de anlise do Biospeckle Laser
3.4.1 Histria temporal dos padres do speckle Uma forma de se realizar o monitoramento das flutuaes temporais do speckle consiste no acompanhamento de um ou um conjunto de pixels da imagem geradora do padro de interferncia no tempo. A anlise da histria temporal dos padres de speckle foi proposta por Oulamara, Tribillon e Duvernoy (1989) e testado por Xu, Joenathan e Khorana (1995). De acordo com este mtodo, um registro da histria temporal feito em imagem bidimensional denominada posteriormente de THSP (Time History Speckle Pattern). Essa imagem consiste na coleta de uma mesma fileira de pixels na imagem em instantes sucessivos montando uma imagem intermediria com a colocao destas linhas lado a lado. Em uma dimenso fica registrado um conjunto de pixels que correspondem distribuio espacial do padro e na outra dimenso a evoluo temporal destes pixels ao longo de instantes sucessivos. A Figura 4 exibe de forma ilustrativa o processo de construo do THSP.
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Figura 4 Construo do THSP: A linha central registrada em momentos sucessivos Na Figura 5 so apresentados dois THSPs construdos a partir de uma amostra com baixa atividade (a) e uma amostra com atividade alta (b). O padro de baixa atividade apresenta pequenas variaes, de modo que o nvel de cinza de cada pixel varia muito pouco ao longo do tempo (eixo das abscissas). Por outro lado, no padro de alta atividade percebem-se rpidas variaes nas intensidades dos pixels ao longo do tempo. Assim a simples observao do THSP permite uma anlise qualitativa da evoluo temporal da superfcie, porm, ainda faltando uma informao quantitativa.
3.4.2 Matrizes de co-ocorrncia e o momento de inrcia O mtodo das matrizes de co-ocorrncia, desenvolvido por Arizaga et al. (1999), baseado em uma tcnica de mesmo nome largamente empregada na anlise de texturas em processamento de imagens digitais (HARALICK;
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SHANMUNGAN; DINSTEIN, 1973). A matriz de co-ocorrncia computada sobre o THSP, sendo definida pela equao 1:
(1)
O valor de Nij corresponde ao nmero de vezes que o valor de intensidade i imediatamente seguido pelo valor de intensidade j na direo e sentido da evoluo temporal passando por todas as linhas ou colunas referentes dimenso espacial. A ordem da matriz quadrada relativa MCO equivale ao nmero de tons de cinza de 8 bits. Quando a superfcie esttica, isto , o THSP praticamente no apresenta variaes de intensidade ao longo do tempo, apenas a diagonal principal contm valores no nulos de ocorrncias. Por outro lado, quando o THSP apresenta grande atividade, os elementos no nulos se espalham ao redor da diagonal principal. Assim, quanto mais ativa a amostra, mais dispersos em torno da diagonal se distribuem os pontos e vice-versa. A Figura 5 apresenta THSPs com as respectivas matrizes de co-ocorrncia. A Figura 5(a) est associada a uma superfcie com baixo grau de atividade, apresentando uma pequena variao de intensidade dos pixels ao longo do tempo e, consequentemente, uma menor disperso em torno da diagonal principal. Por outro lado, a Figura 5(b) representa uma situao gerada a partir do espalhamento de luz por uma superfcie mais nativa, o que gera alta variao na intensidade dos pixels, e, consequentemente, uma maior disperso dos pontos ao redor da diagonal.
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Figura 5 THSPS e suas respectivas matrizes de co-ocorrncia Fonte: Rabelo (2000) Para a quantificao das variaes de intensidades do padro do biospeckle, utiliza-se um momento de segunda ordem, denominado Momento de Inrcia. A MOC original modificada por meio do somatrio do produto dos valores de ocorrncias pelo quadrado da diferena entre as coordenadas, que representam as distncias da diagonal principal, como apresentado na Equao 2:
(2)
A matriz MOC modificada corresponde a normalizao daquela obtida com a soma dos elementos de cada linha sendo igual a 1. A partir da matriz modificada, Arizaga et al. (1999), props quantificar a medida da disperso dos pontos em torno da diagonal por meio do clculo do Momento de Inrcia da matriz, Equao 3:
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(3)
A frmula assumida pelo ndice calculado tem analogia com o momento de inrcia conhecido na Mecnica. Esse indicador tambm anlogo funo estrutura utilizada na espectroscopia de foto-correlao. Em razo do fato do algoritmo proposto por Arizaga et al. (1999) ser de segunda ordem ocorre uma intensificao das diferenas mnimas e mximas. Baixas variaes de intensidades do pixel resultaro em uma contribuio baixa no valor do M.I. , enquanto que grandes variaes de intensidades tero altas contribuies no valor final do M.I.
3.4.3 Mtodos de Fujii e das diferenas generalizadas Entre os mtodos de rotina para se analisar graficamente o biospeckle, podemos destacar a abordagem Fujii (FUJII; ASAKURA, 1985) e das Diferenas Generalizadas (ARIZAGA et al., 2002). O mtodo de Fujii baseia-se no clculo da visibilidade (FUJII; ASAKURA, 1985) entre os pixels de imagens gravadas ao longo do tempo. O procedimento para a construo do mtodo de Fujii descrito pela Equao 4:
(4)
Em que, Ik (x,y) o valor de intensidade na posio (x,y) da imagem k.
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A partir desta equao uma nova imagem construda, e os pixels assumem no mapa final um valor prximo de zero na escala de tons de cinza em regies onde no houve alteraes de intensidade ao longo do tempo, e valores mais altos, prximos de 255, em zonas em que os pixels sofreram grandes alteraes. Dessa maneira, nas zonas de grande atividade a imagem resultante apresenta pontos claros e naquelas reas de baixa atividade os pixels apresentam pontos escuros, ou seja, o clareamento da imagem ocorre em reas onde a diferena de intensidade dos pixels menor. O mtodo de Diferenas Generalizadas uma tcnica derivada do mtodo de Fujii sem o denominador que pondera a somatria das diferenas, e com uma recursividade nas diferenas. De acordo com Arizaga et al. (2002), o que se faz, ento, realizar uma soma das diferenas de intensidade ente uma imagem e as suas subsequentes. Como resultado, obtido um clareamento dos pixels que apresentarem alteraes nas intensidades. A imagem resultante pode ser expressa pela Equao 5:
(5)
sendo k e l as imagens.
O somatrio duplo demonstra a outra diferena do mtodo de Fujii onde neste caso cada imagem comparada com todas as outras, exigindo maior esforo computacional.
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3.5 Anlises em alimentos por meio do Biospeckle Laser
O uso da tcnica do biospeckle no monitoramento e reconhecimento de padres de atividades em alimentos alvo de estudos por diversos autores. Alm dos trabalhos sobre danos ocorridos por impactos mecnicos em mas desenvolvidos por Pajuelo et al. (2003), pode-se citar os estudos de Rabelo et al. (2005), onde se procurou avaliar as variaes fisiolgicas de laranjas, considerando as variaes temporais do biospeckle de acordo com o tempo de ps-colheita. Os experimentos realizados evidenciaram que o biospeckle em laranjas varia de acordo com o ponto amostrado, varia entre cultivares e, tambm, de acordo com o perodo ps-colheita. Outro trabalho relevante na rea de ps-colheita de alimentos refere-se ao desenvolvido por Bergkvist (1997), onde se extraiu por meio do biospeckle informaes sobre a maturidade do fruto. A Figura 6 ilustra a diferena dos padres de THSP de um morango e um objeto sem atividade.
Figura 6 THSP de um morango com alta atividade (a) e de um objeto sem atividade (b)
Fonte: Bergkvist (1997)
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3.6 Anlise em frequncia do biospeckle laser
Trabalhos como os de Cardoso et al. (2011), Nobre et al. (2009) e Passoni et al. (2005) apresentam uma srie de aplicaes da anlise em frequncia dos sinais provenientes das histrias temporais do biospeckle laser e, de forma especfica, usando a transformada de wavelets. Sendra et al. (2005), tambm, analisaram os sinais do biospeckle no domnio da frequncia por meio da aplicao de filtros digitais. Uma das vantagens da utilizao da transformada de wavelets a possibilidade de se obter informaes que relacionam o tempo de ocorrncia de um fenmeno com a frequncia (TORRENCE; COMPO, 1998).
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4 MATERIAIS E MTODOS
4.1 Caracterizao das amostras As amostras de batatas utilizadas no experimento foram obtidas na regio do municpio de Maria da F, localizado ao sul do estado de Minas Gerais, sendo da cultivar Monalisa. A regio em questo uma das maiores produtoras de batata do estado. As batatas adquiridas no passaram pelo processo de lavagem comum nas linhas de beneficiamento e foram obtidas antes de entrar no varejo para comercializao, com o intuito de evitar os danos mecnicos ocorridos nestas etapas. As amostras analisadas foram selecionadas em um universo
correspondente a meia saca ou 25 quilos de batata em um total de 148 batatas. Cada batata correspondeu a uma amostra. Para assegurar a qualidade do universo das amostras antes da execuo do experimento realizou-se uma anlise de danos superficiais e internos onde se observou de forma visual a existncia de danos superficiais e aps serem cortadas foi observada a ocorrncia de danos internos. Entenda-se por danos superficiais, injrias com hematomas, rachaduras e cortes localizados na superfcie ou sub-superficie da batata. Utilizaram-se 20% do total de amostras escolhidas de forma aleatria, como amostragem, para esta anlise. Por fim, realizou-se por meio de um penetrmetro digital um teste de firmeza em outros 20% das amostras com o intuito de garantir a homogeneidade dessa caracterstica no universo analisado. Para execuo efetiva do experimento foram escolhidas 20 amostras e 15 batatas foram submetidas a um impacto controlado antes da fase de iluminao enquanto as 5 outras amostras foram utilizadas como testemunha. Buscando uma padronizao das amostras analisadas, optou-se por selecionar dentro do universo, batatas com tamanho entre 6 a 11 centmetros no sentido do
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maior comprimento e com peso at 120 gramas. Em anlises preliminares se observou a influncia do tamanho das batatas nos resultados, sendo estes parmetros considerados ideais para a realizao deste experimento. Essas caractersticas permitiram o desenvolvimento adequado das injrias internas a partir da energia gerada pelo simulador de impacto.
4.2 Simulao dos impactos Os danos foram provocados a partir de um impacto gerado por um pndulo, composto de uma haste de 60 cm posicionada inicialmente a 90 em relao posio da amostra, e uma esfera localizada na extremidade do pndulo, como demonstrado na Figura 7. A esfera possua um peso de 180g e raio de 1 cm e foi responsvel pela promoo do impacto em um regio de aproximadamente 4 cm2 em cada amostra. O conjunto haste e esfera, constitudo de um peso total de 705g, foi solto de sua posio inicial em queda livre gerando um impacto nas batatas de aproximadamente 1,00J de energia. Este valor de energia se aproxima dos valores obtidos por Blahovec, Mare e Paprtein (2004) em experimentos utilizando o pndulo como ferramenta para a produo do impacto gerador de injrias em alimentos.
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Figura 7 Pndulo utilizado para produzir os impactos nas amostras
4.3 Obteno dos dados Uma vez provocados os impactos, foram coletadas imagens nas primeiras 6 horas em intervalos de 2horas da regio do dano e de regies perifricas ao dano, localizadas entre 3-5 cm de distncia da regio exata do escurecimento. A anlise neste perodo foi necessria para avaliar a capacidade da tcnica em detectar, nos primeiros estgios de desenvolvimento, as alteraes promovidas pelas atividades metablicas na regio do dano logo aps um impacto e, assim, desenvolver um protocolo para predizer se um determinado impacto resultar no escurecimento da regio do dano ao longo do tempo. Tambm foram coletadas imagens nas 24horas, 48 horas e 72 horas, subsequentes ao impacto gerador dos danos. Aps 72 horas foi avaliada a regio do dano para a constatao ou no do escurecimento gerado pelo bruising. Nos mesmos instantes foram coletadas imagens das testemunhas para referncia e comparao de atividades de reas sem dano, reas com dano e reas perifricas ao dano. A mesma anlise foi repetida, porm, analisando toda a imagem gerada pelo biospeckle, sem distino de regies. Para captura das imagens utilizou-se uma cmera CCD de 640 por 480 pixels. A luz coerente utilizada foi um laser de HeNe de 36 mW. Filtros e um
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conjunto de lentes foram usados para a obteno de uma iluminao de melhor qualidade e espalhada por uma maior rea sobre a batata. A configurao experimental utilizada foi a denominada back-scattering, que observa o retorno da luz aps incidir na amostra. Na Figura 8 demonstra-se a disposio da configurao experimental utilizada. As amostras foram colocadas em suportes fixos que permitiram uma variao mnima no ponto de iluminao, sendo coletadas, portanto, imagens da mesma regio da batata em todos os instantes de anlise.
Figura 8 Configurao experimental: (a) croqui (b) set up real
Em cada sesso de iluminao foram coletadas 128 imagens em 8 bits relativas aos padres de biospeckle em intervalos de 0,08s. As frequncias analisadas esto limitadas pela taxa de amostragem conduzida nos trabalhos estando em um intervalo de 0 at 6,25 Hz. Para a anlise da decomposio em frequncia este intervalo foi dividido em 25 bandas durante a utilizao da transformada de wavelets. Os conjuntos de imagens foram processados gerando imagens de referncia com a utilizao dos mtodos de Fujii e Diferenas Generalizadas (DG). A transformada de wavelets foi aplicada nos padres de interferncias permitindo uma filtragem e reconstruo das bandas de frequncias. Assim, foi
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avaliado a capacidade das tcnicas grficas em auxiliar no monitoramento e desenvolvimento de danos internos em batatas.
Anlise pelo momento de inrcia A anlise por meio do momento de inrcia foi utilizada para a avaliao da atividade em regies com e sem danos, durante o processo de desenvolvimento do bruising e em regies saudveis localizadas em amostras usadas como testemunhas. comum no estudo da bioestatstica, que comportamentos em materiais biolgicos apresentem mdias aritmticas aproximadas e, ao mesmo tempo, possuam valores que se distribuem de maneiras completamente diferentes em relao a ela (BASTOS; DUQUIA, 2007), como o caso observado no do desenvolvimento de injurias internas em batatas. A normalizao uma tcnica formal que examina os dados e os agrupa de forma que minimize o impacto dessas variaes no funcionamento do sistema (CALDEIRA, 2003). Desta forma, como tratamento inicial aos dados obtidos foi utilizada uma normalizao nos valores originais do momento de inrcia com o intuito de minimizar o efeito da varincia nos comportamentos dos valores obtidos de cada amostra. A normalizao foi realizada de acordo com a equao 6:
(6)
em que VR n o valor real do momento de inrcia em um dado instante, VR antes o valor real do momento de inrcia antes da ocorrncia do impacto e VN o valor correspondente normalizado. Desta forma, monitorou-se a atividade ocorrida nestas reas durante o perodo do experimento, obtendo as informaes necessrias para avaliar a capacidade da tcnica em fornecer padres que indiquem se um determinado
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impacto pode ou no gerar uma injria interna na batata. Os resultados permitiram observar e comparar o comportamento distinto entre essas regies. Aps a normalizao, foi aplicado o teste de Scott-Knott (SCOTT; KNOTT, 1974) para um nvel de significncia de 5% com o objetivo de observar estatisticamente a diferena dos valores de momento de inrcia entre regies e ao longo do perodo de anlise. O teste de Scott- Knott indicado para anlises univariadas, ou seja, quando se avalia apenas uma varivel, que neste caso se refere ao momento de inrcia. Alm do mais, o teste de Scott- Knott no permite a ambiguidade entre tratamentos, o que normalmente dificulta a interpretao dos resultados (SILVA, 2007). Utilizou-se um delineamento inteiramente casualisado (DIC), sendo 8 tratamentos correspondentes aos intervalos para a aquisio de imagens, 15 repeties para as amostras que sofreram impactos e 5 repeties para as testemunhas usadas no experimento.
Descrio de modelos matemticos Foram utilizadas regresses polinomiais para o desenvolvimento de modelos matemticos com o objetivo de descrever numericamente o comportamento da atividade durante o desenvolvimento do dano, tanto na regio do dano, quanto em regies perifricas a ele.
Anlise complementar Por fim, foi realizada uma anlise das batatas com o equipamento conhecido como colormetro, que permitiu acompanhar a variao de intensidade de cor na regio onde foi provocado o impacto nos instantes de iluminao. Para esta anlise provocou-se um impacto de dimenso semelhante ao promovido na anlise do biospeckle em 40 amostras A cada intervalo de iluminao, 5 amostras foram selecionadas aleatoriamente dentre as 40 amostras
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iniciais, e imediatamente cortadas na regio do dano para a realizao da leitura. O colormetro utiliza uma escala de 0 a 100 para as variaes de cinza, segundo o sistema preconizado pelo CIE (Comisso Internationale de IEclaraige), em que 0 considerado totalmente escuro e 100 considerado totalmente claro, permitindo um acompanhamento do escurecimento da regio de impacto.
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5 RESULTADOS E DISCUSSO
5.1 Caracterizao das amostras Por meio de lotes de amostragens procurou-se caracterizar o estado de qualidade das amostras antes do experimento A Tabela 2 demonstra as quantidades em percentual de batatas com dano e sem dano antes da promoo do impacto e anlise do biospeckle. Danos superficiais e internos podem estar presentes na mesma amostra. Os resultados obtidos para o universo amostral do experimento esto de acordo com os apresentados por Ferreira e Henrique Netto (2007) e Jobling (2000), onde mencionado que as perdas em decorrncia de ferimentos mecnicos podem chegar at 40% da produo.
Tabela 2 Percentual de batatas com ausncia e presena de danos superficiais e interno. Foram utilizadas 30 batatas para a amostragem. Presena de Danos Internos Presena de Danos Ausncia de (bruising e oxidaes Superficiais (injrias, Danos provocadas por cortes e rachaduras e cortes) rachaduras) 63,33% 36,67% 6,67 % Os valores em relao ao peso e firmeza ou resistncia a presso no universo de amostras so apresentados na Tabela 3. Os resultados foram utilizados para padronizao das amostras usadas durante o experimento.
Tabela 3 Relao de peso e firmeza das amostras analisadas Resistncia Presso (Kgf) Variao no Lote de Amostragem 4,00 4,75 (10% do nmero total de amostras) Mdia no Lote de Amostragem 4,33 (10% do nmero total de amostras)
Peso (g) 70 - 135 108,55
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Ainda como parte da caracterizao da amostra, 72 horas aps ocorrncia dos impactos, todas as amostras utilizadas no experimento apresentaram o internal bruising em estgio desenvolvido em sua polpa interna. O fato comprova a eficincia da metodologia utilizada para a produo dos danos, visto que a energia de impacto produzida foi capaz de provocar danos internos em batatas cujo peso e a resistncia presso estejam dentro dos limites apresentados na Tabela 3. No Grfico 1 so apresentados os resultados obtidos por meio da anlise com o Colormetro, onde foi possvel observar a variao do escurecimento na regio de impacto. Observou-se que, logo aps o impacto, a regio do dano sofre um clareamento at o instante de 2 horas. O clareamento pode estar atribudo oxidao ocorrida decorrente do rompimento das membranas durante o impacto (FERNANDES et al., 2010; JOBLING, 2000). A partir de 4 horas aps o impacto, registrou-se o escurecimento na regio do dano, provocado pela produo de melanina resultante das reaes enzimticas em funo do contato direto com o oxignio. O aumento do escurecimento na regio do dano foi percebido at a anlise realizada 72 horas, aps o impacto, sendo que de 24h 48horas observou-se o maior aumento na incidncia do escurecimento.
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ANLISE COLORMETRO
Escala de Escurecimento 80 70 60 50 40 antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h Tempo (Horas) Escurecimento da regio de impacto
Grfico 1 Escurecimento da regio do dano. Escala: 0 (escuro total) 100 (claro total) 5.2 Anlise dos histogramas gerados pela iluminao O histograma de uma imagem digital com nveis de cinzas no intervalo [0, 255] fornece uma descrio global da aparncia de uma imagem (GONZALEZ; WOODS, 2008) e garante a qualidade da imagem a ser analisada. Os histogramas das imagens provenientes do biospeckle de todas as amostras analisadas foram verificados antes do inicio do processo de iluminao com o intuito de ajustar, da melhor forma possvel, a configurao experimental. O objetivo do ajuste foi evitar perdas por escurecimento ou por saturao (abaixo de 0 e acima de 255 na escala de cinza, respectivamente). Todas as imagens utilizadas no experimento apresentaram histogramas (em ANEXO) que revelam boa qualidade para a aplicao dos mtodos de anlises do biospeckle como o apresentado na Figura 9.
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Figura 9 Histograma gerado pelo ajuste experimental da iluminao de uma das amostras analisadas 5.3 Comportamento geral das amostras O Grfico 2 apresenta o comportamento mdio das testemunhas (amostras saudveis que no sofreram impactos) e das amostras que foram submetidas a um impacto. O comportamento mdio foi obtido pelo clculo das mdias dos valores de momento de inrcia das amostras nos perodos de anlise. O comportamento da regio exata do dano, local do escurecimento enzimtico, e o comportamento das regies fora da rea de desenvolvimento do dano foram analisados individualmente. Observou-se que as amostras que sofreram impactos tiveram um comportamento com queda ao longo do tempo, enquanto que o comportamento das testemunhas se manteve em uma faixa constante de atuao do ponto de vista da atividade medida pelo biospeckle. O pico de atividade na regio do dano, imediatamente aps o impacto (0 h), explicado pela intensa entrada de oxignio ocorrida em virtude da quebra das membranas celulares na regio (FERNANDES et al., 2010; JOBLING, 2000). Entre 2h e 24h o que ocorre, ento, a ao das reaes provocadas pelo contato do oxignio combinado com o aumento do metabolismo das enzimas peroxidase e polifenolxidase que so responsveis pelo escurecimento da regio. Este
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escurecimento provocado pelas enzimas a resposta s injrias fsicas sofridas que resultam na oxidao da regio do dano (SILVA; ROSA; VILAS BOAS, 2009; VILAS BOAS, 2002). A queda de atividade aps 24 horas do impacto pode ser justificada pela reduo no metabolismo das enzimas e pela oxidao avanada na regio de impacto, o que leva a regio a ficar opaca (CHITARRA; CHITARRA, 2005).
Momento de Inrcia - Comportamento Mdio
1,30 1,20
Normalizao (M.I)
1,10 1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tem po (horas) Testemunha Regio do dano Regio fora do dano
Grfico 2 Comportamento mdio dos valores de momento de inrcia das amostras e regies analisadas no experimento Por apresentar um comportamento destoado das demais e influenciar de forma significativa no comportamento mdio das batatas saudveis, optou-se por eliminar a curva de atividade do momento de inrcia de uma das amostras utilizadas como testemunha. A justificativa da excluso se baseia no fato de que a amostra foi escolhida de forma aleatria, e, portanto, pode estar inserida dentro da margem de 40% da produo que terminam os processos de ps-colheita com algum tipo de ferimentos fsicos, internos ou aparentes (FERREIRA; HENRIQUE NETTO, 2005; JOBLING, 2000). No Grfico 3 demonstrado o
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novo comportamento mdio das testemunhas aps excluso da amostra destoante. As anlises estatsticas subsequentes foram baseadas neste comportamento mdio para os trs casos analisados (testemunhas, regio do dano e regio fora do dano).
Momento de Inrcia - Comportamento Mdio
1,3 1,2
Normalizao (M.I.)
1,1 1 0,9 0,8 0,7 0,6 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h

Tem po (horas) Testemunha Regio do dano Regio fora do dano
Grfico 3 Novo comportamento mdio dos valores de momento de inrcia do lote de batata saudvel, usados como testemunhas 5.4 Anlise estatstica e comparaes das atividades nas diferentes regies A Tabela 4 apresenta os resultados para o comportamento das testemunhas ao longo do perodo de realizao do experimento. Observa-se que os valores de momento de inrcia no se diferem nos instantes de anlise, fato que comprova o comportamento constante das atividades na regio analisada das testemunhas ao longo de todo experimento, sendo este lote considerado ideal para a utilizao como referncia de batatas saudveis.
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Tabela 4 Teste de mdias para a varivel momento de inrcia das amostras utilizadas como testemunha nos perodos de anlises
Os testes realizados para as amostras que sofreram impactos demonstraram diferenas nos instantes de anlise tanto para a regio do dano (TABELA 5) quanto para a regio fora do dano (TABELA 6). Os resultados confirmam a tendncia de queda de atividade nas batatas que sofreram impactos diferindo de batatas saudveis, que no sofreram impactos. observado, ainda, que os valores obtidos antes do impacto (considerando a ausncia de dano nas batatas) e os valores obtidos aps 2 horas do impacto se diferem estatisticamente, quando analisada a regio especfica do dano. Este fato um indcio de que aps 2 horas de um impacto sofrido seja possvel diferenciar uma batata com predisposio ao desenvolvimento de injrias internas de batatas saudveis. A diferena entre comportamento das mdias tambm pode ser observada para as anlises fora do dano. Esta informao se torna importante, visto que ela permite levantar a hiptese de que possvel verificar se uma batata tem tendncia a desenvolver injrias internas aps as etapas relacionadas ps-colheita (lavagem, transporte, armazenamento, ensaque) sem ter a necessidade de analisar exatamente a regio em que o impacto ocorreu, fato que limitaria a aplicao da tcnica.
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Tabela 5 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia obtidos na regio de desenvolvimento do dano durante o perodo de anlise
Tabela 6 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia obtidos na regio fora do dano em batatas que sofreram impactos durante o perodo de anlise
5.5 Capacidade de predio do desenvolvimento do bruising A partir dos resultados obtidos pelos testes estatsticos foi realizada uma comparao do comportamento das regies e amostras com danos e testemunha. Desta forma, obtivemos os instantes em que batatas com dano se diferenciam de
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batatas saudveis. Uma vez verificado o instante de diferenciao entre batatas saudveis e batatas que, por terem sofrido algum impacto durante as etapas de ps-colheita, possuem a tendncia de desenvolver injrias internas, foi possvel predizer, logo nos primeiros estgios de desenvolvimento do dano, se o impacto sofrido acarretaria no escurecimento enzimtico da regio e formao de uma injria interna no produto. A partir desta informao medidas de controle de qualidade mais eficientes podero ser tomadas e a porcentagem de perdas de produto poder ser reduzida, j que mtodos mais rigorosos de seleo e controle acarretaro em um maior cuidado no manuseio dos produtos durante as etapas de beneficiamento. A comparao entre a regio do dano e a regio fora do dano das amostras as quais foram submetidas a um impacto apresentada no Grfico 4. Os resultados indicam mais uma vez que, mesmo sem analisar diretamente a regio exata de desenvolvimento do dano, possvel identificar e monitorar os efeitos causados pelo impacto nas batatas. A hiptese levantada que os processos metablicos envolvidos no desenvolvimento do dano e escurecimento enzimtico provocam um efeito sistmico na batata como observado em plantas ao se introduzir elementos externos fazendo-se aumentar a resistncia de forma sistmica de culturas contra doenas e praga (TEIXEIRA et al., 2005). Esta uma informao importante, uma vez que ao se analisar uma batata no se sabe a priori onde ocorreu o dano.
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Regio do dano x Regio fora do dano - Variao em torno da mdia (erro padro) 1,3 1,2 1,1 1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tem po (horas)
Normalizao (M.I.)
Regio do dano
Regio fora do dano
Grfico 4 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Regio do dano x Regio fora do dano No Grfico 5 apresentada a comparao dos valores nos instantes de anlise da regio exata do dano e uma regio saudvel localizada na testemunha. Observa-se que a partir das 4hs possvel diferenciar as batatas saudveis de uma batata que sofreu um impacto. Conclui-se, assim, que, ao se analisar diretamente a regio onde foi produzido um impacto, possvel predizer se o impacto ocorrido acarretar em uma injria interna na batata, aps 4 horas.
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Regio do dano x Testemunha - Variao em torno da mdia (erro padro) 1,3 1,2
Normalizao (M.I.)
1,1 1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tem po (horas)
Testemunha
Regio do dano
Grfico 5 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Regio do dano x Testemunha Ao se comparar uma regio fora do dano de uma batata com a regio de uma batata saudvel (Grfico 6) foi possvel diferenci-las a partir de 6hs. Assim, a predio em reas fora da regio exata do desenvolvimento do dano poder ocorrer a 6 horas aps o impacto. O atraso para se diferenciar as reas perifricas ao dano de reas saudveis, pode ser explicado pelo fato da ao do impacto ocorrer de forma menos intensa nessas regies. Isto acontece por no ter ocorrido s quebras de membranas que possibilitaram a entrada de oxignio como na regio exata do impacto.
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Regio fora do dano x Testemunha - Variao em torno da mdia (erro padro) 1,2 1,1
Normalizao (M.I.)
1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tem po (horas)
Testemunha
Regio fora do dano
Grfico 6 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Regio fora do dano x Regio fora do dano 5.5 Anlise sem distino de reas As anlises realizadas em pontos distintos de batatas que sofreram um impacto permitiram observar que possvel diferenciar batatas saudveis de batatas que tendem a desenvolver danos internos e, assim, predizer se um impacto acarretar na formao do internal bruising poucas horas aps o ocorrido, mesmo que o ponto analisado no seja exatamente o ponto de desenvolvimento do escurecimento interno. Apesar de possvel, observado que as atividades metablicas nas regies fora da rea de desenvolvimento do dano demoram mais a se diferenciar de regies saudveis. Essa defasagem de comportamento pode se tornar um fator limitante para a anlise por reas dificultando a utilizao da tcnica em termos prticos. Observa-se, ainda, que se torna difcil em uma unidade de beneficiamento de batatas, por exemplo, diferenciar os pontos exatos de ocorrncia do impacto, j que o internal bruising se desenvolve de forma interna.
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Com objetivo de minimizar a diferena de comportamento das regies dentro e fora do dano em uma mesma amostra e viabilizar a anlise proposta neste trabalho em termos prticos, facilitando sua aplicao tanto no meio cientfico quanto na indstria, foi realizada uma anlise comparando as batatas com danos e as batatas saudveis, porm, desta vez, sem distino de reas. Os resultados apresentados no Grfico 7 demonstram que a partir de 2 horas possvel diferenciar as amostras que sofreram o impacto e que tendem a desenvolver o internal bruising. Assim, conclui-se que a predio do desenvolvimento do internal bruising em batatas pelo biospeckle pode ser obtida a partir de 2 horas aps a ocorrncia do impacto, de forma direta, sem necessidade de se diferenciar regies que sofreram impactos, das regies que sofreram apenas os efeitos sistmicos. A hiptese que justifica a reduo no tempo de predio ao se analisar o comportamento do biospeckle sem distino de rea observada em Braga Jnior et al. (2007). O estudo mostra que ao se analisar a linha temporal do padro do speckle (THSP) em intervalos ocorrer perdas de informaes, mesmo que mnimas, referentes atividade do material analisado.
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Testemunhas x Amostras com danos - Variao em torno da mdia ( erro padro)
1,20 1,10 1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tempo (Horas) Testemunha Amostra com danos
Grfico 7 Variao do erro padro das mdias dos valores de momento de inrcia Amostras com danos x Testemunhas Na Tabela 7 e Tabela 8 so apresentados os resultados obtidos pelo teste de Scott-Knott para a anlise da diferena entre os instantes de leitura para as batatas saudveis, utilizadas como testemunhas, e as batatas que apresentaram internal bruising ao final de 72 horas.
Normalizao (M.I.)
59
Tabela 7 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia das batatas que sofreram impactos e desenvolveram injrias internas durante o perodo de anlise
Tabela 8 Teste de mdias para os valores de momento de inrcia das amostras utilizadas como testemunha nos perodos de anlises
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5.6 Modelagem matemtica do comportamento das batatas com danos
A modelagem matemtica de fenmenos biolgicos permite descrever numericamente comportamentos diversos e so representaes de sistemas em termos ideais (BARBOSA, 2009), sendo uma ferramenta fundamental para a simulao de processos, previso e calibrao de valores (ALMEIDA; SILVA, 2010). Uma vez que se trabalha com os dados normalizados, a modelagem se torna importante para garantir parmetros que permitam a repetibilidade dos resultados. Assim, foram desenvolvidos modelos matemticos para descrio do comportamento das atividades ocorridas nas regies analisadas ao longo do experimento. O Grfico 8 apresenta a aproximao de uma curva de quarta ordem para o comportamento das atividades metablicas na regio do dano. O ajuste sugerido comparado distribuio dos valores de momento de inrcia ao longo do perodo de anlise de todas as amostras apresentou um R2 = 0,82 , sendo considerado satisfatrio para a representao do comportamento da regio. A equao sugerida que descreve o comportamento mdio da regio dada pela equao 7: y = - 0,0032x4 + 0,0611x3 - 0,3918x2 + 0,908x + 0,4443
(7)
sendo y o valor do momento de inrcia normalizado. A normalizao foi realizada considerando o valor da atividade da batata no instante sem o impacto. A varivel x representa o valor correspondente ao instante de anlise, conforme a Tabela 9.
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Comportamento Mdio do Momento de Inrcia - Regio do dano
1,30 1,20 1,10 1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tem po (horas)
Normalizao (M.I.)
Regio do dano
Modelo sugerido
Grfico 8 Modelagem matemtica do comportamento da atividade nas regies de desenvolvimento do internal bruising No Grfico 9, demonstrada a aproximao de uma curva de terceira ordem para o comportamento das atividades ocorridas nas regies fora da regio de escurecimento enzimtico, que sofrem o efeito sistmico das atividades metablicas ocorridas na regio do dano na regio do dano O ajuste sugerido comparado distribuio dos valores de momento de inrcia ao longo do perodo de anlise de todas as amostras apresentou um R2 = 0,78 , sendo considerado satisfatrio para a representao do comportamento da regio. A equao sugerida que descreve o comportamento mdio da regio dada pela equao 8: y = 0,0046x3 - 0,0596x2 + 0,1672x + 0,894
(8)
62
Comportamento Mdio do Momento de Inrcia - Regio fora do dano
1,10
Normalizao (M.I.)
1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tem po (horas)
Regio f ora do dano
Modelo sugerido
Grfico 9 Modelagem matemtica do comportamento da atividade fora das regies de desenvolvimento do internal bruising Por fim, no Grfico 10, apresentada a aproximao de uma curva de terceira ordem para o comportamento geral da atividade da batata com dano, sem distino de reas. O ajuste sugerido comparado distribuio dos valores de momento de inrcia, ao longo do perodo de anlise de todas as amostras, apresentou um R2 = 0,87 , sendo considerado satisfatrio para a representao do comportamento da regio. A equao sugerida que descreve o comportamento mdio da regio dada pela equao 9: y = - 0,0018x4 + 0,0347x3 - 0,2261x2 + 0,5121x + 0,696
(9)
63
Comportamento Mdio do Momento de Inrcia - Amostras com danos
1,20 1,10 1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h
Tem po (horas)
Normalizao (M.I.)
Amostra com danos
Modelo sugerido
Grfico 10 Modelagem matemtica do comportamento da atividade em batatas que desenvolveram o internal bruising Uma vez que a escala entre perodos de tempo de anlise no segue intervalos constantes durante a realizao do experimento foi necessria a construo de uma escala no linear para a atribuio exata de valores para x correspondente ao tempo de anlise aps o impacto sofrido pela amostra. A Tabela 9 apresenta o intervalo em horas para cada variao de unidade.
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Tabela 9 Ajuste para a escala no linear do tempo de anlise VARIAES NA ESCALA Relao no intervalo de Valor em horas Valores de X tempo Antes do impacto 1 -0h (imediatamente aps o 2 1 unidade em 2 horas impacto) 2h 3 1 unidade em 2 horas 4h 4 1 unidade em 2 horas 6h 5 1 unidade em 18 horas 24h 6 1 unidade em 24horas 48h 7 1 unidade em 24horas 72h 8 -5.7 Mapas de intensidade anlise grfica A Figura 10 apresenta os mapas gerados pela tcnica de Fujii para as batatas com e sem dano. As batatas sem desenvolvimento de danos apresentam um comportamento estvel ao longo do perodo de anlise, enquanto nas batatas que sofreram impactos ocorrem pequenas alteraes no padro de atividade, observado com mais clareza no instante imediatamente aps o impacto (0h). Este resultado vai ao encontro com os obtidos por Pajuelo et al. (2003), onde que por meio das tcnicas Fujii e DG foi possvel identificar, em mas, a alterao no padro do biospeckle no instante imediatamente aps a ocorrncia de impacto.
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Figura 10 Anlise Fujii para batatas usadas como testemunha (a) e para as batatas desenvolvimento do dano interno (b). A rea circulada mostra a regio exata de ocorrncia do impacto Apesar de se observar a alterao no padro do mapa de atividade imediatamente aps o impacto ocorrido, a tcnica de Fujii se demonstra incapaz de captar as variaes de atividade ocorridas nos momentos seguintes de anlise, sendo difcil diferenciar os padres entre 2h 72horas. A principal hiptese para a dificuldade da tcnica grfica em observar o fenmeno, em contraposio tcnica numrica, est relacionada configurao experimental adotada nesse
66
caso, que pode estar relacionada uma falta de foco, bem como ao efeito da luz refletida. O uso de polarizadores na configurao experimental (RIBEIRO, 2011) e o ajuste de foco especfico para este tipo de anlise (PAJUELO et al., 2003) so medidas a serem avaliadas em trabalhos futuros, buscando encontrar o melhor ajuste experimental para este tipo de anlise. Outra justificativa para a defasagem da anlise grfica em relao anlise numrica seria a forma como os mtodos so calculados. O processamento das tcnicas de Fujii e DG so realizados por meio da comparao de imagens sucessivas, caracterizando-se mais como um clculo de mdias, e, portanto, trabalhando em primeira ordem, enquanto que o momento de inrcia calculado pela disperso da intensidade de cor em torno de uma mdia e, neste caso, trabalhando com uma estatstica de segunda ordem. A produo de um algoritmo, baseado na frmula do momento de inrcia, mas que permita uma anlise grfica das variaes temporais ocorridas no material analisado pode ser alvo de trabalhos futuros. O mtodo DG tambm apresentou dificuldades em obter informaes para predizer a influncia do impacto no desenvolvimento de um injria interna na batata. No entanto, a tcnica DG permitiu monitorar a queda de atividade propiciada pela degradao na regio do impacto, sendo possvel observar que ao longo do tempo a regio exata de desenvolvimento do dano perde atividade. Como j descrito, ao longo do desenvolvimento do dano ocorre um escurecimento na regio provocado pela liberao de melanina, alm da oxidao dos tecidos da regio, fruto do contato com oxignio e acelerao das atividades metablicas de algumas enzimas (FERNANDES et al., 2010; MENOLLI et al., 2008). Os padres nos mapas de intensidade gerados podem ser observados na Figura 11.
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Figura 11 Anlise das diferenas generalizadas para batatas usadas como testemunha (a) e para as batatas desenvolvimento do dano interno (b). A rea circulada mostra a regio exata de ocorrncia do impacto Ainda foi aplicada uma decomposio em frequncia nas imagens Fujii e DG por meio da transformada de wavelets com o objetivo de obter informaes at ento no observadas nos mapas originais (CARDOSO et al., 2011; PASSONI et al., 2005). Porm, a decomposio em frequncia no apresentou respostas significativas, sendo necessrios ensaios mais especficos para o aprimoramento da aplicao das tcnicas grficas em estudo de predio de desenvolvimento de danos.
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6 CONCLUSES
a) a tcnica do biospeckle laser associada ao momento de inrcia mostrou ser uma ferramenta capaz de predizer a ocorrncia de internal bruising ainda em momentos de no identificao visual do escurecimento causado em batatas aps impactos mecnicos controlados; b) a partir do clculo do momento de inrcia foi possvel diferenciar batatas saudveis de batatas que sofreram algum tipo de impacto, e, portanto, tendem a desenvolver injrias internas; c) a anlise das atividades dos danos metablicas possibilitou relacionadas a predio ao do
desenvolvimento
desenvolvimento das injrias a partir de 4 horas, enquanto as atividades ocorridas na regio prxima da rea de injria em diversos instantes possibilitaram predizer o desenvolvimento do dano a partir de 6 horas. A anlise da imagem sem distino de rea reduziu o tempo de predio do dano para 2 horas aps impacto; d) os modelos matemticos sugeridos foram capazes de representar de forma satisfatria as alteraes metablicas ocorridas tanto nas regies exatas de desenvolvimento do dano, quanto nas regies perifricas fora da zona de escurecimento. Os modelos matemticos alm de descrever numericamente o comportamento das atividades ocorridas nas regies analisadas ao longo do experimento, podero ser utilizados para garantir a repetibilidade dos resultados em trabalhos futuros; e) as tcnicas grficas Fujii e DG mostraram ser promissoras no auxlio da predio de injrias provocadas por impactos.
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REFERNCIAS
ALMEIDA, L. M.; SILVA, A. Por uma educao matemtica crtica: a modelagem matemtica como alternativa. Educao Matemtica Pesquisa, Rio de Janeiro, v. 12, n. 2, p. 221-241, 2010.
AMALVY, J. I. et al. Application of dynamic speckle interferometry to the drying of coatings. Progress in Organic Coating, London, v. 42, p. 89-99, June 2001.
ARIZAGA, R. et al. Display of local activity using dynamic speckle patterns. Optical Engineering, Redondo Beach, v. 41, n. 2, p. 287-294, June 2002.
ARIZAGA, R. et al. Speckle time evolution characterization by the cooccurrence matrix analysis. Optics and Laser Technology, Amsterdam, v. 31, n. 2, p. 163-169, 1999.
BAGNATO, V. S. Os fundamentos da luz laser. Fsica na Escola, So Paulo, v. 2, n. 2, p. 4-9, jul./dez. 2001.
BARBOSA, J. C. Modelagem e modelos matemticos na educao cientfica. Revista de Educao em Cincia e Tecnologia, Alexandria, v. 2, n. 2, p. 6985, jul. 2009.
BARITELLE, A. et al. A classification system for impact-related defects in potato tubers. American Journal of Potato Research, New Zealand, v. 77, n. 3, p. 143-148, 2000.
BASTOS, J. L. D.; DUQUIA, R. P. Medidas de disperso: os valores esto prximos entre si ou variam muito? Scientia Medica, Porto Alegre, v. 17, n. 1, p. 40-44, jan./mar. 2007.
70
BENTINI, M.; CAPRARA, C.; MARTELLI, R. Havesting demage to potato tubers by analisys of impacts records whit sphere instrumented. Biosystems Engineering, New York, v. 94, n. 1, p. 75-85, May 2006.
BERGKVIST, A. Biospeckle-based study of the line profile of light scattered in strawberries. 1997. 62 p. Master (Thesis in Computer)University of Lund, Sweden, 1997.
BLAHOVEC, J.; MARE, V.; PAPRTEIN, F. Static and dynamic tests of pear bruise sensitivity. Research in Agricultural Engineering, Slezsk, v. 50, n. 2, p. 54-60, June 2004.
BRAGA JNIOR, R. A. et al. Reliability of biospeckle image analysis. Optics and Lasers Engineering, London, v. 45, n. 3, p. 390-395, 2007.
BRAGA, R. A. et al. Assessment of seed viability by laser speckle techniques. Biosystems Engineering, Edinburgh, v. 86, n. 3, p. 287- 294, Nov. 2003.
CALDEIRA, C. P. Normalizao de base de dados. Portugal: Universidade de vora. Departamento de Informtica, 2003. 27 p.
CAPUCHO, R. B. Biodigesto anaerbia de resduos orgnicos de atacados alimentcios. 2010. 76 p. Monografia (Graduao em Tecnologia Ambiental) Escola SENAI Mario Amato, So Paulo, 2010.
CARDOSO, R. R. et al. Frequency signature of water activity by biospeckle laser. Optics Communications, Amsterdam, v. 284, n. 8, p. 2131-2136, Apr. 2011.
CARVALHO, P. H. A. et al. Motility parameters assessment of bovine frozen semen by biospeckle laser (BSL) system. Biosystems Engineering, London, v. 102, n. 1, p. 31-35, Jan. 2009.
71
CHITARRA, M. I. F.; CHITARRA, A. B. Ps-colheita de frutos e hortalias: fisiologia e manuseio. 2. ed. Lavras: UFLA, 2005. 785 p.
COATES, J. Encyclopaedia of analytical chemistry. Chichester: J. Wiley and Sons, 2000. 535 p.
DUNDFORD, H. B.; STILLMAN, J. S. Function and mechanism of action of peroxidases. Coordination of Chemistry Reviews, Lausanne, v. 19, p. 187-251, June 1976.
ESEAGHBEYGI, A.; BESHARATI, S. Potato variety and stogare for tuber sensitivy in bruising. World Applied Sciences Journal, Shanrekord, v. 7, n. 12, p. 1504-1507, 2009.
EXPIDO, J.; BUENO, J.; CANNEYT, T. van. Impact detection in potato handling lines with sensors based on triaxial accelerometers. Acta Horticulturae, Leuven, v. 682, p. 1125-1131, July 2005.
FERNANDES, P. L. O. et al. Escurecimento enzimtico em vegetais minimamente processados e seus mtodos de controle. Revista Verde, Mossor, v. 5, n. 2, p. 21-27, 2010.
FERREIRA, M. D.; HENRIQUE NETTO, L. Avaliao de processos nas linhas de beneficiamento e classificao de batatas. Horticultura Brasileira, Braslia, v. 25, p. 279-285, abr. 2007.
FINGER, F. L.; FONTES, P. C. R. Manejo ps-colheita da batata. Informe Agropecurio, Belo Horizonte, v. 20, p. 105-111, mar./abr. 1999.
FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION OF THE UNITED NATIONS. Global agriculture towards 2050. Rome, 2009. Disponvel em: <http://www.fao.org/fileadmin/templates/wsfs/docs/Issues_papers/HLEF2050_G lobal_Agriculture.pdf>. Acesso em: 21 jun. 2011.
72
FREITAS, A. A. et al. Uso de farinha de batata inglesa (Solanum Tuberosum L.) cv. monalisa em misturas para cobertura de empanados de frango. Cincias Agrrias e Engenharias, Ponta Grossa, v. 11, n. 2, p. 17-26, ago. 2005.
FUJII, H.; ASAKURA, T. O fluxo sangneo observada por varing speckle laser tempo. Optics Letters, New York, v. 10, n. 3, p. 104-106, 1985. GONZALEZ, R. C.; WOODS, R. E. Digital image processing. 3rd ed. Upper Saddle River: Prentice Hall, 2008. 954 p.
GUNES, G.; LEE, C. Y. Colour of minimally processed potatoes as affected by modified atmosphere packaging and antibrowning agents. Journal of Food Science, Chicago, v. 62, n. 3, p. 572-575, 1997.
HARALICK, R. M.; SHANMUNGAN, K.; DINSTEIN, I. Textural feartures of images classification. IEE Transaction Systems Man Cybernetics, New York, v. 3, n. 6, p. 610-621, 1973.
HENZ, G. P.; BRUNE, S. Reduo de perdas ps-colheita em batata para consumo. Braslia: Embrapa, 2004. 10 p. (Circular tcnica, 34).
JOBLING, J. Potatoes: handle with care. Good Fruit and Vegetables Magazine, Simcoe, v. 11, p. 34-35, June 2000.
KADER, A. A. Biochemical and physiological basis for effects of controlled and modified atmospheres on fruits and vegetables. Food Technology, Chicago, v. 40, n. 5, p. 99-104, 1986.
MARTINS, C. R.; FARIAS, R. M. Produo de alimentos x desperdcio: tipos, causas e como reduzir perdas na produo agrcola: reviso. Revista da FZVA, Uruguaiana, v. 9, n. 1, p. 20-32, 2002.
73
MENOLLI, L. N. et al. Atuao das enzimas oxidativas no escurecimento causado pela injria por frio em razes de batata-baroa. Acta Scientiarum. Agronomy, Maring, v. 30, n. 1, p. 57-63, 2008.
MITSUHASHI-GONZALEZ, K. et al. Bruising profile of fresh apples associated with tissue type and structure. Applied Engineering in Agriculture, St. Joseph, v. 26, n. 3, p. 509-517, 2010.
MOHSENIN, N. N. Physical properties of plant and animal materials. New York: Gordon e Beach Science Publishers, 1970. v. 1.
MORETTI, C. L.; SARGENT, S. A. Alterao de sabor e aroma em tomates causada por impacto. Scientia Agrcola, Piracicaba, v. 57, p. 385-388, jul./set. 2000.
NICOLA, B. M. et al. Nondestructive measurement of fruit and vegetables quality by means of NIR spectroscopy: a review. Postharvest Biology Technology, Berlin, v. 46, p. 99-108, Apr. 2007.
NOBRE, C. M. B. et al. Biospeckle laser spectral analysis under inertia moment, entropy and cross-spectrum methods. Optics Communications, Amsterdam, v. 282, n. 11, p. 2236-2242, Jan. 2009.
OULOMARA, G.; TRIBILLON, J.; DUVERNOY, J. Biological activity measurements on botanical specimen surfaces using a temporal decorrelation effect of laser speckle. Journal of Moderns Optics, London, v. 36, n. 2, p. 136179, Feb. 1989.
OZAKI, Y.; MCCLURE, W. F.; CHRISTY, A. A. Near-infrared spectroscopy in food science and technology. New Jersey: J. Wiley and Sons, 2006. 368 p.
PAJUELO, M. et al. Bio-speckle assessment of bruising in fruits. Optics and Lasers Engineering, London, v. 40, n. 2, p. 13-24, 2003.
74
PASSONI, I. et al. Dynamic speckle processing using wavelets based entropy. Optics Communications, Amsterdam, v. 246, n. 1/3, p. 219-228, 2005.
PINELI, L. L. O. et al. Associao de atmosfera modificada e antioxidantes reduz o escurecimento de batatas gata minimamente processadas. Horticultura Brasileira, Braslia, v. 23, n. 4, p. 993-999, 2005.
QING, Z.; JI, B.; ZUDE, B. Non-destructive analyses of apple quality parameters by means of laser-induced light backscattering imaging. Postharvest Biology and Technology, Berlin, v. 48, n. 2, p. 215-222, 2008.
RABAL, H. J.; BRAGA, R. A. Dynamic laser speckle and applications. Boca Raton: CRC, 2008. 304 p.
RABAL, H. J, et al. Transient phenomena analysis using dynamic speckle patterns. Optical Enginnering, Virginia, v. 35, p. 57-62, Sept. 1998.
RABELO, G. F. Avaliao da aplicao do speckle dinmico no monitoramento da qualidade de laranja. 2000. 149 p. Tese (Doutorado em Engenharia Agrcola)Universidade de Campinas, Campinas, 2000.
RABELO, G. F. et al. Laser speckle techniques in quality evaluation of orange fruits. Revista Brasileira de Engenharia Agrcola e Ambiental, Campina Grande, v. 9, n. 4, p. 570-575, out. 2005.
RIBEIRO, K. M. Desenvolvimento de um protocolo para a aplicao da tcnica do biospeckle em culturas de tecidos. 2011. 115 p. Dissertao (Mestrado em Engenharia Agrcola)Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2011.
ROCHA, A. M. C. N.; COULON, E. C.; MORAIS, A. M. M. B. Effects of vacuum packaging on the physical quality of minimally processed potatoes. Food Service Technology, San Francisco, v. 3, n. 3, p. 81-88, 2003.
75
SCOTT, A. J.; KNOTT, M. A. A clusters analysis method for gruping means in the analisys variance. Biometrics, Railegh, v. 30, n. 3, p. 507-512, Sept. 1974.
SENDRA, G. H. et al. Decomposition of biospeckle images in temporary spectral bands. Optics Letters, New York, v. 30, n. 13, p. 1641-1643, Dec. 2005.
SILVA, C. M. R. Uso do teste de Scott-Knott e da anlise de agrupamentos, na obteno de grupos de locais para experimentos com cana-de-aucar. 2007. 48 p. Dissertao (Mestrado em Agronomia)Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Piracicaba, 2007.
SILVA, G. O. et al. Qualidade de pelcula de famlias clonais de batata. Bragantia, Campinas, v. 67, n. 03, p. 633-638, 2008.
SILVA, M. V.; ROSA, C. I. L. F.; VILAS BOAS, E. V. B. Conceitos e mtodos de controle do escurecimento enzimtico no processamento mnimo de frutas e hortalias. Centro de Pesquisa e Processamento de Alimentos, Curitiba, v. 27, n. 1, p. 83-96, 2009.
TEIXEIRA, D. A. et al. Evidncias de induo de resistncia sistmica ferrugem do eucalipto mediada por rizobactrias promotoras do crescimento de plantas. Fitopatologia Brasileira, Braslia, v. 30, n. 4, p. 350-356, 2005. TORRENCE, C.; COMPO, G. P. A practical guide to wavelet analysis. Bulletin of the American Meteorological Society, Boston, v. 79, n. 1, p. 61-78, Jan. 1998.
VILAS BOAS, E. V. de B. Qualidade de alimentos vegetais. Lavras: UFLA/FAEPE/DCA, 2002. 68 p. Curso de Especializao Ps-graduao Ensino Distncia: Tecnologia e Aualidade de Alimentos Vegetais. XU, Z.; JOENATHAN, C.; KHORANA, B. M. Temporal and spatial proprieties of the time-varying speckles of botanical. Optical Enginnering, Virginia, v. 34, n. 5, p. 1487-1502, May 1995.
76
WILLIAMS, P.; NORRIS, K. Near infrared technology in the agricultural and food industries. 2nd ed. St. Paul: American Association of Cereal Chemist, 2001. 237 p.
ZEEBROECK, M. van et al. The simulation of the impact damage to fruit during the passage of a truck over a speed bump by means of the discrete element method. Biosystems Engineering, Virginia, v. 101, n. 1, p. 58-68, 2008.

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ANDERSON GOMIDE COSTA

PREDIO E IDENTIFICAO DE DANOS INTERNOS EM BATATAS POR MEIO DO BIOSPECKLE LASER

ANDERSON GOMIDE COSTA

PREDIO E IDENTIFICAO DE DANOS INTERNOS EM BATATAS POR MEIO DO BIOSPECKLE LASER

Orientador Dr. Roberto Alves Braga Jnior

Coorientador Dr. Eduardo Valrio de Barros Vilas Boas

ANDERSON GOMIDE COSTA

PREDIO E IDENTIFICAO DE DANOS INTERNOS EM BATATAS POR MEIO DO BIOSPECKLE LASER

Dr. Roberto Alves Braga Jnior Orientador

Dr. Eduardo Valrio de Barros Vilas Boas Coorientador

A todos, o meu sincero obrigado!

Tabela 1 Tabela 2 Tabela 3 Tabela 4 Tabela 5 Tabela 6

2.2 Objetivos especficos

3.1 Perdas de alimentos na fase de ps-colheita

3.1.4 O Intenal Bruising esmagamento celular interno

Figura 1 Internal bruising em batatas

3.2 O uso do laser no estudo de materiais biolgicos

Figura 3 Comportamento fsico do Biospeckle Observado ao longo do tempo, o biospeckle propicia o

3.4 Mtodos de anlise do Biospeckle Laser

Em que, Ik (x,y) o valor de intensidade na posio (x,y) da imagem k.

3.5 Anlises em alimentos por meio do Biospeckle Laser

3.6 Anlise em frequncia do biospeckle laser

Figura 7 Pndulo utilizado para produzir os impactos nas amostras

Figura 8 Configurao experimental: (a) croqui (b) set up real

Peso (g) 70 - 135 108,55

Momento de Inrcia - Comportamento Mdio

Momento de Inrcia - Comportamento Mdio

1,1 1 0,9 0,8 0,7 0,6 Antes 0h 2h 4h 6h 24h 48h 72h

Regio fora do dano

Regio fora do dano

Testemunhas x Amostras com danos - Variao em torno da mdia ( erro padro)

5.6 Modelagem matemtica do comportamento das batatas com danos

Comportamento Mdio do Momento de Inrcia - Regio do dano

Comportamento Mdio do Momento de Inrcia - Regio fora do dano

Regio f ora do dano

Comportamento Mdio do Momento de Inrcia - Amostras com danos

Amostra com danos

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