Modificaciones postranscripcionales maduracin RNAm

Fabio Roldan, Ph.D. septiembre, 2013 Biologa Molecular

Maduracin del RNA

Modificaciones que sufre el RNA para adquirir su funcionalidad

modificacin o procesamiento post-transcripcional

Luego de este proceso los RNAs son ms resistentes a la accin de nucleasas y tridimensionalmente compactos.

Eventos de maduracin
Modificacin covalente de nucletidos
Fraccionamiento de la molcula

Corte o adicin de nucletidos en los extremos

Corte y empalme (splicing) de la molcula

Modificacin covalente de nucletidos

.
T timina

Pseudouridina
D dihidrouridina N nucletido metilado

tRNA fenilalanina

Eventos de maduracin
Modificacin covalente de nucletidos

Fraccionamiento de la molcula
Corte o adicin de nucletidos en los extremos
Corte y empalme (splicing) de la molcula

Fraccionamiento de la molcula: precursores de tRNA

El transcrito primario contiene varios precursores de tRNA
genes ubicados en tandem
Secuencias espaciadoras Ribonucleasa P (endonucleasa)

Procesamiento del pre-tRNA

Fraccionamiento: precursores de rRNA

Ms del 80% del RNA de una clula es rRNA Los genes del rDNA (DNA ribosomal) se repiten cientos de veces E. coli Exosoma compuesto por diferentes exonucleasas

Xenopus

Realiza cortes enzimticos de los precursores de rRNA

Eventos de maduracin
Modificacin covalente de nucletidos Fraccionamiento de la molcula

Corte o adicin de nucletidos en los extremos

Corte y empalme (splicing) de la molcula

Corte/adicin de nucletidos en los extremos

mRNA Eucariota 5 adicin de caperuza de metil-guanosina en direccin reversa
Aadida al inicio de la transcripcin - estabilidad Esencial para la traduccin (reconocimiento ribosoma) pero no codifica para ningn aminocido

3 adicin de cola poli-A

Corte: ltima parte de la secuencia sintetizada en el extremo 3 del mRNA Adicin de la cola de Poli A (100-200 A) Proteccin

Corte y/o adicin de nucletidos en los extremos

tRNA
La secuencia 5CCA 3 se adiciona al extremo 3 despus del procesamiento)

Eventos de maduracin
Modificacin covalente de nucletidos Fraccionamiento de la molcula

Corte o adicin de nucletidos en los extremos

Corte y empalme (splicing) de la molcula

Maduracin del RNA

70s comparan el mRNA con DNA
No tienen la misma longitud

Exones: regiones EXpresadas Intrones: regiones INTragnicas

Transcrito primario RNA precursor

RNA maduro

El numero de intrones varia mucho: 50 (gen de colageno) 363 (gen Titin)

Corte y empalme alternativo del mRNA

Proceso de inclusin o exclusin de regiones del pre-mRNA Fuente importante de diversidad de protenas eucariotas Isoformas (500 a 38,000) Regulacin temporal o tejido-especfica Se piensa que por lo menos la mitad de todos los genes en el genoma humano experimenta empalme alternativo

Trans-splicing: C. elegans hace splicing entre exones de genes diferentes

Corte y empalme alternativo de mRNA

ADN EXON 1 EXON 2 EXON 3 Transcripcin EXON 4

pre-mRNA

3 mRNA maduros

Splicing alternativo 3 1 4 2 3 4

Protena 1

Protena 2

Protena 3

Corte y empalme (splicing) de la molcula de RNA

Proceso autocataltico o enzimtico para la eliminacin de intrones y unin de exones (mRNA, tRNA, rRNA)

Secuencias consenso

Sitio empalme donante 5: secuencia consenso GU

Sitio de ramificacin: secuencia consenso A entre purina y pirimidina

Sitio empalme aceptor 3: secuencia consenso AG

5 exon

3 exon

Determina el nucletido exacto en el que se producir la escisin del intrn y el posterior empalme de los exones.

Proceso enzimtico: Empalmosoma (spliceosoma)

Complejo ribonucleoprotico elimina los intrones del pre mRNA. Consta de protenas (150) y RNA (5) Proteinas ribonucleares pequeas (snRNP)

Tipos de corte y empalme

Resumiendo: maduracin de un mRNA

Corte de nucletidos en extremo 3 Adicin de nucletidos en ambos extremos Corte y empalme

Proceso enzimtico (tRNA eucariotas)

Proceso mediado por endonucleasas RNasa P (extremo 5) tRNasa Z (extremo 3)

Resumiendo: maduracin de un tRNA

Fraccionamiento de la molcula Modificacin covalente de nucletidos Corte de nuclotidos en ambos extremos y adicin en el extremo 3 Corte y empalme

Resumiendo: maduracin de un rRNA

Fraccionamiento del precursor Metilacin de bases

PROCARIOTAS MODIFICACIONES

mRNA
tRNA rRNA

No hay modificaciones Fraccionamiento del precursor, modificacin bases, modificacin de extremos Fraccionamiento del precursor, metilacin de bases EUCARIOTAS de

mRNA tRNA

Adicin de nucletidos en los extremos (5 CAP poli A); corte y empalme

y 3

Fraccionamiento del precursor, modificacin de bases, corte y empalme, modificacin de extremo Fraccionamiento del precursor, metilacin de bases

rRNA

PREGUNTAS?
Para ver en la red http://vcell.ndsu.edu/animations/mrnaproc essing/movie-flash.htm http://vcell.ndsu.edu/animations/mrnasplici ng/movie-flash.htm