UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO DIVISION DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

MANUAL DE PRÁCTICAS DE BIOLOGÍA CELULAR

Rosa María García Nie o J!a"a L#$e% Go&í"e% M'r"a Sa(a"ero L#$e%

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INDICE

Práctica 1. Manejo, cuidado y uso del microscopio ………………....………….. 3 Práctica 2. !ser"aci#n de c$lulas eucari#ticas…………………..…………… %

Práctica 3. Desnaturali&aci#n de prote'nas……………………….…………….. 12 Práctica (. Permea!ilidad celular ………………………….…….…………….. .1) Práctica *. + ,idaci#n i-ual a "eje&. ……………………………..…………….. 2/ Práctica ). !tenci#n de DN0 ………………………………………….………… 23

Práctica 1. Mitosis……………………………………………………………..…… 2* Práctica 2. Cromatina se,ual 3 en c$lulas de la mucosa !ucal de 4umano… 3/ 5i!lio-ra6'a ……………………………………………………………………….. 32

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P70C8IC0 No.1 M0NE9 , C:ID0D ; :< DE= MIC7 <C PI

!jeti"o> 0plicar los principios te#ricos y lo-rar utili&ar correctamente el microscopio para el análisis de las estructuras celulares ?ue participan en los procesos !iol#-icos. @undamento El desarrollo del microscopio, 4ace más de 3// aAos, mostr# ?ue la "ida no está limitada a lo ?ue se "e por o!ser"aci#n directa. 0?uel in"ento permiti# descu!rir ni"eles de complejidad insospec4ados en los or-anismos "i"os. Mediante el microscopio aparec'a un mundo nue"o ?ue los cient'6icos de la $poca no sa!'an c#mo interpretar. =os primeros, construidos en el si-lo 3BII, ten'an una sola lente. 0ntoni "an =eeuCen4oeD, un "endedor de telas 4oland$s, 6ue uno de los primeros 6a!ricantes de microscopios. <u instrumento era !ien simple> una sola lente montada en una placa de metal con tornillos para mo"er lo ?ue se ?uisiera "er y en6ocar la ima-en. 5ajo su lente, Ban =eeuCen4oeD o!ser"# todo lo ?ue pasa!a por sus manos> pol"o de diamante, lana de cordero, pelo 4umano, pepita de naranja, e,cremento de rana, "ino, restos de piel, restos de 4ueso, etc$tera. Cientos de pe?ueAos seres "i"os totalmente desconocidos por los cient'6icos de la $poca aparec'an con su microscopio. Durante */ aAos, =eeuCen4oeD pu!lic# re-ularmente el resultado de sus minuciosas o!ser"aciones en la 7oyal <ociety !ritánica. 0l mismo tiempo, en In-laterra, 7o!ert EooDe, tam!i$n descri!'a las mara"illas ?ue aparec'an a tra"$s de la lu& del microscopio. En su li!ro Micrographia, ?ue constituy# una de las primeras pu!licaciones so!re el tema, EooDe incluy# descripciones y di!ujos detallados de di"ersas o!ser"aciones microsc#picas y telesc#picas. <i !ien EooDe descri!i# c#mo el corc4o y otros tejidos "e-etales esta!an 6ormados por pe?ueAas ca"idades separadas por paredes, a las ?ue llam# c$lulas, su tra!ajo 6ue s#lo descripti"o ya ?ue no es!o&# teor'a al-una. =as primeras lentes pod'an producir un aumento de 4asta 2// "eces, pero ten'an "arias limitaciones. =os microscopios distorsiona!an la 6orma y el color de los o!jetos y la mayor'a de los cient'6icos "e'a estos instrumentos como ju-uetes y no como al-o Ftil para su tra!ajo. =amenta!lemente, la ciencia no lo-r# a"an&ar demasiado con estas o!ser"aciones, ya ?ue los primeros microscopistas no ten'an nin-una preocupaci#n más ?ue el placer de descu!rir cosas nue"as y no intentaron dar una e,plicaci#n te#rica a lo ?ue "e'an. 8anto es as' ?ue las o!ser"aciones de =eeuCen4oeD y EooDe pasaron casi inad"ertidas por los cient'6icos de la $poca. Esto se de!e so!re todo a dos ra&ones> =eeuCen4oeD no ten'a educaci#n 6ormal y EooDe era s#lo un empleado de 7oyal <ociety, y no miem!ro de ella. 0demás, en el si-lo 3BII aFn se "alora!an más la o!ser"aci#n y la e,perimentaci#n, ideas ?ue se continua!a desde de la Edad Media.

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isten di6erentes t$cnicas ?ue pueden ser utili&adas para teAir 'nte-ramente las c$lulas o componentes espec'6icos de ellas tales como el nFcleo. los microscopios de campo claro están e?uipados con cuatro o!jeti"os. 1/3 G!ajo aumentoH. Incrementando el 'ndice de re6racci#n del medio. y por otro lado. es la de o!tener imá-enes con calidad y aumento y. n es el 'ndice de re6racci#n del medio circundante y λ es la lon-itud de onda de la lu& usada Gpara la lu& !lanca se asume un "alor de /. esta 6undamentado en los principios de transmisi#n. es e. incorporaron una tercera lente para acoplarle una cámara de 6otos o 6ilmadora. donde al6a es la mitad del án-ulo de apertura del lente.*3 NmH. el in"ento del microscopio electr#nico constituy# un -ran aporte al estudio de la !iolo-'a celular. aparato de Ool-i. la microscopia electr#nica dio un salto cuantitati"o al mejorar su resoluci#n. El aumento del o!jeto es lo-rado usando dos sistemas de lentes con6ormados por los lentes del ocular y del o!jeti"o. ya ?ue permiti# conocer la tridimensionalidad de las estructuras celulares as' como la distri!uci#n espacial de los componentes moleculares en su interior. con un poder de aumento de (3. ?ue se re6iere a la capacidad de un lente para mostrar dos o!jetos separados como entidades discretas. En la mitad del si-lo 33. a!sorci#n. aumentan el esp$cimen o!ser"ado por 1/3 o 123 dependiendo del ocular utili&ado. esto e. etc. En el microscopio de campo claro no es posi!le lo-rar un aumento ilimitado por?ue los lentes son limitados en su aumento. (/3 Galto aumentoH y 1//3 GInmersi#nH. En la d$cada de 1%3/. El aceite tiene el mismo 'ndice de re6racci#n ?ue el "idrio y al pasar la lu& por el portao!jeto. por una propiedad conocida como poder de resoluci#n.)1 λLn <enM. Esta ima-en es despu$s proyectada 4acia el tu!o de los oculares. más rayos de lu& entran directamente en la lente del o!jeti"o. 4 . los cuales. El poder de resoluci#n GdH. di6racci#n y re6racci#n de la lon-itud de onda de la lu&. la microscopia comen&# a o6recer instrumentos adecuados para el estudio del interior de las c$lulas.presado con la si-uiente 6ormula dK/. produciendo la ima-en 6inal. lue-o. al respecto e. por ejemplo.plica por?ue el aceite de inmersi#n se utili&a cuando se tra!aja con el o!jeti"o 1//3. descu!rir ?ue las mitocondrias son or-anelos ?ue están dentro del citoplasma. <e lo-r# "er. En este aspecto.<#lo a principios del si-lo 3I3. ?ue en un principio ten'an dos lentes. =a 6unci#n !ásica del microscopio de lu& o de campo claro G?ue se muestra en la 6i-ura 1H. ocurre solo una m'nima di6racci#n de la lu& y resulta una ima-en más n'tida con mayor resoluci#n. 0parecieron los microscopios compuestos. lo ?ue 4ay adentro del ret'culo endosplasmático. con el a"ance de la 6oto-ra6'a. =os lentes del o!jeti"o están más cercanos al esp$cimen a o!ser"ar. produciendo la Iima-en realJ. En la microscopia de campo claro los espec'menes pueden ser 6ijados y teAidos. pero.

Es?uema del microscopio de lu&> Material Cu!reo!jetos Perlas de Bidrio 0ceite de Inmersi#n 0&ul tripano G/. Despu$s ajuste el Microscopio para la iluminaci#n QR4ler y e. 5 .amine el esp$cimen nue"amente. Compare las dos imá-enes. Colo?ue la preparaci#n teAida en el Microscopio en6o?ue la ima-en sin ajustar la iluminaci#n. 0juste el microscopio para la iluminaci#n de QR4ler mediante los si-uientes pasos> S Encienda el microscopio Glu& amarilla de !ajo "oltajeH. Note la apariencia del esp$cimen. S <eleccione el o!jeti"o 1/3.(P en 0-uaH Cámara 4Fmeda Gcaja de petri con papel 6iltroH Microscopio de =u& Isopos de al-od#n Procedimiento 1. S <u!a el condesador a su tope. S 0!ra los dia6ra-mas Gde campo y de irisH.

2. proceda a -irar el portaSocular o el ocular en6oca!le 4asta lo-rar "er n'tida la ima-en. E. colo?ue el cu!reo!jetos y e. despu$s adicione una -ota de la muestra de epitelio !ucal. 8omando en cuenta los lentes. 0juste despu$s la distancia interpupilar.///H !ser"e las preparaciones al microscopio. S De ser necesario. 3. 7esultados 6 . (. o!ser"ando entre lamina y laminilla y. S Contrastar la ima-en con el dia6ra-ma de iris del condensador. ocular y los o!jeti"os utili&ados. :n !uen ajuste normalmente se lo-ra teniendo entre un )) y un 2/P de la apertura de dia6ra-ma de campo "isi!le. colo?ue una -ota de a&ul de tripano so!re un portao!jetos. por otra parte.amine las c$lulas utili&ando los di6erentes o!jeti"os. *.%P e6ectFe una o!ser"aci#n directa de la preparaci#n. Para tener la ima-en. =impie y mar?ue 3 portao!jetos o colo?ue unas pocas es6eras de "idrio en cada portao!jetos so!re de esto. no utilice el mando microS macro para esta 6unci#n.*1*/H al se-undo y deje al tercero seco Gn del aireK1. aceite de inmersi#n GnK1.333/H a una de las preparaciones . una "e& centrado el condensador a!rir el dia6ra-ma de campo 4asta ?ue el !orde apenas desapare&ca del campo "isual. a-re-ar el 6iltro a&ul y de ser necesario intensi6icar un poco más la lu&.S En6o?ue con el mando macrom$trico y microm$trico usando Fnicamente el ojo derec4o. pon-a el cu!reo!jeto y adicione a-ua GnK1. centrar el condensador con la ayuda de sus dos tornillos laterales. determine el aumento de las imá-enes o!ser"adas. SEa-a descender li-eramente el condensador 4asta "er n'tido el !orde del dia6ra-ma de campo. Note c#mo el cam!io en el 'ndice de re6racci#n a6ecta la ima-en de las es6eras. Colecte epitelio !ucal de al-uno de los compaAeros y col#?uelo en *//Tl de Cloruro de <odio al /. SCierre el dia6ra-ma de campo. inclusiones citoplasmáticas y mem!rana plasmática. en orden del incremento del 'ndice de re6racci#n. nucl$olo. Compare las imá-enes teAidas y sin teAir y ela!ore un di!ujo marcando los si-uientes componentes de las c$lulas ?ue 4an sido o!ser"ados> nFcleos.perimente con la iluminaci#n Gdia6ra-ma y condensadorH. Para en6ocar con el ojo i&?uierdo. citoplasma.

2.Conclusi#n> Cuestionario 1. +Cuáles son los sistemas ?ue componen el microscopio de lu&. 7 . +0 ?u$ se le llama poder de resoluci#n. Indica sus partes de cada sistema.

3. 8 . del microscopio de lu& y el microscopio electr#nico. +Cuál es el l'mite de resoluci#n del ojo 4umano. (. Indi?ue dos tipos de microscopia de lu& y electr#nica y sus "entajas.

). Cloroplasto. Citoplasma.P70C8IC0 No. 1*.isoma. =as c$lulas eucariotas no cuentan con un compartimiento alrededor de la mem!rana plasmática GperiplasmaH. 12. =as c$lulas animales componen los tejidos de los animales y se distin-uen de las c$lulas "e-etales en ?ue carecen de paredes celulares y de cloroplastos y poseen centr'olos y "acuolas más pe?ueAas y. la en"oltura nuclear. =a alternati"a a la or-ani&aci#n eucari#tica de la c$lula la o6rece la llamada c$lula procariota. (. 7et'culo endoplasmático liso.0 los or-anismos 6ormados por c$lulas eucariotas se les denomina eucariontes. 13. 7et'culo endoplasmático ru-oso. 11. Nucleolo. Citoes?ueleto GmicrotF!ulosH. 1. Pero. 11. Mem!rana nuclear. Nucleolo. Células vegetales Estructura de una c$lula "e-etal t'pica> 1. 2. =eucoplasto. 9 . 1). ). NFcleo. las c$lulas animales pueden adoptar una "ariedad de 6ormas e incluso pueden 6a-ocitar otras estructuras. 7et'culo endoplasmático liso. Células animales Estructura de una c$lula animal t'pica> 1. 13. Plasmodesmos. Pared celular. más a!undantes. *. 11. Pero. %. Mitocondria. Centriolo. 2 5<E7B0CIUN DE CV=:=0< E:C07IU8IC0< !jeti"o> 7eali&ar o!ser"aciones para identi6icar las caracter'sticas de las c$lulas eucari#ticas. 7et'culo endoplasmático ru-oso. Citoes?ueleto. %. =isosoma. @undamento <e denomina eucariotas a todas las c$lulas ?ue tienen su material 4ereditario 6undamental Gsu in6ormaci#n -en$ticaH encerrado dentro de una do!le mem!rana. 2. En estas c$lulas el material 4ereditario se encuentra dentro de di6erentes compartimientos llamados or-anelos. en el seno del citoplasma. 12. 7i!osoma. Bes'cula. Mem!rana plasmática.isoma. *. 3. 12. I-ualmente estas c$lulas "ienen a ser microsc#picas pero de tamaAo -rande y "ariado comparado con las otras c$lulas. Citoplasma. 1. 0parato de Ool-i. Bacuola central. ?ue delimita un nFcleo celular. De!ido a la carencia de pared celular r'-ida. (. 2. 1/. 7i!osomas. 0parato de Ool-i. 2. -eneralmente. 3. NFcleo. Bes'cula. 1(. 1/. como el ?ue tienen las c$lulas procariotas. Mitocondria.

terior de la mem!rana celular. 10 . 0Aade una -ota de a-ua a la muestra. ?ue están 4ec4as de peptido-licano. *. ?ue es depositada por el protoplasto en el e. li-nina. =os -rupos de plantas sin 6la-elos Gincluidas con'6eras y plantas con 6lorH tam!i$n carecen de los centriolos ?ue están presentes en las c$lulas animales. =a"a con cuidado el e. 2. Esto contrasta con las paredes celulares de los 4on-os.ceso de colorante y s$calo con un poco de papel de 6iltro. ?ue están 4ec4as de ?uitina. <e corta la ce!olla por la mitad y se separa una de las capas de la misma.=as caracter'sticas distinti"as de las c$lulas de las plantas son> • • :na "acuola central -rande Gdelimitada por una mem!rana. y en muc4os casos. y la de los procariontes. poros de enlace en la pared celular ?ue permiten ?ue las c$lulas de la plantas se comuni?uen con las c$lulas adyacentes. =os plastos. el tonoplastoH. Coloca el portao!jetos en la placa de Petri. <epara el 6ra-mento de epidermis con las pin&as y col#calo en el centro del portao!jetos. Marca con el !istur' o con las tijeras una cuadr'cula de pe?ueAo tamaAo G1 cm de ladoH en la parte interna o c#nca"a de la capa. 3. Esto es di6erente a la red de 4i6as usada por los 4on-os. ?ue mantiene la 6orma de la c$lula y controla el mo"imiento de mol$culas entre citosol y sa"ia. (. :na pared celular compuesta de celulosa y prote'nas. • • • Material Microscopio Mec4ero 5istur' o tijeras de punta 6ina Pin&as yLo palillos est$riles Ce!olla Papel de 6iltro Placa de Petri Piseta Colorante G"erde de metilo o a&ul de metilenoH Portao!jetos y cu!reo!jetos Procedimento C$lulas "e-etales GEpidermis de ce!ollaH 1. el pi-mento ?ue da a la plantas su color "erde y ?ue permite ?ue realicen la 6otos'ntesis. aAade unas -otas de colorante so!re la muestra y d$jalo actuar durante cinco minutos. especialmente cloroplastos ?ue contienen cloro6ila. ). =os plasmodesmos.

C$lulas animales GEpitelio de la mucosa !ucalH 2. 7esultados Ea& es?uemas de las c$lulas ?ue o!ser"aste. utili&ando "arios o!jeti"os. <eAala las partes en cada tipo de c$lula y marca las di6erencias entre ellas. 7eali&a una e.1. %. Coloca el cu!re apoyándolo por un lado y dejándolo caer para ?ue no ?ueden !ur!ujas. 7aspa sua"emente el interior del carrillo con las pin&as o con un palillo Gsiempre por la parte roma. 11. reali&a un di!ujo detallado de las c$lulas e indica el aumento del mismo. indicando el aumento usado. Conclusi#n> 11 . !ser"a la preparaci#n al microscopio.tensi#n G6rotisH desli&ando el !orde de un porta so!re el ?ue tiene la muestra. Coloca la mucosa !lanca ?ue se o!tiene en el portao!jetos. procurando no cortarseH. Calienta sua"emente con el mec4ero G¡que no llegue a quemar!H la parte in6erior del porta ?ue contiene la mucosa. 1/. El resto del procedimiento es id$ntico al de la epidermis de ce!olla.

12 .

Para denominar a estas cadenas se utili&an pre6ijos con"encionales como> • • • • • li-op$ptidos. inacti"aci#n de materiales t#.S si el n [ de aminoácidos es menor de 1/.ilo de un aminoácido y el -rupo amino del si-uiente. etc. ya ?ue son la !ase de la estructura del c#di-o -en$tico G0DNH y de los sistemas de reconocimiento de or-anismos e. uAas. Polip$ptidos o cadenas polipept'dicas.. 8rip$ptidos. constituidas !ásicamente por car!ono GCH. <on macromol$culas or-ánicas. ma-nesio GM-H.'-eno y de -rasas en la san-re. 4idr#-eno GEH. 3 DE<N08:70=IW0CIUN DE P7 8EXN0< !jeti"o> Determinar el comportamiento de una prote'na -lo!ular 4idrosolu!le !ajo condiciones de desnaturali&aci#n. @undamento =as prote'nas son los materiales ?ue desempeAan un mayor nFmero de 6unciones en las c$lulas de todos los seres "i"os.. piel.S si el n [ de aminoácidos es 2. dando lu-ar al desprendimiento de una mol$cula de a-ua. co!re GCuH. etc. para 6ormar p$ptidos los aminoácidos se "an enla&ando entre s' 6ormando cadenas de lon-itud y secuencia "aria!le.S si el n [ de aminoácidos es mayor de 1/. desempeAan 6unciones meta!#licas y re-uladoras Gasimilaci#n de nutrientes. =os p$ptidos y el enlace pept'dico. Es un enlace co"alente ?ue se esta!lece entre el -rupo car!o. 2 resultan indispensa!les Go esencialesH para la "ida 4umana y 2 resultan Zsemiindispensa!lesZ. por otro.. transporte de o. 8am!i$n son los elementos ?ue de6inen la identidad de cada ser "i"o.S si el n [ de aminoácidos es 3.traAos en el sistema inmunitario.H . 6orman parte de la estructura !ásica de los tejidos GmFsculos. 4ierro G@eH. =os p$ptidos están 6ormados por la uni#n de aminoácidos mediante un enlace pept'dico.P70C8IC0 No.icos o peli-rosos. yodo GIH.S si el n [ de aminoácidos es (. Dip$ptidos. 0s' pues.'-eno G H y nitr#-eno GNHY aun?ue pueden contener tam!i$n a&u6re G<H y 6#s6oro GPH y. Estos elementos ?u'micos se a-rupan para 6ormar unidades estructurales llamados aminoácidos. tendones. etc. 8etrap$ptidos. <e sa!e ?ue de los 2/ aminoácidos proteicos conocidos. o. . en menor proporci#n. Por un lado.H.

=a estructura secundaria es la disposici#n de la secuencia de aminoácidos en el espacio. para 6ormar un complejo proteico. Esta con6ormaci#n -lo!ular 6acilita la solu!ilidad en a-ua y as' reali&ar 6unciones de transporte. etc. la estructura secundaria. =a 6unci#n de una prote'na depende de su secuencia y de la 6orma ?ue $sta adopte. . En definitiva. a medida ?ue "an siendo enla&ados durante la s'ntesis de prote'nas y -racias a la capacidad de -iro de sus enlaces. Nos indica ?u$ aminoácidos componen la cadena polipept'dica y el orden en ?ue dic4os aminoácidos se encuentran.  los puentes de 4idr#-eno.  los puentes el$ctricos.istencia de enlaces entre los radicales 7 de los aminoácidos. Esta estructura se 6orma al enrollarse 4elicoidalmente so!re s' misma la estructura primaria. • Estructura Cuaternaria Esta estructura in6orma de la uni#n. =os aminoácidos. ad?uieren una disposici#n espacial esta!le. • Estructura terciaria =a estructura terciaria in6orma so!re la disposici#n de la estructura secundaria de un polip$ptido al ple-arse so!re s' misma ori-inando una con6ormaci#n -lo!ular.  las interacciones 4i6r#6o!as.isten dos tipos de estructura secundaria>  =a MS4$lice  =a con6ormaci#n \. mediante enlaces d$!iles Gno co"alentesH de "arias cadenas polipept'dicas con estructura terciaria. en&imática. E. • Estructura <ecundaria. Esta con6ormaci#n se mantiene esta!le -racias a la e. <e de!e a la 6ormaci#n de enlaces de 4idr#-eno entre el SCK de un aminoácido y el SNES del cuarto aminoácido ?ue le si-ue. es la estructura primaria la que determina cuál será la secundaria y por tanto la terciaria. Cada una de estas cadenas polipept'dicas reci!e el nom!re de prot#mero. Eay "arios tipos de enlaces>  el puente disul6uro entre los radicales de aminoácidos ?ue tiene a&u6re.Estructura de las prote'nas =a or-ani&aci#n de una prote'na "iene de6inida por cuatro ni"eles estructurales denominados> • Estructura primaria =a estructura primaria es la secuencia de aminoácidos de la prote'na. 4ormonales.

al cuarto un poco de Na E 1N. al ?uinto sal y al se. 8ape los tu!os y espere media 4ora. 0 primero a-r$-uele un poco de etanol. 7e-istre sus resultados.Material Clara de 4ue"o Etanol 9u-o de lim#n 0cido clor4'drico 1N Eidr#.to !átalo con una "arilla.ido de sodio 1N <al de mesa Procedimiento Colo?ue un poco de clara de 4ue"o en seis tu!os de ensaye. al se-undo un poco de ju-o de lim#n. 7esultados Conclusi#n> . 0 medida ?ue pase el tiempo o!ser"e lo ?ue sucede en cada tu!o. al tercero un poco de ECl 1N.

3. Mencione dos m$todos de desnaturali&aci#n de prote'nas usados cotidianamente en casa. +?u$ condiciones e.Cuestionario 1. 2. .perimentales de!emos cuidar. +Cuáles son las condiciones de desnaturali&aci#n de prote'nas para someter a una separaci#n por electro6oresis en condiciones nati"as. <i ?uisi$ramos o!tener prote'nas de un 4omo-enado celular.

@:NCI NE< DE =0 MEM570N0 P=0<M]8IC0> 1. Constituyen una !arrera selecti"amente permea!le. 8ransducci#n de ener-'a Material Baso de precipitado <oluci#n de yodo <oluci#n de almid#n al 1P 5olsa de plástico Cond#n Celo6án dulce Eilo de al-od#n . 3. los cuales son mol$culas an6ipáticas. Interacci#n celular ). =a 6ormaci#n de las mem!ranas depende de las propiedades de los l'pidos y todas las mem!ranas celulares comparten una or-ani&aci#n estructural comFn de 6os6ol'pidos asociados a prote'nas. sino tam!i$n de6inen los compartimentos internos de las c$lulas eucari#ticas. =a mem!rana celular 6unciona como una !arrera semipermea!le.P70C8IC0 ( PE7ME05I=ID0D CE=:=07 !jeti"o> di6erencias entre di6usi#n. De esta 6orma la mem!rana está estructurada por una !icapa de 6os6ol'pidos con prote'nas asociadas. los 6os6ol'pidos espontaneamente 6orman !icapas en soluciones acuosas con las cadenas de ácidos -rasos inmersas en el interior de la mem!rana y las ca!e&as polares e. diálisis y #smosis. 7espuestas a seAales e. @undamento =a estructura y 6unci#n de las c$lulas depende en 6orma cr'tica de las mem!ranas. Estas prote'nas de mem!rana son responsa!les de muc4as 6unciones especiali&adas.puestas en am!os lados en contacto con el a-ua. las cuales no s#lo separan el interior de la c$lula de su am!iente. incluyendo el nFcleo y los or-anelos citoplásmicos. Compartamentali&aci#n 2. =os elementos 6undamentales de todas las mem!ranas son los 6os6ol'pidos.ternas *. <itio de acti"idades !io?u'micas 1. 8ransporte de solutos (. De!ido a su poca solu!ilidad en a-ua. lo cual si-ni6ica ?ue tienen en su estructura una re-i#n 4idro6#!ica Gdos cadenas de ácidos -rasosH y otra 4idro6'lica Guna ca!e&a polarH. permitiendo el paso a muy pocas mol$culas a tra"$s de ella.

:na espátula o cuc4ara de metal. en el cond#n y en el celo6án dulce. para conse-uir ?ue el cascaron se 6racture. :n capilar. y ?ue está en contacto con el a-ua.Procedimiento =lene el "aso de precipitados con a-ua 4asta el 2/P de su "olumen. 2H DEM <870CI N DE =0 P7E<IUN Material> :n 4ue"o. Con los dedos ?uitar poco a poco el cascaron dejando un espacio cuadrado de 1. introducir con cuidado un capilar 4asta ?ue atra"iese la mem!rana. !ser"e en d#nde se 6orm# el color a&ul Gadentro o a6uera de cada sacoH.tremo a-udo. En el otro e. En el e. Cera 0-ua Baso de precipitado o un 6rasco. <ellar con cera el espacio entre el capilar y el cascaron.* cm sin romper la mem!rana. <umerja los sacos con la soluci#n de yodo y espere unos 1/ minutos. Cierre con el 4ilo de al-od#n. aAádale 1/ -otas de soluci#n de yodo y a-'telo. asentar el 4ue"o por el lado anc4o y con la mem!rana inte-ra. <MU8IC0> Procedimiento> 8omar el 4ue"o y con una espátula o cuc4ara. Colo?ue unos mililitros de soluci#n de almid#n en la !olsa de plástico. !ser"aciones . Dejar el 4ue"o durante una 4ora y o!ser"ar cada 1* minutos el capilar.tremo 4acer el mismo procedimiento. cuidadosamente darle unos -olpecitos en el e.tremo más anc4o. Poner el a-ua 4asta el !orde en un 6rasco. pero solo ?uitar un poco de cascara.

De acuerdo al modelo del mosaico 6luido.Conclusiones Cuestionario 1. +de ?u$ están constituidas las mem!ranas celulares. .

perimento de presi#n osm#tica. 3. +?u$ determina la direcci#n en la cual se mue"e el a-ua.perimento de permea!ilidad. +^u$ 6actores a6ectan la 6luide& de la mem!ranas celulares.2. . +Cuántos tipos de transporte se lle"an a ca!o a tra"$s de la mem!rana y cuál se us# en el e.perimento. En el e. E. (. (.plica por?ue se 6orma el color a&ul en el e.

o.idasa de :rato. En este sitio se produce per#.idasa en 6rutas y "erduras y o!ser"ar el e6ecto del calor y el pE.tracto de S 1/ -otas S 1/ -otas 1/ -otas man&ana o rá!ano E.P7]C8IC0 No. * + 3ID0CIUN IO:0= 0 BE9EW.tracto de man&ana o rá!ano Procedimiento Colo?ue un poco de e.1M Na E /. tu!o 1 2 3 ( * 0morti-uador de 1/ S S S S 6os6atos -otas E. =a acti"idad de esta en&ima e"ita la "eje& y la muerte celular prematura.idasas de aa. ?ue está presente en -randes concentraciones en estos or-anelos.ido de 4idr#-eno por acci#n de "arias en&imas pero.idaci#n de ácidos -rasos de cadena muy lar-a y la s'ntesis de plasmal#-enos.tracto de man&ana en un tu!o y p#n-alo en un !aAo mar'a a 1//°C durante al menos 1/ minutos.idati"as. <on or-anelos con mFltiples 6unciones y contienen más de */ en&imas ?ue participan en acti"idades tan di"ersas como la o. Mientras tanto. @undamento =os pero.tracto de S S 1/ -otas S S man&ana o rá!ano 4er"idos ECl _ 1M S S S 3 -otas S Na E_ 1M S S S S 3 -otas E2 2 3/P * -otas * -otas * -otas * -otas * -otas 5encidina (/ * -otas * -otas * -otas * -otas * -otas mM .i-enada al 3/P 5encidina (/ mM E.1M 0-ua o. Material 0morti-uador de 6os6atos */ mM pE 1.1 a 1. numere cinco tu!os de ensaye y a-re-ue los reacti"os en el orden esta!lecido en la ta!la si-uiente> No.isomas son "es'culas simples limitadas por mem!ranas con un diámetro de /. El E 2 2 -enerado se de-rada rápidamente mediante la en&ima catalasa./ Tm ?ue contiene un centro denso y cristalino de en&imas o./ ECl /. !jeti"o> Determinar la acti"idad de pero.is#micas como la .

0-ite los tu!os y o!ser"e el color desarrollado en cada tu!o durante 1/ minutos._Incu!e 3/ se-undo e inicie el re"elado de la acti"idad adicionando a todos los tu!os el E2 2 y ense-uida la 5encidina. !ser"aciones Conclusi#n> .

..perimento y el desarrollo del color. 2. Escri!e la reacci#n en&imática ?ue reali&a. +Cuál es el papel de la catalasa. E. 3.idasas y cual es su 6unci#n.plica la reacci#n en&imática del e. +En ?u$ or-anelo se encuentran las pero.Cuestionario 1. Menciona al-unos ejemplos.

=a 4idr#lisis de ácidos nucleicos por ácidos o por cierta en&ima ori-ina una me&cla de "arios nucle#tidosY tal como la 4idr#lisis de las prote'nas produce una me&cla de aminoácidos. los ácidos nucleicos Gas' llamados por?ue dan una reacci#n ácida al suspenderse en a-uaH.) 58ENCIUN DE 0DN !jeti"o> !tener DN0 de plátano =os ácidos nucleicos se encuentran en todas la c$lulas "i"as y están com!inados en casi todos los casos con ciertas prote'nas. En 1%*3 `atson y CricD resol"ieron su estructura molecular. con peso molecular de millonesY en estas cintas se repite Ga inter"alos re-ularesH la misma estructura aun?ue no id$ntica. @unci#n !iol#-ica de los ácidos nucleicos =a 6unci#n !iol#-ica de los ácidos nucleicos. perteneciente a los compuestos conocidos como purina y pirimidinas G !ases pFricas y prim'dicasH. tras de las 6unciones !iol#-icas de los ácidos nucleicos son las de almacenamiento. dando comien&o a una nue"a era en la !io?u'mica y la !iolo-'a. ^u'micamente. Cada uno de los cientos de unidades ?ue componen un ácido nucleico se llama nucle#tido y esta constituido de un -rupo 6os6ato y una pentosa Ga&Fcar simple con * car!onosH a la cual se 6ija una estructura or-ánica c'clica llamada !ase. replicaci#n. y transmisi#n de la in6ormaci#n -en$tica Gson las mol$culas ?ue determinan lo ?ue es y 4ace cada una de las c$lulas "i"asH. E. Material :n mortero :na pro!eta 8res "asos de precipitado . :n ácido nucleico simple puede lle"ar "arios o muc4os nucle#tidos y entonces reci!e el nom!re de polinucle#tidos.isten dos clases de ácidos nucleicos en todo or-anismo "i"iente> ]cido ri!onucleico o 7N0 ]cido deso. Esto podr'a compararse a las unidades de aminoácidos ?ue constituyen la cadena pept'dica de una prote'na. son enormes compuestos en 6orma de cintas de -ran lon-itud.P70C8IC0 No.irri!onucleico o DN0 Por otra parte los "irus contienen uno solo ya sea 7N0 o DN0. El a&Fcar y -rupo 6os6ato pueden considerarse como la columna "erte!ral de los ácidos nucleicosY mientras las !ases pueden ser importantes rami6icaciones laterales. recom!inaci#n. espec'6icamente el DN0 es la de contener la in6ormaci#n 4ereditaria. representando los enlaces o unidades de la cadena.

Coloca el "aso 1/ minutos en un !aAo a )/oC. !ser"aciones . Colocar el papel 6iltro en un em!udo.0-ua destilada Em!udo :n plátano. :n tu!o de ensayo <al de mesa Pipeta Pasteur 8erm#metro 0&ul de metileno Procedimiento Muele el plátano en el mortero con 3/m= de a-ua destilada 4asta ?ue ?uede una pasta 4omo-$nea. este es el 0DN sFper enrollado del plátano. 1/m= del deter-ente. parte del 6iltrado del plátano. 0 este tu!o con etanol a-re-a con la pipeta Pasteur. a-re-a )/m= de a-ua destilada. a-'talo cuidadosamente con una "arilla por dos minutos sin 4acer espuma. En un "aso de precipitado. 0l "aso de precipitado anterior. Etanol G%*PH Papel 6iltro Deter-ente Barilla de a-itaci#n. En un tu!o de ensayo a-re-a etanol 6rio G%*PH. y 6iltra la me&cla Gpuede tardar "arios minutos. "erás un precipitado de apariencia y 6ilamentosa. y lue-o re"uel"e con muc4o cuidado por 3 minutos. a-r$-ale 3/m= de la pasta del tejido.

. +^u$ di6erencias estructurales y 6uncionales presentan entre ellos. (.Conclusiones Cuestionario 1. 2. +C#mo se trasmite la in6ormaci#n -en$tica a partir de los ácidos nucleicos. +^u$ importancia tiene el DN0 en la trasmisi#n de la in6ormaci#n -en$tica. 3. +Cuáles son los ácidos nucleicos encontrados en las c$lulas.

Esta or-ani&aci#n ayuda a ase-urar ?ue en la pr#. Interfase & mitosis. Esta l'nea es re6erida como. cuando los cromosomas se separen. =os microtF!ulos se ad4ieren a los cinetocoros y los cromosomas comien&an a mo"erse 4acia el plano central de la c$lula. =a c$lula está ocupada en la acti"idad meta!#lica preparándose para la mitosis Glas pr#. =as 6i!ras del 4uso alinean los cromosomas a lo lar-o de la parte media del 4uso acromático. =a c$lula puede contener un par de centriolos Go centros de or-ani&aci#n de microtu!ulos en los "e-etalesH los cuales son sitios de or-ani&aci#n para los microtu!ulos. esta etapa incluye las 6ases cosecuti"as O1. < y O2 del ciclo celular. marcando el comien&o de la prometa6ase. =as 6i!ras del 4uso se dispersan. Prometafase. prometa6ase. =a inter6ase es el periodo ?ue 4ay entre una mitosis y otra. Anafase. la placa de meta6ase. El nFcleolo desaparece. ana6ase y telo6ase. y son jalados mediante los cinetocoros 4acia lados opuestos de la c$lula. =as cromátides lle-an a los polos opuestos de la c$lula. Metafase. lo ?ue produce dos c$lulas 4ijas id$nticas. @recuentemente se incluye en discusiones so!re mitosis. cada nue"o nFcleo reci!irá una copia de cada cromosoma. y la citocinesis o di"isi#n citoplásmica de la c$lula puede comen&ar tam!i$n durante esta etapa. . aun?ue una manc4a oscura llamada nucleolo. Profase.imas cuatro 6ases ?ue conducen e incluyen la di"isi#n nuclearH. meta6ase. y se 6orman nue"as mem!ranas alrededor de los nFcleos 4ijos.ima 6ase. Introducci#n Mitosis es la di"isi#n nuclear más la citocinesis. =os centr'olos comien&an a mo"erse a polos opuestos de la c$lula y 6i!ras se e. =os cromosomas no se disciernen claramente en el nFcleo. =as prote'nas de ad4ieren a los centr#meros creando los cinetocoros. 0l-unas 6i!ras cru&an la c$lula para 6ormar el 4uso mit#tico.P70C8IC0 1 MI8 <I< !jeti"o> !ser"ar c$lulas "e-etales en proceso de di"isi#n. Este proceso se di"ide en "arias etapas consecuti"as> pro6ase. El mo"imiento es el resultado de una com!inaci#n de> el mo"imiento del cinetocoro a lo lar-o de los microtu!ulos del 4uso y la interacci#n 6'sica de los microtu!ulos polares. =a cromatina en el nFcleo comien&a a condensarse y se "uel"e "isi!le como cromosomas en el microscopio #ptico. puede ser "isi!le. =os pares de cromosomas se separan por la separaci#n del centr#mero.tienden desde los centr#meros. Telofase. =os cromosomas se dispersan y ya no son "isi!les !ajo el microscopio #ptico. =a mem!rana nuclear se disuel"e. aun?ue la inter6ase t$cnicamente no es parte de la mitosis.

2. 0 los 2 o 3 d'as. En c$lulas "e-etales. la pared r'-ida re?uiere ?ue una placa celular sea sinteti&ada entre las dos c$lulas 4ijas. Ela!oraci#n de la preparaci#n microsc#pica 1.Citocinesis. Colocar la ce!olla so!re un 6rasco lleno de a-ua. manteniendo el ni"el del a-ua. para 6acilitar su manipulaci#n 2. . la citocinesis ocurre cuando se 6orma un anillo 6i!roso compuesto de una prote'na llamada act'na. Colocar el tro&o de ra'& dentro de un "aso de precipitados de */ m= y cu!rir con unas -otas de carm'n ac$tico. 3. cortar la parte más 6ina y terminal Gmeristemo radicularH con una tijera de punta 6ina. 3. las ra'ces 4a!rán alcan&ado unos tres cm. E"itar ?ue se se?ue. Calentar el "aso 4asta ?ue el colorante entra en e!ullici#n y mantener durante 1* se-undos. *. Con un escalpelo cortar la e. El 6ra-mento cortado de!e tener una lon-itud de poco más de medio cm. de tal manera ?ue la parte in6erior del !ul!o o suela se manten-a en contacto permanente con el ni"el del 6rasco. Material Ce!olla con ra'ces @rasco con a-ua Na"aja Baso de precipitados de */ m= Ootero Parrilla el$ctrica Portao!jetos Cu!reo!jetos Carm'n ac$tico Procedimiento !tenci#n de c$lulas de ce!olla en mitosis 1. dejando s#lo un 6ra-mento de unos 3 o ( mm.tremidad de la ra'&. de lon-itud. 8ranscurrido este tiempo retirar la ra'& con unas pin&as y colocar so!re el portao!jetos. (. cada una con su nFcleo. Cuando la ra'& 4a alcan&ado el tamaAo adecuado. Este se contrae di"idiendo la c$lula en dos c$lulas 4ijas. En c$lulas animales. alrededor del centro de la c$lula. a temperatura am!iente.

0 continuaci#n aAadir una -ota de carm'n ac$tico so!re el !orde del cu!re y presionar 4asta ?ue el colorante no impre-ne el tejido. de cada una de ellas. • C$lulas más -randes. !ser"aci#n de c$lulas mit#ticas 1. pero de -randes nFcleos teAidos de rosa. y ?ue los nFcleos presentan los cromosomas de color rojoS"ioláceo so!re 6ondo sin pi-mentar. 2. Depositar encima de la punta de la ra'& un cu!reo!jetos y presionar con la e. Eay ?ue distin-uir tres tipos de c$lulas> • C$lulas de menor tamaAo. <on las c$lulas de la co6ia. Con"iene esco-er una re-i#n en ?ue las c$lulas no se 4ayan teAido demasiado. Ele-ir la &ona de c$lulas meristemáticas y o!ser"ar a mayor aumento. alar-adas y con nFcleos más pe?ueAos. !ser"aciones> . <on las c$lulas meristemáticas. de nFcleos pe?ueAos. • C$lulas o"oideas. pero ?ue se tiAen intensamente. indicando el aumento. Poner la preparaci#n en el microscopio y o!ser"ar al principio con aumento moderado. con -ran acti"idad mit#tica. 8ienen citoplasma denso y están dispuestas en 6ilas. <e "erán c$lulas dispersas por todo el campo de o!ser"aci#n. Corresponden a c$lulas ya di6erenciadas. 7econocer c$lulas meristemáticas en las distintas 6ases de la mitosis y reali&ar un di!ujo.tremidad plana de un lápi&.). 3. 1.

E. . 2.plica la di6erencia entre mitosis y meiosis. E.plica de manera !re"e las 6ases del ciclo celular. De6ine mitosis y e. 3.Conclusiones> Cuestionario> 1.plica cada una de sus etapas.

4emato.1 a 1. @ije $ste a la 6lama.ual 0 se de6ine como un corpFsculo intranuclear. "erde de metilo y orce'na. 8iAa con acetoorce'na al /.*P durante * minutos. 2 C7 M08IN0 <E3:0= 3 EN CE=:=0< EN CE=:=0< DE =0 M:C <0 5:C0= DE E:M0N !jeti"o> !ser"ar el corpFsculo de 5arr. Está presente en la mayor'a de las c$lulas de mujeres normales. @undamento =a cromatina se. de 6orma planocon"e. =os corpFsculos de 5arr pueden ser teAidos con un -ran nFmero de colorantes nucleares como "ioleta de cresilo. desteAir con alco4ol acidulado para o!tener el contraste adecuado. !ser"e al microscopio. Con un a!atelen-uas realice un raspado de la mucosa oral. =a cromatina 3 corresponde a la condensaci#n de uno de los cromosomas 3 en la mujer. durante 3 minutos en cada una. lue-o al %) y 6inalmente al 1//P. Colo?ue el raspado en un portao!jetos y realice un 6rotis.ilina. tionina.2 Nm de diámetro. Procedimiento Enjua-ue su !oca antes de iniciar la práctica.P70C8IC0 No.ual en c$lulas 4umanas. =as c$lulas ?ue contienen uno o más -ránulos Gcromatinas 3H se dice ?ue son cromatina 3 positi"as y a?uellas ?ue no la tienen son cromatina ne-ati"as. <i las c$lulas están so!reteAidas. Des4idrate con soluciones de alco4ol primero al 1/. !ser"aciones . correspondiente a la cromatina se.a de /.

+0 ?u$ tipo de cromatina pertenece este corpFsculo. +^u$ di6erencia 4ay entre el nucleolo y el corpFsculo de 5arr. (. 3. Mencione dos s'ndromes en 4umano y si presentar'an corpFsculo de 5arr en las c$lulas de estos indi"iduos. . *. +^u$ si-ni6icar'a ?ue en las c$lulas de un indi"iduo 6enot'picamente masculino se encontrara un corpFsculo de 5arr. 2.Cuestionario 1. +Con ?u$ estudio se podr'a corro!orar el resultado anterior.

D. . and `atson. 7o!erts. D... 0<M Press. McOraCSEill Interamericana.. WipursDy. Matsudaira.. P.E. =. 5iolo-'a Celular y Molecular.<. and Darnell. @reeman and Company. 0. E. 9. 5. Q. 84e Cell. O. O. 2//2. 84ird Edition.M. 9. Cooper. =eCis. 7a66. <inauer. 5ray. 9. 0l!erts.. D. Molecular 5iolo-y o6 t4e Cell.5i!lio-ra6'a Qarp. Molecular Cell 5iolo-y. =odis4.. M.. 0 Molecular 0pproac4. 5altimore.. 5erD. Oarland Pu!lis4in-..

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