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Elvira Garza Gonzlez Departamento de Microbiologa Facultad de Medicina Universidad Autnoma de Nuevo Len
VI Congreso Regional de Qumicos Farmacuticos Bilogos Biblioteca Universitaria Ral Rangel Fras 25 27 de Agosto de 2004
Helicobacter pylori
Resea histrica Aspectos bacteriolgicos
Enfermedades
Diagnstico
Resea histrica
1893 1906 1939 1975 1983 Bizzozero Krienitz Doenges Observ espiroquetas en la mucosa gstrica de perros Observ espiroquetas en pacientes con cncer gstrico Espiroquetas en el estmago de humanos
Steer & Colin-Jones Bacterias en las clulas epiteliales de pacientes con lcera gstrica Warren & Marshall Cultivo de organismos espirales en biopsias gstricas
De Campylobacter a Helicobacter
Inicialmente se pens que poda ser una nueva especie del gnero Campylobacter. El anlisis de secuencias del cido ribonucleico ribosomal 16S (RNAr) permiti demostrar que Campylobacter y Helicobacter son dos gneros diferentes. Desde 1989 se le considera la especie tipo de un nuevo gnero: Helicobacter.
El descubrimiento de que H. pylori estaba implicado en diferentes patologas gstricas, represent UN CAMBIO CONCEPTUAL, ya que era la primera vez que una bacteria se consideraba causante de un proceso gstrico que anteriormente era tratado de forma PALIATIVA PERO NO CURATIVA
Helicobacter pylori
Bacilos Gram negativos espirales o curvos. Son catalasa, oxidasa y ureasa positivos. Son microaerofilos y mviles por mltiples flagelos monopolares.
Murray, P.R. 1999. Manual of Clinical Microbiology. ASM
Coloniza principalmente el antro del estmago, aunque tambin puede infectar el cuerpo, fondo o desplazarse al duodeno.
Fondo
Antro
Cuerpo
Mucosa Epitelio
Hemoglobina
Hemolisinas
Clin. Micorbiol Rew. 1997. 10:720720-41 Murray, P. R.. et al. 1997. Microbiologa Mdica. 2a ed.
INFECCIN POR H. pylori Coloniza el epitelio gstrico. NO INVADE. Ocasiona una fuerte respuesta inflamatoria. Gastritis PERSISTENTE Y ASINTOMTICA en el 90% de los individuos. No se conoce que factores participan para que un individuo desarrolle sntomas y otro no.
Clin. Micorbiol Rew. 1997. 10:720-41
lcera duodenal y gstrica H. pylori est presente en el 95% de los pacientes con lcera duodenal y en el 50-70%% de pacientes con ulcera gstrica.
Cncer gstrico
La infeccin por H. pylori representa un riesgo entre 6 veces mayor al desarrollo de cncer.
Frequencia (%)
C-Terminal
Ciertos genotipos de vacA estn asociados con lugares geogrficos especficos El genotipo de vacA s1 est asociado al desarrollo de enfermedad
Francia e Italia
OBJETIVO Determinar la prevalencia de los genotipos de vacA de Helicobacter pylori y su asociacin con expresin clnica.
MTODOS
Biopsias Biopsias de deantro antro
Cultivo Cultivo
Extraccin Extraccin DNA DNA por por el el mtodo mtodo de defenol-cloroformo fenol-cloroformo
Secuencia (5 3') Producto de PCR (pb) GTCAGCATCACACCGCAAC 190 CTGCTTGAATGCGCCAAAC AGCGCCATACCGCAAGAG 187 GCTAACACGCCAAATGATCC 199 GGTCAAAATGCGGTCATGG 290 CCATTGGTACCTGTAGAAAC GGAGCCCCAGGAAACATTG 352 CATAACTAGCGCCTTGCAC Atherton et al. 1995. J. Biol. Chem. 270:17771-7.
Condiciones de la PCR
(30 ciclos) Desnaturalizacin Alineacin Extensin 94C, 1 min 52C, 1 min 72C, 2 min
Deteccin de vacAs1a
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 c- c+ 1000 bp 200 bp
s1a
s1b
s2
m1
m2
genotipo de vacA
Francia e Italia
Portugal y Espaa
s2 s1a
s1b
1
Noreste de Mxico
Factores de virulencia de H. pylori: cagA, vacA...... Medio ambiente: Dieta, tabaquismo..... Factores genticos del hospedero
Susceptibilidad del hospedero: Variaciones genticas en las citocinas que afectan (aumentan o reducen) su expresin y actividad y por lo tanto la intensidad de la respuesta.....
Xu et al., Nature 408, 111-115(2000)
Normal Normal
Gastritis Gastritiscrnica crnica activa activa Gastritis Gastritis atrfica atrfica Metaplasia Metaplasiaintestinal intestinal
?
Displasia Displasia
Cncer Cncer
antral
de cuerpo
Medicamentos
ANTECEDENTES
Cromosoma 2
Familia IL-1
IL-1RII IL-1RI
IL-1RN
IL-1B
31 TC
IL-1A
Genotipo IL-1B-31*C
IC 95% (1.2-2.2)
OBJETIVO
Estudiar el papel de los polimorfismos IL-1B-31, como factores de riesgo para el desarrollo de cncer gstrico distal en una poblacin mexicana.
MTODOS
Poblacin de estudio: 328 pacientes de Monterrey, Nuevo Len, Mxico.
Media edad Cncer gstrico distal (n= 61) Controles sin cncer (267) 58.4 50.8
METODOS
ENDOSCOPA: Obtencin de biopsias Examen histolgico SANGRE COMPELTA
Extraccin de DNA
Genotipificacin de IL-1B-31
Polimorfismo IL-1B-31*C
p <0.01
CONCLUSIN
Los genotipos de IL-1B-31 incrementan el riesgo al desarrollo de cncer gstrico distal en nuestra poblacin.
Genetica
Drogas
AISLAMIENTO
Oxidasa
Ureasa
Agar Columbia con sangre al 10% e incubacin en microaerobiosis a 37C por 3 a 5 das.
Catalasa
Ureasa
Urea + indicador de pH
Deteccin de anticuerpos
ELISA Western-blot