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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae
CODI/O: +NL2R0%.00%.1030200$ VERSION: 00

Instituto Nacional de Salud

______________________________________________________________ ______________

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD


REDES EN SALUD PBLICA REFERENCIA EN SALUD PBLICA

AUTORES:
+ARIA ELENA REALPE D.4 COORDINADORA /RUPO DE +ICROBILO/5A LUC6 AN/ELINE +ONTA7O V.4 PROFESIONAL /RUPO DE +ICROBIOLO/5A

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

AGOSTO ! 2011

TABLA DE CONTENIDO %. $. 3. In8r)d0ccin O*9e8i#) A-cance de- "an0aRes )nsa*i-idad 3 & 1 1 1 1 1 ; ; ( ( < < < ? %3 %3 %& %& $( $( $( $< 3$ 3$ 33 3( 3? &0 &0 &$ &3 &3 && 3 3 3 3

4.
1. ;. (. <.

De:inici)nes C)ndici)nes /enera-es F0nda"en8)s B0enas rc8icas de -a*)ra8)ri) 9. +a8eria-es e=0i )s > reac8i#)s ?.% +a8eria-es ?.$ E=0i )s ?.3 Reac8i#)s ?.& +an0a-es %0. C)n8enid) 10.1 E ide"i)-)gia %0.$ Diagn)s8ic) %0.$.% Diagn)s8ic) )r -a*)ra8)ri) de -a en:er"edad diarreica *ac8eriana ag0da %0.$.%.% T)"a > r)cesa"ien8) de -as "0es8ras de "a8eria :eca%0.$.$ Rec0 eracin e iden8i:icacin %0.3 /ener) Salmonella %0.3.% /enera-idades %0.3.$ Diagn)s8ic) *ac8eri)-gic) %0.3.3 Iden8i:icacin ser)-gica %0.& /ener) Shigella %0.&.% /enera-idades %0.&.$ Diagns8ic) *ac8eri)-gic) > di:erenciacin de es ecie %0.&.3 Iden8i:icacin ser)-gica %0.1 Vibrio cholerae %0.1.% /enera-idades %0.1.$ Diagns8ic) *ac8eri)-gic) %0.1.3 Iden8i:icacin ser)-gica %0.1.& O8ras carac8er,s8icas de Vibrio cholerae %0.; Pr0e*a de s0sce 8i*i-idad an8i"icr)*iana %0.;.% Pr0e*a de di:0sin en disc) en agar @ir*>2Ba0er %0.;.%.% Lec80ra de -)s res0-8ad)s %0.;.%.$ F0en8es de err)r > -i"i8aci)nes de- "A8)d) %0.;.$ Pr0e*a se"i2a08)"a8iBada C+icr)ScanD %0.;.3 E! resin de res0-8ad)s

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%%. %$. %3. %&. %0.( Tra8a"ien8) D)c0"en8)s de re:erencia C)n8r)- de regis8r)s C)n8r)- de re#isi)nes Ane!)s 1. INTRODUCCION En -a E-8i"a dAcada de- sig-) FF -a En:er"edad Diarreica Ag0da GEDA2 :0e 0n) de -)s r)*-e"as de sa-0d E*-ica "s seri)s en -)s a,ses en desarr)--) > se c)ns8i80>e en 0na de -as rinci a-es ca0sas de en:er"edad > "0er8e en -)s niH)s "en)res de 1 aH)s4 c)n 0na 8asa de ")r8a-idad de a r)!i"ada"en8e 34$ "i--)nes )r aH) C%D. E- r)*-e"a radica en e- e-e#ad) nE"er) de cas)s =0e se resen8an an0a-"en8e > en -)s gas8)s =0e genera e- 8ra8a"ien8) "Adic) genera- ) es ec,:ic) en -)s en:er")sI en r)"edi)4 -)s niH)s adecen 343 e is)di)s de diarrea a- aH)4 er) en a-g0nas reas4 --ega a ? e is)di)s C$D. Es8) a esar de -)s grandes es:0erB)s > -)gr)s =0e4 desde -a ers ec8i#a de -a sa-0d E*-ica se han i" -e"en8ad)4 > a esar de -)s r)gres)s rea-iBad)s desde %?<04 -as en:er"edades diarreicas )casi)nan e- %(J de -as "0er8es de "en)res de cinc) aH)s C3D. La e8i)-)g,a de -a EDA 0ede ser #ira-4 *ac8eriana ) arasi8aria. E- c) r)c0-8i#) es e- "A8)d) de -a*)ra8)ri) )r "edi) de- c0a- se a,s-an -as *ac8erias a8genas in8es8ina-es ara s0 iden8i:icacin > ara -a de8er"inacin de s0 s0sce 8i*i-idad a -)s an8i*i8ic)s. E- -a*)ra8)ri) c-,nic) de r08ina genera-"en8e es8 e=0i ad) ara ais-ar Salmonella s .4 Shigella s ., > Vibrio cholerae. Desde %??(4 e- /r0 ) de +icr)*i)-)g,a c)n e- a )>) de- -a OrganiBacin Pana"ericana de -a Sa-0d GOPS24 rea-iBa > c))rdina e- r)gra"a en red c)n -)s -a*)ra8)ri)s de Sa-0d PE*-ica CLSPD de- a,s4 ara -a #igi-ancia de -)s ser)8i )s > -)s a8r)nes de resis8encia an8i"icr)*iana de -)s rinci a-es a8gen)s ca0san8es de en:er"edad diarreica ag0da4 en8re -)s =0e se enc0en8ra Salmonella s .4 Shigella s .4 > Vibrio cholerae. 2. OB#ETI$O Es8a*-ecer -as 8Acnicas de c)n:ir"acin de Salmonella s .4 Shigella s > Vibrio cholerae e" -eand) r)cedi"ien8)s de iden8i:icacin *i)=0,"ica4 de8er"inacin de ser)8i )s "edian8e -a ser)8i i:icacin > er:i-es de s0sce 8i*i-idad an8i"icr)*iana en e- La*)ra8)ri) de- /r0 ) de +icr)*i)-)g,a4 SRNL de- Ins8i808) Naci)nade Sa-0d. ". ALCANCE DEL MANUAL Es8e d)c0"en8) se a -ica c)") Enica re:erencia ara e- r)cedi"ien8) de c)n:ir"acin de ais-a"ien8)s de Salmonella s .4 Shigella s ., > Vibrio cholerae a 8ra#As de "A8)d)s de Iden8i:icacin c)n r0e*as *i)=0,"icas4 ser)8i i:icacin > s0sce 8i*i-idad an8i"icr)*iana. %. RESPONSABILIDAD La res )nsa*i-idad de- resen8e d)c0"en8) es de- c))rdinad)r4 r)gra"a de EDA. r):esi)na-es > c)n8ra8is8as encargad)s de&& && &1 &; &;

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
&. DEFINICIONES Antgeno Bacteriano: ")-Ac0-a =0e 8iene -a ca acidad de ind0cir 0na res 0es8a in"0ne > ser rec)n)cida 8an8) )r 0n an8ic0er ) CAcD c)") )r cA-0-as resen8ad)ras de an8,gen)s CAgD. Antimicrobiano: r)d0c8) :ar"ac)-gic) =0e 8iene ca acidad de e-i"inar ) inhi*ir e- creci"ien8) de 0n "icr))rganis"). Coprocultivo: sie"*ra de 0na e=0eHa can8idad de "a8eria :eca- en 0n "edi) de c0-8i#) se-ec8i#) de8er"inar -a resencia de gAr"enes en8er) a8gen)s. ara

Etiologa: 0sad) c)n en:er"edades ara agen8es ca0sa-es inc-0>end) "icr))rganis")s. Inc-0>e :ac8)res a"*ien8a-es > s)cia-es > h*i8)s ers)na-es c)") :ac8)res c)n8ri*0>en8es. Medios de Cultivo: c0a-=0ier re aracin -,=0ida ) s-ida hecha es ec,:ica"en8e ara c0-8i#)4 a-"acena"ien8) ) 8rans )r8e de "icr))rganis")s 0 )8r)s 8i )s de cA-0-as. La #ariedad de -)s "edi)s =0e e!is8en er"i8en ec0-8i#) de "icr))rganis")s > 8i )s de cA-0-as es ec,:ic)s4 c)") "edi)s di:erencia-es4 "edi)s se-ec8i#)s4 "edi)s de 8es8 > "edi)s de:inid)s. L)s "edi)s s-id)s es8n c)ns8i80id)s )r "edi)s -,=0id)s =0e han sid) s)-idi:icad)s c)n 0n agen8e c)") e- Agar ) -a /e-a8ina. Morbilidad: r) )rcin de acien8es c)n 0na en:er"edad ar8ic0-ar d0ran8e 0n aH) :i9ad) )r 0na de8er"inada 0nidad de )*-acin. Mortalidad: c)nce 8) es8ad,s8ic) ara de8er"inar "0er8es ca0sadas 0 )c0rridas en 0n e#en8) es eci:ic) c)n en:er"edades. Prevalencia: nE"er) de cas)s de en:er"edad ) de ers)nas en:er"as4 ) de c0a-=0ier )8r) :en"en) Ce9.: acciden8esD regis8rad)s en 0na )*-acin de8er"inada4 sin dis8incin en8re cas)s n0e#)s > an8ig0)s. Pre#a-encia se re:iere a 8)d)s -)s cas)s 8an8) n0e#)s c)") #ie9)s4 a- as) =0e4 incidencia se re:iere s)-) a n0e#)s cas)s. La re#a-encia 0ede re:erirse a 0n ")"en8) dad) C re#a-encia ")"en8neaD4 ) a 0n er,)d) de8er"inad) C re#a-encia d0ran8e cier8) er,)d)D. Pruebas bio umicas: "edi)s de c0-8i#)s -,=0id)s ) s-id)s =0e c)n8ienen s0s8ancias es ecia-es de enri=0eci"ien8)4 s0 -e"en8)4 =0e a- ser in)c0-ad)s er"i8en -a di:erenciacin de -a *ac8eria. Pruebas de Sensibilidad Microbiana: c0a-=0ier r0e*a =0e de"0es8re -a e:icacia re-a8i#a de -)s di:eren8es agen8es =0i"i)8era A08ic)s c)n8ra "icr))rganis")s es ec,:ic)s Ces decir4 *ac8erias4 h)ng)s4 #ir0sD. !esistencia Microbiana: ca acidad de -)s "icr))rganis")s4 en es ecia- -as *ac8erias4 de resis8ir ) 8)-erar :r"ac)s =0i"i)8era A08ic)s4 an8i"icr)*ian)s ) an8i*i8ic)s. Es8a resis8encia 0ede ser ad=0irida a 8ra#As de "08acin gAnica ) ADN e!8raH) en -s"id)s 8rans"isi*-es :ac8)res R. Serotipi"icaci#n: 8Acnica 08i-iBada ara -a de8eccin de an8,gen)s *ac8erian)s es ec,:ic)s Cs)"8ic)s4 :-age-ares > ca s0-aresDI iden8i:icad)s c)n an8is0er)s ")n) > )-i#a-en8es. Vigilancia Epidemiol#gica: c)n90n8) de ac8i#idades =0e er"i8e re0nir -a in:)r"acin indis ensa*-e ara c)n)cer -a c)nd0c8a ) -a his8)ria na80ra- de -as en:er"edades4 as, c)") de8ec8ar ) re#er a-8eraci)nes de s0s :ac8)res c)ndici)nan8es4 c)n e- :in de rec)"endar -as "edidas indicadas > e:icien8es =0e c)nd0Bcan a -a re#encin > a- c)n8r)- de de8er"inad)s agra#i)s.

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
'. CONDICIONES GENERALES Re"i8irse a- n0"era- < de- resen8e d)c0"en8). (. FUNDAMENTOS Cada r0e*a 8iene s0 :0nda"en8). CVer ane!)sD. ). BUENAS PR*CTICAS DE LABORATORIO E" -e) de n)r"as de *i)seg0ridad4 c)ndici)nes de -i" ieBa4 sani8iBacin de- rea > "a8eria-es de 8ra*a9). Ver "an0a- /enera- de Bi)seg0ridad +MNL,A0&.001.0000,001-4 ins8r0c8i#) de -a#ad) de "a8eria- +INT, R01.001.&0"0,00%-4 ins8r0c8i#) c)n8r)- de e=0i )s > r)cedi"ien8)s en -as de8er"inaci)nes "icr)*i)-gicas +INT,R01.001.&0"0,00)-4 -i" ieBa en e- -a*)ra8)ri) de "icr)*i)-)g,a +INT,R01.001.&0"0,00"-, "an0a- de ges8in in8egra- de resid0)s +MNL,A0&.002.0000,001-.

9. MATERIALES E.UIPOS / REACTI$OS


9.1. M01!2304!s Asas *ac8eri)-gicas Ca9as de Pe8ri L"inas )r8a )*9e8)s L"inas de #idri) de $0!$0 c" /radi--as P0n8as -s8icas aB0-es > a"ari--as Pi e8as Pas8e0r de #idri) > -s8icas +echer)s Pa-i--)s de "adera Ser#i--e8as de a e Er-en"e>er de %000 "L T0*)s :a-cn de 10 "L T0*)s de @ahn C%0!(1 ""D -i" i)s4 sec)s > es8Ari-es Frasc)s "*ar T0*)s cri)#ia-es $" Ca9as ara 80*)s cri)#ia-es Esc)*i--)nes es8Ari-es ).2. E563p7s Inc0*ad)ra a 31KC +icr) i e8as a08)"8icas de %00 a%000L- > de $ a $0L +icr)sc) i) P)8enci"e8r) A08)c-a#e BaH) ser)-gic) a 10KC

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Es80:a Ba-anBa V)r8e! L" ara de c0e--) :-e!i*-e ara -eer ag-08inaci)nes Ca*ina de :-09) -a"inar C0ar8) :ri) a &KC Li):i-iBad)r C)nge-ad)r a G (0)C ).". R!081397s +edi) de 8rans )r8e Car>2 B-air C Ver ane!) % D Ca-d) se-eni8) cis8ina C Ver ane!) $D Agar FLD C Ver ane!) 3D Agar MeN8)en C Ver ane!) &D Agar TCBS C Ver ane!) 1D Ag0a e 8)nada C Ver ane!) ;D Agar BMI G C Ver ane!) ( D Agar Ci8ra8) C Ver ane!) <D Agar TSI C Ver ane!) ?D Agar LIA C Ver ane!) %0D Agar UREA C Ver ane!) %%D Agar +)8i-idad /I C Ver ane!) %$D Agar Ace8a8) C Ver ane!) %3D Ca-d) A"in)cid)s CVer ane!) %&D Ca-d) aB0cares r)9) :en)- CVer ane!) %1D +a-)na8) C Ver ane!)%;D Ca-d) Ind)- C Ver ane!) %(D Ca-d) VP C Ver ane!)%<D Agar T,:ica C Ver ane!) %?D Ca-d) EdgOins CVer ane!) $0D S)-0cin sa-ina :)r")-ada a- <P C Ver ane!) $%D Midr)c-)r0r) 8e8ra"e8i-2 2:eni- dia"ina C r0e*a de )!idasaD C Ver ane!) $$D Des)!ic)-a8) de s)di) C r0e*a de -a c0erdaD C Ver ane!) $3D Ca-d) c-)r0r) de s)di)4 di:eren8es c)ncen8raci)nes C Ver ane!) $&D Agar +0e--er2 Min8)n C Ver ane!) $1D S)-0cin sa-ina n)r"a- 0.<1J CVer ane!) $;D +edi) -eche descre"ada C Ver ane!) $(D Diagra"as de :-09) C Ane!)s $<23&D An8is0er)s s)"8ic)s > :-age-ares Salmonella s . An8is0er)s s)"8ic)s Shigella s . S)-0cin de hi )c-)ri8) de s)di) a- 041J ara descar8ar -as -"inas4 i e8as > 80*)s. C)-)ran8es: Tincin de /ra".CINT2R0%.00%.1030200%D Reac8i#)s sis8e"a +icr)Scan. CINT2R0%.00%.1030200$D ).%. M0:604!s

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Es56!;0 ! <06==;0::,>?31! CP) ):4 +.6.4 <Q Ed4 RMO Cen8re :)r Re:eren8e and Research )n Sa-")ne--a4 Ins8i808) Pas8e0r4 Par,s4 Francia4 $00(D. C7472083@: ! G20; CINT2R0%.00%.1030200%D Sis8e"as de iden8i:icacin c)"ercia- +icr)Scan CINT2R0%.00%.1030200$D MA17 7s ! 40B72017237 p020 !4 30C:@s1387 ! Vibrio cholerae CDC 'NCID OPS4 Rashing8)n4 D.C.4 Es8ad)s Unid)s de A"Arica. %??&.

10. CONTENIDO 10.1. EPIDEMIOLOGIA Desde e- 0n8) de #is8a e ide"i)-gic) -as in:ecci)nes )r Salmonella 0eden ca0sar *r)8es en -a )*-acin en genera-4 sin e"*arg) ;0 G <0J de -)s cas)s s)n es )rdic)sI a #eces se r)d0cen grandes *r)8es en h)s i8a-es4 g0arder,as4 *a8a--)nes > res8a0ran8es. La :0en8e "s :rec0en8e de in:eccin s)n -)s a-i"en8)s c)n8a"inad)s en s0 )rigen ) c)n "en)r :rec0encia d0ran8e s0 "ani 0-acin )r 0n )r8ad)r4 es 8a"*iAn i" )r8an8e -a 8rans"isin de ers)na a ers)na. SegEn in:)r"es de -a OrganiBacin +0ndia- de -a Sa-0d GO+S24 -a re-acin en8re -)s cas)s de :ie*re 8i:)idea > ara8i:)idea es %0:%. Es8as ser)#ariedades ca0san 0n c0adr) :e*ri- r)-)ngad) c)n se 8ice"ia > c)" r)"is) de- 8e9id) -in:8ic). E- er,)d) de inc0*acin de -a :ie*re 8i:)idea es de % a 3 se"anas4 c)n 0n rang) de 3 a 1; d,as4 de endiend) de -a d)sis in:ec8an8e C3D. Las es ecies de- gener) Shigella es8n en8re -as *ac8erias "s :rec0en8e"en8e ais-adas de acien8es c)n diarrea. SegEn -a O+S en e- $00$ de- 1 a- %1J de e is)di)s diarreic)s en e- "0nd) s)n a8ri*0id)s a es8e "icr))rganis")4 inc-0>end) %4% "i--n de cas)s :a8a-es d)nde -)s niH)s "en)res de cinc) aH)s s)n -)s "s a:ec8ad)s C1D. En8re 8an8) Vibrio cholerae$ ha ca0sad)4 segEn ci:ras de -a O+S en8re 3 > 1 "i--)nes de cas)s de c-era > en8re %00 > %$0 "i- de:0nci)nes )r aH). Es8) se de*e a -a inges8a de a-i"en8)s ) ag0as c)n8a"inadas =0e 8iene 0n *re#e eri)d) de inc0*acin =0e #ar,a en8re $ h)ras a cinc) d,as > s0"ad) a es80di)s recien8es =0e indican =0e e- ca-en8a"ien8) de- -ane8a crea 0n a"*ien8e :a#)ra*-e ara -)s *aci-)s4 )casi)nand) 0n incre"en8) de- riesg) a resen8arse *r)8es e idA"ic)s. Den8r) de -a #igi-ancia )r -a*)ra8)ri) de -)s en8er) a8gen)s ca0san8es de EDA C Salmonella s .4 Shigella s .4 Vibrio cholerae rea-iBada en e- /r0 ) de "icr)*i)-)g,a4 SRNL c)n -a ar8ici acin de -)s La*)ra8)ri)s de Sa-0d PE*-ica CLSPD4 de Salmonella s . se han reci*id) e- "a>)r n0"er) de ais-a"ien8)s ara s0 c)n:ir"acin > carac8eriBacin :en)8, ica > gen)8, ica4 en e- cas) de Vibrio cholerae -)s da8)s de -a #igi-ancia indican =0e es e- seg0nd) en i" )r8ancia er) ca*e rec)rdar =0e es8as ci:ras c)rres )nden a -a e ide"ia de %??0 a %??< > -)s cas)s ais-ad)s =0e se resen8ar)n )s82e ide"ia CTa*-a %D. T0B40 1. Da8)s de -a Vigi-ancia )r -a*)ra8)ri) de Salmonella s e ide"ia de c-era %??% a $00&. .4 > Shigella s .4 desde %??( a $0%0 >

$3C340:830 p72 40B72017237 ! !:1!27p01@C!:7s 199(,2010 Salmonella s &(<0 .a Shigella s .a 301( Vibrio cholerae &30&
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Mas8a dicie"*re 3% de $0%0 E ide"ia de %??% G %??< > cas)s ais-ad)s has8a $00&. F0en8e: /r0 ) de +icr)*i)-)g,a SRNL.

10.2.

DIAGNSTICO 3022!380 B081!230:0 0C6 0

10.2.1. D30C:7s1387 p72 !4 40B72017237 ! 40 !:=!2;! 0 %0.$.%.%. M6!s120s 0 !860 0s

T)"a > r)cesa"ien8) de -as "0es8ras de "a8eria :eca-.

N) c)n8a"inada c)n )rina Fresca: se reci*e en 0n 8ie" ) "en)r a $ h)ras des 0As de s0 e#ac0acin. T)"ada )r :r)8is rec8aC)n8enid) d0)dena-4 de c)-)s8)",a ) i-e)s8)",a.

M6!s120s 3:0 !860 0s S0e n) han sid) reser#ada en 0n "edi) de 8rans )r8e adec0ad) > =0e 8ienen "s de $ h)ras de ha*er sid) rec)-ec8ada. Mis) )s sec)s c)n "0es8ras de :r)8is rec8a+E-8i -es "0es8ras reci*idas e- "is") d,a.

T7;0 ! 40 ;6!s120 La "0es8ra de*e ser 8)"ada en 0n reci ien8e -i" i)4 -i*re de reser#a8i#)s > de8ergen8es4 sec)4 de *)ca ancha c)n 8a a. N) es necesari) =0e sea es8Ari-. En a-g0n)s cas)s e- :r)8is rec8a- es "s e:icaB =0e -as heces4 ar8ic0-ar"en8e en -)s reciAn nacid)s ) en -)s acien8es ad0-8)s se#era"en8e de*i-i8ad)s > en -)s cas)s =0e se re=0iera e- ais-a"ien8) de Shigella s .4 de*id) a =0e e- :r,) > -a desecacin s)n :ac8)res ad#ers)s ara -a rec0 eracin de es8e "icr))rganis"). C)n re-acin a- #)-0"en4 de % a $ gra")s de "a8eria :eca- s)n s0:icien8es. T20:sp721! ! 40 M6!s120 7 03s40;3!:17. I" regne e- his) ) c)n -a "a8eria :eca- d)nde se )*ser#e ")c) c)n sangre e- his) ) direc8a"en8e derec8)4 -) c0a- es idea- c0and) se s)s echa Shigella s . Inser8e e- his) ) en e- 8erci) s0 eri)r de- "edi) de 8rans )r8e de CAR/ BLAIR. C)r8e -a )rcin s)*ran8e de- a-) de- his) ) > a90s8e :0er8e"en8e -a 8a a de- 80*) Ces8) 0s0a-"en8e e" 09a e- his) ) hacia a*a9) > -) de9a en e- cen8r)D.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 9 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
En#iA -a "0es8ra a- -a*)ra8)ri) de- /r0 ) de +icr)*i)-)g,a en e- "edi) de 8rans )r8e a 8e" era80ra a"*ien8e an8es de &< h)ras. N) de*e ser inc0*ad)4 ni re:rigerad). Re",8a-) c)n e- :)r"a8) de en#i RE/2R0%.00%.1030200& ED0;!: 32!817: N) se rea-iBa.

10.2.2. R!86p!2083@: ! 3 !:13=38083@: Para -a rec0 eracin de Salmonella s ., % Shigella s .4 se rea-iBa e- c) r)c0-8i#)I d)nde -as "0es8ras se de*en re2enri=0ecer en 0n ca-d) se-eni8) cis8ina4 se-eni8) F4 ) ca-d) de 8e8ra8i)na8) c)n e- :in de -)grar -a rec0 eracin de -)s a8gen)s en8Aric)s c0and) s0 c)ncen8racin en -a "0es8ra es *a9a. Es8)s ca-d)s inhi*en e- creci"ien8) de -a :-)ra n)r"a- de- in8es8in) d0ran8e -as ri"eras < a %< h)ras de inc0*acin4 des 0As de es8e 8ie" ) -a ca acidad se-ec8i#a de- "edi) se ierde > e- ca-d) de*e ser descar8ad). E- c0-8i#) se rea-iBa en "edi)s se-ec8i#)s4 -)s rec)"endad)s s)n: e- agar FLD CFi-)sa Lisina Des)!ic)-a8)D > e- agar &e'toen Enteric CMED CFig0ra %D. F3C620 1. Pr)cesa"ien8) de c) r)c0-8i#) ara ais-a"ien8) de Salmonella s .4 > Shigella s .

P278!s0;3!:17 ! 87p278641397 p020 03s40;3!:17 ! Salmonella y Shigella


+a8eria :eca- ) :r)8is rec8a-

Se"*rar en ca-d) se-eni8) cis8ina Cinc0*ar a 3(KC ! <2%< M)rasD

Se"*rar )r ag)8a"ien8) enT: agar MecN8)en agar FLD Cinc0*ar a 3(KC ! %< G $& M)rasD

Se"*rar )r ag)8a"ien8) en: agar MecN8)en agar FLD Cinc0*ar a 3(KC ! %< G $& M)rasD

Se-ecci)nar 3 c)-)nias -ac8)sa nega8i#as ) r)d0c8)ras de M $S Rea-ice 0n es80di) res0n8i#) Sie"*re en: TSI 2 LIA 2 0rea Cinc0*ar a 3(KC ! %< G $& M)rasD Pres0n8i#) )si8i#): U TSI V @'A4 gas 4 M$S U LIA V @'@ ) @'A4 gas 4 M$ S U 0rea V nega8i#a

Pr0e*as *i)=0,"icas

Ser)8i i:ic acin

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 10 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

En e- cas) de Vibrio cholerae e- c) r)c0-8i#) se rea-iBa -a sie"*ra direc8a en e- agar se-ec8i#) de TCBS CTi)s0-:a8)4 ci8ra8) sa-es *i-iares > sacar)saD inc0*ar de %< a $& h)ras > e- re2enri=0eci"ien8) en ag0a e 8)nada a-ca-ina -a =0e se inc0*ara )r ; a < h)ras a 3(WC > resie"*ra de- ag0a e 8)nada en TCBS C:ig0ra $D. F3C620 2. Pr)cesa"ien8) de c) r)c0-8i#) ara ais-a"ien8) de Vibrio cholerae

P278!s0;3!:17 ! 87p278641397 p02 0 03s40;3!:17 ! Vibrio cholerae


+a8eria :eca- ) :r)8is rec8a-

Se"*rar en ag0a e 8)nada a-ca-ina Cinc0*ar de ; a < h)ras a 3(WCD

Se"*rar )r ag)8a"ien8) en: Agar TCBS Inc0*ar a 3(WC ! %< a $& h)rasD

Se"*rar )r ag)8a"ien8) en: Agar TCBS Inc0*ar a 3(WC ! %< a $& h)rasD

Se-ecci)nar 3 c)-)nias sacar)sa )si8i#a

Rea-ice 0n es80di) res0n8i#): Pr0e*a de )!idasa > c0erda

Ser)8i i:icacin: An8is0er) O%: P)si8i#) Pr0e*as c)n:ir"a8)rias

Pres0n8i#) )si8i#): O!idasa: P)si8i#a C0erda: P)si8i#a

I !:13=38083@: p2!s6:1390

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 11 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Para Salmonella s .4 > Shigella s .4 #er reacci)nes *i)=0,"icas. Ta*-a $. CAne!)s $2& > <2%$D Para Vibrio Cholerae re"i8irse gina 33 de- "an0a-.

T0B40 2. Pr0e*as *i)=0,"icas res0n8i#as ara -a di:erenciacin de Salmonella s Salmonella Para8> hi A > Shigella s . PRUEBA /ra": +)r:)-)g,a C)-)racin +acC)nNe> Lac8)sa MeN8)en En8eric2 Lac8)sa MeN8)en En8eric2 Lac8)sa' M$S FLD2 -ac8)sa FLD2 -ac8)sa'M$S FLD G decar*)!i-acin Lisina Ci8ra8) TSI /as M$S LIA Urea +)8i-idad Salmonella spp. Baci-)s Nega8i#a Nega8i#a Nega8i#a Nega8i#a' )si8i#a Nega8i#a Nega8i#a' )si8i#a P)si8i#a P)si8i#) @'A XX'XXX XXX'XXXX @'@ Nega8i#a P)si8i#a S. Typ?3 Baci-)s Nega8i#a Nega8i#a Nega8i#a Neg ' )s neg Nega8i#a Neg' )s neg P)si8i#a Nega8i#) @'A 2 X @'@ Nega8i#a P)si8i#a

.4 Salmonella T> hi4

S. P0201yp?3 A Baci-) Nega8i#a Nega8i#a Nega8i#a Nega8i#a' neg Nega8i#a Nega8i#a' neg Nega8i#a Nega8i#) @'A XX 2 @'A Nega8i#a P)si8i#a

Shigella sp. Baci-) Nega8i#a Nega8i#a Nega8i#a Nega8i#a' neg Nega8i#a Nega8i#a' neg Nega8i#a Nega8i#) @'A 2 2 @'A Nega8i#a Nega8i#a

C)n :rec0encia -)s ais-a"ien8)s de Shigella > Escherichia coli inac8i#a s)n di:,ci-es de di:erenciar )r r0e*as *i)=0,"icas r08inarias4 es )r ende =0e se rec)"ienda -a adicin de -as r0e*as de ace8a8)4 D2!i-)sa > D0-ci8)- ara -)grar -a di:erenciacin 8eniend) en c0en8a e- )rcen8a9e de )si8i#idad C&D C8a*-a 3D T0B40 ". Pr0e*as *i)=0,"icas ara -a di:erenciacin de Shigella > Escherichia coli inac8i#a P26! B0 A8!1017 D,D347s0 D6483174

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 12 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
M382772C0:3s;7 Shigella sonnei Shigella flexneri E. coli 3:081390 0 ) %0 2 2 (0 0 1 %0

I !:13=38083@: 87:=32;017230 De ac0erd) c)n -as reacci)nes )*ser#adas en e- res0n8i#) rea-iBar 0na *a8er,a *i)=0,"ica c)" -e8a a ar8ir de 0n agar BMI ) 0n agar de enri=0eci"ien8) ara 8ener 0na iden8i:icacin *i)=0,"ica c)" -e8a CAne!)s <2 %$4 $<23;D. C7;!:10237s Para -a iden8i:icacin :ina- de- ais-a"ien8) 8eniend) en c0en8a -as r0e*as *i)=0,"icas c)n:ir"a8)rias se de*e re"i8ir a -a 8a*-a de reacci)nes *i)=0,"ica de -as en8er)*ac8erias en e- +an0a- de +icr)*i)-)g,a C-,nica de -a S)ciedad A"ericana de +icr)*i)-)g,a. (th ed. )ashington *++,. p. -,./-0+ Para 0na "e9)r )rien8acin en -a iden8i:icacin re",8ase a -)s diagra"as de :-09) CAne!)s $<23;D L)s res0-8ad)s de -)s ensa>)s ana-,8ic)s se de*en regis8rar en e- c0adern) de Salmonella spp. REG, R01.001.&0"0,0%", Shigella sp. REG,R01.001.&0"0,0%% y Vibrio cholerae REG,R01.001.&0"0,0%& N710. Para 8)das -as r0e*as *i)=0,"icas4 )!idasa4 c0erda > ser)8i i:icacin de Vibrio cholerae4 se de*en hacer a ar8ir de 0n agar de enri=0eci"ien8). CBMI4 N08ri8i#) ) TSAD

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1" de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

10." GENERO SALMONELLA 10.".1 G!:!2043 0 !s Salmonella es 0n) de -)s rinci a-es a8gen)s en8Aric)s ca0san8e de en:er"edad diarreica en h0"an)s 8an8) en a,ses desarr)--ad)s c)") en #,as de desarr)--) C;D. La sa-")ne-)sis es 0na en:er"edad B))n8ica de dis8ri*0cin "0ndia- =0e es 8rans"i8ida )r -)s a-i"en8)s r)#enien8es de ani"a-es in:ec8ad)s4 inc-0>end) h0e#)s cr0d)s ) arcia-"en8e c)cid)s > s0s r)d0c8)sI carnes > s0s deri#ad)sI -eche cr0da > r)d0c8)s -c8e)sI ag0a c)n8a"inadaI a#es de c)rra- Ces ecia-"en8e )--) > a#)D. Es de in8erAs 8an8) en sa-0d E*-ica c)") en sa-0d ani"a- de*id) a- i" ac8) s)ci)ec)n"ic) =0e )casi)na C$D. Ade"s4 de endiend) de- 8a"aH) de- inc0-)4 :ac8)res de #ir0-encia > es8ad) in"0n)-gic) de- acien8e 0ede )casi)nar desde 0na gas8r)en8eri8is a08)-i"i8ada has8a 0na in:eccin se#era sis8A"ica =0e c)" r)"e8e -a #ida de- acien8e C(D. Tiene 0n er,)d) de inc0*acin de ; a ($ h)ras4 genera-"en8e en8re %$ a 3; h)ras > -a gas8r)en8eri8is ersis8e de $& a ($ h)ras L)s ani"a-es de gran9a ad=0ieren -a in:eccin a 8ra#As de s0s a-i"en8)s > de :er8i-iBan8es e-a*)rad)s c)n harinas de carne4 de escad) > de h0es)s c)n8a"inad)s. Es i" )r8an8e -a 8rans"isin ers)na a ers)na )r -a #,a :eca-2)ra-4 en es ecia- c0and) e!is8e diarrea. E- s,ndr)"e de :ie*re en8Arica es8 as)ciad) c)n Salmonella T> hi C:ie*re 8i:)ideaD4 Salmonella Para8> hi A4 B > C C:ie*re ara8i:)ideaD. Las ser)#ariedades T> hi4 Para8> hi A > C s)n a8gen)s e!c-0si#)s de- h)"*re > Salmonella Para8> hi B se 0ede enc)n8rar 8an8) en h)"*re c)") en ani"a-es. En -a 8a!)n)",a ac80a-4 se rec)n)cen s)-a"en8e d)s es ecies de- gAner) Salmonella: Salmonella en8Arica > Salmonella *)ng)ri. Sin e"*arg)4 0na n0e#a es ecie den)"inada S. subterr1nea 2(3 n) es 8)8a-"en8e rec)n)cida > s0 ace 8acin es c)n8r)#ersia- C?D4 S ent4rica es8 di#idida en seis s0*es ecies re:eridas )r n)"*res > nE"er)s r)"an)s de ac0erd) c)n di:erencias *i)=0,"icas > re-aci)nes genA8icas: S. en8erica CID4 S. sa-a"ae CIID4 S. ariB)nae CIIIaD4 S. diariB)nae CIII*D4 S. h)08enae CIVD4 > S. indica CVIDI cada s0*es ecie c)" rende n0"er)s)s ser)8i )s4 de8er"inad)s )r -a c)" )sicin de -)s an8,gen)s s)"8ic)s COD4 :-age-ares CMD ) de s0 er:icie Vi. Salmonella enterica s0* enterica c)" rende e- ??J de -)s ser)8i )s ais-ad)s de "0es8ras c-,nicas. Salmonella es e- gr0 ) "s c)" -e9) de 8)das -as en8er)*ac8erias c)n "s de $.1(? ser)8i )s descri8)s en e- es=0e"a de @a0::"an2 Rhi8e C?D. A "ediad)s de %?<34 e- CDC de A8-an8a ")di:ic e- in:)r"e de -a ser)8i i:icacin de -)s "icr))rganis")s iden8i:icad)s *i)=0,"ica"en8e c)") SalmonellaI As8)s de*en ser den)"inad)s )r gAner) > ser)8i )4 )"i8iend) -a re:erencia a -a es ecie4 )r e9e" -): NOMENCLATURA ACTUAL Salmonella ser)8i ) En8eri8idis NOMENCLATURA ANTERIOR Salmonella enterica ser)8i ) enteritidis

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1% de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Salmonella ser)8i ) T> hi"0ri0" Salmonella enterica ser)8i ) t%phimurium

En e- h)"*re -as in:ecci)nes )r Salmonella s)n c)"En"en8e ca0sadas )r -a inges8in de a-i"en8)s4 rinci a-"en8e h0e#)s > -)s r)d0c8)s e-a*)rad)s c)n As8)s4 c)") -a "a>)nesa. O8ra :0en8e -a c)ns8i80>e e- ag0a ) -a -eche c)n8a"inadas c)n e!cre8as de h0"an)s ) ani"a-es. Se rec)n)cen c0a8r) "ani:es8aci)nes c-,nicas de in:eccin )r Salmonella: -a gas8r)en8eri8is =0e es -a "ani:es8acin "s :rec0en8e4 -a *ac8ere"ia ) se 8ice"ia4 -a :ie*re en8Arica > e- es8ad) de )r8ad)rI en es8e E-8i")4 e- indi#id0) c)n 0na in:eccin re#ia4 es ecia-"en8e )r Salmonella T> hi4 0ede c)n8in0ar e!cre8and) e- "icr))rganis") en s0s heces has8a )r 0n aH). 10.3.2 D30C:@s1387 B081!2374@C387

E- diagns8ic) *ac8eri)-gic) se *asa en e- c) r)c0-8i#) an8eri)r"en8e "enci)nad)4 d)nde -as r0e*as *i)=0,"icas 8ienen 0n a8rn ar8ic0-ar C8a*-a $DI sin e"*arg) a-g0n)s ais-a"ien8)s s)n M$S nega8i#)s. L)s -a*)ra8)ri)s4 rea-iBan den8r) de -a #igi-ancia )r -a*)ra8)ri) -a iden8i:icacin has8a e- gAner) de Salmonella s .4 > de*id) a =0e es esencia- -a carac8eriBacin ser)-gica, )r s0 i" )r8ancia e ide"i)-gica4 se hace necesari) =0e TODOS -)s ais-a"ien8)s sean en#iad)s a- -a*)ra8)ri) naci)na- de re:erencia ara s0 ser)8i i:icacin. 10."." I !:13=38083@: s!274@C380 S!2713p3=38083@: La ser)8i i:icacin c)ns8i80>e 0n i" )r8an8e c)" -e"en8) de -a iden8i:icacin *i)=0,"ica de Salmonella s 4 > desde e- 0n8) de #is8a e ide"i)-gic) er"i8e de8er"inar -a re#a-encia de 0na ser)#ariedad en dis8in8as B)nas ge)gr:icas4 as, c)") 8a"*iAn es de 08i-idad ara e- es80di) de *r)8es > ara c)n)cer -a :0en8e de in:eccin > -as #,as de 8rans"isin. Adici)na-"en8e4 se 08i-iBan "A8)d)s de s0*8i i:icacin c)") -a e-ec8r):)resis de ca" ) 0-sad) CPF/ED4 ara es8a*-ecer -as re-aci)nes genA8icas en8re -)s ais-a"ien8)s > )r ende de:inir c)n "a>)r recisin s0s re-aci)nes e ide"i)-gicas. S0,"ica"en8e4 -)s Ag 0eden ser r)8e,nas4 hidra8)s de car*)n)4 c)" -e9)s de )-i A 8id)s > :)s:)-, id)s. C)") s)n ")-Ac0-as c)" -e9as 8ienen "s de 0na s0*es8r0c80ra =0e 0ede ser#ir c)") de8er"inan8e an8igAnic). De*id) a es8) en -)s s0er)s in"0nes se enc0en8ran an8ic0er )s =0e reacci)nan c)n8ra dis8in8)s de8er"inan8es an8igAnic)s de -a "is"a ")-Ac0-a. L)s ser)8i )s de Salmonella es8n de:inid)s c)n *ase en -a es8r0c80ra an8igAnica de -)s an8,gen)s s)"8ic) ) de -a ared ce-0-ar YOZ > :-age-ar YEZ. La :r"0-a an8igAnica en0ncia ri"er) e- an8,gen) s)"8ic) seg0id) )r -)s an8,gen)s :-age-aresI es8)s se enc0en8ran se arad)s )r $ 0n8)s > -)s :ac8)res an8igAnic)s se enc0en8ran se arad)s )r c)"as4 )r e9e" -): Salmonella T> hi"0ri0" O: %4&4[1\4%$:i:%4$. Signi:ica =0e -a ce a 8iene -)s :ac8)res an8igAnic)s s)"8ic)s %4&414%$I en -a ri"era :ase :-age-ar e- an8,gen) i4 > en -a seg0nda :ase :-age-ar -)s an8,gen)s %4$. A:1FC!:7s s7;G1387s +O-

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1& de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Es8n c)" 0es8)s )r c)" -e9)s de :)s:)-, id)s > )-isacrid)sI s0 c)" )sicin es a r)!i"ada"en8e: ;0J )-isacrid)s4 $0230J -, id)s > 3412&J he!)sa"ina. La cadena de )-isacrid)s de- Ag O es 0n )-,"er) de 0nidades re e8idas de )-ig)sacrid)s Cde 3 a 1 aBEcaresD -inea-es ) ra"i:icad)s. La na80ra-eBa de -)s gr0 )s 8er"ina-es > e- )rden en =0e se enc0en8ran -as 0nidades re e8idas de -a cadena de8er"ina -a es eci:icidad an8igAnica s)"8ica de -a *ac8eria. C)") As8a es8r0c80ra di:iere a" -ia"en8e en8re -as dis8in8as ser)#ariedades4 ha> di:erencias en -a es eci:icidad an8igAnica O. L)s an8,gen)s O s)n 8er")es8a*-es > es8n n0"erad)s de- %2;( en nE"er)s ar*ig)s. L7s 0:1FC!:7s O s! p6! !: 840s3=3802 87;7 =08172!s ;0y72!s y =08172!s ;!:72!s . F08172!s ;0y72!s4 iden8i:ican e- gr0 ) an8igAnic) OI )r e9e" -): Fac8)r O:&4 carac8eriBa e- an8,gen) O de Salmonella gr0 ) B. Fac8)r O:?4 carac8eriBa e- an8,gen) O de Salmonella gr0 ) D. L)s :ac8)res "a>)res s)n de8er"inad)s )r 0n gr0 ) de genes den8r) de- -)c0s r"b en e- cr)")s)"a. F08172!s ;!:72!s4 8ienen )c) ) ningEn #a-)r discri"ina8i#) )r=0e sie" re es8n as)ciad)s a )8r) :ac8)rI )r e9e" -): :ac8)r O:%$ sie" re es8 as)ciad) c)n -)s :ac8)res O:$4 O:& > O:?4 c)") se resen8a en: Salmonella Para8> hi A O:%4$412 Salmonella T> hi"0ri0" O:%4&41412 Salmonella En8eri8idis O:%4?412 L)s an8,gen)s "en)res 0eden de*erse a: L)s =0e s0rgen c)") c)nsec0encia de 0na ")di:icacin =0,"ica de -)s an8,gen)s "a>)resI )r e9e" -): O:1 res0-8a de -a ace8i-acin de -a g-0c)sa resen8e en -as 0nidades re e8idas de- )-isacrid) res )nsa*-e de -a es eci:icidad O:&4%$I O:% res0-8a de -a insercin de 0n resid0) de g-0c)sa en -a ga-ac8)sa de -a cadena de )-isacrid)4 c)") es e- cas) de -a ser)#ariedad Salmonella T> hi"0ri0" O:%4&414%$ F08172!s 0:13CA:387s ! Salmonella Es56!;0 ! <06==;0::, >?31!. C)n *ase en -)s c)" )nen8es an8igAnic)s s)"8ic)s O > :-age-ares M se ha es8a*-ecid) -) =0e se den)"ina e- es=0e"a de @a0::"ann2 Rhi8e4 =0e agr0 a a 8)das -as ser)#ariedades c)n)cidas. E- "an0a- de -a OrganiBacin +0ndia- de -a Sa-0d4 An8igenic F)r"0-ae ): 8he Sa-")ne--a ser)#ars4 Ins8i808 Pas8e0r $00( =0e c)n8iene -as :)r"0-as an8igAnicas de -as ser)#ariedades de Salmonella segEn e- es=0e"a de @a0::"ann2 Rhi8e4 se enc0en8ra escri8) en -a sig0ien8e :)r"a: P23;!20 8746;:0: indica e- n)"*re de- ser)#ar si er8enece a -a s0*es ecie S. enterica -)s nE"er)s r)"an)s II4 IIIa4 III*4 IV4 V4 VI si hace ar8e de 0na s0*es ecie di:eren8e a S. enterica. S!C6: 0 C746;:0: resen8a -)s :ac8)res an8igAnic)s de- Ag O se arad)s )r c)"as. L)s ser)#ares es8n re0nid)s en gr0 )s s)"8ic)s4 cada 0n) de e--)s carac8eriBad) )r 0n :ac8)r O "a>)r > de es8a :)r"a se de8er"inan -)s gr0 )s A4 B4 C4 e8cA8era.I )r e9e" -): /r0 ) O:2 CAD Salmonella Para8> hi A %424%$: a: [%.1\ /r0 ) O:% CBD Salmonella T> hi"0ri0" %4%4[1\4%$ : i : %4$ .

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1' de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
L)s s,"*)-)s ara -)s :ac8)res s)"8ic)s es8n de8er"inad)s as,: C DV ara -)s :ac8)res O > M =0e s)n dA*i-"en8e ag-08ina*-es. [ ]V indica =0e -)s :ac8)res O > M 0eden es8ar resen8es ) a0sen8es sin re-acin a -a c)n#ersin )r :ag)s. ]]V -)s :ac8)res O s0*ra>ad)s es8n de8er"inad)s )r c)n#ersin :gica4 es8) signi:ica =0e e--)s 0eden es8ar resen8es s)-a"en8e si e- c0-8i#) es -is)geniBad) )r e- c)rres )ndien8e :ag). ^ _V -)s :ac8)res indicad)s c)n --a#es s)n e!c-0si#)s4 es decir =0e es8)s :ac8)res n) 0eden c)e!is8ir c)n )8r)s :ac8)res en --a#es.

T!28!20 y 860210 8746;:0: se resen8an -)s :ac8)res an8igAnic)s de -as :ases % > $ de- an8,gen) E. Para -a :ase % -)s :ac8)res se den)"inan c)n -e8ras "inEsc0-as4 seg0idas a-g0nas #eces )r 0n nE"er) =0e se resen8a c)") s0*,ndice > ara -a :ase $ se e" -ean en genera- nE"er)s ar*ig)s4 a0n=0e 8a"*iAn se 08i-iBan -e8ras "inEsc0-as. Un sign) Ynega8i#)Z indica =0e -a :ase c)nsiderada es8 a0sen8e > )r -) 8an8) -a ser)#ariedad es ")n):sica. E9e" -): Salmonella En8eri8idis %4?4%$:g4":2 E- an8,gen) O %4?4%$I an8,gen) E C:ase %D g4" > C:ase $D 2I -a :ase $ es8 a0sen8e4 ser)#ariedad es ")n):sica. )r c)nsig0ien8e -a

La "a>)r,a de -)s "icr))rganis")s c)" ar8en an8,gen)s c)"0nes =0e ca0san reacci)nes cr0Badas c)n an8is0er) arcia-"en8e ) n) a*s)r*id)s. CFig0ra 3D

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1( de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

F3C620 ". F)r"0-as an8igAnicas de -)s ser)8i )s de Salmonella

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

5omado de: Manual de "ormulas Antig4nicas de los serovares de Salmonella, )&6 Collaborating Centre "or !e"erence and !esearch on Salmonella, 7nstitut Pasteur, 8rance. *++.

Inicia-"en8e -)s gr0 )s O :0er)n designad)s )r -e8ras4 er) de*id) a =0e es8as n) :0er)n s0:icien8es ara designar -)s n0e#)s gr0 )s desc0*ier8)s4 :0e necesari) c)n8in0ar c)n -)s nE"er)s de- 1% a- ;(. Las -e8ras se "an8ienen r)#isi)na-"en8e den8r) de arAn8esis4 er) se ac)nse9a a*and)nar -a designacin c)n -e8ras4 -a c0a- es innecesaria. Ta*-a & T0B40 % Designacin an8ig0a > n0e#a de -)s :ac8)res an8igAnic)s de Salmonella C@a0::"an > Rhi8eD Antigua Nueva Antigua Nueva Antigua Nueva

TLas ce as E$ > E34 0eden es8ar -is)geniBadas )r e- :ag) %143& es )r es8) =0e ah)ra :0er)n c-asi:icadas den8r) degr0 ) E%. T)"ad) de: Manual de "ormulas Antig4nicas de los serovares de Salmonella, )&6 Collaborating Centre "or !e"erence and !esearch on Salmonella, 7nstitut Pasteur, 8rance. *++.

P27178747 p020 40 s!2713p3=38083@: ! 03s40;3!:17s ! Salmonella spp. 1. Sie"*re en d)s 80*)s de agar T,:ica > d)s 80*)s de ca-d) EOings 0n c0-8i#) de Salmonella :resc) C%< h)ras de inc0*acin a 31WCD. $. Sa=0e -)s an8is0er)s de- re:rigerad)r ara =0e se a8e" eren. D!1!2;3:083@: 0:1FC!:7s s7;G1387s HOI. La carac8eriBacin an8igAnica s)"8ica YOZ se hace a ar8ir de 0n c0-8i#) 0r) de Salmonella en agar in:0sin cere*r) c)raBn CBMID de %< a $& h)ras de inc0*acin a 31WC. De es8e c0-8i#) se e-ige 0na c)-)nia -isa -a c0ase resie"*ra en $ 80*)s de agar 8,:ica.

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
De- creci"ien8) de Salmonella )*8enid) en -)s $ 80*)s de agar T,:ica4 se 08i-iBa e- 80*) =0e resen8a "a>)r creci"ien8)4 e- seg0nd) 80*) se g0arda c)n e- :in de "an8ener e- ais-a"ien8) #ia*-e. A:13s6!27s s7;G1387s HOI ! Salmonella: De endiend) de -a casa c)"ercia-4 e!is8en di#ers)s an8is0er)s )-i#a-en8es > ")n)#a-en8es =0e c)n8iene -)s an8ic0er )s c)n a:inidad #aria*-e ara -)s :ac8)res an8igAnic)s de Salmonella. Se c)n)cen -)s an8is0er)s )-i#a-en8e de A2E A2I4 ca s0-ar Vi > -)s )-i#a-en8es de gr0 ) de A a / C8a*-a 1D. E- an8is0er) )-i#a-en8e A2E c)n8iene -)s an8ic0er )s c)rres )ndien8es a- ??J de -)s gr0 )s de Salmonella "s :rec0en8e"en8e ais-ad)s =0e r)d0cen in:eccin en -)s h0"an)s. E- )-i#a-en8e A2I ` Vi de8ec8a -a c)"*inacin de -)s sig0ien8es :ac8)res %2%;4 %?4 3& > Vi. T0B40 &. An8is0er)s )-i#a-en8es de gr0 ) A:13s6!27 p743904!:1! ! C26p7 A B C D E F / G26p7s s7;G1387s P2!s!:1!s A4 B4 D4 E%4 E&4 L C%4 C$4 F4 /4 M I4 a4 @4 +4 N4 O P4 S4 R4 S4 T4 U V4 R4 F4 64 b 1% G 11 1; G ;%

A:13s6!27s ;7:7904!:1!s ! C26p7: A4 B C%4 C$4 D%4 D$4 E%4 E& F4 /4 M4 I4 a4 @4 +4 N4 O4 P4 S4 R4 S4 T4 U4 V4 R4 F4 64 b4 1%2;%. P278! 3;3!:17 ! 0C4613:083@: !: 4G;3:0. C)n e- 80*) de agar 8,:ica =0e resen8 "a>)r creci"ien8) :)r"e 0na s0s ensin !:s0 y ?7;7CA:!0, agregand) % "L de s)-0cin sa-ina :)r")-ada a- <P. De9e a 8e" era80ra a"*ien8e )r 0na h)ra4 c)n e:in de inac8i#ar e- "icr))rganis"). Se rec)"ienda =0e -a s0s ensin an8igAnica :)r")-ada 8enga 0na 80r*ideB e=0i#a-en8e a- 80*) $ 3 de +acFar-and. C)n8r)-e =0e -a s0s ensin *ac8eriana n) es8A r0g)sa an8es de iniciar -a ser)8i i:icacin. c)-)cand) d)s g)8as de -a s0s ensin *ac8eriana en -a -"ina de #idri) > rea-ice ;0 #0e-8as c)n ")#i"ien8)s de #ai#An. Si n) a arecen gr0")s4 -a s0s ensin *ac8eriana es8 -isa4 es decir4 a r) iada ara ser)8i i:icar. C)-)=0e 041 L- de cada 0n) de -)s an8is0er)s )-i#a-en8es de gr0 ) A a / en -a ar8e in:eri)r de -a -"ina > c)n 0na i e8a Pas8e0r c)-)=0e en -a ar8e s0 eri)r de -a -"ina 0na g)8a de -a s0s ensin *ac8eriana. +eBc-e a"*as g)8as c)n 0n asa rec8a en sen8id) -)ngi80dina- > c)n ")#i"ien8)s de #ai#An rea-ice %00 #0e-8as a -a -"ina. O*ser#ar -a resencia de ag-08inacin c)n -0B indirec8a c)n8ra 0n :)nd) )*sc0r). La in8ensidad de -a reaccin es8 in:-0enciada )r -a c)ncen8racin *ac8eriana > )r -a ca-idad > 0reBa de -a e 8)na > e- agar en =0e se se"*r e- "icr))rganis"). En cas) de =0e -a ag-08inacin sea )si8i#a c0an8i:i=0e -a ag-08inacin )r cr0ces de X a XXXX de ac0erd) c)n -a ra ideB e in8ensidad de -a reaccin )*ser#ada. E- grad) de ag-08inacin se regis8ra de -a sig0ien8e :)r"a:

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 20 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
XXXX XXX XX X (1 a %00J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s (1J Y Y 10J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s "en)s de- $1J Y Y a0sencia de ag-08inacin.

De endiend) de- an8is0er) )-i#a-en8e de gr0 ) c)n e- =0e ag-08in -a s0s ensin *ac8eriana4 re i8a -)s r)cedi"ien8) 3 > & c)n cada 0n) de -)s an8is0er)s ")n)#a-en8es YOZ c)n8enid)s en e- an8is0er) )-i#a-en8e en :)r"a si"0-8nea. )-i#a-en8e de gr0 ) -a

C0and) e- ais-a"ien8) en es80di) n) reacci)na c)n ning0n) de -)s an8is0er)s reaccin nega8i#a 0ede de*erse a:

aD S0e -a ser)#ar resen8a an8,gen) de en#)-80ra Vi4 c)") 0ede )c0rrir en: Salmonella T> hi4 Salmonella Para8> hi C > a-g0n)s asi-a"ien8)s de Salmonella D0*-in. En es8e cas) e- c0-8i#) se en:ren8a c)n e- an8is0er) Vi. *D S0e e- ais-a"ien8) en es80di) n) es Salmonella. A:1FC!:7 80ps6402 +$3En8re -)s an8,gen)s ca s0-ares de -as En8er)*ac8erias4 e- an8,gen) ca s0-ar CViD es "0> i" )r8an8e en egAner) Salmonella > n) ag-08ina c)n e- an8is0er) O. Es8e es 0n an8,gen) de en#)-80ra -*i- a- ca-)r =0e 0ede r)dear -a ared ce-0-ar > en"ascarar -a ac8i#idad de- an8,gen) s)"8ic). Se enc0en8ra en s-) 8res ser)#ariedades de Salmonella: Salmonella T> hi4 Salmonella Para8> hi C > a-g0nas ce as de Salmonella D0*-in. Las r) iedades de ag-08inacin de- an8,gen) Vi > s0 )der ara inhi*ir -a ag-08inacin O se ierden grad0a-"en8e en -a s0s ensin ac0)sa. Es8e ca"*i) es :0er8e"en8e ace-erad) c)n -a S)-0cin Sa-ina F)r")-ada CSSFD. P)r es8a raBn 0n c0-8i#) s)s ech)s) de ser ca s0-ad) de*e ser s0s endid) en SSF > e!a"inad) in"edia8a"en8e )r ag-08inacin en -"ina. Si -a ag-08inacin c)n e- an8is0er) Vi es )si8i#a4 si -a ag-08inacin c)n e- )-i#a-en8e A2E ' A2I`Vi es dA*i- CX XX de ag-08inacinD se de*e c)-)car -a s0s ensin de -a *ac8eria en *aH) ser)-gic) hir#iend) )r 30 "in08)sI se de9a en:riar -a s0s ensin > As8a se e!a"ina n0e#a"en8e )r ag-08inacin en -"ina4 ri"er) -a s0s ensin s)-a ara )*ser#ar =0e -a ce a n) se #)-#i r0g)sa c)n e- ca-)r4 -0eg) si c)n e- )-i#a-en8e A2E A2I ` Vi > -)s an8is0er)s O ")n)#a-en8es de- gr0 ) D4 B > e- )-i#a-en8e de- gr0 ) E 4 cada 0n) )r se arad). S, n) ha> ag-08inacin se c)n8inEa c)n cada 0n) de -)s )-i#a-en8es de gr0 ) de- B G /. D!1!2;3:083@: 0:1FC!:7s F40C!402!s HEI. La carac8eriBacin an8igAnica :-age-ar YMZ se hace a ar8ir de 0n c0-8i#) 0r) de Salmonella en agar in:0sin cere*r) c)raBn CBMID de %< a $& h)ras de inc0*acin a 31WC. De es8e c0-8i#) se e-ige 0na c)-)nia -isa -a c0ase resie"*ra en $ 80*)s de ca-d) EOings. A:13s6!27s =40C!402!s HEI ! Salmonella: An8is0er)s ")n)#a-en8es: a4 *4 c4 d4 :4 h4 i4 N4 "4 4 r4 s4 84 O4 !4 >4 B4 B;4 B%04 B%34 B%14 B$34 B$<4 B$?4 B3$4 en8re )8r)s. An8is0er)s )-i#a-en8es: se re-aci)nan en -a 8a*-a ;

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 21 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

T0B40 '. An8is0er)s )-i#a-en8es > c)" -e9)s c)n s0s :ac8)res c)rres )ndien8es A:13s6!27s p743904!:1! E a2B A B C D E C)" -e9) / C)" -e9) L C)" -e9) % C)" -e9) EN C)" -e9) b& A:1FC!:7s =40C!402!s p2!s!:1!s C)" -e9)s EN4 L4 b&4 % > -)s :ac8)res a2N4 r4B4B;4B%0 > B$? a4 *4 c4 d4 i4 B%04 B$? e4hI e4nI e4n4!I e4n4B%1I C)" -e9) / N4 -4 r4 >4 B4 B& B314 B3;4 B3(4 B3<4 B3?4 B&%4 B&$ c)" -e9) % > b; :4 "4 4 s4 84 = O4 B%34 B$<4 #4 B&04 B%? $414 ;4 ( !4 B%1 B3$4 B$34B$&4

P278! 3;3!:17 ! =47864083@: !: 16B7. %. Inac8i#ar 0n 80*) de ca-d) EOings c)-)cand) % "L de SSF a- <P. De9ar )r 0na h)ra a 8e" era80ra a"*ien8e. E- )8r) 80*) se de9a sin inac8i#ar ara "an8ener e- "icr))rganis") #ia*-e. $. C)-)car $LL de- c)rres )ndien8e an8is0er) M en cada 80*) de @han4 rec)"endad) As8e segEn e-a*)ra8)ri) =0e -) r)d0ce. 3. Adici)nar 041 "L de -a s0s ensin an8igAnica :)r")-ada > 041 "L de SSN CS)-0cin Sa-ina N)r"a-D 04<1J. &. C)-)car en )8r) 80*) de @han 041 "L de -a s0s ensin an8igAnica :)r")-ada4 sin an8is0er) > 041 "L de SSN 0.<1J =0e sir#e c)") c)n8r)- nega8i#) ara cada "0es8ra. 1. Agi8ar s0a#e"en8e -)s 80*)s e inc0*ar en BaH) de +ar,a a &<WC )r % h)ra. ;. Leer -a r0e*a *0scand) -a resencia de :-c0-)s4 ara -) c0a- se de*e inc-inar e- 80*) s0a#e"en8e c)n8ra -a -0B de 0na -" ara. Rea-iBar es8e r)cedi"ien8) ri"er) c)n e- 80*) c)n8r)- nega8i#). L!81620 ! 3:1!2p2!1083@: ! 47s 2!s6410 7s Se de*e -eer ri"er) e- 80*) c)n8r)- nega8i#) e- c0a- n) de*e resen8ar ningEn sign) de ag-08inacin ara )der in8er re8ar -a r0e*a. Res0-8ad) )si8i#): a aricin de :-c0-)s4 c0an8i:icar -a in8ensidad de -a reaccin )r cr0ces: de X a XXXX4 de endiend) de -a can8idad de :-c0-)s resen8es. E- grad) de :-)c0-acin se regis8ra as,:

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 22 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
&X: %00J de -)s "icr))rganis")s ag-08inad)s > e- s)*renadan8e -,=0id) es c-ar). 3X: (1J de -)s "icr))rganis")s ag-08inad)s > e- s)*renadan8e -,=0id) es -igera"en8e 80r*i). $X: 10J a r)!i"ada"en8e de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s > e- s)*renadan8e es 0n -,=0id) ")derada"en8e 80r*i). %X: $1J a r)!i"ada"en8e de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s > e- s)*renadan8e -,=0id) es 80r*i). Nega8i#): a0sencia de ag-08inacin carac8eriBada )r 0na s0s ensin h)")gAnea de- an8,gen). F3C620 %. Diagra"a de :-09) ara -a iden8i:icacin ser)-gica de Salmonella s .

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

MA17 7 ! 3: 6883@: J 3:9!2s3@: ! =0s! Las *ac8erias =0e )seen -a :ase >a iden8i:icada4 s)n in")#i-iBadas )r e- an8is0er) h)"-)g). De es8a "anera se :aci-i8a =0e -as cA-0-as =0e n) han e! resad) -a )8ra :ase4 -a e! resen > se "0e#an creciend) s)*re -a s0 er:icie de- agar4 si -a r0e*a se rea-iBa en ca9a de Pe8ri ) se des -acen a ar8ir de- 0n8) de in)c0-acin si -a r0e*a se rea-iBa en 80*). P278! 3;3!:17 Lic0ar 0n 80*) de ")8i-idad /i C3 "LD4 de9ar en:riar a 10WC. Adici)nar %0LL de- an8is0er) c)rres )ndien8e a -a :ase =0e se desea in")#i-iBar4 "eBc-ar s0a#e"en8e c)n ")#i"ien8)s de in#ersin > de9ar s)-idi:icar Se"*rar )r 0ncin e- "edi) )r e- cen8r) has8a 0na r):0ndidad de %4$ c" 8ra8and) de n) ")#er easa hacia -)s -ad)s. Inc0*ar a 31WC )r $& h)ras Las *ac8erias =0e )seen -a :ase >a iden8i:icada s)n in")#i-iBadas )r e- an8is0er) h)"-)g)4 er"i8iend) =0e -a :ase n) e! resada se e! rese4 es8) se "ani:ies8a )r -a ")8i-idad de -a *ac8eria ae!8enderse )r di:0sin > ) acidad -a8era- a -a -,nea de sie"*ra Des 0As de- 8ie" ) de inc0*acin4 8)"ar c)n 0na i e8a as8e0r de -a ar8e e!8erna de- creci"ien8) *ac8erian) e in)c0-ar $ 80*)s c)n ca-d) EOings. Inc0*ar a 31WC )r $ 2 & h)ras Si -a ")8i-idad n) es *0ena4 asar a 8ra#As de- "edi) de +)8i-idad /i de n0e#).

OBs!290837:!s Si 0n ais-a"ien8) de Salmonella c)n:ir"ada c)n ag-08inacin s)"8ica n) reacci)na c)n ning0n) de -)s an8is0er)s :-age-ares )-i#a-en8es ) ")n)#a-en8es es ec,:ic)s ha> =0e 8ener en c0en8a =0e: se 0ede 8ra8ar de 0n ais-a"ien8) in"#i- Ca0sencia de :-age-)sD se 0ede 8ra8ar de 0n ais-a"ien8) c)n ")8i-idad red0cida.

L3;310837:!s !4 p278! 3;3!:17 Reaccin :a-sa )si8i#a. E- e!cesi#) ca-)r de :0en8es e!8ernas c)")4 -a --a"a de- "echer)4 -a -" ara4 e8c.4 0eden re#enir e- 8ener 0na s0s ensin s0a#e de- "icr))rganis") ) ca0sar e#a )racin ) reci i8acin de -a "eBc-a. C0-8i#)s r0g)s)s 0eden )c0rrir > ag-08inar en :)r"a es )n8nea4 ca0sand) ag-08inacin en e- 80*) c)n8r)- nega8i#)4 reaccin de a08)ag-08inacin. Las c)-)nias -isas de*en ser se-ecci)nadas ara es80di)s ser)-gic)s.

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Reacci)nes de ag-08inacin de 3X ) "s s)n in8er re8adas c)") )si8i#as. Reacci)nes cr0Badas res0-8an c)n %X ) $X de ag-08inacinI es8as s)n de*idas a an8,gen)s s)"8ic)s. F!:@;!:7s ! 9023083@: 56! 0=!810: 40 s!2713p3=38083@: Para 0na c)rrec8a ser)8i i:icacin de Salmonella es necesari) en8ender > c)n)cer -)s :en"en)s de #ariaci)nes s)"8icas > :-age-ares =0e 0eden )c0rrir. $0230837:!s s7;G1380s $023083@: S,R +L3s0,R6C7s0Es de*ida a 0na "08acin =0e e-i"ina -as cadenas -a8era-es de- Yc)reZ de- )-isacrid). N) es 0na #ariacin a*r0 8a4 )r e- c)n8rari) )c0rre grad0a-"en8e > e!is8en grad)s in8er"edi)s de r0g)sidad en -a 8ransicin de -a :)r"a -isa CSD a -a r0g)sa CRD. L)s c0-8i#)s R dan c)-)nias de *)rde irreg0-ar c)n 8endencia a r)d0cir desarr)--) gran0-ar en ca-d) > a08)ag-08inan c0and) se -as en:ren8a c)n s)-0cin sa-ina4 es decir s)n n) ser)8i i:ica*-es. $023083@: M K N +M6873 ! KN7 ;6873 !Es 0na #ariacin en8re :)r"as "0c)ides C+D > n) "0c)ides CND de Salmonella. + es 0n an8,gen) de en#)-80ra =0e se enc0en8ra )r e9e" -) en Salmonella Para8> hi B. Las :)r"as "0c)ides n) s)n ag-08inadas )r an8is0er)s O. E- an8,gen) + se des8r0>e a %00WC > )r accin de- a-c)h)-4 er) es resis8en8e a- :)r")- > aca-en8a"ien8) a ;0WC. C0and) e- ais-a"ien8) es "0c)ide4 n) se 0ede de8er"inar e- an8,gen) O4 en es8e cas) se de*e c)n:ir"ar -a iden8i:icacin *i)=0,"ica de- ais-a"ien8). $023083@: S,T,R D0ran8e -a e#)-0cin de :)r"as -isas a r0g)sas4 a arecen an8,gen)s 8ransi8)ri)s --a"ad)s T. E- )der an8igAnic) es8 c)nser#ad)I e- as ec8) de -)s c0-8i#)s en ca-d) > en agar es -is) er) ha desa arecid) 8)8a-"en8e -a es eci:icidad O4 siend) ree" -aBada )r 0n n0e#) an8,gen) s)"8ic) T. $023083@: $,> +80ps6402 K :7 80ps6402E- an8,gen) Vi es 0n an8,gen) ca s0-ar ) de en#)-80ra =0e es8 resen8e en Salmonella T> hi4 Salmonella Para8> hi C > en a-g0n)s ais-a"ien8)s de Salmonella D0*-in. Es i" )r8an8e des8acar =0e -a #ariacin V2R )c0rre en Salmonella T> hi > en a=0e--)s ais-a"ien8)s =0e )seen e- an8,gen) Vi. E- an8,gen) Vi en Salmonella T> hi es 0n )-isacrid) a-8a"en8e )-i"eriBad)4 c)" 0es8) )r 0nidades de cid) N2ace8i-2a"in)he!0rnic). Las :)r"as V CVie-D "0> ricas en an8,gen) Vi4 s)n O n) ag-08ina*-es4 "ien8ras =0e -as R CReningD4 des r)#is8as de an8,gen) Vi s)n O ag-08ina*-es. E!is8en 8a"*iAn :)r"as in8er"edias V4 R =0e c)nser#an -a r) iedad de ag-08inar c)n an8is0er)s Vi > O es ec,:ic)s. Una s0s ensin de Salmonella T> hi rica en an8,gen) Vi ca-en8ada a ;0WC d0ran8e 0na h)ra ) a %00WC )r 30 "in08)s4 se 8rans:)r"a en O ag-08ina*-e4 0es se des8r0>e e- an8,gen) Vi. $023083@: :7 =3;B230 0,=3;B230 0 Ade"s de -)s :-age-)s4 -as *ac8erias 0eden r)d0cir )8ras es8r0c80ras :i-a"en8)sas4 --a"adas :i"*rias4 "s :ina > c)r8as4 -)ca-iBadas en -a s0 er:icie de -a *ac8eria en nE"er) de %00 a $10 )r cA-0-a. Se enc)n8r =0e

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 2& de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
en -)s c0-8i#)s :i"*riad)s se 0eden r)d0cir #ariaci)nes en8re :)r"as :i"*riadas > n) :i"*riadas. A-g0n)s c0-8i#)s de Salmonella =0e )seen :i"*rias 0eden inhi*ir -a ag-08inacin s)"8ica.

$0230837:!s =40C!402!s $023083@: OE K O Se de*e a -a Ardida de -)s :-age-)s4 as, =0e 0na se a "#i- se 8rans:)r"a en in"#i-. Es8) )c0rre )r 0na "08acin ) )r 0na Ardida de -)s genes res )nsa*-es de -a s,n8esis de :-age-ina. Es8e :en"en) se )*ser#a c)n re-a8i#a :rec0encia en e- gAner) Salmonella. R!87;!: 0837:!s p020 !4 ;0:!L7 ! 0:13s6!27s +DIFCO Cada :rasc) de an8is0er) M C3 "LD a-canBa an8is0er) 0sad). ara rea-iBar en8re %102%100 r0e*as de endiend) de-

Para rehidra8ar -)s an8is0er)s Salmonella O4 M > Vi4 adici)ne a cada :rasc) 3 "L de s)-0cin sa-ina a04<1J4 "0e#a s0a#e"en8e e- :rasc) has8a -)grar -a c)" -e8a dis)-0cin de- c)n8enid). A-"acene -)s an8is0er)s 8an8) -)s -i):i-iBad)s c)") -)s rehidra8ad)s a $G<WC. La e! )sicin r)-)ngada de As8)s a 8e" era80ras di:eren8es a -a rec)"endada r)d0ce de8ri"en8) de e--)s.

D346837:!s ! 120B0L7 p020 0:13s6!27s E D3=87: Per"i8a =0e e- an8is0er) se e=0i-i*re a -a 8e" era80ra a"*ien8e an8es de rea-iBar -a r0e*a. AsegErese de =0e 8an8) -as i e8as c)") -)s 80*)s =0e #a a 08i-iBar es8An -i*res de de8ergen8e. C)n e- an8is0er) M rehidra8ad)4 rea-iBar 0na di-0cin de 8ra*a9) 1:1000, ara -)s an8is0er)s M p743904!:1!s A, B, C, D, E > ara -)s :ac8)res M =0e n) 8engan )8ra rec)"endacin. T)"ar 04% "L de- an8is0er) M X $1 "L de NaC- a- 04<1J C =08172 ! 34683@: 0,00%D Pre arar -a di-0cin c)rres )ndien8e ara cada an8is0er) M 0n #)-0"en ig0a- a 041 "L c)n s)-0cin sa-ina a04<1J. 0,002 mL del antisuero H + 0,5 mL de solucin salina al 0,85% C)n -)s an8is0er)s M: D, M1", M1&, M2)4 08i-iBar 0na di-0cin de 8ra*a9) 1:&00 T)"ar 0.% "L an8is0er) M X %$41 "L de NaC- a- 04<1J C=08172 ! 34683@: 0,00)D

0,004 mL del antisuero + 0,5 mL de Na l al 0,85%

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C)n e- an8is0er) M )-i#a-en8e a2B4 08i-iBar 0na di-0cin 1:100 T)"ar % ar8e de- an8is0er) X $1 ar8es de NaC- a- 04<1J C =08172 ! 34683@: 0,0%-

0, 02 mL antisuero H + 0,5 mL de Na l al 0,85% A:13s6!27s E: Ins8i808) de Sa-0d PE*-ica de Chi-e CISPD4 Ins8i808) Fi) Cr0B de- Brasi- > -a*)ra8)ri) Behring. C)-)car en -)s 80*)s de @han de -)s an8is0er)s =0e 8ienen e8i=0e8a c)"ercia-TT. Adici)nar % "L de -a s0s ensin an8igAnica :)r")-ada. C)-)car Adici)nar 041 "L de -a s0s ensin an8igAnica :)r")-ada > 041 "L de SSN 04<1J4 en )8r) 80*) de @han =0e sir#e c)") c)n8r)- nega8i#) ara cada "0es8ra. Agi8ar s0a#e"en8e -)s 80*)s e inc0*ar en BaH) de +ar,a a &<WC )r % h)ra. Leer -a r0e*a4 *0scand) -a resencia de :-c0-)s ara -) c0a- se de*e inc-inar e- 80*) s0a#e"en8e c)n8ra -a -0B de 0na -" araI rea-iBar es8e r)cedi"ien8) ri"er) c)n e- 80*) c)n8r)- nega8i#).

TT Si e- an8is0er) n) 8iene -a e8i=0e8a c)"ercia- rea-iBar -a di-0cin de 8ra*a9) c)rres )ndien8e indicada ara cada an8is0er) )r -a ins8i80cin =0e -) r)d0ce. E- ser)8i ) enc)n8rad) se de*e regis8rar en e- c0adern) de Salmonella s . REG,R01.001.&0"0,0%"

La e"isin de res0-8ad)s a- s)-ici8an8e se de*e en#iar en e- :)r"a8) REG,R01.001.&0"0,01"

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 2( de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

10.% GENERO SHI ELLA 10.%.1 G!:!2043 0 !s Shigella er8enece a -a :a"i-ia Enterobacteriaceae4 s)n *aci-)s /ra" nega8i#) de 043 a % L" de di"e8r) > de % a ; L" de -)ngi80d4 in"#i-es4 n) es )r0-ad)s4 anaer)*i)s :ac0-8a8i#)s4 )!idasa nega8i#)4 n) :er"en8an -ac8)sa4 :er"en8an -a g-0c)sa > )8r)s aBEcares sin r)d0ccin de gas. N) 08i-iBan ci8ra8) de Si"")ns4 n) r)d0cen M$S > s)n -isina descar*)!i-asa4 arginina dehidr)-asa > 0reasa nega8i#)s4 n) decar*)!i-an -a )rni8ina e!ce 8) Shigella sonnei. La 8e" era80ra de creci"ien8) 8i"a es 3(K C C%0D. La es ecie de Shigella =0e red)"ina en 0na c)"0nidad arece re-aci)narse c)n e- ni#e- de desarr)--) s)ci)2 ec)n"ic). Las es ecies S. "le9neri > S. sonnei ca0san -as "a>)r,a de -)s cas)s de en:er"edades en h0"an)s en a,ses en desarr)--)4 "ien8ras =0e S. sonnei se a,s-a c)n "a>)r :rec0encia en a,ses desarr)--ad)s. S. bo%dii es re-a8i#a"en8e rar) en a,ses desarr)--ad)s > es 8, ica"en8e as)ciad) c)n indi#id0)s =0ienes han #ia9ad) a reas endA"icas L)s h0"an)s s)n e- Enic) h0As ed na80ra- ara Shigella > s0 8rans"isin es rinci a-"en8e )r c)n8ac8) )ra-2 :eca-. La d)sis in:ec8i#a 0ede ser 8an *a9a c)") s)-) %0 cA-0-as4 er"i8iend) =0e -a en:er"edad se dise"ine e:ec8i#a"en8e a 8ra#As de a-i"en8)s ) ag0a c)n8a"inada > 8a"*iAn )r c)n8ac8) de ers)na a ers)na C%%D. Se de*e 8ener resen8e =0e4 de ac0erd) c)n es80di)s ")-ec0-ares4 se han iden8i:icad) #arias si"i-i80des gen)8, icas > :en)8, icas4 inc-0>end) -a a8)genia4 #ir0-encia4 er:i- *i)=0,"ic)4 > e- ADN de h)")-)g,a4 en8re Escherichia coli en8er)in#asi#a CEIECD > es ecies de Shigella C%$D. E- gAner) es8 :)r"ad) )r Shigella d%senteriae Cser)gr0 ) ADI Shigella "le9neri Cser)gr0 ) BDI Shigella bo%dii Cser)gr0 ) CD > Shigella sonnei Cser)gr0 ) DD C%3D. Las c0a8r) es ecies de- gAner) Shigella s)n ca aces de ca0sar disen8er,a *aci-arI Shigella d%senteriae r)d0ce -a :)r"a "s se#era de -a en:er"edad4 c)n 0na 8asa de -e8a-idad de- $0J. Shigella bo%dii se a,s-a c)n "en)r :rec0encia. En ca"*i) -as in:ecci)nes )r -as es ecies S. "le9neri % S. sonnei s)n -as "s :rec0en8e"en8e ais-adas4 ca0sa in:eccin in8es8ina- ag0da en niH)s e=0eH)s. Las $'3 ar8es de -)s cas)s > -a "a>)r,a de -as de:0nci)nes )c0rren en niH)s de ; "eses a %0 aH)s4 0ede ca0sar -a "0er8e en h0As edes in"0n)c)" r)"e8id)s > ancian)s. La in#asi#idad es e- :ac8)r de #ir0-encia "s i" )r8an8e ara ca0sar -a en:er"edad. Shigella se -)ca-iBa 0s0a-"en8e en e- in8es8in) gr0es)4 en e- rec8) >4 en "0ch)s cas)s4 0ede a:ec8ar ar8e de- i-en 8er"ina-. T, ica"en8e se resen8a 0na in:-a"acin ag0da c)n E-cera de- e i8e-i). La dise"inacin a- 8)rren8e sang0,ne) n) es c)"En. La in:eccin es8 as)ciada c)n -a )*re higiene > se :aci-i8a )r -a *a9a d)sis in:ec8an8e re=0erida C%0% a %0$ *aci-)sD C%&D. D30C:@s1387 B081!2374@C387 y 3=!2!:83083@: ! !sp!83!

10.4.2

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 2) de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
E- diagns8ic) *ac8eri)-gic) de- gAner) Shigella se *asa en e- c) r)c0-8i#)4 inicia-"en8e "enci)nad)4 d)nde -as r0e*as *i)=0,"icas 8ienen 0n a8rn ar8ic0-ar CTa*-a (D4 c)n -as sig0ien8es reacci)nes *i)=0,"icas 8a"*iAn se di:erencia -a es ecie:

T0B40 (. Pr0e*as *i)=0,"icas ara -a di:erenciacin de es ecies de Shigella s . PRUEBA /ra": ")r:)-)g,a c)-)racin +cC)nNe>: -ac8)sa O!idasa TSI4 /as M$S LIA Ci8ra8) Urea ONP/ Orni8ina +)8i-idad Lac8)sa +ani8)Ra:in)sa Sacar)sa Fi-)sa Ind)NE"er) de ser)8i )s /r0 ) an8igAnic) S. !"sen#eriae *aci-)s , , , @'A 2T 2 @'A 2 2 dA*i-TT 2 2 2 2 2 2 2 X'2 %1 A B C D S. flexneri *aci-)s , , , @'A 2T 2 @'A 2 2 2 2 2 2 X dA*i2 2 X'2 %& S. bo"!ii *aci-)s , , , @'A 2T 2 @'A 2 2 dA*i-TT 2 2 2 X 2 2 dA*iX'2 $0 S. sonnei *aci-)s , , , @'A 2T 2 @'A 2 2 X X 2 2 X X CXD X CXD 2 2 %

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 29 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

L)s res0-8ad)s de -)s ensa>)s ana-,8ic)s se de*en regis8rar en e- c0adern) de Shigella sp. REG, R01.001.&0"0,0%%

10.4.3

I !:13=38083@: s!274@C380 La iden8i:icacin ser)-gica se *asa en -)s an8,gen)s s)"8ic)s YOZ Cc)" 0es8)s )r cadenas )-isacar,dicas de- -i ) )-isacrid)2LPS de -a "e"*rana e!8ernaD. L)s "icr))rganis")s r)d0cen 0na #ariedad de an8,gen)s: c)" )nen8es es8r0c80ra-es de -a cA-0-a Cc)" )nen8e de -a ared ce-0-ar4 c s0-as4 :-age-)s4 :i"*riasDI r)d0c8)s de secrecin de -as cA-0-as C8)!inas4 enBi"as e!8race-0-aresD ) an8,gen)s c)n8enid)s en e- in8eri)r de -as cA-0-as. S0,"ica"en8e4 -)s an8,gen)s 0sad)s c)n es8e r) si8) 0eden ser r)8e,nas4 car*)hidra8)s4 ) "eBc-as de a"*)s c)" )nen8es. Es8a r0e*a se rea-iBa n)r"a-"en8e )r ag-08inacin en -"ina c)n s0er)s )-i#a-en8es de an8,gen) de gr0 ) s)"8ic)4 seg0id)4 en a-g0n)s cas)s4 de -a r0e*a c)n an8is0er)s ")n)#a-en8es ara -a iden8i:icacin ser)8, ica es ec,:ica. D!1!2;3:0837: ! 0:13C!:7s s7;01387s HOI. La carac8eriBacin an8igAnica s)"8ica se hace a ar8ir de 0n c0-8i#) 0r) de Shigella en agar BMI Cin:0sin cere*r) c)raBnD de %< a $& h)ras de inc0*acin a 31KC. P278! 3;3!:17 ! 0C4613:0837: !: 4G;3:0 De 0n c0-8i#) se e-ige 0na c)-)nia -isa -a c0a- se resie"*ra en $ 80*)s de agar 8,:ica. C)n e- 80*) de agar 8,:ica =0e resen8e "a>)r creci"ien8)4 :)r"ar 0na s0s ensin densa > h)")gAnea agregand) %2 3 "L de s)-0cin sa-ina :)r")-ada <P. De9e a 8e" era80ra a"*ien8e )r % h)ra c)n e- :in de inac8i#ar e- "icr))rganis"). Se rec)"ienda =0e -a s0s ensin an8igAnica :)r")-ada 8enga 0na 80r*ideB e=0i#a-en8e a- 80*) $23 de +ac Far-and.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina "0 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Veri:i=0e =0e -a s0s ensin *ac8eriana n) sea r0g)sa an8es de iniciar -a ser)8i i:icacin4 ara es8) c)-)=0e $ g)8as de -a s0s ensin en -a -"ina de ser)-)g,a > c)n ")#i"ien8)s de r)8acin girar -a -aca de #idri) d0ran8e % "in08). Si n) a arecen gr0")s4 -a s0s ensin *ac8eriana es8 -isa4 es decir4 a r) iada ara ser)8i i:icar-a. An8es de iniciar -a ser)8i i:icacin4 )*ser#ar si -a r0e*a de -a )rni8ina es )si8i#a ) nega8i#a ara di:erenciar a-g0nas es ecies de )8ras. Si -a )rni8ina de- ais-a"ien8) =0e se #a a ser)8i i:icar es )si8i#a4 c)-)=0e 0na g)8a de an8is0er) )-i#a-en8e de- gr0 ) D CS . sonneiD en -a ar8e in:eri)r de -a -"ina > c)n 0na i e8a as8e0r c)-)=0e en -a ar8e s0 eri)r de -a -"ina 0na g)8a de -a s0s ensin *ac8eriana. +eBc-e a"*as g)8as c)n 0n asa rec8a en sen8id) -)ngi80dina- > c)n ")#i"ien8)s de #ai#An rea-ice %00 #0e-8as a -a -"ina. O*ser#ar -a resencia de ag-08inacin c)n -0B indirec8a c)n8ra 0n :)nd) )*sc0r). La in8ensidad de -a reaccin es8 in:-0enciada )r -a c)ncen8racin *ac8eriana > )r -a ca-idad > 0reBa de -a e 8)na > e- agar en =0e se se"*r e- "icr))rganis").

En cas) de =0e -a ag-08inacin sea )si8i#a c0an8i:i=0e -a ag-08inacin )r cr0ces de X a XXXX de ac0erd) c)n -a ra ideB e in8ensidad de -a reaccin )*ser#ada. E- grad) de ag-08inacin se regis8ra de -a sig0ien8e :)r"a: XXXX (1 a %00J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. XXX (1J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. XX 10J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. X +en)s de- $1J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. 2 a0sencia de ag-08inacin. Re i8a e- r)cedi"ien8) & > 1 c)n an8is0er) ")n)#a-en8e :ase I > III as, de8er"inara a c0a- Shigella sonnei c)rres )nde. En e- cas) =0e -a )rni8ina de- ais-a"ien8) a ser)8i i:icar sea nega8i#a4 re i8a e- r)cedi"ien8) 3 > & c)n an8is0er) )-i#a-en8e de- gr0 ) B CS. "le9neriD4 en cas) de )*8ener 0na ag-08inacin )si8i#a4 se c)n8inEa segEn e- es=0e"a de -a 8a*-a <. T0B40 ). Es8r0c80ra an8igAnica de Shigella "le9neri.

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:13s6!2 7 T3p7 S. flexneri 10 S. flexneri 1B S. flexneri 20 S. flexneri 2B S. flexneri "0 S. flexneri "B S. flexneri %0 S. flexneri %B S. flexneri &0 S. flexneri &B S. flexneri ' S. flexneri $0230:1! O S. flexneri $0230:1! / I N N , , , , , , , , , , , II , , N N , , , , , , , , , III , , , , N N , , , , , , , T3p7 IV , , , , , , N N , , , , , V , , , , , , , , N N , , , VI , , , , , , , , , , N , , C3D & N N N , NJ, NJ, N , N , NJ, , N F08172 ; , N , , N N , N , , , , , ( C<D , , , N N , , , , N , N , F72;640 A:13CA:380 I: & I: &.;; II: 3.& II: (.< III: C3.&D4 ;4 (4 < III: C3.&D4 ; IV: 34& IV: ; V: 34& V: (4 < VI: C&D 2:(4< 2: 3.&

Si e- res0-8ad) es nega8i#) rea-iBar -a ag-08inacin c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e de- gr0 ) C C S. bo%diiD4 C% > C$. Si e- res0-8ad) es nega8i#) rea-iBar -a ag-08inacin c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e de- gr0 ) A C S. d%senteriae3. C0and) e- ais-a"ien8) en es80di) n) reacci)na c)n -)s an8is0er)s )-i#a-en8es4 -a reaccin nega8i#a 0ede de*erse a: Presencia de c s0-a en e- "icr))rganis"). S0e e- ais-a"ien8) en es80di) n) es Shigella.

C0and) -a ag-08inacin c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e es dA*i- ) nega8i#a4 se de*e c)-)car -a s0s ensin *ac8eriana en *aH) +ar,a hir#iend) )r 30 "in08)s. L0eg)4 se de9a en:riar -a s0s ensin > As8a se e!a"ina n0e#a"en8e )r ag-08inacin en -"ina4 ri"er) -a s0s ensin s)-a ara )*ser#ar =0e e- ais-a"ien8) n) se #)-#i r0g)s) c)n e- ca-)r > -0eg) s, c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e c)rres )ndien8e. C:ig0ra 1D Si n) ha> ag-08inacin4 se resie"*ra en agar BMI Cin:0sin cere*r) c)raBnD > rea-iBar de $ a 3 ases ara es8i"0-ar e- an8,gen) es ec,:ic). E- ser)8i ) enc)n8rad) se de*e regis8rar en e- c0adern) de Shigella sp. REG,R01.001.&0"0,0%% La e"isin de res0-8ad)s a- s)-ici8an8e se de*e en#iar en e- :)r"a8) REG,R01.001.&0"0,01%

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
F3C620 &. D30C20;0 ! =46L7 p020 40 3 !:13=38083@: s!274@C380 ! Shigella sp.

10.5

VI$%IO &HOLE%AE

10.&.1 G!:!2043 0 !s

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina "% de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
V. cholerae er8enece a -a :a"i-ia Vibrionaceae a -a c0a- er8enecen -)s gAner)s: Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas % Photobacterium. E- gAner) Vibrio se c)" )ne de 30 es ecies de -as c0a-es s-) %$ se han ais-ad) de "0es8ras c-,nicas h0"anas: V. cholerae O%, V. cholerae O%3?, V. parahemol%ticus, V. alginoliticus, V. damsela, V. "luvialis, V. "urnissii, V. vulni"icus, V. mimicus, V. metchni'ovii, V. cincinnatiensis > V. carchariae C%1D CTa*-a ?D. T0B40 9. As)ciacin de -as es ecies de Vibrio c)n di:eren8es s,ndr)"es c-,nic)s Esp!83!s ! 93B237s 806s0:1!s ! 3:=!883@: !: ?6;0:7s V. cholerae O1 V. cholerae no O1 V. mimic's V. fl'(ialis V. )arahaemol"#ic's V. alginol"#ic's V. cincinna#iens V. ('lnific's V. f'rnisii V. !amsela V. me#schni*o(ii V. carchariae SF: 27;!s 84F:387s G0s127!:1!2313s XXX XXX XX XX XXX X 2 X X 2 X 2 I:=!883@: ! ?!23 0s 2 XX 2 2 2 XX 2 XX 2 XX 2 X I:=!883@: ! 7L7 X X 2 2 2 XX 2 2 2 2 2 2 S!p138!;30 2 X 2 2 X X X XX 2 X X 2

A!a)#a!o !e+ Manual o" Clinical Microbiolog%. Seven Editions. P! Murra%, E: Baron, MA P"aller, 8C5enoves, !& ;ol'en 2eds3. American Societ% "or Microbiolog%. )ashington <.C.*++=.

Vibrio cholerae O% > O%3? s)n -)s a gen8es de -as e ide"ias > ande"ias de c-era. Las ce as e idA"icas de V. cholerae es8n a" -ia"en8e dis8ri*0idas en e- "edi) a"*ien8e. Se enc0en8ra en ag0as de 0na gran #ariedad de sa-inidad4 8a"*iAn se 0eden enc)n8rar en ag0as d0-ces > en e- c)n8enid) in8es8ina- de ani"a-es "arin)s. Se enc0en8ra en reas 8r) ica-es ) d0ran8e -as es8aci)nes 8e" -adasI es s0sce 8i*-e a -a desecacin4 e*0--icin4 ac-)r) > a )8r)s desin:ec8an8es. V. cholerae O% > O%3? s)n -)s agen8es e8i)-gic)s de- c-era4 en:er"edad diarreica ag0da =0e se carac8eriBa )r #"i8)4 diarrea en ag0a de arr)B4 ca0sand) grad)s #aria*-es de deshidra8acin4 acid)sis4 c)-a s) circ0-a8)ri) > si e- acien8e n) es 8ra8ad) r ida"en8e4 -a "0er8e se r)d0ce den8r) de -as $& h)ras de a aricin de -)s s,n8)"as. En -a ac80a-idad se c)n)ce =0e -a in:eccin 0ede ser asin8)"8ica. La his8)ria n)s resen8a sie8e ande"ias de c-era d)c0"en8adas desde %<%( has8a %??%4 d)nde -a E-8i"a a:ec8 a La8in) A"Arica e!ce 8) a Ur0g0a>4 )casi)nand) "i--)nes de de:0nci)nes. En -as A"Aricas -)s E-8i")s cas)s re )r8ad)s )r -a OPS se resen8an en -a 8a*-a %0. T0B40 10. NE"er) de cas)s re )r8ad)s )r OPS en A"Arica.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina "& de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
AQ7 200% 200& 200' 200( 200) C0:0 G 3 ( 1 %T Es10 7s U:3 7s 1 %$T <T (T B20s34 $% 1 0 0 N) se re )r8ar)n cas)s E860 72 1 0 0 0 C747;B30 $ 0 0 0

PC0s7s 56! =6!27: 3;p7210 7s. La e ide"ia de c-era =0e a:ec8 a Mai8, desde "ediad)s de )c80*re de $0%0 ha ca0sad) -a "0er8e de $.?0% ers)nas > %3&.;(< han sid) in:ec8adas4 segEn e- +inis8eri) de Sa-0d PE*-ica > P)*-acin C+SPPD. La 8asa de -e8a-idad en -)s h)s i8a-es es de- $.3JI e- ;(J de -as "0er8es se han r)d0cid) en -)s ser#ici)s de sa-0d4 > e- 33J en -a c)"0nidad. 10.5.2 D30C:@s1387 B081!2374@C387

V. cholerae es 0n *aci-) /ra" nega8i#)4 "#i- de*id) a 0n :-age-) )-ar rec0*ier8)4 e- c0a- se :)r"a c0and) se c0-8i#a en "edi)s -,=0id)sI anaer)*i) :ac0-8a8i#)4 crece a &0KC4 es es8i"0-ad) )r NaC- > 8)-era has8a 0n M.%0. Es8e "icr))rganis") crece :ci-"en8e en "edi)s c)"0nes > :er"en8a -a g-0c)sa c)n ) sin r)d0ccin de gas. Las c)-)nias s)*re +cC)nNe> s)n -ac8)sa nega8i#a > s)*re TCBS s)n sacar)sa )si8i#a Ca"ari--asD. P)see -a enBi"a ci8)cr)") )!idasa4 carac8er,s8ica =0e -) di:erencia de -a :a"i-ia Enterobacteriaceae CFig0ra ;D. N710. Para -as r0e*as *i)=0,"icas de c0erda > )!idasa n) se de*en rea-iBar a ar8ir de "edi)s se-ec8i#)s CTCBSD4 se de*en hacer a ar8ir de "edi)s n) se-ec8i#)s CAgar BMI ) Agar Tri 8icasa S)>a4 e8cD4 #er ane!)s

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina "' de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
F3C620 '. Diagra"a de :-09) ara iden8i:icacin de Vibrio cholerae a ar8ir de "a8eria :eca-

M01!230 =!804 32!810 7 !s ! C02y,B4032


Enri=0eci"ien8) Direc8)

AC60 p!p17:0 0 Se inc0*a )r ;2< h)ras a 3&23(WC. T)"ar 32& asadas de- s)*renadan8e se"*rar en TCBS )r %<2$& h)ras a 3&2 3(WC

TCBS Inc0*ar )r %<2$& h)ras a 3&23(WC

O*ser#ar resencia de c)-)nias sacar)sa )si8i#a Agar BMI4 TSA4 N08ri8i#) c)n 041J de NaC-4 e8c. CInc0*ar )r %<2$& h)ras a 3123(WC P26!B0s B3756F;380s 2Gp3 0s p020 !4 30C:@s1387 2Gp3 7 y p2!s6:1397 ! $3B237 8?74!20! O!idasa: )si8i#a C0erda: )si8i#a
E: 80s7 ! 1!:!2 0:13s6!27

Vibrio spp.

En#,e e- ais-a"ien8) a-a*)ra8)ri) de re:erencia en "edi) de 8rans )r8e Car> B-air a 8e" era80ra a"*ien8e an8es de &< h)ras > di-igencie adec0ada"en8e e- :)r"a8) de en#,) CRE/2R0%.003.10302 00&D.

P26!B0s s!274@C380 An8is0er) P)-i#a-en8e O%: )si8i#)

,osi#i(o Vibrio cholerae O1 CC)n:ir"acin )r e- -a*)ra8)ri) de re:erenciaD

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

Las sig0ien8es 8a*-as "0es8ran -as reacci)nes *i)=0,"icas =0e s)n necesarias ara -a iden8i:icacin de Vibrio cholerae4 n) )*s8an8e es )*-iga8)ri) e- 0s) de- an8is0er) )-i#a-en8e O% ara c)n:ir"ar V. cholerae O% Cc-era andA"ic)D C%;D. Es8a ) cin de iden8i:icacin se 0sa ) ci)na-"en8e has8a es ecie > se re"i8e a- -a*)ra8)ri) de re:erencia en cas) de n) 8ener -)s an8is0er)s. CTa*-as %%4 %$ > %3D. T0B40 11. C2!83;3!:17 ! 8747:30s 56! 6s0: s08027s0 !: !4 0C02 TCBS

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina ") de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C2!83;3!:17 !: 0C02 TCBS R ! 03s40;3!:17s 56! =!2;!:10: 40 s08027s0 !: TCBS $!2 ! V. cholerae V. mimic's V. )arahaemol"#ic's V. alginol"#ic's V. fl'(ialis V.f'rnissi V. hollisae V. har(e"i V. !amsela V. me#schni*o(ii V. cincinna#iensis V. ('lnific's O127s 93B237s ;023:7s Aeromonas " en#erobac#erias 0 %00 ?? 0 0 0 %00 0 ?1 0 0 ?0 Varia*-e A;023447 %00 0 % %00 %00 %00 0 %00 1 %00 %00 %0 Varia*-e B0en) B0en) B0en) B0en) B0en) B0en) +0> )*re B0en) red0cid) a 3;WC 0ede ser red0cid) "0> )*re B0en) Varia*-e +0chas es ecies s)n 8)8a-"en8e inhi*idas

M382772C0:3s;7s

E=383!:830 ! 82!83;3!:17 !: !4 ;! 37

N) crecen

N) crecen

A 0p10 7 !: Manual o" clinical microbiolog%, ( edition, Murra% Patric' et.al- ASM *++,

T0B40 12. P26!B0s p020 40 3=!2!:83083@: ! Vibrio cholerae 87: 7120s !sp!83!s ! Vibrio y CA:!27s

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
M382772C0:3s;7s Aeromon 93B237s Aeromo as ?047p?34387 nas h"!ro)hil s (eronii a V V @'A/ V V A'A/ X 2 2 X X X ,lesiomo nas shigelloi! es @'A @'A 2 X 2 2 X X X 2 X X

PRUEBA

Vibrio cholerae

Vibrio mimic 's

En#erobac#eri aceae V V 2 2 V V V V V V X X

<IA @'A @'A TSI 1R N0C4 A'A @'A C6!2 0 X X OD3 0s0 X X G0s ! 2 2 2 X X C4687s0 S08027s0 X 2 V V X L3s3:0 1R N0C4 X X V V X A2C3:3:0 1R 2 2 X 2 N0C4 V O2:313:0 1R X X 2 X N0C4 V $P 1R N0C4 V 2 V V X C2!83;3!:17 X X 2 X X !: 0R ! N0C4 C2!83;3!:17 X X X X X !: 1R ! N0C4 V: Reaccin #aria*-e a: V.parahaemol%ticus, V.cincinnatiensis, % V.damsei dan reacci)nes #aria*-es *: V."urnissi > V damsei s)n #aria*-es ara gas de g-0c)sa c: Base de ca-d) n08ri8i#) CDi:c)D

Adaptado de: M4todos de laboratorio para el diagn#stico de Vibrio cholerae, C<C>6PS =???

T0B40 1". D3=!2!:83083@: ! 40s !sp!83!s !4 CA:!27 Vibrio.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %0 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A!a)#a!o !e+ M4todos de laboratorio para el diagn#stico de Vibrio cholerae, C<C>6PS =??0

10.5.3

I !:13=38083@: s!274@C380

L)s ais-a"ien8)s de V. cholerae4 =0e )seen e- an8,gen) s)"8ic) O% ag-08inan c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e O% > s)n den)"inad)s V. cholerae O%4 asi"is")4 -)s =0e n) )seen es8e an8,gen) s)"8ic)4 )r -) 8an8)4 n) ag-08inan c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e O% se den)"inan V. cholerae n) O%. A 8)d)s -)s ais-a"ien8)s de V. cholerae n) O% se -es de*e rea-iBar e- es80di) *i)=0,"ic) ara -a c)n:ir"acin de es ecie > -a ser)8i i:icacin c)n e- an8is0er) O%3?4 ara de8ec8ar -a resencia de- an8,gen) O%3?. A0n=0e ara e- 8ra8a"ien8) de- c-era n) es necesari) iden8i:icar e- ser)gr0 ) > ser)8i )4 es8a in:)r"acin 0ede ser de i" )r8ancia e ide"i)-gica en sa-0d E*-ica. C)n *ase en -a resencia de an8,gen)s s)"8ic)s es ec,:ic)s V. cholerae O% se di#ide en 8res ser)8i )s: Ina*a4 OgaOa > MiN)9i"a. CTa*-a %&D.

T0B40 1%. Reacci)nes de ag-08inacin en an8is0er) a*s)r*id) de ser)8i )s de Vibrio cholerae ser)gr0 ) O%

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %1 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
S!2713p7 Vibrio cholerae O1 OgaOa Ina*a MiN)9i"ac R!0883@: ! 0C4613:083@: !: 0:13s6!27 0Bs72B3 7 An8is0er) OgaOa Xa 2 X An8is0er) Ina*a 2b X X

a reaccin de ag-08inacin )si8i#aI b reaccin de ag-08inacin nega8i#aI c reaccin de ag-08inacin )si8i#a en a"*)s an8is0er)s.

Adaptado de: @aborator% Methods "or the <iagnosis o" Epidemic <%senter% and Cholera Centers "or <isease Control and Prevention Atlanta, Aeorgia =???

D!1!2;3:083@: ! 0:1FC!:7s s7;G1387s H7I. La carac8eriBacin an8igAnica s)"8ica se hace a ar8ir de 0n c0-8i#) 0r) de Vibrio cholerae en agar BMI Cin:0sin cere*r) c)raBnD de %< a $& h)ras de inc0*acin a 31KC. P278! 3;3!:17 ! 0C4613:083@: !: 4G;3:0 En 0n 80*) es8Ari- agregand) % "L. de s)-0cin sa-ina a- 0.<1J > c)n c)-)nias -isas > 0ras :)r"ar 0na s0s ensin densa > h)")gAnea. Veri:i=0e =0e -a s0s ensin *ac8eriana n) sea r0g)sa an8es de iniciar -a ser)8i i:icacin4 ara es8) c)-)=0e $ g)8as de -a s0s ensin en -a -"ina de ser)-)g,a > c)n ")#i"ien8)s de r)8acin girar -a -aca de #idri) d0ran8e % "in08). Si n) a arecen gr0")s4 -a s0s ensin *ac8eriana es8 -isa4 es decir4 a r) iada ara ser)8i i:icar-a. C)-)=0e 0na g)8a de an8is0er) )-i#a-en8e de Vibrio cholerae O% en -a ar8e in:eri)r de -a -"ina > c)n 0na i e8a as8e0r c)-)=0e en -a ar8e s0 eri)r de -a -"ina 0na g)8a de -a s0s ensin *ac8eriana. +eBc-e a"*as g)8as c)n 0n asa rec8a en sen8id) -)ngi80dina- > c)n ")#i"ien8)s de #ai#An rea-ice %00 #0e-8as a -a -"ina. O*ser#ar -a resencia de ag-08inacin c)n -0B indirec8a c)n8ra 0n :)nd) )*sc0r). La in8ensidad de -a reaccin es8 in:-0enciada )r -a c)ncen8racin *ac8eriana > )r -a ca-idad > 0reBa de -a e 8)na > e- agar en =0e se se"*r e- "icr))rganis").

En cas) de =0e -a ag-08inacin sea )si8i#a c0an8i:i=0e -a ag-08inacin )r cr0ces de X a XXXX de ac0erd) c)n -a ra ideB e in8ensidad de -a reaccin )*ser#ada. E- grad) de ag-08inacin se regis8ra de -a sig0ien8e :)r"a: XXXX (1 a %00J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. XXX (1J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. XX 10J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. X +en)s de- $1J de -)s "icr))rganis")s s)n ag-08inad)s. a0sencia de ag-08inacin. Si e- res0-8ad) es nega8i#) rea-iBar -a ag-08inacin c)n e- an8is0er) ")n)#a-en8e de Vibrio cholerae O%3?.

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C0and) e- ais-a"ien8) en es80di) n) reacci)na c)n e- an8is0er) nega8i#a 0ede de*erse a: )-i#a-en8e > ")n)#a-en8e4 -a reaccin

S0e e- ais-a"ien8) en es80di) n) es Vibrio cholerae O% 0 O%3?.

C0and) -a ag-08inacin c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e es dA*i- ) nega8i#a4 se de*e c)-)car -a s0s ensin *ac8eriana en *aH) +ar,a hir#iend) )r 30 "in08)s. L0eg)4 se de9a en:riar -a s0s ensin > As8a se e!a"ina n0e#a"en8e )r ag-08inacin en -"ina4 ri"er) -a s0s ensin s)-a ara )*ser#ar =0e e- ais-a"ien8) n) se #)-#i r0g)s) c)n e- ca-)r > -0eg) s, c)n e- an8is0er) )-i#a-en8e c)rres )ndien8e. Si n) ha> ag-08inacin4 se resie"*ra en agar BMI Cin:0sin cere*r) c)raBnD > rea-iBar de $ a 3 ases ara es8i"0-ar e- an8,gen) es ec,:ic). E- ser)8i ) enc)n8rad) se de*e regis8rar en e- c0adern) de Vibrio cholerae REG,R01.001.&0"0,0%&. La e"isin de res0-8ad)s a- s)-ici8an8e se de*e en#iar en e- :)r"a8) REG,R01.001.&0"0,1%2. 10.5.4 O120s 802081!2Fs1380s ! Vibrio cholerae

La iden8i:icacin de *i)8i ) se a -ica e!c-0si#a"en8e a Vibrio cholerae O%I )r s0 i" )r8ancia e ide"i)-gica4 >a =0e4 a>0da a iden8i:icar -a :0en8e de -a c)n8a"inacin4 ar8ic0-ar"en8e4 c0and) e- c-era se diagn)s8ica )r ri"era #eB en 0n a,s ) B)na ge)gr:ica. Se c)n)cen d)s *i)8i )s E- T)r > C-sic). E- *i)8i ) E- T)r ca-i:icad) c)") e- =0e re#a-ece en -a gran "a>)r,a de -)s *r)8es > e ide"ias de c-era en e- "0nd) >4 e- c0a-4 se ha ais-ad) en A"AricaI )r )8r) -ad) e- *i)8i ) c-sic) es )c) :rec0en8e enc)n8rar-) :0era de Bang-adesh. S0 de8er"inacin se rea-iBa )r "edi) de r0e*as :en)8, icas > ")-ec0-ares. O8ra de -as carac8er,s8icas de Vibrio cholerae4 es -a resencia de -a 8)!ina4 c0>a4 r) iedad esencia- es -a #ir0-encia de -a en:er"edad: se carac8eriBa )r 0nirse a 0n rece 8)r de "e"*rana de -a ce-0-ar e i8e-ia-4 ac8i#a -a adeni-a8)cic-asa > r)d0ce ni#e-es e-e#ad)s de aden)sinin")n):)s:a8) c,c-ic) CA+PcD e hi ersecrecin de sa- > ag0a4 -) =0e c)nd0ce a -a a-8a erdida de -i=0id) en diarrea4 )casi)nand) grad)s #ariad)s de deshidra8acin > dese=0i-i*ri) e-ec8r)-,8ic). S0 de8er"inacin se rea-iBa )r "edi) de r0e*as ")-ec0-ares Ta*-a C%1D.

T0B40 1&. Carac8er,s8icas de Vibrio cholerae

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %" de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
S3s1!;0s ! 13p3=38083@: Ser)gr0 )s Bi)8i )s Ser)8i )s Pr)d0ccin de 8)!ina R!40837:0 7s 87: !p3 !;30s O%4 O%3? C-sic) > E- T)r Cn) a -ica aser)gr0 ) O%3?D OgaOa4 Ina*a e MiN)9i"a Cn) a -ica a- ser)gr0 ) O%3?D Pr)d0ce 8)!ina de- c-eraa N7 2!40837:0 7s 87: !p3 !;30s Dis8in8)s de- O%4 O%3? L)s *i)8i )s n) se a -ican a -)s ais-a"ien8)s =0e n) s)n O% Es8)s 3 ser)8i )s n) se a -ican a -)s ais-a"ien8)s =0e n) s)n O% /enera-"en8e n) r)d0cen 8)!ina de- c-era4 a #eces r)d0cen )8ras 8)!inas.

a E!is8en ais-a"ien8)s =0e n) s)n 8)!igAnic)s4 er) n) es8n re-aci)nadas c)n e ide"ias.

Ada 8ad) de: La*)ra8)r> +e8h)ds :)r 8he Diagn)sis ): E ide"ic D>sen8er> and Ch)-era Cen8ers :)r Disease C)n8r)- and Pre#en8i)n A8-an8a4 /e)rgia %??? 10.6 PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA

Las r0e*as de s0sce 8i*i-idad an8i"icr)*iana se de*en rea-iBar en a=0e--)s "icr))rganis")s s)s ech)s)s de c)n8ri*0ir ) es8ar i" -icad)s en 0n r)ces) in:ecci)s) > c0and) -a s0sce 8i*i-idad de- "icr))rganis") ais-ad) n) 0ede redecirse )r s0 iden8idad. Se 0eden 0sar #arias 8Acnicas de -a*)ra8)ri) ara "edir -a s0sce 8i*i-idad in/vitro de -as *ac8erias a -)s agen8es an8i"icr)*ian)s. L)s rinci a-es "A8)d)s e" -ead)s s)n: Pr0e*a de di:0sin de disc) en agar Pr0e*a de di-0cin: o en agar o en ca-d): 2 "acr)8Acnica C80*)D 2 "icr)8Acnica C"icr) -acaD Pr0e*as se"i2a08)"a8iBadas P26!B0 ! 3=6s3@: !: 3s87 !: AC02 <32By,B06!2

10.6.1

E- "A8)d) c)nsis8e en en:ren8ar a- "icr))rganis") en es80di) c)n disc)s de an8i"icr)*ian)s4 en c)ndici)nes es8andariBadas > de8er"inar "edian8e -a -ec80ra e in8er re8acin de -)s ha-)s de inhi*icin e- r)*a*-e c)" )r8a"ien8) in #i#) de esa c)"*inacin. Para e--) se his) a 0n inc0-) es8andariBad) de -a *ac8eria s)*re -a s0 er:icie de 0na -aca de A+M s)*re -a c0a- se c)-)can disc)s de an8i"icr)*ian)s. L0eg) 0n 8ie" ) es8andariBad) de inc0*acin4 se -een -)s di"e8r)s de -as B)nas de inhi*icin a-reded)r de cada disc)4 -)s c0a-es se in8er re8an re:iriAnd)se a -a -as 8a*-as de -)s d)c0"en8)s de- CLSI > -as rec)"endaci)nes naci)na-es #igen8es4 )*8eniAnd)se 0n in:)r"e c0a-i8a8i#) de sensi*-e4 in8er"edi) ) resis8en8e. Para cada "icr))rganis") e!is8e 0na c)"*inacin es ec,:ica de "edi) de c0-8i#)4 densidad de inc0-) > c)ndici)nes de inc0*acin segEn -)s d)c0"en8)s #igen8es de- CLSI. S!4!883@: !4 ;! 37 ! 8641397.

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
E- agar +0e--er2Min8)n4 es e- "edi) =0e ha sid) se-ecci)nad)4 c)") 8i")4 de*id) a =0e en A-4 0eden crecer "0chas *ac8erias ais-adas de "a8eria- c-,nic). Se re ara segEn -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. En -as ca9as de e8ri de ?0 "" se sir#en $1 "- de "edi) > en -as ca9as de %10 ""4 10 "- de "edi). Des 0As de de9ar s)-idi:icar e- "edi) a 8e" era80ra a"*ien8e4 0ede ser 0sad) e- "is") d,a ) re:rigerar-) a 8e" era80ras en8re $W a <WC )r n) "s de ( d,as. E- M :ina- de- "edi) de*e ser (4$. A4;08!:0;3!:17 y ;0:!L7 ! 47s s!:s3 3s87s. L)s sensidisc)s se de*en "an8ener re:rigerad)s a &WC. L)s disc)s de enici-ina4 car*enici-ina4 ce:a-)s )rinas > )!aci-ina se de*en "an8ener a 2%&WC4 ara "an8ener s0 )8encia. L)s 80*)s de -)s disc)s de*en ser re8irad)s de -a ne#era ) de- c)nge-ad)r % $ h)ras an8es de ser 08i-iBad)s ara er"i8ir =0e en e- ")"en8) de 0sar-)s es8An a -a 8e" era80ra adec0ada. N) se de*en 08i-iBar -)s disc)s c)n -a :echa de e! iracin #encida. P2!p02083@: !4 3:@8647. MA17 7 32!817 A ar8ir de 0n c0-8i#) 0r) de $& h)ras se-ecci)ne #arias c)-)nias *ien ais-adas4 =0e resen8en -a "is"a ")r:)-)g,a4 8"e-as c)n 0na asa rec8a > 8rans:iAra-as a 0n 80*) c)n s)-0cin sa-ina a 04?J C&21 "-D. A90s8e -a 80r*ideB a- 80*) nE"er) 041 de +cFar-and c)n s)-0cin sa-ina es8AriC)n8r)-e -a c)ncen8racin de- inc0-) "edian8e e- 0s) de- es ec8r):)8"e8r) a ;$1n". La -ec80ra de -a densidad 8ica de*e es8ar en8re 040< a 04% de a*s)r*ancia.

I:7864083@: ! 40s 80L0s. De*e rea-iBarse den8r) de -)s %1 "in08)s sig0ien8es de re arad) e- inc0-). U8i-ice 0n esc)*i--n es8Ari-. S0"er9a e- esc)*i--n en -a s0s ensin *ac8eriana es8andariBada. Presi)ne e- esc)*i--n :ir"e"en8e c)n8ra -as aredes de- 80*)4 ara e-i"inar e- e!ces) de -a s0s ensin. Es arBa e- inc0-) en 8res direcci)nes s)*re -a s0 er:icie en8era de -a ca9a de agar Csie"*ra en re9i--aD4 r)8and) -a ca9a ;0K a r)!i"ada"en8e4 en cada ) )r80nidad. C)n e- esc)*i--n rea-ice 0na sie"*ra a-reded)r de- *)rde de -a ca9a. Ap438083@: ! 47s s!:s3 3s87s. Per"i8a =0e e- inc0-) se se=0e4 )r 321 "in08)s4 er) n) "s de %1 "in08)s4 an8es de c)-)car -)s sensidisc)s. C)-)=0e -)s sensidisc)s Cen -a ca9a de ?0"" "!i") & disc)s > en -a ca9a de %10"" "!i") < disc)sD4 c)n -a a>0da de 0na inBa es8Ari- haciend) resin ara es8ar seg0r)s de- c)" -e8) c)n8ac8) c)n e- agar. La dis8ancia de- disc) c)n e- *)rde de -a ca9a de*e 8ener ? "" > -a dis8ancia en8re cada disc) de*e 8ener $& ""4 ara e--) e" -ee 0na -an8i--a. Una #eB c)-)cad)s -)s disc)s n) 0eden ser re")#id)s 0es -a di:0sin dean8i*i8ic) c)"ienBa ins8an8nea"en8e. In#ier8a -a ca9a > --A#e-a a -a inc0*ad)ra a 31KC en -a a8"s:era a r) iada4 c0a-=0ier de")ra en e- r)ces) de inc0*acin er"i8ir e- e!ces) de re2di:0sin de- an8i*i8ic).

C!p0s 87:1274

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %& de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Las ce as de re:erencia de*ern inc-0irse cada =0ince d,as ) c0and) se 08i-ice 0n -)8e n0e#) de a-g0n) de -)s reac8i#)s e" -ead)s en -a r0e*a. E. coli P. aeruginosa ATCC $1?$$ ATCC $(<13 S. aureus S. aureus ATCC $?$%3 CBLXD ATCC $1?$3 CBL2D

Ver lmites de las Bonas de inhibici#n aceptables en las tablas del documento de la C@S7 >*+== 10.6.1.1 L!81620 ! 47s 2!s6410 7s Des 0As de %<2$& h)ras de inc0*acin se rea-iBa -a -ec80ra de- an8i*i)gra"a "idiend) e- di"e8r) de -a B)na de c)" -e8a inhi*icin de- creci"ien8) Cen "i-,"e8r)sD.

Leer -as -acas s-) si e- creci"ien8) *ac8erian) es c)n:-0en8e. +edir -as B)nas de inhi*icin en -a *ase de -a -aca de Pe8ri 08i-iBand) ca-i*re ) reg-a c)n8ra 0n :)nd) negr) e i-0"inada c)n -0B re:-e9ada. A r)!i"ar -a -ec80ra a- #a-)r en8er) en "i-,"e8r)s "s cercan). C)nsiderar c)") 0n8) :ina- e- rea =0e n) "0es8re desarr)--) )*#i) a )9). P)cas c)-)nias de 8a"aH) signi:ica8i#) =0e crecen den8r) de -a B)na de inhi*icin4 0eden re resen8ar 0n c0-8i#) c)n8a"inad) ) #arian8es resis8en8es4 )r -) =0e ha> =0e s0*c0-8i#ar-as4 reiden8i:icar-as > reensa>ar-as. Si -0eg) de es8) aEn a arecen esas )cas c)-)nias de- "is") gAr"en4 "edir -a B)na in8erna -i*re de c)-)nias.

I:1!2p2!1083@: ! 2!s6410 7s: In8er re8ar -)s 8a"aH)s de -as B)nas de inhi*icin )*8enidas en e- an8i*i)gra"a )r di:0sin c)n -as Ta*-a $A a $a de- d)c0"en8) +%002S #igen8e de- CLSI4. E- 8a"aH) de -a B)na es c)" arad) c)n -as 8a*-as =0e resen8a e- Ins8i808) de Es8ndares C-,nic)s > de La*)ra8)ri) CCLSID4 ara -a r0e*a de s0sce 8i*i-idad an8i"icr)*iana de di:0sin de disc)4 c)n e- :in de in8er re8ar s, e- "icr))rganis") es sensi*-e4 c)n resis8encia in8er"edia ) resis8encia a-8a. A:13B3@1387s 61343M0 7s !: 40 1A8:380 ! 3=6s3@: ! 3s87 !: 0C02 p020 !s16 37 ! 2613:0 ! 03s40;3!:17s ! Salmonella spp " Shigella sp., !: !4 G26p7 ! M3827B3747CF0: Acid) na-id,!ic) C-)ran:enic)Te8racic-ina A")!aci-ina2Acid) c-a#0-anic) AB8re)na"T A"iNacinaT Es8re 8)"icinaT 30Lg 30Lg 30Lg $0Lg'%0Lg 30Lg 30Lg %0Lg

T Es8)s an8i*i8ic)s se de8er"inan 0nica"en8e ara Salmonella T> hi"0ri0"4

C7:s3 !20837:!s !sp!8304!s:

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %' de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
T)das -as en8er)*ac8erias r)d0c8)ras de BLEE4 de*er,an ser in:)r"adas c)") resis8en8es a 8)das -as enici-inas4 ce:a-)s )rinas > aB8re)na"4 inde endien8e"en8e de -)s res0-8ad)s )*8enid)s Yin #i8r)Z. L)s res0-8ad)s de -as c)"*inaci)nes de an8i*i8ic)s c2-ac8"ic)s'inhi*id)res de c2-ac8a"asas4 ce:a"icinas4 )!ace:e"es > car*a ene"es n) de*ern ser ")di:icad)s e in:)r"arse segEn -)s res0-8ad)s )*8enid)s. L)s ais-a"ien8)s de Salmonella s .4 sensi*-es a -as :-0)r=0in)-)nas4 er) =0e den resis8en8es a cid) na-id,!ic) 0eden as)ciarse c)n :a--a ) de")ra en -a res 0es8a a- 8ra8a"ien8) c)n :-0)r=0in)-)nas en acien8es c)n sa-")ne-)sis e!8rain8es8ina-. P)r -) =0e -as :-0)r)=0in)-)nas de*en ser in:)r"adas c)") SD > ac)" aHarse c)n 0na n)8a a -)s "Adic)s ad#ir8iend) =0e ese ais-a"ien8) )dr,a n) ser erradicad) c)n e- 8ra8a"ien8) c)n es8as dr)gas. 10.6.1.2 F6!:1!s ! !2272 y 43;310837:!s !4 ;A17 7

C0and) -)s di"e8r)s de inhi*icin )*ser#ad)s c)n -as ce as de re:erencia ATCC n) c)rres )nden c)n -)s indicad)s )r -a CLSI en -as 8a*-as c)rres )ndien8es4 de*en c)nsiderarse -as sig0ien8es :0en8es de err)r: Err)res en -a 8ranscri cin de -a in:)r"acin de- c)n8r)- de ca-idad Err)res de- -ec8)r en -as "edici)nes de -as B)nas de inhi*icin C)n8a"inacin ) ca"*i)s en -a ce a c)n8r)Inc0-)s c)ncen8rad)s ) di-0id)s Es8ndar de +cFar-and de8eri)rad) ) n) agi8ad) Te" era80ras ) a8"s:eras de inc0*acin inc)rrec8as Varia*i-idad en -)s di:eren8es -)8es de "edi) PArdida de )8encia de -)s an8i"icr)*ian)s en -)s disc)s d0ran8e s0 a-"acena"ien8) Inc0*acin de -as -acas en arri--as n) h)riB)n8a-es 10.6.2 P26!B0 s!;3,0617;013M0 0 +M3827S80:-

Es 0n "A8)d) de iden8i:icacin diseHad) ara de8er"inar -a sensi*i-idad a agen8es an8i"icr)*ian)s > -a iden8i:icacin a ni#e- de es ecie de *aci-)s /ra" nega8i#)s aer)*i)s > anaer)*i)s :ac0-8a8i#)s. L)s ensa>)s de s0sce 8i*i-idad an8i"icr)*iana se *asan en 0na #ersin en "inia80ra de -a r0e*a de sensi*i-idad en ca-d) =0e se han deshidra8ad) en 0na "icr) -aca. L)s ane-es 08i-iBad)s 8ienen 0na c)"*inacin de c)ncen8raci)nes an8i"icr)*ianas c)n e=0i#a-en8es a -)s 0n8)s de c)r8e in8er re8a8i#)s deCLSI. Ver Ins8r0c8i#) +icr)Scan INT,R01.001.&0"0.002. E- ane- 08i-iBad) ara es80di) de r08ina de ais-a"ien8)s de Salmonella s % Shigella s .4 en e- /r0 ) de +icr)*i)-)g,a es e- ane- nega8i#) NC10 +icr)Scand e- c0a- de8er"ina c)ncen8raci)nes ",ni"as inhi*i8)rias ara -)s sig0ien8es an8i"icr)*ian)s. A"iNacina Ci r):-)!acina A")!ici--ina 'Acid) c-a#0-anic) Er8a ene" A" ici--ina /en8a"icina AB8re)na" I"i ene" Ce:aB)-in Le#):-)!acin

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %( de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Ce:e i"e +er) ene" Ce:)8a!i"e Pi eraci--ina Ce:)8a!i"e ' Acid) c-a#0-anic) Pi eraci--ina ' TaB)*ac8a" Ce:)!i8in Te8rac>c-ina 10.'." EDp2!s3@: !4 2!s6410 7s Ce:8aBidi"a Ticarci--ina ' Acid) c-a#0-anic) Ce:8aBidi"a ' Acid) c-a#0-anic) T)*ra"icina Ce:8ria!)na Tri"e8) ri" ' S0-:a"e8)!aB)Ce:0r)!i"a

L)s res0-8ad)s se e! resan segEn -as ca8eg)r,as de sensi*-es CSD4 in8er"edi)s CID4 resis8en8es CRD ) n) sensi*-e CNSD. Para a-g0nas dr)gas s-) se dis )ne de 0n8)s de c)r8e de sensi*i-idad4 de*id) a =0e se han iden8i:icad) "0> )cas a ning0na ce a resis8en8e4 )r -) =0e s-) 0eden ser in:)r"adas c)") sensi*-es. Para a-g0nas c)"*inaci)nes "icr))rganis")2an8i"icr)*ian) se 0ede in:)r"ar -a ca8eg)r,a de sensi*i-idad dis"in0ida CSDD. Es8a ca8eg)r,a se 08i-iBa en -)s cas)s en =0e )r e- :en)8i ) )*ser#ad) en e- an8i*i)gra"a se 0ede s)s echar -a resencia de 0n "ecanis") de resis8encia de *a9) ni#e- =0e n) --ega a dar resis8encia in #i8r)4 er) =0e en a-g0n)s cas)s4 0ede --e#ar a :a--a de 8ra8a"ien8) si se -e ad"inis8ra a- acien8e esse an8i"icr)*ian) Ce9: Salmonella s . #s :-0)r=0in)-)nasD. 10.7. T2010;3!:17: :7 0p4380

11. DOCUMENTOS DE REFERENCIA %. Ins8i808) Naci)na- de Sa-0d. Pr)8)c)-) de +)r8a-idad )r EDA. $00(. $. Cceres DC4 Es8rada E4 DeAn8)ni) R4 Pe-eB D. La en:er"edad diarreica ag0da: 0n re8) ara -a sa-0d E*-ica en C)-)"*ia. Re#. Pana" Sa-0d PE*-ica. $001I %(C%D:;G%& 3. UNICEF4 Es8ad) +0ndia- de -a In:ancia $00<: S0 er#i#encia In:an8i-. 4. 8armer :. *++,. Enterobacteriaceae: introduction and identi"ication, p. -,-/-0+. 7n Murra% P, Baron :, P"aller M, :orgensen :, ;ol'en : 2ed.3, Manual o" clinical microbiolog%, (th ed. ASM Press, )ashington, <C. 5. Sch)eder /N4 Mi-*i M. +)-ec0-ar Pa8h)genesis ): Shigella s .: C)n8r)--ing M)s8 Ce-- Signa-ing4 In#asi)n4 and Dea8h *> T> e III Secre8i)n. C-inica- +icr)*i)-)g> Re#ieOs $00< V)-. $%4 . %3&G%1;. 6. Ins8i808) Naci)na- de En:er"edades In:ecci)sas A.N.L.I.S. YDr. Car-)s /. +a-*rnZ Cen8r) Regi)nade Re:erencia de- RMO /-)*a- Sa-" S0r# ara A"Arica de- S0r. +an0a- de Pr)cedi"ien8)s ara eDiagns8ic) > Carac8eriBacin de Salmonella s . B0en)s Aires4 Argen8ina $00(.. (. +0rra>. P4 Bar)n. Ea4 P:a--er +A4 Ten)#er F.C.4 6)-Nen R.M. edi8)rs. +an0a- ): C-inica- +icr)*i)-)g>. <8h.edi8i)n. $003. Rashing8)n D.C.4 A"erican S)cie8> :)r +icr)*i)-)g>. Cha 8er &$4 ;1& 2 ;(% 8. She-)*)-ina4 E. S.4 S0--i#an4 S. A.4 OeNei--4 @. R.4 Ne#in4 @. P.4 L)#-e>4 D. R. C$00&D. Is)-a8i)n4 Charac8eriBa8i)n4 and UCVID2Red0cing P)8en8ia- ): a Fac0-8a8i#e-> Anaer)*ic4 Acid2Resis8an8 Bac8eri0" :r)" L)O2 M4 Ni8ra8e2 and UCVID2C)n8a"ina8ed S0*s0r:ace Sedi"en8 and Descri 8i)n ): Salmonella s0*8erranea s . n)#.. A -. En#ir)n. +icr)*i)-. (0: $?1?2$?;1D

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %) de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
9. RMO C)--a*)ra8ing Cen8re :)r Re:erence )n Salmonella4 Pa8ricN A.D. /ri")n8 ` Franf)is2Fa#ier Rei-Ins8i808) Pas8e0r4 Par,s Francia4I An8igenic :)r"0-ae ): 8he Sa-")ne--a ser)#ars4 ?8h edi8i)n $00( 10. Ins8i808) Naci)na- de En:er"edades In:ecci)sas A.N.L.I.S. YDr. Car-)s /. +a-*rnZ Cen8r) Regi)nade Re:erencia de- RMO /-)*a- Sa-" S0r# ara A"Arica de- S0r. +an0a- de Pr)cedi"ien8)s ara eDiagn)s8ic) > Carac8eriBacin de Shigella s . B0en)s Aires4 Argen8ina. $00(. 11. Br))Ns4 /:.4 B08e-4 aS.4 +)rse4 SA. +icr)*i)-)gia "edica de aaOe8B4 +e-nicN > Ade-*erg. %( a . $00$. Edici)n. Ca i80-) %; $;? 2<3. 12. D0P)n84 M. L.4 Le#ine4 +. +.4 M)rnicN4 R. B. ` F)r"a-4 S. B. C%?<?D. In)c0-0" siBe in shige--)sis and i" -ica8i)ns :)r e! ec8ed ")de ): 8rans"issi)n. a In:ec8 Dis %1?4 %%$;G%%$< 13. PL +e-i8)4 DL. R))dOard4 a. +0nr)4 a. Ra-sh4 R. F)s8er4 P. Ti--e>4 e8 a-. A N)#e- Shigella d%senteriae Ser)#ar Is)-a8ed in Canada. a)0rna- ): C-inica- +icr)*i)-)g>. $001. V)-. &3 . (&0G(&&. 14. aanda a+4 A**)88 SL. %?<<. The gen0s Shigella. In The En8er)*ac8eria. $nd. Edi8i)n. Rashing8)n4 D.C.: AS+ PresI $00;. P.;12;(

15. Ins8i808) Naci)na- de En:er"edades In:ecci)sas A.N.L.I.S. YDr. Car-)s /. +a-*rnZ Cen8r) Regi)nade Re:erencia de- RMO /-)*a- Sa-" S0r#4 ara A"Arica de- S0r. +an0a- de Pr)cedi"ien8)s Ais-a"ien8)4 iden8i:icacin > carac8eriBacin de Vibrio cholerae, B0en)s Aires4 Argen8ina. $00<.

16. Cen8ers :)r Disease C)n8r)- and Pre#en8i)n A8-an8a4 La*)ra8)r> +e8h)ds :)r8 Diagn)sis ): E ide"ic
D>sen8er> and Ch)-era4 /e)rgia %???.

12. CONTROL DE REGISTROS

CONTROL DE REGISTROS
IDENTIFICACION ORDENACI ON DOCUMENT AL
Se )rdena cr)n)-gica"e n8e

ARCEI$O DE GESTION RESPONSAB LE


E- r):esi)nares )nsa*-e der)gra"a

ARCEI$O CENTRAL TIEMPO DE RETENCI ON


3 aH)s

ARCEI$O EISTRIC O METODO UTILISADO


E-i"inacin

COD

NOMBRE

LUGAR
Archi#) de Salmone lla spp Sa8A-i8e

METODO UTILISAD O
Se "an8iene en e- archi#) de ges8in de +icr)*i)-)g, a has8a =0e ase aarchi#) cen8raSe "an8iene en e- archi#) de ges8in de +icr)*i)-)g, a has8a =0e ase aarchi#) cen8ra-

RESPON SABLE
Secre8aria de- /r0 ) de +icr)*i)-)g, a

TIEMPO

1 aH)s

REG, R01.001.&0 "0,0%"

C60 !2:7 ! 2!C3s127 Salmonella spp

REG, R01.001.&0 "0,0%%

C60 !2:7 2!C3s127 ! Shigella sp

Se )rdena cr)n)-gica"e n8e

E- r):esi)nares )nsa*-e der)gra"a

Archi#) de Shigella Sa8A-i8e

3 aH)s

Secre8aria de- /r0 ) de +icr)*i)-)g, a

1 aH)s

E-i"inacin

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina %9 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Se )rdena cr)n)-gica"e n8e E- r):esi)nares )nsa*-e der)gra"a Archi#) de Vibrio cholerae Sa8A-i8e 3 aH)s Se "an8iene en e- archi#) de ges8in de +icr)*i)-)g, a has8a =0e ase aarchi#) cen8raSe "an8iene en e- archi#) de ges8in de +icr)*i)-)g, a has8a =0e ase aarchi#) cen8raSe "an8iene en e- archi#) de ges8in de +icr)*i)-)g, a has8a =0e ase aarchi#) cen8raSe "an8iene en e- archi#) de ges8in de +icr)*i)-)g, a has8a =0e ase aarchi#) cen8raSecre8aria de- /r0 ) de +icr)*i)-)g, a 1 aH)s E-i"inacin

REG, R01.001.&0 "0,0%&

C60 !2:7 ! 2!C3s127 ! Vibrio 8?74!20!

REG, R01.001.&0 "0,01"

R!s6410 7s Salmonella spp

Se )rdena cr)n)-gica"e n8e

E- r):esi)nares )nsa*-e der)gra"a

Archi#) de Salmone lla spp Sa8A-i8e

3 aH)s

Secre8aria de- /r0 ) de +icr)*i)-)g, a

1 aH)s

E-i"inacin

REG, R01.001.&0 "0,01%

R!s6410 7s Shigella sp

Se )rdena cr)n)-gica"e n8e

E- r):esi)nares )nsa*-e der)gra"a

Archi#) de Shigella Sa8A-i8e

3 aH)s

Secre8aria de- /r0 ) de +icr)*i)-)g, a

1 aH)s

E-i"inacin

REG, R01.001.&0 "0,1%2

R!s6410 7s ! Vibrio 8?74!20!

Se )rdena cr)n)-gica"e n8e

E- r):esi)nares )nsa*-e der)gra"a

Archi#) de Shigella Sa8A-i8e

3 aH)s

Secre8aria de- /r0 ) de +icr)*i)-)g, a

1 aH)s

E-i"inacin

1". CONTROL DE RE$ISIONES $ERSIO N 00 FECEA APROBACION AA MM D D $0% 0< $$ % DESCRIPCIN Creacin de D)c0"en8)s

1%. ANEOOS Ane!) %. Ane!) $. Ane!) 3. Ane!) &. Ane!) 1. Ane!) ;. Ane!) (. Ane!) <. Ane!) ?. +edi) de 8rans )r8e Car>2 B-air Ca-d) se-eni8) cis8ina Agar FLD Agar MeN8)en Ag0a e 8)nada Agar TCBS Agar BMI Agar Ci8ra8) Agar TSI

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &0 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Ane!) %0. Ane!) %%. Ane!) %$. Ane!) %3. Ane!) %&. Ane!) %1. Ane!) %;. Ane!) %(. Ane!) %<. Ane!) %?. Ane!) $0. Ane!) $%. Ane!) $$. Ane!) $3. Ane!) $&. Ane!) $1 Ane!) $; Ane!) $( Ane!) $< Ane!) $? Ane!) 30 Ane!) 3% Ane!) 3$ Ane!) 33 Ane!) 3& Ane!) 31 Ane!) 3; Ane!) 3( Agar LIA Agar Urea Agar +)8i-idad /I Agar Ace8a8) Ca-d) A"in)cid)s Ca-d) aB0cares r)9) :en)+a-)na8) Ca-d) Ind)Ca-d) VP Agar T,:ica Ca-d) EdgOins S)-0ci)n sa-ina n)r"a- 0.<1J S)-0cin sa-ina :)r")-ada a- <P Midr)c-)r0r) 8e8ra"e8i-2 2:eni- dia"inaC r0e*a de )!idasaD Des)!ic)-a8) de s)di) a- 1J C r0e*a de -a c0erdaD Ca-d) c-)r0r) de s)di)4 en di:eren8es c)ncen8raci)nes Agar +0e--er2 Min8)n +edi) -eche descre"ada Diagra"a de iden8i:icacin res0n8i#) de *aci-)s /ra" nega8i#)s Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s TSI V @'A4 M$S X Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s TSI V @'A sin gas4 M$S G4 -isina G4 Orni8ina G Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s Lisina G4 Orni8ina G4 Ind)Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s Lisina G24 Orni8ina 2G4 ci8ra8). Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s Lisina G4 Orni8ina X Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s TSI V @'A4 M$S G4 -isina G4 Orni8ina X Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s Lisina X4 Orni8ina G Diagra"a de iden8i:icacin de *aci-)s /ra" nega8i#)s Lisina X4 Orni8ina X Pr)cedi"ien8)s ara -a in)c0-acin de -)s "edi)s > -as r0e*as *i)=0,"icas

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &1 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A:!D7 1. M! 37 ! 120:sp721! C02y y B4032 C0s0s 87;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 OFOID F6: 0;!:17 Es8e "edi) es 08i-iBad) ara e- 8rans )r8e de "0es8ras de "a8eria :eca- >') de ais-a"ien8)s4 de "icr))rganis")s /ra" nega8i#)s en8Aric)s. E- "edi) de 8rans )r8e de Car> > B-air es adec0ad) ara e- 8rans )r8e de es8e 8i ) de "0es8ra4 de*id) a s0s escas)s n08rien8es > e- M de <4& incre"en8a -a s0 er#i#encia de -)s "icr))rganis")s > e#i8a s0 re -icacin. P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. O*ser#e =0e a-g0nas casas n) inc-0>en e- CaC-$4 en 8a- cas) de*e agregarse % g F %00 "- > a90s8arse e- M a <4& c)n NaOM 04%N. En#ase en 80*)s c)n 8a a de r)sca %;!%10"" 0n #)-0"en de ( "-. Es8eri-ice en e- *aH) +ar,a a 0n8) de e*0--icin d0ran8e %1 "in08)s. C)nser#e a &KC )r ; a < "esesI si ha> ca"*i) de c)-)r ) deshidra8acin de*e descar8arse. Es8e "edi) 8a"*iAn se 0ede )*8ener de "anera c)"ercia-4 e!is8en di:eren8es casa c)"ercia-es CBBL4 C)- an4 en8re )8r)sDI s)n sis8e"as es8Ari-es4 -is8)s ara 08i-iBarse. I:7864083@: I" regne e- esc)*i--n 8ra8ad) c)n -a "a8eria :eca- ) c)n e- ais-a"ien8). In8r)d0Bca e- esc)*i--n has8a e- 8erci) s0 eri)r de- "edi) R)" a -a ar8e s)*resa-ien8e de- esc)*i--n > 8a e e- 80*) her"A8ica"en8e. +ar=0e e- 80*) > en#,e a- -a*)ra8)ri) -) an8es p7s3B4! 0 1!;p!201620 0;B3!:1! 87: !4 :7;B2! 40 ! 0 , CA:!27, =!8?0 y ?720 ! 40 17;0 ! 40 ;6!s120 7 ! 2!87C3 0 !4 03s40;3!:17.

C7:1274 ! C043 0

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Rec)9a c)n 0n esc)*i--n es8Ari-4 0n c0-8i#) 0r) de 0na ce a c)n)cida4 c)-=0e-a en e- "edi) de 8rans )r8e Resie"*re a -as $& 2 &< h)ras.

La ce a de*e resen8ar 0n *0en creci"ien8) > 0na ")r:)-)g,a 8, ica des 0As de -a in)c0-acin en e- "edi) adec0ad) > de -a inc0*acin d0ran8e %<2$& h)ras. Adici)na-"en8e rea-ice e- c)n8r)- de es8eri-idad C#er c)n8r)- de ca-idad de -)s "edi)s de c0-8i#)D. Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene en8re 1 G $1 WC D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin.

A:!D7 2. C04 7 ! s!4!:317 C0s0s 87;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ F6: 0;!:17 Es 0n ca-d) de enri=0eci"ien8) ara e- ais-a"ien8) de Salmonella % Shigella a ar8ir de heces4 )rina4 ag0a > a-i"en8)s. Las e 8)nas de- "edi) s0"inis8ran -)s c)" 0es8)s car*)nad)s > ni8r)genad)sI e- se-eni8) inhi*e ecreci"ien8) de /ra" )si8i#)s > /ra" nega8i#)s inc-0>end) en8er)c)c)s > c)-i:)r"esI -)s :)s:a8)s "an8ienen es8a*-e e- M > dis"in0>en -a 8)!icidad de- se-eni8). P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. Se de*e ca-en8ar c)n ca-)r s0a#e4 :7 !L02 ?!2932. Dis8ri*0>a 1 "- en 80*)s c)n 8a a de r)sca %;!%00.

I:7864083@: C)n 0n his) ) 8)"e a r)!i"ada"en8e % a $ g de -a "a8eria :eca-. C)-=0e-a en e- ca-d)4 agi8e > descar8e e- esc)*i--n. Inc0*e )r < a %< h)ras > s0*c0-8i#e de- s)*renadan8e4 :7 ;!M8402 )r in#ersin.

C7:1274 ! C043 0 Para e- c)n8r)- de creci"ien8)4 se"*rar 0na ce a c)n)cida c)") en8er) a8gena4 -ac8)sa nega8i#a C Salmonella ) ShigellaDI inc0*e )r < a %< h)ras > s0*c0-8i#e. A- rec0 erar e- "icr))rganis") en e- c0-8i#)4 As8e de*er c)nser#ar -as carac8er,s8icas de creci"ien8) > ")r:)-)g,a 8, icas. Es8e ca-d) )r ser 0n "edi) de enri=0eci"ien8) a-8a"en8e se-ec8i#) n) re=0iere de c)n8r)- re#i) de es8eri-idad. . Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)&

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &" de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C7:s!29083@:: es8e ca-d)4 s)-) se re ara a- ")"en8) de e" -earse. D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d). A:!D7 ". AC02 D347s0 , 43s3:0 , !s7D3874017 +OLDC0s0s C7;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID F6: 0;!:17 Es 0n "edi) se-ec8i#) ara e- ais-a"ien8) de es ecies de -)s gAner)s Salmonella % Shigella. La :er"en8acin de -a !i-)sa4 -a decar*)!i-acin de -a -isina > -a r)d0ccin de s0-:0r)s de hidrgen)4 er"i8e 0na di:erenciacin ri"aria de es8)s gAner)s de )8ras *ac8erias n) en8er) a8genas. P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. N) es8eri-ice en a08)c-a#e ni s)*reca-ien8e. I:7864083@: Sie"*re -a "0es8ra )r ag)8a"ien8) e inc0*e a 3(KC )r %<2$& h)ras. L!81620 P7s31390: Las c)-)nias de -as en8er)*ac8erias :er"en8ad)ras de -ac8)sa CE. coli, Clebsiella sp, Citrobacter sp etcD se 8)rnan a"ari--) *ri--an8e. N!C01390: Las c)-)nias n) :er"en8ad)ras a arecen de c)-)r r)9as CShigella s .D P27 68172 ! E2S: L)s "icr))rganis")s r)d0c8)res de M$S resen8an ade"s 0n c)-)r negr) en e- cen8r) de -a c)-)nia CS. T> hi c)-)nias r)9as > cen8r) negr)D C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 P7s31397: se"*rar 0n en8er) a8gen)4 -ac8)sa nega8i#a CSalmonella ) ShigellaDI e- c0-8i#) de*er c)nser#ar -as carac8er,s8icas de creci"ien8) > ")r:)-)g,a 8, icas. C7:1274 N!C01397: se"*rar &. in"luenBae, no se observa creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r 3 d,as D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin. A:!D7 %. AC02 E!T17!:

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &% de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C0s0s C7;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID F6: 0;!:17 Es 0n "edi) se-ec8i#) > di:erencia- de -)s gAner)s Salmonella > Shigella de )8ras en8er)*ac8erias. E- a-8) c)n8enid) de e 8)na c)" ensa e- )der inhi*i8)ri) de -as sa-es *i-iares ara e- gAner) Shigella. E- incre"en8) de -a -ac8)sa hace :ci- rec)n)cer -as c)-)nias =0e s)n -en8as :er"en8ad)ras de -a -ac8)sa. E- 8i)s0-:a8) > ci8ra8) :Arric) es8n resen8es ara de8ec8ar a -)s "icr))rganis")s r)d0c8)res de M$S. P2!p02083@: Siga -as indicaci)nes de -a casa c)"ercia-. E- "edi) n) se es8eri-iBa en a08)c-a#e. I:7864083@: La "0es8ra de*e se"*rarse )r ag)8a"ien8) e inc0*e a 3(KC d0ran8e %< a $& h)ras. L!81620 P7s31390: -as c)-)nias de -as en8er)*ac8erias :er"en8ad)ras de -ac8)sa C E. coli, Clebsiella s .4 Citrobacter s . e8c.D se 8)rnan anaran9adas. N!C01390: n) :er"en8ad)ras a arecen de c)-)r aB0-2#erde a #erde CShigella s .D P27 68172 ! E2S: -)s "icr))rganis")s r)d0c8)res de M$S resen8an ade"s 0n c)-)r negr) en e- cen8r) de -a c)-)nia CS. T> hi c)-)nias #erdes > cen8r) negr)D C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 P7s31397: se"*rar 0n en8er) a8gen)4 -ac8)sa nega8i#a CSalmonella ) ShigellaDI e- c0-8i#) de*er c)nser#ar -as carac8er,s8icas de creci"ien8) > ")r:)-)g,a 8, icas. C7:1274 N!C01397: &. in"luenBae, no se observa creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r 3 d,as D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin. A:!D7 &. C04 7 ! !:2356!83;3!:17 , 0C60 p!p17:0 0 048043:0 pE ),% F6: 0;!:17 Es 0n ca-d) de enri=0eci"ien8) e inhi*icin ara -as "0es8ras de "a8eria :eca-. Es 08i-iBad) en e- r)cesa"ien8) de "0es8ras s)s ech)sas de Vibrio cholerae )r s0 M a-ca-in) =0e inhi*e -a :-)ra ac)" aHan8e :a#)reciend) s0 rec0 eracin. Es ade"s E8i- c0and) -a can8idad de "icr))rganis")s resen8es en -a "0es8ra es e=0eHa de*id) a an8i*i8ic)8era ia re#ia ) en cas) de )r8ad)res san)s. C7;p7s383@:

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina && de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Pe 8)na C-)r0r) de s)di) Ag0a des8i-ada %0g %0g %000"-

P2!p02083@: Dis0e-#a -)s ingredien8es > a90s8e e- M a <4& c)n NaOM %N. Dis8ri*0>a e- "edi) en can8idades de 1 "- en 80*)s 8a a de r)sca %;!%$1"". Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC )r %1 "in08)s. I:7864083@: Agi8e e- esc)*i--n c)n -a "0es8ra den8r) de- ca-d) e inc0*e a 31KC )r ;2< h)ras. S0*c0-8i#ar en 0n agar TCBS 8)"and) 0na asada de -a s0 er:icie. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. E- c)n8r)- de creci"ien8) se rea-iBa se"*rand) en e- ca-d) 0na ce a de V. cholerae inc0*ar de ; a < h)ras4 s0*c0-8i#ar en e- "edi) se-ec8i#) TCBS. A- rec0 erar e- "icr))rganis") en e- c0-8i#)4 As8e de*er c)nser#ar -as carac8er,s8icas de creci"ien8) > ")r:)-)g,a 8, icas. Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d) d0ran8e s0 a-"acena"ien8). A:!D7 '. AC02 TCBS C0s0s 87;!28304!s: BBL4 DIFCO4 +ERC@. F6: 0;!:17 Es 0n "edi) a-8a"en8e se-ec8i#) ara e- ais-a"ien8) de V. cholerae. P)r s0 c)n8enid) de sa-es *i-iares4 inhi*e ecreci"ien8) de -as *ac8erias /ra" )si8i#as > nega8i#as. Ade"s c)n8iene s0cr)sa Csacar)saD c)") car*)hidra8) :er"en8a*-e )r=0e -a "a>)r,a de- gAner) Vi*ri) -) :er"en8a4 e- 8i)s0-:a8) de s)di) -e r) )rci)na eaB0:re4 e- aB0- de 8i")- > de *r)")8i")- s)n indicad)res de MI n) )*s8an8e e- M a-ca-in) =0e ):rece e- "edi) incre"en8a -a rec0 eracin de- "icr))rganis"). P2!p02083@: De ac0erd) c)n -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. P278! 3;3!:17 Sie"*re -a "0es8ra direc8a"en8e de- "edi) de 8rans )r8e ) rea-ice 0n e 8)nada a-ca-ina. R)8e e- esc)*i--n en -a ar8e s0 eri)r de 0n) de -)s c0adran8es de- agar. Rea-ice 0na sie"*ra )r ag)8a"ien8) c)n e- :in de )*8ener c)-)nias ais-adas. Inc0*e a 31WC )r %<2$& h)ras. re2enri=0eci"ien8) en ag0a

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &' de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
L!81620 Las es ecies de- gAner) Vibrio =0e :er"en8an -a sacar)sa4 crecen en e- "edi) de TCBS :)r"and) c)-)nias a"ari--as. C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. C7:1274 P7s31397: se"*rar 0na ce a creci"ien8) > ")r:)-)g,a 8, icas. V. cholerae > e- c0-8i#) de*er c)nser#ar -as carac8er,s8icas de

C7:1274 N!C01397: E. coli, no se observa creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r 3 d,as D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin. A:!D7 (. AC02 BEI +I:=6s3@: 8!2!B27 8720M@:C0s0s C7;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ G OFOID F6: 0;!:17 Es 0n "edi) s)-id) =0e c)n8iene in:0sin a-8a"en8e n08ri8i#a4 es 0n "edi) enri=0ecid) n) se-ec8i#)4 ara eais-a"ien8) de "icr))rganis")s )c)s e!igen8esI )r n) ser se-ec8i#)4 es8 -i*re de inhi*id)res -) =0e :aci-i8a s0 0s) ara r0e*as de ser)8i i:icacin4 rec)-eccin de ce as4 e8c. P2!p02083@: De ac0erd) c)n -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. Es8eri-ice en a08)c-a#e d0ran8e %1 "in08)s a %1 -i*ras de resin C%$%KCD. De9e en:riar e- "edi) a 0na 8e" era80ra de &1K a 10KC en *aH) +ar,a. Sir#a e- #)-0"en necesari) ara =0e e- "edi) =0ede c)n 0na r):0ndidad a r)!i"ada de &"" De9e en:riar *ien e- "edi) > a-"acene. P278! 3;3!:17 Sie"*re e- ais-a"ien8) direc8a"en8e de- "edi) de 8rans )r8e r)8and) e- esc)*i--n en -a ar8e s0 eri)r de 0n) de -)s c0adran8es de- agarI ) 8)"ar 0na c)-)nia ais-ada de- agar se-ec8i#). Rea-ice 0na sie"*ra )r ag)8a"ien8) c)n e- :in de )*8ener c)-)nias ais-adas. Inc0*e a 31WC )r %<2$& h)ras. E#i8e 08i-iBar -as ca9as c0and) -a h0"edad en -a s0 er:icie de- "edi) sea a aren8e4 si es8) s0cede dA9e-) secar en -a inc0*ad)ra a 31KC C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &( de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C7:1274 P7s31397+ E. coli. Ma> creci"ien8) C7:1274 N!C01397: &. in"luenBae, n) se )*ser#a creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin.

A:!D7 ). AC02 8312017 ! S3;;7:s C0s0s C7;!28304!s: BBL4 DIFCO4 +ERC@4 OFOID. F6: 0;!:17 A-g0nas *ac8erias 0eden )*8ener energ,a 08i-iBand) e- ci8ra8) c)") Enica :0en8e de car*)n). E- "edi) 08i-iBad) ara es8e :in n) de*e c)n8ener r)8e,nas ni car*)hidra8)s =0e sir#an c)") )8ra :0en8e de car*)n). Las *ac8erias =0e 08i-iBan e- ci8ra8)4 8a"*iAn 0ede e!8raer ni8rgen) de -as sa-es de a")ni) de- "edi)4 r)d0ciend) hidr!id) de a")ni)4 As8e c)" 0es8) a-ca-iniBa e- "edi). E- indicad)r aB0- de *r)")8i")- es a"ari--) a M "en)r de ;40 > aB0- a M "a>)r de (4;. P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. En#ase en 80*)s c)n 8a a de r)sca de %;!%00. Es8eri-ice a %$%W )r %1 "in08)s. De9e en:riar -)s 80*)s en )sicin inc-inada. I:7864083@: C)n e- asa rec8a 8)"e 0na c)-)nia ais-ada de- "icr))rganis") a es80diar. Sie"*re -a s0 er:icie de- 8endid) haciend) 0na es8r,a. Inc0*e a 31KC )r $&2&< h)ras. L!81620 P7s31390: Creci"ien8) > ca"*i) de- "edi) a c)-)r aB0- a -as $&2&< h)ras de inc0*acin. N!C01390: E- "edi) n) ca"*ia de c)-)r. C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &) de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 p7s31397 C. pneumoniae: creci"ien8) 2 8endid) aB0-. C7:1274 :!C01397 E. coli: n) se )*ser#a creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin.

A:!D7 9. AC02 123p4! 0MU802 ?3!227 +TSIC0s0s 87;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID F6: 0;!:17 Es 0n agar di:erencia- *asad) en -a :er"en8acin de aBEcares > -a r)d0ccin de M $S > gas. C)n8iene g-0c)sa4 sacar)sa > -ac8)saI -a -ac8)sa > sacar)sa es8n resen8es en 0na c)ncen8racin %0 #eces "a>)r a -a g-0c)saI eindicad)r de M es e- r)9) de :en)-4 e- c0a- #ira a a"ari--) )r -a :)r"acin de cid) a ar8ir de- car*)hidra8)I es0-:a8) :err)s) es 0n de8ec8)r de -a r)d0ccin de M$S. P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. C)-)=0e ; "- en 80*)s de 8a a r)sca de %;!%00 "". Es8eri-ice a %$%KC )r %1 "in. Inc-ine -)s 80*)s de 8a- "anera =0e =0eden 87: 6: =7: 7 y 6: 1!: 3 7 ! " 8;. I:7864083@: C)n e- asa rec8a 8)"e 0na c)-)nia ais-ada de- "icr))rganis") > 0nci)ne e- "edi) p72 !4 8!:127 ?0s10 !4 =7: 7 de- 80*) > -0eg) haga es8r,as en -a s0 er:icie. Inc0*e a 3(KC )r $& a &< h)ras c)n -a 8a a :-)9a. L!81620 A-ca-in) 8endid)'a-ca-in) :)nd) +<J<-: A-ca-in) 8endid)'cid) :)nd) C<JA-: A-ca-in) 8endid)'cid) > negr) :)nd) +<JA, E2S N-: :er"en8acin de car*)hidra8)s 2 :er"en8acin de g-0c)sa X > -ac8)sa 2 :er"en8acin de -a g-0c)sa X -ac8)sa 2 > r)d0ccin de M$S X

@a producci#n de gas en el medio, se observa por la "ormaci#n de burbuDas o desplaBamiento del medio. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina &9 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C7:1274 ! 82!83;3!:17 E. coli: Acid)'cid)4 c)n r)d0ccin de gas4 M$S )si8i#) S. "le9neri: A-ca-in)'cid)4 sin r)d0ccin de gas4 M$S nega8i#) P. aeruginosa: A-ca-in)'a-ca-in)4 sin r)d0ccin de gas4 M$S nega8i#) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin.

A:!D7 10. AC02 43s3:0 ?3!227 +LIAC0s0s C7;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID F6: 0;!:17 L)s r)ces)s de decar*)!i-acin > dea"inacin en e- "edi) de c0-8i#)4 8ienen -0gar c)n -a re#ia :er"en8acin de- car*)hidra8) =0e c)n8iene e- "edi) Cg-0c)saD > -a acideB r)d0cida )r es8a reaccinI si e- "icr))rganis") )see -as decar*)!i-asas necesarias4 se r)d0ce -a decar*)!i-acin -i*ernd)se c)") r)d0c8) :ina- -as a"inas =0e a-ca-iniBan e- "edi) de c0-8i#)I si e- "icr))rganis") )see -as dea"inasas se e:ec8Ea -a dea"inacin > er)d0c8) :ina- s)n cid)s )rgnic)s =0e acidi:ican e- "edi) de c0-8i#). L)s gAner)s Proteus, Providencia % Morganella dea"inan -a -isina c)n 0na carac8er,s8ica es ecia- > es -a :)r"acin de 0n c)" -e9) ard)2r)9iB) en -a s0 er:icie de- "edi)4 e- c0a- se r)d0ce )r -a resencia de )!,gen) > de sa-es :Arricas. Es8e "edi) ade"s es E8i- en -a iden8i:icacin de a-g0nas es ecies de Salmonella4 -as c0a-es s)n -isina decar*)!i-asa )si8i#as en 0n ?&4;J. Salmonella Para8> hi es -isina decar*)!i-asa nega8i#a. La decar*)!i-acin de -a -isina se )*ser#a )r -a resencia de 0n c)-)r Er 0ra4 en 8)d) e- "edi). Es8) se de*e a -a a-ca-iniBacin de- "edi) )r -a a"ina -i*erada: cada#erina. Ning0na de -as es ecies de- gAner) Citrobacter =0e s)n -ac8)sa nega8i#a4 decar*)!i-an -a -isina. P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia- > sir#a ; "- en 80*)s c)n 8a a de r)sca %;F%00. Es8eri-ice -)s 80*)s de*en ser inc-inad)s de 8a- "anera =0e =0eden c)n $41 c" de :)nd) > 341 c" de 8endid). I:7864083@: C)n e- asa rec8a4 8)"e 0na c)-)nia ais-ada de- "icr))rganis") P0nci)ne e- "edi) p72 !4 8!:127 ?0s10 !4 =7: 7 7s 9!8!s. Maga es8r,as en e- 8endid). Cierre her"A8ica"en8e e- 80*) e inc0*e a 3(KC )r $&2($ h)ras. L!81620

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '0 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C7472 !4 1!: 3 7 PEr 0ra CDecar*)!i-acinD < R)9) CDea"inacinD R C7472 !4 =7: 7 A"ari--) CAcid) de g-0c)saD A PEr 0ra CDecar*)!i-acinD < G0s J E2S P27 6883@: ! C0s: B0r*09as den8r) de- "edi) P27 6883@: ! E 2S Ennegreci"ien8) de"edi)

PEr 0ra CDecar*)!i-acinD en 8)d) e- "edi) <J<

C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 P7s31397: <J< S. enteritidis C7:1274 :!C01397: AJA S. "le9neri C7:1274 ! 0;3:083@:: RJA P. mirabilis

Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin. A:!D7 11. AC02 62!0 C0s0s 87;!28304!s: OFOID 2 DIFCO F6: 0;!:17 Es8e "edi) es rec)"endad) ara de8ec8ar -a resencia de -a 0reasa es ecia-"en8e de -as es ecies de- gAner) Proteus 8a"*iAn 0ede ser 0sad) ara )8ras en8er)*ac8erias4 =0e hidr)-iBan -a 0rea "s -en8a"en8e4 inc0*and) e- "edi) )r 0n er,)d) "s -arg) C&< h)rasD. La 0rea a- ser hidr)-iBada r)d0ce a")ni) =0e reacci)na en s)-0cin :)r"and) car*)na8) de a")ni)4 c)" 0es8) =0e a-ca-iniBa e- "edi).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '1 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
P2!p02083@: Para -a *ase de Urea siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. Es8eri-ice a %$%KC )r %1 "in. En:riar -a *ase a 10WC > agregar -a s)-0cin de 0rea es8Ari- a- &0J4 se "eBc-a "0> *ien. Sir#a ; "- en 80*)s c)n 8a a de r)sca %;F%00. De9e en:riar -)s 80*)s en )sicin inc-inada. I:7864083@: T)"e 0na c)-)nia ais-ada de- "icr))rganis")4 c)n asa rec8a. Sie"*re en -a s0 er:icie de- 8endid)4 haciend) 0na es8r,a. Inc0*e a 3(KC )r $& a &< h)ras. L!81620 P7s31397: 0n ca"*i) de c)-)r r)9) :0csia indica =0e -a 0rea :0e hidr)-iBada )r -a 0reasa de- "icr))rganis"). N!C01397: 0n c)-)r a"ari--) indica =0e -a 0rea n) :0e hidr)-iBada. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 p7s31397 Providencia stuarttii: creci"ien8) en -a )rcin inc-inada > c)-)r :0csia. C7:1274 :!C01397. E. coli: creci"ien8) en -a )rcin inc-inada. N) ha> ca"*i) de c)-)r. Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin. A:!D7 12. AC02 ;71343 0 G3 C0s0s 87;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID F6: 0;!:17 De8er"inar si 0n )rganis") es "#i- ) in"#i-. P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. Dis8ri*0>a en 80*)s 8a a r)sca %3!%00 agregand) 1 "-. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC )r %1 "in. De9e en:riar en )sicin #er8ica-. I:7864083@: T)"e c)n 0n asa rec8a 0na c)-)nia a ar8ir de 0n c0-8i#) 0r) > 0nci)ne e- "edi) )r e- cen8r) has8a 0na r):0ndidad de %4$ c" 8ra8and) de n) ")#er e- asa hacia -)s -ad)s. Inc0*e a 3(KC d0ran8e $& a &< h)ras. L!81620 r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '2 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
R!s6410 7 p7s31397: -)s "icr))rganis")s se di:0nden en e- "edi) r)#)cand) ) acidad. R!s6410 7 :!C01397: creci"ien8) *ac8erian) sig0iend) -a -,nea de sie"*ra. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 p7s31397: E. coli di:0sin > ) acidad -a8era- a -a -,nea de sie"*ra. C7:1274 :!C01397: S. "le9neri creci"ien8) *ac8erian) sig0iend) -a -,nea de sie"*ra. r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '" de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 1". AC02 A8!1017 C0s0s 87;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID F6: 0;!:17 Es 0n "edi) 08i-iBad) en -a di:erenciacin de E. coli inac8i#a > e- gAner) Shigella s .4 dada -a si"i-i80d dec)" )r8a"ien8) *i)=0,"ic) :ren8e a -a :er"en8acin de -a -ac8)sa. E- gAner) Shigella s .4 es inac8i#) :ren8e aace8a8) resen8e en e- "edi) c)") Enica :0en8e de car*)n)4 a di:erencia de -a E. coli inac8i#a =0e -) 08i-iBa. P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. Dis8ri*0>a en 80*)s 8a a r)sca %3!%00 agregand) 1 "-. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC )r %1 "in. De9e en:riar en )sicin inc-inada. I:7864083@: C)n e- asa rec8a 8)"e 0na c)-)nia ais-ada de- "icr))rganis") a es80diar. Sie"*re -a s0 er:icie de- 8endid) haciend) 0na es8r,a. Inc0*e a 31KC )r $&2&< h)ras. . L!81620 P7s31390: creci"ien8) ca"*i) de- "edi)4 8endid) aB0- a -as $&2&< h)ras de inc0*acin. N!C01390: e- "edi) n) ca"*ia de c)-)r. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 p7s31397: E. coli inactiva. C7:1274 :!C01397: S. "le9neri Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin. r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '% de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 1%. C04 7 B0s! !802B7D340s0 ! M7!44!2 p020 !:1!27B081!230s y Vibrio cholerae C0s0s C7;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID F6: 0;!:17 E- "edi) es 0n ca-d) de g-0c)sa a- =0e se -e adici)na 0n indicad)r > 0n a"in)cid) C-isina4 )rni8ina ) argininaD4 e- c0a- se 08i-iBa ara "edir -a ca acidad enBi"8ica de -)s "icr))rganis")s de decar*)!i-ar e- a"in)cid) > :)r"ar 0na a"ina. E- "icr))rganis") :er"en8a -a g-0c)sa4 )r 8an8) e- M de- "edi) se acidi:ica4 s,4 e"icr))rganis") decar*)!i-ar e- a"in)cid)4 r)d0ce 0na a"ina > e- M de- "edi) se a-ca-iniBa n0e#a"en8e. P2!p02083@: Pre are -a *ase segEn -as indicaci)nes de -a casa c)"ercia-. Adici)ne e- a"in)cid) C-isina4 arginina > )rni8inaD en 0na c)ncen8racin de- %J4 si e- a"in)cid) es8 en :)r"a L4 ) a- $J si es8 en :)r"a D. De9ar 0na )rcin ara e- c)n8r)-. En -a )rni8ina a90s8e e- M a ;40 c)n NaOM %N4 an8es de es8eri-iBar e- "edi) de*id) =0e es de na80ra-eBa cida. Sir#a & "- en 80*)s c)n 8a a de r)sca %3!%00. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC4 )r %0 "in. I:7864083@: Sie"*re 0na c)-)nia4 a ar8ir de- creci"ien8) de 0n c0-8i#) 0r). In)c0-e 0n 80*) de c)n8r)- C-a *ase sin a"in)cid)D > cada 0n) de -)s 80*)s c)n e- a"in)cid) res ec8i#)4 -isina4 arginina > )rni8ina. Adici)ne a -)s c0a8r) 80*)s % "- de acei8e "inera- ) ara:ina es8Ari-4 ara r)8eger-)s de- aire e#i8and) 0na :a-sa a-ca-iniBacin en -a s0 er:icie de- "edi). Inc0*e -)s 80*)s a 3(KC )r $&2&< h)ras has8a )r & d,as. L!81620 E- 80*) c)n8r)- de*e "an8ener s0 c)-)r a"ari--) des 0As de $&2&< h)ras4 -) =0e indica =0e Enica"en8e ha sid) :er"en8ada -a g-0c)sa. Un c)n8r)- de c)-)r Er 0ra4 in#a-ida -a -ec80ra de -)s )8r)s 80*)s. R!s6410 7 p7s31397 R!s6410 7 :!C01397 C)-)r Er 0ra > 80r*i) C)-)r a"ari--) c-ar) r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17

C7:1274 p7s31397 S. enteritidis, c)-)r Er 0ra > 80r*ideB C7:1274 :!C01397 S. sonnei, c)-)r a"ari--) > 80r*ideB Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d) d0ran8e s0 a-"acena"ien8).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '& de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

N710 E: !4 80s7 ! 47s 0;3:7G83 7s p020 Vibrio cholerae 40 U:380 90230B4! 56! s! p2!s!:10 !s 40 0 383@: ! N0C4 04 1R 0 40 ! B0s! !802B7D340s0 ! M7!44!2 0:1!s ! 0C2!C024! 47s 8722!sp7: 3!:1!s 0;3:7G83 7s, 46!C7 !4 p278! 3;3!:17 !s !4 ;3s;7 56! p020 !:1!27B081!230s.

A:!D7 1&. C04 7 B0s! p020 40 =!2;!:1083@: ! 802B7?3 2017s ! !:1!27B081!230s. C0s0s C7;!28304!s: Pe 8)na Pancre8ica CBBL 2 DIFCO 2 +ERC@ G OFOIDD E!8rac8) de carne CBBL 2 +ERC@ G OFOIDD F6: 0;!:17 T)das -as en8er)*ac8erias 08i-iBan hidra8)s de car*)n) "edian8e 0na :er"en8acin acida "i!8a4 en -a c0a- se r)d0ce :ina-"en8e 0na #ariedad de cid)s )rgnic)s =0e deri#an de- acid) irE#ic). Las r0e*as de :er"en8acin de car*)hidra8)s se hacen c)n e- :in de de8er"inar -a ca acidad de 0n "icr))rganis") de :er"en8ar 0n hidra8) de car*)n) es eci:ic) inc)r )rad) a 0n "edi) *sic)4 r)d0ciend) acid) ) acid) c)n gas #isi*-e. L)s car*)hidra8)s 08i-iBad)s s)n: g-0c)sa4 sacar)sa4 -ac8)sa4 "ani8)-4 s)r*i8)-4 8reha-)sa4 in0-ina4 ra:in)sa4 g-icer)-4 ara*in)sa4 sa-icina4 !i-)sa4 s)r*)sa4 "a-8)sa4 "an)sa4 rha"n)sa4 ga-ac8)sa4 "e-)*i)sa4 en8re )8r)s. C7;p7s383@: Pe 8)na ancre8ica ggggg..%0.0 g E!8rac8) de Carneggggggg3.0 g NaC-gggggggggggg...1.0 g R)9) de :en)-ggggggggg%.; "L. Ag0a des8i-adagggggggg..%000.0 "L. Car*)hidra8)ggggggggg.%0.0 g P2!p02083@: +eBc-e 8)d)s -)s ingredien8es > a90s8e e- M a (.$ Sir#a & "- de- ca-d) en 80*)s c)n 8a a de r)sca %;!%$1 en -)s c0a-es se han c)-)cad) 80*)s de :er"en8acin CD0rha"D. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC4 )r %0 "in.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '' de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
N710: de*e 8enerse en c0en8a =0e -a sa-icina se 0sa a- 0.1J )r -) 8an8) se c)-)ca 1.0 g ara %000 "L. de ca-d). I:7864083@: A ar8ir de- creci"ien8) de 0n c0-8i#) 0r) 8)"e 0na c)-)nia de- "icr))rganis") > e"0-sine-a en e- ca-d). Inc0*e e- 80*) )r %<2$& h)ras a 3(KC. Pr)ceda de ig0a- "anera ara cada 0n) de -)s car*)hidra8)s. L!81620 P7s31390: 08i-iBacin de- car*)hidra8): c)-)r a"ari--). N!C01390: n) 08i-iBacin de- car*)hidra8): c)-)r r)sad). P27 6883@: ! C0s: e-e#acin de- 80*) de :er"en8acin CD0rha"D C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 p7s31397 : se"*rar 0na ce a :er"en8ad)ra de- car*)hidra8) a ana-iBar. C7:1274 :!C01397: se"*rar 0na ce a n) :er"en8ad)ra de- car*)hidra8) a ana-iBar. Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d) ) can8idad d0ran8e s0 a-"acena"ien8). A:!D7 1' C04 7 ! M047:017. C0s0s C7;!28304!s: BBL2DIFCO2+ERC@2 OFOID F6: 0;!:17 Es8e "edi) se 08i-iBa ara de8er"inar -a ca acidad de 0n "icr))rganis") ara 08i-iBar e- "a-)na8) de s)di)4 c)") Enica :0en8e de car*)n)4 dand) 0n r)d0c8) a-ca-in). P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia-. Dis8ri*0>a #)-E"enes de 3 "L. en 80*)s 8a a r)sca %;!%00. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC )r %1 "in. I:7864083@: r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '( de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A ar8ir de- creci"ien8) de 0n c0-8i#) 0r) 8)"e 0na c)-)nia de- "icr))rganis") > res0s enda en e- ca-d). Inc0*e a 3(KC )r $&2 &< h)ras. L!81620 P7s31397: c)-)r aB0- c-ar) ) in8ens) en 8)d) e- "edi). N!C01397: n) se )*ser#a ca"*i) de c)-)r. C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 p7s31397 : C. pneumoniae4 c)-)r aB0- 2 80r*ideB C7:1274 :!C01397: E. Coli4 N) c)-)r G 80r*ideB Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d) ) can8idad d0ran8e s0 a-"acena"ien8). A:!D7 1(. C04 7 0C60 p!p17:0 0 +p26!B0 ! 3: 74C0s0s C7;!28304!s: Pe 8)na Pancre8ica CBBL2DIFCO2+ERC@2 F6: 0;!:17 Es8e "edi) se 08i-iBa ara de8er"inar -a ca acidad de 0n "icr))rganis") de hidr)-iBar e- 8ri 8:an). E- 8ri 8:an) es 0n a"in)cid) =0e )r accin de -a enBi"a 8ri 8):anasa4 resen8e en a-g0nas *ac8erias4 0ede ser hidr)-iBad) > dea"inad) )*8eniAnd)se c)") r)d0c8)s :ina-es4 ind)-4 cid) irE#ic) > a")ni). La r)d0ccin de- ind)-4 se e#idencia )r -a :)r"acin de 0n ani--) de c)-)r r)9) en e- "edi)4 c0and) e- ind)reacci)na c)n e- gr0 ) a-dehid) de- 2di"e8i-a"in)*enBa-dehid)4 ar8,c0-a =0,"ica"en8e ac8i#a de- reac8i#) de @)#ac =0e se 08i-iBa c)") re#e-ad)r. C7;p7s383@: Pe 8)na ancre8ica NaCAg0a des8i-ada P2!p02083@: +eBc-e 8)d)s -)s ingredien8es. Sir#a 3"- en 80*)s de 8a a de r)sca %;!%00"". Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC4 )r %1 "in. I:7864083@: $040 g 140 g %00040 "r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina ') de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A ar8ir de- creci"ien8) de 0n c0-8i#) 0r) 8)"e 0na c)-)nia de- "icr))rganis") > res0s enda en e- ca-d). Inc0*e a 3(KC )r %<2$& h)ras. L!81620 A- :ina- de- er,)d) de inc0*acin4 agregar a- "edi) 1 g)8as de- reac8i#) de @)#ac )r -as aredes de- 80*)4 de9ar re )sar. P7s31397: ani--) de c)-)r r)9) :0csia Cind)- XD N!C01397: ani--) inc)-)r) Cind)- 2D. C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 P7s31397: E. coli N!C01397: Salmonella s Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d) a-"acena"ien8). R!081397 2!9!40 72 p26!B0 ! I: 74 R!081397 ! <7908 A-c)h)- a",-ic) ) is)a",-ic) 0r) 2di"e8i-a"in)*enBa-deh,d) Acid) c-)rh,dric) c)ncen8rad) P2!p02083@: Dis0e-#a e- a-deh,d) en e- a-c)h)- > adici)ne -en8a"en8e e- cid). C7:s!29083@:: a-"acene a & WC en :rasc)s "*ar4 e- reac8i#) es es8a*-e )r % aH). D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- reac8i#) d0ran8e s0 a-"acena"ien8). A:!D7 1). C04 7 ! $7C!!s P27sT06!2 +$PF6: 0;!:17 Es8e "edi) se 08i-iBa ara de8er"inar -a ca acidad de 0n "icr))rganis") de CAce8)inaD c)") r)d0c8) :ina- en -a degradacin de -a g-0c)sa. r)d0cir ace8i-2"e8i-2car*in)%10 "%0 g 10 "d0ran8e s0 r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina '9 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C7;p7s383@: Pe 8)na de carneggggggggggg..(.0 g DCXD /-0c)saggggggggggggg.1.0 g F)s:a8) hidr)genad) di )8asic) C@$MPO&Dg 1.0 g Ag0a des8i-adagggggggggggg...%000.0 "L. P2!p02083@: +eBc-e 8)d)s -)s ingredien8es ca-en8and) s0a#e"en8e has8a :)r"ar 0na dis)-0cin c)" -e8a > a90s8e e- M a ;.?h 0.%. Sir#a & "L. en 80*)s de 8a a de r)sca %;!%00"". Es8eri-ice a %$%KC )r %1 "in08)s. I:7864083@: A ar8ir de- creci"ien8) de 0n c0-8i#) 0r) 8)"e 0na c)-)nia de- "icr))rganis") > res0s enda en eca-d). Inc0*e a 3(KC )r %<2$& h)ras. L!81620 A- :ina- de- er,)d) de inc0*acin4 agregar 1 g)8as de- reac8i#) A )r -as aredes de- 80*) > -0eg) 1 g)8as dereac8i#) B de9ar re )sar. A- 8Ar"in) de %1 "in08)s -a a aricin de 0n c)-)r r)9) de- ca-d) ser 0na reaccin )si8i#a. C7:1274 ! C043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 C7:1274 p7s31397 : E. Coli4 c)-)r r)9). C7:1274 :!C01397: C. pneumoniae4 N) ca"*i) de c)-)r. Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d) a-"acena"ien8). R!081397s 2!9!40 72!s p26!B0 ! Vogees ,ros*a'er .$PS)-0cin A P2!p02083@: i2Na:8)- gggggg..1.0 g E8an)- a*s)-08)ggg..%00"L. d0ran8e s0 r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (0 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
+eBc-e -)s ingredien8es has8a :)r"ar 0na dis)-0cin c)" -e8a.

S)-0cin B P2!p02083@: Midr!id) de )8asi) a- &0J en ag0a des8i-ada. Midr!id) de )8asi)gggggg..&0.0 g Ag0a des8i-adag..ggg.ggg.g%00"L. N710. +eBc-e -)s ingredien8es has8a :)r"ar 0na dis)-0cin c)" -e8a. CTra*a9ar s)*re *aH) de ag0a :r,a ara e#i8ar reca-en8a"ien8)D. C7:s!29083@:: a-"acene a & WC en :rasc)s "*ar4 e- reac8i#) es es8a*-e )r % aH). D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- reac8i#) d0ran8e s0 a-"acena"ien8). A:!D7 19. AC02 T3=380 C0s0s C7;!28304!s: Pe 8)na Pancre8ica CBBL 2 DIFCO 2 +ERC@ G OFOIDD E!8rac8) de carne CBBL 2 +ERC@ G OFOIDD F6: 0;!:17 Es8e "edi) es 08i-iBad) ara e- creci"ien8) de -)s "icr))rganis")s c)") Shigella s .4 Salmonella s . > Escherichia coli4 c0and) se #a a rea-iBar e- es80di) ser)-gic) de -)s "is")s as, c)") 8a"*iAn ara -a r)d0ccin de an8,gen) ara -a #ac0na. C7;p7s383@: Thi)8)neggggggg..%0.0 g E!8rac8) de -e#ad0rag.... &.0 g E!8rac8) de Carnegg..g?.0 g NaC-gg. gggggg...1.0 g L2as araginag...gggg0.1 g. Agar G agar ggggg..g%1.0 g Ag0a des8i-adaggg..g..%000.0 "L. M :ina- (.;

P2!p02083@: Dis0e-#a -a L2 as aragina en 100 "L. de ag0a des8i-ada 08i-iBand) ca-)r s0a#e4 ara "eBc-ar-a -0eg) c)n -)s de"s c)" )nen8es. En -)s 100 "L. res8an8es4 dis0e-#a -)s de"s c)" )nen8es de- "edi) e!ce 8) e- Agar G agar. An8es de adici)nar-)4 a90s8e M a (.; C ara %000 "L de "edi) adici)nar ; "L de NaOM % N a r)!i"ada"en8e.D Sir#a ( "- de- "edi) en 80*)s c)n 8a a de r)sca %;!%10. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC4 )r %1 "in. De9e en:riar en )sicin inc-inada. I:7864083@:

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (1 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

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A ar8ir de- creci"ien8) de 0n c0-8i#) 0r) 8)"e 0na c)-)nia de- "icr))rganis") > rea-ice 0na es8r,a s)*re -a s0 er:icie de- agar. Inc0*e e- 80*) )r %<2$& h)ras a 3(KC. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. C7:1274 ! 82!83;3!:17 &on#rol ,osi#i(o+ E. coli. &a% crecimiento C7:1274 N!C01397: &. in"luenBae, no se observa creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0, 0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a c)n8a"inacin. A:!D7 20. C04 7 E CV3:s F6: 0;!:17 Ca-d) e" -ead) ara -a ser)8i i:icacin :-age-ar de ser)8i )s de Sa-")ne--a. C7;p7s383@: Ca-d) 8ri 8icasa de s)9agggggg%1.0 gr Tri 8)naggggggggggggg%3.0 gr Ag0a des8i-adagggggggggg%000 "L. M :ina- (.& P2!p02083@: Se dis0e-#en -)s c)" )nen8es c)n ca-)r s0a#e. Sir#a %1 "- de- ca-d) en 80*)s c)n 8a a de r)sca $0!%10. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC4 )r %1 "in. I:7864083@: A ar8ir de- creci"ien8) de 0n c0-8i#) 0r) 8)"e 0na c)-)nia de- "icr))rganis") > res0s enda en e- ca-d). Inc0*e e- 80*) )r %<2$& h)ras a 3(KC. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. resencia de daH)4 deshidra8acin )

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (2 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
C7:1274 ! 82!83;3!:17 &on#rol ,osi#i(o+ E. coli. &a% crecimiento C7:1274 N!C01397: &. in"luenBae, no se observa creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0, 0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r $ "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de- ca-d) d0ran8e s0 a-"acena"ien8). A:!D7 21. S74683@: S043:0 04 0.)&R F6: 0;!:17 La s)-0cin sa-ina --a"ada 8a"*iAn s)-0cin :isi)-gica4 es 0na s)-0cin de c-)r0r) de s)di) > 8iene 0na c)" )sicin si"i-ar a- -,=0id) e!8race-0-ar de- )rganis"). La s)-0cin sa-ina a- 0.<1J 8iene a r)!i"ada"en8e -a "is"a resin )s"8ica =0e -)s -,=0id)s c)r )ra-esI es )r es8a raBn =0e es 08i-iBada en -)s ensa>)s de -a*)ra8)ri) de "icr)*i)-)g,a. C7;p7s383@: C-)r0r) de s)di)gggggg<.1 gr Ag0a des8i-adaggg..gg.g%000 "L. P2!p02083@: Se dis0e-#en -)s c)" )nen8es. Sir#a -a can8idad deseada en :rasc)s 8a a de r)sca de 104 %004 $10 "-4 e8c. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC4 )r %1 "in. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. C7:1274 ! !s1!2343 0 N) de*e ha*er creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0, 0)& C7:s!29083@:: a-"acene en8re 1 G $1 WC D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de -a s)-0cin d0ran8e s0 a-"acena"ien8).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (" de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A:!D7 22. S74683@: S043:0 =72;740 0 04 )W F6: 0;!:17 La s)-0cin sa-ina :)r")-ada a- <P in8er#iene en e- "e8a*)-is") ce-0-ar *ac8erian) c)n 0n r)ces) --a"ad) a-=0i-acin4 en d)nde ha> 0na 8rans:erencia de 0n gr0 ) a-=0i-) de r)8e,nas ) cid)s n0c-e,c)s a )8ras ")-Ac0-as4 es8e r)ces) inac8i#a a -a *ac8eria de9nd)-a in#ia*-e sin a-8erar -a es8r0c80ra an8igAnica. C7;p7s383@: C-)r0r) de s)di)gggggggg<.1 gr Ag0a des8i-adaggggg.gg.g%000 "L. F)r"a-dehid) en s)-0cin 3(J......$%.; "L. P2!p02083@: Pre arar %000 "L. de s)-0cin sa-ina. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC4 )r %1 "in. C0and) -a s)-0cin sa-ina es8e :r,a en 0n *a-n #)-0"A8ric) a:)rad) se agrega e- :)r"a-dehid)4 "eBc-ar "0> *ien )r in"ersin > g0ardar en 0n :rasc) "*ar. N710: e- *a-n #)-0"A8ric) a:)rad) de*e desin:ec8arse c)n 1"- de :)r"a-dehid) > %0 de ag0a des8i-ada es8Ari- agi8arse :0er8e"en8e > en90agar c)n *as8an8e ag0a des8i-ada ara e-i"inar resid0)s. C7:1274 ! 8043 0 Cada -)8e de "edi) de*e c)n8ar c)n -as r0e*as de c)n8r)- de ca-idad 8an8) de creci"ien8) c)") de es8eri-idad. C7:1274 ! !s1!2343 0 N) de*e ha*er creci"ien8) Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0, 0)& C7:s!29083@:: a-"acene en8re 1 G $1 WC

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (% de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de -a s)-0cin d0ran8e s0 a-"acena"ien8). A:!D7 2". P26!B0 ! 40 7D3 0s0 C0s0s C7;!28304!s: CSI/+A4 DIFCO4 +ERC@4 OFOIDD F6: 0;!:17 E- dehidr)c-)r0r) de 8e8ra"e8i-2 ara:eni-endia"ina a- %J se e" -ea ara -a de8er"inacin de -a ci8)cr)") )!idasa. Es8e reac8i#) ac8Ea c)") ace 8)r ar8i:icia- de e-ec8r)nes s0s8i80>end) a- )!,gen). En s0 es8ad) red0cid) es inc)-)r) er) en -a resencia de -a ci8)cr)") )!idasa de- "icr))rganis") > e- )!,gen) a8")s:Aric) se )!ida :)r"and) e- aB0- de ind):en)-. R!081397s Tiras c)"ercia-es: +ercN4 O!)id4 Di:c). Sencidisc)s: Di:c) Reac8i#) en )-#): SI/+A P2!p02083@: S)-0cin ac0)sa a- %J4 a r)!i"ada"en8e4 dehidr)c-)r0r) 8e8ra"e8i-2 2:eni- dia"ina OBs!29083@:: ara re#enir e- de8eri)r) de- reac8i#) de )!idasa en )-#) es necesari) re arar-) de es8a :)r"a: %. Reac8i#) -,=0id) Pre are %0 "- de -a s)-0cin a- %40J de E, E,EF,EF2Te8ra"e8i-2 2:eni-endia"ina en ag0a des8i-ada. Dis ense e- reac8i#) en a-,c0)8as de % "- > g0rde-)s en c)nge-acin a G$0WC. Para 08i-iBar-)4 desc)nge-e 0n #ia- de % "- > Ese-) ara h0"edecer e- a e- de :i-8r) ) ehis) ). 2. Tiras secas de a e- de :i-8r). Se 0ede 8ener 0n s8)cN de 8iras secas > se re ara a ar8ir de- reac8i#) -,=0id) En 0na s0 er:icie n) )r)sa C -acas de e8ri4D. De9e secar -as 8iras a- aire ) en -a inc0*ad)ra. C0and) -as 8iras es8An c)" -e8a"en8e secas4 nga-as en 0n 80*)':rasc) *ien 8a ad) > re:rigere a &WC. 3. La :r"0-a de -a )!idasa de @)#ac es c)") sig0e: E, E,EF,EF2Te8ra"e8i-2 2:eni-endia"inagggg.0401g Ag0a des8i-adaggg.. 140 "Dis0e-#a e- reac8i#) en ag0a 0ra. CN) ca-ien8e ara dis)-#er.D

P278! 3;3!:17

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (& de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
Rea-ice -a r0e*a a ar8ir de 0n c0-8i#) de %<2$& h)ras4 de 0n "edi) =0e n) c)n8enga aBEcares. Ecreci"ien8) en 0n "edi) =0e se ha acidi:icad) de*id) a -a :er"en8acin de car*)hidra8)s :7 de*e e" -earse >a =0e -a acideB inhi*e -a enBi"a ci8)cr)") )!idasa. C7: 1320s 87;!28304!s: :r)8e 0na c)-)nia en -a s0 er:icie i" regnada c)n e- reac8i#). C7: 2!081397: re are 0na s)-0cin ac0)sa de- reac8i#)4 C%"L de ag0a des8i-ada > -) =0e 8)"a -a 0n8a de 0n esc)*i--n de "adera4 agi8ar > 0sar in"edia8a"en8eD c)-)=0e 0na g)8a de -a s)-0cin en 0n a e- :i-8r)4 :r)8e 0n c)-)nia en -a s0 er:icie de- a e- i" regnada c)n e- reac8i#).

L!81620 P7s31397: desarr)--) de 0n c)-)r #i)-e8a )sc0r) N!C01397: n) ha> desarr)--) de c)-)r

C7:1274 ! 8043 0 La r0e*a de*e rea-iBarse si"0-8nea"en8e c)n d)s ce as c)n8r)-. C)n8r)- )si8i#): Pseudomona aeruginosa. C)n8r)- nega8i#): Escherichia coli C7:s!29083@: E- reac8i#) en )-#) de*e es8ar en 0n :rasc) "*ar4 se a-"acena en 0na rea )sc0ra en8re %1 G $1 WC. En :)r"a -,=0ida a 2$0WC En 8iras secas > sensidisc)s a &WC

D!1!23727 !4 p27 6817 Sensi*-e a -a -0B4 N) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH) ) c)n8a"inacin. A:!D7 2%. P26!B0 ! 40 86!2 0 F6: 0;!:17: es8a r0e*a se rea-iBa ara di:erenciar e- gAner) Vibrio de -)s de"s gAner)s er8enecien8es a -a :a"i-ia Vibrionaceae c)") Plesiomonas > Aeromonas. La ac8i#idad -,8ica de- cid) des)!ic-ic) s)*re -a ared de -)s Vibrios :a#)rece -a -i*eracin de ADN =0e a- c)n8ac8) c)n e- cid) des)!ic-ic) :)r"a 0na s0s ensin adheren8e ) "0c)ide. P278! 3;3!:17: Res0s enda -a c)-)nia en 0na g)8a de des)!ic)-a8) de Na a- 041J. P7s31390:

L!81620

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (' de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $0%%'0('$1

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
-as cA-0-as *ac8erianas se -isan )r -a accin de- des)!ic)-a8) > e- ADN se -i*era #)-#iAnd)se -a re aracin "0c)ideI a8)car-a c)n 0n asa > -e#an8ar e- asa se :)r"ara 0n hi-).

C7:1274 ! 8043 0 A- rea-iBar -a r0e*a se de*en 08i-iBar d)s c)n8r)-es4 c)") c)n8r)- )si8i#) 0na ce a c)n)cida de Vibrio cholerae % c)") c)n8r)- nega8i#) 0na ce a de Plesiomonas shigelloides. C7:s!29083@:: a-"acene a 1 WC D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH) ) c)n8a"inacin. N710: si enc0en8ra reci i8acin de- reac8i#) se de*e ca-en8ar a *aH) "ar,a has8a #er =0e e- reac8i#) es8e n0e#a"en8e h)")gAne).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (( de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 2&. C04 7 :61231397 p020 40 p26!B0 ! 174!20:830 04 N0C4 0R, 1R, "R, 'R, )R y 10R C0s0s C7;!28304!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERC@ 2 OFOID COMPOSICIN a. Ca-d) n08ri8i#) *. Ag0a des8i-ada c. NaC<40g %.00040"-

P2!p02083@: +eBc-e -)s ingredien8es a > * > c)-)=0e a ca-)r s0a#e has8a =0e se dis0e-#a c)" -e8a"en8e A90s8e e- M en8re (4& a (41 Di#ida e- ca-d) en "a8races en can8idades de $00" Adici)ne e- NaC- de ac0erd) c)n e- sig0ien8e es=0e"a can8idad de ca-d) $00 "$00 "$00 "$00 "$00 "$00 "gra")s de NaC0 $ ; %$ %; $0 C)ncen8racin :ina0J %J 3J ;J <J %0J

Sir#a 3"- de- ca-d) en 80*)s de 8a a de r)sca de %; ! %00"" Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC ! %0 "in08)s P278! 3;3!:17 Maga 0na s0s ensin en ag0a e 8)nada sin NaC- a- % de +c:ar-and. S0s enda 0na g)8a en cada s)-0cin C7:1274 ! 8043 0 Creci"ien8) en e- ca-d) a- 0J de NaC- V Vibrio cholerae Creci"ien8) en e- ca-d) a- %J de NaC- V Vibrio alginol%ticus Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a 1WC has8a )r d)s "eses D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de -a s)-0cin d0ran8e s0 a-"acena"ien8).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina () de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 2'. AC02 M6!44!2,E3:17: D!s823p83@: E- "edi) agar +0e--er2Min8)n es 08i-iBad) ara de8er"inar -a s0sce 8i*i-idad de "icr))rganis")s a agen8es an8i"icr)*ian)s. E- C)"i8A de -a OrganiBacin +0ndia- de -a Sa-0d ara -a es8andariBacin de r0e*as de s0sce 8i*i-idad an8i"icr)*iana4 ha ace 8ad) e- "edi) de +0e--er2Min8)n ara de8er"inar -a s0sce 8i*i-idad de "icr))rganis")s4 de*id) a: Presen8ar 0na *0ena re r)d0ci*i-idad en -)s res0-8ad)s Tener 0n *a9) c)n8enid) de inhi*id)res ara -)s an8i*i8ic)s c)") s0-:)na"idas4 8ri"e8) ri" s0-:a > 8e8racic-ina. La "a>)r,a de -)s a8gen)s n) :as8idi)s)s resen8an 0n *0en creci"ien8). C7;p7s383@: 56F;380 La c)" )sicin =0,"ica de- "edi) de agar +0e--er2Min8)n4 de ac0erd) c)n -a casa c)"ercia- DIFCO CRe:. 0$1$2%(2;D es -a sig0ien8e: g'L In:0sin de carne 30040 g Casa"in)cid)s %(41 g A-"idn %41 g Agar %(40 g M :ina- a $1KC (43 h 04% P2!p02083@: Siga -as ins8r0cci)nes de -a casa c)"ercia Es8eri-ice en a08)c-a#e d0ran8e %1 "in08)s a %1 -i*ras de resin C%$%KCD. De9e en:riar e- "edi) a 0na 8e" era80ra de &1K a 10KC en *aH) +ar,a. A90s8e e- M de- "edi) C(4$ a (4&D Sir#a e- #)-0"en necesari) ara =0e e- "edi) =0ede c)n 0na r):0ndidad a r)!i"ada de &"" De9e en:riar *ien e- "edi) > a-"acene en e- re:rigerad)r C$K a <KCD evite utiliBar las caDas cuando la humedad en la super"icie del medio sea aparente, si esto sucede d4Delo secar en la incubadora a ,GHC C7:1274 ! 8043 0 1. Es1!2343 0 Inc0*e a 31KC d0ran8e &< h 0na -aca de agar +0e--er2Min8)n4 > -ea -a r0e*a de es8eri-idad )r e- n)2 creci"ien8) *ac8erian) 2el nImero de caDas para el control de esterilidad depende del tamaJo del lote3. Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 N) 0se ca9as de "s de ( d,as de re aradas4 c0and) a- "edi) se -e ha adici)nad) sangre de c)rder) a- 1J D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a resencia de daH)4 deshidra8acin ) c)n8a"inacin.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina (9 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A:!D7 2(. M! 37 L!8?! !s82!;0 0 C0s0s 87;!28304!s: BBL4 DIFCO4 OFOID F6: 0;!:17 La -eche descre"ada se 0sa c)") 0n "edi) c)" -e8)4 ) c)") ingredien8e de )8r) "edi) es ecia-4 ara -a r) agacin de "icr))rganis")s en r)d0c8)s -c8e)s. E- )-#) de -eche descre"ada es 0n )-#) desecad) a ar8ir de grandes #)-E"enes de -eche descre"ada4 es s)-0*-e > :ci- de re arar. La -eche descre"ada a- $0J es 0sada c)") cri) r)8ec8)r ara c)nser#ar "icr))rganis")s aer*ic)s > anaer*ic)s a 2(0W C as, c)") ara e- r)ces) de -i):i-iBacin de -a "a>)r,a de -)s "icr))rganis")s inc-0>end) -e#ad0ras > h)ng)s. C7;p7s383@: SNi" +i-N es 0n r)d0c8) es8andariBad)4 rec)"endad) c)") "edi) de c0-8i#) =0e a- rec)ns8i80ir es e=0i#a-e-en8e a -eche desna8ada :resca. Leche desna8ada Ag0a des8i-ada P2!p02083@: Dis0e-#a -)s ingredien8es en :rasc)s 8a a de r)sca de 104 %00 > $10 "L. Es8eri-ice en a08)c-a#e a %$%KC )r < "in08)s. Tenga c0idad) en e#i8ar s)*re2ca-en8a"ien8) ) =0e -a -eche 8)"e 0n c)-)r cara"e-) >a =0e de es8a "anera n) c)nser#ar -)s "icr))rganis")s. La d0racin de- "edi) es de % "eses. E- M de- "edi) de*e "an8enerse a ;4% X'2 0.$. $0 g %00 "-

C7:1274 ! 8043 0 E- c)n8r)- de ca-idad se rea-iBa 8)"and) 0n )c) de -a s)-0cin4 =0e se de*e se"*rar en 0n agar BMI ) TSA. N) de*e ha*er creci"ien8) *ac8erian). Si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de -a s)-0cin d0ran8e s0 a-"acena"ien8)4 de*er descar8arse. Regis8re -)s res0-8ad)s en e- :)r"a8) C)n8r)- de ca-idad de "edi)s de c0-8i#) REG,R01.001.&0"0,0)& C7:s!29083@:: a-"acene a & WC4 )r % "es. D!1!23727 !4 p27 6817: n) 08i-iBar si se )*ser#a a-gEn ca"*i) en e- as ec8) de -a s)-0cin d0ran8e s0 a-"acena"ien8).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )0 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 2). D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: p2!s6:1397 ! B08347s G20; :!C01397s

DIAGRAMA DE IDENTIFICACION PRESUNTI$O DE BACILOS GRAM NEGATI$OS

M08C 7:T!y : 8747:30s 40817s0 :!C01390s

:!C01390

OD3 0s0

p7s31390

TSI X <JA s3: C0s, E 2S , LIA X <JA s3: C0s ;71343 0 3: 74 62!0s0 8312017 X :!C01390 X :!C 01397 X :!C 01390 X:!C01397
OBSER$AR TIPO DE COLONIA Shigella s Enterobacter aglomerans Clebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis PESUE7A "a>)r 8a"aH)4 -ana grandes4 "0c)ides > e-e#adas grandes4 "0c)ides > e-e#adas

B08347 G20; :!C01397 :7 =!2;!:10 72

72:313:0 X p7s31390

72:313:0 X :!C01390

Shigella sonnei

ONP/ X "ani8)- X

ONP/ 2 "ani8)- X

ON P/ 2 "ani8)- 2

E. aglomerans C. oBaenae C. "reundii M$S

Shigella s C. rhinoscleromatis

Shigella !"sen#eriae

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )1 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 29. D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s TSI X <JA, E2S N

D30C20;0 ! =46L7 p020 40 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s 0 p02132 ! TSI X <JA, E2S N M08C7:T!y : 8747:30s 40817s0 :!C01390s

:!C01390

OD3 0s0

p7s31390

TSI N 2S TSIXX<JA, <JA,E E 2S N

B08347 G20; :!C01397 :7 =!2;!:10 72 Vibrio s)). Aeromonas s)). ,lesiomonas s)).

Salmonella spp. Salmonella T> hi EdKarsiella tarda Citrobactter "reundii M$SX

Salmonella spp. Salmonella T> hi EdKarsiella tarda

43s3:0

!"#
C. "reundii M$SX

!"#
Salmonella T> hi P27 6883@: ! C0s

Salmonella spp. EdKarsiella tarda

E!/arsiella E!/arsiella#ar!a #ar!a

!"#
I: 74 Salmonella spp.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )2 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 "0. D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s TSI X <JA s3: C0s, E2S K, 43s3:0 K, Orni#ina 0

TSI X <JA s3: C0s, E 2S , 43s3:0 , , 72:313:0 ,

Shigella s Cdi:eren8e de Shigella sonnei Enterobacter aglomerans Clebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis Citrobactter "reundii M$S2

Shigella s E. aglomerans C. "reundii M$S2

3: 74

Shigella s E. aglomerans C. oBaenae C. rhinoscleromatis

E. aglomerans C. "reundii M$S2

+
;71343 0

Shigella s E. aglomerans C. oBaenae C. rhinoscleromatis C. "reundii M$S2

+
C. "reundii M$S2 E. aglomerans C. oBaenae

8312017
Shigella s E. aglomerans C. oBaenae C. rhinoscleromatis

+
Shigella s E. aglomerans C. oBaenae C. rhinoscleromatis

;0:3174
Shigella ys!:1!230!

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )" de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 "1. D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s L3s3:0 K, O2:313:0 K, I: 74

Lisina 24 )rni8ina2
Shigella gr')os A- $- & Citrobacter "reundii M$S / Enterobacter agglomerans Clebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis

N
Shigella gr')os A- $- & Citrobacter "reundii M$S / Enterobacter agglomerans

2
Shigella gr')os A- $- & Citrobacter "reundii M$S / Enterobacter agglomerans Clebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis

I: 74

C312017 S3;;7:s

2
Shigella s). E. agglomerans

N
C. "reundii M$S / E. agglomerans

;71343 0

2
Shigella s). C. "reundii M$S / E. agglomerans C. oBaenae C. rhinoscleromatis C312017 S3;;7:s

C. "reundii M$S / E. agglomerans

N
C. "reundii M$S /

02C3:3:0

E. agglomerans

N
E. agglomerans C. oBaenae

0 7:3174

C. "reundii M$S / E. agglomerans C. oBaenae

Shigella s). E. agglomerans C. oBaenae C. rhinoscleromatis

E. agglomerans C. "reundii M$S /

N
E. agglomerans C. oBaenae C. rhinoscleromatis

0 7:3174

Shigella s). E. agglomerans

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )% de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A:!D7 "2. D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s L3s3:0 K,, O2:313:0 ,K, 8312017.

Lisina 24 )rni8ina2
Shigella gr')os A- $- & Citrobacter "reundii M$S / Enterobacter agglomerans Clebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis

Citrobacter "reundii M$S / Enterobacter agglomerans Clebsiella oBaenae

C312017

Shigella C26p7s A, B, C Enterobacter agglomerans Clebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis

M71343 0

E. agglomeransL
T j%1J "8i-es

2
Shigella C26p7s A, B, C.100R-

M0417s0 O347s0 C!47B37s0

Shigella C26p7s A, B, C.100RClebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis

X
Clebsiella oBaenae Clebsiella rhinoscleromatis
N710: p020 40 3=!2!:83083@: ! !s17s 7s CA:!27s !s 3;p7210:1! 1!:!2 !: 86!:10 40 p278! !:830 ! 40 ;6!s120

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )& de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A:!D7 "". D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s L3s3:0 K, O2:313:0 N

LISINA 2 ORNITINA X S. Para8> hi A C. diversus S. bo%dii =, E. cloacae ;. Enterocolitica C. "reundii M$S / S. bo%dii =, C. amalonaticus N C312017 C. "reundii &*S / C. diversus C. amalonaticus C. diversus M. morganii E. coli , X S. bo%dii %3 M. morganii C. amalonaticus E. coli U2!0 N C. amalonaticus M. morganii N C. "reundii M$S / S. sonnei M. morganii C. amalonaticus E. coli ,

I: 74

S. Parat%phi A S. sonnei E. cloacae

C. "reundii &*S/ S. bo%dii =, ;. enterocolitica

C312017 2 S. Para8> hi A S. sonnei S. bo%dii =, ;. enterocolitica

C. "reundii &*S / E. cloacae N $P ,

A 7:3174

E. cloacae

C. "reundii &*S /

S. bo%dii =, C. amalonaticus E. coli M71343 0 N S. Para8> hi A ;. enterocolitica C$1KCD 2 S. sonnei S. bo%dii =, ;. enterocolitica 3(KC

F!:34040:3:0

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )' de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A:!D7 "%. D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s TSI X <JA, E2S K, 43s3:0 K, Orni#ina 1

Lisina 2T4 Orni8ina X4 TSI V @'A4 M$S 2


S.P0201yp?3 A S?. S7::!3 S?. B7y 33 1" M72C0:!440 ;72C0:33 /. !:1!2787431380

S. P02011yp?3 A M72C0:!440 ;72C0:3

a!

S?. s7::!3 S?. B7y 33 1" /. !:1!2787431380

M. ;72C0:33

Indol

Urea

S?. s7::!3 S?. B7y 33 1"

S. P0201yp?3 A

+
/. !:1!2787431380

N7 ;7134

M7134 0 2& YC

$Lisina de%car&o%ilasa

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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

A:!D7 "&. D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s L3s3:0 N, O2:313:0 K

L3s3:0 N , O2:313:0 , E. coli C. pneumoniae C. oBaenaea S. rubidaea C. o9%toca S.odori"era

N E. coli C. o9%toca S.odori"era C312017 ! S3;;7:s N C. o9%toca S.odori"era , E. coli

I: 74 , , C. pneumoniae S. rubidaea C. oBaenaea

G0s +TSIN C. pneumoniae C. oBaenaea $P , C. oBaenaea S. rubidaea

U2!0 M047:017

N
C. pneumoniae

,
C. oBaenaea

N S. rubidaea

N C. o9%toca

, S.odori"era

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina )) de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.
A:!D7 "'. D30C20;0 ! 3 !:13=38083@: ! B08347s G20; :!C01397s L3s3:0 N, O2:313:0 N

LisinaX4 )rni8ina X
Escherichia coli Enterobacter aerogenes &a"nia alvei Serratia marscescens Serratia noli ue"aciens Enterobacter gergoviae Serratia odori"era

N
Escherichia coli Serratia odori"era

2
I: 74
Serratia noli ue"aciens Enterobacter aerogenes Enterobacter gergoviae &a"nia alvei Serratia marscescens

C312017 S3;;7:s

2
Escherichia coli

A20B3:7s0

2
S. marscescens

Serratia odori"era

Enterobacter aerogenes Enterobacter gergoviae &a"nia alvei Serratia marscescens

N
E. aerogens

G0s

2
DN0s0

A 7:3174

E. aerogenes E. gergoviae &. alvei

&. alvei S. marscescens

2
E. gergoviae &. alvei U2!0

E. gergoviae

2
&. alvei

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A:!D7 "(. P278! 3;3!:17s p020 40 3:7864083@: ! 47s ;! 37s y 40s p26!B0s B3756F;380s T)"e c)n 0na asa rec8a -a "i8ad de -a c)-)nia de 0na ca9a de ASC ) +C4 e in)c0-e -)s "edi)s di:erencia-es de -a sig0ien8e "anera: M! 37 ! 8312017 S3;7:s Rea-ice 0na es8r,a s)*re -a s0 er:icie de- agar 8endid) Inc0*e a 3(WC4 en aer)*i)sis4 )r $& h)ras c)n -a 8a a :-)9a. M! 37 TSI. Rea-ice 0na 0ncin )r e- cen8r) de- "edi) has8a --egar a- :)nd) de- 80*) Maga 0na es8r,a s)*re e- 8endid) de- "edi). Inc0*e a 3(WC4 en aer)*i)sis )r $&2&< h)ras c)n -a 8a a :-)9a. M! 37 ! LIA Rea-ice $ 0nci)nes )r e- cen8r) de- "edi) has8a --egar a- :)nd) de- 80*) Maga 0na es8r,a en -a s0 er:icie de- 8endid). Cierre her"A8ica"en8e e- 80*) e inc0*e a 3(WC4 en aer)*i)sis4 )r $&2 &< h)ras. M! 37 ! MIO. Rea-ice 0na 0ncin )r e- cen8r) de- "edi) has8a --egar a- :)nd) de- 80*). Inc0*e a 3(WC4 en aer)*i)sis )r $& h)ras c)n -a 8a a *ien a90s8ada. M! 37 ! 62!0 Rea-ice 0na es8r,a s)*re e- 8endid) Inc0*e a 3(WC en aer)*i)sis )r $& h)ras c)n -a 8a a :-)9a. M! 37 ! ;71343 0 +;! 37 GI P0nci)ne e- "edi) )r e- cen8r) has8a -as $'3 ar8es 8ra8and) de n) ")#er e- asa hacia -)s -ad)s. Inc0*e a 3(WC4 en aer)*i)sis )r $& h)ras c)n -a 8a a :-)9a. AC60 p!p17:0 0 +p26!B0 ! 3: 74 S0s enda e- "icr))rganis") agi8and) e- asa rec8a en -a s0 er:icie de- "edi). Inc0*e a 3(WC )r $& h)ras c)n -a 8a a :-)9a. A;3:7G83 7s !: 804 7 B0s! ! M7!44!2: 43s3:0, 02C3:3:0, 72:313:0 y 87:1274 Cca-d) *ase sin a"in)cid)D S0s enda e- "icr))rganis") indi#id0a-"en8e en cada "edi) Adici)ne % "- de acei8e "inera- es8Ari- s)*re -a s0 er:icie de- "edi). Inc0*e a 3(WC4 en aer)*i)sis )r $&2&< h)ras.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 90 de 90 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a $00?'0('0;

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ENFERMEDAD DIARREICA BACTERIANA AGUDA, IDENTIFICACIN DE Salmonella spp., Shigella sp., y Vibrio cholerae.

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