SAPONINAS ESTEROIDES

Alejandro Martínez M.

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Definición
O O

RO R=H, Sapogenina esteroide R=Carbohidratos (Deoxi), Saponina esteroide

Las saponinas esteroides son glicósidos esteroides con un núcleo espirostano que tienen la propiedad de hemolizar los glóbulos rojos y forman espuma abundante y estable al agitar sus soluciones acuosas
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3 .Biogénesis Alejandro Martínez M.

Estructuras de saponinas esteroides naturales Alejandro Martínez M. 4 .

c. en cajas de Petri con agar-sangre o en cajas de Petri con gelatina-sangre. Falsos positivos: Otras sustancias p. Puede realizarse en tubo de ensayo. se asume que la prueba es positiva. d. b. ej. ENSAYO DE LA ESPUMA Solución acuosa de una muestra + Agitación fuerte: Espuma abundante y estable. Alejandro Martínez M. ENSAYO DE HEMOLISIS Suspensión de glóbulos rojos en solución salina + Solución acuosa de la muestra. etc. ENSAYO DE LIEBERMANN-BURCHARD Si la porción esteroide posee grupos dienos conjugados reales o potenciales. de la Antrona. Si los glóbulos rojos se rompen (lisan o hemolizan). algunas proteínas. Interferencias: Taninos (Se eliminan con MgO). 5 .Ensayos de reconocimiento a. ENSAYOS PARA CARBOHIDRATOS Ensayos de Molisch.

EXTRACCION Y AISLAMIENTO • • En solv. La técnica C. Liofilización. Material Fresco: Extracto metanólico. masas (CG-EM) permite reconocimiento de los carbohidratos ligados en forma de derivados trimetilsililéteres de alditoles-MBA: Método de Hakomori. • • Alejandro Martínez M. de gases-E. gases de derivados TMS. 6 . carbohidratos ligados mediante la hidrólisis ácida. El marco se extrae con etanol. apolares: Saponinas insol. Cromatografía con Sephadex LH-20 para separar saponinas de otras moléculas como péptidos y macromoléculas.. Detn. CP frente a estándares ó C. metanol o mezclas estos alcoholes y agua. Material vegetal seco y molido: Desengrase. Sapogeninas sol. Columna de intercambio iónico. HPLC.

25R • ESPECTROMETRÍA DE MASAS FAB O m/z 577 O xil glu gal O m/z 739 m/z 871 gal [M-H] .Características espectrales • a. 7 . Intensidad relativa de bandas a 900 y 920 cm-1 permite determinar la estereoquímica del carbono 25. 920 y 987 cm-1. 900.= 1033 m/z 901 Alejandro Martínez M. Si banda 900 más intensa que 920 cm-1. INFRARROJO • Varias bandas tensiones C-O anillos pirano y furano: alrededor de 850.

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9 .Espectrometría de masas IE de Sapogeninas y Saponinas Alejandro Martínez M.

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Resonancia Magnética Nuclear 0.08d (25S) 0.0m 0. 11 .8s O 0.78d (25R) 0.96d (25R) 1.5m O 3.3-4.98d (25S) 3.2s 4.5m RO Alejandro Martínez M.7-0.9-1.

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O 110 65 (25S) 67 (25R) 27 (25S) 30 (25R) 16 (25S) 17 (25R) O 80 RO Alejandro Martínez M. 13 .

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espec. * Peso mol. Derivados alditoles y CG-EM. = Rot. Rot. 2. Papel con carbohidratos estándares. 15 . mol. / 100 C = Rot. sapogenina Si C es aprox. mol.Métodos para determinar carbohidratos enlazados y tipo de enlace glic. Hidrólisis ácida y C. y con la porción esteroide. 1. mol. el enlace es alfa Si C es aprox.60°. el enlace es ß Alejandro Martínez M. Método de Hakomori: Sirve para determinar número. clase y enlaces entre las unidades de carbohidratos. .Rot. saponina . + 305°. 3. Regla de Klyne: Determina si el enlace glicosídico es alfa ó ß.

Hidrólisis ácida: HO OH O MeO MeO OMe OH + MeO MeO OH O OH OMe + R-OH 3. 16 .METODO DE HAKOMORI 1. Metilación exhaustiva (permetilación): O MeO MeO O O OMe MeO MeO O OMe R (R = aglicona esteroide) 2. Reducción con NaBH4 y acetilación: AcO OAc MeO MeO OMe OAc + MeO MeO OAc OAc OMe + R-OAc I II Derivados alditoles fáciles de analizar por CG-EM Alejandro Martínez M.

17 .DISTRIBUCION NATURAL Monocotiledóneas: Liliaceae. p. Dioscoreaceae ( p. Fique Dicotiledóneas: Solanáceas y escrofulariáceas Animales: Estrellas de mar (No espirostánicas) Alejandro Martínez M. ej. ñames) y Amaryllidaceae (Agavaceae).ej.

18 .Conversión industrial en medicamentos OAc O O O O O O OAc A cO AcO A cO O OH O OH B r O O A cO B r Br A cO F OH HO O OH HO OH O OH O OH O OH F O O O Hidrocortisona Prednisolona Prednisona Alejandro Martínez M.

19 .O O O Br O O O Br AcO O OH O O Br AcO AcO O HO F O R O O O OH R O O O 9 etapas AcO O AcO O 9-fluorocorticoides Acetato de 11-cetopregnenolona Acetato de 11-cetotigogenina Alejandro Martínez M.

O O Testololactona O Aspergillus sp. 20 . O Compuesto S Streptomyces fradiae HO Curvularia lunata OH O OH O O Hidrocortisona Androstenodiona HO OH O OH O OH 14-hidroxicortisona Alejandro Martínez M.O O O Dehidrotestololactona OH O OH Cylindrocarpon radicicola O O OH Rhizopus sp. OH O OH Aspergillus sp.

se aisló la sustancia A. con las siguientes características espectrales: IR (KBr): 3400. c 1). EMIE: 414 (5. 271 (23). [alfa]20D=-115°.1). al comparar con sustancias de referencia se detectó la presencia de D-xilosa (Rf 0. 835. IR (KBr): 1730 cm-1. 253 (21.7). 396 (2. 200-2°C y [alfa]20D= -128° (cloroformo.20 Se acetila para dar un derivado de P. 918.3). 21 . 115 (16. 980. Esta sustancia se sometió a reflujo durante 3 horas con HCl al 7%.F.7).Problema 5 • • PHYTOCHEMISTRY 1983. 802 (898 >918) cm-1. de la fase orgánica se obtuvo una sustancia B.F. 189-90°C. 282 (42. 22: 2259 Del extracto metanólico de las raíces de Asparagus sprengeri. 898. • • • • • Alejandro Martínez M. %C = 78.3). 3020.15 %H = 10. se concentró y se analizó por cromatografía en papel eluyendo con la mezcla BAW 4:1:5. 2845.6). Luego de una partición con cloroformo. La fase acuosa se neutralizó con Carbonato de plata. Liliaceae. 300 (25). 345 (6. 860. 139 (100).28) y D-glucosa (Rf 0. La sustancia B es un sólido de P.18).

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ó R = Xil-GluAlejandro Martínez M. 23 .O O RO R = Glu-Xil.

0. 1H).F.77 (s.5-6°C EMIE: 412 (M+. 24 . 864 cm-1. 3H).10 (d.85 (s. 900. 290.). RMN-1H: 5.F. 898.95 (d. 287. 920. 203-4°C EMIE: 432. b) Brisbenona P.81 (d.5 Hz. IR : 3420. 3H).Problema 6 • • • • • • • • • • • • • STEROIDS 24. 7. 3H. 980. 318. J=6 Hz. 279. etc. 1H. 205 (1974) Determine las estructuras más probables para la brisbagenina y la brisbenona. UV (máx): 231 nm. 139 (100). RMN-1H: 0. las cuales presentan las siguientes características: a) Brisbagenina P. 980. 3H). 0. 0. J=10. 867 cm-1. IR: 1680. 204. 300. etc.5 Hz).77 (d. J=10. Alejandro Martínez M. 139 (100). 920. 1050. J=7 Hz).

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26 .O O O Brisbenona HO Brisbagenina Alejandro Martínez M.