You are on page 1of 115

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

CETESB Companhia Ambiental do Estado de So Paulo

2012

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Mnica Luisa Kuhlmann Guiomar Johnscher-Fornasaro Lucy Lina Ogura Hlio Rubens Victorino Imbimbo

CETESB Companhia Ambiental do Estado de So Paulo Diretoria de Engenharia e Qualidade Ambiental Departamento de Anlises Ambientais Diviso de Anlise Hidrobiolgicas Setor de Comunidades Aquticas

2012

Dados Internacionais de Catalogao


(CETESB Biblioteca, SP, Brasil)

C418p

CETESB (So Paulo) Protocolo para o biomonitoramento com as comunidades bentnicas de rios e reservatrios do estado de So Paulo [recurso eletrnico] / CETESB ; Mnica Luisa Kuhlmann ... [et al.]. So Paulo : CETESB, 2012. 113 p. : il. color.

Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35publicacoes-/-relatorios> Disponvel tambm em CD. ISBN 978-85-61405-37-3 1. Bentos 2. Comunidade bentnica anlise 3. Indicadores biolgicos mtodos 4. Integridade ecolgica 5. Macroinvertebrados aquticos 6. Qualidade ambiental biomonitoramento 7. Reservatrios - So Paulo (Est.) 8. Rios - So Paulo (Est.) I. Kuhlmann, Mnica Luisa II. Johnscher-Fornasaro, Guiomar III. Ogura, Lucy Lina IV. Imbimbo, Hlio Rubens Victorino V. Ttulo.

CDD (21. ed. Esp.) CDU (2. ed. Port.)

363.739 463 169308161 591.764 0286 8161 592/596:502.175 (282.2:815.6)

Catalogao na fonte: Margot Terada CRB 8. 4422

DEDICATRIA

Este trabalho dedicado ao professor Dr Aristides de Almeida Rocha, primeiro bilogo e bentlogo da CETESB e professora Dra Gisela Yuka Shimizu, lder no estudo da ecologia de comunidades bentnicas no Brasil.

AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem bibliotecria Margot Terada pela minuciosa e preciosa reviso do documento nos aspectos relativos s normas ABNT. Agradecemos a Dra Denise Navas Pereira que, gerindo a Diviso de Anlises Hidrobiolgicas por muitos anos, sempre apoiou e incentivou as nossas iniciativas, bem como a todos os profissionais bilogos que, em sua passagem pelo bentos, no Setor de Comunidades Aquticas, contriburam com o estabelecimento dos mtodos aqui apresentados, especialmente Dra Rosana M. Henrique e Dra Helena M. Watanabe. Agradecemos ao auxiliar tcnico Emerson Alves de Arajo, colaborador incansvel do bentos. Agradecemos os trabalhos de parceiros, como a Dra Gisela Y. Shimizu, que dedicou boa parte de seu tempo acadmico na orientao de vrios profissionais da CETESB, a MSc Vanessa H. Fidalgo, a MSc Flvia Mazzini e a MSc Fabiana Bonani, juntamente com seus orientadores, Dra Ana L. Brandimarte, Dr Marcelo Z. Moreira e Dra Alade A. F. Gessner, respectivamente, por desenvolverem, em suas dissertaes de mestrado, questes metodolgicas sugeridas pela CETESB. Agradecemos aos ex-estagirios que auxiliaram nas discusses de nossos mtodos com seus trabalhos de concluso de curso ou com apresentaes em eventos cientficos, como os bilogos Cristiane Y. Hayashida; Glucia M. C. Marques; Josilaine T. Kobayashi; Melissa V. Schleich; Jlia L. Krhenbhl e Eduardo G. Martins. Agradecemos a todo o grupo de pesquisadores do projeto Levantamento e Biologia de Insecta e Oligochaeta aquticos de sistemas lticos do estado de So Paulo, do Programa BIOTA/FAPESP, parceiros da CETESB no desenvolvimento e adequao de ferramentas para a garantia de qualidade da anlise de macroinvertebrados aquticos. Agradecemos tambm a todos os fotgrafos, cujas obras ilustram este documento, em especial o Dr Frederico F. Salles, que gentilmente permitiu o uso de sua foto da forma imatura da espcie ameaada de extino Perissophlebiodes flinti. E, finalmente, agradecemos o apoio da Dra Maria Ins Z. Sato, gerente do Departamento de Anlises Ambientais; da Dra Marta C. Lamparelli, gerente da Diviso de Anlises Hidrobiolgicas e da Dra Maria do Carmo Carvalho, gerente do Setor de Comunidades Aquticas.

LISTA DE ILUSTRAES

Figura 1 2 3 4 5 6 7

Ttulo Exemplo de formulrio para registro do dado em bancada Curva de acmulo de txons Exemplo de formulrio para CQA de identificao taxonmica ndice da Comunidade Bentnica para rios (ICBRIO) ndice da Comunidade Bentnica para regio sublitoral de reservatrios (ICBRES-SL) ndice da Comunidade Bentnica para regio profundal de reservatrios (ICBRES-P) Faixas de qualidade

p.

47 49 59 64 64 64 66

Foto 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Acessos para a embarcao Margem deposicional em rio Pegador Ponar

Ttulo

p.

22 24 27 29 30 31 32 34 35 36 37 38 39 41 42 44 44

Pegadores Petersen modificado e van Veen Verses do pegador Ekman-Birge Substrato artificial do tipo cesto com pedra de brita Testemunho Coleta de amostra de sedimento para anlise de comunidade bentnica Acondicionamento das amostras para transporte Material para lavagem de amostras de macroinvertebrados Etapas de preparao de amostras de bentos Flutuao de amostras Placa de Petri descartvel de fundo quadriculado para triagem Larva de Chironomus (Chironomidae Chironominae). Larva de Stempellina (Chironomidae Chironominae). Opistocystidae Reproduo assexuada em Dero (Tubificidae Naidinae)

18 19 20 21 22 23

Colnia de Bryozoa Subamostrador em L Cpsula ceflica de Labrundinia (Chironomidae Tanypodinae) Larva de Chironomus em 4 instar Mentos de Chironomus em condies normal e deformados Coleo referncia para famlias de Trichoptera

45 48 51 53 54 61

LISTA DE SIGLAS

ABC Regio que compreende os municpios de Santo Andr, So Bernardo, So Caetano, Diadema e Mau CQA - Controle de Qualidade Analtico CETESB Companhia Ambiental do Estado de So Paulo CONAMA - Conselho Nacional do Meio Ambiente EPC - equipamentos de proteo coletivo EPI - equipamentos de proteo individual IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica IBI - Index of Biotic Integrity ICI - Invertebrate Community Index ICB ndice da Comunidade Bentnica INMETRO - Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade Industrial IOT - Instruo Operacional de Trabalho POP - Procedimento Operacional Padronizado SMA - Secretaria do Meio Ambiente do Estado de So Paulo UFBA Universidade Federal da Bahia UFJF Universidade Federal de Juiz de Fora UFSC Universidade Federal de Santa Catarina UFSCar - Universidade Federal de So Carlos UNICID - Universidade Cidade de So Paulo USEPA United States. Environmental Protection Agency USP - Universidade de So Paulo

SUMRIO APRESENTAO INTRODUO 19 PLANEJAMENTO AMOSTRAL 21 Locais ou pontos de coleta 21 Habitats 23 Perodo de amostragem 24 Frequncia de amostragem 25 Natureza do dado 25 MTODOS DE AMOSTRAGEM 26 Equipamentos 26 Pegadores 27 Substrato artificial 30 Testemunho 32 Coleta, armazenamento e transporte 33 MTODOS DE ANLISE 35 Preparo da amostra 35 Anlise da amostra 38 Triagem 38 Identificao e contagem 39 Subamostragem 48 Preparao de lminas 50 AVALIAO DA FREQUNCIA DE DEFORMIDADES EM MENTO DE CHIRONOMUS 52 SADE OCUPACIONAL 54 SISTEMA DE QUALIDADE ANALTICA 56 CQA - triagem 57 CQA - identificao de organismos 58 TRATAMENTO DE DADOS 62 REFERNCIAS GERAIS 67 APNDICE A 77 APNDICE B 91 ANEXO A 95 ANEXO B 109

1 2 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 3 3.1 3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.2 4 4.1 4.2 4.2.1 4.2.2 4.3 4.4 5 6 7 7.1 7.2 8

13

14

APRESENTAO

A utilizao de macroinvertebrados aquticos, que incluem as comunidades bentnicas, para o diagnstico de qualidade de ecossistemas aquticos continentais remonta ao incio do sculo XX. Desde ento, muitos ndices e protocolos foram desenvolvidos para sua aplicao em programas de biomonitoramento, especialmente para ecossistemas ribeirinhos de baixa ordem e rasos (nascentes, crregos, riachos), sendo atualmente a biota mais empregada para este fim (FLOTEMERSCH et al., 2006). Porm, os mtodos utilizados nestes protocolos no se aplicam aos ambientes mais profundos, como os rios e reservatrios investigados na rede de monitoramento da Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB).

A despeito de Thienemann ter empregado a comunidade bentnica na tipologia de lagos desde 1925 (BRINKHURST, 1974), protocolos para o

biomonitoramento de reservatrios e grandes rios ainda so escassos na literatura, podendo ser citados Gerritsen et al. (1998), Gerritsen et al. (2000) e Flotemersch et al. (2006). Os primeiros dois trabalhos, voltados para lagos e reservatrios, subsidiaram muitas decises tomadas na padronizao dos mtodos adotados neste protocolo. J o trabalho de Flotemersch et al. (2006), desenvolvido para grandes rios, realiza coletas marginais, utilizando os mesmos mtodos aplicados em riachos. Como os grandes rios do estado de So Paulo so em geral encaixados, com margens profundas ou cobertas por bancos de vegetao (alagados), no permitiriam o emprego destas tcnicas.

O uso de comunidades no diagnstico da qualidade ambiental de recursos hdricos do estado de So Paulo pela CETESB iniciou-se ainda em sua formao, no incio da dcada de 1970, a partir do qual foram realizados estudos em ambientes crticos, como nos rios Atibaia (JOHNSCHER-FORNASARO et al., 1979), Moji-Guau (CETESB, 1980a), Sorocaba (PIVA et al., 1980b), Cubato (JOHNSCHER-FORNASARO; ZAGATTO, 1987), Ribeira de Iguape 15

(HENRIQUE, 1998) e nos reservatrios Salto Grande-Americana (ROCHA, 1972), Guarapiranga (ROCHA, 1976) e Billings (ROCHA, 1984; KUHLMANN et al., 1997; KUHLMANN; TRUZZI; JOHNSCHER-FORNASARO, 1998), aos quais somaram-se estudos de desenvolvimento metodolgico para o estabelecimento deste protocolo.

A insero das anlises de comunidades biolgicas na rede de monitoramento do estado de So Paulo foi impulsionada pela Resoluo da Secretaria do Meio Ambiente do Estado de So Paulo (SMA) n 65 (SO PAULO, 1998), que incentivava a criao de novos mtodos de diagnstico, que abordassem o uso de indicadores biolgicos. Foram ento criados grupos de trabalho para o desenvolvimento destes ndices e uma primeira verso do ndice de Comunidade Bentnica (ICB), j seguindo a abordagem multimtrica, foi concebida por profissionais da CETESB (MSc Guiomar Jonhscher-Fornasaro e Dra Mnica Luisa Kuhlmann) e pesquisadores da Universidade de So Paulo (USP) (prof. Dra Gisela Yuka Shimizu e prof. Dra Ana Lcia Brandimarte), da Universidade Federal de So Carlos (UFSCar) (prof. Dra Alade Aparecida Fonseca Gessner e prof. Dra Suzana Trivinho-Strixino), Universidade Cidade de So Paulo (UNICID) (prof. Dr Maurcio Anaya) e Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC) (prof. Dra Renata Maria Guereschi). Posteriormente, com projetos especficos, o ICB recebeu diferentes verses, de acordo com o tipo de ambiente em estudo (rios, sublitoral e profundal de reservatrios) e teve alguns de seus ndices formadores alterados e/ou ajustados, mesmo depois da insero da anlise de comunidade bentnica entre as variveis da rede de monitoramento do estado de So Paulo, em 2002. Embora ambientes de grande porte em geral estejam sujeitos a um maior nmero de interferncias e apresentem alta capacidade de assimilao, dificultando a investigao de relaes causais de impactos individuais (FLOTEMERSCH et al., 2006), a rede de monitoramento do estado de So Paulo tem priorizado a avaliao destes ambientes em sua malha de amostragem. Essa diretriz relaciona-se em parte com a caracterstica fisionmica da nossa 16

rede hidrogrfica, rica em rios encaixados e de mdio e grande porte, mas tambm pelo histrico das preocupaes ambientais em ecossistemas aquticos do estado, iniciado com a influncia deletria das grandes indstrias da regio do ABC sobre o rio Tamanduate. Alm disso, a anlise de bentos na rede de monitoramento foi incorporada na anlise integrada de qualidade dos sedimentos, tendo sua metodologia se adequado a esta aplicao. Este protocolo descreve os mtodos de amostragem e anlise das comunidades bentnicas em rios e reservatrios utilizados nesta rede.

17

18

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

INTRODUO

Os macroinvertebrados aquticos so aqueles selecionados em rede de no mnimo 0,20 mm (ou 200 m) de abertura (ROSENBERG; RESH, 1993). Em ecossistemas dulciaqucolas englobam espcies de Insecta, Annelida (principalmente Oligochaeta e Hirudinea), Nemertinea, Crustacea (Decapoda, Amphipoda e Isopoda), Mollusca (Bivalvia e Gastropoda) e alguns Turbellaria e Bryozoa. Colonizam o substrato de fundo dos ambientes aquticos (bentos), onde podem viver na gua de fundo (hiperbentos), sobre o substrato (epifauna), se enterrar em sedimento mais fino (infauna) ou ocupar os espaos entre os gros de areia (fauna intersticial). Mas tambm podem ser encontrados associados s macrfitas (fitfilos) ou ao filme superficial (nuston). Em ambientes rasos e marginais, a separao entre estes ltimos e a fauna verdadeiramente bentnica no possvel, mas os macroinvertebrados encontrados em ambientes profundos tm hbito de vida bentnico. Esta biota componente essencial para o funcionamento dos ecossistemas aquticos, atuando nos processos ecolgicos de transferncia de energia e de ciclagem de nutrientes. Alm disso, tem papel na movimentao de contaminantes e nutrientes dos sedimentos por: 1) biorrevolvimento ou bioturbao, alterao fsica e qumica dos sedimentos promovido pelas populaes que se enterram; 2) bioacumulao, em que a concentrao corprea de determinada substncia tende a aumentar com o tempo de contato do organismo a ela; 3) transferncia trfica ou biomagnificao, quando a concentrao aumenta com o nvel trfico; 4) biodegradao, quando h transformao, aps ingesto, da substncia pelo bentos; e 5) migrao, quando o contaminante transportado para outro sistema ou trecho do mesmo ambiente como, por exemplo, na emergncia de insetos cujas larvas so aquticas. As comunidades de macroinvertebrados bentnicos retratam a diversidade ecolgica do meio aqutico por serem formadas por populaes de hbitat e hbitos alimentares variados. Esta biota responde especialmente bem aos impactos de origem antrpica e tem sido utilizada como indicadora da qualidade ecolgica para toda a biota aqutica por viver em situao extrema. Por serem sedentrias ou de motilidade reduzida e estarem associadas ao sedimento, suas populaes so as primeiras a sofrerem as consequncias deletrias das atividades humanas do entorno. Alm disso, o sedimento o ponto final de grande parte da carga poluidora que adentra o ambiente aqutico e na gua prxima ao leito que os teores de oxignio dissolvido podem, rapidamente, atingir teores limitantes vida. Consequentemente, os macroinvertebrados tm sido usados na tipologia de lagos (BRINKHURST, 1974) e na avaliao biolgica da qualidade da gua, em projetos de diagnose e de monitoramento ambiental. Nestes estudos, apesar das variveis fsicas e qumicas apresentarem respostas mais rpidas, a aplicao de 19

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

dados das comunidades biolgicas, justifica-se por: 1) integrarem a ao de vrias fontes de impacto sobre os ecossistemas aquticos, incluindo alteraes fsicas, como a retirada da mata ciliar; 2) integrarem a ao de vrios contaminantes, situao esta mais comum tanto em descargas industriais quanto domsticas, e que podem vir a exibir efeitos sinrgicos ou antagnicos; 3) responderem a nveis de contaminantes no detectveis pela metodologia qumica; 4) responderem aos novos contaminantes, cuja metodologia analtica ainda est em desenvolvimento; 5) acusarem a ocorrncia de despejos intermitentes, como caracterstica da emisso de efluentes industriais e 6) serem medida direta da qualidade ecolgica do local, servindo como indicador de metas de qualidade para a biodiversidade. O uso formal destes organismos como indicadores da qualidade de ecossistemas aquticos comeou no incio do sculo XX, quando Kolkwitz e Marsson introduziram espcies do grupo no Sistema Saprobiano (CAIRNS; PRATT, 1993). Desde ento, vrios ndices foram desenvolvidos ao redor do mundo, com o intuito de traduzir as respostas biolgicas em nmeros que no s possibilitam o dimensionamento de impactos como so mais facilmente compreendidos pelos gestores de recursos hdricos. Estes ndices podem se basear no potencial bioindicador dos diferentes grupos que compem a biota (p. ex. os ndices biticos), na estrutura da comunidade (p. ex. os ndices de diversidade), ou ser uma mistura destes (os ndices multimtricos). importante frisar que a maioria dos ndices biticos existentes foi desenvolvida para riachos e no so aplicveis para rios de mdio e grande porte e, muito menos, para reservatrios. O mau uso destes ndices pode resultar em diagnsticos errneos e, consequentemente, decises equivocadas, comprometendo a sade do meio ambiente. O monitoramento um processo definido pela Resoluo do Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA) n 357/05 (BRASIL, 2005) como sendo de medio ou verificao de parmetros de qualidade e quantidade de gua, que pode ser contnua ou peridica, utilizada para acompanhamento da condio e controle da qualidade do corpo dgua. No monitoramento ambiental, anlises de comunidades so utilizadas para avaliar a qualidade ambiental com vistas proteo da biodiversidade, ou seja, a qualidade ecolgica do corpo dgua. A mesma Resoluo 357 sugere a aplicao de comunidades aquticas, quando apropriado, em seu artigo 8, 3 pargrafo. Outro uso desta biota em meio ambiente est nos estudos de avaliao de impacto, em processos de licenciamento ambiental que envolvam obras de grande porte e/ou impacto sobre ecossistemas aquticos. Neste contexto, a comunidade de macroinvertebrados pode ser inserida tanto na fase de diagnose ambiental quanto como instrumento para o acompanhamento de possveis impactos sobre os recursos hdricos envolvidos (monitoramento). Algumas diferenas metodolgicas sobre o uso em monitoramento devem ser consideradas na fase de diagnose. No levantamento inicial espera-se um inventrio dos componentes da biota, ou seja, a amostragem deve ser 20

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

exploratria e buscar capturar exemplares de todas as populaes existentes no trecho em estudo, e a identificao taxonmica dever atingir o nvel mais fino possvel para que questes sobre a ocorrncia de: espcies pertencentes s listas (federal e/ou estadual) de ameaadas de extino (anexo A), espcies exticas invasoras ou com potencial de bioinvaso (anexo B), espcies ou grupos endmicos, espcies ou grupos sensveis ao impacto previsto, espcies ou grupos indicadores, que possam inclusive ser apontados para um plano de monitoramento, sejam contempladas na discusso dos resultados. Alm de sua aplicao ao nvel de comunidade, que confere alta relevncia ecolgica ao dado de macroinvertebrados aquticos, a avaliao da frequncia de deformidade em mento de larvas do gnero Chironomus (Diptera: Chironomidae) pode ser til na diagnose de problemas de uma bacia. Estas deformidades so em geral consideradas de natureza teratognica, ou seja, no so transferidas para a gerao seguinte, desaparecendo o efeito assim que o agente causador for afastado (BIRD; SCHWARTZ; JOSEPH, 1995). Mas, segundo Bird, Schwartz e Joseph (1995), algumas deformidades que mantm a simetria bilateral do espcime e que so observadas em culturas do gnero podem ser mutagnicas, neste caso, passando para a prole. De qualquer maneira, parece no haver inviabilidade da populao, servindo como medida de efeitos subletais in situ. Segundo literatura (KUHLMANN; HAYASHIDA; ARAJO, 2000), essas deformidades esto associadas presena de contaminantes qumicos no ambiente, sendo apontados como causadores, PCBs, HPAs, metais pesados, pesticidas e hormnios e podem indicar contribuies desta natureza ao recurso hdrico avaliado. 2 PLANEJAMENTO AMOSTRAL

No planejamento amostral primordial delinear adequadamente a questo a ser respondida. a partir dela que se definir, por exemplo, os recursos hdricos a serem amostrados, a posio dos pontos de coleta e o tipo de amostragem a ser realizada. 2.1 Locais ou pontos de coleta

Como varivel ecolgica, destinada a avaliar a qualidade de um corpo dgua para a sustentao da biodiversidade aqutica, as amostragens de comunidades bentnicas devem ser inseridas em redes de monitoramento, apenas em locais com tal preocupao. Entre os pontos de coleta selecionados, pode ser crucial a definio de um ou mais locais referncia, ou seja, ambientes com caractersticas fsicas similares quele que ser estudado, preferencialmente localizados na mesma bacia hidrogrfica, mas que apresente nenhuma ou mnima interferncia humana. Em rios e reservatrios do estado de So Paulo muito improvvel poder trabalhar com a primeira condio.

21

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 1 - Acessos para embarcao: entre o ideal e o possvel

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2001) e Lucy Lina Ogura (2012)

Para a localizao inicial dos pontos de coleta podem ser utilizadas ferramentas como cartas do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica (IBGE) (p. ex. na escala 1:50.000), mapas rodovirios e imagens do Google Earth. E, em redes de monitoramento, muito importante que as agncias ambientais e/ou prefeituras e/ou comits de bacia possam opinar no momento de insero de 22

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

um ponto na bacia hidrogrfica de sua responsabilidade, j que conhecem os problemas da regio. De qualquer modo, crucial uma visita para reconhecimento do local antes do trabalho de coleta. Nesta vistoria, os tcnicos de campo definiro se o local permitir o uso de embarcao, qual tipo de embarcao a ser empregada e o local de acesso da embarcao ao corpo dgua (foto 1). Se no houver possibilidade de uso da embarcao e no houver outro tipo de apoio para a coleta, como um per, o ponto dever ser deslocado. S depois de definido um local apropriado pelos tcnicos de campo que se faz a caracterizao do ponto de coleta, anotando suas coordenadas geogrficas com GPS e outras referncias de localizao do ponto, dados de uso e ocupao de solo, de ocorrncia de fauna e do grau de preservao da mata ciliar. Pode-se tambm fazer um croqui do ponto, apontando as principais referncias de localizao, como estradas e ruas. 2.2 Habitats

Nos ambientes aquticos, as condies fsicas, qumicas e biolgicas variam ao longo de seus eixos transversal e longitudinal, criando zonas ecolgicas s quais diferentes populaes biolgicas estaro melhores adaptadas a se instalar. Consequentemente, as comunidades diferiro nos mesohabitats formados. Em reservatrios, comunidades bentnicas distintas so formadas nas regies litoral, sublitoral e profundal (gradiente transversal), na zona de transio (braos) e no corpo central (gradiente longitudinal), em funo da ao de ondas, da ocorrncia de macrfitas, da variabilidade e tipo de substrato, da distribuio qumica, da incidncia de luz, da estrutura trmica da massa dgua, da flutuao de nvel e da hidrodinmica. Em rios, as comunidades das margens deposicional e erosional e do canal distinguem-se principalmente em funo da hidrodinmica que define, por exemplo, o tipo do substrato e o estabelecimento da vegetao aqutica. Como, em geral, os ndices utilizados no diagnstico ambiental so tambm sensveis a estas diferenas, decorrentes da zonao, fundamental padronizar o mesohabitat a ser monitorado, evitandose com isso que a variabilidade natural no confunda o diagnstico. Em reservatrios, as coletas so realizadas em seu corpo central, em geral a uma distncia suficiente para evitar as interferncias promovidas pelas operaes da barragem (adota-se, por exemplo, a distncia de 2 km da barragem). Na rea de amostragem so obtidas amostras das regies sublitoral e profundal. As comunidades da regio sublitoral so utilizadas no apenas por serem mais diversas que as da profundal, mas tambm por melhor retratarem as condies de qualidade da gua e do estado geral do ambiente para a biodiversidade aqutica (KUHLMANN et al., 2005). Alm disso, em funo da profundidade em que se encontram, no sofrem a influncia de ondas e a heterogeneidade de habitats da regio litoral (GERRITSEN et al., 1998). So preferidas margens que apresentem algum grau de conservao das matas, de modo que o dado no responda exclusivamente ao uso do solo imediato rea de coleta. As comunidades da regio profundal, embora naturalmente mais restritas, so nicas para o diagnstico da qualidade dos sedimentos finos, que se depositam 23

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

nas regies mais profundas e calmas do sistema e que carregam consigo os contaminantes introduzidos por atividades antrpicas na bacia. Em rios, as coletas so realizadas nas regies de deposio (margens deposicionais) de forma que os resultados se encaixem nos diagnsticos de qualidade de guas e de sedimentos, para a preservao da biodiversidade aqutica. Shimizu e colaboradores (2002) e Watanabe (2007) observaram que a fauna da margem deposicional mostrou-se suficientemente sensvel para o dimensionamento da qualidade ecolgica de rios. As margens de deposio so mais facilmente reconhecidas na face interna de curvas (foto 2) Foto 2 - Margem deposicional

Fonte: Paulo Srgio Gonalves Rocha (2002)

2.3

Perodo de amostragem

Variaes sazonais tambm influenciaro a estrutura da comunidade e consequentemente os ndices que as descrevem, devendo, portanto, ser evitadas. No perodo de vero chuvoso, por exemplo, quando o aumento das vazes ocasiona o arraste de parte da fauna em rios e a distribuio irregular de calor ao longo da coluna dgua pode promover o estabelecimento de termoclinas em reservatrios mais profundos, esperada menor diversidade e riqueza em rios e nas regies profundas de reservatrios. Estas alteraes naturais do ambiente atuam nos ndices de forma similar a um impacto antrpico negativo sobre a biota bentnica, confundindo o diagnstico. Assim, este perodo deve ser evitado para amostragem com fins de avaliao da qualidade ecolgica do ambiente. O inverno seco foi o perodo de coleta padronizado para o biomonitoramento com macroinvertebrados bentnicos no estado de So Paulo, por ser um perodo associado a menores vazes e, portanto, ao aumento da concentrao 24

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

de poluentes, deixando a fauna mais vulnervel aos efeitos de efluentes e, sob condies naturais, ainda apresentar riqueza elevada (KUHLMANN et al., 2005) e por ser o perodo de mistura da massa dgua em reservatrios que estratificam (COELHO-BOTELHO et al., 2006). 2.4 Frequncia de amostragem

As anlises de macroinvertebrados podem ser demoradas e um incremento na frequncia de coleta reduzir o alcance espacial do biomonitoramento. Uma vez padronizado o perodo de coleta, espera-se que variaes sazonais tenham pouca ou nenhuma interferncia sobre os dados. Consequentemente, na rede de monitoramento do estado de So Paulo preferiu-se aumentar o nmero de locais diagnosticados e manter apenas um perodo anual para a coleta das amostras (inverno seco). 2.5 Natureza do dado

Os dados podem ter natureza quantitativa, qualitativa ou semi-quantitativa. No primeiro caso possvel trabalhar com as densidades populacionais, no segundo apenas com a riqueza e, no terceiro, com abundncias relativas. Para o diagnstico de alteraes na comunidade decorrentes de modificaes antrpicas no meio ou em seu entorno, os dados de densidade so mais sensveis, respondendo a concentraes subletais de poluentes que, em um primeiro momento, no eliminam toda a populao, mas apenas os indivduos mais sensveis ou debilitados. Esta resposta inicial ao agente estressor observada na queda da densidade e/ou da biomassa. Alm disso, em rios e reservatrios a macrofauna mais restrita do que em riachos, onde protocolos qualitativos tm tido sucesso. Por estas razes, apesar da amostragem qualitativa oferecer uma anlise mais rpida e com isso permitir o diagnstico de um maior nmero de locais a um custo inferior, no estado de So Paulo optou-se inicialmente pelo levantamento de dados quantitativos ou semiquantitativos no biomonitoramento de rios e reservatrios. No entanto, mtodos qualitativos para aplicao no biomonitoramento de rios de mdio e grande porte e reservatrios devem ser desenvolvidos para uso em uma primeira investigao da qualidade. Desta forma, os mtodos semiquantitativos e quantitativos atualmente empregados na rotina, se transformariam em opes de aprofundamento do diagnstico. Para o levantamento quantitativo, a tomada de rplicas obrigatria, diante da natureza agregada das populaes que compem a comunidade de macroinvertebrados. O nmero ideal de rplicas depende do ambiente em estudo, sendo menor para locais impactados, que j tiveram parte da fauna eliminada. Existem equaes na literatura que permitem o clculo do nmero adequado de rplicas por local a ser estudado (ELLIOTT, 1977), porm muitas vezes este valor no compatvel com os objetivos do monitoramento e com a capacidade do laboratrio. Assim, adotou-se um nmero fixo e vivel de trs rplicas por hbitat amostrado. 25

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

MTODOS DE AMOSTRAGEM

A obteno de amostras de sedimento para anlise das comunidades de macroinvertebrados bentnicos em ambientes profundos, como rios e reservatrios, requer embarcao. Assim, na equipe que vai ao campo essencial que pelo menos um tcnico tenha habilitao para pilotar o barco. Os equipamentos devem estar em condies de uso e interessante relacionar (lista de checagem) todo o material necessrio para a coleta para checagem antes da sada para o campo. Fichas de coleta devem ser elaboradas de acordo com as requisies do projeto, definindo todas as amostras a serem coletadas e para quais variveis se destinam, j que muitas necessitam de preservativos ou frascos especialmente lavados. Para a interpretao posterior dos dados so consideradas variveis essenciais a serem mensuradas, juntamente com as amostras de comunidades bentnicas: profundidade de coleta, transparncia da gua, oxignio da gua prxima ao fundo, granulometria, teor de matria orgnica e umidade do sedimento. A profundidade e a transparncia indicaro se a comunidade amostrada estar construda por membros das cadeias alimentares de detritos e de pasteio ou s de detritos, no caso de no estar exposta luz suficiente para que se desenvolvam organismos produtores primrios. O oxignio dissolvido condio essencial para a vida aerbia da qual fazem parte todos os membros da macrofauna bentnica. A granulometria determinar o tipo de populao que ocorrer no ambiente e a matria orgnica a disponibilidade de alimento. A umidade, junto com a granulometria, determinar o grau de compactao do substrato: substratos finos em geral possuem alto teor de umidade (>85%), se o teor for baixo indicar a ocorrncia de torres, que podem limitar o estabelecimento de organismos tubcolas. O trabalho de campo deve iniciar com as amostragens para anlises de variveis da gua, para que partculas suspensas do fundo no interfiram nos resultados. Na coleta de sedimentos, a primeira pegada deve se destinar anlise da comunidade bentnica, uma vez que a perturbao do fundo com as tomadas repetidas de amostras pode afugentar ou afastar os organismos mais geis. As rplicas so retiradas segundo um intervalo espacial aleatrio em relao primeira. O trecho percorrido e representado pelos dados obtidos estende-se por cerca de 100m, para rios a at um raio de 500m, para reservatrios. Em rios, as coletas devem seguir a direo jusante montante, novamente para que no se perturbe o ambiente a ser coletado. 3.1 Equipamentos

Existem vrios tipos de equipamentos de coleta de amostras de sedimento para anlise de macroinvertebrados bentnicos de rios e reservatrios. Todos exibem algum tipo de seletividade, sendo a escolha definida segundo o tipo de 26

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

ambiente e o objetivo do trabalho. A escolha do equipamento mais adequado chave para a qualidade da amostragem. Existem vrias publicaes que podem orientar esta deciso (KLEMM et al., 1990; BRANDIMARTE et al., 2004; KUHLMANN; WATANABE; KOBAYASHI, 2006; CETESB, 2011b). 3.1.1 Pegadores

Equipamentos com rea de captura mensurvel que agarram uma parcela do sedimento. Construdos em metal, so pesados e o movimento de descida pode formar ondas de choque, que podem lavar a superfcie do sedimento e afugentar organismos mais geis. Uma forma de prevenir a formao destas ondas controlar a velocidade de descida do equipamento. Suas garras podem ser bloqueadas por pedras, galhos ou outros detritos, acarretando perda de amostra. a) Ponar Foto 3 - Pegador Ponar

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2003)

Ambiente: rios profundos, litoral e sublitoral de reservatrios. Caractersticas: apresenta vrios tamanhos, a verso maior pesada e necessita de guincho. considerado o melhor amostrador quantitativo em substrato duro para a comunidade bentnica pela United States - Environmental Protection Agency (USEPA) (KLEMM et al., 1990).

27

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

placas laterais e telas previnem a perda de amostra no fechamento e reduzem a formao de ondas de choque, mas, em substrato mole, pode haver perda de partculas finas por ondas de choque. possui pino de segurana. em terreno inclinado, como em muitas regies litorneas e sublitorneas de reservatrios, pode haver dificuldade de desarme, j que as placas que prendem o pino podem no ficar alinhadas. o perfil vertical do sedimento no mantido ntegro.

Usos: em substrato grosso e duro (arenoso cascalho). a verso maior mais indicada para ambientes pristinos e a menor para locais poludos. para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica. b) Petersen, van Veen e modificaes (foto 4) Ambiente: rios profundos, litoral e sublitoral de reservatrios.

Caractersticas: apresentam vrios tamanhos. no adequado para uso em substrato mole, havendo perda de partculas finas por ondas de choque e de organismos que se enterram mais profundamente Usos: em substrato grosso e duro (arenoso cascalho). para ambientes lmnicos so indicadas as verses menores. para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica.

28

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 4 - Pegadores Petersen modificado e van Veen

B
Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2003) Notas: A = Petersen modificado; B = Pegador van Veen

c) Ekman-Birge e modificaes (foto 5) Ambiente: regio profundal de reservatrios.

29

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Caractersticas: leve e de fcil operao. menor formao de ondas de choque pela existncia de placas que se abrem no topo. a amostra obtida quase ntegra, permitindo subamostragem. muito leve para ser usado em substrato duro ou sob correnteza moderada ou forte. possvel a perda de material fino na subida do amostrador. Usos: em substrato fino e mole (arenoso fino argiloso). para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica. a modificao de Lenz permite estratificao e estudos ao longo do perfil vertical do sedimento. Foto 5 - Verses do pegador Ekman-Birge

Fonte: Helena Mitiko Watanabe (2003) Nota: pegador padro

Fonte: Helena Mitiko Watanabe (2003) Nota: pegador modificado por Lenz

3.1.2

Substrato artificial

Amostradores que imitam um substrato de colonizao. Podem ser totalmente construdos com material inorgnico ou preenchidos com material orgnico, que diminui o tempo de espera para a colonizao. Embora possibilitem uma amostragem padronizada e no destrutiva do local, exigem duas viagens a campo (instalao e retirada). Alm disso, o tempo de colonizao dos organismos espacial e temporalmente varivel. Por isso, necessrio um 30

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

estudo prvio para o estabelecimento do tempo de colonizao dos organismos para cada ambiente em que o equipamento for empregado. tambm frequente a perda de amostras por vandalismo ou inundaes no local. O substrato do tipo cesto preenchido com pedra de brita foi desenvolvido e testado pela CETESB (HENRIQUE-MARCELINO et al., 1992; KUHLMANN et al., 1993; KUHLMANN, 2000; IMBIMBO, 2001; KUHLMANN; IMBIMBO; WATANABE, 2003), tendo sido seu uso descartado para a rede de monitoramento pela logstica, uma vez que necessita de duas viagens a campo, e pelo risco de perda da informao (foto 6). Mesmo assim, mostrou-se uma ferramenta sensvel deteriorao do ambiente (IMBIMBO, 2001) e interessante para o monitoramento de locais protegidos e prximos, como no monitoramento de recursos hdricos dentro de empresas ou de unidades de conservao. No rio Tiet, o tempo de colonizao necessrio para se observar estabilidade nas medidas de estrutura da comunidade variou de 7 (vero) a 14 (inverno) dias (KUHLMANN, 2000). Foto 6 - Substrato artificial do tipo cesto com pedra de brita

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2002)

Ambiente: rios e margens de reservatrios.

Caractersticas: padroniza o substrato de coleta. permite amostragem em locais duros demais para uso de outros amostradores. a amostra de fcil processamento analtico. o equipamento barato, de fcil construo e operao. na coleta, deve-se minimizar perdas de organismos com a lavagem pelo filme de tenso superficial. somente reflete as condies do ambiente no perodo de colonizao. 31

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

seletivo para alguns organismos, no amostrando adequadamente aqueles com hbito de se enterrar (oligoquetos) e favorecendo a coleta de insetos. Consequentemente, no retrata a estrutura da comunidade bentnica do local de amostragem.

Usos: em substrato grosso e duro (arenoso a rochoso). para ensaios de comunidades bentnicas. para amostragem semi-quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica. 3.1.3 Testemunho

Tambm conhecidos como corer ou core sampler, so coletores em tubo que permitem amostragem de um perfil ntegro e profundo dos sedimentos (foto 7). Podem ser usados manualmente ou utilizar mecanismos de fechamento, como mensageiros. Podem ser constitudos por um nico tubo ou por at quatro (mltiplo). Este ltimo, segundo Milbrink e Wiederholm (1973) quase to eficiente quanto a Ekman-Birge padro na amostragem de larvas de Chironomidae em substrato lodoso. Foto 7 - Testemunho

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2002)

Ambiente: rios e reservatrios. Os manuais tm uso restrito a ambientes rasos.

Caractersticas: amostragem quantitativa e qualitativa. amostra ntegra, permitindo estratificao e estudos ao vertical do sedimento. perturbao mnima da interface sedimento gua. amostrador adequado para organismos que se enterram em sedimento mole. o pequeno tamanho amostral permite maior nmero serem analisadas em curto perodo de tempo. existem vrios modelos (por ex.: fechamento por mensageiro) e dimetros disponveis.

longo do perfil

profundamente de replicatas a gravidade ou

32

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

pode apresentar vlvulas de funcionamento automtico que previnem a perda da amostra. baixo risco de contaminao por uso de material inerte e tubos removveis. aqueles que operam por gravidade podem apresentar problemas de funcionamento e ocasionar perda da amostra. rea de amostragem limitada, requerendo repetio da operao e retirada de tubos. No permite preciso na estimativa da biomassa bentnica. o modelo mltiplo mais indicado para anlise de comunidades bentnicas. necessrio cuidado no manuseio para evitar perda de sedimento. O dimetro do tubo do amostrador pode restringir o tamanho dos organismos coletados, como bivalves e gastrpodas de maiores dimenses.

Usos: em substrato fino e compacto. 3.2 Coleta, armazenamento e transporte

Amostras obtidas com pegadores ou testemunhos, que cheguem superfcie vazando ou transbordando de sedimentos, devem ser descartadas, j que a perda de material evidente. Considerando que a maior parte dos organismos concentra-se nos 10 cm superiores do sedimento, para uma amostra adequada o equipamento dever estar preenchido com cerca de 2/3 a 3/4 de material. A gua que recobre o sedimento pode ou no ser coletada, dependendo do objetivo da amostragem. Se a anlise for considerar a epifauna ela dever ser coletada, se for uma anlise da infauna, como em alguns estudos de qualidade de sedimentos, essa gua dever ser sifonada e descartada. Nas amostragens da rede de monitoramento do estado de So Paulo a epifauna considerada. Amostras obtidas com pegadores, testemunhador ou substrato artificial podem ser acondicionadas diretamente em sacos plsticos resistentes (foto 8). Sugerimos o uso de sacos duplos (sobrepostos), j que o prprio pegador, de metal, pode furar o saco interno.

33

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 8 - Coleta de amostra de sedimento para anlise de comunidade bentnica

Fonte: Paulo Lobeira (2001)

A fixao deve ser realizada em campo, com formalina neutralizada (com brax ou bicarbonato de sdio) em volume tal que a concentrao final na amostra atinja de 4 e 10%. Ou seja, cerca de 100 mL para cada litro de amostra. A fixao em campo previne a continuidade de processos interativos entre os organismos, como a predao, e a decomposio da amostra, que modificariam o resultado final.

CUIDADO: O formol uma substncia voltil, txica e cancergena. Portanto, cuidado com sua manipulao e armazenamento, assim como das amostras em que foi utilizado, para no correr riscos de sade e no contaminar amostras destinadas a anlise de outros parmetros, especialmente para ensaios de toxicidade e mutagenicidade.

Os sacos, quando usados duplos, devem ser fechados separadamente, com fita adesiva grossa. No transporte deve-se evitar a colocao de materiais pesados e/ou pontiagudos sobre os sacos e o transbordamento dos potes, caso as amostras tenham sido assim acondicionadas (foto 9). E, havendo coleta de outras variveis, principalmente de medidas de efeitos txicos ou mutagnicos, as amostras de bentos no devem ser armazenadas juntas, assim como o manuseio do formol no barco deve ser cuidadoso de forma a evitar a contaminao das outras amostras.

34

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 9 - Acondicionamento das amostras para transporte

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2001)

MTODOS DE ANLISE

As amostras de sedimento coletadas em campo devem ser preparadas antes de se iniciar a anlise propriamente dita, uma vez que partculas finas de sedimento dificultam e at impossibilitam a recuperao dos organismos que compem a comunidade. 4.1 Preparo da amostra

Aps a coleta, as amostras de sedimento devem ser lavadas com gua de torneira em rede com malha de seleo previamente escolhida segundo os objetivos do projeto. Este procedimento reduz o volume da amostra ao eliminar partculas orgnicas e inorgnicas finas, o que tambm facilita a visualizao dos organismos. Para biomonitoramento so geralmente empregadas aberturas de malha de 0,5 0,6 mm, enquanto malhas mais finas (p. ex. 0,25 mm) encaixam-se melhor s metas do levantamento faunstico. A CETESB padroniza em seu programa de biomonitoramento a malha de 0,5 mm. A lavagem da amostra pode ser realizada em campo ou em laboratrio, de acordo com a melhor logstica de trabalho de campo, a ser definida no final do planejamento. Por exemplo, quando as amostras forem de locais muito distantes do laboratrio e/ou muito numerosas, a lavagem em campo facilitar o transporte. Em campo ou laboratrio a lavagem deve ser realizada preferencialmente em pia, com gua corrente, e os cuidados devem centrar-se na ausncia de perda de parte do material amostrado pelas bordas da rede, tanto na transposio do material do saco para a rede quanto por transbordamento, e na quebra dos 35

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

organismos, que compromete sua identificao. Para tanto, a rede deve estar apoiada e no se deve inserir material at sua boca. Redes na forma de sacos so mais eficientes e previnem melhor o transbordo que peneiras rgidas (foto 10) e o uso de baixa velocidade de fluxo da gua corrente ou chuveirinhos evitam danos aos organismos. Na confeco dos sacos importante evitar dobras e costuras internas, onde os organismos possam se prender ou enroscar. Foto 10 - Material para lavagem de amostras de macroinvertebrados a) Peneiras b) Saco

Fonte: Helena Mitiko Watanabe (2002)

A areia fina presente na amostra pode entupir a trama da rede, tornando a lavagem mais demorada. Alm disso, a areia danifica muito os organismos por frico, dificultando o trabalho posterior de identificao. Elimina-se mais facilmente a areia fina da amostra, sem danificar tanto os organismos, mergulhando a rede de lavagem em balde com gua e passando a mo gentilmente na superfcie externa desta para desobstruir a malha. Cuidado para no deixar extravasar o material pela boca da rede. Folhas e galhos podem ser subtrados da amostra lavando-os com cuidado na rede. Ateno para recuperar organismos fixos (ex. Bryozoa) ou que colonizem o interior oco dos troncos (ex. Trichoptera e Chironomidae). Aps a lavagem, o preservativo pode continuar a ser o formol 4-10% mas, por uma questo de sade do analista, preferencial troc-lo pelo lcool 70 GL, em volume tal que a proporo entre a amostra e o preservativo no ultrapasse 1:2 (1/3), principalmente quando houver muito material orgnico. Amostras que resultem em mais de um pote devem ter em suas etiquetas a anotao dos volumes (p. ex. 1/3, 2/3 e 3/3). O uso de um corante (Rosa de Bengala ou Floxina B) otimiza a etapa de triagem, que consome a maior parte do tempo da anlise de comunidade bentnica, mas pode dificultar a identificao de alguns organismos (foto 11). Segundo Mason e Yevich (1967) o uso de corante pode economizar at 50% do tempo da triagem 36

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

e boa parte da cor, que atrapalha a identificao, pode ser retirada do espcime se este for mergulhado em etanol 95%. Os mesmos autores relatam que o corante Rosa de Bengala, alm de apresentar colorao mais intensa, tinge mais rapidamente (em 24 horas) que a Floxina B (48 horas).

CUIDADO: O corante Rosa de Bengala mutagnico e deve ser manipulado com luvas.

Foto 11 - Etapas de preparao de amostras de bentos


a) Lavagem do sedimento b) Lavagem de folhas c) Amostra corada

Fonte: CETESB; Mnica Luisa Kuhlmann (2002)

Amostras com muito material inorgnico grosseiro (cascalho e areia) ou com muitos torres de argila podem ser flutuadas em soluo supersaturada de sal de cozinha (foto 12). O procedimento deve ser repetido por trs vezes, reutilizando-se a soluo retida em bquer, ou at que no se verifiquem perdas. Por ltimo pode-se realizar uma lavagem da amostra com gua de torneira. Cuidado para no manter por muito tempo os organismos em contato com a soluo, que pode provocar murchamento e dificultar a identificao. O material inorgnico deve ser triado a olho nu para verificao de perdas, principalmente de moluscos e tricpteros, dotados de conchas e abrigos, respectivamente, que tendem a funcionar como lastro e manter esses organismos em meio areia que ser descartada. Essa visualizao ser facilitada se a amostra tiver sido previamente corada. No caso de amostras com torres, aps a flutuao, retornar o material para a rede e desmanch-los gentilmente com as mos, triando o material restante em busca de organismos cavadores.

37

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 12 - Flutuao de amostras


a) Preparo da soluo salina supersaturada b) Amostra na soluo c) Revolvimento da amostra

d) Reteno do sobrenadante em rede

e) Retirada do sobrenadante da soluo

f) Lavagem em gua corrente do material retido

Fonte: CETESB; Mnica Luisa Kuhlmann (2002)

4.2

Anlise da amostra

A anlise da amostra propriamente dita realizada em duas etapas que podem ou no ser concomitantes: a triagem, que consiste na separao dos macroinvertebrados aquticos dos detritos vegetais e das partculas inorgnicas dos sedimentos e a identificao e contagem (para amostras quantitativas) dos txons. 4.2.1 Triagem

A triagem consiste na separao dos macroinvertebrados dos detritos vegetais e das partculas inorgnicas da amostra. Pode ser realizada integralmente a olho nu, em bandeja de fundo branco, de fundo quadriculado ou no, com ou sem base iluminadora; parcialmente a olho nu, para separao do material mais grosseiro, aliada a uma inspeo mais fina em busca de indivduos de menor tamanho, sob lupa (microscpio estereoscpico); ou integralmente sob lupa. Depender do objetivo do estudo, da malha de seleo empregada, do nvel de identificao requerido e das caractersticas da amostra.

38

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Colheres e pinas de ponta grossa e fina (de relojoeiro, nmeros dois e trs) so utilizadas como ferramentas de manipulao da amostra. Alguns profissionais tambm se utilizam de pincis, principalmente para a captura de organismos frgeis, como pequenos moluscos e microcrustceos. Para amostras coradas necessrio realizar uma lavagem prvia antes do incio da triagem para a retirada do excesso de corante e assim se efetivar o contraste entre os indivduos corados e o material (orgnico e vegetal) no corado. Sob a lupa, a amostra passada aos poucos, em pequenas subamostras homogeneamente distribudas em placas de Petri que, para garantir a leitura de toda a amostra, podem ser em material plstico descartvel e ter seu fundo quadriculado em campos de, por exemplo, 1 cm2 (foto 13). Os campos so passados um a um, na direo que o analista assim padronizar. Mas h outros mtodos que atingem o mesmo objetivo, como o uso de um afunilador de amostra. Foto 13 - Placa de Petri descartvel de fundo quadriculado para triagem

Fonte: Hlio Rubens Victorino Imbimbo (2012)

4.2.2

Identificao e contagem

A macrofauna bentnica em rios e reservatrios compe-se essencialmente de Nemertea, Turbellaria, Mollusca (Bivalvia e Gastropoda), Annelida (Oligochaeta e Hirudinea), Bryozoa, Crustacea (Decapoda e Amphipoda), Acarina e Insecta (principalmente Diptera, mas com algumas famlias de Odonata, Ephemeroptera, Trichoptera, Plecoptera, Coleoptera e Lepidoptera). 39

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Outros grupos e muitas famlias de macroinvertebrados restringem-se a ambientes lticos de cabeceiras, como os insetos Megaloptera e Neuroptera. Grande parte do trabalho de identificao da macrofauna realizada sob lupa e em geral baseia-se na visualizao de caracteres morfolgicos externos. O nvel de identificao a ser empregado variar de acordo com o tipo de estudo. Em levantamentos faunsticos para avaliao de impactos, por exemplo, fundamental o investimento no refinamento taxonmico, j que diferentes espcies possuem diferentes requisitos ambientais e, consequentemente, respondero de formas distintas aos impactos de uma determinada atividade. Alm disso, h espcies de invertebrados bentnicos nas listas de invertebrados (terrestres e aquticos) ameaados de extino (MACHADO; DRUMMOND; PAGLIA, 2008), cujas populaes esto legalmente protegidas (anexo A). Por outro lado, em programas de monitoramento o importante ser padronizar esse procedimento, de forma que o resultado seja comparvel e o retrato da qualidade eficiente. A discusso sobre o nvel de identificao ideal tem ocupado vrios pesquisadores tambm com relao s metas do biomonitoramento (p. ex.: BAILEY; NORRIS; REYNOLDSON, 2001; CHESSMAN; WILLIAMS; BESLEY, 2007). muito claro que, quanto mais fina a identificao, mais informao se agregar ao dado e mais preciso ser o diagnstico. Por exemplo, segundo Pinto et al. (2009), a utilizao de caractersticas biolgicas e ecolgicas das populaes que compem a biota oferece menor variabilidade temporal que o uso de densidades. Embora esta abordagem se mostre promissora, no Brasil ainda enfrenta-se uma grande lacuna de conhecimento sobre a biologia e os requisitos ecolgicos das espcies que compem nossas comunidades bentnicas. Assim, os principais critrios para a escolha do menor nvel taxonmico recaem sobre a sensibilidade ao gradiente de degradao e o menor tempo possvel para a anlise, crucial para a obteno de uma resposta rpida, que acelere a tomada de aes de controle e que permita a investigao de um maior nmero de ambientes. No biomonitoramento de rios de mdio e grande porte realizado pela CETESB, famlia o nvel taxonmico padro, mas alguns txons so identificados mais grosseiramente, em filo, classe ou ordem, como Bryozoa, Turbellaria/Tricladida e Nemertea, enquanto a famlia Chironomidae identificada at o nvel taxonmico discernvel sob lupa, ou seja, subfamlias (Orthocladiinae e Tanypodinae) e tribos (Chironomini e Tanytarsini). Contudo, para aplicao dos ndices de tolerncia (T/DT) e sensibilidade (Ssen), os gneros de Chironomidae, Chironomus, Stempellina, Stempellinella e Constempellina (KUHLMANN et al., 2007) so identificados e contados separadamente. Estes gneros possuem caractersticas que possibilitam sua identificao sob lupa. As larvas de espcies de Chironomus em geral so grandes, tm corpo avermelhado, possuem dois pares de tbulos abdominais grandes no oitavo segmento 40

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

abdominal e algumas tambm possuem um par de processos laterais na base do stimo segmento (foto 14). As larvas de Stempellina so pequenas, possuem a cabea achatada e constroem casulos de areia cnicos (foto 15), como as de Stempellinela e Constempellina. Para estes ambientes, nossos estudos tm demostrado que a identificao genrica das ordens Ephemeroptera, Plecoptera e Trichoptera (IMBIMBO, 2006), mundialmente considerados indicadores de boa qualidade em riachos, e de Chironomidae (MAZZINI, 2007), que podem predominar, ainda no se oferece compensadora mediante o tempo gasto para a gerao da informao. Mas, possvel que, no futuro, com o crescente conhecimento sobre a biologia e a ecologia das espcies bentnicas, o refinamento do dado realmente incremente a sensibilidade do diagnstico e possa ser usado na necessidade de um diagnstico mais robusto. No monitoramento de reservatrios so identificados os gneros de Oligochaeta e Chironomidae, j que os dois grupos em geral compreendem quase a totalidade da fauna destes ambientes e um nvel taxonmico mais grosseiro no permite o discernimento das classes de qualidade necessrias ao diagnstico. A identificao da maioria dos gneros destes dois txons feita sob microscpio. Foto 14 - Larva de Chironomus (Chironomidae: Chironominae)

Fonte: Hlio Rubens Victorino Imbimbo (2012)

41

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 15 - Larva e casulo de Stempellina (Chironomidae: Chironominae)

Fonte: Hlio Rubens Victorino Imbimbo (2012) Nota: A cor se deve ao uso do corante Rosa de Bengala.

Atualmente h uma grande disponibilidade de chaves de identificao, encontradas em livros ou publicadas em revistas e sites, que auxiliam o trabalho de identificao. Materiais desenvolvidos para os territrios brasileiro e sulamericano devem ser preferidos ao uso de chaves norte-americanas e de outros continentes, que podem ser utilizados, mas com critrio. Muitas famlias, gneros e espcies no ocorrem no Brasil e vice-versa. Nunca deixe de checar a listagem de famlias ou gneros presentes no pas. J existem vrias listas organizadas por especialistas de diferentes grupos de organismos (ver Referncias para Identificao Taxonmica). Muitos grupos exigem o uso de espcimes maduros ou de ltimo nstar para identificao, uma vez que alguns caracteres desenvolvem-se tardiamente. fundamental seguir a diretriz da chave de identificao utilizada quanto a este critrio, caso contrrio, o risco de resultado errneo ser maior. Assim, espcimes em estgio de desenvolvimento abaixo do requerido pela chave devero ser mantidos no nvel taxonmico mais grosseiro em que sua correta identificao for segura. O que identificar tambm uma questo pertinente, especialmente nas amostragens quantitativas. Quando o foco for o levantamento da macrofauna, com o uso de redes de malha 0,5-0,6 mm, como no biomonitoramento de rios e reservatrios da CETESB, indivduos da meiofauna e at da microfauna eventualmente capturados e observados podem ter suas presenas registradas, mas nunca suas densidades estimadas. Isto porque a malha aplicada permitir 42

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

que grande parte da populao seja perdida na lavagem e um erro operacional estar associado ao valor de densidade que se obtenha. Similarmente, formas inativas da populao, como pupas, casulos e gmulas podem ter as presenas registradas, mas no comporo a tabela de densidades das populaes, j que so fases diferentes das mesmas populaes cujas densidades foram estimadas como larvas ou adultos. O tipo de coleta e preparo do material muitas vezes danifica os espcimes. Neste caso, preciso padronizar o que ou como ser realizada a quantificao das famlias ou gneros. Nemertneos, turbelrios e oligoquetos, por exemplo, quebram com facilidade. Para Nemertinea, pode-se padronizar a contagem pela poro anterior, que apresenta os ocelos e a probscide. No caso de Turbellaria, a melhor forma de quantificao pela contagem da faringe musculosa, que sai da metade anterior ventral do corpo, mas pode-se optar pela contagem da cabea. J para Oligochaeta a contagem requer uma maior padronizao, que depender da famlia. Na identificao e contagem de Tubificinae aconselhvel que se utilize a parte anterior do corpo onde, para algumas espcies se desenvolve, no XI segmento, a bainha penial em indivduos maduros, estrutura essencial para sua identificao. Para Naidinae e Opistocystidae, tanto a parte anterior quanto a posterior sero fundamentais para a determinao do gnero. Assim, para os espcimes quebrados aconselhase a contagem separada das partes (anterior e posterior), para posterior definio. Por exemplo, a famlia Opistocystidae caracteriza-se pela presena de trs apndices caudais de tamanhos variveis no final do abdmen (foto 16). No entanto sua poro anterior, com quetas capilares desde o segmento II e presena de uma probscide torna-o confundvel com o gnero Pristina (Tubificidae-Naidinae). Em amostras em que se evidencie, pelos espcimes inteiros, a presena dos dois txons, contamos separadamente as pores posteriores de Opistocystidae (com trs caudas) e as pores anteriores que podem ser Opistocystidae ou Pristina. No final, so considerados Pristina apenas as partes anteriores que sobrarem da subtrao com as pores anteriores de Opistocystidae. Similar procedimento pode ser seguido na separao e contagem de espcimes quebrados de Dero e Nais. Alm disso, Aelosomatidae, Naidinae e Opistocystidae reproduzem-se assexualmente por fisso, podendo formar cadeias de indivduos (foto 17). Neste caso, preciso padronizar se, na quantificao da populao, ser considerado apenas os organismos livres, totalmente diferenciados, ou cada membro da cadeia.

43

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 16 - Opistocystidae. A cor se deve ao uso do corante Rosa de Bengala

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2012) Nota: Setas apontam apndices caudais e probscide.

Foto 17 - Reproduo assexuada em Dero (Tubificidae: Naidinae)

Fonte: Hlio Rubens Victorino Imbimbo (2012) Nota: A cor se deve ao uso do corante Rosa de Bengala. A seta indica a regio da fisso.

Algumas vezes ocorrem nas amostras espcimes de Hirudinea Glossiphoniidae com filhotes aderidos ao abdmen. Neste caso, apenas o indivduo adulto deve ser contado, j que os filhotes ainda so dependentes da me e parte deles pode vir a morrer antes de se tornar membro livre da 44

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

populao. Porm, se os filhotes forem encontrados livres na amostra sero contabilizados. Para Bryozoa, que forma colnias, cada indivduo ou zoide contado separadamente (foto 18). Foto 18 - Colnia de Bryozoa com dois zoides

Fonte: Hlio Rubens Victorino Imbimbo (2012) Nota: A cor se deve ao uso do corante Rosa de Bengala.

E, finalmente, na contagem de Mollusca preciso confirmar se o espcime estava vivo no momento da coleta, quebrando a concha at ser observada sua parte mole. Como a concha importante na identificao, esta deve ser realizada antes da contagem. Principalmente para este grupo taxonmico, as espcies exticas invasoras e ameaadas de extino devem ser identificadas e consideradas como informao adicional ao diagnstico de qualidade (anexo B). Para o cmputo final de riqueza e diversidade de espcies, espcimes identificados mais grosseiramente do que o requerido, at por dificuldade na identificao (espcimes muito pequenos ou quebrados), s sero considerados se nenhuma identificao no nvel exigido foi possvel. Caso contrrio, sero computados como sendo daquela famlia identificada (se algumas caractersticas se assemelharem) ou extrados da anlise, j que poderamos estar considerando o mesmo txon duas vezes. Por exemplo, se no foi possvel identificar a famlia de trs espcimes de Bivalvia, que se apresentaram em ms condies de identificao, e nenhum outro espcime possibilitou a definio de famlia dentro deste grupo, os trs espcimes sero considerados como um txon nico (Bivalvia), de famlia no identificada, nos clculos dos ndices de 45

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

riqueza e diversidade. Porm, se forem encontrados indivduos de Corbiculidae e algumas caractersticas combinarem, os trs sero somados a esta famlia. Caso contrrio, se persistir a dvida sobre a insero dos trs em Corbiculidae, eles sero extrados da anlise. O dado bruto deve ser registrado em formulrio prprio que identifique a amostra e a anlise (fig. 1).

46

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Figura 1 - Exemplo de formulrio para registro do dado em bancada

Fonte: CETESB (2011)

Na quantificao final do dado, o nmero de espcimes de cada txon deve preferencialmente ser expresso em termos de indivduos ou organismos/m2. Essa transformao permitir que amostras coletadas com diferentes pegadores 47

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

sejam comparadas. Para tanto, necessrio conhecer a rea de amostragem, mais facilmente calculvel para amostradores de rea rgida, como os pegadores Ponar e Ekman. Para os pegadores van Veen e Petersen, ela deve ser estimada com o equipamento em descanso sobre superfcie lisa e plana. Obviamente o substrato real dificilmente ser plano e liso e, consequentemente a rea da mordedura variar mais nestes casos. No entanto, essa variabilidade impossvel de ser determinada. Estabelecida a rea de amostragem s aplicar uma regra de trs para determinar o fator de multiplicao do pegador para a transformao em m2. Por exemplo: para uma rea de 20 x 20 cm = 400 cm2 = 0,04 m2, cada indivduo contado na triagem equivaler a 25 ind./m2. 4.3 Subamostragem

Amostras com altas densidades de uma ou poucas populaes bentnicas, estrutura tpica de ambientes submetidos a cargas elevadas de esgotos domsticos, podem ser subamostradas na triagem, na identificao ou na contagem. Um subamostrador ou quarteador em L, com comprimento dos lados iguais ao raio da placa de Petri, pode ser utilizado para este fim (foto 19). A amostra distribuda homogeneamente na placa de Petri e o quarteador inserido aleatoriamente na placa. Os txons que ocorrem em superpopulao sero retirados e contados apenas no delimitado, enquanto os outros podem ser triados e contados integralmente. Organismos cortados pelo subamostrador devem ser contados apenas se sua parte anterior estiver na rea de contagem. No esquecer que as densidades finais dos txons subamostrados correspondero ao resultado da contagem multiplicado por quatro! Este mtodo de subamostragem garante a continuidade do carter quantitativo da anlise e pode ser usado de uma vez s para a amostra toda. Neste caso, a amostra homogeneamente espalhada em uma bandeja branca. Um quarteador com dimenses compatveis com o tamanho da bandeja ento utilizado para separar a poro a ser trabalhada (KLEMM et al., 1990). Foto 19 Subamostrador em L

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2002)

Outros mtodos de subamostragem podem tornar o dado semi-quantitativo, perdendo a possibilidade de transformao em densidades absolutas, mas 48

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

mantendo seu uso em termos de abundncias relativas. Este o caso da contagem de um nmero mnimo de indivduos, quando no associado a uma porcentagem ou parcela da amostra total. A literatura (por exemplo, KLEMM et al., 1990) define como suficientes a identificao e contagem de 100 a 400 organismos como mtodo de subamostragem. Se a estimativa de riqueza for importante para o diagnstico, aconselhvel aliar o mtodo com uma curva de acmulo de espcies/txons (figura 2), usando como unidade amostral o contedo de uma placa de Petri. Quando a curva se estabilizar e o nmero mnimo de organismos a ser contado (p. ex. 400) for atingido, encerra-se a anlise. Um critrio de estabilizao deve ser assumido (por exemplo, aps cinco placas sem alterao de S). Figura 2 - Curva de acmulo de txons

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2012)

Quando a densidade de organismos a serem identificados for muito elevada possvel utilizar uma tcnica de subamostragem nesta etapa, em que apenas uma parcela dos organismos submetida ao trabalho de identificao, sendo o valor total extrapolado segundo as propores obtidas na subamostra. Para tanto, possvel proceder a uma separao prvia em grupos morfolgicos em lupa e posterior identificao de uma parcela (10 a 50%, dependendo da densidade total e da segurana do analista). Se o grupo se revelar homogneo, ou seja, estiver composto de um nico gnero ou espcie, o nmero de organismos contados para o grupo ser a densidade do txon a identificado. Se o grupo se mostrar heterogneo, significa que os caracteres morfolgicos utilizados na separao no foram eficientes. Neste caso, pode-se rever o material em busca de novas diferenas e separaes ou extrapolar o nmero total na proporo identificada de organismos. Essa ltima opo pode ser 49

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

utilizada desde o incio do procedimento, mas gera mais insegurana quanto perda de txons raros. Alis, para que txons raros no deixem de ser observados e ter sua presena registrada para o ambiente em estudo, aconselhase o uso da subamostragem apenas para a contagem de txons dominantes. 4.4 Preparao de lminas

A identificao mais fina de alguns grupos, como Chironomidae e Oligochaeta requerer preparo de lminas para anlise em microscpio. importante escolher o meio mais apropriado para cada txon e conhecer previamente a posio que o espcime dever ser arranjado na lmina. Existem meios temporrios, de curta (gua, glicerina, cido ltico 70%) e mdia (CMC-9, CMC-10, Hoyer, lactofenol) durao, e meios para preparao permanente (blsamo do Canad e Euparal). Os meios prontos, CMC-9 e CMC-10 so importados e indicados para Chironomidae e Oligochaeta, respectivamente, mas tm apresentado problema de formao de craquelado com o tempo. Para Chironomidae, o meio de Hoyer o mais indicado e facilmente preparado, segundo procedimento abaixo, descrito em Trivinho-Strixino (2011): Material: 30 g de goma arbica; 200 g de hidrato de cloral; 20 mL de glicerina; 50 mL de gua destilada. Forma de preparo: Adicionar a goma arbica na gua e deixar dissolver por cerca de 24h. Acrescentar o hidrato de cloral e deixar a soluo em repouso at que dissolva totalmente. Acrescentar a glicerina e filtrar em algodo de vidro. Os espcimes, preferencialmente de 4 nstar (TRIVINHO-STRIXINO, 2011), devem ser decapitados com a ajuda de pinas de pontas finas, agulhas ou estiletes, e as cabeas montadas em lmina em face ventral, de forma a permitir a visualizao das peas bucais. Sugere-se que a decaptao dos organismos seja feita sobre a lmina j com o meio de preparao, de modo a evitar que as cabeas destacadas sejam perdidas. Os corpos devem ser removidos da lmina aps a retirada das cabeas. O material deve ser coberto com uma lamnula e uma leve presso sobre esta assegurar a exposio e, consequentemente, a visualizao, das peas bucais necessrias para a identificao. Na identificao genrica de Tanypodinae e Orthocladiinae, os corpos tambm devem ser montados. Para conseguir o foco desejado e necessrio, peas de diferente espessura no devem ficar sob a mesma lamnula. Assim, nunca se deve juntar na mesma lamnula corpo e cabea de um espcime ou cabeas de diferentes 50

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

tamanhos. Para tanto, importante que o analista tenha registrado exatamente o que est montado em cada lamnula e manter alguma ordem em suas preparaes. Por exemplo, na montagem de vrios espcimes de Tanypodinae possvel organizar na mesma lmina uma lamnula de cabeas e outra de corpos, a segunda, na mesma sequncia da primeira. Alguns gneros possuem morfologia facilmente reconhecvel em lupa e no necessitaro de montagem em lmina. o caso de Coelotanypus, de cabea tipicamente pontuda em que, nos espcimes de maior porte, possvel visualizar o par de ganchos entre o terceiro e o quarto segmentos. Tanypus stellatus, que possui prolongamentos laterais no penltimo segmento abdominal. E algumas Labrundinia que exibem espinhos laterais e manchas, em forma de Y, na face ventral da cabea (foto 20). Foto 20 Cpsula ceflica de Labrundinia (Chironomidae Tanypodinae)

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2002)

Para Oligochaeta o meio deve ser menos viscoso, de forma a permitir alteraes na posio do espcime. Meios de curta durao servem a este propsito, porm, o lactofenol o meio mais apropriado, segundo o especialista Dr Roberto da Gama Alves (UFJF) (com. pess.), mas seu uso deve ser cuidadoso, pois o fenol uma substncia reconhecidamente cancergena. No seu preparo, basta misturar: 100g de fenol; 100mL de cido ltico; 200mL de glicerina; 100mL de gua. Segundo o Dr Alves, a visualizao das quetas ser melhor se a lmina for mantida em estufa a 30-40 C por poucos minutos a at trs dias. O lactofenol higroscpico e pode ser guardado por poucos meses no escuro ou em frasco mbar (BRINKHURST; MARCHESE, 1989).

CUIDADO: Evitar a inalao do lactofenol utilizando mscaras, pois o fenol cancergeno.

51

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Para evitar a formao de bolhas, a lamnula deve ser posicionada obliquamente na borda do meio e deslizada gentilmente para baixo. Ocorrendo bolhas, se estas estiverem atrapalhando a visualizao dos caracteres, possvel retir-las pressionando levemente a lamnula de forma a empurr-la para a borda. Se este procedimento no for eficaz, ser necessrio refazer a montagem. Bolhas que no estiverem atrapalhando o trabalho de identificao podem ser mantidas na preparao. Para maior durabilidade de preparaes em meios semi-permanente e permanente, aps sua secagem a lamnula deve ser selada com esmalte de unha, preferencialmente, transparente. 5 AVALIAO DA FREQUNCIA DE DEFORMIDADES EM MENTO DE Chironomus

Embora ocorram deformidades em outros gneros de Chironomidae, o gnero Chironomus foi escolhido por apresentar maior sensibilidade a este efeito (HUDSON; CIBOROWSKI, 1996b) e por ser tolerante s condies extremas de baixa oxigenao, j que bastante comum que ambientes com forte impacto qumico tambm sofram a influncia de efluentes domsticos. Alm disso, um gnero de tamanho grande, de colorao avermelhada e de fcil identificao. A maioria das espcies de Chironomus apresenta larvas com dois pares de longos tbulos no 8 segmento abdominal e as mais resistentes tambm exibem um par de processos laterais no 7 segmento abdominal. No s no mento que so observadas deformidades em larvas de Chironomidae, contudo nessa estrutura que se pode evidenciar melhor as deformidades de efeitos da preparao da lmina para microscopia (WARWICK et al., 1987). A avaliao de frequncia de deformidades s ser possvel quando ocorrer no local amostrado uma populao numerosa e madura do gnero Chironomus (Diptera: Chironomidae), j que se estabeleceu um mnimo de 100 larvas para a anlise (BURT; CIBOROWSKI; REYNOLDSON, 2003). Os espcimes podem ser obtidos a partir das trs rplicas que compem a amostra para a anlise de comunidade, ou com amostras adicionais at que este nmero seja atingido. importante salientar que este esforo adicional s ser recompensador se houver de fato no ambiente uma populao densa do gnero. Alm do nmero, foi padronizada a utilizao de larvas de 4 nstar, mais facilmente caracterizadas em sua fase final, quando exibem espessamento no trax (foto 21). A utilizao de larvas em seu ltimo estgio de desenvolvimento garante sua exposio mais prolongada aos agentes causadores de deformidade.

52

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 21 - Larva de Chironomus em 4 nstar

Fonte: Fabiana Bonani (2004) Nota: A seta aponta o espessamento torcico.

O mento normal do gnero Chironomus apresenta um dente central trfido e seis laterais (foto 22a). Para fins de padronizao, so consideradas deformidades: gap, bifurcao do dente central, falta e excesso de dentes (foto 22b a e). Para no confundir uma quebra no dente (foto 22f) com a deformidade do tipo gap basta observar a borda da falha. Se for lisa um gap e se for rugosa uma quebra, que no entra no cmputo da frequncia de deformidade. A frequncia de deformidade simplesmente a porcentagem de indivduos que apresentaram um ou mais tipos de deformidades com relao ao total analisado.

53

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 22 - Mentos de Chironomus em condies normal e deformados a) Normal b) Deformidade do tipo gap

c) Bifurcao do dente central

d) Falta de dente lateral

e) Excesso de dentes laterais

f) Quebra de dente

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann e Fabiana Bonani (2004) Notas: normal (a), com deformidades do tipo gap (b), bifurcao de dente central (c), falta (d) e excesso de dentes laterais (e) e quebrado (f).

SADE OCUPACIONAL

Algumas etapas da anlise de comunidade bentnica exigiro o uso de equipamentos de proteo individual (EPI) ou coletivo (EPC).

54

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Na coleta, por requerer o uso de embarcaes, a segurana do trabalho depender em grande parte da habilitao e treinamento dos pilotos. Estabilizar um barco em situaes de forte correnteza, evitar pedras e troncos submersos, agir rapidamente em emergncias so capacitaes desejveis ao piloto e copiloto da embarcao. A presena de dois membros da equipe com habilitao para a navegao tambm garantia de segurana, j que numa emergncia ou na impossibilidade temporria do piloto conduzir a embarcao sempre haver o segundo piloto para faz-lo. Uma pessoa que fique na margem, como apoio em terra, tambm desejvel, principalmente em ambientes de grandes propores, como o so vrios reservatrios do estado de So Paulo. Alm disso, importante zelar pela manuteno do prprio barco e de seus equipamentos de proteo coletiva, como botes salva-vidas, boias circulares, sinalizadores e aparelhos de comunicao distncia. Este material deve estar disponvel, especialmente em embarcaes de maior porte que naveguem em grandes reservatrios. Os tripulantes devem utilizar EPI, como: colete salvavidas, luvas, culos e protetor solar. Os tcnicos coletores tambm devem ser capacitados no manuseio dos equipamentos. Os mecanismos de fechamento dos pegadores muitas vezes operam de forma violenta para evitar o bloqueio das garras por pedras, galhos ou outros detritos. Travas de segurana devem ser adicionadas a estes equipamentos para evitar riscos, inclusive de amputao, em sua operao. No campo, os tcnicos devem utilizar luvas de proteo e, no momento da fixao da amostra com formol, devem tambm colocar um respirador descartvel para evitar inalao de vapores deste composto, comprovadamente cancergeno. Em laboratrio a amostra deve ser lavada em pia, sob um exaustor ou capela e o tcnico deve utilizar avental, luvas de borracha e, se preferir, tambm um avental de plstico, do tipo utilizado por aougueiros. Usar as luvas sempre que for manipular o corante rosa de bengala ou retir-lo da amostra, j que este mutagnico. Para a sade do analista aconselhvel manter a amostra, aps lavagem, em lcool 70-80 GL. A anlise de macroinvertebrados no exige muita adequao na estrutura fsica do laboratrio. necessrio uma bancada para acomodao dos equipamentos pticos (lupa e microscpio) ou da base iluminadora e de uma pia. Nesta questo, em relao sade ocupacional, um dos focos principais na anlise de bancada ser com a ergonomia, ou seja, com o uso de bancadas e cadeiras apropriadas para a correta postura diante dos equipamentos pticos. Alm disso, o tempo prolongado de observao em microscopia, na direo de um campo iluminado ou, s vezes, diretamente para a fonte luminosa, pode causar problemas com a viso. O analista em geral tende a piscar menos do que o necessrio, causando secura nos olhos, e a luz intensa sobre a retina pode 55

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

prejudic-la. Consequentemente adequado que se realizem breves descansos em intervalos de 40-50 minutos e que o trabalho em bancada ocupe no mximo 70% do trabalho dirio do analista. Amostras j analisadas so descartadas em lixo comum aps a retirada de seu contedo lquido (lcool). 7 SISTEMA DE QUALIDADE ANALTICA

A implementao de um sistema de qualidade para anlises ambientais assegura a confiabilidade do resultado obtido e fortalece sua aplicao como instrumento legal sendo, portanto, fundamental para os rgos de controle ambiental. O Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade Industrial (INMETRO) acredita anlises ambientais segundo a Norma ISO-IEC 17025 (ABNT, 2005), incluindo a anlise de comunidade bentnica (ou macroinvertebrados aquticos). Todos os funcionrios devem receber treinamento sobre a Norma e seus requisitos. O sistema exige uma srie de documentaes tcnicas, nas quais so descritas as metodologias empregadas, e administrativas, que, por exemplo, definem responsabilidades, registram o treinamento dos tcnicos e permitem a rastreabilidade do dado. No primeiro caso encaixam-se o Procedimento Operacional Padronizado (POP) e a Instruo Operacional de Trabalho (IOT). O primeiro documento, nico e mais importante para cada anlise, deve descrever o mtodo de determinao da varivel e o segundo, geralmente em maior nmero, deve descrever operaes em complemento ao primeiro, como por exemplo, a preparao de uma soluo ou o uso de algum software. Administrativamente, deve estar registrado o treinamento de cada funcionrio e suas responsabilidades dentro do laboratrio. A gerncia tambm deve manter um calendrio de manuteno preventiva para equipamentos e outros bens do laboratrio. Todos os equipamentos, de campo e de laboratrio, devem estar em perfeitas condies de uso. Para garantir a rastreabilidade do dado, cada amostra recebida no laboratrio deve ter o registro de suas condies e do responsvel por determinada ao. Por exemplo, um registro de entrada de amostras pode no s identificar todas as amostras que entraram para aquela varivel, mas em que data o fizeram, a que projeto pertencem, caractersticas de campo que possam ser importantes (como local, profundidade de coleta, tipo do pegador, para definir a rea de amostragem) e o responsvel pelo recebimento. Ateno: no recebimento que se identifica se a amostra est em conformidade com os critrios de qualidade que envolvem a coleta e a preservao em campo. Se a amostra no estiver de acordo com os procedimentos estabelecidos ela estar em no conformidade e no dever ser aceita pelo laboratrio, pois erros 56

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

analticos no controlados podem distorcer o resultado final. Exceto se o cliente, aps cincia do problema, precise do dado e solicite, por escrito, a anlise, mesmo com restrio na qualidade do resultado. Por exemplo, se a amostra no foi fixada em campo e nem mantida em gelo e demorou mais de 24 horas para chegar ao laboratrio, ela sofreu um processo de decomposio que tambm deve ter afetado os organismos da fauna. Consequentemente, o analista pode no ter condio de avaliar se espcimes em mau estado j estariam mortos no momento da coleta ou se morreram no processo de deteriorao da amostra. Todo o tratamento a que a amostra for submetida (por exemplo, a malha da rede de lavagem ou a flutuao com sal), e o responsvel pela sua realizao tambm devem estar registrados. Os responsveis pelas diferentes etapas da anlise (triagem, retriagem, identificao e reidentificao) tambm devem ser registrados, j que uma mesma amostra pode passar por mais de um analista. Os cuidados com a qualidade da anlise de comunidade bentnica englobam procedimentos relacionados desde a tomada da amostra at a expresso de seu resultado. Qualquer fonte de erro que possa comprometer a fidelidade do resultado realidade local em investigao deve ser cercada por cuidados, alguns dos quais formaro o Controle de Qualidade Analtico (CQA) da anlise. Para a anlise de macroinvertebrados aquticos foram definidos dois CQAs, um na etapa de triagem e outro na identificao dos organismos: 7.1 CQA - triagem

Todas as amostras triadas devem ser guardadas para posterior avaliao do CQA de triagem. aconselhvel indicar na etiqueta as amostras j triadas e armazenadas para o CQA, de forma a no serem confundidas com aquelas que ainda necessitam de triagem. Neste controle, a cada 10 amostras analisadas por um tcnico j capacitado, uma (10%) ser sorteada para retriagem por outro tcnico. considerado aceitvel um mximo de 5% de perda de organismos (para amostras quantitativas) ou txons (para amostras qualitativas). A estimativa de perda calculada segundo as seguintes frmulas: Estimativa de perda para amostras quantitativas:
P 100 , onde P = nmero de organismos encontrados na retriagem DT DT = densidade total da amostra na triagem

(1)

57

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Estimativa de perda para amostras qualitativas:


T 100 , onde T = nmero de txons encontrados na retriagem, S que no haviam sido registrados na triagem S = nmero total de txons na amostra triada

(2)

Se a anlise efetuada por um tcnico treinado exceder o critrio de aceitabilidade, outra amostra sua, imediatamente anterior ou posterior, ser retriada at que tenha atingido o critrio. Perdas na triagem decorrem de distrao, que pode ser eventual, restrita a uma amostra, ou mais frequente, e ter origem ambiental ou pessoal. Se a perda recorrer para um determinado tcnico, eventuais causas, como excesso de visitas no laboratrio, m ao do corante, mau conhecimento de espcies que compem a amostra e cansao, devem ser detectadas e sanadas. Tcnicos em treinamento devem ter 100% das amostras retriadas at que seu trabalho se estabilize dentro da faixa de aceitabilidade. Anlises realizadas por estagirios sempre devem ser retriadas por funcionrios treinados do laboratrio. 7.2 CQA - identificao de organismos

Tambm no controle da qualidade na identificao dos organismos, 10% das amostras identificadas por um bilogo capacitado ser revisada por outro, mas apenas no caso do laboratrio desejar verificar a variabilidade (ou conflito de identificao) entre os resultados de dois analistas. Neste caso aceita uma variabilidade de 20%. Este valor foi estabelecido a partir das distores no ndice utilizado para o diagnstico da qualidade ambiental na rede de monitoramento (o ICB, ver item 8). Para outros usos do dado, outro valor de aceitabilidade deve ser avaliado. A amostra (preferencialmente a de maior riqueza no lote de 10) analisada pelo analista 1 e pelo analista 2 (figura 3) e os dois resultados so colocados em paralelo para que se identifique perdas (P = txon cuja ocorrncia o primeiro analista registrou mas o segundo no) e ganhos (G = txon registrado pelo segundo analista mas no pelo primeiro). Calcula-se, ento, o Dimensionamento de Conflito (DC) como:
PG 100 , onde PG = maior valor entre Perdas (P) e Ganhos (G) Sm Sm = riqueza mdia das duas leituras

(3)

Analistas em treinamento sero habilitados quando concordarem em 90% com a identificao do analista treinado ao nvel taxonmico imediatamente superior ao da anlise e em 80% ao nvel taxonmico da anlise. Por exemplo, para
58

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

anlises em FAMLIA a concordncia de 90% dever ser medida em ORDEM e de 80% em FAMLIA.

Figura 3 - Exemplo de formulrio para CQA de identificao taxonmica

Fonte: CETESB (2007)

59

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Os resultados do CQA de identificao de organismos podem indicar os grupos taxonmicos de maior dificuldade (grande frequncia de conflitos) da equipe e, consequentemente apontar para a necessidade de treinamento dos analistas. O conhecimento do analista na identificao dos grupos taxonmicos que compem a fauna de macroinvertebrados chave para a garantia da veracidade e, portanto, da qualidade dos dados. Vrias ferramentas podem e devem ser desenvolvidas pelo laboratrio para que se mantenha a qualidade de seus resultados. A manuteno e atualizao de material bibliogrfico relacionado taxonomia de macroinvertebrados aquticos, como artigos e livros, requisito obrigatrio, assim como a realizao de cursos com especialistas. A capacitao na identificao dos diferentes grupos pelos tcnicos pode ser evidenciada no apenas pela apresentao do certificado de comparecimento a um determinado curso, mas tambm pelo registro de seu aproveitamento em provas que podem se seguir ao treinamento e/ou por ensaios interlaboratoriais de calibrao. Porm, neste ltimo caso, no momento no h nenhuma instituio que oferea tal ensaio no Brasil. O conhecimento de listas de ocorrncia dos diferentes grupos taxonmicos auxilia o analista a no cometer erros grosseiros de identificao, principalmente quando este se utiliza de chaves de identificao estrangeiras. A organizao de catlogos com informaes, desenhos e fotos dos txons que podem ocorrer na regio de abrangncia das anlises tambm de grande auxlio. Muita informao pode ser obtida em sites de especialistas. A organizao e manuteno de colees referncia de organismos, avalizada por um especialista de cada grupo taxonmico, um instrumento similar ao usado pelas anlises qumicas para garantir o bom estado de seus equipamentos e, portanto, tem sido bem aceito pelo sistema de qualidade. A coleo (foto 23) deve receber os cuidados de armazenamento e manuteno similar aos de um museu de zoologia. Por exemplo, armazenamento em local escuro e livre de umidade e reviso peridica do conservante (em geral, lcool 80 GL). O laboratrio pode tambm manter uma lista de especialistas colaboradores para garantir uma checagem final em uma dvida que persista mesmo aps o uso de todos os recursos do laboratrio.

60

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Foto 23 - Coleo referncia para famlias de Trichoptera

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2012) Nota: Organizada e avalizada pelo especialista prof. Dr. Adolfo A. Calor (UFBA).

A emisso de boletins de anlise (laudos) deve ser preferencialmente realizada aps o trmino das anlises de CQA. Se a emisso ocorrer antes e for detectado um ou mais problemas em alguma anlise o cliente ou coordenador do projeto dever ser avisado e o boletim corrigido e substitudo. Qualquer desvio do procedimento de anlise descrito deve ser comunicado ao cliente, que deve se manifestar quanto ao aceite ou no da modificao.
61

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Cpias do boletim e as fichas de coleta e de registro dos dados brutos podem ser armazenados juntos e encadernados de acordo com o projeto e/ou ano, para facilitar sua rastreabilidade. O tempo de armazenamento de um dado definido no Manual de Qualidade do laboratrio sendo, em geral, de cinco anos. 8 TRATAMENTO DE DADOS

No diagnstico da qualidade ambiental de ecossistemas aquticos, os dados de comunidade bentnica tm o papel de avaliar a qualidade do ambiente em termos de preservao de toda sua biodiversidade. uma medida ecolgica do estado de um corpo dgua que, aliada s medidas fsicas, qumicas e ecotoxicolgicas permite que se verifique se um ambiente est ou no degradado, qual o seu grau de degradao e, muitas vezes tambm quais poderiam ser as causas da degradao. Transformar a informao biolgica em um nmero no tarefa fcil, mesmo porque o universo biolgico complexo e no exato. Mesmo assim, muitos realizaram este feito, dando origem a uma infinidade de ndices encontrados na literatura de biomonitoramento (por exemplo, RESH; JACKSON, 1993). Este esforo demonstra a importncia desta traduo, que no s permite dimensionar a alterao na biota causada por um estressor, como facilita a comunicao com profissionais de outras carreiras. Algumas caractersticas devem ser verificadas na escolha do ndice: Seu poder estatstico (CARLISLE; CLEMENTS, 1999), dado em % deve ser elevado, sendo calculado como: (Ir It ) (4) CVr Onde, (Ir-It) = diferena entre o valor do ndice no ambiente referncia e no tratamento CVr = coeficiente de variao entre as rplicas do ambiente referncia

O coeficiente de variao deve ser baixo entre os dados do ambiente referncia. Ser sensvel ao gradiente de qualidade (CARLISLE; CLEMENTS, 1999), de preferncia, fornecendo diferentes respostas aos diferentes estressores. Ter relevncia ecolgica, ou seja, retratar as alteraes sofridas pela biota em resposta ao impacto, ao nvel populacional ou de comunidade. Ser de fcil compreenso e clculo, de forma a ser claro aos no especialistas.
62

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Minimizar a variabilidade espacial, com a padronizao do habitat. Minimizar a variabilidade temporal do dado, com a definio de um perodo fixo de coleta. Evitar a redundncia de informao na montagem de um ndice multimtrico. Por exemplo, no utilizar dois ndices de diversidade. Ser de baixo custo. ndices quantitativos em geral custam mais por exigirem rplicas.

ndices multimtricos agregam em um nmero vrios ndices (ou mtricas), cada qual abordando um aspecto diferente da comunidade alterado em funo de impactos de origem antrpica. O primeiro ndice deste tipo foi o Index of Biotic Integrity (IBI), desenvolvido para a ictiofauna por Karr (1981 apud KLEMM et al., 1990). Em 1989 a USEPA de Ohio (USEPA, 1989) adaptou este ndice para macroinvertebrados, denominando-o Invertebrate Community Index (ICI), a partir do qual vrios outros surgiram. Atualmente , provavelmente, a linha de diagnose mundialmente mais adotada, tendo absorvido em sua constituio muitos ndices biticos e de comunidade. Para o monitoramento da qualidade das guas interiores do estado de So Paulo a partir de dados de macroinvertebrados bentnicos de rios e reservatrios, a CETESB desenvolveu e adotou o ndice da Comunidade Bentnica (ICB). Este ndice tem este carter multimtrico e possui verses diferentes para cada tipo de sistema analisado: ICBRIO (figura 4), para as comunidades de rios de mdio a grande porte; ICBRES-SL (figura 5), para comunidades da regio sublitoral de reservatrios e ICBRES-P (figura 6), para comunidades da regio profundal de reservatrios.

63

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Figura 4 - ndice da Comunidade Bentnica para rios (ICBRIO)


CLASSE PSSIMA RUIM REGULAR BOA TIMA PONTO 5 4 3 2 1 5 6 13 14 20 21 3,00 > 3,00 - 9,50 > 9,50 - 20,00 > 20,00 S ICS H AZICO 1,00 > 1,00 - 1,50 > 1,50 - 2,50 > 2,50 > 0,75 0,50 - 0,75 > 0,25 - < 0,50 0,25 0 1 2 3 T/DT Ssens

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2012)

Figura 5 - ndice da Comunidade Bentnica para regio sublitoral de reservatrios (ICBRES-SL)


CLASSE PSSIMA RUIM REGULAR BOA TIMA PONTO 5 4 3 2 1 18 9 16 17 24 25 < 5,00 5,00 - < 15,00 15,00 - < 25,00 25,00 S ICS H AZICO 1,50 > 1,50 - 2,25 > 2,25 - 3,50 > 3,50 0,70 0,40 - < 0,70 0,10 - < 0,40 < 0,10 0 1 2 3 T/DT Ssens

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2012)

Figura 6 - ndice da Comunidade Bentnica para regio profundal de reservatrios (ICBRES-P)


CLASSE PSSIMA RUIM REGULAR BOA TIMA PONTO 5 4 3 2 1 13 46 79 10 1,00 > 1,00 - 3,50 > 3,50 - 7,00 7,00 S ICS H AZICO 0,50 > 0,50 - 1,50 > 1,50 - 2,00 > 2,00 0,80 0,03 T/DT Tt/Chi

0,50 - < 0,80 > 0,03 - 0,06 0,20 - < 0,50 > 0,06 - < 0,10 < 0,20 0,10

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2012)

Os seguintes ndices descritores da estrutura das comunidades bentnicas compem o ICB:

64

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

1. Riqueza (S), sendo simplesmente a soma das categorias taxonmicas encontradas na amostra. 2. ndice de Diversidade de Shannon-Wiener (H), calculado com log em base 2 (WASHINGTON, 1984). 3. ndice de Comparao Sequencial (ICS), (CAIRNS; DICKSON, 1971), determinado por software desenvolvido pelo prof. Dr. Aristotelino Monteiro Ferreira para a CETESB (HENRIQUE-MARCELINO et al., 1992). 4. Razo Tanytarsini/Chironomidae (Tt/Chi), com dados de densidade (USEPA, 1989). 5. Riqueza de txons sensveis (Ssens), em que so considerados sensveis as famlias de Ephemeroptera, Plecoptera, Trichoptera e o gnero Stempellina de Chironomidae-Tanytarsini em rios e as famlias de Ephemeroptera, Odonata, Trichoptera e os gneros Stempellina, Stempellinella e Constempellina de Chironomidae-Tanytarsini em reservatrios. 6. Dominncia de grupos tolerantes (T/DT), em que so considerados tolerantes, Tubificidae sem queta capilar, Tubificidae com queta capilar (s Tubifex), Naididae e Chironomus, em rios e Limnodrilus hoffmeisteri, Bothrioneurum, Tubifex, Dero, Pristina, Pristinella e Chironomus, em reservatrios. Para o clculo do ndice da Comunidade Bentnica apenas um dos ndices de diversidade (H ou ICS) considerado, dando-se preferncia ao ICS, cuja amplitude de variao maior. O valor final, que gera o diagnstico ou a classificao da qualidade do habitat, ser simplesmente a mdia aritmtica do valor obtido com a soma dos pontos de cada mtrica. Por exemplo, para um determinado ambiente ribeirinho, os valores das mtricas foram: S ICS T/DT Ssen 8 12,08 0,68 0

Os pontos de cada mtrica sero: S ICS T/DT Ssen 8 12,08 0,68 0 3 2 3 4

Ento, o ICBRIO = 3 + 2 + 3 + 4 = 12 4 = 3, portanto a qualidade ecolgica deste ambiente ser REGULAR. importante destacar que o nvel de identificao taxonmica, especialmente para Chironomidae e Oligochaeta, difere de acordo com o ambiente. Assim, em rios, em que a fauna bentnica representada por uma maior variedade de
65

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

grupos taxonmicos, a identificao de Chironomidae atinge subfamlias (Tanypodinae e Orthocladiinae) e tribos (Tanytarsini e Chironomini) e de Oligochaeta, famlias (Opistocystidae, Enchytraeidae, Lumbriculidae, Aelosomatidae) e subfamlias (Naidinae e Tubificinae). J em reservatrios, onde os dois grupos predominam e, no raramente, representam mais de 80% das comunidades bentnicas, a identificao deve diferenciar seus gneros. Na interpretao do resultado de frequncia de deformidades em mento de Chironomus, consideram-se os nveis naturais destas alteraes morfolgicas como basais, acima dos quais se evidencia a ao de poluentes. Para o estado de So Paulo, Bonani (2010) sugeriu o valor de 2% como limite entre o natural e o provocado por contaminao qumica do ambiente, diante da observao de ausncia total a 2,4% de deformidades em mento de larvas coletadas em ambientes mais preservados. Por outro lado, considerando que o maior valor encontrado foi de 43% (rio Quilombo) (CETESB, 2005) e que ambientes com forte influncia de esgotos domsticos, exibem frequncias de 4-6%, como os rios Sorocaba (KUHLMANN et al., 2007) e Jacupiranguinha (CETESB, 2009), foram definidas as seguintes faixas de qualidade (figura 7) para esta mtrica: Figura 7 Faixas de qualidade
QUALIDADE TIMA FREQUNCIA 2% RELAO COM O AMBIENTE Ambiente sem contaminantes que promovam a m formao do mento de Chironomus Frequncia provavelmente provocada por contaminantes diludos no esgoto domstico Frequncia provavelmente provocada por contaminantes qumicos lanados ao ambiente

REGULAR

2,1 6 %

RUIM

>6%

Fonte: Mnica Luisa Kuhlmann (2012)

66

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

REFERNCIAS GERAIS ABNT. NBR ISO/IEC 17025: requisitos gerais para competncia de laboratrios de ensaio e calibrao. Rio de Janeiro, 2005. BAILEY, R.C.; NORRIS, R.H.; REYNOLDSON, T.B. Taxonomic resolution of benthic macroinvertebrate communities in bioassessments. Journal of the North American Benthological Society, Lawrence, v. 20, n. 2, p. 280-286, june 2001. BIRD, G.A.; SCHWARTZ, W.J.; JOSEPH, D.L. The effect of 210Pb and stable lead on the induction of menta deformities in Chironomus tentans larvae and on their growth and survival. Environ. Toxicol. Chem., Pensacola, US, v. 14, n. 12, p. 2125-2130, dec. 1995. BONANI, F. Avaliao de deformidades morfolgicas em larvas de Chironomus (Dptera, Chironomidae) na bacia do rio Piracicaba e sua aplicao no biomonitoramento. 2010. 80 p. Dissertao (Mestrado em Ecologia) - Centro de Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade Federal de So Carlos, So Carlos, 2010. Disponvel em: <http://www.bdtd.ufscar.br/htdocs/tedeSimplificado//tde_busca/arquivo.p hp?codArquivo=3347>. Acesso em: out. 2012. BRANDIMARTE, A.L. et al. Amostragem de invertebrados bentnicos. In: BICUDO, C.E.M.; BICUDO, D.C. (Org.). Amostragem em limnologia. So Paulo: RiMa, 2004. Cap. 13., p. 213-230. BRASIL. Ministrio do Meio Ambiente. Instruo Normativa no 3, de 27 de maio de 2003. Dirio Oficial da Unio: Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, n. 101, 28 mai. 2003. 2003. Seo 1, p. 88-97. Disponvel em: <http://www.in.gov.br/visualiza/index.jsp?data=28/05/2003&jornal=1&pagi na=88&totalArquivos=112>. Acesso em: out. 2012. ______. Ministrio do Meio Ambiente. Instruo Normativa no 5, de 21 de maio de 2004. Dirio Oficial da Unio: Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, n. 102, 28 mai. 2004. Seo 1, p. 136-142. Disponvel em: <http://www.in.gov.br/visualiza/index.jsp?jornal=1&pagina=136&data=28/0 5/2004>. Acesso em: out. 2012. ______. CONAMA. Resoluo no 357, de 17 de maro de 2005. Dispe sobre a classificao dos corpos de gua e diretrizes ambientais para o seu enquadramento, bem como estabelece as condies e padres de lanamento de efluentes, e d outras providncias. Alterada pelas Resolues n 370, de 2006, n 397, de 2008, n 410, de 2009, e n 430, de 2011. Complementada pela Resoluo n 393, de 2009. Disponvel em:
67

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

<http://www.mma.gov.br/port/conama/legiabre.cfm?codlegi=459>. Acesso em: out. 2012. BRINKHURST, R.O. The benthos of lakes. London: MacMillan, 1974. 190 p. BRINKHURST, R.O.; MARCHESE, M.R. Guia para la identificacion de oligoquetos acuaticos continentales de sud y centroamerica. 2a ed. Santo Tom: Asociacion de Ciencias Naturales del Litoral, 1989. 207p. (Coleccin Climax, n. 6). BURT, J.; CIBOROWSKI, J.J.H. & REYNOLDSON, T.B. Baseline incidence of mouthpart deformities in Chironomidae (Diptera) from Laurentian Great Lakes, Ontario. J. Great Lakes Res., Duluth, US, v. 29, n. 1, p. 172-80, 2003. CAIRNS JR., J.; DICKSON, K.L. A simple method for biological assesment on the effects of the most discharges on aquatic bottom- dwelling organisms. J. Water Pollut. Control Fed., Washington, DC, v. 43, n. 5, p. 755-772, may 1971. CAIRNS, JR., J.; PRATT, J.R. A history of biological monitoring using benthic macroinvertebrates. In: ROSENBERG, D.M.; RESH, V.H. (Ed.). Freshwater biomonitoring and benthic macroinvertebrates. New York: Chapman & Hall, 1993. Chap. 2, p. 10-27. CARLISLE, D.M.; CLEMENTS, W.H. Sensitivity and variability of metrics used in biological assessment of running waters. Environ. Toxicol. Chem., Pensacola, US, v. 18, n. 2, p. 285-291, feb. 1999. CETESB. Avaliao da situao atual de contaminao dos rios Mogi-Guau e Pardo e seus reflexos sobre as comunidades biolgicas: relatrio tcnico. So Paulo, 1980. 3 v. CETESB. L5.309: Determinao de bentos de gua Doce: macroinvertebrados Mtodo Qualitativo e Quantitativo. So Paulo, 2003. Disponvel em: ______. Relatrio de qualidade das guas interiores no estado de So Paulo 2002. So Paulo, 2003. 279 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Relatrio de qualidade das guas interiores no estado de So Paulo 2003. So Paulo, 2004. 273 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Relatrio de qualidade das guas interiores no estado de So Paulo 2004. So Paulo, 2005. 297 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em:
68

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

<http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Relatrio de qualidade das guas interiores no estado de So Paulo 2005. So Paulo, 2006. 488 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Relatrio de qualidade das guas interiores no estado de So Paulo 2006. So Paulo, 2007. 327 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Relatrio de qualidade das guas interiores no estado de So Paulo 2007. So Paulo, 2008. 537 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Relatrio de qualidade das guas interiores no estado de So Paulo 2008. So Paulo, 2009. 528 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Relatrio de qualidade das guas superficiais no estado de So Paulo 2009. So Paulo So Paulo, 2010. 312 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Qualidade das guas superficiais no estado de So Paulo 2010. So Paulo, 2011a. 298 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ______. Guia nacional de coleta e preservao de amostras: gua, sedimento, comunidades aquticas e efluentes lquidos. So Paulo: CETESB; Braslia: ANA. 2011b. 326 p. Disponvel em: <http://arquivos.ana.gov.br/institucional/sge/CEDOC/Catalogo/2012/Guia NacionalDeColeta.pdf>. Acesso em: out. 2012. ______. Qualidade das guas superficiais no estado de So Paulo 2011. So Paulo So Paulo, 2012. 356 p. + anexos. (Srie Relatrios). Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. CHESSMAN, B.; WILLIAMS, S.; BESLEY, C. Bioassessment of streams with macroinvertebrates: effect of sampled habitat and taxonomic resolution. Journal
69

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

of the North American Benthological Society, Lawrence, v. 26, n. 3, p. 546-565, sept. 2007. COELHO-BOTELHO, M.J.C. et al. Desenvolvimento de ndices biolgicos para o biomonitoramento em reservatrios do Estado de So Paulo. So Paulo: CETESB, 2006. 146 p. + anexos. Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35-publicacoes-/relatorios>. Acesso em: out. 2012. ELLIOTT, J.M. Some methods for the statistical analysis of samples of benthic invertebrates. 2nd ed. Ambleside, UK: Freshwater Biological Association, 1977. 160 p. (Scientific publication, n. 25). FLOTEMERSCH, J.E. et al. Development of a standardized large river bioassessment protocol (LR-BP) for macroinvertebrate assemblages. River Res. Applic., Berlin, v. 22, n. 7, p. 775-790, sept. 2006. GAZOLA-SILVA, F.F.; MELO, S.G.; VITULE, J.R.S. Macrobrachium rosenbergii (Decapoda: Palaemonidae): possvel introduo em um rio da plancie litornea paranaense (PR, Brasil). Acta Biol. Par., Curitiba, v. 36, n. 1-4, p. 83-90, 2007. GERRITSEN, J. et al. Lake and reservoir bioassessment and biocriteria: technical guidance document. Washington, DC: EPA, 1998. (EPA 841-B-98-007). Disponvel em: <http://nepis.epa.gov/Exe/ZyNET.exe/20004ODM.txt?ZyActionD=ZyDocum ent&Client=EPA&Index=1995%20Thru%201999&Docs=&Query=&Time=&End Time=&SearchMethod=1&TocRestrict=n&Toc=&TocEntry=&QField=&QFieldY ear=&QFieldMonth=&QFieldDay=&UseQField=&IntQFieldOp=0&ExtQFieldO p=0&XmlQuery=&File=D%3A%5CZYFILES%5CINDEX%20DATA%5C95THR U99%5CTXT%5C00000012%5C20004ODM.txt&User=ANONYMOUS&Passwor d=anonymous&SortMethod=h%7C&MaximumDocuments=1&FuzzyDegree=0&ImageQuality=r75g8/r75g8/x150 y150g16/i425&Display=p%7Cf&DefSeekPage=x&SearchBack=ZyActionL&Bac k=ZyActionS&BackDesc=Results%20page&MaximumPages=1&ZyEntry=3>. Acesso em: out. 2012. GERRITSEN, J. et al. Development of Lake Condition Indexes (LCI) for Florida. Florida: Department of Environmental Protection, 2000. Disponvel em: <http://www.dep.state.fl.us/water/bioassess/docs/techdox/Florida_LCI.pdf >. Acesso em: out. 2012. HENRIQUE, R.M. Avaliao da qualidade ambiental do rio Ribeira de Iguape (SP, Brasil) atravs do estudo da macrofauna bentnica. 1998. 99 p. Dissertao (Mestrado) - Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, 1998.

70

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

HENRIQUE-MARCELINO, R. M. et al. Macrofauna bentnica de gua doce: avanos metodolgicos. So Paulo: CETESB, 1992. 16 p. HUDSON, L.A.; CIBOROWSKI, J.J.H. 1 Teratogenic and genotoxic responses of larval Chironomus salinarus group (Diptera: Chironomidae) to contaminated sediment. Environ. Toxicol. Chem., Pensacola, US, v. 15, n. 8, p.1375-1381, aug. 1996a. ______. Spatial and taxonomic variation in incidence of mouthpart deformities in midge larvae (Diptera: Chironomidae: Chironomini). Can. J. Fish. Aquat. Sci., Ottawa, v. 53, n. 2, p. 297-304, feb. 1996b. IMBIMBO, H.R.V. Estudo comparativo da eficcia de dois amostradores de comunidade bentnica no diagnstico da qualidade d gua do rio Tiet. 2001. 89 p. Dissertao (Mestrado) - Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2001. ______. Avaliao da qualidade ambiental, utilizando invertebrados bentnicos, nos rios Atibaia, Atibainha e Cachoeira, SP. 2006. 75 p. + anexos. Tese (Doutorado em Cincias) - Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2006. Disponvel em: <http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/41/41134/tde-16082007111253/pt-br.php>. Acesso em: out. 2012.

JOHNSCHER, G.L. et al. A comunidade bentnica e a caracterizao da qualidade da gua de um trecho do rio Atibaia. So Paulo: CETESB, 1979. 31 p. (CETESB, n 37). Trabalho apresentado ao 10 Congresso Brasileiro de Engenharia Sanitria e Ambiental, Manaus, AM, 1979. JOHNSCHER-FORNASARO, G.; ZAGATTO, P.A. The use of the benthic community as a water quality indicator in the Cubato River Basin. Water Sci. Tech., London, UK, v. 19, n. 11, p. 107-112, 1987. KLEMM, D.J. et al. Macroinvertebrate field and laboratory methods for evaluating the biological integrity of surface waters. Cincinnati, US: EPA, 1990. 256 p. (EPA/600/4-90/030). Disponvel em: <http://www.epa.gov/bioiweb1/pdf/EPA-600-4-90030MacroinvertebrateFieldandLaboratoryMethodsforEvalutingtheBiologicalInt egrityofSurfaceWaters.pdf>. Acesso em: out. 2012. KUHLMANN, M.L. Invertebrados bentnicos e qualidade ambiental. 2000. 133 p. Tese (Doutorado) - Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2000.

71

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

KUHLMANN, M.L. et al. Macrofauna bentnica de gua doce: avanos metodolgicos II. So Paulo: CETESB, 1993. 18 p. KUHLMANN, M.L.; HAYASHIDA, C.Y.; ARAJO, R.P.A. Using Chironomus (Chironomidae: Diptera) mentum deformities in environmental assessment. Acta Limnol. Bras., Rio Claro, v. 12, n. 2, p. 55-61, 2000. Disponvel em: < http://www.ablimno.org.br/acta/pdf/acta_limnologica_contents1202E_files/ artigo%205_12(2).pdf>. Acesso em: out. 2012. KUHLMANN, M.L.; IMBIMBO, H.R.V.; WATANABE, H.M. Macrofauna bentnica de gua doce: avanos metodolgicos III. So Paulo: CETESB, 2003. 74 p. Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguassuperficiais/35-publicacoes-/-relatorios>. Acesso em: out. 2012. KUHLMANN, M.L.; TRUZZI, A.C.; JOHNSCHER-FORNASARO, G. The benthos community of the Billings Reservoir (So Paulo, Brazil) and its use in environmental quality assessment. Verh. Internat. Verein Limnol., v. 26, p. 2083-87, 1998. KUHLMANN, M.L. et al. A fauna bentnica do complexo Billings (SP). So Paulo: CETESB, 1997. 108 p. Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/tecnologiaambiental/Laborat%C3%B3rios/110Publica%C3%A7%C3%B5es%20e%20Relat%C3%B3rios%20%20Relat%C3%B3rio%20T%C3%A9cnico>. Acesso em: out. 2012. KUHLMANN, M.L. et al. Developing a protocol for the use of benthic invertebrates in So Paulo states reservoirs biomonitoring: habitat, sampling period, mesh size and taxonomic level - I. Acta Limnol. Bras., Rio Claro, v. 17, n. 2, p. 143153, 2005. Disponvel em: < http://www.ablimno.org.br/acta/pdf/acta_limnologica_contents1702E_files/ Acta17(2)_04.pdf>. Acesso em: out. 2012. KUHLMANN, M.L.; WATANABE, H.M.; KOBAYASHI, J.T. Estudo da estrutura da comunidade bentnica. In: MOZETO, A.A.; UMBUZEIRO, G.A.; JARDIM, W.F. (Ed.). Mtodos de coleta, anlises fsico-qumicas e ensaios biolgicos e ecotoxicolgicos de sedimentos de gua doce: projeto QUALISED. So Carlos: Cubo, 2006. Cap. 5, Parte III, p. 182-189. KUHLMANN, M.L. et al. Aplicao da trade na avaliao da qualidade de sedimentos em redes de monitoramento. So Paulo: CETESB, 2007. 107 p. Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35publicacoes-/-relatorios>. Acesso em: out. 2012. MACHADO, A.B.M.; DRUMMOND, G.M.; PAGLIA, A.P. (Ed.). Livro vermelho da fauna brasileira ameaada de extino. Braslia: MMA; Belo
72

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Horizonte: Fundao Biodiversitas, 2008. 2 v. (Biodiversidade, 19). Disponvel em: <http://www.mma.gov.br/publicacoes/biodiversidade/category/55-especiesameacadas-de-extincao>. Acesso em: out. 2012. MAGALHES, C. et al. Exotic species of freshwater decapod crustaceans in the state of So Paulo, Brazil: records and possible causes of their introduction. Biodiversity and Conservation, The Netherlands, v. 14, n. 8, p. 1929-1945, july 2005. MASON, W.T.; YEVICH, P.P. The use of phloxine B and rose bengal stains to facilitate sorting benthic samples. Trans. Amer. Microsc. Soc., Lawrence, v. 86, n. 2, p. 221-223, 1967. MAZZINI, F. Efeitos da resoluo taxonmica de invertebrados bentnicos no diagnstico da qualidade de ecossistemas lticos. 2007. 90 p. Dissertao (Mestrado em Ecologia Aplicada) - Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de So Paulo, Piracicaba, 2007. Disponvel em: <http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/91/91131/tde-22102007111107/pt-br.php>. Acesso em: out. 2012. MILBRINK, G.; WIEDERHOLM, T. Sampling efficiency of four types of mud bottom samplers. Oikos: a journal ecology, Copenhagen, v. 24, p. 479-482, 1973. PINTO, P. et al. Seasonal and spatial gradients in the biological and ecological traits of benthic macroinvertebrate communities in Mediterranean rivers in southern Portugal. Verh. Internat. Verein Limnol., v. 30, n. 8, p. 1197-1201, 2009. PIVA, S.A.E. et al. Projeto rio Sorocaba: estudos biolgicos. So Paulo: CETESB, 1980. 59 p. RESH, V.H.; JACKSON, J.K. Rapid assessment approaches to biomonitoring using benthic macroinvertebrates. In: ROSENBERG, D.M.; RESH, V.H. (Ed.) Freshwater biomonitoring and benthic macroinvertebrates. New York: Chapman & Hall, 1993. Chap. 6, p. 195-233. ROCHA, A.A. Estudo sobre a fauna bentnica da represa de Americana no Estado de So Paulo (BR). 1972. 65 p. Dissertao (Mestrado) - Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, 1972. ______. A limnologia, os aspectos ecolgicos-sanitrios e a macrofauna bentnica da Represa do Guarapiranga na regio metropolitana de So Paulo. 1976. 194 p. Tese (Doutorado) - Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, 1976.

73

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

______. A ecologia, os aspectos sanitrios e de sade publica da represa Billings na regio metropolitana de So Paulo: uma contribuio sua recuperao. 1984. 166 p. Tese (Livre Docncia) - Faculdade de Sade Pblica, Universidade de So Paulo, So Paulo, 1984. ROCHA, O. et al. Animal invaders in So Paulo State reservoirs. Oecologia Australis, Rio de Janeiro, v. 15, n. 3, p. 631-642, set. 2011. Disponvel em: <http://www.oecologiaaustralis.org/ojs/index.php/oa/article/viewFile/oeco .2011.1503.14/540>. Acesso em: out. 2012 ROSENBERG, D. M.; RESH, V. H. (Ed.) Freshwater biomonitoring and benthic macroinvertebrates. New York: Chapman & Hall, 1993. 504p. SO PAULO. SMA. Resoluo n 65, de 13 de agosto de 1998. Dispe sobre a criao do ndice de Qualidade de gua para fins de Abastecimento Pblico (IAP). Dirio Oficial [do] Estado de So Paulo, Poder Executivo, So Paulo, SP, v. 108, n. 154, 14 ago. 1998. SO PAULO. CONSEMA. Deliberao Normativa 2, de 9 de novembro de 2011. Dispe sobre a elaborao e a atualizao de lista de espcies exticas com potencial de bioinvaso no Estado de So Paulo e d outras providncias. Dirio Oficial [do] Estado de So Paulo, Poder Executivo, So Paulo, SP, v. 121, n. 218, 22 nov. 2011. Seo 1, p. 71. Disponvel em: <http://diariooficial.imprensaoficial.com.br/nav_v4/index.asp?c=1>. Acesso em: out. 2012 SHIMIZU, G.Y et al. Estudos preliminares para o uso de ndices biolgicos no biomonitoramento de ambientes aquticos continentais riachos e corredeiras da bacia hidrogrfica do rio Atibaia. So Paulo: CETESB, 2002. 85 p. + anexos. Disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br/agua/aguas-superficiais/35publicacoes-/-relatorios>. Acesso em: out. 2012. SIMONE, L.R.L. Land and freshwater mollusks of Brazil. So Paulo: FAPESP: Bernardi, 2006. 390 p. SOUZA, R.C.C.L.; CALAZANS, S.H.; SILVA, E.P. Impacto das espcies invasoras no ambiente aqutico. Cinc. Cult., Campinas, v. 61, n.1, p. 35-41, 2009. Disponvel em: <http://cienciaecultura.bvs.br/pdf/cic/v61n1/a14v61n1.pdf>. Acesso em: out. 2012. SURIANE, A.L.; FRANA, R.S.; ROCHA, O. A malacofauna bentnica das represas do mdio rio Tiet (So Paulo, Brasil) e uma avaliao ecolgica das espcies exticas invasoras, Melanoides tuberculata (Mller) e Corbicula fluminea (Mller). Rev. Bras. Zool., Curitiba, v. 24, n. 1, p. 21-32, mar. 2007. Disponvel em: <http://www.scielo.br/pdf/rbzool/v24n1/03.pdf>. Acesso em: out. 2012.
74

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

TRIVINHO-STRIXINO, S. Larvas de Chironomidae: guia de identificao. So Carlos: UFSCar, 2011. 371 p. USEPA. Biological criteria for the protection of aquatic life: standardized biological field sampling and laboratory methods for assessing fish and macroinvertebrate communities. Collumbus, Ohio, 1989. v. 3, sec. 1, 19 p. Disponvel em: <http://www.epa.ohio.gov/dsw/bioassess/BioCriteriaProtAqLife.aspx>. Acesso em: out. 2012. WARWICK, W.F. et al. The incidence of deformities in Chironomus spp from Port Hope Harbour, Lake Ontario. J. Great Lakes Res., Duluth, US, v. 13, n. 1, p. 88-92, 1987. WASHINGTON, H.G. Diversity, biotic and similarity indices - a review with special relevance to aquatic ecosystems. Water Res., London, v. 18, n. 6, p. 65394, 1984. WATANABE, H.M. Bases para a aplicao de ndices biolgicos no biomonitoramento de ambientes lticos: comunidade bentnica. 2007. 120 p. Tese (Doutorado em Cincias) - Instituto de Biocincias, Universidade de So Paulo, So Paulo, 2007. Disponvel em: <http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/41/41134/tde-20122007144107/en.php>. Acesso em: out. 2012

75

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

76

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

APNDICE A Referncias para identificao taxonmica de macroinvertebrados aquticos. INVERTEBRADOS AQUTICOS

DOMNGUEZ, E.; FERNNDEZ, H.R. (Ed.) Macroinvertebrados bentnicos sudamericanos. Sistematica y biologa. Tucumn, Fundacion Miguel Lillo. 2009. LOPRETTO, E.C.; TELL, G. (Eds) Ecosistemas daguas continentales: metodologias para su estudio. Tomo II. La Plata, Ed. SUR, 1995. t. 2-3. MUGNAI, R.; NESSIMIAN, J.L.; BAPTISTA, D.F. Manual de identificao de macroinvertebrados aquticos do Estado do Rio de Janeiro.Rio de Janeiro: Technical Books Ed., 176p. 2009. PENNAK, R.W. Fresh-water invertebrates of the United States: Protozoa to Mollusca. 3rd ed. New York, John Wiley & Sons, Inc. 628p. 1989. PEREZ, G.R. Gua para el studio de los macroinvertebrados acuticos del Departamento de Antiquia. Bogot: Presencia, 1988. 217p. Fondo Fen Colombia. Col. Cincias. Universidad de Anlioquia. THORP, J.H.; COVICH, A.P. (Ed.) Ecology and classification of North American freshwater invertebrates. San Diego, Academic Press, Inc. 911p. 1991. BRYOZOA DU BOIS-REYMOND-MARCUS, Eveline; MARCUS, Ernest. Bryozoa. In: SCHADEN, R. (Org.). Manual de identificao de invertebrados lmnicos do Brasil. Braslia, DF: CNPq, 1984. p. 26. MOLLUSCA BURCH, J.B. Freshwater snails (Mollusca: Gastropoda) of North America. Cincinnati, USEPA, EPA-600/3-82-026. 301p. 2-1982. Disponvel em: <http://nepis.epa.gov/Exe/ZyNET.exe/10004R98.txt?ZyActionD=ZyDocume nt&Client=EPA&Index=1981%20Thru%201985&Docs=&Query=&Time=&EndT ime=&SearchMethod=1&TocRestrict=n&Toc=&TocEntry=&QField=pubnumbe r%5E%22600382026%22&QFieldYear=&QFieldMonth=&QFieldDay=&UseQFie ld=pubnumber&IntQFieldOp=1&ExtQFieldOp=1&XmlQuery=&File=D%3A%5 CZYFILES%5CINDEX%20DATA%5C81THRU85%5CTXT%5C00000000%5C100 04R98.txt&User=ANONYMOUS&Password=anonymous&SortMethod=h%7C77

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

&MaximumDocuments=10&FuzzyDegree=0&ImageQuality=r75g8/r75g8/x15 0y150g16/i425&Display=p%7Cf&DefSeekPage=x&SearchBack=ZyActionL&Ba ck=ZyActionS&BackDesc=Results%20page&MaximumPages=1&ZyEntry=1>. Acesso em: out. 2012. HEARD, W.H. Identification manual of the freshwater clams of Florida. Tallahassee, Florida Department of Environmental Protection. 87p. 1979. Disponvel em: <http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/clams.pdf>. Acesso em: out. 2012. MANSUR, M.C.D.; SCHULZ, C.; GARCES, L.M.M.P. Moluscos bivalves de gua doce: identificao dos gneros do sul e leste do Brasil. Acta Biologica Leopoldensia, v.9, n.2, p. 181-202, 1987. MANSUR, M.C.D.; PEREIRA, D. Bivalves lmnicos da bacia do rio dos Sinos, Rio Grande do Sul, Brasil (Bivalvia, Unionoida, Veberoida e Mytiloida). Rev. Bras. Zool., v. 23, n. 4, p. 1123-1147. 2006. MARTINS, C.M. Chave para identificao de moluscos dulccolas. So Paulo, 2003. So Paulo: CETESB, 14p. + Figs. (apostila de curso interno) PIMPO, D.M.; MANSUR, M.C.D. Chave pictrica para identificao dos bivalves do baixo Rio Aripuan, Amazonas, Brasil (Sphaeriidae, Hyriidae e Mycetopodidae). So Paulo, Biota Neotropica, vol.9, n. 3, 2009. Disponvel em: < http://www.biotaneotropica.org.br/v9n3/pt/fullpaper?bn00609032009+pt>. Acesso em: out. 2012. SIMONE, L.R.L. Land and freshwater mollusks of Brazil. So Paulo, EGBFAPESP. 390p. 2006. THOMPSON, F.G. An identification manual for the freshwater snails of Florida. Disponvel em: <http://www. Flmnh.ufl.edu/malacology/flsnail/snail1.htm>. Acesso em: out. 2012. OLIGOCHAETA BRINKHURST, R.O.; MARCHESE, M.R. Guia para la identificacion de oligoquetos acuaticos continentales de sud y centroamerica. 2a ed. Santo Tom, Coleccin CLIMAX no 6. 207p. 1992. MILLIGAN, M.R. Identification manual for the aquatic Oligochaeta of Florida. Vol. I. Freshwater oligochaetes. Tallahassee, Department of Environmental Protection.187p. 1997. Diponvel em: <http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/oligofw.pdf>. Acesso em: out. 2012.
78

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

PINDER, A.M.; BRINKHURST, R.O. A preliminary guide to the identification of the microdrile Oligochaeta of Australian inland waters. Albury, Cooperative Research Centre for Freshwater Ecology, 137. 1994. Diponvel em: <http://www.mdfrc.org.au/bugguide/resources/1-1994-Pinder-BrinkhurstGuide_to_Oligochaeta.pdf>. Acesso em: out. 2012. RIGHI, G. Oligochaeta. In: SCHADEN, R. (Org.) Manual de identificao de invertebrados lmnicos do Brasil. Braslia, CNPq/Coordenao editorial, 48p. 1984. HIRUDINEA CHRISTOFFERSEN, M.L. A catalogue of Helobdella (Annelida, Clitellata, Hirudnea, Glossiphoniidae), with a summary of leech diversity, from South America. Neotropical Biology and Conservation, 4(2): 89-98, 2009. Disponvel em: <http://www.unisinos.br/publicacoes_cientificas/images/stories/pdfs_neotr opical/v4n2/christoffersen.pdf>. Acesso em: out. 2012. CHRISTOFFERSEN, M.L. Clitellate evolution and leech diversity: Glossiphoniidae excl. Helobdella (Annelida: Hirudinea: Rhynchobdellida) from South America. Gaia Scientia, Joo Pessoa, PB, v. 1, n. 2, p. 131-140, 2007. Disponvel em: http://periodicos.ufpb.br/ojs2/index.php/gaia/article/view/2269/1995>. Acesso em: out. 2012. ARTHROPODA FERNNDEZ, H.R.; DOMNGUEZ, E. (Eds) Gua para la determination de los artrpodos bentnicos sudamericanos. Tucumn, EUdeT. 282p. 2001. CRUSTACEA BARROS, M.P.; BRUSTULIN, J.; CORTE, R.B.D. Heterias (Fritzianira) exul (Muller, 1892) (Janiridae, Isopoda, Crustacea), novo registro para as guas continentais do Rio Grande do Sul, Brasil. Porto Alegre: Biocincias (revista eletrnica), v. 15, n. 2, p. 269-270, 2007. Disponvel em: http://revistaseletronicas.pucrs.br/fabio/ojs/index.php/fabio/article/viewFil e/161/3006>. Acesso em: out. 2012. BRASIL-LIMA, I.M. & BARROS, C.M.L., 1998. Malacostraca - Peracarida. Freshwater Isopoda. Flabellifera and Asellota. In: YOUNG, P.S. (ed.). Catalogue of Crustacea of Brazil. Rio de Janeiro: Museu Nacional. p. 645-651. (Srie Livros n. 6).

79

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

MELO, G.A.S. (Ed.) Manual de identificao dos Crustacea Decapoda de gua doce do Brasil. So Paulo. Ed. Loyola/Centro Univ. So Camilo/Museu de Zoologia-USP. 430p. 2003. INSECTA BORROR, D.J.; DELONG, D.M. Estudo dos insetos. So Paulo, Ed. Edgard Blcher Ltda. 653p. 1969. COSTA, C.; IDE, S.; SIMONKA, C.E. (Eds) Insetos imaturos metamorfose e identificao. Ribeiro Preto, Ed. Holos, 249p. 2006. FROEHLICH, C.G. (org.). 2007. Guia on-line: Identificao de larvas de Insetos Aquticos do Estado de So Paulo. [So Paulo: s.n.], 2007. Disponvel em: <http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/botoes.htm>. Acesso em: out. 2012. MERRITT, R.W.; CUMMINS, K.W.; BERG, M.B. (Eds) An introduction to the aquatic insects of North America. 4th ed. Dubuque, Kendall/Hunt Publ. Co. 1158p. 2008. COLEOPTERA BENETTI, C.J.; CUETO, J.A.R.; FIORENTIN, G.L. Gneros de Hydradephaga (Coleptera: Dytiscidae, Gyrinidae, Haliplidae, Noteridae) citados para o Brasil, com chaves para identificao. So Paulo, Biota Neotropica, v. 3, n. 1, 2003. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v3n1/pt/fullpaper?bn00803012003_1+pt >; <http://www.biotaneotropica.org.br/v3n1/pt/fullpaper?bn00803012003_2+pt >; <http://www.biotaneotropica.org.br/v3n1/pt/fullpaper?bn00803012003_3+pt >. Acesso em: out. 2012. BENETTI, C.J. et al. Chaves de identificao para famlias de colepteros aquticos ocorrentes no Rio Grande do Sul, Brasil. Neotropical Biology and Conservation, v. 1, n. 1, p. 24-28, 2006. Disponvel em: <http://www.unisinos.br/publicacoes_cientificas/images/stories/Publicacoes /neotropicalv1n1/art04_neiss_neotropical.pdf>. Acesso em: out. 2012. BOUCHARD, R.W., Jr. Coleoptera (aquatic Beetles). In: BOUCHARD, R.W., Jr. Guide to aquatic invertebrates of the Upper Midwest. Water Resources Center, University of Minnesota, St Paul, MN., Chapter 12, p. 141-158, 2004. Disponvel em: <http://www.dep.wv.gov/wwe/getinvolved/sos/documents/benthic/umw /coleoptera.pdf>. Acesso em: out. 2012.

80

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

EPLER, J.H. Identification manual for the water beetle of Florida. Tallahassee, Florida Dept. Environ. Protection. 1996. Disponvel em: <http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/beetles96.pdf>. Acesso em: out. 2012. EPLER, J.H. The water beetles of Florida - an identification manual for the families Chrysomelidae, Curculionidae, Dryopidae, Dytiscidae, Elmidae, Gyrinidae, Haliplidae, Helophoridae, Hydraenidae, Hydrochidae, Hydrophilidae, Noteridae, Psephenidae, Ptilodactylidae and Scirtidae. Tallahassee, Florida Dept. Environ. Protection. 2010. Disponvel em: <http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/beetles10.pdf>. Acesso em: out. 2012. FERREIRA, Jr, N.; NICOLINI, L.B.; NESSIMIAN, J.L. Description of the third instar larva of Megadytes latus (Fabricius) (Coleoptera, Dytiscidae), with an identification key for described larvae of the genus. Rev. Bras. Zool., v. 23, n.3, p. 792-795, 2006. Disponvel em: <http://www.scielo.br/pdf/rbzool/v23n3/a25v23n3.pdf>. Acesso em: out. 2012. PASSOS, M.I.S.; NESSIMIAN, J.L.; FERREIRA, Jr, N. Chaves para identificao dos gneros de Elmidae (Coleoptera) ocorrentes no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Rev. Bras. Entomol., v. 51, n. 1, p. 42-53, 2007. Disponvel em: <http://www.scielo.br/pdf/rbent/v51n1/08.pdf>. Acesso em: out. 2012. SEGURA, M.O.; VALENTE-NETO, F.; FONSECA-GESSNER, A.A. Chave de famlias de Coleoptera aquticos (Insecta) do Estado de So Paulo, Brasil. Biota Neotropica, v. 11, n. 1, p. 393-412, 2011. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v11n1/pt/fullpaper?bn02711012011+pt> . Acesso em: out. 2012. SEGURA, M.O.; VALENTE-NETO, F.; FONSECA-GESSNER, A.A. Elmidae (Coleoptera, Byrrhoidea) larvae in the state of So Paulo, Brazil: Identificatio key, new records and distribution. ZooKeys, v. 151, p. 53-74, 2011. Disponvel em: <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3286224/pdf/ZooKeys151-053.pdf>. Acesso em: out. 2012. SEGURA, M.O.; VALENTE-NETO, F.; FONSECA-GESSNER, A.A. Checklist of the Elmidae (Coleoptera: Byrrhoidea) of Brazil. Zootaxa, v. 3260, p. 1-18, 2012. Disponvel em: <http://www.mapress.com/zootaxa/2012/1/zt03260p018.pdf>. Acesso em: out. 2012.

81

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

DIPTERA EPLER, J.H. Identification manual for the larval Chironomidae (Diptera) of Florida. Tallahassee, Florida Dept. Environ. Protection. 1995. Disponvel em: <http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/midges.pdf>. Acesso em: out. 2012. EPLER, J.H. Identification manual for the larval Chironomidae (Diptera) of North and South Carolina. EPA Region 4. 2001. Disponvel em: <http://www.sjrwmd.com/technicalreports/pdfs/SP/SJ2001-SP13.pdf>. Acesso em: out. 2012. MENDES, H.F.; PINHO, L.C. Chironomidae: situao taxonmica atual. In: FROEHLICH, C. G. (Coord.). Levantamento e biologia de Insecta e Oligochaeta aquticos de sistemas lticos do Estado de So Paulo. So Paulo, 2006. Disponvel em: <http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/chironomidae/chiroindex.htm>. Acesso em: out. 2012. PEPINELLI, M. Checklist de Simuliidae (Insecta, Diptera) do Estado de So Paulo, Brasil. Biota Neotrop., v. 11, n. 1a, 2011. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v11n1a/pt/fullpaper?bn0341101a2011+p t>. Acesso em: out. 2012. PFEIFFER, J. et al. Taxonomic Aids for Mid-Atlantic Benthic Macroinvertebrates. Ephemeroptera: Baetidae; Plecoptera: Capniidae/Leuctridae; Diptera: Simuliidae. Washington: USEPA, 2008. EPA260-R-08-014. Disponvel em: <http://www.epa.gov/bioiweb1/pdf/EPA-260R-08-014TaxonomicAidsforMid-AtlanticBenthicMacroinvertebrates.pdf>. Acesso em: out. 2012. PINHO,L.C. Diptera. In: FROEHLICH, C.G. (Org.) Guia on-line de identificao de larvas de insetos aquticos do Estado de So Paulo. [So Paulo: s.n.], 2008. Diponvel em: <http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/Guia_online/Guia_Diptera.pdf>. Acesso em: out. 2012. SHELLEY, A.J. et al. (Ed.) The blackflies of Brazil (Diptera, Simuliidae). Sofia, Bulgaria: Pensoft, 2010. 821 p. (Aquatic Biodiversity in Latin America Series, v. 6). TRIVINHO-STRIXINO, S. Larvas de Chironomidae. Guia de identificao. So Carlos, Departamento de Hidrobiologia/Laboratrio de Entomologia Aqutica/UFSCar. 371p. 2011.

82

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

TRIVINHO-STRIXINO, S. Chironomidae (Insecta, Dptera, Nematocera) do Estado de So Paulo, Sudeste do Brasil. Biota Neotrop., v. 11, n. 1a, 2011. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v11n1a/pt/fullpaper?bn0351101a2011+p t>. Acesso em: out. 2012. TRIVINHO-STRIXINO, S.; STRIXINO, G. Larvas de Chironomidae do Estado de So Paulo: Guia de identificao e diagnose dos gneros. So Carlos, UFSCar/PPG - Ecologia e Recursos Naturais. 229p. 1995. TRIVINHO-STRIXINO, S.; STRIXINO, G. A new neotropical species of Tanytarsus van der Wulp, 1874 (Diptera: Chironomidae), with an unusual anal process. Zootaxa, n. 1654, p. 61-67, 2007. Disponvel em: <http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download?doi=10.1.1.193.990&rep=rep 1&type=pdf>. Acesso em: out. 2012. EPHEMEROPTERA CHACN, M.M.; SEGNINI, S. Reconocimiento taxonomico de las nayades del orden Ephemeroptera en la deriva de dos rios de alta montana en el Estado Merida, Venezuela. Bol. Entomol. Venez. N.S., v. 11, n. 2, p. 103-122, 1996. DA-SILVA, E.R. Variaes interespecficas da ninfa de Askola froehlichi Peters, 1969 (Insecta, Ephemeroptera, Leptophlebiidae), com notas biolgicas. Rio de Janeiro, Boletim do Museu Nacional, Zoologia, no. 492, p. 1-5, 2002a. Disponvel em: <http://www.insecta.ufv.br/Entomologia/cien/sistematica/ephemeroptera/e phembrasil/pdfs/DaSilva2002a.pdf>. Acesso em: out. 2012. DA-SILVA, E.R. Descrio da ninfa de Farrodes carioca Dominguez, Molinari & Peters, 1996 (Insecta, Ephemeroptera, Leptophlebiidae). Rio de Janeiro, Boletim do Museu Nacional, Zoologia, no. 495, p. 1-5, 2002b. Disponvel em: <http://www.insecta.ufv.br/Entomologia/cien/sistematica/ephemeroptera/e phembrasil/pdfs/DaSilva2002b.pdf>. Acesso em: out. 2012. DA-SILVA, E.R.; PEREIRA, S.M. Description of the nimph of Ulmeritus (U.) saopaulensis (Traver, 1946) from southeastern Brazil (Ephemeroptera, Leptophlebiidae, Atalophlebiinae). Revta bras. Entomol., v. 36, n. 4, p. 855-858, 1992. Disponvel em: <http://www.insecta.ufv.br/Entomologia/cien/sistematica/ephemeroptera/e phembrasil/pdfs/DaSilvaPereira1992.pdf>. Acesso em: out. 2012. DA-SILVA, E.R. et al. A identificao das famlias de Ephemeroptera (Insecta) ocorrentes no Estado do Rio de Janeiro: Chave pictrica para as ninfas. Rio de Janeiro, Boletim do Museu Nacional, Zoologia, no. 508, p. 1-6, 2003. Disponvel em:
83

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

<http://www.publicacao.museunacional.ufrj.br/Boletim/Zoologia/Zool2003/ Zool508.pdf>. Acesso em: out. 2012. DA-SILVA, E.R.; SALLES, F.F.; BAPTISTA, M.S. As brnquias dos gneros de Leptophlebiidae (Insecta: Ephemeroptera) ocorrentes no Estado do Rio de Janeiro. So Paulo, Biota Neotropica, v. 2, n. 2, 2002. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v2n2/pt/fullpaper?bn00902022002+pt>. Acesso em: out. 2012. DIAS, L.G. et al. Key to the genera of Ephemerelloidea (Insecta: Ephemeroptera) from Brazil. So Paulo, Biota Neotropica, v. 6, n. 1, 2006. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v6n1/pt/fullpaper?bn00806012006+en>. Acesso em: out. 2012. DIAS, L.G.; MOLINERI, C.; FERREIRA, P.S.F. Ephemerelloidea (Insecta: Ephemeroptera) do Brasil. Papis Avulsos de Zoologia, v. 47, n. 19, p. 213-244, 2007. Disponvel em: <http://www.scielo.br/pdf/paz/v47n19/01.pdf>. Acesso em: out. 2012. DOMNGUEZ, E. et al. Ephemeroptera of South Amrica. Sofia, Bulgaria: Pensoft, 2006. 646 p. (Aquatic Biodiversity in Latin America Series, v. 2). GONZLES-LAZO, D.D.; NARANJO L, C. Clave de identification para larvas del orden Ephemeroptera presentes en Cuba. Rev. Soc. Entomol. Argent., v. 66, n. 1-2, p. 137-145, 2007. Disponvel em: <http://www.scielo.org.ar/pdf/rsea/v66n1-2/v66n1-2a07.pdf>. Acesso em: out. 2012. LOPES, M.J.N.; FROEHLICH, C.G.; DOMINGUEZ, E. Description of the larvae of Thraulodes Schlingeri (Ephemeroptera: Leptophlebiidae). Ilheringia, Sr. Zool., v. 93, n. 2, p. 197-200, 2003. Disponvel em: <http://www.scielo.br/pdf/isz/v93n2/a11v93n2.pdf>. Acesso em: out. 2012. MARIANO, R.; POLEGATTO, C. Checklist de Ephemeroptera do Estado de So Paulo, Brasil. Biota Neotrop., v. 11, n. 1a, 2011. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v11n1a/pt/fullpaper?bn0281101a2011+p t>. Acesso em: out. 2012. MOLINERI, C. Cladistic analysis of the South American species of Tricorythodes (Ephemeroptera: Leptohyphidae) with the description of new species and stages. Aquatic insects, v. 24, n. 4, p. 273-308, 2002. Disponvel em: <http://www.famu.org/mayfly/pubs/pub_m/pubmolineric2002p273.pdf>. Acesso em: out. 2012. MOLINERI, C.; MALZACHER, P. South American Caenis Stephens (Ephemeroptera, Caenidae), new species and stage descriptions. Zootaxa, 1660,
84

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

p. 1-31, 2007. Disponvel em: <http://www.mapress.com/zootaxa/2007/zt01660p031.pdf>. Acesso em: out. 2012. PEREIRA, S.M.; da SILVA, E. R. Nova espcie de Campylocia Needham & Murphy, 1924 com notas biolgicas (Ephemeroptera, Euthyplocidae). Bol. Museu Nacional RJ, n. 336, 1990. Disponvel em: <http://www.famu.org/mayfly/pubs/pub_p/pubpereiras1990p1.pdf>. Acesso em: out. 2012. PESCADOR, M.L.; RICHARD, B.A. Guide to the mayfly (Ephemeroptera) nymphs of Florida. Tallahassee, Florida Department of Environmental Protection. 173p. 2004. Disponvel em: <http://www.famu.org/mayfly/pubs/pub_p/pubpescadorm2004p1.pdf>. Acesso em: out. 2012. PFEIFFER, J. et al. Taxonomic Aids for Mid-Atlantic Benthic Macroinvertebrates. Ephemeroptera: Baetidae; Plecoptera: Capniidae/Leuctridae; Diptera: Simuliidae. Washington: USEPA, 2008. EPA260-R-08-014. Disponvel em: <http://www.epa.gov/bioiweb1/pdf/EPA-260R-08-014TaxonomicAidsforMid-AtlanticBenthicMacroinvertebrates.pdf>. Acesso em: out. 2012. RODRGUEZ, E.; HUBBARD, M.D.; PETERS, W.L. Clave para ninfas y adultos de las familias y gneros de Ephemeroptera (Insecta) sudamericanos. La Plata, UNLP/CONICET, Biologa Acuatica no. 16, 1992. SALLES, F.F. et al. As espcies de Ephemeroptera (Insecta) registradas para o Brasil. So Paulo, Biota Neotropica, v. 4, n. 2, 2004. Disponvel em: < http://www.biotaneotropica.org.br/v4n2/pt/fullpaper?bn04004022004+pt >Acesso em: out/2012. SALLES, F.F. et al. Baetidae (Ephemeroptera) na regio sudeste do Brasil: novos registros e chave para gneros no estgio ninfal. Neotropical Entomology, v. 33, n. 5, p. 725-735, 2004. Disponvel em: < http://www.scielo.br/pdf/ne/v33n6/23344.pdf >. Acesso em: out/2012. SALLES, F.F.; LUGO-ORTIZ, C.R. Nova espcie de Cloeodes Traver (Ephemeroptera: Baetidae) do Estado do Rio de Janeiro. Neotrop. Entomol., v. 32, n. 3, p. 449-452, 2003. Disponvel em: < http://www.scielo.br/pdf/ne/v32n3/18759.pdf >. Acesso em: out/2012. SALLES, F.F.; LUGO-ORTIZ, C.R. Um novo gnero e espcie de Baetidae (Ephemeroptera) do Estado de Minas Gerais, sudeste do Brasil. Ilheringia, Sr. Zool., v. 93, n. 2, p. 201-206, 2003. Disponvel em: < http://www.scielo.br/pdf/isz/v93n2/a12v93n2.pdf > Acesso em: out/2012.
85

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

SILVA, R.M.L. Ephemeroptera: ordem Ephemeroptera (Arthropoda: Insecta). In: FROEHLICH, C.G. (Org.). Guia on-line: identificao de larvas de insetos aquticos do Estado de So Paulo. [So Paulo: s.n.], 2007. Disponvel em: <http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/Guia_online/guia_Ephemeroptera.pdf>. Acesso em: out. 2012. HEMIPTERA EPLER, J.H. Identification manual of the aquatic and semi-aquatic Heteroptera of Florida. Tallahassee, Florida Department of Environmental Protection, 195p. 2006. Disponvel em: < http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/heteroptera.pdf > Acesso em: out/2012. NIESER, N.; MELO, A.L. Os heterpteros aquticos de Minas Gerais. Guia Introdutrio com chave de Identificao para as espcies de Nepomorpha e Gerromorpha. Belo Horizonte, Ed. UFMG. 177p. 1997. MEGALOPTERA AZEVEDO, C.A.S.; HAMADA, Megaloptera: ordem Megaloptera Latreille, 1802 (Arthropoda: Insecta). In: FROEHLICH, C.G. (Org.). Guia on-line: identificao de larvas de insetos aquticos do Estado de So Paulo. [So Paulo: s.n.], 2008. Disponvel em: < http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/Guia_online/Capitulo_6_Megaloptera.pdf > Acesso em: out. 2012. CONTRERAS-RAMOS, A. Recent account on the systematics and biogeography of Neotropical Megaloptera (Corydalidae, Sialidae). Ann. Mus. Civ. St. Nat. Ferrara, n. 8, p. 67-72, 2007. ODONATA CARVALHO, A.L.; CALIL, E.R. Chave de identificao para as famlias de Odonata (Insecta) ocorrentes no Brasil, adultos e larvas. So Paulo, Papis Avulsos de Zool., 41(15): 223-241. 2000. COSTA, J.M.; MACHADO, A.B.M.; LENCIONI, F.A.A.; SANTOS, T.C. Diversidade e distribuio dos Odonata (Insecta) no Estado de So Paulo, Brasil: Parte I Lista de espcies e registros bibliogrficos. Rio de Janeiro, Publ. Avul. Mus. Nac., n. 80, p. 1-27, 2000. Disponvel em: < http://www.angelfire.com/mn/janira/trabalhos/pa80.pdf> Acesso em: out/2012.

86

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

RICHARDSON, J.S. Identification manual for the damselfly nymphs (Zygoptera) of Florida. Tallahassee, Florida Department of Environmental Protection. 62p. 2010. Disponvel em: < http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/zygoptera.pdf>. Acesso em: out/2012. RICHARDSON, J.S. Identification manual for the dragonfly larvae (Anisoptera) of Florida. Tallahassee, Florida Department of Environmental Protection. 122p. 2003. Disponvel em: <http://publicfiles.dep.state.fl.us/dear/labs/biology/biokeys/dragonflykey.p df>. Acesso em: out/2012. SOUZA, L.O.I.; COSTA, J.M.; OLDRINI, B.B. Odonata: ordem Odonata Fabricius, 1793 (Arthropoda:Insecta). In: FROEHLICH, C.G. (Org.). Guia online: identificao de larvas de insetos aquticos do Estado de So Paulo. [So Paulo: s.n.], 2008. Disponvel em: <http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/Guia_online/Guia_online_Odonata_Vers%C3%A3o_1%C3%9F2.0.pdf>. Acesso em: out. 2012. PLECOPTERA FROEHLICH, C.G. Brazilian Plecoptera 4. Nymphs of perlid genera from southeastern Brazil. Annls Limnol., v. 20, n. 1-2, p. 43-48, 1984. FROEHLICH, C.G. Cheklist dos Plecoptera (Insecta) do Estado de So Paulo, Brasil. Biota Neotrop., v. 11, n. 1a, 2011. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v11n1a/pt/fullpaper?bn0291101a2011+p t>. Acesso em: out/2012. HAMADA, N.; COUCEIRO, S.R.M. An illustrated key to nymphs of Perlidae (Insecta, Plecoptera) genera in Central Amazonia, Brazil. Rev. Bras. Entomol., v. 47, n. 3, p. 477-480, 2003. Disponvel em: <http://www.scielo.br/pdf/rbent/v47n3/18916.pdf>. Acesso em: out. 2012. LECCI, L.S.; FROEHLICH, C.G. Plecoptera. In: FROEHLICH, C.G. (Org.) Guia on-line de identificao de larvas de insetos aquticos do Estado de So Paulo. . [So Paulo: s.n.], 2007. Disponvel em: < http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/Guia_online/Guia_identifica%C3%A7%C 3%A3o_larvas_Plecoptera.pdf >. Acesso em: out/2012. OLIFIERS, M.H. et al. A key to brazilian genera of Plecoptera (Insecta) based on nymphs. Zootaxa, 651, p. 1-15, 2004. Disponvel em: <http://www.mapress.com/zootaxa/2004/zt00651.pdf>. Acesso em: out/2012.

87

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

STARK, B.P.; FROEHLICH, C.G.; ZIGA, M.C. South American Stoneflies (Plecoptera). Sofia, Bulgaria: Pensoft, 2009. 154 p. (Aquatic Biodiversity in Latin America Series, v. 5). TRICHOPTERA BLAHNIK, R.J.; PAPROCKI, H.; HOLZENTHAL, R.W. New distribution and species records of Trichoptera from southern and southeastern Brazil. So Paulo, Biota Neotropica, v. 4, n. 1, 2004. Disponvel em: < http://www.biotaneotropica.org.br/v4n1/en/fullpaper?bn01304012004+en >. Acesso em: out/2012. CALOR, A.R. Trichoptera. In: FROEHLICH, C.G. (Org.) Guia on-line de identificao de larvas de insetos aquticos do Estado de So Paulo. [So Paulo: s.n.], 2007. Disponvel em: <http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/Guia_online/Guia_Trichoptera_b.pdf>. Acesso em: out/2012. CALOR, A.R. Cheklist dos Trichoptera (Insecta) do Estado de So Paulo, Brasil. Biota Neotrop., v. 11, n. 1a, 2011. Disponvel em: <http://www.biotaneotropica.org.br/v11n1a/pt/fullpaper?bn0311101a2011+p t>. Acesso em: out/2012. CALOR, A.R.; FROEHLICH, C.G. Description of the immature stages of Notalina morsei Holzenthal, 1986 (Trichoptera: Leptoceridae) and an updated key to larvae of neotropical Leptocerida genera. Zootaxa, 1779, p. 45-54, 2008. Disponvel em: <http://www.mapress.com/zootaxa/2008/f/z01779p054f.pdf>. Acesso em: out/2012. DUMAS, L.L.; NESSIMIAN, J.L. Description of the immature stages of Anastomoneura guahybae Humantico & Nessimian, 2004 (Trichoptera: Odontoceridae), with a new record for the genus and keys to larvae and pupae of Neotropical genera. Zootaxa, 1362, p. 43-53, 2006. Disponvel em: <http://www.mapress.com/zootaxa/2006f/z01362p053f.pdf>. Acesso em: out/2012. HOLZENTHAL, R.W. et al. Order Trichoptera Kirby, 1813 (Insecta), Caddisflies. Zootaxa, v.1668, p. 639-698. 2007. Disponvel em: <http://bioguid.info/files/1175-5326/pdf/zt01668p698.pdf>. Acesso em: out/2012. MORSE, J.C. Trichoptera (Caddisflies). In: RESH, V.H.; CARD, R.T. (eds) Encyclopedia of Insects. P. 1145-1151, 2003.

88

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

PAPROCKI, H.; HOLZENTHAL, R.W.; BLAHNIK, R.J. Checklist of the Trichoptera (Insecta) of Brazil I. So Paulo, Biota Neotropica, v. 4, n. 1, 2004. Disponvel em: < <http://www.biotaneotropica.org.br/v4n1/es/fullpaper?bn01204012004+en>. Acesso em: out/2012. PES, A.M.O.; HAMADA, N.; NESSIMIAN, J.L. Chaves de identificao de larvas para famlias e gneros de Trichoptera (Insecta) da Amaznia Central, Brasil. Rev. Bras. Entomol., v. 49, n. 2, p. 181-204, 2005. Disponvel em: < http://www.scielo.br/pdf/rbent/v49n2/a02v49n2.pdf>. Acesso em: out/2012. PESCADOR, M.L.; RASMUSSEN, A.K.; HARRIS, S.C. Identification manual for the caddisfly (Trichoptera) larvae of Florida. Tallahassee, Department of Environmental Protection. 132p. 1995. Disponvel em: <http://famu.org/trichoptera/pubs/manual.pdf>. Acesso em: out/2012. POSADA-GARCA, J.A.; ROLDN-PREZ, G. Clave ilustrada y diversidad de ls larvas de Trichoptera em el nor-occidente de Colmbia. Caldasia, v. 25, n. 1, p. 169-192, 2003. WIGGINS, G.B. Larvae of the North American caddisfly genera (Trichoptera). 2nd ed. Toronto, Univ. Toronto Press Incorp. 457p. 1996.

89

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

90

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

APNDICE B Lista de sites com informaes teis sobre macroinvertebrados aquticos. Bureau of Laboratories List of Keys and Guides Florida Department of Environmental bin/sbio/keys.asp Protection: (chaves de http://www.dep.state.fl.us/labs/cgiidentificao para vrios grupos,

desenvolvidas para o Estado da Flrida) California Digital Reference Collection Department of Fish and Game: http://www.dfg.ca.gov/ABL/Lab/CA_digital_ref_Psephenidae.asp (guia ilustrado de identificao de grupos bentnicos) Chaves Taxonmicas Biota/FAPESP:

http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/botoes.htm (chaves de identificao de algumas ordens bentnicas desenvolvidas no projeto Biota-Fapesp para o Estado de So Paulo) Chironomid Research Group University of Minessota:

http://www.entomology.umn.edu/midge/ (biologia de Chironomidae e guia ilustrado para organismos bentnicos) Chironomidae and Water Beetles of Florida web site:

http://home.comcast.net/~johnepler3/index.html download de chaves de identificao) Digital Key for Aquatic Insects of

(informaes,

North

Dakota:

http://www.waterbugkey.vcsu.edu/ (chave ilustrada para identificao de grupos bentnicos) Diptera: Chironomidae.

http://sites.ffclrp.usp.br/aguadoce/chironomidae/chiroindex.htm (listagem de ocorrncia das espcies brasileiras de Chironomidae) Discover Life Plecoptera: (informaes,

http://www.discoverlife.org/20/q?search=Plecoptera links, imagens)

91

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Discover

Life

Trichoptera: (informaes,

http://www.discoverlife.org/20/q?search=Trichoptera links, imagens) Dr Bill Starks Page:

http://www.mc.edu/campus/users/stark/

(atualizaes e links para Plecoptera) Entomologistas do Brasil: http://www.ebras.bio.br/dives/index.asp (informaes, download gratuito de artigos) Ephemeroptera do (lista das Brasil: espcies

http://sites.google.com/site/ephemeropterabr/ brasileiras, download gratuito de artigos, imagens)

Ephemeroptera Galactica: http://www.famu.org/mayfly/ (informaes, catlogos, download gratuito de artigos) Freshwater Benthic Ecology and Aquatic Entomology Homepage: http://www.chebucto.ns.ca/ccn/info/Science/SWCS/ZOOBENTH/BE NTHOS/benthos.html (informaes, valores de tolerncia, download) Gordons Trichoptera Page:

http://www.earthlife.net/insects/trichopt.html (informaes, lista e sites) Identification and Ecology of Australian Freshwater Invertebrates: http://www.mdfrc.org.au/BugGuide/ (material para identificao de grupos bentnicas por imagens e descries) Illiesia International Journal of Stonefly Research: http://www2.pmslj.si/illiesia/html/2010.html (download gratuito de artigos) Instituto Hrus: http://www.institutohorus.org.br/ (banco de dados e informaes sobre as espcies exticas invasoras do Brasil) Invertebrates as Indicators - United States Environmental Protection Agency: http://www.epa.gov/bioindicators/html/invertebrate.html

(informaes, imagens, sites, relatrios) Key to Aquatic Macroinvertebrates New York State Department of Environmental http://www.dec.ny.gov/animals/35772.html
92

Conservation:

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Nederlandse

zoetwater

bryozon

(mosdieren):

http://www.bryozoans.nl/ (Informaes e timas fotos de briozorios) North American Benthological Society:

http://www.benthos.org/index.aspx (informaes, acesso aos arigos do JNABS s para asociados) Plecoptera: http://www.cals.ncsu.edu/course/ent425/compendium/stonef~1.html (informaes) Tree of Life Web Project - Trichoptera: http://tolweb.org/trichoptera (filogenia da ordem) Tree of Life Web Project Plecoptera:

http://tolweb.org/tree?group=Plecoptera (filogenia da ordem) Trichoptera World Checklist:

http://entweb.clemson.edu/database/trichopt/ Troutnout.com: http://www.troutnut.com/ (fotos de Ephemeroptera, Trichoptera e Plecoptera) Walker, I. R., 2007. The WWW Field Guide to Fossil Midges: http://www.paleolab.ca/wwwguide/ (chave de identificao com imagens fotogrficas de gneros de Chironomidae)

93

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

94

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

ANEXO A Espcies de macroinvertebrados aquticos ameaadas de extino com ocorrncia no estado de So Paulo Porfera - Desmopongiae Famlia Potamolepidae Uruguaya corallioides (EN) Ocorrncia: Bacias dos rios Paran e Tiet. Principais ameaas: Construo de barragens. Mollusca - Bivalvia Famlia Hyriidae Castalia undosa (EN) Ocorrncia: Bacias dos rios Paran, Paranapanema, Grande e Tiet. No Programa Biota-Fapesp foi coletado nos municpios de: Porto Ferreira, Jardinpolis (Rio Pardo), Paulo de Faria, Paranapu, Pirassununga, Araraquara e So Carlos. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Corbicula fluminea).

Fonte: Dr Wagner E. P. Avelar (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

95

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Diplodon caipira (EN) Ocorrncia: Rios Sapuca e Pardo. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Corbicula fluminea e Limnoperna fortunei). Diplodon expansus (VU) Ocorrncia: Baixo rio Tiet. (em UC: Reserva Biolgica da Serra do Mar) Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Melanoides tuberculatus e Corbicula fluminea). Diplodon fontainianus (EN) Ocorrncia: Bacias dos rios Tiet, Paran, Paranapanema e em rios da costa atlntica. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras. Diplodon greeffeanus (EN) Ocorrncia: Afluentes do mdio e alto rio Paran. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Melanoides tuberculatus e Corbicula fluminea). Diplodon martensi (VU) Ocorrncia: em UC: Reserva Biolgica da Serra do Mar. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Limnoperna fortunei e Corbicula fluminea).

96

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Diplodon rotundus (EN) Ocorrncia: Bacias dos rios Sapuca, Pardo e Mogi-gua. No Programa BiotaFapesp foi coletado nos municpios de: Sta Rosa do Viterbo, Ourinhos (Rio Fartura), Teodoro Sampaio, Porto Ferreira, So Joaquim da Barra, Ipu, Guair, Ilha Solteira, Pereira Barreto, Buritama (Res. Nova Avanhandava), Tamba, Jardinpoilis, Pirassununga, Itapira, Bragana Paulista (Rio Atibaia), Morungaba (Rio Jaguari), Valinhos (Rio Jaguari Usina Esther), Cosmpolis (rio Piracicaba), Piracicaba, Laranjal Paulista (Rio Lara), Piraju (Rio Paranapanema) e Taquarituba (Rep. Guaranapanema). Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras.

Fonte: Dr Wagner E. P. Avelar (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

97

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Famlia Mycetopodidae Anodontites soleniformes (VU) Ocorrncia: Bacias dos rios Paran, Paranapanema, Grande e Tiet. No Programa Biota-Fapesp foi coletado nos municpios de: Jardinpolis (Rio Pardo) e So Jos da Bela Vista. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras.

Fonte: Dr Wagner E. P. Avelar (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

98

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Anodontites tenebricosus (VU) Ocorrncia: No Programa Biota-Fapesp foi coletado no municpio de: Caconde (Rio Pardo). Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Limnoperna fortunei e Corbicula fluminea).

Fonte: Dr Wagner E. P. Avelar (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

99

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Anodontites trapesialis (VU) Ocorrncia: Bacias dos rios Paran, Paranapanema, Grande e Tiet. No Programa Biota-Fapesp foi coletado nos municpios de: Porto Ferreira, Ourinhos (Rio Fartura), Jardinpolis (Rio Pardo), Paranapu, Barra Bonita, Pereira Barreto (Res. Trs Irmos), Buritama (Res. Nova Avanhandava), So Joaquim da Barra, Tamba, Barrinha, Pirassununga, Itapira (Rio Manso e Rio do Peixe), Bragana Paulista (Rio Atibaia), Morungaba (Rio Jaguari), Anhembi (Rio do Peixe) e Taquarituba (Represa do Guaranapanema). Em 2003, uma populao desta espcie foi observada no Res. do Rio Grande, no complexo Billings, junto desembocadura do Ribeiro Pires, em frente ao Parque Municipal Milton Marinho de Moraes (Portal Perfuradores.com, 2003). Em 2010 e 2012 foram capturados exemplares no municpio de Monte Aprazvel (Rio So Jos dos Dourados) na Rede de Monitoramento CETESB (CETESB, 2011a). Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras.

100

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Fonte: Dr Wagner E. P. Avelar (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/) Nota: Portal Perfuradores.com, 2003. Disponvel em: http://www.perfuradores.com.br/index.php?CAT=pocosagua&SPG=noticias&TEMA=Meio% 20Ambiente&NID=0000001192).

Anodontites trapezeus (EN) Ocorrncia: Bacias dos rios Paran, Paranapanema, Grande e Tiet. No Programa Biota-Fapesp foi coletado nos municpios de: Porto Ferreira e Barra Bonita. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras.

101

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Fonte: Dr Wagner E. P. Avelar (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

Fossula fossiculifera (EN) Ocorrncia: Bacias dos rios Paran, Paranapanema e Tiet. No Programa Biota-Fapesp foi coletado nos municpios de: Porto Ferreira, So Joaquim da Barra, Ipu, Jardinpolis (Rio Pardo), Caconde (Rio Pardo), So Jos da Bela Vista, Paranapu, Bragana Paulista (Rio Atibaia) e Morungaba (Rio Jaguari). Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras.

102

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Fonte: Dr Wagner E. P. Avelar (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

Monocondylaea paraguayana (VU) Ocorrncia: atualmente desconhecida no estado de So Paulo. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Limnoperna fortunei e Corbicula fluminea). Mycetopoda siliquosa (VU) Ocorrncia: atualmente desconhecida no estado de So Paulo. Principais ameaas: Destruio de habitats e competio com espcies exticas invasoras (especialmente Limnoperna fortunei e Corbicula fluminea).

103

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Mollusca - Gastropoda Famlia Hydrobiidae Potamolithus troglobius (VU) Ocorrncia: endmica das cavernas Areias I e Areias II (coordenadas aproximadas 2435S; 4842W), localizadas no Parque Estadual Turstico do Alto Ribeira. Principais ameaas: Visitao excessiva das cavernas, alteraes na qualidade do habitat e competio com espcies exticas invasoras, especialmente Melanoides tuberculatus. Malacostraca - Amphipoda Famlia Hyalellidae Hyalella caeca (VU) Ocorrncia: Restrita a Gruta Tobias de Baixo, localizada no municpio do Iporanga (Parque Estadual Turstico do Alto Ribeira). Principais ameaas: Minerao ilegal de calcreo, excesso de visitao das cavernas e degradao do habitat. Malacostraca - Decapoda Famlia Aeglidae Aegla caverncola (VU) Ocorrncia: Espcie endmica das Grutas Areias I e II, no municpio de Iporanga. As grutas esto situadas na Provncia Espeleolgica do Vale do Ribeira, regio do Vale do Betari (Parque Estadual Turstico do Alto Ribeira). Principais ameaas: Excesso de visitao das cavernas e degradao do habitat. Aegla leptochela (VU) Ocorrncia: Espcie endmica da Gruta dos Paivas, no municpio de Iporanga. As grutas esto situadas na Provncia Espeleolgica do Vale do Ribeira, regio do Vale do Betari (Parque Estadual Turstico do Alto Ribeira). Principais ameaas: Excesso de visitao das cavernas e degradao do habitat. Aegla microphtalma (VU) Ocorrncia: Espcie endmica da Caverna SantAnna, no municpio de Iporanga. As grutas esto situadas na Provncia Espeleolgica do Vale do Ribeira, regio da Fazenda Intervales (Parque Estadual Turstico do Alto Ribeira). Principais ameaas: Excesso de visitao das cavernas e degradao do habitat, especialmente contaminao das guas por metais pesados (As, Hg e Cd). Famlia Atyidae
104

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Atya scabra (VU) Ocorrncia: Rios costeiros. Em UC: Estao Ecolgica Juria-Itatins e Parque Estadual da Ilha do Cardoso. No Programa Biota-Fapesp foi coletado nos municpios de: Perube (Poo do Paraso - Ncleo Itingu, Rio Perequ); So Sebastio (Rio Guaec, Rio Toque-toque Pequeno, Rio Bela Vista, Rio Cristina), Ubatuba (Rio da
Fazenda, Rio Picinguaba, Poo do Amor Ncleo Picinguaba, Rio Comprido, Rio do Ouro, Rio Marimbondo, Rio Tunhumbi, Cach. do Engenho), Canania (Cach. Rio Pedro Luiz), Ilhabela (Rio da Cocaia, Rio Castelhanos, Rio Trs Tombos, Rio do Curral).

Principais ameaas: Degradao do habitat, especialmente a construo de barragens.

Fonte: Dr Srgio S. da Rocha, Dr Emerson C. Mossolin, Dr Srgio L.S. Bueno, Dr Fbio Kyiohara e Dra Isabel C. Arantes (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

105

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Famlia Palaemonidae Macrobrachium carcinus (VU) Ocorrncia: Rios costeiros. Em UC: Estao Ecolgica Juria-Itatins. No Programa Biota-Fapesp foi coletado nos municpios de: Caraguatatuba (Rio Claro, Rio Mococa), Perube (Rio Perequ), Ubatuba (Rio da Fazenda, Rio da Canoa, Rio Picinguaba, Poo do Amor - Ncleo Picinguaba, Rio do Ouro, Rio Marimbondo), Canania (Rio Branco), So Sebastio (Rio Toque-toque Pequeno, Rio Bela Vista), Ilhabela (Rio
Cocaia, Rio do Curral).

Principais ameaas: Degradao do habitat, especialmente a construo de barragens.

Fonte: Dr Srgio S. da Rocha, Dr Emerson C. Mossolin, Dr Srgio L.S. Bueno, Dr Fbio Kyiohara, Dra Isabel C. Arantes, Dr Clio Magalhes e Dra Georgina Bond-Buckup (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

106

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Insecta - Ephemeroptera Famlia Leptophlebiidae Perissophlebiodes flinti (EN) Ocorrncia: Riachos rpidos da Mata Atlntica. Em UC: Parque Estadual Intervales. No Programa Biota-Fapesp foi coletado no municpio de: Guapiara. Principais ameaas: Degradao do habitat.

Foto: Ninfa de hbito aqutico. Dr Frederico F. Salles (http://sites.google.com/site/ephemeropterabr/)

Fonte: Dr C.M. Polegatto (http://sinbiota1.biota.org.br/sia/consulta?search) Nota: Mapa construdo pelo Sistema de Informao Ambiental do Biota (SinBiota) do Programa

107

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Biota/FAPESP (http://sinbiota1.biota.org.br/atlasold/)

Insecta - Odonata Famlia Coenagrionidae Minagrion mecistogastrum (VU) Ocorrncia: Ambientes aquticos inseridos no bioma Mata Atlntica, nos municpios de Iporanga, Barueri, Juqui, Jacare e Salespolis. Em UCs: Parque Estadual da Serra do Mar ncleo Caraguatatuba, Parque Estadual de Jacupiranga e Estao ecolgica da Juria-Itatins. Principais ameaas: Degradao do habitat.
Fonte: Brasil (2003, 2004), Machado, Drummond e Paglia (2008) e Programa Biota - FAPESP (http://www.biota.org.br/index). Legenda: EN= em perigo; VU = vulnervel. Nota: segundo Instrues Normativas do Ministrio do Meio Ambiente nos 03/03 e 05/04 (BRASIL, 2003, 2004). Status de acordo com Machado, Drummond e Paglia (2008)

108

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

ANEXO B Espcies exticas invasoras e com potencial de bioinvaso de macroinvertebrados aquticos para o estado de So Paulo. Em 09/11/2011, o Conselho da Secretaria do Meio Ambiente do estado de So Paulo aprovou a Deliberao CONSEMA Normativa -2 (SO PAULO, 2011) que regulamentou a elaborao e atualizao da lista de espcies exticas invasoras para o estado de So Paulo. De imediato, das espcies bentnicas de gua doce, apenas o mexilho dourado (Limnoperna fortunei) foi listado como espcie invasora. As outras espcies abaixo listadas devero passar por anlise de risco de bioinvaso antes de pertencerem lista oficial, mas a literatura (MAGALHES et al., 2005; SIMONE, 2006; GAZOLA-SILVA; MELO; VITULE, 2007; SURIANE; FRANA; ROCHA, 2007; SOUZA; CALAZANS; SILVA, 2009; ROCHA et al., 2011) j as indica como invasoras em So Paulo e/ou em estados vizinhos. O pitu de gua doce, Macrobrachium rosenbergii, embora no oferea risco de bioinvaso quando cultivado no interior do Estado, por necessitar de gua salobra para completar seu ciclo de vida, est listado por ainda apresentar potencial de invaso em cultivos junto regio costeira.

109

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Mollusca - Bivalvia Famlia Corbiculidae Corbicula fluminea

Foto: Carlos Barbosa Pinto

Ocorrncias: Amplamente distribudo nas bacias hidrogrficas do estado de So Paulo. Origem: China. Introduo: Provavelmente pela gua de lastro. Impacto: Desenvolvem populaes densas que deslocam as espcies nativas por competio e causam entupimento de canalizaes urbanas e dos sistemas de resfriamento de hidreltricas. Fonte: Suriane, Frana e Rocha (2007) e CETESB (2003, 2004, 2005, 2006, 2007, 2008, 2009, 2010, 2011, 2012).

110

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Famlia Mytilidae Limnoperna fortunei

Foto: Mnica Luisa Kuhlmann

Ocorrncias: Em todo trecho paulista do rio Paran, no rio Parananapena, pelo menos at o reservatrio Capivara, no rio Grande e na bacia do mdio ao baixo Tiet (do reservatrio de Barra Bonita sua foz), acompanhando as rotas hidrovirias do estado. Origem: China e sudeste da sia. Introduo: Descarga de gua de lastro. Impacto: Desenvolvem populaes densas, fixando-se em todo tipo de substrato, deslocando as espcies nativas por competio ou causando sua morte por asfixia ao desenvolverem-se sobre suas conchas. Tambm tem modificado a dieta alimentar de vrias espcies de peixes. Causam danos econmicos vultuosos ao promoverem o entupimento de canalizaes urbanas e dos sistemas de resfriamento de hidreltricas. Fonte: Souza, Calazans e Silva (2009); CETESB (2007, 2008, 2009 e 2010).

111

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Mollusca - Gastropoda Famlia Thiaridae Melanoides tuberculatus

Foto: Mnica Luisa Kuhlmann

Ocorrncias: Amplamente distribudo nas bacias hidrogrficas do estado de So Paulo. Origem: Norte e norte da frica, sudeste da sia, China e Ilhas do IndoPacfico. Introduo: Aquariofilia. Impacto: Deslocamento de espcies nativas por competio. Fonte: Suriane, Frana e Rocha (2007) e CETESB (2003, 2004, 2005, 2006, 2007, 2008, 2009, 2010, 2012). Crustacea - Decapoda Famlia Cambaridae Procambarus clarkii Ocorrncias: Taubat (crrego no bairro Vila Nogueira); So Paulo (Parque Municipal Alfredo Volpi); Embu (pesqueiro do Gacho no bairro Itatuba) Origem: Centro-sul dos EUA e nordeste do Mxico. Introduo: Aquariofilia. Liberao acidental ou proposital de donos de aqurio arrependidos. Impacto: O hbito de cavar causa prejuzo s culturas (arroz), represas e lagoas de piscicultura. Pode causar dano s spp nativas, principalmente de moluscos, anfbios e alevinos, principalmente como vetor de doenas, como fungos. Fonte: Magalhes et al. (2005)

112

PROTOCOLO PARA O BIOMONITORAMENTO COM AS COMUNIDADES BENTNICAS DE RIOS E RESERVATRIOS DO ESTADO DE SO PAULO

Famlia Palaemonidae Macrobrachium rosenbergii Ocorrncias: Brejo Alegre; Pindamonhangaba (viveiros do I. Pesca). Origem: Regio indo-pacfica (Oeste do Indo-Pacfico, do Paquisto ao Vietnam, Filipinas, Nova Guin e Norte da Austrlia). Introduo: Aquicultura. Importado em 1977 de fazendas havaianas pela UFPE e introduzido em SP, provavelmente tambm para fins de pesquisa, no incio dos anos 1980. No h relato de sucesso reprodutivo da espcie em ambiente natural (provavelmente a dificuldade consista na dependncia da larva ao ambiente salobro). Impacto: no h relatos de impactos econmicos ou ecolgicos. Fonte: Magalhes et al. (2005); Gazola-Silva, Melo e Vitule (2007).

113