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Daniele Cristina Ramo der Jos de Souza Gilberto das Dores Neves Rosemary Aparecida Lopes Melo Augusto

REAO DE PRECIPITAO DIRETA

Trabalho apresentado professora Ana Paula Alves Andr para obteno de nota parcial na disciplina Imunologia.

Conselheiro Lafaiete 2013

SUMRIO

1.0 INTRODUO ____________________________________________ 3 2.0 JUSTIFICATIVA ____________________________________________3 3.0 AGLUTINAO ____________________________________________ 3 3.1 Teste de aglutinao direta ______________________________ 3 3.2 Tipagem sangunea ____________________________________ 4 3.3 Teste de Coombs ______________________________________ 4 4.0 POSSVEIS ERROS _________________________________________ 4 5.0 CONCLUSO ______________________________________________ 5 6.0 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS _____________________________ 5

1.0 INTRODUO 0s ensaios imunolgicos so os maiores responsveis pelo conhecimento que se tem do sistema imune. So importantes, na clnica, para a deteco de infeces, de doenas auto-imunes e de estados de imunodeficincia. Podem ser utilizados no s para detectar a produo de anticorpos e de antgenos, diferenciar o estgio de uma doena, selecionar doadores e receptores de rgos para transplantes, avaliar o prognstico da doena, da eficcia de um tipo de terapia, dentre outros. Existem vrios ensaios imunolgicos como a precipitao, aglutinao, imunodifuso, ELISA, imunoeletroforese, entre outros (BALESTIERI, 2006). 2.0 JUSTIFICATIVA Realizar uma reviso bibliogrfica juntamente com apresentao oral utilizando-se de livros, revistas e artigos cientficos sobre reao de aglutinao direta, bem como suas utilizaes no diagnstico, reaes cruzadas e falsos resultados. 3.0 AGLUTINAO A reao de aglutinao caracteriza-se pela formao de agregados visveis como resultado da interao de anticorpos especficos e partculas insolveis que contm determinantes antignicos em sua superfcie (DOAN, 2008). A aglutinao pode ocorrer tanto com partculas que apresentam

determinantes antignicos naturais em sua superfcie, como com partculas inertes ou mesmo com clulas antigenicamente no relacionadas s quais se adsorvem ou se fixam antgenos solveis. No primeiro caso, a reao dita aglutinao direta, e no segundo, aglutinao indireta ou passiva (BALESTIERI, 2006). 3.1Teste de Aglutinao Direta No teste de aglutinao direta, o antgeno faz parte naturalmente da clula, e haver aglutinao dessas clulas promovida por anticorpos contra esses antgenos. So exemplos usuais desses testes a identificao de antgenos eritrocitrios na

tipagem sangunea utilizando anticorpos especficos e o por anticorpos anti-Rh (Teste de Coombs). Clulas bacterianas tambm podem ser utilizadas como antgeno para a pesquisa de anticorpos em amostras de soro de pacientes, como por exemplo, na leptospirose, brucelose e salmonelose. Os testes de aglutinao direta geralmente so feitos em tubos ou placas, incubando amostras de soro em diluies seriadas diante da concentrao constante de suspenso de clulas (antgeno). Aps o perodo de incubao de 30 a 90 minutos observa-se a formao de agregados visveis (DOAN, 2008). 3.2 Tipagem sangunea Por aglutinao direta utilizando hemcias pode-se identificar o sistema ABO e Rh. Hemcias que possuem antgeno A aglutinam-se em presena de anti-A; hemcias que possuem antgeno B aglutinam-se em presena de reagente anti-B. Caso ocorra aglutinao para anti-A e anti-B o sangue ser AB e se no aglutinar na presena dos dois O (PERES, 2009). 3.3 Teste de Coombs O teste de Coombs importante para diagnosticar a doena hemoltica do recm-nascido, na qual a mulher Rh negativa sensibilizada pelas hemcias Rh positivas do filho durante o parto, alm da anemia hemoltica durante a gravidez. O Coombs indireto detecta imunoglobulinas IgG ou fraes do complemento ligadas s hemcias aglutinando-se, o que em situaes patolgicas pode levar a hemlise. No Coombs direto , as hemcias fetais revestidas pelos anticorpos antiRh aglutinam na adio de soro anti Ig humana (CALICH, 2009). 4.0 POSSVEIS ERROS Na reao de aglutinao ocorre o fenmeno de pr-zona, semelhante ao processo que ocorre na reao de precipitao onde alguns anticorpos no conseguem precipitar o antgeno quando esto em maiores quantidades. Para evitar este fenmeno, se faz necessrio a utilizao de soros diludos para se observar aglutinao.

Alguns anticorpos, ditos incompletos ou bloqueadores, so incapazes de aglutinar as hemcias. A explicao est na dificuldade de acessar o antgeno na superfcie da hemcia, porque o determinante antignico deste antgeno est localizado na regio intramembranar, e/ou as cargas eltricas presentes na membrana da hemcia dificultam o acesso do anticorpo. Um tratamento enzimtico da hemcia com tripsina, papana ou bromelina melhor expem estes antgenos e altera as cargas eltricas da membrana da hemcia favorecendo a reao com o anticorpo (CALICH, 2009). 5.0 CONCLUSO Os mtodos imunolgicos diretos tm sido amplamente utilizados para suprir as deficincias dos mtodos parasitolgicos ou microbiolgicos na pesquisa de antgenos, anticorpos ou imunocomplexos, pela rapidez, simplicidade de execuo, possibilidade de automao e baixo custo operacional. O conhecimento da aplicao dos testes sorolgicos e a interpretao correta dos resultados obtidos so fundamentais para clnicos, patologistas e laboratoristas orientarem seu trabalho visando o diagnstico correto, associando sempre os resultados obtidos s investigaes clnicas e epidemiolgicas. 6.0 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS BALESTiERI, F.N.P.; Imunologia. 1 ed. Barueri, So Paulo: Editora Manole, 2006. CALICH, V.; VAZ, C.; Imunologia. 2 ed. Rio de Janeiro: Editora Revinter, 2009. DOAN, Thao; et al. Imunologia Ilustrada. 1 Edio. So Paulo: Artemed Editora S.A, 2008. PERES, A.;CHIES, J. A.B.; HEINZELMANN, L. S.; O Sistema Imunolgico. 1 Edio. Porto Alegre: Editora Universitria Metodista, 2009. VAZ, A. J.; TAKEI, K.; BUENO, E. C.; Imunoensaios: Fundamentos e aplicaes. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007.