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Introducción

:
La obtención y el correcto de muestras sanguíneas permiten la exactitud en resultados de la muestra. La parte experimental de la inmunologia requiere estudios que competen todo el sistema inmunológico. En la sangre encontramos estructuras que participan activamente en la inmunidad del individuo como los glóbulos blancos. Existen procesos específicos que ayudan al experimentador obtener las estructuras requeridas para determinado experimento, donde la toma de muestra debe ser con la mayor pulcritud e higiene para asegurar la inocuidad de la muestra y la seguridad del donante. En el siguiente informe se explicara la forma adecuada de tomar la muestra y luego de esta el tratamiento que la muestra requiera para determinados estudios.

b!etivos:
 "onocer las vías de toma de muestra sanguínea del cuy y del ave  #eali$ar con satisfacción la toma de muestra de estas especies.  #eali$ar toma de muestras con y sin anticoagulante sabiendo a que examen esta dirigido cada muestra  %aber los pasos para obtener el suero animal  %aber los pasos para obtener el plasma sanguineo  %aber los pasos para reali$ar lavado de glóbulos ro!os

&arco teórico:
Sangre:
%angre, sustancia líquida que circula por las arterias y las venas del organismo. La sangre es ro!a brillante o escarlata cuando ha sido oxigenada en los pulmones y pasa a las arterias' adquiere una tonalidad m(s a$ulada cuando ha cedido su oxígeno para nutrir los te!idos del organismo y regresa a los pulmones a trav)s de las venas y de los peque*os vasos denominados capilares. En los pulmones, la sangre cede el dióxido de carbono que ha captado procedente de los te!idos, recibe un nuevo aporte de oxígeno e inicia un nuevo ciclo. Este movimiento circulatorio de sangre tiene lugar gracias a la actividad coordinada del cora$ón, los pulmones y las paredes de los vasos sanguíneos.

Composición de la sangre:
La sangre est( formada por un líquido amarillento denominado plasma, en el que se encuentran en suspensión millones de c)lulas que suponen cerca del +,- del volumen de sangre total. .iene un

una hormona de crecimiento producida en los te!idos renales..000 y /0. la producción de hemoglobina aumenta cambiando el color del citoplasma en muestras de sangre te*idas con la tinción de <right. En el adulto sano el volumen de la sangre es una onceava parte del peso corporal. el cual es importante para mantener la deformabilidad celular y la . La eritropoyetina. llamados eritrocitos o hematíes' entre . de +. al igual que los leucocitos tienen su origen en la m)dula ósea.olor característico y una densidad relativa que oscila entre /. ya carece de n3cleo y . La membrana del eritrocito en un comple!o bilípido = proteínico. El n3cleo paulatinamente se vuelve picnótico y es expulsado fuera de la c)lula en la etapa ortocrom(tica.000 corp3sculos o glóbulos blancos que reciben el nombre de leucocitos. La hemoglobina es uno de sus principales componentes y su ob!etivo es transportar el oxígeno hacia los diferentes te!idos del cuerpo.1 y /.000 plaquetas. Proceso de desarrollo: Las etapas de desarrollo morfológico de la c)lula eritroide incluyen 7en orden de madure$ creciente8 • • • • • • 9roeritroblasto Eritroblasto basófilo Eritroblasto policromatófilo Eritroblasto ortocrom(tico #eticulocito :ematíe. denominadas trombocitos. de a$ul oscuro a gris ro!o y ros(ceo. Eritrocitos: Los eritrocitos 6 glóbulos ro!os o hematíes6.011. a 1 litros. son los elementos formes cuantitativamente m(s numerosos de la sangre. medida que la c)lula madura. cuando mitocondrias. 2n milímetro c3bico de sangre humana contiene unos cinco millones de corp3sculos o glóbulos ro!os. medio que facilita la circulación de muchos factores indispensables que forman la sangre. y entre 400.. finalmente. estimula a la eritropoyesis.0. la formación de eritrocitos y es responsable de mantener una masa eritrocitaria en un estado constante. La sangre tambi)n transporta muchas sales y sustancias org(nicas disueltas. Los eritrocitos. Los eritrocitos se derivan de las c)lulas madre comprometidas denominadas hemocitoblasto.000 y 500. es decir. 2na gran parte del plasma es agua.

%in embargo. La rotura del eritrocito a nivel intravascular libera hemoglobina directamente a la sangre. 7los anfibios y aves tienen eritrocitos con n3cleo8. en otros mamíferos como los perros y los caballos. El aumento de la concentración de eritrocitos 7 eritrocitosis 8 es menos com3n. . la membrana se hace rígida. pero esta pr(ctica pone en riesgo al sistema cardiovascular dado que )ste no est( preparado para soportar sangre cuya viscosidad sea superior a la normal.l enve!ecer la c)lula.quí.>?. %e encuentran concentraciones m(s altas en $onas de gran altitud. globina y hierro. edad. no contienen pigmentos. Los leucocitos son c)lulas móviles que se encuentran en la sangre y forman lo que se llama la @serie blancaA. La hemólisis es la destrucción de los eritrocitos enve!ecidos y sucede en los macrófagos del ba$o e hígado. Los eritrocitos son producidos continuamente en la m)dula ósea de los huesos largos. Esta alteración provoca hipoxia tisular. Estas c)lulas. Leucocitos: Los leucocitos o glóbulos blancos son un con!unto de c)lulas sanguíneas cuya función principal es la defensa del organismo de sustancias a!enas o agentes infecciosos. a diferencia de los glóbulos ro!os. los cuales se unen a la proteína de transporte. 7En el embrión. . haptoglobina. La vida media promedio del eritrocito normal es de /00 a /40 días. la mol)cula se disocia en dímeros α y β. Esta transporta los dímeros al hígado donde posteriormente son cataboli$ados a bilirrubina y excretados. Eritrocitos en mamíferos: Los eritrocitos de los mamíferos no poseen n3cleo cuando llegan a la madure$. . el ba$o libera grandes cantidades de glóbulos ro!os en momentos de estr)s.permeabilidad selectiva. ubicación geogr(fica. Los eritrocitos tambi)n pierden su mitocondria y utili$an la glucosa para producir energía mediante el proceso de glucólisis seguido por la fermentación l(ctica. La concentración eritrocitaria varia de acuerdo al sexo. en varones y en reci)n nacidos.8 El ba$o act3a como reservorio de eritrocitos. es decir que pierden su n3cleo celular y por lo tanto su . permeable y el eritrocito es destruido en el ba$o. pero su función es algo limitada en los humanos. Los elementos esenciales. Las disminuciones por deba!o del rango de referencia resultan en un estado denominado anemia. son conservados y reutili$ados. por lo que se les . La fracción hem de la mol)cula es cataboli$ada a bilirrubina y excretada a trav)s del tracto intestinal.lgunos atletas han tratado de explotar esta función del ba$o tratando de liberar sus reservas de eritrocitos mediante f(rmacos. el hígado es el principal productor de glóbulos ro!os.

. así como los productos de desecho del metabolismo.. bilirrubina 70. %on c)lulas con n3cleo. Es el componente mayoritario de la sangre. • "omponentes inorg(nicos 7/0-8 o ?a"l o Gicarbonato o Hosfato o "a"l4 o &g"l4 . %us dos tipos principales son los leucocitos polimorfonucleares y los linfocitos.de agua.califica de glóbulos blancos.del volumen sanguíneo.del volumen sanguíneo total. El suero. mgFdL8 y sales biliares 7tra$as8.0 mgFdL8... Est( compuesto por un B/.y m3ltiples sustancias disueltas en ella. mgFdL8. Est( compuesto por agua el B0. transferrina. glucosa 7/00 mgFdL8... . :>L. capaces de moverse libremente mediante pseudópodos. distribuidas de la siguiente forma: • 9roteínas plasm(ticas 7C0-8 o fibrinógeno 7C-8 o inmunoglobulinas 75D-8 o alb3minas 7. mgFdL8.ambi)n contiene gl3cidos y lípidos. L>L. triacilgliceroles 7/4. .restante corresponde a los elementos formes 7tal magnitud est( relacionada con el hematocrito8.. El +.. &etabolitos org(nicos 7no electrolíticos8 y compuestos de desecho 740-8 • fosfolípidos 74D0 mgFdL8. creatinina 7/.barca el .. protrombina. Los segundos presentan un n3cleo bien unido e individuali$ado.. >e )stas las m(s abundantes son las proteínas. (cido l(ctico 7/0 mgFdL8. Los primeros tienen su n3cleo con una apariencia de fragmentación. puesto que representa aproximadamente el . adem(s de numerosas sustancias inorg(nicas y org(nicas 7solutos del plasma8. Composición: El plasma es un fluido coloidal de composición comple!a que contiene numerosos componentes. urea 7/. es el remanente del plasma sanguíneo una ve$ consumidos los factores hemost(ticos por la coagulación de la sangre.+-8 o otras proteínas 7/-8: EL>L. (cido 3rico 75 mgFdL8. mgFdL8. Plasma sanguineo: El plasma sanguíneo es la fracción líquida y acelular de la sangre. colesterol 7/..

00 mgFKg /ml x LM 0.0D mlFKg 0.o o I"l ?a4% + Experimentación: Materiales:  Especies animales: "uy y Jallina  .. 9ara el cuy: Ketamina: +0mgFKg .0 gr LM 0.0 gr Xilacina: .uberculinas y !eringas de 5ml  Ietamina y xilacina  ./14.lcohol y algodón  %uero fisiológico 9ara poder reali$ar la toma de muestra es necesario primero anestesiar al animal con un anestesico y un tranquili$ante.0D ml L xM 0. En este caso la xilacina y la Ketamina.ml x LM0./ ml /000 gr 1.4 LM 0.0. X= 0.gu!as numero 4/ y 45 x /``  .mlFKg 0.00 mg +0mg . /00gr 1.4. Para el pollo: Ketamina: ml .  . 9ara los 4 tipos de animales se les calculo la dosis necesaria de acuerdo a su peso.4.ubos de prueba con y sin E>.

La vena debe locali$arse claramente 7si se tienen dudas. fibrillas de col(geno y espon!a gelatinosa que pueden servir de ayuda si persiste el sangrado.0mg! "g #ia intramuscular gr 0.%( ml 0. pero se le debe tranquili$ar.%( La )oma *e Muestra: El animal debe estar suavemente su!eto por un manipulador experimentado que.ambi)n hay varios preparados hemost(ticos de alginato de calcio. ml %ml X X= 0. ?o hay tampoco que sobre valorar el papel clave desempe*ado por la persona que su!eta al animal y evidencia la vena. siempre que sea posible. lo que detendr( r(pidamente cualquier sangrado.0$ mg X %000 &'0 gr '00 mg 0mg X= 0. La gota de sangre formada puede retirarse con un tubo capilar o con una micropipeta con punta de pl(stico. se debe mantener una presión suave pero firme sobre el lugar durante unos 50 segundos. con la palma de la mano sobre la espalda y el resto de los . puede chillar. %e su!etan muy bien colocando el dedo pulgar e índice alrededor del cuello. >espu)s de haber sacado la sangre. ml %00ml X X %000 gr &'0gr X= 0. deber( ser conocido por los animales. es me!or no hacerlo y buscar ayuda8 y la punción llevada a cabo decididamente me!or que con vacilaciones.0$ Xilacina: $mg!"g 000mg $mg X= 0. %on tímidos y la su!eción debe hacerse firme pues tratan de escapar cuando se les manipula. 9uede que el animal muestre signos de incomodidad 7Ncomo nosotrosO8 por e!emplo. trat(ndole con suavidad y habl(ndole. Manipulación: Cu+: Los cobayos rara ve$ muerden. 9uede que se necesite alguna presión próxima al lugar de oclusión del retorno venoso con el fin de obtener suficiente volumen de sangre. .

La agu!a debe insertarse paralela a la vena y la punta de la agu!a dirigida al lumen de forma longitudinal. . la otra mano debe su!etar la parte inferior de su cuerpo. "uando se mantiene colgado.dedos alrededor del cuerpo. >eterminados pasos deben ser tomados en cuenta aunque solo la pr(ctica determina la eficiencia del procedimiento. En esta t)cnica los animales deben ser anestesiados y su!etados. la aspiración deben de hacerse lenta para evitar se colapse. "uando se detecta que se introdu!o en vena.cnica: La parte m(s difícil es la introducción de la agu!a P45 en vena. La punción en cora$ón es el m)todo mas practico para la toma de sangre en peque*os roedores cuando solo se requieren unas gotas de sangre. . La agu!a debe ser insertada en el punto donde se siente el latido del cora$ón.ambi)n se utili$ada en especies mayores. "uidado especial requiere la manipulación de hembras gestantes pues son pesadas ).

el animal debe estar viendo hacia el su!eto. 9ara manipulación del ave se debe colocar sobre una superficie cogiendo con una mano la cabe$a y fi!ando las alas y con la otra su!etar las patas. Luego hacer punción con el bisel de la agu!a P4/ hacia arriba en dirección a la vena esperar y extraer un poco y ver si la c(mara de la !eringa se llena de sangre si así es extraer lentamente la sangre. / o 4 mm de la punta de la cola pueden cortarse y la sangre recogida. se puede Sorde*arT la cola. conteos celulares y hemoglobina.0 cc. Luego retirar suavemente la agu!a y depositar en un recipiente con o sin anticoagulante. >esinfectar la $ona con un algodón h3medo de alcohol. %i la sangre no sale. En el ratón la toma de muestra de sangre de la cola es 3til para hematocrito. "on esta t)cnica entre 50 a +0 cc de sangre pueden ser colectadas. 9uede consultar a los m)dicos veterinarios de la 29E. %u!eción e extracción sanguínea de la gallina: 9ara efectos de transporte colocar la mano por deba!o del animal su!etando las patas y las alas. %e coloca la gasa en la punción para evitar hematomas. >espu)s de la desinfección de la cola. 9ara la extracción se debe ubicar la vena radial que se encuentra por deba!o del ala. La cola debe ser calentada en agua a +0 Q . En este lugar es simple la t)cnica. El animal debe ser anestesiado antes. Luego la sangre se extrae. La extracción debe ser lenta y la cantidad limitada a menos que se decida la eutanasia del animal. El (rea es afeitada y desinfectada con xilacina seguido de alcohol.0R". El cone!o debe estar bien su!eto y evitarse los hematomas. *atos extra: La vena marginal de la ore!a del cone!o es ideal para la extracción de peque*os vol3menes de sangre y tambi)n puede ser usada para inyecciones intravenosas.LQ "investav para cualquier duda. La vena es dilatada seguida de la introducción cuidadosa de la agu!a y la extracción de la sangre. El latido del cora$ón es palpado con el dedo y la agu!a es introducida pegada al dedo a trav)s del pecho en la c(mara cardiaca como se muestra en la figura i$quierda. .&)todo para la extracción de sangre del cora$ón en rata. El me!or m)todo para extraer mayores cantidades de sangre del cone!o es el uso de la arteria de la ore!a y un vacutainer de .

?o ser( posible si la muestra fue tomada sin anticoagulante puesto a que esta sangre ya estaría coagulada en cambio si necesito la obtención de suero la muestra debe tomarse sin anticoagulante ya que es una sustancia seme!ante al plasma que se obtiene de una muestra con . glóbulos blancos. U ml puede ser extraído con una frecuencia semanal usando estas t)cnicas. la rata y el h(mster ayuda al )xito de la t)cnica. la rata y el h(mster de la periórbital del o!o. El sangrado del plexus orbital de la rata y del sinus orbital del ratón y el h(mster es lo m(s usual.. La vena se ve lateralmente cerca de la base de la cola. La extracción de sangre en el seno orbital del ratón requiere que el tubo capilar entre directamente en el sinus orbital. Es obligatoria la anestesia en toda t)cnica de extracción de sangre periorbital.unque es un m)todo 3til. plaquetas. En la rata se facilita cuando el tubo capilar se coloca encima del globo ocular y se alcan$a la vena mayor entre la m(s profunda y la vena superficial de la órbita El conocer la ubicación de las estructuras venosas del ratón. el tubo capilar se coloca en la mayor de las estructuras venosas orbítales.. ml %oluto: 0. suspensiones de eritrocitos. El sangrado de la vena yugular en especie mayores es lo m(s adecuado. "uando se usa en h(mster. etc. tanto este como el corte de dedos en ratón deben ser evitado lo m(s posible. "uando se extraiga sangre del ratón. Vcon que finalidad se a*ade o no anticoagulante al tomar una muestra sanguíneaW >ependiendo al tipo de examen que se quiera reali$ar por e!emplo en un examen de c)lulas. Lavado de glóbulos ro!os: /F/0 Eolumen : +. el tubo capilar es colocado en el caudal del sinus orbital. se requiere buena iluminación y dilatación para observarse me!or.. 7glóbulos ro!os8 %olvente: +. hemoglobina. La toma de muestra en vena de la cola del ratón y la rata es posible.0 7suero fisiológico8 Cuestionario: /.

#ealice los calculos para preparar /0ml de una suspensión de glóbulos ro!os al 55 ml L LM 0. VXue diferencias hay entre el plasma y sueroW 9ara obtener el plasma y el suero las muestras necesitan distinto tratamiento luego de su extracción.. El plasma y el suero son muy seme!antes en sus componentes sin embargo el carece de fibrinogeno ya que lo perdió al coagularse la sangre. 9ara obtener el plasma la muestra se debe tomar con anticoagulante mientras que el suero se toma sin anticoagulante.us. 5.monografias. >elimite anatómicamente las vías de sangrado de cada una de las especies animales utili$adas durante la pr(ctica. En el ave: %e hace por deba!o del ala por los ligamentos se ubica la vena radial +. "on que finalidad se reali$a el lavado de glóbulos ro!os %e utili$a para preparar suspensiones de glóbulos ro!os. En el cuy: La punción cardiaca se hace en el lado i$quierdo del animal entre los espacios intercostales hasta llegar al cora$ón.5 /00ml /0ml Gibliografía: http:FFYYY.shtml http:FFes.esFindex.phpFLeucocito .anticoagulante pero sin la presencia del fibrinogeno pues este se uso durante la coagulación.orgFYiKiFJl-"5-G5bulosZro!os http:FFenciclopedia. 9un$ar en la $ona en que los latidos sean m(s prominentes. . 4.YiKipedia.comFtraba!osFsangreFsangre.

orgFYiKiF"irculaci-"5-G5nZdeZlaZsangre .YiKipedia.>neo http:FFes.rticulo de scribd.http:FFes.YiKipedia.orgFYiKiF9lasmaZsangu-"5-.com .