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30 zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63

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Acta A. A. Michel: 30
2008 Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

Análisis histológico sobre el desarrollo y maduración
del ovario en Baeacris punctulatus (Thunberg)
(Orthoptera: Acrididae: Melanoplinae)
Michel, Adriana A.
Instituto de Morfología Animal, Fundación Miguel Lillo, Miguel Lillo 251, 4000 San Miguel
de Tucumán, Argentina. e-mail: adrianaazucenamichel@hotmail.com

R E S U M E N — Baeacris punctulatus es una de las especie de Melanoplinae considerada
de importancia económica para la Argentina. Los ovarios de insectos están sujetos a cam-
bios en su anatomía, morfología y ultraestructura durante toda la vida del animal. Los
estudios histológicos sobre desarrollo y maduración de las gónadas en Acrididae de Suda-
mérica son escasos. El objetivo de este trabajo es proveer información sobre el proceso
de morfogénesis del ovario y la ovogénesis durante el desarrollo embrionario, postembrio-
nario y el imago. Las hembras de Baeacris punctulatus obtenidas en cautiverio se fijaron
en Bouin y se conservaron en alcohol n-butílico. Los ejemplares completos se incluyeron
en paraplast. Se realizaron cortes seriados de 6 µm de espesor. Los cor tes se colorearon
con Hematoxilina-Eosina, Tricrómico de Mallory y Hematoxilina de Verhoeff. Los resultados
demostraron que en esta especie los ovarios se diferencian en el Estadio Embrionario X,
identificándose en cada ovariola el germario con ovogonias en mitosis. La meiosis ovogonial
se inicia antes de la eclosión de las ninfas. Los ovocitos primarios pasan por tres periodos
de crecimiento: el primer periodo abarca desde el Estadio Embrionario XI al Ninfal II, se
desarrolla en el germario e incluye desde preleptonema al paquinema. El segundo periodo
abarca desde el Estadio Ninfal II a los 5 días de imago, se desarrolla en el vitelario e
incluye el subestadio de postpaquinema y estadios de previtelogénesis del diplonema. El
tercer periodo de crecimiento abarca desde los 5 a los 15 días de imago, incluye los
estadios de vitelogénesis hasta la síntesis de cubiertas externas del ovocito, la envoltura
vitelina y el corion. Entre los 15 y 25 días del imago se producen las primeras ovula-
ciones y en este periodo la hembra alcanza la madurez sexual. Estos resultados aportan
datos sobre la biología reproductiva de Baeacris punctulatus, los cuales pueden contribuir
a un mejor manejo de esta especie.
Palabras claves: Baeacris punctulatus, Orthoptera, Acrididae, Melanoplinae, Ovogénesis,
Histología.

A B S T R A C T — “Histological analysis of the development and maturation of ovaries in
Baeacris punctulatus (Thunberg) (Orthoptera, Acrididae, Melanoplinae)”. Baeacris punctulatus
is a Melanoplinae species of economical importance in Argentina. During the life of an in-
sect, ovaries undergo changes characterized by morphological and phisiological cell alte-
rations. Histological studies of the development and maturation of gonads in South
American Acrididae are rare. The objective of this study is to provide information on the
morphogenesis of the ovary and oogenesis during the embrionic, postembrionic and the
imago stage of development. Captive females Baeacris punctulatus were obtained. They
were fixed in Bouin and preserved in n-butilic alcohol. Specimens were placed in “paraplast”
and 6 µm-thick segments were stained with Hematoxylin-Eosin, Trichrome of Mallory and
Hematoxylin of Ver hoeff. Results show that in this species, ovaries differentiate in the
embryonic stage X, observing in the ovarioles the germarium with oogonia in mitosis. The
oogonial meiosis begins before the hatching of the nymphs. The primary oocytes go
through three stages of development. The first stage takes place between the embryonic
stage XI and nymphal stage II. It develops in the germarium and it includes from pre-
leptonema to paquinema. The second period goes from nymphal stage II to five days of
the adult stage and it occurs in the vitelarium that includes the substage of postpaquinema
and stages of previtellogenesis of the diplonema. The third period occurs between the fifth
and fifteen days of the imago and it includes stages of vitellogenesis up to the synthesis

Recibido: 20/10/08 – Aceptado: 28/05/09
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of external covers, vitelline cover and corium. The first ovulations occur between the fif-
teenth and twenty-fifth day. It is during this period that the female reaches sexual maturity.
These results provide information on the reproductive biology of B. Punctulatus, which may
contribute to better species management.
Key Words: Baeacris punctulatus, Or thoptera, Acrididae, Melanoplinae, Oogenesis, His-
tology.

INTRODUCCIÓN por cambios morfogenéticos producidos des-
de la puesta hasta la eclosión de las ninfas.
La especie Baeacris punctulatus (Thun- La duración media del desarrollo postem-
berg) forma parte del grupo “punctulatus” del brionario en el macho es de 28 días, mien-
género Baeacris. En este grupo se incluyen un tras que para la hembra la duración media
conjunto de especies crípticas con una amplia es de 30 días. En ambos sexos el desarrollo
distribución en Sudamérica, de aspecto exte- postembrionario incluye 5 estadios ninfales
rior uniforme pero fácilmente separables por desde la eclosión de las ninfas hasta la
su distribución geográfica y los caracteres muda imaginal, determinados por el análisis
derivados de la genitalia del macho. Estas del desarrollo de pterotecas y genitalias ex-
especies son en general de tamaño pequeño, ternas. Los adultos matenidos en cámara de
de forma frágil y elegante sobre todo el ma- cría tuvieron una longevidad máxima de 70
cho, ya que las hembras son más robustas y días. La primera cópula se produce entre los
grandes. En su coloración predominan los 2 y 12 días después de la muda imaginal y
colores castaño y pardo, siendo las tibias pos- la primera puesta 10 días después de la có-
teriores de color rojo vivo (Carbonell y Ron- pula (Michel y Terán, 2006).
deros, 1973). Dentro del grupo “punctulatus” Aunque se realizaron estudios histológi-
y aún del género, Baeacris punctulatus es la cos de gónadas en especies sudamericanas
especie de mayor distribución geográfica, ya de Acridoidea, como los de Cruz-Landim
que ocupa todo el territorio de América del (1994) en Conocephalus saltador (Saussure)
Sur al este de los Andes, desde Colombia hasta (Orthoptera, Conocephalidae), Ferreira et
Argentina (Bentos Pereira, 1989; Ronderos y al. (2006) en Cromacris speciosa (Thunberg)
Cigliano, 1991). (Orthoptera, Romaleidae) y Santos et al.
Baeacris punctulatus es una de las espe- (2006) en Tropidacris collares (Stoll) (Or-
cies de Melanoplinae considerada de impor- thoptera, Romaleidae), los estudios histoló-
tancia económica para Argentina (Lieber- gicos sobre desarrollo y maduración de las
mann y Schiuma, 1946). Así mismo, se ha gónadas en especies de Acrididae de Suda-
comprobado que en esta especie de desarro- mérica son escasos. Entre los trabajos que
llo continuo, con diapausa embriónica facul- realizan este tipo de estudios, se puede men-
tativa (Michel y Terán, 2006), la hembra cionar el realizado por Michel (2007) sobre
presenta una gran susceptibilidad a agentes desarrollo del testículo y espermatogénesis
de control biológico, siendo ésta sustrato en Baeacris punctulatus.
adecuado para la esporulación de microspo- En Baeacris punctulatus, la gónada de la
ridios en el cuerpo graso. En insectos, el vo- hembra está constituida por un par de ova-
lumen del cuerpo graso en la hembra adulta rios ubicados por encima del tubo digestivo.
está directamente relacionado con el desa- Cada ovario esta constituido por 10 ovario-
rrollo y maduración del ovario (Villeco, las panoísticas, es decir carecen de células
1998; Lange, 2002, 2003; Albert et al., nutricias especiales (trofocitos) y el epitelio
2004). folicular es el único tejido trófico presente.
En condiciones de cría óptimas para su Cada ovariola, limitada externamente por
desarrollo, en B. puntulatus el desarrollo una capa de células epiteliales planas, está
embrionario tiene una duración media de 20 formada por tres regiones: el filamento ter-
días, que incluyen 11 estadios determinados minal que se une a la pared del cuerpo a tra-
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vés del ligamento suspensorio, el tubo de provistas de desovadores. La incubación de
huevos en el cual se desarrolla la línea ger- los desoves y el mantenimiento de las crías se
minal y un corto pedicelo que desemboca en realizó en una cámara con un ambiente re-
el oviducto lateral. El tubo de huevo está for- gulado a 30 ± 1° C, entre 50 y 70% de hu-
mado por el germario en el extremo distal, medad relativa y un fotoperíodo de 14 horas
con ovogonias y ovocitos en las primeras eta- luz. La alimentación de los adultos silvestres
pas de la profase I de la meiosis, dispuestos y de ninfas y adultos obtenidos en cautiverio
en forma irregular y rodeados por tejido pre- se realizó con hojas frescas de Taraxacum
folicular y el vitelario en la región media y officinale. Los ejemplares de referencia se
proximal, con ovocitos en las diferentes eta- encuentran depositados en la Colección Ento-
pas de previtelogénesis y vitelogénesis, dis- mológica del Instituto-Fundación Miguel Li-
puestos linealmente y rodeados por una capa llo (IFML), Tucumán, Argentina.
continua de células foliculares (Michel y Te- Para el estudio histológico, durante el
rán, 2005). desarrollo embrionario se tomaron muestras
Los ovarios de insectos están sujetos a de 3 huevos cada una, cada 3 horas durante
cambios en su anatomía, morfología y ul- el primer día y luego cada 24 horas, extra-
traestructura durante toda la vida del animal yéndose hasta 3 muestras por vez. Mientras
(Büning, 1994). Considerando que Baeacris que para el estudio durante el desarrollo
punctulatus es una de las especies de Mela- postembrionario, se tomaron muestras de 2
noplinae de importancia económica para ejemplares hembras cada 48 horas desde el
Argentina y que los estudios sobre morfogé- momento de la eclosión de las ninfas hasta
nesis de la gónada y gametogénesis en Acri- la muda imaginal. Para el estudio en el
didae de Sudamérica son escasos, el objetivo imago, se tomaron muestras de 2 hembras
de este trabajo es proveer información sobre cada una a las 24, 48, 72 y 120 horas de la
el proceso de morfogénesis del ovario y la muda imaginal y luego cada 5 días hasta los
ovogénesis durante el desarrollo embriona- 30 días del imago. Además se tomaron
rio, postembrionario y en el imago. muestras de hembras vírgenes, durante la
Para cumplir con los objetivos planteados cópula, y a las 12, 24 y 48 horas después de
se realizó un estudio exhaustivo en cortes se- la primera cópula y en el momento de la
riados de ejemplares fijados enteros, en dife- puesta. La obtención de ejemplares de Baea-
rentes tiempos desde el momento de la puesta cris punctulatus en las diferentes etapas del
hasta los 30 días de imago, lo que permitió desarrollo se realizó considerando los esta-
obtener una imagen tridimensional de los dios de desarrollo establecidos por Michel y
cambios morfológicos producidos en los ova- Teisaire (1996) y Michel y Terán (2006).
rios durante su desarrollo. Por un lógico pro- Los ejemplares completos se fijaron en
blema de espacio, solamente se han incluído Bouin (solución acuosa saturada de ácido
las figuras más representativas de los proceso pícrico, formol puro y ácido acético 70: 25:
descripto. Los aspectos cualitativos que éstas 5) durante 24 horas. Se deshidrataron en
representan constituyen una síntesis de la una batería ascendente de etanol y se con-
gran cantidad de información obtenida. servaron en alcohol n-butílico. Las hembras
se incluyeron en paraplast y se realizaron
MATERIAL Y MÉTODOS cortes seriados de 6 µm de espesor con orien-
tación sagital y frontal. Se coloreó con he-
La cría de la especie se llevó a cabo a matoxilina de Erlich-eosina (H-E) (Geurr,
partir de desoves obtenidos de adultos silves- 1956 citado por Humason, 1979), hematoxi-
tres capturados con redes entomológicas, en lina de Verhoeff (H.V.) (según Mallory, 1944
áreas destinadas al pastoreo y banquinas del citado por Humason, 1979) y tricrómico de
Km. 28 y 29 de Ruta provincial N° 340 (Tu- Mallory (Azan) Heidenhain (M.A.) (Modifi-
cumán) y mantenidos en el laboratorio a cado por Konef, 1938, citado por Humason,
temperatura ambiente (20 ± 2° C) en jaulas 1979). Las observaciones se realizaron con
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un microscopio Leitz-Dialux 20 2B y las mi- nulos gruesos y separados. Por el tamaño y
crofotografías se tomaron con una cámara las características del núcleo, estas células
Miranda acoplada con adaptador al tubo corresponden a preovocitos, ya que se en-
monocular de fotografías. cuentran en una etapa previa a la iniciación
de la meiosis, es decir, en un período de re-
RESULTADOS plicación del DNA o fase S de la interfase
premeiótica. Este cordón de células ventra-
1. MORFOGÉNESIS DEL OVARIO Y OVOGÉNESIS les de cada ovario constituye el rudimento
EN EL DESARROLLO EMBRIONARIO del vitelario, a partir del cual se formará el
Estadio Embrionario X (17 a 18 días después vitelario al completarse el desarrollo de la
de la puesta).— En Baeacris punctulatus, los ovariola (Tabla 1, al final del trabajo). Las
ovarios se identifican por su organización células mesodérmicas que rodean a la re-
estructural recién a partir del Estadio X del gión ventral de cada ovario se prolongan en
desarrollo embrionario, en posición dorsal dirección cefálica en un delgado cordón que
al tubo digestivo, desde la mitad del 2° seg- constituye el esbozo de la glándula accesoria
mento abdominal al 4° inclusive, siendo ro- de la hembra y en dirección caudal en un
deados por abundante tejido graso. En cada cordón que forma el esbozo de la porción
ovario, se pueden distinguir una región dor- gonádica del oviducto lateral de cada lado
sal y anterior en la cual se observan 10 gru- del cuerpo.
pos celulares dispuestos linealmente en sen-
tido longitudinal. En corte transversal, cada Estadio Embrionario XI (20 a 21 días des-
uno de estos grupos está formado por 6 ovo- pués de la puesta).— En este estadio, cada
gonias dispuestas en forma irregular y ro- ovario está constituido por 10 ovariolas
deadas por 2 o 3 células mesodérmicas alar- completamente diferenciadas y rodeadas por
gadas que forman una capa continua alrede- una delgada capa de células mesodérmicas
dor de las mismas. Las ovogonias son célu- aplanadas que constituyen la membrana li-
las pequeñas con un diámetro de 7,5 µm, mitante externa, la cual se prolonga distal-
con grandes núcleos de forma esférica u mente en un delgado y corto cordón celular
ovoidea y escaso citoplasma levemente ba- que corresponde al filamento terminal de la
sófilo. La mayor parte de las ovogonias se mismas. Las ovariolas son ligeramente alar-
encuentran en interfase, ya que en sus nú- gadas, con un diámetro menor en el extremo
cleos la heterocromatina está condensada en distal de las mismas, ubicado en la región
gránulos gruesos y separados y la eucromati- dorsal de cada ovario y rodeado por abun-
na se presenta en forma de finas hebras que dante tejido graso, mientras que el extremo
cubren completamente el nucleoplasma; proximal de la ovariola de mayor diámetro
siendo escaso el número de ovogonias que se ubica en la región ventral del ovario y
han comenzado a dividirse mitóticamente está limitado solamente por una delgada
(Fig. 1). Cada uno de estos grupos celulares capa de células mesodérmicas.
constituye el rudimento del germario de las En estas hembras, las ovogonias ubicadas
ovariolas en desarrollo. en el extremo distal de cada ovariola se en-
En la región ventral y hacia la línea me- cuentran en activo proceso de división celu-
dia del cuerpo, en cada ovario se observa un lar, observándose numerosos núcleos en pro-
cordón continuo de células grandes, redon- fase y metafase mitótica. Al mismo tiempo
deadas, levemente basófilas, dispuestas en en la región ventral de la ovariola se ha re-
forma lineal y rodeadas por numerosas célu- ducido el número de preovocitos y en cam-
las mesodérmicas. Estas células tienen un bio se observan numerosas células esféricas
diámetro que oscila entre 10,5 y 12 µm, pre- ligeramente mayores, con grandes núcleos
sentan un núcleo grande y esférico, rodeado rodeados por escaso citoplasma levemente
por escaso citoplasma granular levemente basófilo y cromosomas en diferentes grados
basófilo y la cromatina condensada en grá- de condensación en el interior de los mis-
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mos, lo que indicaría el inicio del estadio de queños engrosamientos (cromómeros) dis-
profase I de la meiosis (Fig. 2). Dichas célu- puestos en forma de cuentas de collar, y c)
las corresponden a ovocitos primarios en los en menor número se observan ovocitos pri-
siguientes subestadio: a) en preleptonema marios en cigonema, de un tamaño ligera-
con un diámetro aproximado de 16,5 µm, en mente mayor aproximadamente 19,5 µm y
la etapa inicial de la condensación cromosó- en sus núcleos se visualizan cromosomas
mica con cromosomas largos y delgados que como cintas largas y delgadas levemente
forman un ovillo compacto intensamente basófilos, indicando el apareamiento progre-
basófilo en el interior del nucleoplasma, b) sivo de cromosomas homólogos parcialmen-
células en leptonema con un diámetro de te condensados. La ligera variación en tama-
aproximadamente 18 µm, con el núcleo me- ños indicaría que estos ovocitos se encuen-
nos basófilo y cromosomas más condensados tran en el “primer periodo de crecimiento”
que se presentan como finas hebras con pe- (Tabla 1).

Figura 1: Corte sagital de la hembra de Baeacris punctulatus en el Estadio Embrionario X,
se observa la región dorsal del ovario (O) con esbozos de ovariolas (OV) separados por
abundante tejido graso (TC). Cada ovariola está constituida por grupos de ovogonias (o) dis-
puestas en forma irregular, rodeados por una delgada capa de células mesodérmicas. H-E.
Barra = 18,2 µm.
Figura 2: Corte sagital de la región ventral del ovario (O) en el Estadio Embrionario XI, en
continuidad con el esbozo de la porción gonádica del oviducto lateral (PGL). Se observa el
extremo proximal de las ovariolas separados por una delgada capa de células mesodérmicas
(cm) y en su interior ovocitos primarios (op) en preleptonema (pl) y leptonema (l). H-E.
Barra = 1,2 µm.
Figura 3: Corte sagital del ovario en el Estadio Ninfal I, se observa la región proximal de las
ovariolas (OV) rodeada por células mesodérmicas y cuerpo graso (CGR). En el interior de la
ovariola se identifican grupos de ovocitos primarios (op) en paquinema (pa) rodeados por
células prefoliculares (cp). H-E. Barra = 1,2 µm.
Figura 4: Región distal de las ovariolas (OV) de un ejemplar en el Estadio Ninfal II, limitada
por la vaina externa (VE) de células mesodérmicas y tejido graso (TC). En el interior de la
ovariola, se observan ovogonias (o) en interfase (i) y metafase mitótica (m). H-E. Barra =
1,2 µm.
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2. MORFOGÉNESIS DEL OVARIO Y OVOGÉNESIS dio. En el extremo de cada cromosoma se
EN EL DESARROLLO POSTEMBRIONARIO observan gránulos fuertemente basófilos que
Estadio Ninfa I (1 a 6 días después de la corresponden a los centrómeros de cromáti-
eclosión de las ninfas).— Al comienzo del das hermanas. En estas hembras, el diámetro
desarrollo postembrionario, los ovarios son de los ovocitos primarios en los diferentes
ligeramente alargados, se ubican en posi- subestadios de la profase I de la meiosis va-
ción dorsal al tubo digestivo, y abarcan des- ría entre 14 y 21 µm, desde el extremo distal
de el 2° al 4° segmento abdominal inclusive. al proximal del germario, y forman nidos de
En cada ovario se distinguen claramente 10 2 a 4 células rodeados por 3 a 4 células pre-
ovariolas completamente diferenciadas, alar- foliculares de forma alargada con grandes
gadas y en forma de huso, dispuestas en for- núcleos ovoideos fuertemente basófilos (Ta-
ma paralela y separadas por una delgada bla 1, Fig. 3).
capa de tejido graso. En estas hembras, cada
ovariola está formada por un delgado fila- Estadio Ninfal II (7 a 12 días después de la
mento terminal, que se prolonga hasta el eclosión de las ninfas).— Al comienzo del
extremo posterior y dorsal del primer seg- estadio Ninfal II, en el germario de cada ova-
mento abdominal; y el germario está limita- riola se observan las mismas cantidades y
do externamente por una delgada vaina ex- tipos celulares del estadio anterior, pero en
terna de aproximadamente 8 células epitelia- estos ejemplares las ovogonias próximas al
les en corte transversal. filamento terminal se disponen en forma
En la región distal del germario, se ob- irregular, mientras que las de la región basal
servan por corte transversal aproximadamen- de la ovariola forman grupos de 2 a 6 célu-
te 14 ovogonias dispuestas en forma irregu- las. Cada grupo está limitado externamente
lar, la mayoría de las cuales se encuentran por células prefoliculares dispuestas en for-
en interfase mitótica y un número reducido ma desordenada. En ambas zonas, la mayo-
de ellas, en las restantes etapas de la mito- ría de las ovogonias se encuentra en interfa-
sis. En la región media y proximal se obser- se, profase o prometafase mitótica y solo
van 2 preovocitos y 6 u 8 ovocitos primarios algunas en metafase (Fig. 4). Entre los ovo-
en preleptonema, leptonema y cigonema dis- citos primarios que ocupan el resto del ger-
puestos en forma irregular. A continuación mario, se observan “núcleos picnóticos”, que
de estas células, en la región basal del ger- probablemente correspondan a restos de ovo-
mario, se observan 2 ovocitos primarios en gonias en degeneración que no se diferen-
paquinema inicial de aproximadamente 21 ciaron en ovocitos (Fig. 5).
µm de diámetro. Estas células son esféricas Al finalizar este estadio, las ovariolas pre-
con un núcleo grande claro y escaso citoplas- sentan una mayor longitud, observándose en
ma levemente basófilo alrededor del mismo. el extremo distal del germario aproximada-
En el interior del núcleo se observan cromo- mente 30 ovogonias por corte transversal, de
somas largos y anchos como cintas, leve- las cuales las que se disponen en forma irregu-
mente basófilos y con escasos centrómeros lar están en interfase, mientras que las restan-
visibles entre ellos (Fig. 3). tes que forman nidos se encuentran principal-
Al finalizar el primer estadio ninfal, se mente en metafase, anafase y telofase mitóti-
observa un ligero aumento de longitud de ca. En el extremo proximal de cada ovariola y
las ovariolas, aumentando el número de ovo- a continuación del germario, comienza a for-
gonias a 20 por corte transversal en el extre- marse el vitelario, ya que por primera vez se
mo distal de las mismas, mientras que en el observan ovocitos primarios en el subestadio
extremo proximal, se observan 2 ovocitos de postpaquinema dispuestos en forma lineal
primarios en paquinema avanzado. En el y rodeados cada uno de ellos por 5 o 6 células
núcleo de estos ovocitos se observan cromo- prefoliculares (Tabla 1). Estos ovocitos (5 o 6
somas más cortos y de una basofilia más in- por cada ovariola) son células ligeramente
tensa que en la etapa inicial de este subesta- más grandes que las del subestadio anterior,
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ya que presentan una variación del diámetro Cada uno de los ovocitos en el estadio
de 21 a 24 µm que se manifiesta tanto en la previtelogénico I está rodeado por una capa
cantidad de citoplasma basófilo como en el continua de 4 a 8 células foliculares aplana-
tamaño de la vesícula germinal. En estos ovo- das con grandes núcleos ovoideos fuertemen-
citos, los cromosomas no son visibles y la cro- te basófilos y escaso citoplasma alrededor
matina es difusa y forma grandes acúmulos de los mismos, que constituyen el esbozo de
en el nucleoplasma. Estas células, por su ima- un folículo ovárico. Estos ovocitos previtelo-
gen nuclear, se encuentran en una etapa inter- génicos son de forma cúbica a esférica y pre-
media entre el subestadio de paquinema y el sentan un aumento progresivo de tamaño
de diplonema, y correspondería al inicio del que va desde 30 a 72 µm, lo que se mani-
“segundo período de crecimiento” del ovocito. fiesta tanto en la cantidad de citoplasma
como en el diámetro de la vesícula germi-
Estadio Ninfal III (13 a 16 días después de nal. Dicha vesícula es grande (21 a 36 µm) y
la eclosión de las ninfas).— En este estadio se ubica en el centro del ovocito, con una
en cada ovario, se observa un aumento de envoltura nuclear claramente visible. La cro-
longitud de las ovariolas, las cuales están matina es difusa y difícil de observar al mi-
separadas entre sí por una delgada vaina croscopio óptico, ya que se presenta en for-
externa y todas ellas rodeadas por abundan- ma de finas hebras y pequeñas condensacio-
te tejido graso. En cada ovariola se distingue nes basófilas (cromómeros) que se distribu-
en la región distal, el filamento terminal y yen uniformemente en el jugo nuclear y au-
el germario, y en la región media y proxi- mentan en número a medida que aumenta el
mal, el vitelario. En el germario se observan tamaño del ovocito. En la región central y
ovogonias con escasa actividad mitótica, ya próxima a la envoltura nuclear se observan
que la mayoría se encuentra en el periodo de de 4 a 8 “cuerpos proteinosos” que se identi-
interfase, y ovocitos primarios en el “primer fican como acúmulos de diferentes tamaños
periodo de crecimiento” (preleptonema, lep- constituidos por fina granulación basófila.
tonema, cigonema, paquinema inicial y Entre estos acúmulos se observan 2 o 3 ma-
avanzado), los cuales al igual que en el es- cronucleolos formados por granulaciones
tadio ninfal II, forman grupos de 2 a 4 célu- fuertemente acidófilas y numerosos micronu-
las rodeados por 3 a 4 células prefoliculares cleolos fuertemente acidófilos alrededor de
cada uno. En el vitelario se observan ovoci- estos últimos y próximos a la envoltura nu-
tos primarios en el “segundo periodo de cre- clear. El citoplasma de los ovocitos en el es-
cimiento”, los cuales se disponen en forma tadio previtelogénico I es basófilo finamente
lineal y aumentan progresivamente de tama- granular, observándose una disminución pro-
ño hacia el extremo proximal de la ovariola, gresiva de la basofilia a medida que aumen-
observándose primero 2 o 3 ovocitos esféri- ta el tamaño de los mismos. En algunos ca-
cos en postpaquinema y rodeados cada uno sos, se observan pequeños gránulos fuerte-
o de a pares por 2 o 3 células prefoliculares mente acidófilos próximos a la envoltura
y luego 4 a 8 ovocitos primarios al comien- nuclear, que probablemente estén relaciona-
zo del subestadio de diplonema de la meio- dos con la presencia de los cuerpos proteino-
sis, los cuales serán considerados en este tra- sos ubicados dentro de la vesícula germinal.
bajo como ovocitos en el estadio previtelogé- Tanto el aspecto de los cromosomas, como la
nico I (Tabla 1, Fig. 6). En esta etapa de la presencia de los cuerpos proteinosos y el cre-
ovogénesis (diplonema), se produce la pri- cimiento de la masa celular, indican que es-
mera detención de la meiosis y los ovocitos tos ovocitos se encuentran en una etapa ini-
primarios pasarán por diferentes estadios de cial del subestadio de diplonema de la meio-
previtelogénesis y vitelogénesis en los cuales sis (Tabla 2, al final del trabajo, y Fig. 6).
se realizará la incorporación de diferentes
moléculas y nutrientes que le permitirán al- Estadio Ninfal IV (17 a 22 días después de
canzar su tamaño definitivo. la eclosión de las ninfas).— En este estadio,
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los ovarios están rodeados por abundante distal y dorsalmente en la cavidad abdomi-
cuerpo graso y han aumentado su volumen nal para formar el ligamento suspensorio que
abarcando desde el 1° al 4° segmento abdo- se une al diafragma dorsal. El ligamento
minal. Cada ovariola está rodeada por una suspensorio está formado por células alarga-
delgada capa de células epiteliales planas, das cuyos núcleos ovoideos con la cromatina
con núcleos voluminosos que sobresalen del condensada en gránulos gruesos y separa-
escaso citoplasma levemente acidófilo, que dos, están rodeados por abundante citoplas-
constituyen la vaina externa que separa tan- ma levemente acidófilo.
to al germario como al vitelario del tejido En el extremo distal del germario, a conti-
graso circundante. La vaina externa se pro- nuación del filamento terminal se observan
longa en el extremo distal de cada ovariola aproximadamente 35 ovogonias, la mayoría
en un delgado filamento terminal, y todos de las cuales forman grupos de 4 o 5 células
los filamentos de un mismo ovario se unen cada uno y se encuentran en interfase mitóti-

Figura 5: Región proximal de las ovariolas (OV) de un ejemplar en el Estadio Ninfal II. Entre
los ovocitos primarios (op) en diferentes estadios de la primera división meiótica, se observan
núcleos picnóticos (np). H-E. Barra = 1,2 µm.
Figura 6: Corte sagital del ovario en el Estadio Ninfal III, se observan las ovariolas (OV) limi-
tadas por la vaina externa (VE). En cada ovariola, se identifica en la región distal se identifica
el germario (G) y en la región media y proximal el vitelario (VT). En el vitelario, se observan
ovocitos en postpaquinema (pp) y en el estadio previtelogénico I (prI). Se destacan los cuer-
pos proteinosos (cu) en la vesícula germinal de estos ovocitos. H-E. Barra = 18,2 µm.
Figura 7: Región proximal de las ovariolas en el Estadio Ninfal IV rodeada por abundante
cuerpo graso (CGR). Se observan folículos ováricos constituidos por una capa continua de
células foliculares planas (cf), con ovocitos en el estadio previtelogénico II (prII). Se destaca
la vesícula germinal (g) en posición central con numerosos cuerpos proteinosos (cu). H-E.
Barra = 18,2 µm.
Figura 8: Región proximal de la ovariola en el Estadio Ninfal V. Se observa un folículo basal
rodeado por epitelio folicular simple (EP) y en su interior un ovocito primario en el estadio
previtelogénico III (prIII). En la vesícula germinal se destacan los nucleolos (n) entre los cuer-
pos proteinosos (cu). H-E. Barra = 18,2 µm.
38 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

ca, observándose solo algunas células en los ovarios están rodeados por gran cantidad de
estadios de profase y metafase, mientras que cuerpo graso, tubos de Malpighi y traqueo-
en el extremo proximal se observan ovocitos las, y entre las ovariolas se observa abun-
primarios (en grupos de 2 o 3 células rodea- dante tejido graso. En cada ovariola puede
dos por células prefoliculares) en el primer observarse claramente el límite entre germa-
período de crecimiento, de los cuales en cada rio y vitelario, marcado por una delgada
corte pueden observarse aproximadamente 1 capa de células prefoliculares, y dentro del
en preleptonema, 3 en leptonema y 5 en pa- vitelario, cada folículo ovárico está separado
quinema inicial y avanzado (Tabla 1). por 2 a 3 capas de células interfoliculares
En el vitelario además de los ovocitos pri- entre los ovocitos en el estadio previtelogéni-
marios en postpaquinema (3 o 4) y en el esta- co I y de 6 a 8 capas entre los ovocitos en
dio previtelogénico I (aproximadamente 10 los estadios previtelogénicos II y III.
células dispuestas linealmente), se observan 4 En estas hembras, el germario ocupa solo
o 5 ovocitos en una etapa más avanzada de una pequeña zona del extremo distal de cada
diplonema que será considerada como estadio ovariola, observándose una importante re-
previtelogénico II. Estos ovocitos son ligera- ducción en el número de ovogonias (12 a 14
mente ovoideos y aumentan de tamaño hacia por corte longitudinal) y de actividad mitóti-
el extremo proximal de la ovariola, con un ca de las mismas, ya que la mayoría se en-
diámetro mayor que oscila entre 72 y 120 µm. cuentran en interfase y solo algunas en pro-
Estos ovocitos previtelogénicos no ocupan fase mitótica. A continuación de las ovogo-
completamente la luz del folículo ovárico, el nias, en el extremo proximal del germario,
cual está constituido aproximadamente por se observan 6 a 8 ovocitos primarios en pre-
10 a 26 células foliculares alargadas con nú- leptonema y leptonema y 3 o 4 en paquine-
cleos ovoides y abundante citoplasma basófilo ma. El vitelario en cambio abarca la mayor
entre ellos (Tabla 1, Fig. 7). parte de la ovariola, observándose entre 15 y
En los ovocitos en estadio previtelogénico 16 ovocitos primarios en diferentes etapas
II, la vesícula germinal es grande y esférica del segundo periodo de crecimiento. En el
(42 a 54 µm), se ubica en el centro del mis- extremo distal del vitelario, se observa la
mo y está rodeada por una envoltura nu- misma cantidad de ovocitos primarios en los
clear fuertemente basófila, observándose en subestadios de postpaquinema y diplonema
ella una mayor cantidad de cromatina des- (estadios previtelogénicos I y II) que en el
condensada y de cromómeros que se distri- cuarto estadio ninfal. Sin embargo, los ovo-
buyen en forma homogénea sin llegar a cu- citos en el estadio previtelogénico II han au-
brir completamente el jugo nuclear. En el mentado de tamaño, llegando a tener los
interior de la vesícula germinal de estos ovo- más grandes un diámetro mayor de 210 µm.
citos se observan aproximadamente 11 cuer- Estos ovocitos ocupan completamente la luz
pos proteinosos de menor tamaño que en el del folículo ovárico, el cual llega a tener
estadio anterior y 2 o 3 macronucleolos hasta 45 células foliculares en los más gran-
fuertemente acidófilos y numerosos micronu- des. En el extremo proximal del vitelario (a
cleolos ubicados entre los cuerpos basófilos continuación de los ovocitos anteriores), se
o bien superpuestos con ellos. El citoplasma observan 3 o 4 ovocitos alargados (con un
granular de estos ovocitos presenta una ba- diámetro mayor que oscila entre 222 y 288
sófilia menor que en el estadio I de previtelo- µm) en una etapa posterior del subestadio de
génesis, observándose pequeños gránulos diplonema, la cual será considerada como
fuertemente acidófilos próximos a la envol- estadio previtelogénico III (Tabla 1). Estos
tura nuclear y algunos de menor tamaño en ovocitos ocupan completamente la luz del
el resto del citoplasma (Tabla 2, Fig. 7). folículo ovárico, el cual está constituido por
un epitelio cúbico simple de 45 a 65 células
Estadio Ninfal V (23 a 30 días después de la en activa división. Las células foliculares de
eclosión de las ninfas).— En este estadio, los estos folículos, con limites celulares clara-
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 39

mente visibles, presentan grandes núcleos copuladas, se observa abundante tejido graso
esféricos con la cromatina condensada en rodeando externamente a cada ovario y, entre
gránulos gruesos y finos y escaso citoplasma las ovariolas, alrededor del extremo proxi-
granular basófilo alrededor de los mismos. mal. En el germario de cada ovariola, el
El epitelio folicular descansa sobre una lá- número de ovogonias y de ovocitos prima-
mina basal fuertemente acidófila, que está rios en el primer período de crecimiento es
en íntimo contacto con la vaina externa de considerablemente menor al observado en
cada ovariola y correspondería a la túnica los primeros estadios ninfales, ya que la
propia. mayoría de las células se encuentran en el
En los ovocitos en el estadio previtelogéni- “segundo periodo de crecimiento”, por lo que
co III, la vesícula germinal, delimitada por en estas hembras es difícil observar las pri-
una envoltura nuclear fuertemente basófila, meras etapas de la ovogénesis. A continua-
alcanza un diámetro de 60 µm y está ligera- ción del filamento terminal, en el germario se
mente desplazada al extremo posterior del observan aproximadamente 5 ovogonias en
ovocito. En el interior de la vesícula germinal, interfase o bien en los primeros estadios de
la cromatina está completamente desconden- la mitosis, 2 o 3 ovocitos primarios en lepto-
sada, ya que se presenta en forma de finas y nema y 4 o 5 en paquinema, ambos tipos
abundantes hebras con numerosas condensa- celulares rodeados por células del tejido pre-
ciones basófilas (cromómeros), que cubren folicular. Siguiendo al germario de cada
completamente el jugo nuclear dando la ima- ovariola se observa un acúmulo de aproxi-
gen de cromosomas plumulados. Entre la cro- madamente 8 células prefoliculares que lo
matina, se observan 6 a 7 cuerpos proteinosos separan del vitelario.
pequeños y compactos, y 3 a 4 nucleolos En estas hembras, en la región distal y
granulares fuertemente acidófilos, ambas es- media del vitelario se observan aproximada-
tructuras ubicadas preferentemente en el cen- mente 3 o 4 ovocitos primarios en postpa-
tro de la vesícula germinal (Fig. 8). quinema y 14 ovocitos en el segundo perio-
El ooplasma de los ovocitos en el estadio do de crecimiento en los estadios previtelo-
previtelogénico III está constituido por finas genicos I, II y III, ya mencionados en ejem-
y abundantes granulaciones basófilas que le plares del Estadio Ninfal V, mientras que en
confieren una basofilia menor a la observada el extremo proximal se observan 4 ovocitos
en los ovocitos de estadios anteriores, donde en el estadio previtelogénico IV, los cuales al
la granulación es más gruesa y menos abun- igual que los restantes ovocitos del vitelario,
dante. En el ooplasma perinuclear, al igual se disponen linealmente y aumentan progre-
que en los otros estadios de previtelogénesis, sivamente de tamaño hacia el extremo de la
se observa pequeños gránulos fuertemente ovariola (Tabla 1). Entre el extremo proxi-
acidófilos próximos a la envoltura nuclear. mal de cada ovariola y el pedicelo se obser-
En el ooplasma perinuclear y rodeando a la va un tapón epitelial de mayor espesor que
vesícula germinal de algunos de estos ovoci- en ejemplares del Estadio Ninfal V, el cual
tos se puede observar además una o más ve- está constituido por 6 capas de 2 células fo-
sículas grandes o “núcleos accesorios”, con liculares delgadas, con grandes núcleos en
una envoltura idéntica a la envoltura nu- posición externa y escaso citoplasma granu-
clear del ovocito y en cuyo interior se obser- lar levemente basófilo entre ellos. El epitelio
van pequeños acúmulos de material basófilo folicular que rodea a cada ovocito previtelo-
y acidófilo (Tabla 2, Fig. 9). génico del vitelario se apoya sobre una del-
gada lámina basal fuertemente acidófila o
3. MORFOGÉNESIS DEL OVARIO Y OVOGÉNESIS túnica propia, la cual se prolonga a través
EN EL IMAGO del tejido interfolicular y separa a ambos
Imago 1 (24 y 72 horas después de la muda tejidos de la vaina epitelial externa que ro-
imaginal).— En hembras vírgenes, en las dea a cada ovariola (Fig. 10).
primeras horas de imago que aún no fueron Los ovocitos en el estadio previtelogénico
40 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

IV, observado en hembras vírgenes de 24 ho- de estriado. Este epitelio se encuentra en un
ras de imago, están rodeados por un epitelio activo proceso de división celular, ya que se
folicular simple constituido por células cilín- observan numerosas células foliculares en
dricas bajas, con limites celulares poco cla- metafase y anafase mitótica (Fig. 10).
ros, por lo que es difícil determinar el núme- Los ovocitos en el estadio previtelogénico
ro de células foliculares que constituyen IV son alargados y ligeramente ovoideos,
cada folículo. Dichas células presentan gran- con un diámetro mayor que oscila entre 312
des núcleos esféricos que ocupan la mayor µm en los más pequeños y 468 µm en ovoci-
parte de las mismas, con cromatina conden- tos próximos al pedicelo. La vesícula germi-
sada en gránulos gruesos y separados, esca- nal de estos ovocitos mide desde 66 a 72 µm
so citoplasma granular basófilo, solo en la y está desplazada hacia el extremo posterior
región apical y la membrana apical con bor- del mismo. La cantidad y aspecto de la cro-

Figura 9: Folículo basal de la ovariola en el Estadio Ninfal V, se observa par te de un ovocito
en el estadio previtelogénico III (prIII). Se destaca la vesícula germinal (g) con la cromatina
descondensada, cuerpos proteinosos (cu) y nucleolos (n). En el ooplasma perinuclear del
ovocito se observa un núcleo accesorio (na). H-E. Barra = 1,2 µm.
Figura 10: Región proximal de las ovariolas en una hembra de 24 horas de imago, se ob-
serva el folículo basal separado del pedicelo (P) por un delgado tapón epitelial (TE). Se des-
taca el epitelio folicular (EF) en activa división rodeado externamente por la túnica propia (TP)
y la vaina externa (VE) de la ovariola. En el interior del folículo, se observa un ovocito prima-
rio (op) en el estadio previtelogénico IV (prIV). H-E. Barra = 18,2 µm.
Figura 11: Corte sagital de una hembra de 5 días de imago. Se observa la glándula acceso-
ria (GA) del aparato reproductor con secreción acidófila y el extremo proximal de una ovario-
la en continuidad con el pedicelo (P) rodeado por cuerpo graso y traqueolas. El folículo basal
está constituido por un epitelio folicular (EF) cilíndrico simple en activa división que contiene
un ovocito primario (op) en el estadio vitelogénico I (vI). Se destaca la formación de plaquetas
vitelinas (pv) en el ooplasma cortical del ovocito. H-E. Barra = 45,3 µm.
Figura 12: Corte sagital de la región ventral del ovario de una hembra de 10 días de imago.
En el folículo basal de las ovariolas se observa un ovocito en estadio vitelogénico IIa (vIIa),
destacándose la vesícula germinal (g) en el extremo posterior del ovocito y el ooplasma cu-
bierto de plaquetas vitelinas (pv). H-E. Barra = 45,3 µm.
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 41

matina en el nucleoplasma es similar a la que serán considerados en este trabajo como
observada en los estadios anteriores de pre- ovocitos en el estadio vitelogénico I, indicio
vitelogénesis, pero en estos ovocitos, los del comienzo del “tercer periodo de creci-
cuerpos proteinosos son menos compactos y miento” del ovocito (Tabla 1).
parecen grandes acúmulos basófilos dispues- Los ovocitos primarios en el estadio vite-
tos preferentemente en la región central de logénico I están rodeados por un epitelio fo-
la misma. Además se observan 2 macronu- licular simple con limites celulares poco vi-
cleolos compactos y fuertemente acidófilos sibles, de un espesor considerablemente ma-
superpuestos con los cuerpos proteinosos y yor al observado en ovocitos al final de la
numerosos micronucleolos junto a la cara previtelogénesis y, al igual que en ovocitos
interna de la envoltura nuclear. El ooplasma previtelogénicos IV, se encuentra en un activo
de estos ovocitos está constituido por finas proceso de división celular, ya que en él se
granulaciones acidófilas con escasas plaque- observan numerosas células en metafase y
tas vitelinas, pequeñas y fuertemente acidófi- anafase mitótica. Dicho epitelio está consti-
las en la periferia del ovocito. La membrana tuido por células cilíndricas altas con gran-
plasmática es delgada y fuertemente acidófi- des núcleos ovoideos en posición basal, con
la (Tabla 2, Fig. 10). Tanto el aumento de la cromatina condensada en gránulos grue-
diámetro de la vesícula germinal y el despla- sos y separados y envoltura nuclear poco vi-
zamiento de ésta hacia el extremo posterior sible. El citoplasma es basófilo finamente
del ovocito como la ligera acidofilia del granular y está localizado principalmente en
citoplasma, indicarían la finalización del la región apical de la célula y la membrana
segundo periodo de crecimiento (que incluye apical presenta un fino borde estriado. El
ovocitos en postpaquinema y en los diferen- epitelio folicular de estos ovocitos se apoya
tes estadios de previtelogénesis) que tiene sobre una lámina basal fuertemente acidófi-
lugar dentro del subestadio de diplonema de la, de mayor espesor que en los restantes fo-
la meiosis. lículos del vitelario (Fig. 11).
En el ooplasma de algunos ovocitos pre- En ovocitos del estadio vitelogénico I se
vitelogénicos IV, se puede observar un núme- observa un importante crecimiento que se
ro variable de “núcleos accesorios” que se manifiesta principalmente en la cantidad de
presentan como vesículas de diferentes diá- ooplasma de los mismos, ya que la vesícula
metros, íntimamente unidas entre sí y en germinal mantiene un diámetro similar al
proximidad a la vesícula germinal, rodeadas observado en hembras de 24 horas de imago,
por una membrana semejante a la envoltura mientras que el diámetro mayor de estos ovo-
nuclear pero de menor espesor, observándo- citos oscila entre 540 y 594 µm. En estos ovo-
se con gran aumento, pequeños canales que citos, la vesícula germinal ha completado su
atraviesan las membranas de vesículas veci- desplazamiento hacia el extremo posterior
nas y escaso material granular basófilo en el del mismo (próximo al pedicelo de la ovario-
interior de las mismas. Las diferencias mor- la), lo que indicaría el inicio del proceso de
fológicas existentes entre estos núcleos acce- vitelogénesis. La cromatina se encuentra en
sorios y los descriptos durante el desarrollo forma de finas hebras y abundantes gránulos
postembrionario probablemente se deban a basófilos (cromómeros) que cubren la mayor
que se encuentran en una etapa diferente de parte del jugo nuclear y la envoltura nuclear
su formación. es claramente visible. En la vesícula germinal
de estos ovocitos no se observan cuerpos pro-
Imago 2 (5 días después de la muda imagi- teinosos y los nucleolos se presentan como
nal).— En estas hembras se observan impor- pequeñas granulaciones fuertemente acidófi-
tantes cambios en sus gónadas, observándo- las o micronucleolos. El citoplasma está cons-
se en el extremo proximal del vitelario de tituido en su mayor parte por finas granula-
cada ovariola ovocitos en diplonema en una ciones acidófilas, observándose solo en la re-
etapa inicial del proceso de vitelogénesis, gión cortical pequeñas plaquetas vitelinas
42 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

fuertemente acidófilas. En este estadio de vite- mente ondulada, fragmentada en algunos
logénesis, el ovocito comienza a sintetizar puntos y con finas granulaciones basófilas
parte de su cubierta externa, observándose junto a la cara interna y externa de la mis-
entre el epitelio folicular y el oolema, una ma. Las características de la vesícula germi-
delgada matriz extracelular constituida por nal de estos ovocitos indicarían que en las
finas granulaciones fuertemente acidófila que células en el estadio vitelogénico IIb se ha
corresponde a la envoltura vitelina en forma- iniciado el proceso de condensación cromó-
ción (Tabla 2, Fig. 11). somica y fragmentación de la envoltura nu-
En estas hembras, alrededor del extremo clear. Por lo tanto, estos ovocitos se encuen-
proximal de las ovariolas, se observa un tran en la etapa previa a la ruptura de la
gran desarrollo del cuerpo graso, cuyos adi- vesícula germinal, indicando la finalización
pocitos de forma cilíndrica, se unen forman- del subestadio de diplonema. En el citoplas-
do largos cordones irregulares. Dichas célu- ma de ambos tipos de ovocitos se observan
las presentan núcleos esféricos y fuertemente finas granulaciones acidófilas y abundantes
basófilos en posición central, con la croma- plaquetas vitelinas esféricas de diferentes
tina condensada en gránulos gruesos que diámetros, variando en cantidad y diámetro
cubren completamente el nucleoplasma. Al- según el tamaño del ovocito. En el ooplasma
rededor del núcleo se observa abundante de los ovocitos en el estadio vitelogenicos IIb
citoplasma de aspecto ligeramente esponjoso se observa la mayor cantidad de plaquetas
(Fig. 11). vitelinas (Tabla 2, Fig. 13).
Los ovocitos en el estadio vitelogénico II
Imago 3 (10 días después de la muda imagi- están rodeados por un epitelio folicular cons-
nal).— En estas hembras, en el extremo tituido por células cilíndricas altas con for-
proximal del vitelario de cada ovariola, se ma de botella o clava, con grandes núcleos
observan ovocitos primarios en una etapa fuertemente basófilos ubicados en la base de
más avanzada del proceso de vitelogénesis la célula y la cromatina condensada en grá-
que será considerado como estadio vitelogé- nulos gruesos que cubren completamente el
nico II (Tabla 1). Estos ovocitos son ovoideos nucleoplasma. Alrededor del núcleo, se ob-
y presentan un rango de crecimiento mayor serva escaso citoplasma basófilo finamente
al observado en los ovocitos en el estadio vi- granular, mientras que en la región apical
telogénico I, ya que su diámetro mayor osci- de la célula se observa abundante citoplas-
la entre 700 y 1500 µm. La vesícula germi- ma homogéneo fuertemente basófilo. En los
nal permanece en el extremo posterior del ovocitos en el estadio vitelogénico IIb, se
mismo, con un diámetro aproximado de 66 observa un halo blanco en la región su-
µm. En este estadio de vitelogénesis, se dife- pranuclear de las células foliculares, que
rencian dos tipos de ovocitos: 1) los de me- corresponde a la imagen negativa del Golgi,
nor tamaño, que serán considerados como indicando una intensa actividad secretora.
ovocitos en estadio vitelogénico IIa, en cuya En esta zona de la ovariola (al igual que en
vesícula germinal se observa parte de la cro- el resto del vitelario), entre la membrana
matina en forma de finas hebras y el resto apical del epitelio folicular y la membrana
condensada en gránulos fuertemente basófi- plasmática del ovocito en el estadio vitelogé-
los que se concentra en pequeños acúmulos nico II, se observa una delgada matriz extra-
en la región central de la misma, donde se celular constituida por finas granulaciones
observa además 6 micronucleolos. La envol- acidófilas (Tabla 2, Figs. 12 y 13).
tura nuclear de estos ovocitos es completa-
mente lisa (Fig. 12); y 2) los de mayor tama- Imago 4 (12 días después de la muda imagi-
ño, considerados como ovocitos en estadio nal).— En estas hembras, el folículo basal
vitelogénico IIb, en cuya vesícula germinal de cada ovariola contiene un ovocito prima-
se observa mayor cantidad de cromatina rio en la etapa final del proceso de vitelogé-
condensada y la envoltura nuclear es ligera- nesis incluido en el subestadio de diplonema
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 43

de la meiosis, que será considerado como es- aspecto vacuolar en la región basal y apical
tadio vitelogénico III. Como en estos ovocitos de las mismas (Tabla 2, Fig. 15).
aún no se realizó el proceso de coriogénesis En las ovariolas de hembras de 12 días
que en estos insectos se produce en el inte- de imago, en íntimo contacto con la mem-
rior de cada ovariola antes de la ovulación, brana basal del epitelio folicular de los ovo-
fue necesario hacer una subdivisión dentro citos del vitelario se observa una delgada
de este estadio de vitelogénesis y por lo tan- lámina basal levemente acidófila, que co-
to los ovocitos del folículo basal, que care- rresponde a la túnica propia. En cortes
cen de corion, serán considerados como ovo- transversales de estas hembras, coloreados
citos en el estadio vitelogénico IIIa. Estos con la técnica de Verhoeff, se determinó que
ovocitos presentan un diámetro mayor que la lámina basal que rodea a los ovocitos del
oscila entre 2,64 a 3,36 µm y por lo tanto se vitelario, está constituida por una gruesa
encuentran en la etapa final del tercer perio- capa interna de fibras de colágeno en inti-
do de crecimiento (Fig. 14). mo contacto con la membrana basal del epi-
Los ovocitos en el estadio vitelogénico telio folicular y una delgada capa externa
IIIa, presentan un ooplasma completamente de fibras elásticas en contacto con la vaina
cargados de plaquetas vitelinas de forma externa de la ovariola (Fig. 16).
hexagonal que se unen formando grandes En estas hembras, casi todos los ovocitos
masas de vitelo en el interior del mismo, del extremo proximal de las ovariolas se
observándose restos de citoplasma granular encuentran en la etapa final de la vitelogéne-
acidófilo solo en la región cortical, donde se sis, observándose en cada ovario la madura-
observa una estrecha zona de gránulos de ción simultánea de aproximadamente 18
diferentes diámetros fuertemente acidófilos ovocitos, lo cual coincide con el límite supe-
junto a la cara interna del oolema. En estos rior del rango alcanzado en el número de
ovocitos la vesícula germinal no es visible huevos por desoves de esta especie. Sin em-
(Tabla 2, Fig. 14). En el estadio vitelogénico bargo, en un número reducido de ovariolas,
IIIa se completa la síntesis de la envoltura a continuación de los ovocitos en el estadio
vitelina, la cual se identifica como una del- vitelogénico I, se observa un “cuerpo de re-
gada matriz extracelular de aspecto homo- absorción”, producto de la degeneración de
géneo y levemente acidófila, ubicada entre un ovocito vitelogénico II que no ha comple-
el oolema y la membrana plasmática del tado su desarrollo (Fig. 14). En estas hem-
epitelio folicular (Fig. 15). Cada ovocito en bras se observa un ligero adelgazamiento
el estadio vitelogénico IIIa está rodeado por del tapón epitelial que impide la comunica-
epitelio folicular simple, constituido por cé- ción entre el lumen de cada ovariola y la luz
lulas cúbicas en la mayor parte del folículo del extremo distal del oviducto lateral res-
que sintetizarán el corion, y células cilíndri- pectivo, quedando constituido solamente por
cas en el extremo posterior del ovocito rela- 3 o 4 capas de células con núcleos pequeños
cionadas con la formación del micrópilo y y abundante citoplasma levemente basófilo
earópilo del huevo. El núcleo de las células entre ellos (Fig. 15).
foliculares cúbicas es esférico en posición Los “cuerpos de reabsorción” observados
basal, con la cromatina condensada en grá- en estas hembras se encuentran en las prime-
nulos finos distribuidos en forma homogénea ras etapas de su formación, ya que son alar-
cubriendo completamente el nucleoplasma y gados y miden aproximadamente 1,5 mm de
1 o 2 nucleolos acidófilos claramente visi- longitud. Cada uno de estos cuerpos está se-
bles. El citoplasma, fuertemente basófilo y parado del folículo anterior, por tejido inter-
finamente granular, está concentrado princi- folicular, en el cual la mayor parte de las
palmente en la región apical de la célula. células se disponen en forma irregular, y del
Las células cilíndricas presentan un núcleo de pedicelo por un tapón epitelial de células
características similares a las anteriores, completamente desordenadas, entre las que
pero el citoplasma es menos basófilo y de se observan acúmulos de pigmentos color
44 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

ámbar producidos por la reabsorción del vi- citoplasma granular levemente acidófilo y
telo del ovocito degenerado. Cada cuerpo de grandes núcleos esféricos con la cromatina
reabsorción está limitado externamente por condensada en gránulos finos que cubren
una gruesa túnica propia lisa y fuertemente completamente el nucleoplasma o bien pe-
acidófila, que se pliega profundamente en el queños y picnóticos. Entre las células folicu-
extremo anterior (tejido interfolicular) y lares se pueden observar grandes vacuolas y
posterior (tapón epitelial) del mismo. En el restos de vitelo fuertemente acidófilo.
interior de los cuerpos de reabsorción se ob-
servan numerosas células foliculares esféri- Imago 5 (14 días de imago durante la cópula
cas y de disposición irregular, con escaso y a las 12, 24 y 48 horas después de la cópu-

Figura 13: Corte sagital de la región ventral del ovario de una hembra de 10 días de imago.
Se observa parte de un folículo basal de una ovariola con un ovocito en estadio vitelogénico
IIb (vIIb), se destaca la vesícula germinal (g) en el extremo posterior del ovocito con la en-
voltura nuclear (en) ondulada y fragmentada, el ooplasma perinuclear cubierto de plaquetas
vitelinas (pv), y externamente al oolema una gruesa matriz extracelular (MX). Se destaca las
características citológicas del epitelio folicular (EF) con intensa actividad secretora. H-E.
Barra = 1,2 µm.
Figura 14: Corte sagital del ovario de una hembra de 12 días de imago. En el folículo basal
de las ovariolas, se observan ovocitos en estadio vitelogénico IIIa (vIIIa) con el ooplasma
cargado de vitelo (v) y rodeados por un epitelio folicular (EF) cúbico simple con células cilín-
dricas en el extremo posterior del ovocito. Se destaca una ovariola con un cuerpo de reab-
sorción (CR) en su extremo proximal. H-E. Barra = 288 µm.
Figura 15: Región proximal de la ovariola de una hembra de 12 días d imago. Se observa el
folículo basal con un ovocitos en estadio vitelogénico IIIa (vIIIa) separado del oviducto lateral
(OL) por un grueso tapón epitelial (TE). Se destaca la formación de gránulos acidófilos (GC)
junto a la cara interna del oolema y externamente a esta la envoltura vitelina (MV). Se obser-
va la modificación del epitelio folicular (EF) en la región micropilar. H-E. Barra = 45,3 µm.
Figura 16: Corte transversal de un ovocito en el estadio vitelogénico IIa (vIIa) de una hembra
de 12 días de Imago. Se detaca el ooplasma cargado de vitelo (v). Externamente al epitelio
folicular (EF), se obser va la túnica propia (TP) constituida por fibras elásticas. H.V. Barra =
6,6 µm.
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 45

la).— En hembras fijadas durante la primera En los ovarios de hembras aisladas del
cópula, los ovarios están completamente de- macho y fijadas a las 12, 24 y 48 horas des-
sarrollados y en cada ovariola se puede dis- pués de la primera cópula, se observaron en
tinguir claramente el germario con escasas el interior de los 2 últimos folículos del vite-
ovogonias y ovocitos primarios en el primer lario, ovocitos en los estadios vitelogénicos
periodo de crecimiento y el vitelario con IIIa y IIIb y a continuación de éstos un grue-
ovocitos primarios en el segundo y tercer so tapón epitelial que impide el descenso de
periodo de crecimiento, observándose desde los ovocitos maduros.
el filamento terminal al pedicelo, las dife-
rentes etapas de la ovogénesis descriptas en Imago 6 (15, 20 y 25 días después de la
hembras adultas de diferentes edades (Tabla muda imaginal).— Las observaciones reali-
1). Sin embargo, en el folículo basal de zadas en gónadas y demás órganos reproduc-
cada ovariola de estas hembras, se observa tivos de estas hembras (ya copuladas), mos-
un ovocito primario en la etapa final del es- traron un desarrollo completo de la ovogé-
tadio III de vitelogénesis, considerado como nesis dentro del ovario, observándose en el
estadio vitelogénico IIIb. Estos ovocitos man- interior del folículo basal de cada ovariola,
tienen las dimensiones y características cito- ovocitos en el estadio vitelogénico IIIa o IIIb
lógicas de los observados en el estadio vite- (con o sin corion) y en los ovarios de algu-
logénico IIIa, pero están cubiertos externa- nas de estas hembras indicios de la primera
mente además de la envoltura vitelina por el ovulación. En estas hembras, cada ovariola
corion. El corion que rodea a estos ovocitos contiene la serie completa de las diferentes
es delgado, fuertemente acidófilo y está etapas de la ovogénesis, desde ovogonias en
constituido por una capa interna o endoco- el extremo distal del germario hasta ovocitos
rion, ubicada junto a la envoltura vitelina, y primarios en el estadio vitelogénico II en el
una capa externa o exocorion, delgada, ho- extremo proximal del vitelario, ya que los
mogénea, fuertemente acidófila y con depre- ovocitos en el estadio vitelogénico III fueron
siones hexagonales en su superficie externa, ovulados (Tabla 1). A continuación del últi-
en íntimo contacto con las células folicula- mo folículo de cada ovariola se observa una
res que rodean al ovocito. En estos ovocitos estrecha zona de tejido interfolicular (con
en los cuales se ha completado el proceso de células aplanadas dispuestas en capas para-
coriogénesis, el epitelio folicular es delgado lelas) que lo separa de un corto conducto de
y está formado por células cúbicas bajas de paredes gruesas y luz estrecha ubicado en la
escasa actividad secretora. En ellas se obser- base de la ovariola. Cada uno de estos con-
van núcleos esféricos ligeramente comprimi- ductos corresponde a un “cuerpo lúteo”, for-
dos sobre la membrana basal, la cromatina mado por la reducción progresiva del folícu-
está condensada en gránulos gruesos y sepa- lo basal de la ovariola, luego de la ovula-
rados, el citoplasma, ubicado principalmen- ción de un ovocito maduro en el estadio vite-
te en la región apical, es basófilo finamente logénico IIIb.
granular. La membrana apical de las células La longitud de cada cuerpo lúteo varía
foliculares está en contacto directo con el según el grado de contracción del folículo,
exocorion (Tabla 2, Fig. 17). pero en general, están constituidos por 3 o
En hembras fijadas durante la cópula, el más capas de células foliculares en degene-
folículo basal de cada ovariola está rodeado ración que rodean a una pequeña cavidad
externamente por la túnica propia y la vaina central. Las células foliculares son pequeñas
externa completamente adelgazadas, y a y ovoideas y, en ellas, se observan grandes
continuación de este folículo se observa un núcleos fuertemente basófilos con la croma-
delgado tapón epitelial constituido por 2 o 3 tina condensada en gránulos gruesos que
capas de células, que impiden el descenso de cubren completamente el nucleoplasma y
los ovocitos maduros a través del pedicelo escaso citoplasma levemente acidófilo alre-
hacia la luz del oviducto lateral. dedor de los mismos. Cada cuerpo lúteo está
46 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

limitado externamente por una delgada túni- basal del pedicelo, se observaron restos de
ca propia, que forma pequeños pliegues en folículos con grandes vacuolas cargadas de
el extremo superior e inferior del folículo, pigmentos amarillos. En estas hembras se
producidos por su proceso de contracción. observaron ovocitos en el estadio vitelogéni-
En ovarios de hembras fijadas entre los co IIIb (con el extremo micropilar dirigido
15 y 25 días de imago, en el extremo proxi- hacia el extremo posterior del abdomen) en
mal de algunas ovariolas, a continuación la región distal y media de los oviductos la-
del tapón epitelial que separa el folículo terales, con un corion de aspecto diferente al

Figura 17: Corte sagital del ovario de una hembra de 14 días de imago fijada durante la cópu-
la. Se observa parte del folículo basal de dos ovariolas con ovocitos en estadio vitelogénico IIIb
(vIIIb), cargados de vitelo (v). Entre el epitelio folicular (EF) y la envoltura vitelina (MV) de cada
ovocito, se observa un corion formado por una gruesa capa interna o endocorion (COI) y una
delgada capa externa o exocorion (COE). Externamente al epitelio folicular de cada ovariola se
observa la túnica propia (TP) y la vaina externa (VE). H-E. Barra = 1,2 µm.
Figura 18: Corte sagital de una hembra de 16 días de imago. Se observa el extremo proxi-
mal de una ovariola con ovocitos en el estadio vitelogénico II (vII), un pequeño cuerpo lúteo
(CL) y a continuación del pedicelo (P), la región distal del oviducto lateral (OL) en cuya luz se
observa un ovocitos en estadio vitelogénico IIIb (vIIIb). En estos ovocitos, en los que el vitelo
se ha desprendido por el procesamiento histológico, se observa un aumento de espesor y
cambio de coloración del exocorion (COE). H-E. Barra = 288 µm.
Figura 19: Corte sagital de una hembra de 30 días de imago. Se observa el extremo proxi-
mal de las ovariolas con ovocitos primarios (op) en estadio vitelogénicoIIIa (vIIIa) y a continua-
ción de estos un cuerpo lúteo (CL), producto de la ovulación de un ovocito maduro. H-E.
Barra = 288 µm.
Figura 20: Extremo proximal de la ovariola de una hembra de 30 días de imago, donde se
observa parte de un folículo basal con un ovocito en estadio vitelogénicoIIIa (vIIIa), separado
del cuerpo lúteo (CL) por un delgado tapón epitelial (TE). Se destaca las modificaciónes del
epitelio folicular que rodea al ovocito con el del cuerpo lúteo, con células foliculares (cf) dis-
puestas en forma irregular y numerosos núcleos picnótico (np). Externamente al epitelio fo-
licular se observa la túnica propia (TP) plegada a nivel del tapón epitelial y la vaina externa
(VE) lisa. Se destaca el ooplasma del ovocito cargado de grandes plaquetas vitelinas (v) y
pequeños gránulos acidófilos (GC) junto a la cara interna del oolema. H-E. Barra = 18,2 µm.
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 47

observado en ovocitos maduros dentro de la proceso de diferenciación durante el desarro-
ovariola. El corion de estos ovocitos, presen- llo embrionario, postembrionario y el imago.
ta una coloración ligeramente pardusca y un Al mismo tiempo, se establecen parámetros
importante aumento del espesor del exo y morfofisiológicos para la identificación de
endocorion, lo cual se acentúa más en el las células sexuales durante las diferentes eta-
extremo posterior del ovocito o región mi- pas del proceso de ovogénesis. Las caracterís-
cropilar (Fig. 18). ticas observadas en el desarrollo y madura-
Aunque en estas hembras, todas las ova- ción del ovario de Baeacris punctulatus se
riolas presentan un cuerpo lúteo a continua- comparan con los aspectos mencionados so-
ción del folículo basal, el número de ovoci- bre este proceso para otras especies de Acridi-
tos dentro del oviducto lateral respectivo fue dae, como Anacridium aegyptium, Melano-
menor al número de ovocitos ovulados. Por plus differentialis, Locusta migratoria migra-
otra parte, en estas hembras no se observa- torioides, Poecilocerus pictus, Schistocerca
ron ovocitos maduros ni en la luz del oviduc- gregaria y para otros insectos.
to medio ni en la de la cámara genital. Mediante las observaciones realizadas, se
determinó que en Baeacris punctulatus los
Imago 7 (30 días de imago y al finalizar la ovarios se identifican por su organización
puesta).— Las observaciones realizadas en estructural a partir del Estadio X del desarro-
estas hembras, muestran en el folículo basal llo embrionario. En este estadio, cada ovario
de cada ovariola, un ovocito en el estadio está constituido por el número total de esbo-
vitelogénico IIIa (sin corion), separado del zos que forman las ovariolas de la hembra
pedicelo por un cuerpo lúteo reducido. Cada adulta.
cuerpo lúteo contiene abundantes células fo- En el Estadio Embrionario XI, antes de la
liculares, cuyos núcleos presentan un alto eclosión de las ninfas, en cada esbozo de
grado de condensación de la cromatina o ovariola se identifica el rudimento del ger-
bien son picnóticos y están rodeados por un mario con ovogonias en mitosis, preovocitos
citoplasma vacuolar levemente acidófilo. La y ovocitos primarios en preleptonema, lepto-
presencia de un ovocito completamente de- nema y cigonema de la profase I de la meio-
sarrollado y un cuerpo lúteo reducido (pro- sis. En Baeacris punctulatus como en Anacri-
ducto de la primera ovulación) en el extremo dium aegyptium (Colombo, 1953) los pre-
proximal de cada una de las ovariolas de ovocitos, por sus características citológicas,
estas hembras, indicaría que en estos ovarios corresponden a ovogonias en interfase pre-
se estaría por producir la segunda ovulación meiótica. Sin embargo, la determinación de
(Figs. 19 y 20). En estos ejemplares no se la iniciación de la meiosis ovogonial antes
observaron ovocitos en el estadio vitelogéni- de la eclosión de las ninfas en Baeacris punc-
co III ni en oviductos ni en cámara genital. tulatus no fue mencionada hasta el momento
Sin embargo, se observó una amplia comu- en otras especies de Acrididae, ya que los
nicación entre la luz de los oviductos latera- trabajos realizados por Nelsen (1934) en
les y el oviducto medio y un aumento de diá- Melanoplus differentialis, Roonwal (1937) y
metro de la dilatación dorsal de la cámara Gallois (1979a, 1979b) en Locusta migrato-
genital, lo que indicaría el paso a través de ria migratorioides, Colombo (1953, 1955) y
estos conductos de ovocitos recientemente Colombo y Bassato (1957) en Anacridium
ovulados. aegyptium, mencionan que tanto en el ma-
cho como en la hembra de estas especies, la
DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES meiosis comienza entre el primer y segundo
estadio ninfal.
En este trabajo, se realiza una descripción Los ovocitos primarios en insectos al
histológica sobre el desarrollo del ovario de igual que en vertebrados, durante la ovogé-
Baeacris punctulatus, en la cual se pone de nesis experimentarán una serie de transfor-
manifiesto las etapas más importantes en su maciones morfológicas e histoquímicas, tan-
48 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

to a nivel citoplasmático como nuclear, que Durante el segundo estadio ninfal, las ova-
les permite crecer y madurar. Los cambios riolas crecen en longitud debido a la activa
nucleares llevarán al final de la meiosis a la multiplicación de las células mesodérmicas y
formación de un núcleo haploide y los cam- las células de la línea germinal que en ellas se
bios citoplasmáticos permiten la acumula- desarrollan. Las ovogonias y los preovocitos
ción de los materiales necesarios para diri- ubicados lejos del filamento terminal adquie-
gir el desarrollo embrionario temprano ren una cierta ordenación con respecto a las
(Karp, 1987; Villecco, 1998; Alberts et al., células prefoliculares. Sin embargo, entre las
2004). En Baeacris punctulatus, al igual que ovogonias ubicadas en diferentes zonas del
en Anacridium aegyptium (Colombo, 1953), germario, no existen diferencias citológicas
una vez iniciada la meiosis, los ovocitos pri- significativas, como sucede con las esperma-
marios pasarán por tres periodos de creci- togonias en el macho de esta especie (Michel,
miento: el primero incluye desde el comien- 2007), que justifiquen la clasificación de las
zo de la profase I con el subestadio de pre- ovogonias en primarias, secundarias y tercia-
leptonema hasta el final del subestadio de rias como lo establece Colombo (1953) para
paquinema, el segundo abarca el subestadio Anacridium aegyptium.
de postpaquinema y el período de previtelo- En Baeacris punctulatus, entre los ovoci-
génesis del subestadio de diplonema, y el tos en el primer periodo de crecimiento, se
tercero abarca el periodo de vitelogénesis observan numerosos núcleos picnóticos, que
del subestadio de diplonema de la profase de pueden haberse originado de ovogonias o de
la primera división de maduración. Al final células prefoliculares que no continuaron su
del tercer período de crecimiento, el ovocito desarrollo. Este material cromatínico extra-
ha completado su desarrollo en el ovario y celular también fue observado por Colombo
está en condiciones de ser ovulado. (1953) en ovariolas de igual estadio ninfal
Durante el primer estadio del desarrollo de A. aegyptium, y este autor afirma que di-
postembrionario de la hembra de Baeacris cho material se origina de ovogonias en de-
punctulatus, las ovariolas son ligeramente generación y cumple una importante función
alargadas y están constituidas por el fila- en la iniciación de la meiosis tanto en la
mento terminal y la región del germario con ovogénesis como en la espermatogénesis de
ovogonias y preovocitos rodeados por célu- esta especie. En estudios previos realizados
las mesodérmicas indiferenciadas y grupos sobre espermatogénesis en B. punctulatus
de ovocitos primarios en preleptonema, lep- (Michel, 2007), no se observaron núcleos
tonema, cigonema y paquinema rodeados picnóticos en los folículos testiculares, por lo
por células prefoliculares. En esta especie, al que en esta especie este material cromatínico
igual que en Anacridium aegyptium (Colom- extracelular solamente podría intervenir en
bo, 1953), el paquinema por su larga dura- la iniciación de la meiosis ovogonial.
ción se dividió en dos etapas, las cuales se Al finalizar el segundo estadio ninfal, en
identifican con facilidad por el comporta- el extremo proximal de cada ovoriola, se
miento de los cromososmas a lo largo del observaron ovocitos primarios en postpaqui-
mismo. Mientras el leptonema y cigonema nema dispuestos linealmente y rodeados por
abarcan periodos cortos que duran horas, el células prefoliculares, por lo que en esta
paquinema tiene una duración considerable- etapa del desarrollo postembrionario de B.
mente mayor, abarcando varios días dentro punctulatus comienza a diferenciarse el vite-
del desarrollo postembrionario. La variación lario y se inicia el segundo periodo de creci-
de tamaño y la disposición con respecto a miento del ovocito. Las características cito-
las células prefoliculares observadas en los lógicas de los ovocitos en postpaquinema en
ovocitos primarios durante el primer estadio esta especie es similar a la observada para
ninfal de la hembra de B. punctulatus, indi- otros Acrididae como lo mencionan Colombo
carían que estas células se encuentran en el (1953), Bonhag (1958) y Chapman (1969).
primer periodo de crecimiento. Coincidimos con estos autores en que estas
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 49

células por su forma, tamaño y relación con minal fue cambiando en las diferentes eta-
las células prefoliculares, son fácilmente pas del proceso. Estas estructuras basófilas
identificables en el extremo distal del vitela- también fueron mencionadas para ovocitos
rio de ovariolas panoísticas en desarrollo. previtelogénicos de Anacridium aegyptium
Durante el tercer estadio ninfal, se produ- como aparato siderofilo o endonúcleos (Co-
cen importantes cambios en los ovarios de lombo, 1953), de Gryllus como cuerpos pro-
Baeacris punctulatus, ya que en la región del teinosos o endocuerpos y de Xenopus como
vitelario por primera vez se observan ovocitos organelas esféricas (Büning, 1994). Aunque
primarios en el estadio previtelogenico I del estas estructuras varían en forma y cantidad
subestadio de diplonema. El subestadio diplo- según el grupo, coincidimos con ambos au-
nema en insectos como en los restantes grupos tores en que los cuerpos proteinosos están
de invertebrados y vertebrados es una fase estrechamente relacionados con las hebras
extremadamente larga y de intensa actividad de DNA y junto con los nucleolos cumplen
metabólica, que se manifiesta tanto por el una importante función en la síntesis de RNA
comportamiento de los cromosomas como durante la profase meiótica del ovocito.
por el aumento de la masa celular. Durante Durante el cuarto estadio ninfal de Baea-
este subestadio, el crecimiento del ovocito de- cris punctulatus, los ovarios alcanzan el ta-
penderá en gran parte de la actividad sinteti- maño del adulto y están rodeados por abun-
zadora de las células foliculares que forman dante cuerpo graso, especialmente en la re-
una capa epitelial continua alrededor del gión proximal de las ovariolas. Coincidimos
mismo y se mantienen unidas por contactos con Villeco (1998) y Albert et al. (2004) en
en hendiduras que permiten el intercambio de que este aumento de volumen del cuerpo gra-
pequeñas moléculas originadas a partir del so está directamente relacionado con el pro-
tejido circundante y que serán los precursores ceso de previtelogénesis que en ellas se desa-
de las proteínas vitelinas (Bonhag, 1958; rrolla. En el vitelario, los ovocitos primarios
Chapman, 1969; Karp, 1987; Saxena et al., de mayor tamaño se encuentran en el segun-
1988; Büning, 1994; Albert et al., 2004). En do estadio de previtelogénesis y se identifi-
B. punctulatus, el diplonema incluye el perio- can por una marcada disminución de la ba-
do de previtelogenésis con cuatro estadios, sofília citoplasmática, un aumento de espe-
que abarcan desde el comienzo del diplonema sor en la envoltura nuclear, aumento en la
hasta la aparición de las primeras vesículas cantidad de cromatina descondensada y en
vitelinas y un periodo de vitelogénesis con tres el número de cuerpos proteinosos en la vesí-
estadios, en los cuales el ovocito acumula cula germinal.
gran cantidad de proteínas vitelinas en su Durante el quinto estadio ninfal de la
citoplasma, dando lugar a un crecimiento hembra de Baeacris punctulatus, los ovarios
pronunciado en un corto periodo de tiempo, están rodeados por abundante cuerpo graso,
que finaliza con la formación de las cubiertas gran cantidad de tubos de Malphigi y gran-
externas del ovocito. des tráqueas. En las ovariolas se reduce la
Los ovocitos en el estadio previtelogénico longitud del germario y aumenta la del vite-
I están rodeados por un epitelio folicular lario como consecuencia de una variación en
plano y se identifican fácilmente por su ta- el número de células que cada uno de ellos
maño, forma, basofília citoplasmática y las contiene. En este estadio se diferencia el teji-
características de la vesícula germinal en la do prefolicular que separa ambas regiones
cual comienza el proceso de desespiraliza- de la ovariola y el tejido interfolicular que
ción de la cromatina, se forman los cuerpos separa los folículos ováricos dentro del vite-
proteinosos y se visualizan claramente los lario, aunque en esta especie ambos tejidos
nucleolos. En Baeacris punctulatus, los cuer- presentan características citológicas simila-
pos proteinosos estuvieron presentes en todos res. Coincidimos con Bonhag (1958) en la
los estadios de previtelogénesis, aunque su necesidad de diferenciarlos según la posición
morfología y ubicación en la vesícula ger- que éstos ocupan en la ovariola.
50 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

En el quinto estadio ninfal, los ovocitos tienen RNA y juegan un papel importante en
del extremo proximal de la ovariola alcan- la síntesis del vitelo y formación de la en-
zan el estadio previtelogénico III y están ro- voltura vitelina. Mientras que Büning
deados por un epitelio folicular cúbico sim- (1994) menciona la formación de núcleos
ple en activa división, que descansa sobre accesorios durante los estadios de previtelo-
una delgada lámina basal en íntimo contac- génesis y vitelogénesis en el citoplasma de
to con la vaina externa de la ovariola. La ovocitos de Hymenoptera, Mallophaga, Dip-
vesícula germinal está ligeramente desplaza- tera (Chironomus, Pryne) y Mecoptera (Pano-
da hacia el extremo posterior de la célula, rpa) y sostiene que aunque el proceso de for-
la cromatina adquiere la característica for- mación y estabilización de los mismos es si-
ma de cromosomas plumulados, los cuerpos milar en los diferentes grupos mencionados,
proteinosos son pequeños y compactos y los la estructura y la distribución en el ovocito
nucleolos adquieren un aspecto granular. El es diferente en cada uno de ellos y probable-
ooplasma de estos ovocitos es de menor ba- mente estén involucrados en diferentes pro-
sofília que en el estadio anterior de previte- cesos celulares. Según este autor, los núcleos
logénesis y en su región perinuclear se for- accesorios se originan por compartimentali-
man núcleos accesorios. Según Büning zación de la vesícula germinal durante los
(1994), los cromosomas plumulados han estadios de previtelogénesis y vitelogénesis y
sido identificados en algunos ovarios panoís- juntos con los cuerpos proteinosos cumplen
ticos de insectos usando métodos clásicos. una importante función como almacena-
Sin embargo, las hélices son muy pequeñas y miento y transporte de ribonucleoproteínas y
delicadas y solamente en algunas especies proteínas nucleares indispensables para las
de Orthoptera, como Locusta migratoria y primeras etapas de embriogénesis. Los nú-
Decticus albifrons, la estructura de las héli- cleos accesorios identificados en ovocitos
ces de ovocitos en los últimos estadios de previtelogénicos de Baeacris punctulatus pre-
previtelogénesis pueden ser comparables con sentan una estructura y distribución similar
la de los anfibios, mientras que en otros ova- a la observada en Eomenacanthus strami-
rios panoíticos como Acheta domesticus, la neus (Mallophaga). Cabe mencionar que el
imagen no es clara. Las imágenes obtenidas hallazgo en B. punctulatus constituye la pri-
en las vesículas germinales de ovocitos al mera cita para Orthoptera. Considerando
final del periodo de previtelogénesis de que los estudios realizados hasta el momen-
Baeacris punctulatus son idénticas a las ob- to en los diferentes grupos de insectos no
servadas en anfibios, por lo que coincidimos han permitido determinar claramente la fun-
con Büning (1994) en que el concepto gene- ción y el destino de los núcleos accesorios,
ral de cromosomas plumulados utilizados será necesario realizar posteriores estudios
para anfibios, puede ser también utilizado con técnicas de inmunocitoquímica e histo-
para ovocitos de insectos con ovariolas pa- químicas, con el fin de contribuir al conoci-
noísticas. miento del papel que juegan estas estructu-
Bonhag (1958) menciona la formación ras durante el desarrollo del ovocito y del
de núcleos accesorios en el citoplasma corti- embrión.
cal de ovocitos vitelogénicos de insectos con En las primeras 24 horas, después de la
ovariolas meroísticas como Hemiptera, Le- muda imaginal de la hembra Baeacris punctu-
pidoptera, Coleoptera, Diptera y especial- latus, se reduce el número de ovogonias y de
mente en Hymenoptera, en los cuales ellos ovocitos primarios en el primer período de
actuarían como precursores de los cuerpos crecimiento, por lo que es difícil identificar
de vitelo. Hopkins (1964) en cambio analiza las primeras etapas de la ovogénesis. Los ovo-
la estructura y función de los núcleos acceso- citos de mayor tamaño se encuentran en el
rios durante los estadios de vitelogénesis de estadio previtelogénico IV y están rodeados
Bombus terrestris y sostiene que ellos se ori- por un epitelio folicular cilíndrico bajo en
ginan a partir de la vesícula germinal, con- activa multiplicación. Estos ovocitos son
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 51

alargados y ligeramente ovoideos, la vesícula folículo basal de esta región, ya que en esta
germinal desplazada hacia el extremo poste- especie como en los restantes insectos, el
rior de la célula, presenta un gran desarrollo cuerpo graso actúa como un órgano de reser-
de los cromosomas plumulados, grandes va de glucógeno, proteínas y lípidos para ser
cuerpos proteinosos y macronucleolos. En el utilizados en periodos de gran actividad
ooplasma cortical de estos ovocitos comien- metabólica.
zan a formarse las primeras plaquetas viteli- En Baeacris punctulatus, al igual que en
nas, mientras que en la región perinuclear Anacridium aegyptium (Colombo, 1953), al
proliferan los núcleos accesorios en íntimo iniciarse el proceso de vitelogénesis se inicia
contacto con la vesícula germinal. En las ova- el tercer período de crecimiento del ovocito,
riolas de estas hembras, aumenta el espesor el cual culminará cuando la célula comple-
de la lámina basal del epitelio folicular que tamente cargada de vitelo haya alcanzado su
rodea a cada ovocito del vitelario y por lo tamaño definitivo y esté en condiciones de
tanto comienza a formarse la túnica propia. ser ovulada. En hembras de 5 días, los ovoci-
Bonhag (1958), Chapman (1969) y Sahai y tos ubicados en el folículo basal de cada
Banerjee (1987) sostienen que en insectos en ovariola se encuentran en el estadio vitelogé-
general y en particular en Poecilocerus pictus, nico I y están rodeados por un epitelio foli-
la túnica propia se extiende a lo largo de toda cular simple constituido por células cilíndri-
la ovariola (tanto en la región del germario cas altas en activa división y una gruesa lá-
como del vitelario) y por lo tanto tiene un mina basal que le confiere mayor espesor a
doble origen, a partir de las células epitelia- la túnica propia en esta región del vitelario.
les que forman la vaina externa y de las célu- Los ovocitos en el estadio vitelogénico I se
las foliculares. En B. punctulatus, la túnica identifican fácilmente por su tamaño y for-
propia está presente solamente en la región ma y por su citoplasma granular acidófilo
del vitelario, por lo que sería sintetizada solo con numerosas plaquetas vitelinas en la re-
por las células foliculares y como lo mencio- gión cortical. La vesícula germinal en estos
nan estos autores, en esta región de la ovario- ovocitos está ubicada en el extremo micropi-
la, la vaina externa y la túnica propia cum- lar o posterior de la célula, con la cromatina
plen una importante función en el transporte completamente descondensada, con numero-
de nutrientes desde el cuerpo graso a través sos micronucleolos y una envoltura nuclear
del epitelio folicular al ovocito en desarrollo claramente visible. Estas observaciones coin-
para la síntesis de vitelo. Asimismo, la pre- ciden con las de Büning (1994), quien sostie-
sencia de fibras colágenas en la cara interna ne que el desplazamiento de la vesícula ger-
de la túnica propia observada en la región minal hacia su posición definitiva en el hue-
proximal del vitelario, corroboraría que esta vo, es el principal indicio de la iniciación del
lámina basal cumple una función de sostén, proceso de vitelogénesis. Del mismo modo,
mientras que la presencia de fibras elásticas la presencia de una delgada matriz extrace-
en la capa externa indicaría que la túnica lular acidófila entre el oolema y la membra-
propia también cumple una importante fun- na plasmática del epitelio folicular, indica-
ción en el transporte del ovocito a través del ría que en el primer estadio de la vitelogéne-
vitelario. sis de B. punctulatus comienza a sintetizarse
A los 5 días de vida adulta se produce un la envoltura vitelina, la cual como en los
importante aumento en la cantidad de cuer- restantes insectos, formará parte de la cu-
po graso que rodea a cada ovario y cambia bierta externa del ovocito en el momento de
la morfología de las células adiposas que ser ovulado (Albert et al., 2004).
rodean la región proximal de las ovariolas, A los 10 días de imago de la hembra de
lo cual como mencionan Nieto Nafria y Baeacris punctulatus, el ovocito primario del
Mier Durante (1985) está directamente rela- folículo basal de cada ovariola ha alcanza-
cionado con la iniciación del proceso de vi- do el segundo estadio de vitelogénesis. Este
telogénesis en los ovocitos ubicados en el estadio incluye dos etapas sucesivas, las cua-
52 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

les se diferencian por el tamaño del ovocito, Entre los 12 y 14 días de vida adulta de
las características de la vesícula germinal la hembra de Baeacris punctulatus, los ovo-
(tanto de la cromatina como de la envoltura citos primarios que llegan al folículo basal
nuclear), la cantidad de plaquetas vitelinas de cada ovariola se encuentran en el último
acumuladas en el citoplasma y en el estado estadio de vitelogénesis. Durante este esta-
funcional de las células foliculares que lo dio, los ovocitos pasarán por dos etapas su-
rodean. Lusis (1963) analiza el proceso de cesivas: la primera, considerada como esta-
vitelogénesis en Schistocerca gregaria y lo dio vitelogenico IIIa, en la cual se completa
divide en cuatro estadios, de los cuales el la síntesis de vitelo y de la envoltura viteli-
segundo correspondería solo al estadio vite- na, y el ovocito alcanza su tamaño definitivo
logenico IIa de B. punctulatus, ya que este finalizando así el tercer período de creci-
autor no observa ovocitos en la etapa previa miento, y la segunda etapa, considerada
a la ruptura de la vesícula germinal, la cual como estadio vitelogénico IIIb, en la cual se
coincidimos con Büning (1994) y Albert et produce la síntesis del corion a partir de las
al. (2004), indica la finalización del proceso células foliculares. Al finalizar el periodo de
de vitelogénesis y por lo tanto del estadio de vitelogénesis, en B. punctulatus como en los
diplonema de la profase I de la meiosis. restantes insectos, los ovocitos primarios es-
La segunda etapa del estadio vitelogénico tarán en condiciones de iniciar el proceso de
II de Baeacris punctulatus fue también obser- maduración ovocitaria, es decir, la reanuda-
vada por Sahai y Banerjee (1987) en Poecilo- ción de la meiosis por un aumento local de
cerus pictus. En el segundo estadio de vitelo- la ecdisona en el ovocito, lo que le permitirá
génesis de B. punctulatus, las células folicu- completar su desarrollo dentro del ovario y
lares adquieren forma de clava, con un nú- transformarse en un ovocito maduro en con-
cleo grande en posición basal e intensa baso- diciones de ser ovulado (Büning, 1994; Vi-
filia citoplasmática en la región apical, des- llecco, 1998; Albert et al., 2004). Debido a
tacándose en el epitelio folicular de los ovo- la gran cantidad de vitelo acumulada en el
citos en el estadio vitelogenico IIb, el gran ooplasma de los ovocitos en el estadio vitelo-
desarrollo del aparato de Golgi en la región genico III, no se pudo determinar la caracte-
supranuclear de sus células, lo que indicaría rísticas del material cromosómico de estas
su intensa actividad secretora (Bonhag, células. Sin embargo, las características de
1958; Albert et al., 2004). Las característi- la vesícula germinal en ovocitos en el esta-
cas citológicas del epitelio folicular en el dio vitelogénico IIb en los cuales se observa
segundo estadio de vitelogénesis de Baeacris una envoltura nuclear fragmentada en algu-
punctulatus, coinciden con las observadas en nos puntos, indicaría que en los ovocitos en
etapas previas a la síntesis del corion de Poe- el estadio vitelogénico IIIb, que corresponde
cilocerus pictus. Sin embargo, en B. punctu- al final del período de vitelogénesis de B.
latus, no se han observado células folicula- punctulatus, ya se ha producido la ruptura
res binucleadas como las mencionadas por de la vesícula germinal e iniciado el subes-
Chapman (1969) en otros insectos, y Sahai y tadio de diacinesis o etapa inicial de la ma-
Banerjee (1987) y Saxena et al. (1988) en P. duración ovocitaria.
pictus. Las observaciones realizadas en los Los ovocitos en el estadio vitelogénico
restantes órganos reproductores de estas IIIa se identifican fácilmente porque la vesí-
hembras, en las cuales aún no se ha comple- cula germinal no es visible y el ooplasma
tado el desarrollo del ovocito en el ovario, está completamente cargado de vitelo, ob-
mostraron que sus espermatecas estaban car- servándose en la región cortical una delgada
gadas de abundante fluido seminal con es- zona de gránulos fuertemente acidófilos.
permatozoides, por lo que coincidimos con Externamente al ovocito y en íntimo contacto
Gillot (1980) en que las hembras adultas de con el oolema, se observa la envoltura viteli-
Acrididae pueden ser copuladas antes de al- na. Bonhag (1958), Lusis (1963), Sahai
canzar su madurez sexual. (1984), y Saxana et al. (1988) analizan el
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 53

proceso de vitelogénesis en ovocitos termi- del ovocito en el vitelario indicaría que en
nales de diferentes especies de Acrididae y se Baeacris punctulatus la túnica propia, ade-
refieren a la síntesis de vitelo y al proceso de más de ser una estructura mecánica que
coriogénesis, pero no mencionan la presen- mantiene la forma de la ovariola, cumple
cia de gránulos acidófilos como los observa- una importante función en el transporte de
dos en el ooplasma cortical de ovocitos en el nutrientes y el acceso de hormonas durante
estadio vitelogénico IIIa de Baeacris punctu- la previtelogénesis. Por otra parte, el mayor
latus, los cuales podrían corresponder a los espesor de la túnica propia en el extremo
gránulos corticales presentes en muchos óvu- proximal del vitelario indicaría que también
los incluidos los de mamíferos. Según Albert contribuye al desplazamiento del ovocito
et al. (2004), los gránulos corticales, al dentro de la ovariola y a su eliminación du-
igual que la envoltura vitelina, son sinteti- rante la ovulación, lo cual coincidiría con
zados por el propio ovocito y cumplen una los conceptos de túnica propia establecidos
importante función durante la fecundación, por Bonhag (1958), Chapman (1969) y Bü-
ya que al producirse el impacto espermático, ning (1994) para otras especies de Acrididae
éstos liberan su contenido por exocitosis y con ovariolas panoísticas.
producen una alteración de la cubierta exter- Entre los 15 y 30 días de vida adulta, to-
na del ovocito evitando la polispermia. La das las hembras de Baeacris punctulatus con-
envoltura vitelina, en cambio, tiene como tienen ovariolas cargadas de ovocitos madu-
función proteger al ovocito de lesiones me- ros, observándose en algunas de estas hem-
cánicas y actuar como barrera especifica bras indicios de la primera ovulación, es
permitiendo solo el paso de espermatozoides decir, el proceso que involucra la liberación
de la misma especie. del ovocito completamente desarrollado del
En el estadio vitelogénico IIIa de Baeacris folículo basal de la ovariola, la ruptura del
punctulatus, se producen importantes cam- tapón epitelial, el ingreso al pedicelo y el
bios a nivel del epitelio folicular, los cuales, paso hacia la luz del extremo distal del ovi-
coincidiendo con Chapman (1969) y Albert ducto lateral (Chapman, 1969). En los ova-
et al. (2004), están directamente relaciona- rios de estas hembras, se observó un escaso
dos con el proceso de coriogénesis. En estos número de ovariolas que contenían en su
ovocitos la mayor parte del epitelio folicular base grandes vacuolas cargadas de pigmen-
está constituido por células cúbicas con una tos amarillos, producto de la acumulación
intensa basofília citoplasmática, mientras de lípidos por la reabsorción de ovocitos
que las células ubicadas en el extremo poste- anormales. Estos restos de folículos corres-
rior del ovocito, que están relacionadas con ponden a los cuerpos de reabsorción mencio-
la formación del micrópilo y earópilo del nados para otras especies de Acrididae como
huevo, son cilíndricas con un citoplasma le- Anacridium aegyptium (Colombo, 1957),
vemente basófilo y de aspecto vacuolar. En Locusta migratoria migratorioides y Schisto-
el estadio vitelogénico IIIb, el ovocito está cerca gregaria (Singh, 1958; Lusis, 1963;
rodeado por un corion con dos capas fácil- Uvarov, 1966; Chapman, 1969).
mente diferenciables por su morfología y es- En algunas hembras de 30 días Imago de
pesor, y como consecuencia del proceso de Baeacris punctulatus, el extremo proximal
coriogénesis el epitelio folicular es de menor de la ovariola mostraba un ovocito primario
espesor y escasa actividad secretora. en el estadio vitelogénico III y un cuerpo
El epitelio folicular en ambas etapas del lúteo reducido producto de la primera ovula-
tercer estadio de vitelogénesis, presenta una ción, lo que indicaría que en estas hembras,
lámina basal de gran espesor constituida por se estaba por producir una segunda ovula-
una gruesa capa interna de fibras de coláge- ción. La estructura histológica del cuerpo
no y una delgada externa de fibras elásticas. lúteo observada en las hembras de esta espe-
El aumento de espesor de la lámina basal cie coincide con la descripta por Uvarov
del epitelio folicular durante el desarrollo (1966), Chapman (1969), Sahai y Banerjee
54 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

(1987) y Büning (1994), para diferentes gru- las características de la vesícula germinal de
pos de insectos. ovocitos del segundo estadio de vitelogénesis
Mediante las observaciones realizadas en nos permite inferir que en esta especie, como
hembras de 15 a 30 días de vida adulta de en los restantes insectos (Bonhag, 1958;
Baeacris punctulatus, se determinó que en Chapman, 1969; Büning, 1994; Albert et al.,
esta especie como en el resto de los Orthop- 2004), los ovocitos son ovulados en la meta-
tera (Uvarov, 1966; Chapman, 1969), todas fase de la primera división de maduración,
las ovariolas ovulan simultáneamente; sien- estadio en el cual se produciría la segunda
do Anacridium aegyptium (Colombo, 1955) detención de la meiosis hasta su fecundación
la única especie de Acrididae en la cual se en la cámara genital de la hembra.
determinó que las ovariolas de un mismo En Baeacris punctulatus, la posición de
ovario ovulan en tiempos diferentes. La ma- los ovocitos en el oviducto lateral después de
duración y ovulación simultánea de los ovo- la ovulación, indicaría que al ingresar éstos
citos en todas las ovariolas de estas hembras, a la cámara genital de la hembra se ubica-
sumado a la escasa cantidad de ovocitos rían dentro de la dilatación dorsal, región
anormales que en ellas se producen cuando descripta en estudios previos por Michel y
las hembras son mantenidas en condiciones Terán (2005), con el micrópilo en contacto
óptimas para el desarrollo, son indicios de directo con la abertura del conducto esper-
la gran capacidad reproductiva de la espe- matecal. En esta especie, como en otros in-
cie Baeacris punctulatus. sectos (Gillot, 1980; Conn, 1993; Albert et
En esta especie como en Melanoplus di- al., 2004), esta orientación del ovocito faci-
fferentialis (Nelsen, 1934), después de la litará la penetración del esperma durante la
ovulación, los ovocitos son almacenados en fecundación. Una vez producido el impacto
la región distal y media de los oviductos la- espermático, se reanudará la meiosis y desde
terales con el área micropilar dirigida hacia su eliminación de la cámara genital hasta
el extremo posterior del abdomen, observán- completar la ovoposición, el ovocito se
dose en Baeacris punctulatus una modifica- transformará en un óvulo maduro tras lo
ción del espesor y la coloración de las capas cual podría producirse la anfimixis. Según
externas e internas del corion de estos ovoci- estudios previos (Michel y Teisaire, 1996), en
tos. Según observaciones realizadas en estu- B. punctulatus, la unión de los pronucleos se
dios previos por Michel y Terán (2005), estas produce después de la puesta, ya que en esta
modificaciones del corion son producidas especie el primordio embriónico es visible
por la secreción proteica que sintetizan las recién 48 horas después de la puesta.
células epiteliales de la región distal y me- Los resultados obtenidos en este trabajo
dia de estos conductos. En hembras de 15 a indicarían que la hembra de Baeacris punc-
30 días de imago, la cantidad de ovocitos tulatus, bajo condiciones controladas de la-
almacenados en los oviductos laterales fue boratorio, alcanza la madurez sexual entre
menor al número de cuerpos lúteos observa- los 15 y 25 días del imago, período en el
dos en el ovario y esto sumado al hecho de cual los ovocitos completan su desarrollo en
no haber encontrado ovocitos durante su tra- el ovario y se produce la primera ovulación.
yecto por el oviducto medio y la cámara ge- Estos resultados se corresponden con las ob-
nital, indicarían que en Baeacris punctulatus servaciones de cría y con los estudios de
el descenso de los ovocitos maduros a través morfogénesis, en los cuales se establece que
de los oviductos, la fecundación y posterior entre los 15 y 25 días después de la muda
eliminación de la cámara genital se produce imaginal, se completa el desarrollo de los
en sucesivas etapas hasta completar el deso- órganos reproductores de la hembra, hay
ve durante la ovoposición. una intensa actividad secretora en las glán-
Aunque en Baeacris punctulatus no se dulas accesorias y en los oviductos laterales,
pudo observar la etapa de maduración ovo- y se producen las primeras ovoposiciones
citaria en la cual se produce la ovulación, (Michel, 2001; Michel y Terán, 2006).
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 55

Según Turk y Barrera (1979), en Dichro- Bentos Pereira, A. 1989. Distribución geo-
plus punctulatus (=Baeacris punctulatus) la gráfica de las especies del género Di-
chroplus Stal (Orthoptera, Acrididae,
madurez sexual en ambos sexos se alcanza Melanoplinae). Revista Brasilera de
con la primera cópula a los 10 días de vida Entomología, 33(1): 31-47.
adulta. Considerando los resultados obteni- Bonhag, P. F. 1958. Ovarian structure and
dos en este trabajo y los conceptos de madu- vitellogenesis in insects. Annual Review
rez sexual establecidos por Uvarov (1966) y of Entomology, 3: 137-160.
Büning, J. 1994. The insect ovary: Ultras-
Gillot (1980), tanto para Orthoptera como tucture, previtellogenic growth and evolu-
para otros insectos, en Baeacris punctulatus, tion. Chapman y Hall, London, 400 pp.
la primera cópula (que en condiciones ópti- Carbonell, C. S. y Ronderos, R. A. 1973.
mas para el desarrollo se produce entre las Las especies del grupo punctulatus del
48 horas y 12 días de la muda imaginal), es género Dichropus Stal (Orthoptera, Acri-
didae). Revista del Museo de La Plata,
un indicio de la madurez sexual solo en el 11: 359-398.
macho, ya que entre los 5 y 10 días después Chapman, R. F. 1969. The Insects, Structu-
de la muda imaginal del macho, se completa re and Function. Elsevier, New York,
el proceso de morfogénesis de los órganos 819 pp.
reproductores y la espermatogénesis en los Colombo, G. 1953. L’oogenesi negli Ortotte-
ri: I. Ricerche istologiche e citometriche
testículos produciéndose abundantes esper- in Anacridium aegyptium L. dalla schiusa
matozoides que se liberan a los conductos all’imagine. Acta Zoologica, Stockholm,
deferentes y se almacenan en las vesículas 34: 191-232.
seminales. Además en este período, las glán- Colombo, G. 1955. L’oogenesis negli Ortot-
dulas accesorias del macho están completa- teri. II. Ricerche sull accrescimento de-
gli oociti di Anacridium aegyptium L. Ar-
mente diferenciadas y producen abundante chivio Zoologico Italiano, Napoli, 40:
secreción, que permitirá la formación del 235-263.
espermatóforo durante la cópula (Michel, Colombo, G. y Bassato, M. 1957. La diffe-
2001; 2007). renziazione delle gonadi negli embrioni
La información aportada en este trabajo della cavallette. Ricerche istologiche su
embrioni di Anacridium aegyptium L. (Or-
contribuye a un mejor conocimiento del de- thoptera, Acridoidea). Bollettino di Zoolo-
sarrollo y la reproducción de Baeacris punc- gia, 24: 275-285.
tulatus, lo cual será de utilidad para la apli- Conn, D. B. 1993. Atlas of Invertebrate
cación de métodos de control de los Melano- Reproduction and Development. Wiley-
plinae de importancia económica para la Liss, New York, 252 pp.
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phalus saltator (Saussure). (Orthoptera,
AGRADECIMIENTOS Conocephalidae): citoplasm elimination
from spermatid. Revista Do Centro De
Este trabajo se basa en parte de los resul- Ciencias Biomedicas Da Universidade
tados obtenidos en mi Tesis Doctoral, por lo Federal de Uberlandia, 10(1): 21-28.
que quiero agradecer a mi director de tesis, Ferreira, A. V. S., Wanderley-Teixeira, V.,
Santos, F. A. B., Veiga, A. F. S. L. y
el Dr. Héctor R. Terán. Agradezco también al Teixeira, A. A. C. 2006. Histologia do
Consejo de Investigación de la Universidad aparelho reprodutor masculino e morfo-
Nacional de Tucumán, por el apoyo efectua- metria da população celular dos folículos
do durante la realización de la misma. testiculares de Chromacris speciosa
(Thunberg, 1824) (Orthoptera: Romalei-
dae) submetido a três fotoperíodos. Ar-
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56 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

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Ver tablas 1 y 2 en páginas ss.
58 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

Estadios Estadios y
Regiones de la Tipos Nº
del desarrollo subestadios de
ovariola celulares de células
la ovogénesis

Ovogonias Interfase 6
Embrionario X Germario ........................... ........................... ...........................
Preovocitos Interfase premeiótica 4

Interfase
Ovogonias Profase 10
Metafase
........................... ........................... ...........................
Embrionario XI Germario Preovocitos Interfase premeiótica 4
........................... ........................... ...........................
Ovocitos primarios Preleptonema
“primer periodo de Leptonema 4 a 6
crecimiento” Cigonema

Ovogonias Interfase 14 a 20
...........................
........................... ...........................
Preovocitos Interfase premeiotica 2
...........................
........................... ...........................
Ninfal I Germario Preleptonema
Ovocitos primarios Leptonema 6 a 8
“primer periodo creci- Cigonema
miento” Paquinema inicial 2
Paquinema vanzadado 2

Interfase
Profase 30
Ovogonias Prometafase
Metafase
Germario ........................... ........................... ...........................
Ovocitos primarios Preleptonema
Ninfal II “primer periodo de Leptonema
crecimiento” Cigonema 8 a 10
Paquinema inicial
Paquinema avanzado
........................... ........................... ........................... ...........................
Ovocitos primarios Postpaquinema 5 a 6
Vitelario “segundo periodo de
crecimiento”

Ovogonias Interfase 30
........................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Preleptonema
“primer periodo de Leptonema
crecimiento” Cigonema 8 a 10
Ninfal III Paquinema inicial
........................... Paquinema avanzado
........................... ........................... ...........................
Vitelario Ovocitos primarios Postpaquinema 2 a 3
“segundo periodo de Diplonema:
crecimiento” previtelogénico I 4 a 8

Tabla 1 (continúa en págs ss). Regiones de la ovariola y estadios de la ovogénesis durante el
desarrollo embrionario, postembrionario y el imago de Baeacris punctulatus.
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 59

Estadios Estadios y
Regiones de la Tipos Nº
del desarrollo subestadios de
ovariola celulares de células
la ovogénesis

Interfase
Ovogonias Profase 35
Metafase
Germario ........................... ........................... ...........................
Preleptonema 1
Ovocitos primarios Leptonema 3
Ninfal IV “primer periodo de Paquinema inicial 2
crecimiento” Paquinema avanzado 3
........................... ........................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Vitelario Ovocitos primarios Diplonema:
“segundo periodo de previtelogénico I 8 a 10
crecimiento” previtelogénico II 4 a 5

Ovogonias Interfase
12 a 14
Profase
........................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Preleptonema
6 a 8
“primer periodo de Leptonema
Ninfal V crecimiento” Paquinema 3 a 4
........................... ........................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Ovocito primario Diplonema:
Vitelario “segundo periodo de previtelogenico I 8
crecimiento” previtelogénico II 4
previtelogénico III 3 a 4

Ovogonias Interfase 5
........................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Leptonema 2 a 3
“primer periodo de Paquinema 4 a 5
Imago de 24 a 72 crecimiento”
horas .......................... ........................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Ovocitos primarios Diplonema:
Vitelario “segundo periodo de previtelogénico I
crecimiento” previtelogénico II 14
previtelogénico III
previtelogenico IV 4

Ovogonias Interfase 5
........................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Leptonema 2 a 3
“primer periodo de Paquinema 4 a 5
crecimiento”
........................... ........................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Ovocitos primarios Diplonema:
Imago 5 días “segundo periodo de previtelogénico I
Vitelario crecimiento” previtelogénico II 14
previtelogénico III
previtelogenico IV 4
........................... ........................... ...........................
Ovocitos primarios Diplonema:
“tercer periodo de vitelogénico I 1
crecimiento”
60 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

Estadios Estadios y
Regiones de la Tipos Nº
del desarrollo subestadios de
ovariola celulares de células
la ovogénesis

Ovogonias Interfase 5
........................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Leptonema 2 a 3
“primer periodo de Paquinema 4 a 5
crecimiento”
........................... ........................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Imago 10 días Ovocitos primarios Diplonema:
“segundo periodo de previtelogénico I
crecimiento” previtelogénico II 14
Vitelario previtelogénico III
previtelogenico IV 4
........................... ........................... ...........................
Diplonema:
vitelogénico I 1
Ovocitos primarios vitelogénico IIa 1
“tercer periodo de vitelogénico IIb 1
crecimiento”

Ovogonias Interfase 5
........................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Leptonema 2 a 3
“primer periodo de Paquinema 4 a 5
crecimiento”
........................... ........................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Ovocitos primarios Diplonema:
Imago 12 días “segundo periodo de previtelogénico I
crecimiento” previtelogénico II 14
previtelogénico III
Vitelario previtelogenico IV 4
........................... ........................... ...........................
Diplonema:
vitelogénico I 1
Ovocitos primarios vitelogénico IIa 1
“tercer periodo de vitelogénico IIb 1
crecimiento” vitelogénico IIIa 1

Ovogonias Interfase 5
........................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Leptonema 2 a 3
“primer periodo de Paquinema 4 a 5
crecimiento”
........................... ........................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Imago 14 días Ovocitos primarios Diplonema:
“segundo periodo de previtelogénico I
crecimiento” previtelogénico II 14
previtelogénico III
Vitelario previtelogenico IV 4
........................... ...........................
Diplonema:
Ovocitos primarios vitelogénico I 1
“tercer periodo de vitelogénico IIa 1
crecimiento” vitelogénico IIb 1
vitelogénico IIIb 1
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 61

Estadios Estadios y
Regiones de la Tipos Nº
del desarrollo subestadios de
ovariola celulares de células
la ovogénesis

Ovogonias Interfase 5
..................................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Leptonema 2 a 3
“primer periodo de Paquinema 4 a 5
crecimiento”
........................... ..................................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Ovocitos primarios Diplonema:
Imago 15 a 25 días “segundo periodo de previtelogénico I
crecimiento” previtelogénico II 14
previtelogénico III
Vitelario previtelogenico IV 4
........................... ...........................
Diplonema:
vitelogénico I 1
Ovocitos primarios vitelogénico IIa 1
“tercer periodo de vitelogénico IIb 1
crecimiento” “cuerpo luteo 1” 1

Ovogonias Interfase 5
..................................... ........................... ...........................
Germario Ovocitos primarios Leptonema 2 a 3
“primer periodo de Paquinema 4 a 5
crecimiento”
........................... ..................................... ........................... ...........................
Postpaquinema 3 a 4
Ovocitos primarios Diplonema:
Imago 30 días “segundo periodo de previtelogénico I
crecimiento” previtelogénico II 14
previtelogénico III
Vitelario previtelogenico IV 4
..................................... ........................... ...........................
Diplonema:
Ovocitos primarios vitelogénico I 1
“tercer periodo de vitelogénico IIa 1
crecimiento” vitelogénico IIb 1
vitelogénico IIIa 1
“cuerpo luteo 1” 1

Tabla 1 (continuación y final). Regiones de la ovariola y estadios de la ovogénesis durante el
desarrollo embrionario, postembrionario y el imago de Baeacris punctulatus.
62 A. A. Michel: Análisis histológico del ovario en Baeacris punctulatus

Estadios Cantidad, forma Vesícula Folículo
Ooplasma
del ovocito y medida germinal ovárico

4 a 8 ovocitos Ø 21 a 36 µm, de Granular basófilo Epitelio simple
cúbicos a esféricos contornos lisos, en intenso a moderado, constituído por 4 a
con un Ø mayor de posición central, con pequeños grá- 8 células aplana-
30 a 72 µm. cromatina en finas nulos acidófilos das, con núcleos
hebras y abundan- próximos a la envol- fuertemente basófi-
Previtelogénico I tes cromómeros, 4 tura nuclear. los y citoplasma
a 8 “cuerpos protei- levemente basófilo.
nosos”, 2 a 3 ma-
cronucleolos y nu-
merosos micronu-
cleolos.

5 ovocitos ligera- Ø 42 a 54 µm, en Granular levemente Epitelio simple con
mente ovoides con posición central, basófilo, con esca- 10 a 26 células de
un Ø mayor de 72 envoltura nuclear sos gránulos fuerte- características idén-
a 210 µm fuertemente basófi- mente acidófilos ticas al estadio I.
Previtelogénico II la, mayor cantidad próximos a la envol-
de cromatina en tura nuclear.
hebras y cromóme-
ros, 11 “cuerpos
proteinosos” y 2 a
3 micronucleolos.

3 a 4 ovocitos Ø 60 µm, Con finas y abun- Epitelio simple con
alargados con un Ø ligeramente despla- dantes granulacio- 45 a 65 células
mayor de 222 a zada hacia el extre- nes levemente basó- cúbicas, núcleos
288 µm. mo posterior del filas, en la región esféricos con cro-
ovocito, cromatina perinuclear peque- matina condensada
Previtelogénico III completamente des- ños gránulos fuerte- en gránulos gruesos
espiralizada, 6 a 7 mente acidófilos y y finos, escaso
“cuerpos proteino- 1 o 2 “núcleos citoplasma basófilo
sos” y 3 a 4 nu- accesorios”. finamente granular.
cleolos granulares
fuertemente acidófi-
los.

4 ovocitos alarga- Ø 66 a 72 µm, Con finas granula- Epitelio simple, con
dos y ligeramente de contornos lisos ciones acidófilas y células cilíndricas
ovoides con un Ø y ubicada en el escasas plaquetas bajas, núcleos esfé-
mayor de 312 a extremo posterior vitelinas en la re- ricos con cromatina
468 µm. del ovocito, cromati- gión periférica y en gránulos gruesos
na igual al estadio “núcleos accesorios” y separados, cito-
anterior, los “cuer- en número variable plasma granular
pos proteinosos” se próximos a la vesí- basófilo.
Previtelogénico IV presentan como cula germinal.
grandes acúmulos
basófilos en el
centro de la misma
2 macronucleolos,
compactos y centra-
les, micronucleolos
numerosos junto a
la cara interna de
la envoltura.

un ovocito alargado Ø igual al anterior, Con finas granula- Epitelio simple con
con un Ø mayor de de contorno liso y ciones acidófilas y células cilíndricas
540 a 594 µm ubicada en el extre- numerosas plaque- altas, núcleos ovoi-
mo posterior, cro- tas vitelinas solo en des en posición
matina en finas la periferia del basal, cromatina en
Vitelogenico I hebras y cromóme- mismo. Rodeando al gránulos gruesos y
ros que cubren ovocito una delgada separados, citoplas-
completamente el envoltura vitelina ma con finas granu-
jugo nuclear y nu- con finas granula- laciones basófilas,
merosos micronu- ciones fuertemente lámina basal del
cleolos fuertemente acidófilas. epitelio fuertemente
acidófilos. acidófila.

Tabla 2. Características del ovocito primario en los estadios de previtelogénesis y vitelogéne-
sis de Baeacris punctulatus
Acta zoológica lilloana 52 (1–2): 30–63, 2008 63

Estadios Cantidad, forma Vesícula Folículo
Ooplasma
del ovocito y medida germinal ovárico

1 ovocito alargado, Ø igual al anterior, Con finas granula- Epitelio simple,
con un Ø mayor en contorno liso, croma- ciones acidófilas y células cilíndricas
el límite inferior del tina en finas hebras abundantes plaque- altas en forma de
rango 697,82 µm a y el resto en gránu- tas vitelinas de botella, con grandes
1,5 mm los fuertemente diferentes diámetros núcleos ovoides
basófilos que forman y fuertemente acidó- basales y fuerte-
acúmulos en el cen- filas. mente basófilos,
tro, 6 micronucleo- cromatina en gránu-
Vitelogénico IIa los centrales, envol- los gruesos, cito-
tura nuclear fuerte- plasma alrededor
mente basófila. del núcleo con finas
granulaciones basó-
filas y en la región
apical fuertemente
basófilo. Lamina
basal con una capa
interna de fibras
colágenas y una
externa de fibras
elásticas.

1 ovocito alargado, Mayor cantidad de Con plaquetas viteli- Igual al anterior,
con un Ø mayor en cromatina condensa- nas de mayor diá- pero con imagen
el límite superior da, envoltura nuclear metro y en mayor negativa del golgi
Vitelogénico IIb del rango 697,82 ondulada, fragmenta- proporción que en en la región su-
µm a 1,5 mm. da en algunos puntos el estadio IIa. pranuclear. Lámina
y con finos gránulos basal igual al ante-
en la cara interna y rior.
externa de la misma.

1 ovocito alargado No es visible. Completamente Epitelio simple con
con un Ø mayor de cargado de plaque- células cúbicas con
2,640 a 3,360 tas vitelinas, que- núcleos esféricos
mm. dando una delgada basales, cromatina
franja de citoplasma en gránulos finos y
con finas granula- 1 o 2 nucleolos
ciones acidófilas en acidófilos, citoplas-
la periferia del ma granular fuerte-
Vitelogénico IIIa ovocito, en la cual mente basófilo;
se ubican gránulos células cilíndricas
corticales de dife- en la región micro-
rente diámetro. pilar, con núcleos
Envoltura vitelina esféricos basales
homogénea levemen- con cromatina en
te acidófila. gránulos finos, 1 o
2 nucleolos y cito-
plasma vacuolar
basófilo.

Igual al anterior. Igual al anterior. Igual al anterior, Epitelio simple con
pero recubiertos células cúbicas
externamente por un bajas, con núcleos
delgado corion fuer- esféricos comprimi-
temente acidófilo. dos sobre la mem-
Vitelogénico IIIb brana basal, croma-
tina condensada en
gránulos gruesos y
separados, citoplas-
ma apical con finas
granulaciones basó-
filas.

Tabla 2 (continuación y final). Características del ovocito primario en los estadios de previte-
logénesis y vitelogénesis de Baeacris punctulatus