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Enzimas

So protenas responsveis pela catlise das reaes qumicas. Catlise das reaes qumicas: Converso de substrato em produto, pela ao enzimtica. Propriedades: Alta especificidade Alta atividade cataltica (acelera a velocidade das reaes qumicas)

A especificidade das enzimas varia de uma enzima para outra. Especificidade baixa: Enzimas degradativas - peptidases (ligaes peptdicas), fosfatases (ligaes fosfato-ster), estearases (ligaes carboxi-ster). Especificidade intermediria. Especificidade de grupo hexoquinases (fosforilao de aldohexoses). Especificidade absoluta- urease (hidrolisa a uria), tripsina (hidrolisa ligaes peptdicas formadas por grupos carboxlicos de aminocidos bsicos. Ex: arginina e lisina) Estereospecifidade: um estereoismero reagido ou formado em preferncia todos os outros.

As enzimas so catalisadores biolgicos Enzimas podem aumentar 1020 vezes a velocidade de uma reao. Transformam substrato em produto sem serem consumidas neste processo. Afetam apenas a velocidade da reao. Ambas as reaes (direta e inversa) ficam mais velozes. Logo, o equilbrio qumico (proporo reagentes produtos na mistura final) no muda. Com exceo de alguns RNAs, que catalisam seu prprio processamento, todas as enzimas so protenas.

Classificao das enzimas segundo a comisso de enzimas

As enzimas diminuem a energia de ativao de uma reao, acelerando a sua velocidade . Energia de ativao a energia necessria para que um substrato seja transformado em produto de uma reao.

Energia de ativao: quantidade de energia (cal) necessria para se levar 1 mol de uma substncia ao estado de transio.

Modelo chave-fechadura

Modelo de ajuste induzido

E + S ES EP E + P

Representao da ligao enzima-substrato

Note a grande diferena de pesos moleculares entre a enzima urease e os seus substratos: Urease = 500.000 Uria = 60 gua = 18

Atividade enzimtica avaliada pela velocidade da reao que a enzima catalisa. A medida da atividade de uma enzima essencial para a dosagem desta. Para essas dosagens, a enzima dever ser incubada com altas concentraes de substrato. A velocidade da reao expressa em unidades internacionais (U), que equivalem quantidade de enzima capaz de formar 1 mol de produto por minuto, em condies ideais de temperatura e pH. Atividade Especfica= U/mg

Enzimas na Clnica: As enzimas podem ser utilizadas como: - Reagentes altamente especficos e sensveis em reaes colorimtricas quantitativas. - Indicadores de leso celular e tecidual. O extravasamento de enzimas do meio intra para o meio extracelular leva a um aumento da atividade destas no sangue. Esta atividade pode ser medida e fornece importante informao diagnstica e da evoluo de um quadro clnico. A distribuio rgo-especfica de algumas destas enzimas permite a localizao da leso com bastante preciso.

Cintica de liberao de enzimas cardacas no soro aps um IAM

Cintica enzimtica:
Velocidade: Quantidade de produto formado por unidade de tempo. Velocidade mxima: Quantidade mxima de produto formado por unidade de tempo. Km: Concentrao de substrato necessria para a obteno da metade da velocidade mxima. A velocidade das reaes varia com fatores como: quantidade de enzima e de substrato, temperatura e pH. Temperatura tima: a temperatura onde a enzima apresenta sua atividade mxima. pH timo: o pH onde a enzima apresenta sua atividade mxima

Cintica enzimtica
Km uma medida da AFINIDADE da enzima pelo substrato. Km ALTO = BAIXA AFINIDADE Km BAIXO = ALTA AFINIDADE

Grfico dos duplos recprocos de Lineweaver-Burk

Muitas enzimas requerem um componente no proteico para suas reaes. Inorgnicos: Mg+2, Zn+2, Fe+2, Mn+2 (cofatores metlicos) Orgnicos: - ligado firmemente enzima: Grupo prosttico. - no ligado firmemente enzima: coenzima. Esses componentes podem ajudar na funo cataltica de uma enzima, como fazem os cofatores metlicos e os grupos prostticos, ou tomar parte na reao enzimtica, como as coenzimas solveis. Algumas enzimas podem requerem ons metlicos e tambm coenzimas para sua atividade! Obs: Enzima + ons metlicos e/ou coenzima = Holoenzima
Apoenzima ou apoprotena - parte protica da protena

Nicotinaminda adenina dinucleotdeo Principal aceptor de eltrons

NAD+ forma reduzida (NADH+H+) Aceita 1 on H e 2 eltrons.

Inibio enzimtica: A atividade enzimtica pode ser diminuda por grande nmero de substncias, constituintes normais ou estranhas s clulas, conhecidas como inibidores. Inibio enzimtica irreversvel Os inibidores inativam irreversivelmente as enzimas, pois se ligam covalentemente a elas. EX: A penicilina liga-se s enzimas da via de sntese da parede bacteriana, inibindo-as. Desprovidas de parede, as clulas ficam sujeitas lise. EX: Aspirina transfere seu grupo acetil para o grupo OH de um resduo de serina na molcula da ciclooxigenase, inativando-a.

Inibio enzimtica reversvel Os inibidores ligam-se reversivelmente s enzimas. a) Inibidores competitivos: Inibidor e substrato competem pelo stio ativo da enzima. Um aumento da concentrao de substrato capaz de reverter esse tipo de inibio. EX: AZT, um inibidor da DNA polimerase (transcriptase reversa), necessria para a replicao do vrus HIV.

b) Inibidores no competitivos: Inibidor e substrato no competem pelo stio ativo da enzima. Ligam-se em regies distintas da enzima. Um aumento da concentrao de substrato no capaz de reverter esse tipo de inibio. Ocorre diminuio da velocidade mxima. EX: Metais pesados como Hg+2 (mercrio) e Pb+2 (chumbo) que reagem com os grupos SH das protenas.

REGULAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA Ligao alostrica: efetores (reguladores ou moduladores) ligam no covalentemente em local diferente do stio ativo,alterando a afinidade da enzima pelo substrato e/ou a atividade cataltica. Uma enzima pode conter stios alostricos, para a ligao de efetores (moduladores) negativos e ou positivos; sendo denominada como enzima alostrica.

Controle alostrico

Retroinibio: FeedBack Inibio que o produto final de uma via metablica exerce sobre a primeira enzima desta via. Desta forma, quando aumenta o produto final, a sua sntese inibida pela ligao deste produto com a primeira enzima da cadeia. Esta ligao geralmente reversvel quando os nveis do produto voltam a diminuir.

EX: transformao do aminocido treonina no aminocido isoleucina, que ocorre em cinco etapas. Quando a concentrao de isoleucina atinge um nvel suficientemente alto, a atividade da enzima treonina desaminase inibida. Quando o nvel de isoleucina diminui o suficiente, a enzima volta sua atividade normal. Esse um exemplo de inibio por interao alostrica.

Modificao covalente: adio ou remoo de grupos fosfato de resduos especficos de Ser, Thr e Tyr. Fosforilao e desfosforilao: Quinases e Fosfatases.

Modificao covalente

Ativao proteoltica: As enzimas sintetizadas na forma de um precursor inativo (zimognio), so ativadas quando um ou mais oligopeptdeos so liberados.

Ativao proteoltica

Compartimentalizao celular

Induo ou represso da sntese Leva horas para ocorrer. Comum em enzimas no constitutivas.