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PRACTICA Nº 1 EXAMEN COPROPARASITOLOGICO INTRODUCCIÓN: Este examen es un estudio de materia fecal, indicado en sospechas de infestaciones por parásitos, utilizando

diferentes técnicas y posterior observación microscópica, se pueden observar formas parasitarias de quistes o huevos. Para ello se debe recolectar muestras de materia fecal de 3 a 5 días consecutivos en dos frascos: * 1 frasco de boca ancha con formol al 5%. * 1 frasco sin conservantes (muestras en fresco) para detectar la presencia de protozoarios. Por Ej. Giardias y Coccidios. Rutinariamente se recomienda, cada 4 a 6 meses, se debe realizar un análisis de materia fecal y desparasitar basándose en los resultados. OBJETIVO: Que el alumno aprenda a realizar TODOS los métodos más utilizados en un laboratorio. También que identifique los huevecillos, larvas, quistes y trofozoitos de los parásitos a observar. MATERIAL: Según sea el método a realizar... EXAMEN COPROPARASITOLOGICO DIRECTO: Es un método que es muy fácil de realizar y que nos ayudará a encontrar huevecillos, trofozoitos, larvas y quistes de helmintos y protozoarios. MATERIAL: REACTIVOS: Guantes Solución salina al 0.9 % Cubre bocas Solución de Yodo Lugol Porta objetos Cubre objetos Tubos de ensayo Aplicadores Pipeta Pasteur Frasco recolector EQUIPO: BIOLÓGICO: Microscopio Muestra fecal TÉCNICA: 1

• Se toma un fragmento de materia fecal de aproximadamente 1mm de diámetro con el aplicador. • Se lleva a un porta, el cual contendrá una gota de solución salina o yodo lugol. • Se emulsiona perfectamente, se protege con un cubre y se observa al microscopio. Si la muestra tiene moco con sangre se realiza una toma igual del sitio. MÉTODO DE KATO O VERDE DE MALAQUITA: Este es un método de frotis grueso útil para diagnosticar helmintiasis y además cuantificar la presencia de huevecillos. En este método el reactivo que se utiliza es el verde de malaquita. MATERIAL: REACTIVOS: Microscopio Verde de malaquita al 3% Porta objetos Glicerina pura Cubre objetos Agua destilada Papel celofán TÉCNICA: • Se pone un día antes de la práctica cuadros de papel celofán en la sustancia de verde de malaquita. • Se pone un frotis y se coloca en el cuadro de papel celofán sobre el mismo y se deja reposar durante 1 hora. • Posteriormente se observa a 10X y 40X METODO DE FAUST: Método de concentración de materia fecal para la búsqueda de parásitos o estudio de quistes, huevecillos o larvas. Se toma en cuenta el peso específico de estos para hacerlo notar o sedimentar. MATERIAL: REACTIVOS: Microscopio Agua Cubre objetos Sulfato de zinc Porta objetos Yodo lugol Asas bacteriológicas Mechero de Bunsen Trípie Tela de alambre Vaso de precipitados Agitador 2

y se decanta la muestra. Se observa a 10X y 40X. METODO DE RITCHIE: Es un método de concentración fecal muy parecido al de Faust.Tubos de ensayo Centrifugadora Embudo TÉCNICA: • Se hace una suspensión homogénea con 2g de materia fecal en un vaso de precipitados y se colocan 10ml de agua • Se pasa a través de una gasa colocada en un embudo recolectando la suspensión directamente en un tubo. • Se centrífugan los tubos a 2500 R. se le agregan 2ml de éter etílico y se centrífuga nuevamente. • Al final se observan 4 capas. se homogeniza nuevamente. • Se centrífugan los tubos a 2500 R. • Se decanta nuevamente y se le agregan 5ml de Sulfato de Zinc. • Se centrífuga a 2500 R.P. solo que esta vez se sedimentará en el fondo nuestra materia fecal a examinar.P. MATERIAL: REACTIVOS: Microscopio Solución Salina fisiológica Cubre objetos Formaldehído Porta objetos Yodo lugol Pipetas Pasteur Éter Etílico Vaso de precipitados Agitador Tubos de ensayo Centrifugadora Embudo TÉCNICA: • Se pesan 2g de materia fecal y se hace una mezcla homogénea. • Se hace pasar a través de un embudo (con un gasa) a un tubo de ensayo. se le agrega yodo lugol y se le coloca el cubre.M. y es útil para encontrar huevecillos.M. • Se decanta nuevamente y esta vez se le agregan 5ml de formaldehído y se homogeniza. y se decanta el sobrenadante y se resuspende con agua agitando con el aplicador. se centrífuga nuevamente y se vuelve a decantar hasta que aparezca totalmente transparente.M. se le agregan 7ml de solución salina y se vuelve a centrifugar hasta que el líquido sea transparente. 3 . en un vaso de precipitados con 10ml de agua.P. y con el asa flameada se recolecta el sobrenadante y se coloca en el porta. quistes y trofozoitos muy pesados.

ya que viven como parásitos de plantas y animales. 4 . de agua dulce o marinos. Los que viven en el interior. Ciertos parásitos como los piojos. Muchos son dañinos para la economía y para la salud. se conocen como endoparásitos. y son organismos de vida libre durante el resto de su ciclo vital. se denominan ectoparásitos. sin embargo. como las duelas del hígado. pasan los estadios parásitos de su ciclo vital en un único huésped. Los parásitos heteroicos. Los parásitos temporales viven durante un breve periodo en el huésped. que habitan sobre la superficie del que los hospeda. sin dar ninguna compensación a cambio al hospedador. los parásitos dañan o causan enfermedades al organismo hospedante. Los parásitos permanentes pasan la mayor parte de su ciclo vital dentro o sobre el organismo al que parasitan. es el nombre común de cualquier miembro de un filo de gusanos no segmentados. NEMATODOS: Gusano cilíndrico. como las lombrices intestinales. • Se le agrega agua al vaso de precipitados y se calienta con el mechero.METODO DE AMIBA EN FRESCO: Es un método. • Se coloca el tubo dentro del vaso de precipitados con ayuda de las pinzas. algunas especies causan enfermedades graves. INVESTIGACIONES: PARASITO: Parásito. sencillo de realizar y que nos ayudará en la búsqueda de protozoarios. En muchos casos. evitando que se introduzca agua dentro del mismo y se deja reposar 5 minutos. Los parásitos autoicos. se llaman parásitos obligados. que pueden ser terrestres. también nematodo. del que obtiene parte o todos sus nutrientes. La ciencia que estudia a los parásitos se denomina parasitología. Los gusanos cilíndricos están distribuidos por casi todo el mundo y son muy numerosos en las capas superficiales del suelo. Los parásitos que no pueden sobrevivir sin el huésped. necesitan alojarse en animales diferentes en cada fase de su ciclo vital. como por ejemplo los nematodos parásitos. incluidos los seres humanos. cualquier organismo que vive sobre o dentro de otro organismo vivo. MATERIAL: REACTIVOS: Mechero de Bunsen Yodo Lugol Trípie Tela de alambre Vaso de precipitados Tubos de ensayo Pinzas para tubo de ensayo Termómetro TÉCNICA: • Se colocan aproximadamente 1g de materia fecal dentro de un tubo de ensayo. • Se procede a observarlo al microscopio a 10X y 40X. se deja de calentar hasta que tenga una temperatura de 37º C. así como sus quistes y trofozoitos. Los parásitos facultativos son aquellos que pueden alimentarse tanto de seres vivos como de materia muerta. Las infecciones por gusanos cilíndricos son frecuentes y normalmente pasan inadvertidas.

La cápsula bucal es fuerte. tiene un borde ventral o superior. 5 . Los gusanos planos parásitos suelen presentar ciclos de vida muy complejos. En situación simétrica presenta dos pares de dientes en forma de ganchos. tienen un saco digestivo sin ano y pertenecen al PHILUM de los PLATHELMINTOS. Normalmente se aloja en el intestino delgado y a veces se abre camino hasta otras partes del cuerpo. con cansancio generalizado y daño anatomopatológico importante que puede llegar a causar la muerte. y a las pocas semanas de su maduración en el suelo se vuelven infectantes. UNCINARIA: Es un gusano cilíndrico. alargados. ya que las repercusiones en la salud. En este recorrido. las larvas sufren varias mudas y posteriormente ascienden hacia los bronquios y luego a la faringe. Sus huevos se desarrollan en el agua o en tierra húmeda. La infección tiene lugar cuando los huevos son ingeridos con alimentos contaminados o cuando los niños se meten en la boca las manos sucias que han estado en contacto con suelo contaminado. es de color blanquecino o rosado. Presentan simetría bilateral y son un tanto aplanados dorsoventralmente. cercano y lejano oriente. triangulares y quitinosas. con una organización simple que consiste en un intestino interior y una pared muscular exterior. La especie más conocida es la lombriz intestinal. TREMATODOS: Son gusanos parásitos en forma de hoja lanceolada y son aplastados.Estos gusanos son animales cilíndricos. y a veces requieren de 4 o 5 huéspedes para completarlos. los cuales son la principal fuente de infestación. El filo al que pertenecen los gusanos planos o platelmintos comprende: las tenias. de color blanquecino o rosado. mide de 15 a 25 cm de longitud. La pared exterior segrega una cutícula elástica que el animal muda cuatro veces durante su vida. completándose el ciclo biológico. nombre común de un grupo de animales de cuerpo blando. que en su fase adulta son parásitos del tracto digestivo de los animales. no presentan segmentos. también platelminto. en el borde inferior un par de dientes rudimentarios. Son de distribución cosmopolita en países que explotan el ganado ovino y bovino. en el fondo de la cápsula bucal hay un par de placas pequeñas. Las especies acuáticas se alimentan principalmente de plancton. separadas por una cavidad llamada pseudocele. de Sudamérica y en el sur de China. estan desprovistos de cilios vibrátiles. que atraviesan la pared intestinal y se desplazan al hígado. Por lo general. las duelas. donde son deglutidas. Las crías se parecen a los individuos adultos y se desarrollan sin metamorfosis. con una curvatura cervical que hace que la porción anterior se dirija hacia el dorso. género de gusanos parásitos del filo de los Nematodos. Son los animales más sencillos entre los que poseen cabeza. Los gusanos planos de vida libre se encuentran en prácticamente todos los medios y así. se produce la fecundación y la hembra libera los huevos que son expulsados con las heces. al corazón y a los pulmones. y ahusado en ambos extremos. La mayoría tienen sexos separados y la fecundación es interna. se localizan tanto formas terrestres como marinas o de agua dulce. regiones de África. que infecta a los humanos. La mayoría son alargados. Estos parásitos poseen ventosas musculares fijadoras y su ciclo evolutivo es muy complejo. donde se transforman en adultos. llena de líquido. Es una de las enfermedades más antiguas conocidas por el hombre. por lo general parásitos. Finalmente. ASCARIS: Ascaris. descendiendo por el aparato digestivo hasta llegar nuevamente al intestino delgado. Tienen una longitud que varía desde lo microscópico hasta 10 cm. PLATELMINTO: Gusano plano. Son muy frecuentes al este de Asia. Los huevos ingeridos pasan al intestino donde se liberan las larvas. pero también pueden ser perros y gatos. sobre todo en los países con clima cálido y húmedo. traen como consecuencia retraso en el desarrollo físico y mental. que parasitan diversos órganos de distintos animales. quitinosa y de contorno oval. y los gusanos planos de vida libre. en especial a los niños.

llamada enterobiasis u oxiuriasis. La infección en los humanos. Los síntomas de la infección por oxiuros no son graves: picor.. trastornos intestinales. El hombre y la salud. por lo que la practica me gustó. Editorial LAROUSSE. media cabeza. CONCLUSIONES: Para realizar esta practica debemos tener una buena técnica. Miden alrededor de 1 cm de largo. tiempo de licuefacción el pH y observar las anormalidades que presentan. El análisis se forma en varios aspectos como son medir el volumen. e infectan a los niños con más frecuencia que a los adultos. se produce por la ingestión de agua y alimentos contaminados con huevos de lombrices. Los gusanos adultos se desarrollan en el intestino y ponen sus huevos en la región anal. el color. También en esta práctica haremos una espermatobioscopia. forma alargada. vómitos y nerviosismo. MATERIAL: Microscopio Vaso para la toma de muestra Regla Portaobjetos Caja de Neubauer Probeta 6 . Los oxiuros son los gusanos cilíndricos más comunes. ESPERMATOBIOSCOPIA Fundamento: Suele formar parte de la investigación científica completa de una prueba de infertilidad.OXIURO: gusano nematodo parásito del intestino humano que se encuentra en casi todo el mundo. larvas. así como las deformaciones que pueden presentar los espermatozoides como son: cabeza de alfiler. esto fue muy entretenido y para nada aburrido. OBSERVACIONES: En la práctica. quistes y trofozoitos de parásitos.. cabeza doble. pp. aprendimos todos los métodos (más utilizados en un laboratorio) de exámenes coproparasitológicos y nos dimos cuenta que no vamos a encontrar los mismos parásitos en todos los métodos. Si los huevos se vuelven a tragar se produce una reinfección. prueba de embarazo y prueba de factor reumatoide. cabeza gigante. de ahí la importancia de aprender a realizarlos y conocer lo que vamos a encontrar en cada uno de estos métodos. BIBLIOGRAFÍA: Biblioteca de Consulta Microsoft ® Encarta ® 2005 y Enciclopedia LAROUSSE Integral. etc. PRACTICA Nº 2 EXAMENES INMUNOLOGICOS INTRODUCCIÓN: Estos exámenes nos ayudan a conocer si no tenemos algún tipo de bacteria en nuestro organismo. la viscosidad. Se dan en todas las clases sociales e indistintamente en el medio rural y el urbano. así como identificar huevos. 341−355. OBJETIVO: Que el alumno aprenda a realizar todos los exámenes inmunológicos correspondientes a la mesa de trabajo.

• Con ayuda de una cinta reactiva se medirá el pH. este método esta indicado en el frasco de las cintas reactivas (cómo medir el pH). estar en un estado de gravidez o fertilidad. Existen dos tipos de pruebas de embarazo: cualitativa. y es una prueba que se puede llevar a cabo en sangre (suero) o en orina. que mide la cantidad de hormona que está presente.Pipeta de glóbulos blancos o rojos Cintas reactivas TÉCNICA: • Se procede a que el paciente done la muestra • Se mide el volumen con ayuda de un matraz • La viscosidad se mide con ayuda de dos portas y una regla • El tiempo de licuefacción es el tiempo que tarda la muestra en volverse líquida completamente. VALORES NORMALES: Examen Físico: Volumen: 2−4 ml Color: Blanco−Blanco lechoso Elasticidad: 5−10 ml Tiempo de licuefacción: 15−20 min. y cuantitativa. tomaremos un poco de la muestra y se depositará en la cámara de Neubauer y se procederá a contarlos. Examen Químico: pH: Ligeramente alcalino 7−9 Examen microscópico: Vivos: 70 − 80 % Muertos: 20−30 % Ascendentes: 60 % Descendentes 40% PRUEBA DE EMBARAZO: Fundamento: Es una prueba de diagnostico que se utiliza para detectar el estado de una mujer que se piensa. Una prueba de embarazo mide una hormona llamada gonadotropina coriónica humana (GCH) para determinar si una mujer está en embarazo. • Posteriormente con ayuda de una pipeta de glóbulos blancos o rojos. MATERIAL: 7 . que mide si la GCH está presente.

Tubos de ensayo Sangre Reactivo de hormona gonadotropina coriónica humana (GCH) TÉCNICA: La prueba de la gonadotropina coriónica humana (GCH) en orina por lo general se lleva a cabo mediante la aplicación de una gota de orina en una banda o tirilla química preparada. • Antígeno O Salmonella Typhi • Antígeno Paratyphi A • Antígeno H Salmonella Typhi • Antígeno Paratyphi B • Antígeno Brucella Aborturs • Antígeno Proteus OX−19 TÉCNICA: 8 . El título del anticuerpo depende del tipo y curso de la enfermedad. que generalmente presenta el resultado en uno o dos minutos. Para que los resultados tengan un valor diagnóstico el título de ellos debe aumentar. Las pruebas en suero se llevan a cabo mediante la extracción de un sólo tubo de sangre el cual se envía al laboratorio y es posible que se deba esperar entre algunas horas y más de un día para obtener los resultados. si no se forma nada es negativa. etc. Para que la prueba sea positiva debe formarse un círculo al fondo del tubo de ensayo. REACCIONES FEBRILES: Fundamento: Es una prueba que consiste en analizar una muestra de sangre (suero) para determinar si contiene alguna bacteria que pueda ocasionar enfermedades tales como tifoidea. brucelosis. MATERIAL: Placas con divisiones (de Highlan) Gradillas Tubos de ensayo Aplicadores (palillos) Reactivos Tíficos Pipetas automáticas REACTIVOS. responde produciendo anticuerpos aglutinantes contra ellos los cuales se ponen de manifiesto al entrar en contacto el anticuerpo con el anticuerpo específico. Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando el organismo humano es invadido por agentes infecciosos.

01 0. 3. Observar la aglutinación con ayuda de una lámpara. A cada gota de suero añadir una gota de cada antígeno. La Proteína C reactiva se eleva ante un problema infeccioso o inflamatorio antes que la VSG y comienza a disminuir antes que ella ante la recuperación de la enfermedad.02 0. ya que aparece elevada durante 3 ó 4 días.m) durante 2 ó 3 minutos. 2. Se utiliza para evaluar la presencia de enfermedades infecciosas bacterianas. La proteína C reactiva aparece elevada en el infarto de miocardio. enfermedades inflamatorias (fiebre reumática. Depositar en cada cuadro 0. Su importancia es que reacciona con el sistema del complemento que es un sistema de defensa contra agresiones externas del cuerpo humano. Mezclar con un aplicador limpio ( utilizar un aplicador para cada antígeno.04ml de suero del paciente para cada uno de los antígenos que se vayan a utiliza. Si se trata la enfermedad con Aspirina o antiinflamatorios desaparece su elevación.1.08 0. para luego disminuir. etc.04 0.p. MATERIAL: TÉCNICA: INVESTIGACIONES PROTEINA C REACTIVA: La proteína C reactiva se produce en el hígado cuando hay una infección o inflamación aguda en el cuerpo. Agitar suavemente la placa por rotación (120 r. 4. si persiste elevada es que hay alguna infección o complicación post−quirúrgica. 6.) pero no se eleva de forma habitual en enfermedades producidas por virus. 9 Dilución 1:20 1:40 1:80 1:160 1:329 . artritis reumatoide. También puede ser de ayuda tras una intervención de cirugía. 5. Cuando hay reacción positiva se repite la técnica con diluciones las cuales se obtienen con el uso de las siguientes cantidades del suero en la siguiente forma.005 FACTOR REUMATOIDE: Fundamento: Es una prueba que mide la presencia y nivel de las IgM especifica contra las inmunoglobulinas IgG anormales producidos por los linfocitos de la membrana sinovial de las articulaciones afectadas por artritis reumatoide. Mililitros de suero 0. Anotar el antígeno correspondiente en la placa de vidrio.

empleados para el tratamiento de los portadores. inmóviles. Las epidemias de peste. Sin embargo. que fueron muy importantes en la antigüedad. Las especies que poseen flagelos son móviles. tos. dolores articulares y aborto espontáneo. alimentos. pero en el 20% restante se complica con septicemia. que hoy día se obtiene de forma artificial. La enfermedad remite de forma espontánea tras varias semanas en el 80% de los casos. y con frecuencia produce alteraciones del sistema nervioso central. El organismo que produce la enfermedad fue descubierto en 1887 por el médico y anatomopatólogo británico David Bruce. cada una de ellas con una región constante y una región variable. transmitida a los seres humanos por animales como las vacas. el agua o los alimentos contaminados por heces de enfermos o portadores. los fermentadores. nombre común de una familia de bacterias Gram negativas que reciben este nombre porque suelen encontrarse en el intestino de los mamíferos. diarrea y dolores abdominales. la brucelosis puede presentarse en forma aguda o crónica. Se piensa como ocurre en otras situaciones con las células B. Este fármaco. como la salmonelosis. Los portadores son personas sanas que sufren una infección asintomática y excretan periódicamente el bacilo. FR. fiebre alta y postración. lo que puede servir para indicar el origen y tratamiento de un proceso de meningitis. En los animales. focos de infección salmonelósica a distancia (neumonías. también son producidas por una enterobacteria. Este anticuerpo. FACTOR REUMATOIDE: El factor reumatoide (FR) es un anticuerpo reactivo contra el fragmento Fc de la inmunoglobulina G (IgG). Es una intoxicación muy rápida. Se contagia por la leche. saprofitos. aislado de un moho sudamericano a finales de la década de 1940. osteomielitis. Además. La forma aguda se caracteriza por debilidad. TIFOIDEA: Enfermedad infecciosa aguda producida por el bacilo Salmonella typhi. sigue siendo el tratamiento de elección en la mayoría de los casos. ha reducido de forma significativa la incidencia de brucelosis bovina. La tasa de mortalidad se redujo a partir del descubrimiento del primer antibiótico efectivo frente a la salmonella. el cloranfenicol. fiebre mediterránea y fiebre de las cabras. es producido por los linfocitos B y está compuesto por inmunoglobulinas. es una enfermedad infecciosa causada por varias especies de bacterias del género Brucella. la enfermedad puede producir esterilidad parcial. que se puede inocular al ganado vacuno. Las bacterias se acumulan en el intestino delgado y de ahí pasan al torrente sanguíneo. moscas y excretas). Los síntomas son fiebre.En la meningitis bacteriana aparece elevada y no así en la producida por virus. en casi todos los casos aparece fiebre remitente y alteraciones del sistema nervioso central. cerdos y cabras. Esta afección se ha conocido con el nombre de fiebre de Malta. La enfermedad se adquiere por contacto con animales infectados o al ingerir su leche. que las células B−FR presentaría los antígenos contenidos en los inmunocomplejos a las células T−helper específicas. 10 . En el ser humano. El periodo de incubación varía de una a tres semanas. La entrada en sangre de la bacteria ocasiona los primeros síntomas: escalofríos. la persona que padece brucelosis responde a la administración de antibióticos de amplio espectro. fiebre nocturna elevada. escalofríos. Otros antibióticos útiles son la ampicilina y la amoxicilina. BRUCELLA: También denominada fiebre ondulante. Hay una prueba de aglutinación sanguínea que permite detectar la enfermedad. Los enfermos presentan además cefaleas. porque los síntomas son imprecisos y muy variables. Los que no realizan la fermentación son patógenos. La brucelosis crónica es difícil de diagnosticar. abscesos hepáticos o cerebrales) o perforaciones de la mucosa digestiva con la subsiguiente hemorragia. Como norma. El esquema de transmisión epidemiológica se puede simplificar con las siglas DAME (dedos. PROTEUS: Enterobacterias. El anticuerpo FR está compuesto de dos cadenas pesadas y dos cadenas ligeras. Hay enterobacterias que provocan intoxicaciones alimentarias. La capacidad para fermentar la lactosa y el tiempo empleado en hacerlo sirven para diferenciar los géneros. Estas complicaciones pueden producir la muerte. vómitos y diarrea. el resto. disminución de la producción de leche y abortos. el desarrollo en la década de 1950 de una vacuna denominada cepa 19. La pasteurización de la leche es fundamental para el control de la brucelosis. enfermedad de Bang.

MATERIAL: REACTIVOS: Espectrofotómetro semiautomático manual Solución acuosa de A. Estas especies se mueven con mucho actividad por medio de flagelos perítricos. OBSERVACIONES: Tenemos que estar atentos al realizar una prueba de reacciones febriles y factor reumatoide. Gastón M. BIBLIOGRAFÍA: : Biblioteca de Consulta Microsoft ® Encarta ® 2005 Enciclopedia LAROUSSE Integral. para así dar un buen diagnostico y tratamiento. PRACTICA Nº 3 QUÍMICA SANGUÍNEA INTRODUCCIÓN: La química sanguínea es un examen que utiliza reacciones químicas para analizar la sangre de un paciente. pero al cabo de un tiempo comienza a aglutinar y sería positiva. A continuación se darán las técnicas para obtener TODOS los parámetros solicitados en una Química Sanguínea.C. crecen en medio de cianuro de potasio (KCN). Es uno de los exámenes más importante y más tedioso que se realiza dentro de un laboratorio. Editorial LAROUSSE. por que no hay aglutinación. por lo que me gustó. Pírico Cubetas para espectro Solución acuosa de NaOH Tubos de ensayo Solución de creatinina con Zn2Cl Gradillas Mechero de Bunsen Trípie Tela de alambre Cristalizadores 11 . Graillet Juárez CONCLUSIONES: La práctica fue muy tediosa. lo que da por resultado hormigueo sobre los medios sólidos a menos que este fenómeno se inhiba con productos químicos. Autor: M. ya que a veces creemos que es negativa. OBJETIVO: Que el alumno aprenda a realizar una química sanguínea y reconozca los valores normales y elevados.Los miembros del grupo Proteus desaminan la fenilalanina. El mundo vivo Apuntes de Bacterias. pp. pero al final me divertí haciendo todos los métodos ya antes citados. y fermentan la xilosa. son mótiles. por lo pequeños que son. 250−263. También es un poco difícil contar espermatozoides en una cámara de Neubauer. Nueva estrategia curricular.

. Para combatir esta desventaja.Termómetro Pipetas Pasteur Pipetas de 10ml. CONTROL DE CALIDAD: Incluya en cada corrida de muestras un suero control y/u orina con valores conocidos analizados por este método. Aunque desde entonces se han descrito muchos métodos. Esta reacción esta sujeta a interferencias a causa de varias sustancias como proteínas y glucosa. 5ml. 0.0 ml. TÉCNICA: • Coloque las cubetas del espectrofotómetro a 37º C. La velocidad de formación del color es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra. La creatinina reacciona con el ácido pícrico en un medio alcalino para formar un complejo de color el cual absorbe a 510nm. RESULTADOS: Los valores resultan de comparar el cambio de absorbancia (A) de la muestra (M) con el estándar (S) tratado de la forma idéntica. • Transcurridos exactamente 20 segundos.1ml Pipetas automáticas Sangre TÉCNICA: Según la sustancia. la reacción clásica de Jaffe es la más utilizada. se han desarrollado modificaciones.05ml del estándar en el tubo de ensayo. simples y sin interferencias. Los métodos cinéticos son los más utilizados por ser más rápidos. mezcle inmediatamente y pase a una celdilla de lectura. 12 . CREATININA: Fundamento: En 1886 Jaffe describe un método para la determinación de creatinina haciendo reaccionar un filtrado libre de proteínas con ácido pícrico en una solución alcalina. si el instrumento requiere volúmenes mayores a 1. • Lleve a cero el espectrofotómetro con un blanco de agua destilada a 510nm. • Transfiera 0. • Pipetee 1 ml del reactivo en cada cubeta y preincube por 3 minutos a 37º C. lea y registre absorbancia (A1) • Exactamente 60 segundos después de la lectura inicial lea y registre la absorbancia final (A2) • Calcule el cambio de absorbancias A restando (A1 − A2) NOTA: Todos los volúmenes se pueden duplicar..

La intensidad del color es proporcional a la concentración de glucosa. seguido por el de Teller adicionando un reactivo cromogénico al procedimiento de Keston La glucosa es oxidad en presencia de glucosa oxidasa (GOD).0 − REACTIVO ESTANDAR 13 . El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la influencia de peroxidasa (POD) con fenol y 4aminoantipirina para formar un complejo rojo−violeta de quinona.0 − 0.4 mg/dl (Orina) 600 − 1500 mg/24 horas GLUCOSA: Fundamento: La determinación de los niveles de glucosa fue el primer procedimiento empleado en el laboratorio clínico medico. La metodología de la glucosa−oxidasa fue introducida por Keilin y Hartree en 1948. REACTIVO BLANCO (RB) ESTANDAR (E) 1. Más tarde Keston reportó el uso de un reactivo combinado glucosaoxidasa−peroxidasa. MATERIAL: REACTIVOS: Espectrofotómetro capaz de ab.7 − 1.9 − 1.VALORES NORMALES: Hombres (Suero) 0.5 mg/dl (Orina) 1000 − 2000 mg/24 horas Mujeres (Suero) 0.0 1.01 MUESTRA (M) 1. de 500nm Glucosa Liquicolor ® Pipetas automáticas Estándar de glucosa (100mg/dl) Mechero de Bunsen Trípie Tela de alambre Cristalizadores Cubetas para espectro Agitador Cronometro TÉCNICA: • Coloque en cubetas los siguientes volúmenes (ml) y mezcle bien.

CONTROL DE CALIDAD: Se deben incluir dos sueros control con niveles de glucosa conocidos determinados por este método o por el procedimiento de hexocinasa en cada serie de pruebas.60 g/l. MATERIAL: Espectrofotómetro capaz de dar absorbancias de 505nm Pipetas automáticas Mechero de Bunsen Trípie Tela de alambre Cristalizadores Cubetas para espectro 14 . VALORES NORMALES: Suero / Plasma 70−105 mg/dl (3.3 mmol/l) Líquido cerebro espinal: 40−75 mg/dl (2.MUESTRA − − 0. • Lea E y M contra RB a 500 nm antes de 60 minutos. Estudios epidemiológicos demuestran que el riesgo de contraer enfermedad cardiaca coronaria para individuos de más de 40 años con colesterolemia menor a 2.2−4.10 g/l es 3 veces menor que entre individuos con más de 2. RESULTADOS: Los valores se derivan de la siguiente ecuación: Glucosa (mg/dl)= AM x 100 AE Donde Am y As son los valores de las absorbancias de la muestra y el estándar respectivamente y 100 es la concentración del estándar (mg/dl).30 g/l y 6 veces menor que entre individuos con más de 2. Se recomienda el uso de Suero Control Normal Ser −T− Fy I y Suero Control Anormal Ser −T− Fy II para cada ensayo. • Incube las cubetas a 37º C por 5 minutos o a temperatura ambiente 15−30º C por 10 minutos. Se ha visto que el colesterol es uno de los factores contribuyentes a la formación de ateromas dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen en individuos hipercolesterolemicos.0 ml.9−5.2 mmol/l) COLESTEROL: Fundamento: La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad diagnóstica limitada.01 NOTA: El volumen se puede incrementar si el instrumento requiere volúmenes mayores que 1.

Reactivo 4−AF: Solución de 4−aminofenazona 25 mmol/l. colesterol oxidasa (CHOD) 3 U/ml y peroxidasa (POD) 20 U/ml. CALCULO DE LOS RESULTADOS: Colesterol (g/l)= D x f donde f = 2. S (Standard) y D (desconocido). colocar: Standard (S) Desconocido (D) Standard 20 ul − Muestra − 20 ul Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml Incubar 15 minutos en baño de agua a 37º C o 30 minutos a temperatura ambiente (25º C). TÉCNICA: • En tres cubetas para espectro marcadas B (blanco).5−dicloro−2−hidroxibenzosulfónico (DCHB) en presencia de peroxidasa y 4 aminofemazona.Agitador Cronometro REACTIVOS: Standard: Solución de colesterol 2 g/l Enzimas: Suspensión conteniendo lipasa fungal 300 U/ml. para formar un complejo quinoneimina de color rojo violeta.39 g/l Elevado: > de 2.40 g/l ACIDO URICO: Fundamento: La uricaza sobre el ácido úrico para toma peróxido de hidrógeno y alantoina. Leer en espectrofotómetro a 505 nm.00 g/l S VALORES DE REFERENCIA: El panel de expertos del National Colesterol Education Program (NCEP) provee los siguientes valores de colesterol: Deseable: < de 2. MATERIAL: Espectrofotómetro capaz de dar absorbancias de 520nm 15 . El H2O2 es leído cuantitativamente por su reacción con el ácido 3. llevando a cero con el Blanco.00 g/l Moderadamente alto: 2.00 a 2. Reactivo Fenol: Solución de fenol 55 mmol/l.

0 mg/dl 16 . con estabilizadores y solubilizadores TÉCNICA: 1.0 − 0.Cubetas Mechero de Bunsen Tela de alambre Trípie Pipetas automáticas Cristalizador REACTIVOS: Ácido Úrico Enzimático (liquido).0 − − Estándar (E) 1. Pipetear en cubetas los siguientes volúmenes (ml) y mezcle bien Reactivo Blanco (RB) 1.02 Reactivo Estándar Muestra NOTA: El volumen puede ser incrementado si el instrumento requiere volúmenes mayores a 1ml. determinadas por este método se recomiendan utilizar en cada ensayo. • Lea E y M contra RB a 520nm antes de 15 minutos. No. CALCULO DE LOS RESULTADOS: Se calculan mediante la ecuación: Ácido Úrico en suero o plasma (mg/dl)= AM X 8 AE VALORES NORMALES: Hombres: 3. Cat.4−7.05 ml del estándar o la muestra. Use 2ml del reactivo y añada 0. • Incube todas las cubetas a 37º C por 5 minutos y deje enfriar o incube a temperatura ambiente por 15 minutos.0 0.02 − Muestra (M) 1. CONTROL DE CALIDAD: 2 niveles de sueros controles con concentraciones de ácido úrico conocidas. 1044 Solución acuosa de ácido úrico.

• Lea y registre la absorbancia en 1 minuto. 17 . • Añada 20 (0. Las elevaciones también se observan durante el 3er trimestre del embarazo. MATERIAL: Espectrofotómetro capaz de dar absorbancias de 405nm Cubetas Mechero de Bunsen Tela de alambre Trípie Pipetas automáticas Cristalizador REACTIVOS: Buffer de fosfatasa alcalina (R1) Substrato Fosfatasa Alcalina (R2) PREPARACIÓN DEL REACTIVO: El buffer y el substrato son reactivos líquidos listos para usarse. colitis ulcerativa. Entre estos estan la enfermedad de Hodgkin. • Ajuste a cero el espectrofotómetro con agua destilada. falla congestiva cardiaca. en el cual se utiliza p−nitrofenilfosfato y en el de Schifren y Burnett el cual trata los efectos de los errores de la longitud de onda y el ancho de la banda del espectro.0ml del reactivo de trabajo en una cubeta o tubo de prueba e incube a 37º C por 3 minutos.020ml) de suero al tubo respectivo y mezcle suavemente. Prepare el reactivo de trabajo a razón de 5 partes de buffer (R1) y 1 parte substrato (R2) (ejemplo 50ml buffer y 10ml de substrato). Continúe incubando a 37º C antes de cada lectura.Mujeres 2. • Determine el incremento de absorbancia por minuto (A/min. Y multiplique por el factor 2764 para obtener los resultados en U/l.4−5. La fosfatasa alcalina hidroliza el 4−nitrofenilfosfato para formar 4−nitrofenol y fosfatos. enteritis regional e infecciones bacterianas intra−abdominales. • Para cada muestra y control añada 1.7 mg/dl FOSFATASA ALCALINA: Fundamento: Los niveles de fosfatasa alcalina sérica son de interés en el diagnostico de desordenes hepatobiliares y óseos asociados con el incremento en la actividad osteoblástica. El procedimiento esta basado en el trabajo de Bowers y McComb. Las elevaciones también se pueden observar en varias condiciones que no involucran al hígado o al hueso. TÉCNICA: • Prepare el reactivo de trabajo de acuerdo a las instrucciones.

peritonitis. NITRÓGENO DE UREA: Fundamento: La urea es el principal producto de desecho del catabolismo de proteínas. el cual es producido como resultado de la desaminación de aminoácidos. La disminución de Nitrógeno de Urea (BUN) se ha visto en nefritis. destrucción hepática aguda. Normalmente. G427−86 y el suero control anormal Ser−T−Fy II Cat no. La importancia de la determinación del nitrógeno de urea es su valor como buen indicador del funcionamiento hepático y renal. obstrucción urinaria e intestinal. shock en cirugía y fallas cardiacas. G427−86 son recomendables para verificar precisión y exactitud. Los volúmenes se pueden incrementar al doble si el instrumento requiere un volumen mayor a 1ml. amiloidosis y embarazos. Una unidad por litro (U/l) de fosfatasa alcalina es la cantidad de enzima que produce 1 mmol/l de 4−nitrofenol por minuto. 18 . enfermedad de Addison. el nitrógeno de urea en la sangre comprende sólo el 45% del nitrógeno no proteico. uremia. CALCULO DE RESULTADOS: Los valores se derivan del coeficiente de absorvatividad micromolar a 405 nm. CONTROL DE CALIDAD: El suero control normal Ser−T−Fy I Cat no. MATERIAL: Espectrofotómetro capaz de dar absorbancias de 340nm Cubetas Mechero de Bunsen Tela de alambre Trípie Pipetas automáticas Cristalizador REACTIVOS: Regulador de BUN (R1) Enzima BUN (R2) Estándar de BUN − 30 mg/dl PREPARACIÓN DEL REACTIVO: El buffer y los reactivos enzimáticos líquidos estan listos para su uso. envenenamiento por metales. neumonía. VALORES NORMALES: Rango Normal (Adultos) 34−114 U/l a 37º C. Es sintetizada en el hígado a partir del amonio.NOTA: Si la cubeta no esta a temperatura controlada incube las muestras a 37º C antes de cada lectura. Valores elevados de BUN se han visto en casos de nefritis aguda y crónica.

0ml de reactivo de trabajo a la cubeta y llevar a 37º C por 3 minutos.Prepare el reactivo de trabajo en una porción de 5 partes Buffer (R1) y 1 parte de enzima (R2). VALORES NORMALES: BUN: 8−23 mg/dl UREA: 17−49 mg/dl INVESTIGACIONES SUERO: Es una sustancia formada exclusivamente por agua y también por minerales o electrolitos. BUN suero (mg/dl)= Au X 30 As Donde Au y As son los cambios de absorbancias (decrementos) de la muestra y del estándar. • Calibre a cero el espectrofotómetro a 340nm con agua destilada.010ml) de suero a cada tubo respectivamente y agitar levemente. su lugar de almacenamiento de estas sustancias vienen siendo las células grasas razón por la cual. agregar 1. • Por cada Muestra y Control. mantener el reactivo de trabajo a temperatura ambiente. Magnesio. en la diarrea profusa. cloro. • Leer y anotar la absorbancia (A1) después de 30 segundos. El suero se observa en herida como esa parte amarillenta en la misma. 15−25º C por lo menos 30 minutos. CALCULO DE RESULTADOS: Los valores se derivan de la comparación de l cambio de absorbancia (A) de muestra (m) con la del estándar (s). • Adicionar 10 (0. por ejemplo una sudoración excesiva. 19 . De las sustancias que se hayan formando el suero tenemos: Calcio. NOTA: Si la cubeta no está a temperatura controlada incube las muestras a 37º C entre lectura y lectura. TÉCNICA: • Prepare el reactivo de trabajo de BUN de acuerdo al instructivo. cuando una persona realiza ejercicio expulsa gran cantidad de agua. • Calcule el cambio de absorbancia por minuto (A) mediante la resta (A1−A2). es decir. Potasio. • Exactamente a los 60 segundos después de leer (A1) lea y registre la absorbancia (A2). (por ejemplo 25 ml de buffer y 5 ml de enzima). CONTROL DE CALIDAD: Los sueros control Normal Ser−T−Fy I y suero control anormal Ser−T−Fy II son recomendados en cada ensayo. Sodio. tendrá un pH alcalino. respectivamente y 30 es la concentración del estándar (mg/dl). en el vomito. Antes de utilizarse. en todos aquellos casos fisiológicos y patológicos que se reflejen por una perdida total de líquidos. La deficiencia de alguna de estas sustancias se puede producir por una perdida elevada de líquidos.

el tabaquismo o la obesidad. de fórmula CO(NH2)2. de ahí el otro nombre alternativo dextrosa (del latín dexter. Industrialmente. Cuando el colesterol se eleva en la sangre por encima de unos niveles. hay que considerar que. cuyos efectos se suman a la hora de facilitar un evento cardiovascular. Se consideran normales. pero las células del cerebro. La urea se obtiene mediante la síntesis de Wöhler. Actúa como precursor en la síntesis de vitamina D. Se encuentra en la miel y en el jugo de numerosas frutas. La urea está presente también en mohos de los hongos así como en las hojas y semillas de numerosas legumbres y cereales. de enzimas. El trifosfato de adenosina o ATP es la principal fuente de energía del organismo. y en medicina para el tratamiento de la deshidratación y alimentación intravenosa.. que almacena de forma temporal grupos fosfato de alta energía disponible para aportarla cuando se necesite. Las disoluciones de glucosa giran el plano de polarización de la luz a la derecha. por lo que utilizan la creatina de forma complementaria. corazón y músculos requieren enormes cantidades de energía. almidón y glucógenos. en el hígado. pero. está presente en la sangre. valores de colesterol en la sangre iguales o inferiores a 200 mg/dl. en la linfa y en los fluidos serosos. existen otros factores de riesgo cardiovascular. 20 .. El nombre alternativo azúcar de uva proviene de la presencia de glucosa en las uvas. y también en los excrementos de los peces y muchos otros animales inferiores. y ligeramente soluble en éter. El colesterol pertenece a un grupo de compuestos conocidos como esteroides. TRIGLICÉRIDOS: Grupo de compuestos orgánicos existentes en la naturaleza que consisten en ésteres formados por tres moléculas de ácidos grasos y una molécula del alcohol glicerina. El nitrógeno de la urea. o más frecuentemente. Se produce en la hidrólisis de numerosos glucósidos naturales. La fermentación de la glucosa por la acción de levaduras produce alcohol etílico y dióxido de carbono. sobre todo. y está relacionado con las hormonas sexuales producidas en las gónadas y las hormonas de la corteza suprarrenal. considerados como normales. de fórmula C6H12O6. celulosa. con un punto de fusión de 132. como la creatina fosforilada o fosfocreatina.GLUCOSA: Azúcar monosacárido. en las hipercolesterolemias moderadas se sitúan entre 250 y 299 mg/dl y en las hipercolesterolemias graves los valores de colesterol superan los 299 mg/dl. La glucosa está presente en la sangre de los animales Es un sólido cristalino de color blanco. procede de la descomposición de las células del cuerpo. maltosa. aunque el colesterol es el factor de riesgo más importante de las cardiopatías isquémicas en pacientes menores de 50 años. Su aplicación más importante es como agente edulcorante en la elaboración de alimentos. La urea se forma principalmente en el hígado como un producto final del metabolismo. Es soluble en agua y en alcohol. En las hipercolesterolemias leves los valores de colesterol se sitúan entre 200 y 249 mg/dl. se produce una enfermedad conocida como hipercolesterolemia. las células la absorben y en su interior se transfieren grupos fosfato de alta energía procedentes del ATP de las mitocondrias. 'derecha'). Son sustancias aceitosas. Creatina: sustancia presente en el torrente sanguíneo de los vertebrados que se utiliza como molécula portadora de energía suplementaria en algunos sistemas del organismo (la arginina desempeña un papel equivalente en los invertebrados). COLESTEROL: Colesterol. que fue diseñada en 1828 por el químico alemán Friedrich Wöhler. Sin embargo. como la hipertensión. La glucosa se forma en la hidrólisis de numerosos hidratos de carbono. conocido también como carbamida.7° C. La glucosa cristaliza en tres formas diferentes y cada una de ellas gira el plano de polarización de la luz en distinto grado. También se emplea en curtidos y tintes. que constituye la mayor parte del nitrógeno de la orina. la diabetes. CREATININA: Compuesto derivado de la degradación de la creatina. UREA: compuesto cristalino incoloro. algo menos dulce que el azúcar destinado al consumo. Esta sustancia se produce en los riñones y en el hígado. la glucosa se obtiene en la hidrólisis del almidón bajo la acción de ácido diluido. alcohol complejo que forma parte de todas las grasas y aceites animales. de las proteínas de los alimentos. En cantidades menores. como la sacarosa. Se encuentra abundantemente en la orina de los humanos y otros mamíferos.

Esta comparación permite determinar la concentración de la sustancia que ha producido ese espectro. pp. igual que los prismas. Los primeros se aplican especialmente al análisis de espectros de infrarrojos. y los segundos al de espectros ultravioletas. son químicamente similares a las grasas. por lo que me gustó. son poco solubles en alcohol y se disuelven fácilmente en éter y otros disolventes orgánicos. mientras que los aceites fijos (para distinguirlos de los aceites esenciales y el petróleo) son líquidos. Ciencia y tecnología CONCLUSIONES: La práctica fue muy tediosa. Editorial LAROUSSE. FOSFATASAS ALCALINAS: Enzimas que liberan fosfatos inorgánicos de ésteres fosfóricos. blanco. Las grasas y aceites son más ligeros que el agua e insolubles en ella. La gota es el resultado de una alteración en el metabolismo del ácido úrico. 21 . Las redes de difracción pueden emplearse. Al calentarse forma urea. que se forma en el cuerpo como resultado del metabolismo de las proteínas. Las grasas son blandas y untuosas a temperaturas ordinarias. amoníaco y dióxido de carbono. El ácido úrico es muy poco soluble en agua e insoluble en alcohol y éter. 108−154. pero al final me divertí haciendo todos los métodos ya antes citados. se definen como ácidas o alcalinas según sean más activas a valores de pH < o > 7 ACIDO URICO: compuesto nitrogenado. que son sólidos duros a temperaturas ordinarias.grasientas o cerosas. Los espectrofotómetros también son útiles para estudiar espectros en las zonas no visibles porque sus elementos de detección son bolómetros o células fotoeléctricas. Algunas ceras. tanto en los espectrógrafos como en los espectrofotómetros. que en estado puro son normalmente incoloras. inodoras e insípidas. Las piedras en los riñones formadas por sales de ácido úrico aparecen en personas con altos niveles de este ácido en la orina. inodoro e insípido. y en cantidades mayores en la orina de los pájaros y reptiles. BIBLIOGRAFÍA: : Biblioteca de Consulta Microsoft ® Encarta ® 2005 Enciclopedia LAROUSSE Integral. de fórmula C3H4N4O3. OBSERVACIONES: Tenemos que estar atentos al realizar una prueba de cualquier parámetro ya que es difícil de realizar por los tiempos que te dan. Está presente en pequeñas cantidades en la orina humana. ESPECTROFOTOMETRO: El espectrofotómetro se usa para medir la intensidad de un espectro determinado en comparación con la intensidad de luz procedente de una fuente patrón. a veces es muy poco y tenemos que apurarnos y estar atentos para hacer un buen análisis.