ESPE INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA

Cultivo de Embriones de Frutos Inmaduros
Carrera G, Solis N. Escuela Politécnica del Ejército , Sangolquí, Pichincha, Ecuador, 2013 RESUMEN El cultivo de embriones de frutos inmaduros se realizó sumergierondo los frutos en una solución al 2% de detergente más tween 20 durante 10 minutos y en una solución de cloro al 5% más Tween 20 durante 2 minutos en agitación. Se sembró los embriones en medio MS enriquecido con: 2 mg L-1 de kinetina, 0,5 mg L-1 de AIA, 100 mg L-1 de mioinositol, 30 g L-1 de azúcar y 6,5 g L-1 de agar. pH ajustado a 5,7 – 5,8.

INTRODUCCIÓN La técnica del cultivo de embriones fue iniciada por Laibach (1925) en híbridos interespecíficos de Linum, mientras Brienk y col (1944) fueron los primeros en emplear ese método en cereales (Kott y col, 1985). Esta técnica puede utilizarse para eliminar la dormancia de la semilla, la cual ha sido exitosa en y otra aplicación práctica es para evitar el deterioro o pérdida de la viabilidad de la semilla, que resulta en la pérdida de la variedad asociada también con el daño al genoma (Pérez, 2006). El cultivo de embriones ha ayudado al mejoramiento genético de especies arbóreas porque acorta el tiempo de siembra floración, ya que los embriones cultivados in vitro no necesitan un periodo de latencia previo. Por medio del cultivo de embriones es posible acortar la latencia y producir plántulas para el trasplante a las dos o tres semanas (Roca, 1991). El objetivo de la práctica es obtener brotes a partir de embriones de frutos inmaduros

MATERIALES Y MÉTODOS Preparación explante y desinfección del

Se escogieron frutos inmaduros uno para cada integrante del grupo, en total cinco. Los frutos se lavaron en agua corriente para eliminar las impurezas más grandes. Se sumergieron los frutos en una solución al 2% de detergente más tween 20 durante 10 minutos en agitación. Las muestras se enjuagaron dos veces con agua destilada y una con agua estéril. Se eliminó el agua y se sumergieron los frutos en una solución de cloro al 5% más Tween 20 durante 2 minutos en agitación. Se realizaron tres lavados con agua estéril dentro de la cámara de siembra. Siembra del material vegetal Se trabajó con todas las medidas asépticas necesarias. Se desinfectó adecuadamente la sala de siembra, cámara de flujo laminar y el material de siembra. Se sembraron dos semillas del mismo fruto por cada estudiante en dos frascos y hubo un caso de solo uno, en

 RESULTADOS El medio MS en donde se sembró los embriones no presenta contaminación. Al extinguirse la llama se realizó un corte transversal al fruto.total 2 frascos por grupo. W. Instituto de Investigaciones del Arroz. Colombia. Se selló el frasco con 2 capas de plástico adherente y una liga. la contaminación y viabilidad fueron evaluados una semana después. Los embriones se han engrosado y uno ha perdido el tegumento.Cuba. a las concentraciones de citocininas o auxinas o a que solo son dos semanas desde la siembra de los embriones. Cultivo de tejidos en la Agricultura: Fundamentos y aplicaciones. Una vez realizados los lavados dentro de la cámara. DISCUSIÓN El tratamiento de desinfección es el adecuado para esta práctica. 0. pH ajustado a 5. Fig1: Foto de embriones de frutos inmaduros de Citrus limon .A. Segunda edición. 100 mg L-1 de mioinositol.M.8 . 4 semillas fueron extraídas y colocadas directamente al frasco de medio MS enriquecido con: 2 mg L-1 de kinetina. Antes de sellar el frasco se flameó la boca. La pérdida de los tegumentos se debe a la humedad captada del medio.5 mg L-1 de AIA. No se observa presencia de brotes. Las semillas han adquerido un color un poco oscuro y están recubiertos de una cubierta gelatinosa.5 g L-1 de agar. (2006). CIAT. Roca. Los frascos fueron rotulados con la fecha. y L..7 – 5. lo que también indica que la manera de sembrar fue correcta. se atomizó con alcohol al 90% y se acercó a la llama del mechero. Curso de Capacitación en Mejoramiento Genético del Arroz. o al tiempo corto para la toma de datos. las iniciales del estudiante y el tipo de explante. (1993). Mroginski. No se sabe si la no presencia de brotes se debe a errores del medio de cultivo. 30 g L-1 de azúcar y 6. La Habana. Los residuos se colocaron en una funda destinada a ser basurero. Se Incubaron los 5 frascos. Cali. No se puede determinar si el medio usado es el correcto o si la concentración de auxinas o citocininas son las correctas porque todavía es un tiempo demasiado corto como para comenzar a ver la presencia de brotes. CONCLUSIONES  Los métodos de desinfección son los adecuados porque no existe presencia de hongos o bacterias. ya que ninguno de los explantes sembrados tuvo contaminación. se sostuvo el fruto con una pinza. A. BIBLIOGRAFÍA Pérez.