Cultivando o Saber Viabilidade do Plen de Milho Adriano Balbinot1, Robson M.

Delai2; Amir Jos Klein Werle3

133

Acadmico do curso de Agronomia-FAG, 2Professor do curso de Agronomia da Faculdade Assis Gurgacz Avenida das Torres n. 500, CEP: 85.806-095, Bairro Santa Cruz. Cascavel, PR.; 3Msc. pesquisador Syngenta Seeds Ltda. t_balbinot@hotmail.com, robson@fag.edu.br, amirjkw@yahoo.com.br

Resumo: O milho uma gramnea da famlia Poaceae, tribo de Maydeae, gnero Zea e espcie Zea mays L., um cereal essencialmente americano, pois nesse continente que se encontram os seus parentes selvagens mais prximos: Teosinte e Tripsacum. O presente trabalho foi desenvolvido na Estao Experimental da Syngenta Seeds Ltda, tendo o objetivo de verificar a viabilidade do plen. Gros de plen de duas linhagens de milho foram colocados em trs tratamentos diferentes, gua, cmara fria e ambiente natural, onde esses gros de plen ficaram, 0, 12, 24, 36 horas. A porcentagem de germinao dos gros de polens foram analisada pela quantidade de sementes em cada espiga. Para as analises estatsticas foi utilizado o programa SISVAR, anlise de regresso quadrtica ou de 2 grau. Os resultados obtidos indicam que os gentipos a ambiente bem como o numero de horas influenciam a viabilidade do plen de milho, assim como o ambiente de cmara-fria apresentou-se como e meio mais adequado para armazenagem do plen, porm insuficiente para armazenamento por longo perodo. Palavras-chave: Zea mays L., conservao, plen

Viability of pollen the maize Abstract: Mayze is a grass family Poaceae, tribe Maydeae, genus and species Zea mays L., maize is a cereal essentially American, because it is that continent which are their closest wild relatives, teosinte and Tripsacum. The present work was developed at the experimental station of Syngenta Seeds Ltda., with the objective of verifying the viability of pollen. Pollen grains from two strains of corn were placed in three different treatments, water, cold-room and natural environment where these pollen grains were, 0, 12, 24, 36 hours. The percentage of germinated pollen grains was analyzed for the amount of seeds in each ear. For the statistical analysis program was used SISVAR, quadratic equation or second degree. The results indicate that the genotypes to the environment as well as the number of hours affecting pollen viability of maize, as well as the environment of cold-room and introduced himself as the most appropriate medium for storing pollen, but not enough storage for a long period. Keyworks: Zea mays L., conservation, pollen.

Introduo O milho uma gramnea da famlia Poaceae, Tribo Maydeae, Gnero Zea e Espcie Zea mays L. A tribo Maydeae caracteriza-se por flores unissexuadas geralmente inflorescncias masculinas e femininas separadas nas mesmas plantas. um cereal de origem

Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

134

americana, pois nesse continente que se encontram os seus parentes selvagens mais prximos do Teosinte e Tripsacum (Werle, et al. 2011). A origem do milho tem despertado o interesse de muitos pesquisadores resultando em uma extensa literatura sobre o assunto e inmeras pesquisas e adaptaes, tornando assim o milho uma espcie altamente domesticada, pois no sobrevive sem a interveno humana (Borm e Miranda, 2007). Por ser um cereal muito importante o milho tornou-se uma das espcies vegetais mais estudadas, onde inmeros programas de melhoramento trabalham nessa cultura, em busca de novas variedades, hbridos e linhagens que satisfaam tanto o produtor o consumidor e tambm as indstrias alimentcias. Atualmente o milho produzido em todos os continentes, sendo os maiores produtores os Estados Unidos, China, Brasil e Mxico com, 333, 155, 53 e 21 milhes de toneladas anuais, respectivamente, na safra 2009/2010 a produo mundial de milho foi de 805 milhes de toneladas (USDA, 2010). Nos programas de melhoramento de milho para o desenvolvimento de novos hbridos, novas linhagens ou novas variedades, h necessidade de se fazer cruzamentos entre diferentes gentipos ou diferentes linhagens existentes, ento comum a necessidade de cruzamentos entre gentipos de ciclos distintos no havendo dessa maneira o sincronismo no florescimento, o que inviabiliza a produo de sementes (Ferreira et al., 2007), surgindo assim em muitos casos a necessidade de conservao e armazenagem do gro de plen, Sprague e Johnson (1977) relataram que para a preservao da viabilidade de gros de plen, faz-se necessrio a manuteno de baixos teores de gua dos gros de plen e temperatura baixas durante o armazenamento e, em alguns casos, a excluso do oxignio do interior dos recipientes de armazenamento. Os mtodos de polinizao de milho so relativamente simples principalmente pela separao das inflorescncias masculinas e femininas. Portanto praticamente qualquer processo de melhoramento pode ser empregado, independentemente de envolver a produo de um ou mais tipos de famlia, auto-fecundaes ou cruzamentos mltiplos. Os mtodos de polinizao podem ser de dois tipos; i) polinizao aberta, normalmente utilizada na produo de poucos cruzamentos mas em grandes quantidades ou de vrios cruzamentos com um testador exige isolamento no tempo ou no espao; ii) polinizao manual, permite realizar os diferentes tipos de cruzamentos exigidos pelos delineamentos genticos em programas de melhoramento de populaes (Pinto, 2009). O milho uma espcie algama, ou seja, numa populao na qual no se pratica controle de polinizao os descendentes so em sua maioria decorrentes de polinizao Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

135

cruzada, com freqncia superior a 95% de produo cruzada. A alogamia conseqncia de duas caractersticas da espcie: a) monoicia, que caracteriza-se pela presena no mesmo individuo de rgo produtores de gameta masculino e femininos na mesma planta porem em estruturas ou inflorescncias diferentes; b) protandria, quando rgos ou gametas masculinos amadurecem antes dos rgos ou gametas femininos. Os gametfitos masculinos so produzidos no pendo, inflorescncia masculina localizada no pice da planta, ao passo que os gametfitos femininos so produzidos na espiga ou boneca, inflorescncia feminina que se desenvolve na axila de uma ou de duas folhas localizada na parte central da planta (Raven, et al., 2001). O presente trabalho tem como objetivo avaliar a viabilidade do plen em diferentes horrios e em diferentes meios de conservao, testando os diferentes horrios, aps a retirada do pendo.

Material e Mtodos O presente trabalho foi conduzido na Estao Experimental da Syngenta Seeds Ltda. Foram utilizadas sementes de milho hbrido STATUS TL usado como receptor de plen ou receptor feminino, e sementes de duas linhagens L62 e L28 como doadoras de plen. O plantio das linhagens ocorreu no dia 20 de Janeiro de 2010 e o plantio do hibrido trs dias depois, foram semeadas trs linhas de cada linhagem e 18 linhas do hibrido, ambos com 20 m. de comprimento e com espaamento 0,2 m. entre plantas dentro das linhas, assim foram obtidas 300 plantas viveis de cada linhagem, 1800 plantas do hibrido que ir receber plen para constituir os diferentes tratamentos. O delineamento utilizado foi de blocos completos com tratamentos casualisados, com 3 repeties e cada repetio consta de 3 espigas escolhidas aleatoriamente dentro das parcelas do hibrido para preceder a polinizao. O delineamento dos tratamentos foi um fatorial com 3 fatores com; Gentipo (2), Ambiente (3) e Horas (4), formando um fatorial 2 x 3 x 4, sendo horas um fator quantitativo e sua significncia deve ser analisada em analise de regresso, com quatro diferentes horas amostradas dever ser analisada em uma regresso cbica ou de terceiro grau. Para anlises estatsticas foram utilizados o programa estatstico SISVAR. As bonecas ou inflorescncia feminina do hibrido foram cobertas com saquinhos plsticos antes da emisso do estigmas, aps 65 dias do plantio foram iniciados os procedimentos de coleta de plen das linhagens, cobrindo os pendes com sacos de papel para assim proceder coleta do plen, aps as 4 horas foram batidos os pendes separadamente e Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

136

fazendo um bulk de plen de cada linhagem, aps isso foram separadas as amostras de gro de plen para cada repetio e cada tratamento, e levada para seus determinados ambientes. Os tratamentos utilizados foram: a) b) Linhagens: as linhagens utilizadas foram; L62, L28. Ambientes: foram utilizados trs ambientes distintos; Natural, no ambiente

natural as amostras contendo os gros de plen foram armazenado no laboratrio de manipulao de sementes, com temperatura e umidade ambiente; Cmara Fria: as amostras foram guardadas na cmara fria com temperatura media de 11.3C e uma umidade de 56%; gua: as amostras foram cobertas com gua e armazenadas no laboratrio de manipulao de sementes em temperatura ambiente. c) Horas: as amostras foram colocadas nos ambientes citados por diferentes

horrios: 0, 12, 24 e 36 horas de armazenamento, das amostras de gros de plen. A colheita foi feita manualmente bem como a debulha, as sementes das espigas foram contadas e computadas para as analises estatsticas necessrias. As variveis analisadas foram numero de gros por espiga, aps a contagem foram feita a transformao dos dados Log(10).

Resultados e Discusso Na tabela 1 podemos ver o resultado da anlise de varincia do experimento, os resultados demonstram a significncia dos diferentes tratamentos; i) o efeito de linhagem, mostrando que o efeito de gentipos influenciam na viabilidade do gro de plen; ii) de ambiente, mostrando que a forma e local de armazenagem de plen influencia a viabilidade de plen; iii) e de horas, indicando que devido a numero de horas o gro de plen vai perdendo a viabilidade. As interaes linhagem x ambiente, ambiente x horas, bem como a interao tripla linhagem x ambiente x horas, apresentaram significncia, sendo que apenas a interao linhagem x horas no apresentou interao significativa a 5% de probabilidade pelo teste de F. A presena de interao significativa, implica um maior esforo do pesquisador em detalhar mais a anlise dos dados (Zimmermann, 2004). Vale ressaltar que devido a no homogeneidade das varincias, e a presena de valores iguais a zero, foi procedido da converso de dados atravs de Log(10) (Banzatto e Kronka, 2006). O experimento apresentou um coeficiente de variao 8,17% que demonstra boa preciso experimental em que foi conduzido o experimento.

Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber Tabela 1 Anlise de Varincia dos dados convertidos de numero de gros por repetio FV BLOCO LINHAGEM (L) AMBIENTE (A) HORAS (H) LxA LxH AxH LxAxH ERRO TOTAL GL 2 1 2 3 2 3 6 6 46 71 SQ 0.004 0.363 0.973 56.777 0.421 0.113 1.442 0.302 0.877 QM 0.002 0.3627 0.487 18.926 0.211 0.038 0.240 0.050 0.019 Fc Pr>Fc1, 2 0.117 19.029 0.000 25.534 0.000 993.049 0.000 11.053 0.000 1.972 0.131 12.612 0.000 2.643 0.028

137

** ** ** ** NS ** *

1 - Valores seguidos por **, *, so significativos a 1% , 5% de probabilidade pelo teste de F. 2 valores seguidos por ns, no significativos pelo teste de F.

Nos grficos 1, 2 e 3 esto presentes os resultados das anlises de regresso, em relao a viabilidade de plen. Pode-se notar no grfico 1 que o ambiente natural (AMB1) com 0 horas foi igual aos demais, porem a medida que foram se passando as horas ele apresentou uma maior perda de viabilidade em relao aos demais ambientes, este resultado deve ter sido influenciado pelo temperatura, uma vez que neste ambiente a temperatura mais elevada em relao ao ambiente de gua e cmara-fria, estes resultados concordam com o obtidos por Ferreira, et al. (2007), que estudando a conservao e viabilidade do plen de milho, verificaram que ao decorrer do dia com o aumento da temperatura e umidade relativa do ar houve diminuio na viabilidade do gro de plen. No ambiente de gua (AMB2) a curva de regresso apresentou-se mais constante em relao aos demais ambientes, onde em 0 horas apresentou o mesmo valor que aos demais, e com 36 horas apresentou viabilidade maior em relao ao ambiente natural e menor que o ambiente de cmara-fria (AMB3), esses resultados so efeitos da menor variao de temperatura a que a gua sofre, Roy, et al. (1995), verificaram que em temperaturas elevadas diminui significativamente a viabilidade do gro de plen. No ambiente de cmara-fria (AMB3) apresentou os mesmos valores com 0 hora porem com 36 horas apresentou a melhor viabilidade de plen em relao aos outros ambientes. Com a linhagem L62 (LIN1) o ambiente de cmara-fria apresentou-se resultados melhores para armazenagem do gro de plen por at 36 horas, e como era de esperar o ambiente natural apresentou e menor valor, se demonstrado assim a incapacidade para armazenagem de plen desta linhagem neste ambiente.

Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

138

Figura 1 - Resultados da regresso da linhagem L62 (LIN1) no ambiente Natural (AMB1), gua (AMB2) e Cmara-fria (AMB3), em diferentes horas, 0, 12, 24 e 36 horas.

No grfico 2, esto apresentados os resultados da curva de regresso em relao a linhagem L28 (LIN2), no ambiente natural, a 0 horas apresentou os mesmos valores aos demais ambientes, porem com 12 e 24 horas apresentou valor superior ao ambiente de cmara-fria e inferior em relao ao ambiente de gua, o ambiente de gua apresentou uma menor curva de regresso sendo mais constates em relao ao numero de horas comparado aos demais ambientes, resultado idntico ao obtido com a linhagem L62. Para o ambiente de cmara-fria apresentou a menor valor de polens viveis ao decorrer das horas apresentando uma possvel estabilizao aps 24 horas. No grfico 3 pode ser visto que a linhagem L28 (LIN2) com 36 horas apresentou valores semelhantes nos diferentes ambientes. Assim tambm mostra que a linhagem L62 no ambiente de cmara-fria, apresenta melhor adaptao para a armazenagem neste ambiente, por at 36 horas. Devide, et al. (1984), afirmam que a viabilidade e vitalidade do gro de plen podem variar de acordo com o gentipo utilizado, resultado confirmado neste trabalho. Os resultados obtidos em cmara-fria sugerem que o gro de plen tem uma perda de viabilidade maior nas primeiras horas de armazenagem, porem ao passar das horas mantm uma porcentagem maior de plen vivel em relao aos demais ambientes testados, onde aps 24 horas apresenta uma estabilizao (plat) na perda de viabilidade do plen. A gua mantm uma estabilidade na perda de vigor, apresentando uma curva de regresso menor, ou Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

139

seja, comportando-se de forma linear, isso pode ser efeito da menor variao de temperatura sofrida ao decorrer do tempo, porem para armazenagem em perodos mais longos o teor de gua inviabiliza o plen, resultados relatados por Ferreira, et al (2007), que por perodo de 14 dias com teor de umidade de 51,7% armazenado na geladeira, no apresentou plen vivel, j com teores de gua menor como 21,7% apresentou 8,8% de plen vivel nas mesmas condies de armazenagem .

Figura 2 - Resultados da regresso da linhagem L28 (LIN2) no ambiente Natural (AMB1), gua (AMB2) e Cmara-fria (AMB3), em diferentes horas, 0, 12, 24 e 36 horas.

No ambiente natural, pode-se dizer que at 12 horas a viabilidade de plen superior a 50%, porem apresentando uma queda acentuada a partir das 12 horas de armazenagem do gro de plen. Para a maioria das espcies, baixas temperaturas e umidade de armazenamento favorecem a longevidade e viabilidade do gro de plen, pois diminuem as atividades metablicas e ao de microorganismos (Devide, et al., 2009). A viabilidade do gro de plen diminui substancialmente como o armazenamento a decorrer das horas, independente do meio em que for armazenado, resultados igual ao obtido por Ferreira, et al (2007). A temperatura bloqueia algumas aes enzimticas de degradao atrasando o mecanismo de inviabilizao. Assim este tipo de armazenamento o mais indicado, pois o mesmo mantm o plen com maior viabilidade dentro das primeiras 24 horas, sofrendo uma atenuada perda de viabilidade aps este perodo, mantendo um padro constante tambm at 36 horas ps-armazenamento.

Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

140

Figura 3 - Resultados da regresso das linhagens 1 e 2 (LIN1 e LIN2) no ambiente Natural (AMB1), gua (AMB2) e cmara-fria (AMB3), em diferentes horas, 0, 12, 24 e 36 horas.

Alguns tipos de protena e aminocidos influenciam a viabilidade de plen, e sua desnaturao ou degradao podem diminuir a viabilidade do gro de plen, Plfi e Kves (1984) avaliaram o teor de prolina na germinao de gro de plen de centeio e milho e identificaram que o seu contedo proporcional a germinao e vitalidade do plen destas culturas. Porem outros fatores como estado nutricional da planta, condies ambientais e receptividade do estigma podem exercer influencia significativa na viabilidade do gro de plen (Barnabs, et al. 1988). Algumas alteraes fisiolgicas podem reduzir a viabilidade do gro de plen como; mudanas na velocidade da respirao celular, converso de aucares em cidos orgnicos, acmulo de produtos metablicos como, cidos orgnicos, alteraes dos lipdios (Stanley e Linskens, 1974). Todas essas caractersticas em conjunto fazem com que o gentipo influencie na viabilidade do plen, bem como na significncia das interaes com ambiente e horas, resultados obtido neste trabalho.

Concluses Os resultados obtidos permitem chegar s seguintes concluses, sobre os gentipos, ambientes e horas estudadas:

Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

141

- O gentipo, ambiente e o nmero de horas (tempo) influenciam a viabilidade do gro de plen; - O plen vivel por um determinado perodo de tempo, sua viabilidade diminuiu com a extenso deste tempo; - A cmara-fria apresenta-se o meio mais adequado para armazenagem do plen, devido a suas propriedades conservativas, porem insuficiente para armazenagem por grande perodo;

Referncias BANZATTO, D.A.; KRONKA, S.N. Experimentao agrcola. 4. ed. Jaboticabal: Funep, 2006. 237p. BARNABS, B. KOVACS, G. ABAANYI, A.; PFAHLER, P. Effect of pollen storange by drying and deep freezing on the expression of different agronimic traits in maize (Zea mays L.). Euphytica, 39: 221-225, 1988. BORM, A.; MIRANDA, G.V. Melhoramento de plantas. 4. ed. Viosa: UFV, 2007. 525p. DAVIDE, L. M. C.; PEREIRA, R. C.; ABREU, G. B.; SOUZA, J. C.; VON PINHO, E. V. R. Viabilidade de plen de milho em diferentes perodos de armazenamento em baixa temperatura. Revista Brasileira de Milho e Sorgo, 8:199-206, 2009. FERREIRA, C. A.; VON PINHO, E. V. R.; ALVIN, P. O.; ANDRADE, V.; SILVA, T. T. A.; CARDOSO, D. L. Conservao e determinao da viabilidade de gros de plen de milho. Revista Brasileira de Milho e Sorgo, 2:159-173, 2007. FERREIRA, D. F. SISVAR: um programa para anlise e ensino de estatstica. Revista Cientfica Symposium, 6:36-41, 2008. PLFI, G.; KVES, E. Determination of vitality of pollen on the basis of its amino acid content. Biochemie und Physiologie der Pflanzen, 179:237-240, 1984. PINTO, R.J.B. Introduo ao melhoramento gentico de plantas. 2. ed. Maring: Eduem, 2009. 351p. RAVEN, P.H.; EVERT, R.F.; EICHHORN, S.E. Biologia vegetal. 6. ed. Rio de Janeiro: Guanabara-Koogan, 2001. 906p. ROY, S. K.; RAHAMAN, S. M. L.; SALAHUDDIN, A. B. M. Pollination control in relation to seed yield and effect of temperature on pollen viability of maize (Zea mays). Indian of Journal of Agricultural Science, 65:785-788, 1995. SPRAGUE, J. R.; JOHNSON, V. W. Extraction and storage of loblolly pine (Pinus taeda) pollen. In: Southern Forest Tree Improvement Conference, 14:20-27, 1977.

Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011

Cultivando o Saber

142

STANLEY, R. G.; LINSKENS, H. F. Pollen: biology, biochemistry and management. New York: Springer verlag, 1974. 172p. USDA-United States Department of Agriculture. Disponvel em: <http://www.usdabrazil.org.br/home/suppliers-of-us.asp. 2010>. Acesso em: 03/01/2011. WERLE, A. J. K. Avaliao dialelica de linhagens elites e hbridos de milho. Maring: Universidade Estadual de Maring - UEM, 2011. 70p. Dissertao (Mestrado em Gentica e Melhoramento de Plantas). ZIMMERMANN, F. J. P. Estatstica aplicada pesquisa agrcola. Santo Antnio de Gois: Embrapa Arros e Feijo, 2004. 402

__________ Recebido em: 25/05/2011 Aceito para publicao em: 08/06/2011

Cascavel, v.4, n.2, p.133-142, 2011