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FACULTAD DE BIOQUIMICA Y CIENCIAS BIOLOGICAS LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGIA OPERACIONES Y PROCESOS BIOTECNOLOGICOS I - Año 2009 GUÍA DE PROBLEMAS UNIDADES TEMÁTICAS

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Y

III

Problema 1: Un proceso fermentativo se lleva a cabo en un CSTR de volumen V1 = 1 m3. El crudo, que es estéril, contiene el sustrato en una concentración de 60 g/m3. El proceso está gobernado por las siguientes cinéticas de formación de biomasa y consumo de sustrato: 4 rx = — 3 s ——— 4+s

x

rs = -10 rx donde: x = concentración de biomasa, g m-3 s = concentración de sustrato, g m-3 rx = velocidad de formación de biomasa,g m-3 h-1 rs = velocidad de formación de sustrato, g m-3 h-1 a) Calcule el máximo flujo de alimentación tolerado por el quimiostato y la máxima productividad celular, esta última expresada en (g células h-1 m-3) b) Para llevar la capacidad de alimentación de crudo a 3.75 m3h-1 en condiciones de máxima productividad, se propone la incorporación de un nuevo reactor de volumen V2. Calcule este volumen para el caso en que los reactores se dispongan en paralelo. c) Para el mismo caudal de alimentación y el volumen V2 calculado en (b), determine la producción de un arreglo en serie del mismo par de reactores, considerando las dos alternativas. Discuta las diferencias entre ambas secuencias y entre éstas y el arreglo en paralelo.

Problema 2: Se pretende diseñar (esto es, calcular su volumen) un reactor tanque continuo agitado, para producir 1.2 kg/h de cierto tipo de biomasa a temperatura ambiente (25-30 °C). La cinética de formación de la biomasa puede representarse adecuadamente mediante el modelo de Contois:

μ = μmax —————
s + Ks x donde s es la concentración del sustrato limitante, en g sustrato/l Los parámetros de la ecuación de Contois para el sistema en estudio a 25 °C fueron ajustados en el rango 28 g/l ≤ s ≤ 42 g/l , resultando:

s

μmax = 0.75 h-1 y Ks = 4 g sustrato/g biomasa

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obviamente para la producción deseada -. (c) Verifique si en la solución obtenida en (b) la concentración de sustrato está dentro del rango en que fueron ajustados los parámetros de la ecuación de Contois. (a)Diseñe el reactor . Reporte el volumen del reactor.5 h-1 0. pero adoptando como criterio de diseño la minimización de su volumen. ¿aceptaría como válidos los resultados obtenidos en (b)? ¿Qué recursos utilizaría para superar esa dificultad? (d) Escriba las ecuaciones que le permitirán predecir el valor de las concentraciones de biomasa y de sustrato 24 horas después de la interrupción simultánea de la alimentación y salida del reactor diseñado según (b).05 g/l 0.01 g/l 0. los caudales de alimentación y de salida y las concentraciones de sustrato y biomasa en la corriente de salida. Si así no fuera. Explicite las hipótesis de su modelo de reactor.utilizando como criterio la condición de que el valor de la concentración del sustrato en la corriente de salida sea igual al 75% del valor correspondiente a la corriente de alimentación al reactor. El rendimiento en biomasa en el rango de concentración de sustrato de interés es: YX/S = 0. Reporte las mismas variables que en la parte (a). (b) Diseñe el reactor . con una concentración de sustrato sf = 40 g/l.45 g biomasa/g sustrato. tomando i = x/10 Problema 4: En la figura adjunta se representa el crecimiento de cierto tipo de biomasa. La velocidad específica de crecimiento graficada puede expresarse mediante la ley logística: 2 . (a) Grafique la concentración de biomasa x y la de sustrato s en función del factor de dilución D para un sistema cuya velocidad de producción de biomasa rx está dada por: rx = μmax s x —————————— Ks + s + i Ks /Ki con: s0 x0 Ks Ki i = = = = = = = 10 g/l 0 1 g/l 0. Derive las ecuaciones para los cocientes (s/si) y xD/(xD)i donde el subíndice “i” indica condiciones de presencia del inhibidor.La alimentación es estéril.1 g células/g sustrato μmax YX/S Incluya en el mismo gráfico los valores de x y s para i = 0 (b) Asuma un CSTR diseñado para operar en condiciones libres de inhibición. Problema 3: Diseño de un Reactor Tanque Continuo Agitado (CSTR) con inhibición. una vez superada la fase “lag”.obviamente para la producción deseada . ¿Cómo afecta la presencia del inhibidor el comportamiento del reactor en lo que a (xD)max y “lavado” del reactor respecta? (c) Repita (a) y (b) para el caso en que i aumenta con x.

Opine al respecto.0 m3 cuando al sistema se alimentan 0. La formación de biomasa está acompañada por la producción de etanol (C2H6O). f) Otro colaborador sostiene que el CSTR del esquema propuesto es innecesario.9 m3/h de crudo estéril. ya que con el mismo reactor tubular operando con un gran reciclo puede igualarse y aún superarse la producción del esquema del punto (b).6N0.8O0.15 utilizando glucosa (C6H12O6) como fuente de carbono. 0 50 1 2 3 4 5 6 7 8 50 Concentracion de células (g/litro) 40 40 30 30 20 20 10 10 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 0 t (horas) Problema 5: Se está analizando un proceso de producción de un microorganismo de fórmula CH1. Opine. sobre esta propuesta.x μ = μmax (1 − ) k a) Obtenga los parámetros μmax y k b) Calcule la producción de esa biomasa en un esquema de reactores consistente en un Reactor Tanque Continuo Agitado Ideal (en estado estacionario) de 2.0 m3 de volumen seguido de un Reactor Tubular (operando en condiciones de flujo pistón) de 3. c) ¿Qué porcentaje de la máxima productividad se alcanza en el CSTR operando en las condiciones del punto (b)? d) Determine el máximo caudal que puede procesarse con el esquema del punto (b) e) Alguien sugiere que invirtiendo el orden de los reactores en la secuencia puede mejorarse la producción. Para obtener información sobre la bioreacción se 3 . fundamentando matemáticamente su respuesta.

En tal caso.0 g glucosa/l y 1.115 c)Asumiendo que μ = μ g etanol/g sustrato. YP/S = 0. a cambios en el caudal de dilución D.00 8.00 11.025 0. e)Dimensione un reactor tanque agitado continuo capaz de producir la misma cantidad diaria de etanol procesando un crudo con la misma composición.1.86 3.0175 l g −1h −1 .1 a)Determine si los rendimientos sustrato/biomasa y sustrato/etanol pueden considerarse constantes en el rango de concentraciones analizado b)Determine si puede representarse la cinética de formación de biomasa con una expresión del tipo $ s .1 se presenta la respuesta de un CSTR con alimentación estéril y una vez alcanzado el estdo estacionario. s ≤ 2 Ks 2 Ks . D (h-1) s (mg l-1) x (g cél l-1) t (h) 4 .94 2. donde s es la concentración de glucosa. (d) y (e).425 g biomasa/g sustrato.10 7. Caudal de alimentación (l/h) 0. en el rango s ≤ 2 Ks.00 1. En la tabla 6. d)Dimensione un reactor tanque agitado continuo capaz de obtener la misma producción diaria de etanol a partir de la misma cantidad diaria de crudo utilizada en el reactor discontinuo. a partir de un medio conteniendo inicialmente 10.75 2. utilizando ese microorganismo. estime el valor de la constante μ $ s . Problema 6: La velocidad específica de producción de cierto microorganismo sobre glucosa puede expresarse mediante la Ecuación de Blackman: μmax μmax s ⎯⎯⎯ .0 g biomasa/l. alimentado con una corriente estéril conteniendo glucosa en una concentración s0 = 30 g/l.08 4.100 0.24 3. dimensione un reactor tanque agitado discontinuo capaz de producir. con μ $ = 0. En la tabla 6.70 5.150 Concentraciones en la corriente de salida (g/l) Biomasa Glucosa Etanol 12.30 2.04 9. s ≥ 2 Ks μ= donde s es la concentración de glucosa.25 11. "aproximación de 1er. Reporte las concentraciones de biomasa y glucosa al finalizar la fermentación.realizan experiencias utilizando un reactor tanque continuo perfectamente agitado de 1 litro de volumen útil.050 0.2 se reportan los resultados para un reactor “batch”. Reporte el caudal de alimentación de crudo que le permite operar en estas condiciones.0 kg de etanol en 24 horas.075 0. Orden a la Ecuación de Monod": μ = μ $ . pero en condiciones de máxima productividad. operando en la región s ≥ 2 Ks.125 0. Analice críticamente las diferencias entre los resultados de (c) . obteniéndose los resultados que se muestran en la Tabla 5.81 10.30 2.58 Tabla 5. 5. YX/S = 0.56 9.45 3.

g de sustrato consumido para energía de mantenimiento/(g × células unidad de tiempo) Y = rendimiento aparente.2 (s >2 Ks) a) Estime los valores de los parámetros μmax y Ks b) Adoptando μmax = 0.60 2.1 (s < 2 Ks) 0. asumiendo exceso de sustrato puede ser escrita: 1 –— Y μx = 1 –— Y’ μx – ke x donde: Y’= rendimiento del crecimiento celular. obtenga las expresiones de la concentración de biomasa. El rendimiento biomasa/sustrato es constante: Yx/s = 0.0 m3 h-1 de crudo no estéril. x.67 18 38 58 85 Tabla 6. s.23 0. la ecuación resultante. g células producidas/g de sustrato consumido para el crecimiento ke = “constante de mantenimiento”. ¿qué podría representar físicamente el término kex? Existen estados estacionarios no triviales (es decir. con x>0) para cualquier s>0 y D < Dmáx?. calcule la producción horaria de un CSTR de 1 m3 de capacidad cuando al mismo se alimentan 2.5 3. c) Compare la producción obtenida en (b) con la de un reactor tubular de igual volumen operando en régimen de flujo pistón y alimentado en las mismas condiciones que el CSTR.44 2. Dmáx.5 1. del factor de dilución máximo.36 0.0.0 2.50 1.49 0.40 Tabla 6. para el caso en el que μmáx s x rx = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ – ke x ( Ks + rs = – ⎯⎯ Y 1 s) μmáx s x ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ ( Ks + s) Discutir analogías y diferencias con el caso desarrollado en clase. Problema 8 : Cuando un término negativo es incluido en la cinética celular para modelar el metabolismo endógeno o la energía de mantenimiento.36 1. de sustrato.5 8.4 g biomasa/g glucosa. g células/gramos de sustrato consumido 5 .0 5. conteniendo glucosa en una concentración s0 = 250 mg l-1 y biomasa en una concentración x0 = 100 mg l-1. y de la productividad máxima de biomasa (Dx)máx. En particular. d) Analice críticamente sus resultados.865 h-1 y Ks = 66 mg l-1. Puede extender sus conclusiones a cualquier rango de variación de las varibles D y s ? Problema 7: Basándose en el modelo para el “quimiostato de Monod” desarrollado en clase.

aerogenes sobre glicerina graficado en la figura responde a este modelo. Problema 9: La pretendida equivalencia entre el modelo de Luedeking-Piret para el crecimiento y formación de productos (1) y el modelo de energía de mantenimiento de Pirt (2) ha sido objeto de polémica permanente.(a) Demuestre que en un CSTR. Y’y D en estas condiciones? (c) Analice cuantitativamente si el crecimiento de A.s) (b) ¿Qué relación debe existir entre ke. g sustrato/(g célula . (1) rfp = α μ x + β x (2) 1 — Y = 1 — Y’ + m — μ donde: Y = rendimiento celular observado basado en sustrato Y’ = coeficiente de rendimiento de crecimiento (teórico o sin mantenimiento) m = coeficiente de mantenimiento. h) 6 . x y s están relacionados a través de: D Y’ ————— ke Y’ + D x = (s0 . Dé una opinión fundada al respecto.

75 h-1. El caudal a tratar es de 1000 l/h. desde el punto de vista del volumen total de reactores a construir.1 g sustrato/g de biomasa formada. Opine al respecto. con una concentración del contaminante s0 = 120 mg/l y no contiene biomasa. determine los parámetros de la ecuación de Andrews $ = 0.01875 mg h l -1 -1 μ* = 0.Problema 10: Un microorganismo se utilizará para remover parcialmente un contaminante de aguas residuales. Formule y resuelva el problema de optimización para esta última alternativa. Ks = 40 mg/l y KI = 10 mg/l.15 h -1 μ (h ) -1 s = 20 mg/l * s (mg de sustrato/litro) Problema 11: Considere un CSTR con separador de biomasa y reciclo como el que se muestra en la figura. el primero de ellos diseñado para operar en condiciones de máximo μ y el segundo para completar el tratamiento hasta el grado de contaminación tolerado (10 mg/l). La velocidad específica de crecimiento del microorganismo sobre el sustrato a remover se muestra en la figura y puede representarse mediante la Ecuación de Andrews: $ μ=μ s Ks + s + s2 KI El consumo específico del sustrato a remover es de 0. 7 . a) A partir de la información disponible en la gráfica adjunta. (δμ/δs)s->0 = 0. diseñe un CSTR capaz de reducir la b) Adoptando μ concentración del contaminante a 10 mg/l. fundamentando matemáticamente su respuesta d) Otro biotecnólogo sugiere que la configuración del punto (c) puede mejorarse encontrando el volumen de cada reactor que hace mínimo el volumen total. consiste en utilizar dos CSTR en serie. Reporte la concentración de biomasa a la salida del reactor c) Alguien sugiere que un mejor diseño. aprovechando el hecho de que el contaminante constituye un sustrato necesario para el crecimiento celular.

0 h-1 y k = 20. Al reactor conteniendo 2. el volumen útil del reactor es V= 1 m3.5 kg de biomasa y 10 kg de glucosa. El rendimiento biomasa/sustrato es constante: Yx/s = 0. μmax = 0.4 g biomasa/g glucosa.0 m3 de crudo estéril se cargan 0.x FR.xf F'.F.0 g l-1 b) Calcule la concentración de biomasa a la salida del esquema operando en condiciones de máxima productividad cuando el caudal de alimentación es F = 1 m3/h c) Determine todos los caudales y concentraciones de las corrientes involucradas en el esquema operando en condiciones de máxima productividad cuando el separador produce una concentración en la corriente de reciclo xR = 3 xs.xR F. demuestre que si la alimentación es estéril y la cinética de formación de biomasa responde a la ecuación: x μ = μmax (1 − ) k la máxima productividad que puede obtenerse de este esquema es: Pmax = μ max k 4 siendo x la concentración de biomasa en g l-1. μmax = 1.x0 F'.xS a) Mediante un balance de biomasa global en el esquema. x la de biomasa. Su velocidad específica de producción responde a una cinética con inhibición por biomasa del tipo: μ = μmax ————— s + Ks x donde s es la concentración de glucosa.0 g sustrato/g biomasa. s 8 .2 h-1 y Ks = 4. d) Verifique que con los valores obtenidos en (c) se satisface el balance de biomasa en el reactor Problema 12: Un reactor tanque agitado de 2.0 m3 de volumen útil se operará en forma discontinua para producir cierto microorganismo sobre glucosa.

Problema 13: Se dispone de un reactor tanque continuo agitado y de un reactor tubular. k = 40 g l-1 y x la concentración de biomasa.75 h-1 .6O0. se produce una levadura de fórmula CH1. en g l- -1 . CO2 y H2O.0 g l-1 de biomasa. μmax = 0. se suspende la alimentación de O2 al bioreactor y se cambian las condiciones del medio para que la levadura formada produzca un compuesto determinado con un rendimiento YP/S = 0. respectivamente. Las concentraciones iniciales de glucosa y biomasa son 50. Como fuente nitrogenada se utiliza NH3.5N0. ambos de 1 m3 de volumen útil. La cinética de formación del producto es de primer orden en la concentración de biomasa: rfp = β x . conteniendo 1 m3 de medio de cultivo. a) Encuentre el arreglo en serie de los reactores que le permite obtener la mayor producción cuando al esquema se alimenta 1 m3 h-1 de alimentación no estéril conteniendo 10.0 g l-1. los únicos productos de la bioreacción son biomasa. Puede considerar que el reactor tanque continuo agitado es ideal y que el reactor tubular opera en régimen de "flujo pistón" b) Determine la producción de un arreglo en paralelo de esos mismos reactores. conteniendo sustrato en una concentración s0 y biomasa en una concentración x0.0 g l-1 y 2. y no se reproduzca más. El rendimiento biomasa/sustrato es YX/S = 0. con β = 0. para producir cierto tipo de biomasa cuya velocidad específica de crecimiento puede expresarse mediante la ley logística: x μ = μmax (1 − ) k siendo μmax = 0.52 g biomasa/ g glucosa.15 por fermentación aeróbica de glucosa en un reactor discontinuo perfectamente agitado.6 h-1 y Ks = 2.15 g producto/(g biomasa h) s 9 . si el caudal de alimentación se distribuye en partes iguales c) ¿Cómo distribuiría el caudal de alimentación en el arreglo en paralelo para obtener la máxima producción? Problema 14: Para producir un determinado producto.a) Determine el tiempo de operación si se establece como criterio que la fermentación debe detenerse cuando rx alcanza su valor máximo. pero operando en forma semicontinua: con corriente de alimentación pero sin corriente de salida. b) Plantee el sistema de ecuaciones cuya resolución le permitiría conocer para un dado tiempo t. Reporte las concentraciones finales de biomasa y sustrato. las concentraciones de biomasa y sustrato si la fermentación se lleva a cabo en el mismo reactor. se utiliza la siguiente estrategia: En una primera etapa. de caudal constante F. La alimentación es estéril.5 g l-1 Cuando la concentración de biomasa alcanza los 10 g l -1.70 g producto/g glucosa. En esta etapa. en g l-1. El volumen inicialmente cargado al reactor es V0. con una concentración de sustrato sf. La velocidad específica de formación de biomasa está dada por: μ = μmax ————— s + Ks donde s es la concentración de glucosa.

El rendimiento másico de la bioreacción es Y X/S = 0. se interrumpe el reciclo.0 Conc.62 7. y contiene toda la biomasa producida (esto es.1)Determine el tiempo total de la operación necesario para obtener 20 kg de producto.5 1 1. μ máx = 2.0 10 . y complete la Tabla 7 de especificación de las corrientes en esa situación. para distintos caudales de dilución: D(h-1) 0.13 Caudal (m3/h) Conc.53 s (g/l) 1. Proponga un procedimiento para encontrar ese óptimo 3)Calcule la cantidad de O2 consumido durante la etapa de fermentación aeróbica Problema 15: El sistema esquematizado en la figura (un reactor tanque contiuo perfectamente agitado de 1 m3 de capacidad. 1 2 3 5 4 a) Calcule la máxima productividad de biomasa.0 0. Sustrato ( gl −1 ) 40.02 6.32 g biomasa/g sustrato. no hay biomasa en la corriente de reciclo). Compare la producción en la nueva situación con la anterior y comente acerca de las ventajas del reciclo. Proponga modificaciones al sistema para mejorar la producción. Corriente Descripción N° 1 2 3 4 5 Alimentación Entrada al Reactor Salida del Reactor Reciclo Salida del Sistema Tabla 7 b) Encuentre el estado estacionario a que se llega si alimentado el sistema según (a).5 h −1 y Ks = 250. en g/(lh). en g sustrato l −1 .5 2 x (g/l) 7.37 2.45 7. que puede esperarse de este sistema. con reciclo) se utilizará para producir un microorganismo cuya cinética de crecimiento responde a la "aproximación de primer orden de la Ecuación de Monod ": μ = μ máx s Ks siendo s la concentración de sustrato. Reporte la concentración de glucosa al final de la operación 2)Formule el problema de minimización del tiempo de operación requerido para obtener la producción deseada del compuesto. La concentración de sustrato no se altera en el separador. Biomasa ( gl −1 ) 0.87 5.0 g sustrato l −1 . El separador opera de modo tal que el caudal de la corriente de salida del sistema es el 20% del caudal de la corriente que ingresa al separador.63 3. Problema 16: En la Tabla 8 se reportan las concentraciones de un cierto microorganismo (x) y de sustrato (s) obtenidas en un CSTR con alimentación estéril conteniendo 20 g/l de sustrato.

con Ki = 3. b) Obtenga la expresión del rendimiento observado de la bioreacción transcurriendo en un CSTR: Yobs = x − xe (donde el subíndice "e" denota "entrada" al bioreactor) se − s en función de los parámetros del modelo y de la concentración de sustrato en el reactor. μ max = 125 . YX / S = 0. o si ante la presencia de inhibición por biomasa resulta aplicable la Ec.2. biomasa (g/l) 11 . de Contois.05 h −1 .55 g b / g s .01 Tabla 8 6. a) Determine si puede modelarse la cinética de producción de biomasa con la Ecuación de Monod. determine el caudal de alimentación de una corriente estéril conteniendo el sustrato en una concentración s0 = 25 g s / l que hace máxima la producción de biomasa de un reactor tanque continuo perfectamente agitado de 1 m3 de capacidad. Problema 17: Para determinar la cinética de formación de un microorganismo se hace la siguiente experiencia: a un reactor tanque continuo perfectamente agitado se alimenta una corriente estéril conteniendo el sustrato limitante en una concentración s0 = 25 g / l . Reporte el caudal al que debe alimentarse el crudo y las concentraciones de sustrato y biomasa. k d = 0.75 g s / g b .37 a) Verifique si las cinéticas de formación de biomasa (rx) y de sustrato (rs) pueden representarse mediante el siguiente modelo: $ s x − kd x rx = μ $ μ rs = − s x Y $ . μ = μ max s s + Ki x b) Estime los parámetros de la Ecuación que mejor aproxima los resultados experimentales y el rendimiento biomasa/sustrato YX/S. Tiempo de Residencia (h) Conc. sustrato (g/l) Conc.45 g biomasa / g sustrato μ dimensione un CSTR de volumen mínimo capaz de producir 10 kg/h del microorganismo cuando es alimentado con un crudo estéril en el que la concentración de sustrato es se = 15 g/l.5 6. c) Asumiendo que se cumple (a) con: $ = 0. h −1 . c) Asumiendo que puede utilizarse el Modelo de Contois. Y = 0.4 g sustrato −1 l h −1 . obteniéndose los resultados de la Tabla 9 para distintos valores del caudal de alimentación. Reporte las concentraciones de biomasa y de sustrato a la salida del reactor operando en las condiciones halladas. k d e Y parámetros (constantes). determine los valores de esos parámetros siendo μ a partir de la información de la Tabla 8. En caso afirmativo.

5 3.29 17.5 2.70 7.55 14.0 2.92 8.47 /////////////////// 12 .0 1.5 22.0 3.48 Tabla 9 1.1.52 4.08 5.10 7.71 9.31 10.47 12.