LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II

LICENCIATURA EN QUÍMICA

UACJ
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LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II

LICENCIATURA EN QUÍMICA

ICB
PROGRAMA DE QUÍMICA
ANALISIS QUÍMICOS II
Universidad Autónoma de Ciudad Juárez Instituto de Ciencias Biomédicas Departamento de Ciencias Química Biológicas

Manual
Q. B. P. ARMANDO MARQUEZ

Cd. Juárez Chihuahua Fecha:

Contenido

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LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II

LICENCIATURA EN QUÍMICA

PRACTICA 1: MAXIMO DE ABSORCION Y CURVAS DE CALIBRACION ---------------- 3 PRACTICA 2: DETERMINACION DE FENOLES TOTALES POR ESPECTROFOTOMETRIA------------------------------------------------------------------------------- 5 PRACTICA 3: DETERMINACION DE NITROGENO (NITRITO) EN AGUA------------------ 7 PRACTICA 4: DETERMINACION DE FIERRO----------------------------------------------------- 9 PRACTICA 5: NITROGENO DE NITRATO, METODO ESPECTOFOTOMETRICO ULTRAVIOLETA SEGÚN LA NORMA MEXICANA NMX-AA-082-1986 (MODIFICADA)---------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 11 PRACTICA 6: PRINCIPIO ACTIVO DE UN MEDICAMENTO COMERCIAL--------------- 14 PRÁCTICA 7: DETERGENTES EN MUESTRAS ACUOSAS------------------------------------16 PRÁCTICA 8: DETERMINACION DE CALCIO EN UNA MUESTRA DE AGUA MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA (EAA)-------------- 18 PRÁCTICA 9: DESPLAZAMIENTO DE MAXIMOS DE ABSORCION EN ESPECTROS UV-Vis------------------------------ ------------------------------------------------------------------------20 PRÁCTICA 10: ANÁLISIS DE CADMIO EN AGUA POR FLUORESCENCIA MOLECULAR----------------------------- ----------------------------------------------------------------23 PRÁCTICA 11: FOSFORO INORGANICO EN SUERO HUMANO---------------------------- 25 PRÁCTICA 12: ESPECTROFOTOMETRIA DE INFRARROJO EN LA IDENTIFICACIÓN DE COMPUESTOS ORGANICOS--------------------------------------------------------------------- 27 PRÁCTICA 13: PROCESOS DE EMISION MOLECULAR (LUMINISCENCIA)------------- 29 ACTIVIDAD PRELIMINAR POR PARTE DEL ALUMNO---------------------------------------30

PRACTICA No. 1 MAXIMO DE ABSORCION Y CURVAS DE CALIBRACION

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Para aplicar la ley de Beer debe SELECCIONARSE LA LONGITUD DE ONDA OPTIMA.025 y 0. y para este propósito se determina la curva espectral.2 M mida la absorbancia en intervalos de 40 nm desde 400 hasta 700 nm. Las curvas resultantes se llaman espectros de transmitancia y espectro de absorción respectivamente. Para probar la ecuación A = EbC se prepara una serie de soluciones de concentraciones conocidas. Las desviaciones de la ley son designadas como positiva o negativa de acuerdo a que la curva este arriba o abajo de la línea recta. Si la ley de Beer es obedecida en los rangos de concentración probados. FUNDAMENTO TEORICO CURVAS ESPECTRALES La ley de Beer es de gran importancia en análisis cuantitativo debido que muestra que le variación de A es directamente proporcional a la concentración de un soluto.1. El espectro en le región IR son altamente discretas y por tanto especialmente útiles para el análisis cualitativo. manteniendo la concentración C y el espesor de celda (b) constantes. Con la solución 0. siempre se debe probar la validez (u obediencia) de la ley para dicho material y en general esto se aplicará mientras no se conozcan les desviaciones de la ley de Beer por un material homogéneo. Algunas sustancias tienen espectros con muchos picos. grafique longitud de onda contra concentración y determine el máximo de 4 .2 M de nitrato de cobalto.05. Encienda el instrumento espectrofotómetro de visible. y por tanto estas curvas pueden ser utilizadas para el análisis cualitativo de un soluto en particular. déjelo calentar por 20 minutos y fije en cero de absorbancia y/o 100 % de transmitancia contra un blanco de agua destilada. se obtendrá una línea recta que parte del origen. Mejorar las habilidades en el manejo de espectrofotómetros de visible. 0. Las absorbencias medidas son graficadas como una función de la concentración.0125 M de dicha sustancia para elaborar su curva estándar. dentro de un rango que se crea cubre las concentraciones de muestras desconocidas y se determina la absorbancia A para cada una de las muestras a espesor y longitud de onda constantes. PROCEDIMIENTO Preparar una solución 0. Las sustancias orgánicas generalmente tienen curvas espectrales más complicadas. PRUEBA DE LA LEY DE BEER Para usar la ley de Beer en análisis exactos de un material homogéneo. 0.. A partir de la solución anterior prepare soluciones a 0.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA OBJETIVO Determinar el máximo de absorción y elaborar la curva de calibración para una solución de nitrato de cobalto. Para el análisis cuantitativo se seleccione una longitud de onda donde el soluto absorbe fuertemente y las sustancias interferentes absorben mínimamente. En la práctica cada por ciento de transmitancia (%T) o Absorbencia (A) se grafica como una función de la longitud de onda. Las curvas espectrales son características de le sustancia absorbente.

Fije la longitud de onda al máximo de absorción. Todas las medidas se deben hacer contra un blanco del solvente utilizado en la preparación de muestras. 2 5 . PRACTICA No. grafique concentración contra absorbancia y obtenga su curva de calibración respectiva. Mediante el programa Excel obtenga el coeficiente de correlación y la ecuación de su curva.20 nm con respecto al máximo de absorción identificado y establezca el máximo de absorción optimo. haga dos medidas más en + .LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA absorción. ponga a cero de absorbancia contra el blanco y mida las absorbancias de las muestras estándar.

A cada una de las soluciones estándar preparadas anteriormente se les agrega lo siguiente (en ese orden): i) 2. PROCEDIMIENTO 1. 2. patrón a un matraz aforado de 100 ml y afore con agua destilada.0 ml 500..0 ml 800.0 0. Un gran número de derivados del fenol se han usado como antisépticos. de esta última dilución preparar los siguientes estándares de calibración: Concentración (microgramos/L) Volumen de solución 50. La cantidad de color producido es una función de la concentración de fenol en la muestra. El fenol altera y precipita las proteínas celulares envenenando así directamente todas las células.0 ml 200. verifique que el pH sea 10.0 ml de esta solución deben de poder ajustar el pH de 100 ml a 10.. que se licua (fenol líquido) al agregar 5% de agua. FUNDAMENTO TEORICO Método aprobado por la EPA para la determinación de fenoles totales en muestras de diversos orígenes como aguas residuales. Los compuestos tipo fenólico reaccionan con la 4-aminoantipirina en presencia de ferricianuro de potasio a un pH de 10. dando lugar a un compuesto colorido (rojo-café).0 ml 0.0 blanco (0..LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA DETERMINACION DE FENOLES TOTALES POR ESPECTROFOTOMETRIA OBJETIVO Mediante espectrofotometría visible determinar la cantidad de fenoles totales en una muestra problema. antioxidantes y conservadores.5 ml 100. Buffer pH = 10: 16.A partir de la solución patrón de fenol prepare la siguiente disolución: diluya 10. Solución patrón de fenol al 0.9 gr de NH4Cl en 143 ml de NH4OH concentrado y diluir a 250 ml con agua destilada. solo se reporta la concentración de fenoles totales en la muestra.0 10. salinas y superficiales. 6 .0 2. anestésicos locales. desinfectantes. Este método no diferencia entre distintos tipos de fenoles. germicidas.0 ml de la sol. El fenol puro es un compuesto blanco.Preparar las siguientes soluciones: aminoantipirina al 2 % en agua destilada.0 8. industriales.0 5.0 ml) 3.0 1. 2.0 ml de la solución amortiguada.1 % en agua destilada.0 ml de la solución de aminoantipirina y se mezcla.0 ml 1000. ii) 2. sólido. domésticas. Ferricianuro de potasio K3Fe(CN)6 al 8 % en agua destilada.

iiii) Después de 15 min.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA iii) 2. Se lee la absorbancia a 510 nm.0 ml de la solución de ferricianuro de potasio y se mezcla...Sobre su muestra problema repita del paso no. 4. 3 en adelante. PRACTICA No. 5. 3 DETERMINACION DE NITROGENO (NITRITO) EN AGUA 7 .Haga una grafica de absorbancia contra concentración y determine la concentración de su muestra problema.

5 mL y afore a 25 mL. Nitritos.Disolver 0. partiendo de la solución patrón de nitrito De estas soluciones tome 2.0 ml del reactivo revelador. espere 10 min y lea la absorbancia a 543 nm..125 gr de nitrito de sodio en 0. de esta solución tome 2.0. El residuo de nitrito permisible en los alimentos es de 0.En algunos casos.A 25 ml de agua destilada agregue 1.0 ppm. Patrón de nitrito.0. que son carcinógenas en las animales y se cree que también lo sean para los seres humanos. Curva estándar.0 ml de reactivo revelador y espere 10 min..0 gr de sulfanilamida. A cada una de las soluciones adicione 1. calcule la concentración de nitrito de sodio y de nitrógeno en ppm. pueden producir metahemoglobinemia en los lactantes..1 lt.1 gr de N-(1.Preparar 25 ml de cada una de las siguientes concentraciones: 0. FUNDAMENTO TEORICO El ion nitrito puede ser determinado indirectamente por espectroscopia de absorción molecular (visible) mediante la reacción con un reactivo revelador (de color). Los nitritos pueden entonces causar envenenamiento.Preparado al mezclar: 1. 2. se aforan a 100 ml con agua destilada. Calcular la cantidad de nitrógeno presente en la muestra como nitrito en ppm (mg/lt) 8 .5. colóquese esta solución en frasco ámbar a resguardo de la luz y en refrigeración para evitar la descomposición fotoquímica y termal. 3. Las concentraciones de nitritos en agua de pozo mayores de 10 ppm. Blanco de referencia.0 y 5.naftil)etilendiamina hidrocloruro y 10 ml de ácido fosfórico concentrado (85%). 1. Estas nitrosaminas se encuentran en las superficies acuáticas como resultado de la contaminación. Los nitritos pueden interactuar con las aminas libres o en sistemas biológicos para formar nitrosaminas. 4.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA OBJETIVO Determinar la viabilidad de un acuario por medio de la cuantificación de nitrógeno de nitritos presentes en una muestra problema. Los nitritos se usan también para conservar el color de la carne en los procesos de encurtido y salado de la misma.5 ml de cada una y afórelas a 25 ml con agua destilada..01%. calibre a 100 % T y 0 de absorbancia. PROCEDIMIENTO Reactivo revelador. 0.0. los nitratos como el nitrato de bismuto o los nitratos del agua de pozo pueden ser convertidos en nitritos por la acción de las bacterias intestinales..

LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA PRACTICA No. 4 9 .

Fuentes Hígado. Deficiencia Anemia.Pesar 0. dátiles. Prepare otras tres soluciones ahora 10 .. Exceso Altos índices de este elemento pueden aumentar el riesgo de enfermedades del corazón.. Por lo que una deficiencia provoca anemia. disolverlos en 5. Alrededor de dos terceras partes del hierro en el cuerpo se utiliza para la producción de hemoglobina.0gr/L. estándar de fierro y [añadir a gotas solución de citrato trisódico hasta pH = 3. músculo y otros tejidos. Reactivo O-fenantrolina. sardinas. carne magra.0 ml de hidroquinona con una concentración de 10. Función El hierro combinado con el oxígeno genera la hemoglobina.En un matraz aforado de 50. y el resto se encuentra en enzimas. yema de huevo.0 ml con agua destilada. Esta transporta el oxígeno desde nuestros pulmones hasta cada una de las células de nuestro cuerpo.125 gr de O-fenantrolina. vegetales de hoja verde.0 gr/L.0 ml de la sol. Estándar de fierro.5 después] agregar 1. fatiga.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA DETERMINACION DE FIERRO OBJETIVO Determinar y comprobar mediante espectrofotometría visible la cantidad de fierro en forma ferrosa contenido en una tableta vitamínica comercial FUNDAMENTO TEORICO HIERRO El hierro es un mineral responsable de ayudar a la creación de hemoglobina..0 ml de la solución de hidroquinona y 1... Disuelva la sal de fierro en agua en un matraz volumétrico que contenga 0. depresión. PROCEDIMIENTO Reactivo Hidroquinona.Preparar 100. (nota..0 ml poner 5.0 ml de sulfato de amonio y fierro hexahidratado con una concentración de 0. higos secos y cereales enriquecidos.2 ml de ácido sulfúrico concentrado.Preparar 50. palpitaciones y bajas resistencias a las infecciones.ácido cítrico)]. [Citrato trisódico.Preparar 50 ml de citrato trisódico con una concentración de 25.0 ml de etanol y aforar a 50. fatiga y baja las defensas.5 ml de la solución de Ofenantrolina y aforar a 50 ml con agua destilada. Curva estándar.04 gr de fierro/L.

Filtrar esta solución directamente a un matraz aforado de 100. dejar enfriar y aforar a 100.A 5.5 ml de O-fenantrolina y afora a 50. De preferencia en la campana de extracción.0 ml con agua destilada en un matraz aforado (en caso de que la vitamina comercial a determinar indique que contiene menos de 15.0 ml con agua destilada.0 ml de agua destilada [agregue citrato de sodio hasta un pH = 3.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA con 2. Blanco de referencia.Colocar una tableta de vitamina en una vaso de precipitado de 200.0 ml y [agregue gota a gota citrato de sodio hasta pH = 3.0 ml con agua destilada. 1. de esta ultima dilución tome 5.0 ml de solución de hidroquinona.0 ml en vez de 5..0 ml de la solución anterior a 100. Muestra problema.0 ml con agua destilada y deje reposar por 10 minutos.0 y 0.0 mg.0 ml (recuerde hacer 2 a 3 lavados sobre el vaso y el filtro con 5 a 10 ml de agua destilada).5.0 ml). Construir su grafica de absorbancia contra concentración y calcular la cantidad de fierro en la tableta.5 después] añada 1.0 ml. tome 10.0 ml y agregar 25.5 ml de Ofenantrolina y afora a 50. Leer a 540 nm. Diluir 5.5] después añada 1.. [tomando en cuenta que ahora el volumen de citrato de sodio es proporcional al volumen de estándar]. 1. 5 NITROGENO DE NITRATO METODO 11 . PRACTICA No.0 ml de solución de hidroquinona.5 ml de la solución estándar de fierro de la misma manera que para la de 5. 1.0 ml de ácido clorhídrico 6M y hervir durante 15 min.

Esta solución es estable por seis meses. La metahemoglobina se caracteriza por inhibir el transporte de oxígeno en la sangre. FUNDAMENTO TEORICO Aunque los nitratos son un producto normal del metabolismo humano el agua con altas concentraciones en nitratos representa un riesgo para la salud. Mejorar las habilidades en el manejo de espectrofotómetros de ultravioleta. La Organización Mundial de la Salud (OMS) fija el límite de nitrato en el agua de consumo humano en 50 mg/l de nitrato (como N). La relación entre absorbancia y concentración es lineal hasta una concentración de 11 μg/L. La concentración de nitratos en una muestra de agua se determina midiendo la absorbancia en el ámbito de ultravioleta a 220 nm y comparándola con una curva de calibración. si puede llegar a provocar la muerte. En cambio. El mínimo detectable es de 0. especialmente en los niños. Solución patrón de nitrato Diluir 5 cm3 de solución madre de nitratos a 50 cm3 con agua destilada. la Comunidad Europea fijan los niveles máximos permitidos de nitratos en 50mg/l de N. Solución de ácido clorhídrico (densidad 1. que al ser absorbido en la sangre convierte a la hemoglobina en metahemoglobina.01 μg /L..2 mL de cloroformo (CHCl3). El método es rápido y adecuado para pruebas de control rutinario.19 g/cm3) 1N 12 . Solución madre de nitratos Pesar 0. 1 cm3 = 10 μg NNO3.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA ESPECTROFOTOMETRICO ULTRAVIOLETA SEGÚN LA NORMA MEXICANA NMX-AA-082-1986 (modificada) OBJETIVO Determinar la cantidad de N como nitrato por espectrofotometría de u ultravioleta.0722 g de nitrato de potasio anhidro y diluir a 100 mL con agua destilada. la Agencia para la Protección del Medio Ambiente Norteamérica (EPA) sitúa este límite en 10 mg/l de nitrato. Si se bebe agua con elevadas concentraciones de nitratos la acción de determinados microorganismos en el estómago puede transformar los nitratos en nitritos. Nota. Preservar con 0. 1 mL = 100 μg N_NO3. Por su parte.la Norma ha sido modificada para adecuarla a volúmenes menores. Pero también los nitratos pueden formar nitrosaminas y nitrosamidas compuestos que pueden ser cancerígenos. Aunque la formación de metahemoglobina es un proceso reversible. REACTIVOS Los reactivos que a continuación se mencionan deben ser grado analítico a menos que se indique otra cosa. especialmente en niños (“síndrome del bebé azul").

para determinar interferencias debidas a materia orgánica. Los nitratos absorben la luz a 220 nm. Restar dos veces la lectura de absorbancia a 275 nm (A 275) de la lectura de absorbancia a 220 nm (A 220). primero por el papel de poro fino y posteriormente a través del filtro de membrana. Posteriormente se recoge la muestra en recipientes de vidrio o plástico. y debe ser analizada lo más pronto posible. 2. Hacer las lecturas de absorbancia en la misma forma que la curva de calibración.3 cm3 de ácido clorhídrico concentrado (HCl) a 100 cm3 con agua destilada. y 7. 4. este método no es aplicable. MUESTREO Y ALMACENAMIENTO Las muestras deben ser representativas de las condiciones que existan en el punto y hora de muestreo y tener el volumen suficiente para efectuar las determinaciones correspondientes. 1. En caso de haber trazado la curva de calibración graficando las absorbancias obtenidas contra los μg correspondientes (de 0 a 35.0. INTERFERENCIAS Interfiere la materia orgánica disuelta.1.4.NO-3/cm3 = C / V Donde: C = μg leídos de la curva. CALCULOS Corrección por materia orgánica disuelta. 3. 13 . 0. la materia orgánica absorbe la luz tanto a 220 como a 275 nm. nitritos y cromo hexavalente.0. V = Volumen de muestra en cm3 para el análisis.5. 0. Añadir 0. 1. el contenido en μg N_NO3/cm3 se determina mediante la siguiente fórmula: ug N .LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Diluir 8.0. En caso de requerir almacenamiento.2 A 275 Leer en la curva de calibración la concentración correspondiente a las observancias ya corregidas de las muestras y determinar el contenido de nitrógeno de nitratos en μg N_NO3/cm3.5 cm3 obteniéndose las siguientes concentraciones.1 cm3 de solución de HCl 1N y agitar vigorosamente. detergentes. por lo que una segunda medición a 275 nm se usa para corregir los valores de nitrógeno de nitratos.3. Trazar la curva de calibración graficando las absorbancias obtenidas contra las concentraciones correspondientes.1 cm3 de solución de HCl 1N a cada una de las soluciones de la curva y agitar vigorosamente. CURVA DE CALIBRACION Diluir los siguientes volúmenes de la solución patrón y completar a 5 cm 3.2.0.7.0 y 3.0 μg).0 μg de N_NO3).0 μg de N_NO3/cm3 ( de 0 a 35. Para el caso de pozos y tanques elevados se deja fluir el agua de 5 a 10 minutos con el fin de desalojar el agua estacionada en la tubería. 0. AC = A 220 . filtrar si es necesario. PROCEDIMIENTO Tomar 5.0 cm3 de muestra clara.6. 1. 0. 3. 6.0. Leer las absorbancias de las muestras a 275 nm. 0.0. mantener en refrigeración por un máximo de 48 horas entre 275 y 278 K (2 y °c). Si el valor de la lectura a 275 nm es mayor del 10% del valor de la lectura a 220 nm. Añadir 0. 0. 0. 2.

6 14 .LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA PRACTICA No.

centrifuge aproximadamente 20 mL de esta solución. PROCEDIMIENTO Estándar: disuelva el estándar en 100 mL de agua destilada a una concentración de 400 ppm.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA PRINCIPIO ACTIVO DE UN MEDICAMENTO COMERCIAL OBJETIVO Determinar y comprobar mediante espectrofotometría ultravioleta el contenido real del principio activo de un medicamento comercial. Ensayo: transfiera 5 mL de cada una de las soluciones anteriores y agrégueles lo siguiente: 10 mL de agua destilada. por lo tanto está en función de los tipos de enlaces en las especies en estudio. Problema: triture el numero de tabletas equivalente a 400 mg de propanolol.VIS es causa de la excitación de los electrones enlazantes. FUNDAMENTO TEORICO Las especies que absorben en el UV o VIS es un proceso de dos etapas. El propranolol pertenece al grupo de medicamentos llamados bloqueantes beta. Agite durante 5 min. 15 . para aliviar la angina (dolor de pecho) y en los pacientes con ataque al corazón para ayudar a prevenir más ataques al corazón. siendo el más común como calor. La absorción de radiación UV . y 3)electrones de transferencia de carga. al cabo del cual termina por algún proceso de relajación. 1 mL de Hidróxido de sodio al 20 % 25 mL de heptano. transfiéralas a un matraz de 500 mL y disuélvalas con 350 mL de ácido clorhídrico 1:100 en agitación constante. use como blanco heptano. Determine la absorbancia de la fracción no polar de cada una de las soluciones a una longitud de onda de 293 nm. Energía de los electrones de enlaces sencillos son altas (UV vacío) < 185. El propanolol también se usa para corregir latidos irregulares. Todos los compuestos orgánicos son capaces de absorber REM. Clasificación de las especies absorbentes en base a transiciones que implican: 1) electrones ¶ y n. afore a 500 con el mismo ácido. y deje separar las capas. 2)electrones d y f. En el UV – VIS grupos funcionales con electrones de valencia con energía de excitación bajas. ya que todos contienen electrones de valencia que pueden ser excitados. que implican una excitación electrónica cuyo tiempo de vida es del orden de 10 –8 s. prevenir migrañas y tratar temblores. Se usa para tratar la presión alta.

1 tab..0 mg Excipiente c....... 7 16 ..LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Calcule la concentración o cantidad del principio activo de las tabletas a partir de la ecuación.. Cp = 0.......... PRACTICA No.....p..b.....5 Cs (Ap / As) Medicamento: INDERALICI Clorhidrato de propranolol... ..40....

Son muchas las dificultades causadas por un alto contenido de los detergentes en aguas y aguas residuales. El método se basa en la formación de una sal.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA DETERGENTES EN MUESTRAS ACUOSAS OBJETIVO Conocer y aplicar técnica de separación por extracción. por acción degradativa de los microorganismos ocasionan una mayor demanda de oxígeno perjudicial para los peces y para el propio cuerpo de agua. con agua destilada. otros sulfonatos y ésteres sulfatados). 17 . de muestra o parte alícuota aforada a 100 ml. que al morir. lo cual se logra adicionando 25 ml de suspensión de hidróxido de aluminio y aproximadamente 150 ml. Correr un testigo de agua destilada. Adicionar unas gotas de fenolftaleína para estimar si la muestra está ácida (incolora) o alcalina (color rosa). Los detergentes contienen un elevado porcentaje de fosfatos los cuales son nutrientes. en primer lugar es indeseable la formación de espuma en los ríos desde el punto de vista estético y a su vez la toxicidad de los surfactantes que contienen representan un serio peligro a la flora y fauna acuática. lo que también ocurre en las unidades de aeración de plantas de tratamiento. En los Estados Unidos Mexicanos el surfactante más ampliamente utilizado es el sulfonato de alquil benceno ABS. La formación de espuma en las corrientes dificulta la transferencia del oxígeno atmosférico en el agua. Transferir la capa de cloroformo a un segundo embudo de separación. La sal es soluble en cloroformo y la intensidad del color es proporcional a su concentración. cuando el azul de metileno reacciona con los surfactantes (ABS. Extraer con 25 ml de la solución de azul de Metileno y 10 ml de cloroformo (cuidado con la presión generada). La intensidad es medida espectrofotométricamente. que estando presentes en un cuerpo de agua contribuyen a una superpoblación de la flora acuática. En un embudo de separación tomar 100 ml. FUNDAMENTO TEORICO A mediados del siglo XX los detergentes comenzaron a ser usados como productos limpiadores en sustitución de los jabones comunes y pronto su demanda se multiplicó al grado que en la actualidad una gran variedad de ellos son los agentes de limpieza más populares tanto en uso doméstico como industriales. este fenómeno se conoce como eutroficación. PROCEDIMIENTO El procedimiento requiere que la muestra se encuentre libre de color y de turbiedad. de muestra y filtrando a través de papel filtro. Neutralizar a pH de 7 con NaOH o H2SO4 1N. por lo que es utilizado para estandarizar los siguientes métodos analíticos: Método colorimétrico del Azul de Metileno. Realizar una prueba del contenido de detergentes a una muestra de agua residual. sin dejar de pensar que esta agua al ser utilizadas para irrigación contaminen los suelos y por lo consiguiente los cultivos.

Diluir con cloroformo hasta la marca del matraz de 100 ml y agitar bien. 8 18 .. Repetir la extracción de la solución de lavado dos veces más.Factor de conversión. RESULTADOS. Compile sus resultados de absorbancia en una tabla. cuidado con la presión generada). agitar vigorosamente por 30 segundos. 1000. De ABS leídos en la curva de calibración. usando 10 ml de cloroformo en cada ocasión. Adicionar 50 ml de solución de lavado al segundo embudo de separación (el que contiene los 3 extractos de cloroformo). Leer absorbancia de la a 652 nm contra un testigo de cloroformo. ppm (ABS) = En donde: A. A x 1000 V1 PRACTICA No. dejar escapar el gas..LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Repetir esta operación de extracción dos veces más.mg. cada una con 10 ml de cloroformo. V1. Transferir la capa de cloroformo a un matraz aforado de 100 ml filtrando a través de un embudo de tallo largo que contenga lana de vidrio.-Volumen de muestra. Realice cálculos para obtener los miligramos de detergentes en la muestra Calcular las ppm de ABS con la siguiente ecuación. para luego separar las fases (Nuevamente.

PROCEDIMIENTO 19 . La técnica de atomización más usada es la de A. Interferencias debidas a la matriz Interferencias químicas Interferencias espectrales. Los métodos espectroscópicos se basan en la medida de la radiación electromagnética emitida o absorbida por la materia. Este método consiste en la medición de las especies atómicas por su absorción a una longitud de onda particular. Las aguas que sobrepasan los 200mg de calcio presentan inconvenientes para los usos domésticos e industriales. FUNDAMENTO TEORICO Calcio. Principios generales de la EAA. Describir la instrumentación. los métodos de emisión utilizan la radiación emitida cuando un analito es excitado por energía térmica. los componentes y el funcionamiento básicos de un equipo de absorción atómica.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA DETERMINACION DE CALCIO EN UNA MUESTRA DE AGUA MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA (EAA) OBJETIVO Conocer y aplicar la técnica la adición del estándar. los métodos de absorción están basados en la disminución de la potencia de la radiación electromagnética como consecuencia de la absorción que se produce en su interacción con el analito. Aplicar los principios fundamentales de la EAA en la determinación del calcio en una muestra de agua. Las aguas potables de buena calidad contienen de 100 a 140mg/L del calcio. eléctrica o radiante.A con llama. El calcio es uno de los elementos que hace parte de la dureza del agua. que nebuliza la muestra y luego la disemina en forma de aerosol dentro de una llama de aire acetileno u óxido nitroso-acetileno. Las interferencias existentes en EAA se clasifican como: Interferencias debidas a la llama Interferencias de ionización. Existe principalmente en forma de bicarbonatos. siendo los distintos procedimientos utilizados para llegar al estado fundamental del átomo lo que diferencia las técnicas y accesorios utilizados. La especie atómica se logra por atomización de la muestra.

proceda al análisis de la muestra. Coloque la cabeza del quemador para la llama aire-acetileno. Aspire un blanco y ponga de nuevo en cero el instrumento. Prenda el quemador. durante aproximadamente 10 minutos. Conecte los gases aire y acetileno y ajuste el flujo de cada uno de ellos. Ajuste la posición del quemador. PRACTICA No. Encienda el equipo Coloque la lámpara de cátodo hueco de calcio y aplique la corriente que recomienda el fabricante.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Consulte en el manual de instrucciones del equipo. Deje que se estabilice la corriente. 9 DESPLAZAMIENTO DE MAXIMOS DE ABSORCION EN ESPECTROS UV-Vis 20 . las condiciones estándares para el calcio. Agregue 10ml de la solución de óxido de lantano al 5% P/V a 100ml de la muestra y de los estándares. Ajuste los gases combustible y oxidante para obtener también una máxima ganancia. Gire cada uno de los controles en sentido opuesto de las manecillas del reloj. Optimice la longitud de onda. Aspire un blanco y ponga en cero el instrumento. Aspire la solución de sensibilidad para el calcio y ajuste la velocidad de aspiración de nebulizador para obtener la máxima ganancia. Alinee la lámpara para conseguir la ganancia óptima del equipo.

PROCEDIMIENTO Preparar 100 ml de disolución CuCl2 0.05M a partir de CuCl2 2H2O sólido Poner 10 ml de esta disolución en cinco tubos de ensayo numerados del 1 al 5. Al aumentar la polaridad del disolvente los picos n ¶* se desplazan hacia el azul. Los máximos de absorción de alguno cromóforos pueden servir para la identificación de grupos funcionales.05 M + 15 gotas de NH3(ac)).05 M) al 5 (10 ml de CuCl2 0. por el contrario la transición ¶ ¶* se desplaza hacia el rojo. respectivamente. Conjugación entre el oxígeno de doble enlace en aldehídos.05 M 1 gota NH3(ac) 2 gotas NH3 (ac) 4 gotas NH3(ac) 15 gotas NH3(ac) 1 2 3 4 5 Seguidamente registrar los espectros de absorción de los tubos 1 (10 ml de CuCl 2 0. cetonas y ácidos carboxílicos y un doble enlace tiene el mismo efecto.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA OBJETIVO Comprobar mediante adiciones de una base los desplazamientos batocromicos / hipsocromicos en un sistema absorbente en función del pH y la formación de complejos de transferencia de carga. La conjugación de cromóforos tiende a desplazar hacia el rojo los máximos de absorción. Tubo nº 1: según el espectro: 21 . de la disolución acuosa de amoniaco. FUNDAMENTO TEORICO Transiciones n * se observan entre 150 y 250 nm. 4 y 15 gotas. los disolventes polares desplazan el máximo de absorción a mas cortas. Las absortividades molares relacionadas a este tipo de transición son de baja magnitud (100 a 3000 L/cm mol). 2. 1. considérese el efecto del disolvente y la estructura molecular. con un barrido desde = 400 nm hasta = 850 nm y determinar los máximos de absorción que se alcanzan. a los que debe añadir 0. 10 ml de CuCl2 0.

LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Amax = al max = nm Tubo nº 5: según el espectro: Amax max nm A continuación repetir el experimento empleando NiNO3 en lugar de CuCl2 y nuevas cantidades de NH3(ac) en los tubos de ensayo. respectivamente. Depositar 10 ml de esta disolución en cinco tubos de ensayo numerados del 1 al 5. 10 y 25 gotas. de la disolución acuosa de NH3. 1.05 M + 25 gotas de NH3(ac)). Graficar los Espectros: 1 CuCl2 2 NiNO3 10 ml de NiNO3 0.05 M) al 5 (10 ml de NiNO3 0. a los que se añaden 0. Preparar 100 ml de disolución de NiNO3 0.08M a partir de NiNO3 6H2O sólido. 2. con un barrido desde = 400 nm hasta = 850 nm y determinar los máximos de absorción que se alcanzan: Tubo nº 1: según el espectro: Amax al Tubo nº 5: según el espectro: Amax 22 max max nm nm .08 M 1 gota NH3(ac) 2 gotas NH3 (ac) 10 gotas NH3 (ac) 25 gotas NH3 (ac) 1 2 3 4 5 Correr los espectros de absorción de los tubos 1 (10 ml de NiNO 3 0.

10 ANÁLISIS DE CADMIO EN AGUA POR FLUORESCENCIA MOLECULAR 23 .LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Graficar los Espectros: 1 CuCl2 2 NiNO3 PRACTICA No.

símbolo Cd. Las aguas residuales con Cadmio procedentes de las industrias mayoritariamente terminan en suelos. Aplicar los principios fundamentales de la fluorescencia molecular para la determinación del cadmio en una muestra problema. Su punto de fusión de 320. Efecto de la concentración de reactivo. Lleva bastante tiempo antes de que el Cadmio que ha sido acumulado en los riñones sea excretado del cuerpo humano. etc.65 a 20ºC (68ºF). El Cadmio primero es transportado hacia el hígado por la sangre. A continuación se evaluarán las características analíticas del método y finalmente se aplicará la metodología desarrollada al análisis de muestras reales. 24 . Es más blando y maleable que el zinc. Cuando la gente respira el Cadmio este puede dañar severamente los pulmones.40 y densidad relativa de 8. número atómico 48. tiene relación estrecha con el zinc. con el que se encuentra asociado en la naturaleza. de color blanco argentino con un ligero matiz azulado. Efecto del tiempo de formación del complejo y estabilidad del mismo. El método investigará la influencia que sobre la señal analítica poseen distintas variables (pH. Esto puede incluso causar la muerte.) en orden a conseguir la mejor sensibilidad posible. Esto causa la excreción de proteínas esenciales y azúcares del cuerpo y el consecuente daño de los riñones. pero poco más duro que el estaño. Es un metal dúctil. Los principales aspectos a tener en cuenta en la optimización del método para cinc son: Efecto del pH de la disolución reguladora (hay que prestar atención a los "blancos" y a la longitud de onda del máximo que puede desplazarse al cambiar el valor del pH). Se llevará a cabo siguiendo el método con una concentración constante de analito dentro del intervalo lineal. Efecto de la fuerza iónica de la disolución reguladora. los componentes y el funcionamiento básico de un equipo de emisión molecular. minerales de fosfato y las bioindustrias del estiércol. El Cadmio se acumula en los riñones. Allí es unido a proteínas para formar complejos que son transportados hacia los riñones. Peso atómico de 112.9ºC (610ºF) y de ebullición de 765ºC (1410ºF) son inferiores a los del zinc. temperatura. El Cadmio de las corrientes residuales pueden también entrar en el aire a través de la quema de residuos urbanos y de la quema de combustibles fósiles Determinación de cadmio por fluorescencia molecular con el reactivo 5-sulfónico-8hidroxiquinoleína.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA OBJETIVO Describir la instrumentación. Las causas de estas corrientes de residuos son por ejemplo la producción de Zinc. FUNDAMENTO TEORICO Elemento químico relativamente raro. donde causa un daño en el mecanismo de filtración. concentración de reactivo.

Disolución reguladora: Las disoluciones reguladoras se prepararán por disolución de la sal (p.ej. Para ello es absolutamente necesario lavar los matraces utilizados con ácido nítrico al 10% dejándolos toda la noche.ej. ácido acético) correspondiente hasta alcanzar el pH apropiado. acetato sódico). en concentración seleccionada. Precauciones: Se ha de poner especial cuidado en la preparación y conservación de las disoluciones. 11 FOSFORO INORGANICO EN SUERO HUMANO 25 . Patrones de Cd(II): Preparación a partir de una disolución patrón de Cd(II) de 1. cuidando de modo especial la limpieza de los contenedores de las disoluciones al objeto de evitar contaminaciones cruzadas.000 mg·L-1. en agua desionizada y adición de la cantidad de ácido (p. al objeto de diluirlas al mínimo se les debe añadir una reguladora concentrada hasta alcanzar la concentración final óptima.1 M (probar hasta 2M) Concentración de reactivo: 10-2 M (probar hasta 10-4 M) Patrones y reactivos. Disolución de 5-sulfónico-8-hidroxiquinoleína: disolución "madre" 0. PROCEDIMIENTO Condiciones iniciales de trabajo Concentración de cadmio: 0. Con el o los máximos de absorción/emisión elaborar curva de calibración y reportar concentración de la muestra problema. Se llevará a cabo el análisis de contenido en Cd(II) en agua residual sin tratar (se recomienda las técnicas de calibrado: con patrones externos y con adiciones estándar.3 ppm pH reguladora: 2 (probar entre 2 y 8) Concentración de reguladora (efecto de la fuerza iónica): 0. PRACTICA No. Análisis de muestra problema.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Influencia de la temperatura tanto en la formación del complejo (fuera del compartimento de medida) como en la intensidad de fluorescencia del mismo (dentro del compartimento de medida).01 M del reactivo en agua desionizada. Las muestras deben ser preparadas en una disolución reguladora similar a la utilizada en los patrones. Las disoluciones de trabajo se preparan cada día por dilución adecuada con la concentración óptima de reguladora. por lo tanto.

El fenómeno es comúnmente conocido como eutrofización. la secreción normal de la leche materna. 12MoO3 + 51 NH4+ + 72 7 (NH4)3PO4 . 12MoO3 + Agente reductor Mo (V) Especie azul PROCEDIMIENTO Preparación de reactivos: Acido tricloroacético al 5 % (200 mL). por tanto su presencia es fundamental. Participa de la división de las células y por tanto del crecimiento. Determinación de fósforo a partir de un filtrado libre de proteínas que reacciona con molibdato de amonio en condiciones reductoras para dar un producto de color azul en función de la cantidad de molibdeno V. El fósforo inorgánico reacciona con molibdato de amonio para formar un complejo de coloración intensa después de que éste es reducido. El incremento de la concentración de fósforo en las aguas superficiales aumenta el crecimiento de organismos dependientes del fósforo. El fósforo interviene en la formación y el mantenimiento de los huesos. FUNDAMENTO TEORICO Este macromineral está presente en todas las células y fluidos del organismo. Reacción: 7 PO4-3 + 12 (NH4)6Mo7O24 + 36 H2O OH7 (NH4)3PO4 .LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA OBJETIVO Determinar la cantidad de fosforo presente en una muestra sanguínea de un paciente sano y uno con deficiencia de fosforo. La primera reacción produce fosfomolibdato de amonio que al reducirse produce un complejo de molibdeno V conocido como azul de molibdeno. y su presencia en el cuerpo ronda los 650 mg. Los efectos son mayormente consecuencias de las emisiones de grandes cantidades de fosfatos en el ambiente debido a la minería y los cultivos. el desarrollo de los dientes. la formación de los tejidos musculares y el metabolismo celular Fosfatos: Los fosfatos tienen muchos efectos sobre los organismos. Esto hace que el agua sea poco adecuada para la vida de otros organismos. como son las algas. 26 . Estos organismos usan grandes cantidades de oxígeno y previenen que los rayos de sol entren en el agua.

Centrifugue a 1500 rpm durante 5 min.pese 2. Tratamiento de la muestra problema (suero): Agregue a un tubo de ensayo 9.ponga 5 mL de ácido tricloroacético al 5% en un tubo de ensayo y márquelo como no. Tratamiento general: Tome 5 ml de las soluciones marcadas como 1.. filtre con papel filtro No. marque la solución como no.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Acido sulfúrico 5 M (50 mL) Acido aminonaftilsulfónico reducido. 42. Finalmente adicione a cada tubo 0. 4 y 5) agrégueles 1 ml de la solución de molibdato de amonio y mezcle bien.Tomar 1 ml de la solución estándar y aforarlo a 100 mL con ácido tricloroacético al 5%. Grafique las absorbancias contra concentración y calcule la concertación de su muestra problema (suero). Tome 5 ml del sobrenadante y deposítelo en un tubo de ensayo. A todos los tubos (1.5 mL de ácido tricloroacetico al 5% mas 0.5 mg/dL de concentración respectivamente y márquelos como nos. 2 y 3. 4. Blanco.5 gr de molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24. calibrando a cero con agua destilada y restando la absorbancia del blanco (4) a las demás absorbancia medidas. Mida la absorbancia de todos sus tubos a 690 nm.. 1.. Solución estándar de fósforo (100 mg/dL). PRACTICA No. 3.pesar 0.. De esta última solución tome 2 y 5 mL y dilúyalos a 10 mL con ácido tricloroacético al 5% cada uno para así obtener 0. diluir en 80 mL de agua destilada y adicionar 30 mL de ácido sulfúrico (H 2SO4) 5 M.pesar 0.4H2O].. márquelo como muestra problema con el numero 5. mezcle y deje reposar por 5 min.5 gr de ácido aminonaftilsulfónico y diluir en 5 mL de solución al 20% de sulfito de sodio (Na2SO3). esto da una concentración de 1mg/dL de P. 12 27 . una vez disuelto añadirlos a 195 mL de solución al 15% de bisulfito de sodio (NaHSO3). 2 y 3 y a cada una agregue 5 mL de ácido tricloroacético al 5%.5 mL de suero. deje reposar de 5 a 10 min. Molibdato de amonio.2 mg/dL y 0. No debe de presentar coloración azul.4 ml de la solución de ácido aminonaftilsulfónico reducido y mezcle. 2.439 gr de fosfato diácido de potasio (KH2PO4) y diluirlo a 100 ml con agua destilada Curva de fósforo. Multiplique por 20 para determinar la concentración original en suero. en caso de no contar con centrifuga.

etc.).. Para el estudio de la muestra gaseosa deberá impregnar dos papeles filtro de aprox.e. y de un solo haz proporciona un método útil para el estudio de las soluciones diluidas. La muestra liquida deberá depositarla en la aditamento especial para líquidos (en caso de contar con un equipo ATR se le indicara lo consecuente). Conocer y preparar muestras en estado liquido. de diferentes impurezas. ESPECTROSCOPIA DEL INFRARROJO MEDIO. En este caso. SiH. esta técnica permite detectar la presencia.. Por último. en el material analizado.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA ESPECTROFOTOMETRIA DE INFRARROJO EN LA IDENTIFICACION DE COMPUESTOS ORGANICOS. conociendo previamente la absortividad asociada al tipo de enlace correspondiente. se obtienen los interferogramas para el disolvente y la muestra por separado. En este caso. OH. la ventaja proviene del hecho de que se puede observar todo el espectro en forma simultánea.Cada compuesto químico tiene asociado un espectro infrarrojo característico. se recomienda que la relación KBr/muestra sea de 100 a 20 mgr. NH... PROCEDIMIENTO Con las muestras proporcionadas elabore lo siguiente: Una pastilla de KBr para tratar la muestra solida. FUNDAMENTO TEORICO ESPECTROFOTOMETRIA INFRARROJA.) de los enlaces químicos presentes.. donde los máximos de absorción corresponden a determinadas energías de vibración (tensión. no olvide correr un background para evitar la interferencia del bióxido de carbono atmosférico 28 . OBJETIVO Obtener el espectro de absorción de diversas muestras orgánicas. (p. Este método también se ha empleado para el estudio de especies transitorias que de otra forma requerirán un barrido de longitud de onda muy rápido. flexión. Por tanto..la aplicación de la espectroscopia basada en la transformada por Fourier al intervalo entre 650 y 4000 cm-1. átomos de hidrógeno formando enlaces. 3 cm de diámetro y colocarla dentro de la cámara de gases Una vez obtenidas sus muestras se colocan en el área de muestra dentro de su instrumento y se corre el escaneo de acuerdo al programa instrumental. La espectroscopia basada en la transformada de fourier. Esta muestra también deberá ser procesada mediante una extracción básico clorofórmica. se deberá hacer por medio del pistón de presión. es posible cuantificar el número de enlaces presentes en la muestra analizada. solido y gaseoso para su estudio mediante espectrofotometría de infrarrojo.

también identifique las moléculas con ayuda del software del equipo.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA Una vez obtenidos los espectros respectivos identifique los grupos funcionales mediante su número de onda. PRACTICA No. 13 29 .

Anote la longitud de onda de excitación y deduzca las longitudes de onda de emisión para establecer si existe o no un desplazamiento de Stokes.LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA PROCESOS DE EMISION MOLECULAR (LUMINISCENCIA). 30 . 25 mL. 25 mL de cada una. no olvide mantener siempre bajo irradiación ultravioleta sus muestras. anotar las observaciones respectivas. Relación entre el numero de moléculas que emiten luminiscencia y el número total de moléculas excitadas. a este fenómeno se le llama desplazamiento o líneas de Stokes. Credencial de elector. OBJETIVO Observar el fenómeno luminiscente de fluorescencia y el cambio en la eficacia o rendimiento cuántico en función de cambios en el pH y en la rigidez estructural. Sulfato de quinina al 1% en solución básica. acida y amoniacal. Comprobar el fenómeno del desplazamiento de Stokes. ej. Rigidez. Al disminuir la rigidez aumenta la velocidad de conversiones interna y por la tanto aumenta la probabilidad de desactivación sin radiación. billetes de diversas nominaciones. Fluoresceína al 0. Rendimiento cuántico. La Fluorescencia se favorece en moléculas con estructura rígidas ej. PROCEDIMIENTO Preparar las siguientes soluciones y materiales: Fenolftaleína al 2 % en solución etanólica. El pH. pero es más común que la misma sea reemitida a una longitud de onda más larga que la Fluorescencia resonante. acuosa.Las formas ácidas o básicas están asociadas a especies resonantes y dependiendo de estas se puede ver favorecida o no la Fluorescencia.. la fluoresceína tiende a un valor de 1. FUNDAMENTO TEORICO Cuando la REM es absorbida a cierta longitud de onda y reemitida a igual longitud de onda se observa el fenómeno de fluorescencia resonante.5 % en solución etanolica. a las soluciones preparadas agregar bases o ácidos y anotar sus observaciones. Con el material anterior proceder a irradiarlo con luz de longitud de onda de ultravioleta cercano. acida y neutra. fluoreno contra bifenilo.

LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO II LICENCIATURA EN QUÍMICA TODAS LOS REPORTES DEBEN INCLUIR ADEMAS: REACCION QUIMICA (CUANDO ASI SE REQUIERA) MATERIAL Y SUSTANCIAS OBSERVACIONES RESULTADOS. solicitarlos al almacén con sus respectivos vales y tenerlos preparados y listos para la hora o el día de práctica. 31 . CALCULOS Y GRAFICAS DISCUSIÓN Y CONCLUSIÓN BIBLIOGRAFIA ACTIVIDAD PRELIMINAR POR PARTE DEL ALUMNO: El alumno deberá elaborar su propia lista de material y reactivos (en función de los procedimientos a realizar).