You are on page 1of 43

CEFET Qum ica Analise Instrumental

Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



SUMRIO


A. INTRODUO

B. O QUE A CROMATOGRAFIA EM FASE GASOSA

C. PARMETROS CROMATOGRFICOS

D. DETECTORES

E. MTODOS QUANTITATIVOS

F. BIBLIOGRAFIA




CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



2
A. INTRODUO

A cromatografia faz parte de um importante grupo de mtodos de separao, que nos
permite separar, isolar, identificar e quantificar substncias, mesmo em misturas muito complexas.
Existem vrias tcnicas cromatogrficas, que vo das mais simples, como a cromatografia
sobre papel, at as mais sofisticadas e computadorizadas, como a cromatografia lquida de alta
eficincia (HPLC). O ponto comum entre essas tcnicas, e que caracteriza o mtodo, o fato dos
componentes da mistura, ou amostra, serem distribudos entre duas fases. Uma delas permanece
fixa, e por isso chamada de fase estacionria (F.E.), enquanto a outra percola
1
atravs da F.E.,
sendo ento chamada de fase mvel (F.M.). Esta situao dinmica, resulta numa migrao
diferencial, ou seja, os componentes da amostra tm diferentes velocidades ao passarem pela fase
estacionria.
A tabela abaixo mostra algumas combinaes de fases estacionrias e fases mveis:
Fase Mvel Fase Estacionria Abreviatura Mecanismo de
separao
Tipo de cromatografia
lquido slido C L S adsoro cromatografia lquida
gs slido C G S adsoro cromatografia gasosa
lquido lquido C L L partio cromatografia lquida
gs lquido C G L partio cromatografia gasosa
Cada uma dessas combinaes envolve diferentes mecanismos de separao. Por exemplo,
na CLS acontece, em geral: adsoro na superfcie do slido e interao resultante da troca inica
ou da formao de complexos. Na CGS tambm ocorre, de maneira geral, o fenmeno da adsoro.
Na CLL ocorre a partio definida pela solubilidade relativa do soluto nos dois lquidos. Na CGL
d-se a partio do soluto definida pela presso parcial de vapor do soluto na soluo.
A fase estacionria, de forma geral, acondicionada nas chamadas colunas cromatogrficas,
que na sua maioria so tubos de vidro ou metal de dimenses diversas. Quando essa fase um
slido, basta que a coluna seja preenchida com o mesmo, de acordo com tcnicas especiais. Por
outro lado, quando a fase estacionria um lquido, esse pode tanto revestir as paredes da coluna,
no caso de colunas capilares, quanto estar aderido a um suporte slido com o qual se enche a
coluna.
A amostra introduzida na coluna e a fase mvel carreia os diversos componentes dessa
amostra atravs da coluna e, dependendo do tipo de cromatografia, pode participar ou no da
separao. Assim, a separao dos diversos componentes ser dada em funo de uma maior ou

1
Percolao o nome dado ao movimento (infiltrao) das guas pluviais no subsolo.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



3
menor afinidade de cada um deles, por cada uma das fases. Logo, o componente com maior
afinidade pela fase estacionria fica mais tempo retido na coluna, enquanto aquele que tiver mais
afinidade pela fase mvel percorrer a coluna com mais rapidez (fig. 1). Outras caractersticas
importantes na separao sero o tamanho da molcula, sua massa e, no caso da cromatografia em
fase gasosa, sua presso de vapor (ou ponto de ebulio).


Fig. 1 (a,b,c) - Ilustrao esquemtica de uma separao utilizando cromatografia lquida.
(d) - Grfico representativo de fraes coletadas durante a eluio.

B. O QUE A CROMATOGRAFIA EM FASE GASOSA

A cromatografia gasosa veio possibilitar, de maneira rpida e eficiente, uma srie de
separaes extremamente difceis, ou mesmo impossveis pelos mtodos tradicionais, como por
exemplo a separao da mistura benzeno-ciclohexano, impossvel de ser feita por destilao
fracionada, ou ainda, a anlise de gases provenientes de automveis, contendo mais de cem
componentes, que podem ser separados por essa tcnica. Os princpios do mtodo cromatogrfico
so os mesmos para todas as formas de cromatografia, ou seja, um processo no qual uma mistura
de substncias pode ser separada nos seus constituintes graas passagem de uma fase mvel
gasosa, que carreia a mistura, sobre uma fase estacionria.
Como o nome denota, a cromatografia gasosa (CGS ou CGL) aquela em que a fase mvel
um gs e a estacionria, um slido ou um lquido. Na CGS a fase estacionria um slido com
grande rea superficial, enquanto que na CGL ocorre partio dos componentes de uma amostra
entre uma fase mvel gasosa e uma camada delgada de um lquido no voltil que recobre um
suporte slido inerte.
As principais caractersticas dessas tcnicas (CGS ou CGL) so as seguintes:
I. A fase mvel um gs quimicamente inerte.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



4
II. Nas condies cromatogrficas escolhidas para a anlise s possvel analisar substncias
volteis (ou derivados volteis gerados a partir de reaes qumicas apropriadas).
A funo do gs usado como fase mvel apenas a de carrear os componentes da amostra
atravs da coluna, sem participar dos processos de interao. Por este motivo chamado gs de
arraste. Exemplos de gases mais utilizados em CG so o He, H
2
e o N
2

.
Na figura abaixo observa-se os principais componentes de um Cromatgrafo a Gs.

Fig. 2 - Esquema de um cromatgrafo a gs.
O gs de arraste passa atravs de um regulador de presso e penetra no injetor de amostra,
arrastando a amostra para a coluna. Os componentes da amostra so separados durante a passagem
pela coluna e, um aps o outro, passam pelo detector que, por sua vez, envia um sinal ao
registrador. Finalmente, o gs passa atravs de um medidor de vazo e , ento, liberado para a
atmosfera. Quando qualquer substncia diferente do gs de arraste passa pelo detector, este envia
um sinal eltrico ao registrador, que passa para o papel os sinais recebidos, compondo o
cromatograma. Para uma amostra de 3 componentes (A, B e C), por exemplo, o aspecto do
cromatograma ideal seria o seguinte:

Fig. 3 - Cromatograma ideal para uma amostra contendo trs substncias.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



5
Como o detector no responde passagem do gs de arraste, observa-se uma linha reta,
constante, entre cada sinal, chamada Linha de Base. Quando a substncia A alcana o detector, este
sensibilizado, envia um sinal ao registrador e o registro grfico esperado o observado na figura
3. Entretanto isso s seria possvel se todas as molculas da substncia A alcanassem o detector
simultaneamente. Na verdade acontece, entre outras coisas, o fenmeno da difuso longitudinal no
interior da coluna, que faz com que as molculas da mesma substncia percorram a coluna com
velocidades levemente diferentes. Isto faz com que o aspecto real de um cromatograma de uma
amostra contendo trs substncias (A, B e C) seja como o que se v na figura 4.

Fig. 4 - Cromatograma real de uma amostra contendo trs substncias.
A cromatografia gasosa permite a realizao de anlises qualitativas e quantitativas. A
anlise qualitativa baseada na velocidade com que cada componente da mistura atravessa a
coluna, utilizando-se o parmetro Tempo de Reteno (Tr). O tempo de reteno de uma substncia
o tempo gasto desde o momento em que a amostra injetada, at o momento em que o maior
nmero de molculas da substncia sai do sistema cromatogrfico e detectado.
O Tr calculado dividindo a distncia (espao entre o incio do cromatograma e o ponto
mximo do pico formado) pela velocidade do papel do registrador. O tempo de reteno
caracterstico de uma dada substncia, em condies determinadas de anlise. Dessa forma, para
uma dada coluna, um dado gs de arraste e condies de temperatura e presso estabelecidas, cada
substncia tem um tempo de reteno prprio, que permite a sua identificao atravs da
comparao com a anlise de padres, realizada sob as mesmas condies.
A anlise quantitativa est relacionada com a rea formada sob os picos, pois a intensidade
do sinal enviado pelo detector proporcional quantidade de substncia presente na amostra.
Para se realizar uma anlise cromatogrfica necessrio que o cromatograma obtido esteja
bem "resolvido". Este termo, "resolvido", significa boa separao entre os picos, de tal forma que se
possa determinar com preciso, tanto os Tr (s) como as reas dos mesmos. Na prtica, controlando-
se adequadamente os parmetros cromatogrficos, pode-se obter um registro cromatogrfico com
picos bem separados e simtricos, isto , com boa resoluo.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



6
EXERCCIOS

1) Na cromatografia gasosa, o tempo de reteno determinado por alguns parmetros. Para
substncias com peso molecular prximo, portanto, tem maior tempo de reteno aquela que:
( ) mais interage com a fase estacionria.
( ) tem menor presso de vapor.
( ) menos interage com a fase mvel.
( ) for mais polar.
Justifique a sua resposta tanto para as
afirmativas corretas como para as
incorretas.

2) Por que o tempo de reteno de sries homlogas de substncias maior quanto mais pesada for
a substncia, na grande maioria das fases estacionrias usadas em CG, sendo essa ordem
independente da polaridade da fase utilizada?
3) Dentre as alternativas abaixo, a nica anlise qualitativa que impossvel se fazer por
cromatografia a gs o teor de:
A- ( ) metanol em bebidas alcolicas. B- ( ) n-octano em gasolina.
C- ( ) aucar no mel. D- ( ) xido nitroso em ar atmosfrico poludo.
E- ( ) metano em gases proveniente de biodegradao.

4) Para fazer uma anlise cromatogrfica, um analista injetou 1,0 mL de uma substncia pura X
(grau PA) e aps um determinado tempo observou a formao do cromatograma 1 com dois picos.
Surpreso com o resultado obtido, reinjetou novamente a referida substncia pura nas mesmas
condies cromatogrficas, obtendo o cromatograma 2.


Explique o aparecimento do sinal com menor tempo de reteno no cromatograma 1.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



7
5) O esquema abaixo mostra um cromatgrafo improvisado. A deteco feita pelo contraste da cor
da chama das substncias orgnicas (normalmente amarela e luminosa) contra a chama incolor do
hidrognio.

Como poderia ser feita neste cromatgrafo:
A) A anlise qualitativa de uma mistura de pentano e benzeno?
B) A diferenciao de duas solues de benzeno com concentraes distintas?

C. PARMETROS CROMATOGRFICOS

C.1. ESCOLHA DA TEMPERATURA DO FORNO DAS COLUNAS

Como a cromatografia gasosa utiliza um gs como fase mvel, coerente pensar que as
substncias a serem analisadas devem estar no estado gasoso no momento em que penetram no
interior da coluna. Quando as substncias componentes de uma mistura entram em contato com a
fase estacionria iniciam-se vrios tipos de interaes que iro influenciar na migrao diferenciada
de cada substncia.
Um fenmeno que em geral ocorre com todas as substncias o de ter, cada uma, o seu
equilbrio Lquido Vapor deslocado para a fase vapor, quanto mais aquecido estiver o forno da
coluna. Quanto menos aquecido estiver o forno da coluna, esse equilbrio tambm estar menos
deslocado para a fase vapor. Dessa forma, conclui-se que uma substncia eluir mais rapidamente
quanto mais aquecido estiver o forno da coluna e, por outro lado, a substncia ficar mais tempo em
contato com a fase estacionria, quanto menos aquecido estiver o forno. Consequentemente, os
valores de Tr sero modificados medida em que se altera a temperatura do forno das colunas.
A ordem de sada das substncias, entretanto, ser regida por dois fatores simultneos, que
so: a afinidade de cada substncia pela fase estacionria e a tendncia de cada substncia se manter
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



8
na fase mvel. O primeiro fator depende da caracterstica qumica (estrutural) da substncia e o
segundo fator decorrente da presso parcial de vapor da mesma.
Deve-se ter em mente que a temperatura mxima com que se pode trabalhar com uma
determinada fase estacionria depende de sua volatilidade. Acima desta temperatura pode ocorrer
perda de fase estacionria (sangria), que provoca uma diminuio do tempo de vida da coluna.

C.2. ESCOLHA DA VAZO DO GS DE ARRASTE

A vazo de um fluido o produto da velocidade de escoamento do referido fluido (v) pela
rea da seo reta (A) do tubo no qual est ocorrendo o escoamento, ou seja:
Vazo = v A
Desenvolvendo a equao anterior, tem-se:
v A =
d
t
A =
V
t


V = volume do tubo pelo qual ocorre o escoamento do fluido.
d = distncia percorrida pelo fluido dada em cm.
t = tempo dado em min.
A alterao da velocidade de escoamento do gs, leva mudana da vazo do mesmo. Essa
ltima acarreta modificao na intensidade de interao de uma dada substncia com a fase
estacionria. Por que isto ocorre ?
Suponha que, a uma dada vazo, as substncias A e B , por exemplo, esto interagindo
fortemente com a fase estacionria. Observa-se, neste caso, valores altos para Tr
A
e Tr
B
.
Aumentando-se a vazo, as substncias A e B tm as suas interaes diminudas e
consequentemente os valores de Tr
A
e Tr
B
sero reduzidos.
Analogamente ao aumento da temperatura do forno da coluna, tambm aqui, no aumento da
vazo do gs de arraste, tem-se uma diminuio da capacidade de interao das substncias com a
fase estacionria e consequentemente uma diminuio nos valores de Tr.
E em relao a diminuio da vazo do gs de arraste ? O que ocorre ?
A vazo alterada, aumentando ou diminuindo a presso do gs no sistema, atravs do
ajuste da vlvula reguladora de fluxo. Media-se a vazo utilizando-se, por exemplo, um dispositivo
bastante simples como o fluxmetro de bolha de sabo ou "bolhmetro". Trata-se de um cilindro
com um volume pr estabelecido (marcado com dois traos), pelo qual faz-se passar uma pelcula
de sabo. Mede-se o tempo gasto para a movimentao da pelcula entre as duas marcaes.
Aparelhos modernos contam com um medidor de fluxo prprio.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



9

C.3. ESCOLHA DA FASE ESTACIONRIA
TIPO, % DA FASE ESTACIONRIA SOBRE O SUPORTE E GRANULOMETRIA

A caracterstica qumica da fase estacionria (F.E.) influencia na qualidade de separao das
substncias que compem uma dada amostra. Pode-se escolher uma fase baseando-se na polaridade
da amostra que ser evaporada. Os tipos de interaes que ocorrem com mais freqncia entre a
substncia e a F.E. so: foras de Van der Walls , interaes dipolo-dipolo, pontes de hidrognio.
Supondo uma F.E. lquida, onde ocorre partio, em geral as substncias (solutos) polares
so retidas em grande extenso conforme a polaridade aumenta. Por outro lado, solutos no-polares
so retidos em maior extenso conforme a polaridade da fase diminui. Tratando-se de fase apolar,
os solutos apolares iro interagir de forma semelhante, sem nenhuma seletividade especial, sendo
ento separados na ordem dos seus pontos de ebulio.
Existe um grande nmero de lquidos que podem ser usados como fase estacionria, na
cromatografia gs-lquido. Esses lquidos devem ter algumas especificaes, a saber:
Serem trmicamente estveis;
No devem reagir com as substncias presentes na amostra;
Devem ser seletivos para as substncias que compem a amostra.
Se a fase estacionria slida, ela deve ser constituda por partculas de dimetros regulares,
para maior eficincia de separao. No caso da cromatografia gs-slido, onde ocorre adsoro,
substncias que so adsorvidas de forma semelhante podem ser separadas, se apresentarem
volatilidades diferentes.
Para gases fixos (O
2
, CO
2
, N
2
, etc.), utiliza-se separao por tamanho, em colunas de peneira
molecular, aonde as molculas que so capazes de entrar nos poros da fase estacionria slida so
mais retidas do que as molculas maiores, que no conseguem penetrar na fase estacionria (passam
"por fora").
Tratando-se da % de fase lquida que se deposita sobre o suporte, deve-se ter em mente que
a camada de fase que envolve o gro do suporte dever ter uma espessura que garanta a formao de
um filme fino e homogneo, favorecendo a interao soluto - solvente.

Fig. 5 - Corte transversal do gro envolvido pela fase estacionria lquida.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



10
O dimetro do gro (suporte) muito importante, pois deseja-se uma grande superfcie de
contato para que as interaes ocorram. Quanto menor o tamanho do gro, para um mesmo volume
de coluna, maior a superfcie de contato da fase, retida sobre o gro, com a substncia (soluto).
Porm, nas baixas presses de trabalho da cromatografia gasosa, no indicada uma granulometria
muito baixa, pois os gros iro atuar como uma barreira passagem do gs, dificultando o processo
de separao. Normalmente utiliza-se uma granulometria da ordem de 80 a 100 mesh.
No caso de coluna capilar, esse fenmeno de barreira no existe e a fase depositada sobre a
parede interna do "tubo capilar" por onde se far passar a amostra. Para se aumentar a superfcie de
contato da fase estacionria com o soluto, trabalha-se com colunas longas. O dimetro interno pode
variar de 0,10 a 0.53 mm e a espessura do filme lquido depositado na superfcie interna do tubo
capilar normalmente de 2,5 mm.
Tabela 1 Principais caractersticas das colunas empacotada e capilar
Caractersticas
Empacotada Capilar
Comprimento (m) 1 - 5 5 - 60
Dimetro Interno (mm) 2 - 4 0.10 - 0.53
Pratos por metros 1.000 5.000
Pratos totais (aproximadamente) 5.000 300.000
Resoluo Baixa Alta
Fluxo (mL/min) 10 - 60 0.5 2.0
Capacidade 10 g / pico <100 ng / pico
Espessura do filme lquido (m) 10 0.1 5.0


C.4. ATENUAO

O atenuador um dispositivo relacionado com a intensidade de corrente eltrica enviada ao
registrador. O sinal eltrico reduzido com a presena de resistncias associadas ao circuito que
liga o detector ao registrador. Assim, o sinal que chega ao registrador reduzido. Isto no altera a
resoluo dos picos, mas modifica o tamanho dos mesmos.

Fig. 6 - Esquema simplificado do sistema de atenuao.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



11
C.5 REA DO PICO

A quantidade de substncia injetada vai gerar um sinal no detector. Quanto maior a
quantidade, maior o sinal eltrico. De acordo com a difuso longitudinal, as molculas no saem
todas juntas, gerando um conjunto de sinais em forma de pico para cada substncia que alcana o
detector. A quantidade de substncia ento ser proporcional rea do pico cromatogrfico. Como
esta rea obtida atravs da contagem de sinais eltricos, normalmente ela no tem unidade.

EXERCCIOS

1) Assinale o parmetro cromatogrfico que quando alterado no afeta o tempo de reteno de
uma determinada substncia.
A- ( ) temperatura do forno das colunas. D- ( ) polaridade da fase estacionria.
B- ( ) vazo do gs de arraste. E- ( ) % de fase estacionria no suporte slido.
C- ( ) temperatura do forno do detector.

2) Aps a injeo de 2,0 mL de uma certa soluo amostra, em atenuao 100x, achou-se para uma
certo componente, uma rea de 12.000. Usando-se um volume injetado de 1,0 mL e atenuao 500x,
considerando as demais condies iguais, a nova rea do pico esse componente ser:
A- ( ) 1.200 B- ( ) 6.000 C- ( ) 12.000
D- ( ) 24.000 E- ( ) 60.000

3) Uma amostra contendo quatro componentes originou o cromatograma a seguir:

Ao diminuir-se a temperatura de anlise, obteve-se o seguinte resultado:


Explique quais as possveis causas que originaram a obteno de cromatogramas
diferentes e quais as formas de confirmar isso.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



12
4) Um cromatograma obtido num cromatgrafo a gs apresentou o seguinte aspecto:

Um analista desejando otimizar as condies de
anlise, introduziu algumas alteraes no cromatgrafo, uma
por vez. Diga quais foram as alteraes para cada um dos
cromatogramas a seguir:

5) Um analista injetou 0,5 mL de gua deionizada em
cromatgrafo a gs com atenuao = x 10, coluna Porapak-Q
com 3,0 metros de comprimento, vazo do gs de arraste de 40
mL/min, temperatura das colunas = 70C; temperatura do
vaporizador = 120C; temperatura do detector = 200C;
velocidade do papel = 2,0 cm/min, obtendo o cromatograma
ao lado:

Considerando que o analista esperava obter um s pico, uma explicao plausvel para o
cromatograma obtido :
A-( ) a temperatura do forno da coluna estava abaixo do ponto de ebulio da gua.
B-( ) a temperatura do forno do detector estava muito alta decompondo assim a amostra.
C-( ) a vazo do gs de arraste estava muito baixa, favorecendo a difuso dos gases.
D-( ) a amostra foi introduzida no vaporizador em tempos distintos havendo erro na injeo.
E-( ) a amostra estava contaminada com NaCl proveniente da resina trocadora de ons.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



13
6) Observe as estruturas das seguintes fases estacionrias:
Poli (100% dimetilsiloxano) ou
DB1

Fase ligada no polar
Faixa operacional de temperatura -
60C - +320C
Poli (5% fenil 95% dimetilsiloxano)
ou DB5
Fase ligada polaridade intermediria
Faixa operacional de temperatura
-60C - +320C
Polietieleno glicol PEG
ou Carbowax 20M
Fase ligada polar
Faixa operacional de temperatura
+50C at +280C.

Uma mistura de Tolueno (PE 111C), Naftaleno (PE 218C), Hexanol (PE 157C), Fenol
(182C), Decano (174C) e Dodecano (216C) foi injetada em colunas contendo as fases
indicadas, obtendo-se os cromatogramas abaixo.


Compare os cromatogramas e explique a ordem de sada dos componentes em cada fases,
baseando-se na presso de vapor dos componentes e na polaridades relativasdas substncias e
das fases.
Substncias Polar Aromtico Ponte H Dipolo
Tolueno No Sim No Induzido
Hexanol Sim No Sim Sim
Fenol Sim Sim Sim Sim
Decano No No No No
Naftaleno No Sim No Induzido
Dodecano No No No No
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



14
7) Um analista injetou num cromatgrafo a gs uma mistura contendo cinco substncias,
obtendo o seguinte cromatograma:

A) Como voc avalia esta anlise do ponto de vista econmico? Justifique.
B) O que se poderia fazer para melhorar? Justifique.

8) O resduo de evaporao de hexano comercial forneceu o seguinte cromatograma:

O que aconteceria se:

A) Utilizassemos uma coluna com o dobro de comprimento da usada?
B) Desejssemos saber se existe tolueno e benzeno no resduo?
C) Aumentssemos a vazo do gs de arraste?
D) Injetssemos o hexano e no o seu resduo de evaporao ?
E) Diminussemos a atenuao ?

9) Um analista quer identificar tolueno numa amostra com benzeno, tolueno, xilenos (orto, meta,
para), p-etil-tolueno e p-propil-tolueno, utilizando uma coluna apolar. Injetou os padres
individualmente e uma mistura contendo todos os padres, verificando que o tolueno tinha o mesmo
tempo de reteno do o-xileno. Como ele deve proceder para saber se h realmente tolueno na
amostra? Explique o procedimento a ser adotado, prevendo inclusive qual dever ser a ordem de
sada das substncias. Leve tambm em conta que os pontos de ebulio dos xilenos esto na
ordem: o-xileno< m-xileno< p-xileno.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



15
10) Um analista realizou uma anlise de steres metlicos lineares com 10, 11 e 12 tomos de
carbono a 120
o
C utilizando uma coluna de DEGS, obtendo o cromatograma abaixo:

Utilizando as mesmas condies de anlise, o analista injetou alcanos lineares de 10,
11 e 12 tomos de carbono, obtendo o cromatograma abaixo:

A) A fase estacionria polar ou apolar?
B) Qual a provvel ordem de sada dos compostos nos dois cromatogramas?
C) O que deveria ser feito para melhorar a primeira anlise, utilizando a mesma coluna?
D) Como voc faria uma anlise qualitativa no 2
O
cromatograma?
E) O que aconteceria se fosse alterada a velocidade do papel?
F) Se fossem misturados esses alcanos e steres, como ficaria o cromatograma, nas mesmas
condies cromatogrficas? O que deveria ser feito para otimizar o cromatograma da
mistura?

11) O que ocorrer numa anlise cromatogrfica se:
a) a temperatura do injetor inferior ao ponto de ebulio de um componente da amostra?
b) o volume injetado muito grande?
c) a temperatura da coluna aumentada alm da temperatura mxima recomendada?
d) a temperatura do detetor for diminuida?
e) injetar-se, distraidamente, uma soluo de NaOH.
f) a temperatura da coluna inferior ao ponto de ebulio de um componente da amostra?
g) o septo do injetor estiver muito furado?
h) a temperatura do injetor for muito alta?
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



16
12) Observe a tabela de tempos de reteno relativos
2
para a H
2
O, n-propanol e heptano em vrias
colunas.
Fase estacionria Carbowax 20M SE-30 Glicerol DEGS Esqualano
Temperatura da coluna 70
o
C 70
o
C 50
o
C 70
o
C 60
o
C
gua 6 1 90 1 1
n-propanol 4,3 1,5 2,3 4 2,5
heptano 1 7 1 1,2 10
Em funo da magnitude dos valores de reteno relativa encontrados e da polaridade das
substncias analisadas, colocar as fases em ordem crescente de polaridade. Justifique.

13) A reao do resorcinol ( I ) com o iodeto de metila (MeI) em condies estequimtricas (1:1 em
mol) fornece uma mistura dos produtos ( II ) e ( III ), alm de uma certa quantidade de ( I ) que no
reagiu. A reao :
OH
OH
OMe
OH
OMe
OMe
+ MeI +
( I ) ( I I ) ( I I I )

O cromatograma A representa a injeo da mistura equimolar de ( I ) e MeI antes de reagir,
enquanto que o cromatograma B corresponde injeo de uma alquota do meio reacional aps
meia hora de reao. A partir de ento, a cada intervalo de meia hora, retirou-se alquotas do meio
reacional e o aspecto dos cromatogramas obtidos no foi diferente do cromatograma B, indicando
que a reao havia chegado ao equilbrio. Observe os cromatogramas abaixo e responda:

a) A provvel ordem de sada, sabendo que a fase polar.
b) Por que o sinal 4 mais largo que os demais?
c) Se utilizasse uma quantidade bem maior, em moles, de MeI em relao a I, obter-se-ia aps um
determinado tempo, um cromatograma com somente dois picos. Explique e desenhe o referido
cromatograma.

2
Reteno relativa a razo entre os tempos de reteno de duas substncias, ou seja, Tr
x
/Tr
ref
.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



17
14) A reao de desidratao do etanol (CH
3
CH
2
OH CH
2
CH
2
+
H
2
O) foi monitorada por cromatografia. Aps 5 minutos de reao,
obteve-se o cromatograma ao lado, onde L
1
= 3,00 cm, L
2
= 4,80
cm e L
3
= 7,50 cm. Vel. do papel = 12 cm/min.
Decorridos 15 minutos, nova injeo foi realizada nas
mesmas condies anteriores, obtendo-se o seguinte cromatograma:
Outros dados obtidos a partir do cromatograma foram reunidos na tabela abaixo:
Dados 1
o
cromatograma 2
o
cromatograma
b (base) h (altura) b (base) h (altura)
Pico 1 0,20 0,40 2,30 3,50
Pico 2 2,30 6,20 2,00 4,02
Pico 3 0,10 0,20 1,35 2,70
a) Qual a razo entre as massas de etanol no primeiro e segundo cromatograma?
b) Qual a ordem de sada dos componentes na coluna, j que a fase estacionria polar? Justifique.
c) Qual o tempo de reteno de cada substncia?
d) Sabendo-se que o ter dietlico um produto secundrio da reao, onde ele poderia aparecer
num outro cromatograma obtido aps a injeo dos dois primeiros?
e) Caso o pico do ter fosse obtido fundido ao seu vizinho no terceiro cromatograma, o que voc
faria para tentar separ-los?

D. DETECTORES

At esse momento, foram apresentados todos os componentes de um sistema
cromatogrfico gs. Entretanto, faz-se necessria uma complementao sobre o princpio de
funcionamento dos detectores, para que se possa compreender melhor como a presena de
substncias nos mesmos pode ser convertida em sinal eltrico.
Atualmente existem vrios tipos de detectores, com princpios de funcionamento
completamente diferentes. Se ver neste captulo os dois mais largamente utilizados, que so o
detector de condutividade trmica (DCT) e o detector de ionizao em chama (DIC).

D.1. DETECTOR DE CONDUTIVIDADE TRMICA (DCT)

Baseia-se na capacidade das substncias de conduzirem calor. Essa caracterstica depende da
estrutura molecular de cada substncia.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



18
Tem-se um filamento (resistncia) onde se faz passar corrente eltrica. A resistncia do
circuito gera calor e faz o filamento se aquecer. E
T
= R i
2
, onde E
T
a energia trmica gerada.
Em maiores temperaturas, a resistividade dos materiais maior, a resistncia aumenta e a
corrente cai se o potencial constante (V = R i), diminuindo a quantidade de calor gerado. A
temperatura continua subindo e o calor gerado diminuir at que o calor dissipado seja igual ao
calor gerado e a temperatura se estabilize.
Deixando um fluxo da gs em contato com esse filamento (fig. 9), mais calor poder ser
dissipado pelo fluxo gasoso e a temperatura e a resistividade do filamento diminuem. Com a
resistncia diminuda, a corrente que passa pelo filamento aumenta.
A corrente que passa pelo filamento depende do potencial usado, do fluxo do gs de arraste e
do tipo de gs que est sendo utilizado, j que h gases com maior condutividade trmica que
outros, isto , h gases com maior capacidade de dissipar calor do que outros. Quando passa um gs
diferente do gs de arraste, h uma variao de corrente, causada pela diferena de condutividade
trmica dos gases. Quando volta a passar gs de arraste, a corrente volta ao nvel anterior. Isso ser
assinalado pelo registrador.


Fig. 9 - Corte esquemtico de um DCT
Analisando um circuito mais sofisticado:





Fig. 10 - Detector de condutividade trmica com dois resistores.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



19
Conforme a figura 10, haver resistncias ou termistores em dois pontos do fluxo gasoso,
um antes do ponto de introduo da amostra e outro na passagem do efluente da coluna. Como
inicialmente, somente o gs de arraste passa pelos filamentos, estes, estando associados a uma
ponte de Wheatstone, daro uma condio de equilbrio, ou seja: R
1
R
3
= R
2
R
4
Quando a substncia a ser analisada eluir da coluna, haver uma condio de desequilbrio
(R
1
x R
3
R
2
x R
4
), porque a condutividade trmica da substncia juntamente com o gs de arraste
ser diferente da condutividade trmica do gs de arraste puro. Gera-se, portanto, um sinal que
amplificado e no registrador forma-se o pico correspondente substncia que foi detectada.
Um outro sistema pode ser montado, trabalhando com duas colunas (referncia e indicao)
que so acopladas, cada uma, a dois termistores, em ramos opostos da ponte de Wheatstone. A
figura 11 ilustra a montagem, que d um sinal de maior intensidade.

1- Fonte
2- Ajuste de corrente
3- Miliampermetro
4- Filamento de deteco
5- Filamento de referncia
6- Ajuste do zero grosso
7- Ajuste do zero fino
8- Sistema de atenuao
9- Registrador
FA - Fluxo de gs coluna de anlise
FR - fluxo de gs coluna de referncia

Fig. 11 - Circuito eltrico simplificado de um DCT.
Observando-se os dados de condutividades trmicas da tabela 2, pode-se notar a acentuada
diferena existente entre os valores referentes aos gases normalmente utilizados como fase mvel e
os valores referentes maioria das substncias. A condutividade trmica do nitrognio aproxima-se
mais das condutividades dos compostos orgnicos, levando a uma menor sensibilidade de deteco,
quando o mesmo utilizado como gs de arraste.
Tabela 2 - Valores de condutividade trmica de compostos.
Substncia Cond. Trmica
(cal.s
-1
.cm
-1
.F
-1
)
Substncia Cond. Trmica
(cal.s
-1
.cm
-1
.F
-1
)
He 36,0 Cl
2
2,11
H
2
44,5 Br
2
1,16
N
2
6,24 C
6
H
6
2,56
Ar 4,25 CH
3
OH 3,68
CH
4
8,18 C
2
H
5
OH 3,47
CO
2
3,96 H
2
O 4,25
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



20
O DCT responde a todos os tipos de compostos orgnicos e inorgnicos que possam ser
analisados por CG e no destrutivo, tornando-se muito til para trabalhos em escala preparativa.

D.2. DETECTOR DE IONIZAO EM CHAMA (DIC)

Baseia-se na condutividade eltrica dos ons formados na chama do detector. A
condutividade eltrica de um gs proporcional concentrao das partculas com carga dentro do
volume de gs.
Nesse detector, tem-se inicialmente somente a passagem do gs de arraste e a quantidade de
ons produzidos bem pequena. Quando um composto orgnico passar pela chama, haver uma
produo maior de cargas devido formao de ons e eltrons livres, dentre outros, gerando um
aumento na corrente. Um esquema do DIC mostrado a seguir:

Fig. 12 - Detector de ionizao em chama.
Tem-se a chama formada por ar (O
2
) e hidrognio e, lateralmente, dois eletrodos com
potencial aplicado por uma fonte externa. A chama de hidrognio produz poucos ons, em
comparao com outras substncias combustveis. Quando um composto orgnico passa pela
chama, formam-se mais ons, aumentando a corrente, que amplificada, originando,
posteriormente, o pico cromatogrfico no registrador.
O DIC s responde aos tomos de carbono oxidveis. A intensidade de resposta decresce
medida em que aumenta a substituio por halognios, grupos amina ou grupos hidroxila.
Como se comportar o DIC quando passarem pela chama substncias tais como H
2
O, CO
2

ou CS
2
? E quanto aos compostos inorgnicos?
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



21

Tabela 3 - Comparao entre os dois detectores
Tipo de Detector D.C.T. D.I.C.
Faixa de linearidade 10
5
10
7

Quantidade mnima detectvel 10 ng 10 pg
Sensibilidade do detector menor maior
Universo de substncias detectveis universal seletivo
Conservao das amostras no-destrutivo destrutivo
Controle da temperatura rigoroso no rigoroso
Existem outros tipos de detectores que so mais seletivos, como por exemplo: o detector de
captura de eltrons e o detector fotomtrico. O primeiro utilizado para anlise de compostos
halogenados, anidridos, perxidos, nitrilas e organo-metlicos, dentre outros. O segundo utilizado
normalmente para anlise de compostos sulfurados e fosforados.

EXERCCIOS

1) Explique porque os cromatgrafos gs com detectores de condutividade trmica, normalmente,
operam com 2 colunas ao invs de uma s.

2) Os cromatogramas abaixo apresentam uma anlise feita por cromatografia gasosa, onde fez-se a
amostra passar simultaneamente por dois detectores (ionizao em chama, DIC e condutividade
trmica, DCT).
Comente as diferenas presentes nos dois cromatogramas em termos de sensibilidade e
seletividade e indique o procedimento mais indicado para quantificar as substncias A e B presentes
na amostra. Considere os sinais positivos para ambos os detectores.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



22
3) Um detector termossensvel baseia-se no fato de que a resistividade de um filamento varia com a
temperatura, emitindo ento sinais que so registrados. Das duas montagens abaixo, qual seria a
melhor e por que? Considere os circuitos eltricos utilizados e que a voltagem da fonte pode oscilar.


4) Uma anlise realizada em cromatgrafo a gs com DCT forneceu o seguinte cromatograma:

Seria vantajoso fazer a anlise em um cromatgrafo a gs com DIC ? Explique.

5) Correlacione as colunas:
1- Injetor ( ) Compe a fase mvel na CG
2-Gs de arraste ( ) Promove a separao cromatogrfica
3- Manmetro ( ) Vaporiza a amostra
4- Coluna ( ) Promove o aquecimento do detector
5- Forno ( ) Envia sinal eltrico para o amplificador
6- Detector ( ) Controla a presso do gs

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



23
6)Em um cromatgrafo operando com DCT injetou-se uma amostra e obteve-se um cromatograma
com reas iguais de H
2
O e EtOH. Considerando o gs de arraste Hlio e as condutividades
trmicas dadas abaixo, complete as frases abaixo e justifique cada opo.
Condutividade trmica a O C (valores fictcios)
He 33,60
H
2
O 9,400
N
2
8,332
EtOH 5,024
a) O teor de H
2
O nessa amostra _______________ (maior, menor ou o mesmo) do que o de
EtOH
b) Numa mistura de concentraes iguais de H
2
O e EtOH, a rea __________ (maior ou menor)
seria a do EtOH.
c) Numa mistura de concentraes iguais de H
2
O e EtOH, se o N
2
fosse o gs de arraste, a
rea__________ (maior ou menor) seria a do EtOH.
d) Se o detetor utilizado fosse o DIC ao invs do DCT, aps injeo de mesmo volume da mesma
amostra, usando o N
2
como gs de arraste, o sinal relativo ____________ (H
2
O ou EtOH) no
apareceria no cromatograma.

7) Dentre as alternativas abaixo, a nica determinao quantitativa que impossvel se fazer por
cromatografia gasosa com DIC o teor de:
A- ( ) metanol em bebidas alcolicas.
B- ( ) Octano em gasolina.
C- ( ) mentol (monoterpeno) em creme para a pele.
D- ( ) metano em gases provenientes de biodegradao.
E- ( ) vapor dgua no ar atmosfrico.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



24
8) Para ligar um cromatgrafo gs com DCT e gs de arraste He, um analista regulou a vazo do
gs de arraste, as temperaturas dos fornos, a corrente de alimentao do DCT, um valor adequado
de atenuao, zerou o aparelho (balanceou a ponte de Wheatstone) e finalmente ligou o motor do
registrador com uma determinada velocidade e, sem efetuar nenhuma injeo, observou que a linha
de base do cromatograma subia indefinidamente, conforme a figura abaixo.
Assinale, dentre as alternativas abaixo, a
nica que se refere hiptese improvvel
para explicar o fenmeno observado
(explique cada item):
A- ( ) A coluna necessita de um recondicionamento, pois h substncias dentro dela,
proveniente de outras anlises, que ainda no saram totalmente.
B- ( ) A temperatura do forno das colunas est regulada em um valor acima de ponto de
ebulio da fase estacionria lquida, ocorrendo sangramento da coluna.
C- ( ) A temperatura do forno do detetor ainda no est estabilizada.
D- ( ) Os filamentos do detetor so sensveis a uma determinada substncia que impregna o
ar do laboratrio.
E- ( ) Alguma regio da linha do cromatgrafo (injetor, coluna, detetor ou tubos conectores)
est suja.

9) Injetou-se uma amostra em um cromatgrafo gs com DCT e gs de arraste He e observou-se
no cromatograma obtido a formao de picos negativos, conforme ilustra a figura abaixo.


Assinale, dentre as alternativas abaixo,
a nica hiptese provvel para explicar o
fenmeno observado.
A- ( ) A corrente de alimentao do DCT estava desligada.
B- ( ) Todas as substncias analisadas na amostra tm condutividade trmica maior do que a
do gs de arraste.
C- ( ) A polaridade da ponte de Wheatstone do DCT estava invertida.
D- ( ) A velocidade do papel do registrador foi regulada para um valor muito alto.
E- ( ) A atenuao usada estava muito pequena para a quantidade de amostra analisada.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



25

10) Observe os cromatogramas A e B obtidos a partir de uma mistura gasosa com concentraes
molares iguais de metano, metanol e vapor dgua em uma coluna de caracterstica polar, um
detetor de condutividade trmica e um tipo de gs de arraste para cada cromatograma (considere as
demais condies cromatogrficas iguais).

Com base na intensidade dos sinais obtidos, na ordem de sada mais provvel e nos valores
de condutividade trmica dados (unidades relativas), os gases de arraste usados em cada
cromatograma so, respectivamente:
H
2
= 44,5 He = 36,0 CH
4
= 8,22
N
2
= 6,24 H
2
O = 4,25 CH
3
OH = 1,00
( ) hlio e nitrognio. ( ) nitrognio e hlio. ( ) hidrognio e hlio.
( ) hlio e hidrognio. ( ) nitrognio e hidrognio.

E.MTODOS QUANTITATIVOS

E.1. INTRODUO

A rea sob um pico cromatogrfico, originado a partir da passagem de uma determinada
substncia pelo detector, proporcional quantidade presente na amostra dessa mesma substncia.
Logo, a determinao dessa rea servir para quantificar o constituinte da amostra.
O clculo da rea pode ser feito por algumas tcnicas de integrao. Mas, para que esse valor
de rea possa realmente expressar uma concentrao, so necessrias algumas condies:
1. A existncia de padres com pureza confivel que possam ser utilizados nos clculos.
2. Os compostos de interesse no podem sofrer decomposio trmica ou decomposio cataltica
no sistema cromatogrfico e nem ficarem retidos permanentemente.
3. O pico de interesse deve corresponder somente a uma substncia, ou seja, no tenha ocorrido
coeluio.
4. A quantidade de massa analisada esteja na faixa linear de resposta do detector, do amplificador
e do sistema de integrao.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



26
5. Dependendo do mtodo de clculo, o operador deve ter conhecimento da existncia ou no de
substncias no detectveis e/ou no eludas.
6. Repetibilidade na operao do cromatgrafo, isto , as temperaturas e vazes utilizadas, etc,
para que se possa reproduzir corretamente os dados de reteno e resoluo.
7. Amostragem correta do sistema a ser analisado.
8. Preciso e exatido altura das exigncias do mtodo analtico na determinao das reas dos
picos.
9. Anlise das fontes de erro ao longo de todo processo para que o resultado final seja expressado
com a preciso correta.

E.2. DETERMINAO DAS REAS DOS PICOS

A escolha do mtodo a ser utilizado na determinao das reas depender da preciso e
exatido desejadas, do tempo e recursos humanos, tcnicos e financeiros disponveis.
Como exemplo, a tabela 4 mostra os resultados da determinao das reas do cromatograma
de uma mesma amostra feitos por diferentes tcnicas de integrao.


Tabela 4 - Comparao das tcnicas de integrao de reas
planmetro triangulao HL (1/2 H) cortar e pesar disco de bola digital
rea
mdia
C.V.
%
rea
mdia
C.V.
%
rea
mdia
C.V
%.
rea
mdia
C.V.
%
rea
mdia
C.V.
%
rea
mdia
C.V.
%
Propano 0,04 20 0,05 14 0,04 12 0,01 14 0,04 18 0,03 10
Isobutano 4,8 1,7 4,8 8,7 4,5 3,8 5,0 2,0 4,6 0,4 4,6 0,9
n-Butano 14,0 5,6 13.7 4,5 13,6 1,6 15,0 2,8 14,1 1,0 14,1 0,4
1-Buteno 18,5 3,3 18,5 4,8 18,6 3,1 18,4 1,2 18,7 2,5 18,7 0,3
trans-2-Buteno 20,2 6,5 20,3 3,3 20,1 2,0 20,1 1,4 20,2 1,1 20,2 0,2
cis-2-Buteno 16,1 3,7 15,8 1,6 16,4 3,7 15,9 1,5 16,1 0,7 16,0 0,4
Butadieno 18,2 2,0 18,3 1,8 18,2 1,7 17,6 1,2 18,3 0,7 18,3 0,5
Isobuteno 8,1 5,7 8,6 3,7 8,6 2,2 8,0 2,1 8,1 2,6 8,2 0,5
Tempo de
clculo (min)
45/60 45/60 50/60 100/120 15/30 5/10
D.D.R. 4,1 4,1 2,6 1,7 1,3 0,4
C.V.= coeficiente de variao D.D.R.= desvio relativo ao valor real

A escolha do mtodo de anlise quantitativa depende da preciso desejada, do tempo
necessrio, do custo e do equipamento disponvel no laboratrio para efetuar as medies e,
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



27
tambm, do aspecto dos picos. A combinao de todos esses fatores que vai definir o mtodo a ser
adotado.

E.3. CLCULOS QUANTITATIVOS

Quatro mtodos so geralmente utilizados na determinao quantitativa dos componentes da
amostra
3
: normalizao interna, normalizao de reas, padronizao externa e padronizao
interna.

E.3.1. NORMALIZAO INTERNA

A rea de um sinal cromatogrfico dada pela equao a seguir e proporcional
concentrao da substncia que passa pelo detector:

A
V x C k x
S
t
inj
=
Onde S a rea do pico, determinada no cromatograma, k a cte. de proporcionalidade que
depende da interao da substncia com o sistema de deteco, C a concentrao da substncia
eluda, V
inj
o volume injetado e A
t
a atenuao. Se o valor de k o mesmo para todos os
componentes da amostra e se tambm todos eles estiverem devidamente registrados no
cromatograma, pode-se considerar que o percentual de rea corresponde ao percentual de massa.
Como exemplo, observe o cromatograma de uma amostra que contm somente as
substncias A, B e C (figura 13).



Fig. 13- Cromatograma das substncias A, B e C.
A determinao quantitativa da substncia "B" no cromatograma acima seria simplesmente a
porcentagem de sua rea em relao rea total, isto :
( ) % B =
B
S
S
i

10 0


CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



28
Vantagens:
simples e prtica, sendo ideal para anlises
de rotina em que a exatido no um fator
importante.
independe do volume injetado.
independe da estabilidade do aparelho.
no necessria a utilizao de padres.
Limitaes:
essa tcnica no serve para amostras mais
complexas.
exige o registro de todos os componentes da
amostra.
no adequada para a anlise de traos.
normalmente a exatido baixa.

E.3.2. NORMALIZAO DE REAS

Na normalizao interna levou-se em considerao que a resposta do detector sempre a
mesma para qualquer substncia, ou seja, k o mesmo para todos os componentes da amostra. Se
isso fosse verdade, a substncia B teria a mesma rea das substncias A e C se essas trs substncias
estivessem na mesma concentrao. Isso representaria que o detector teria a mesma sensibilidade
para todos os componentes dessa amostra. O que normalmente acontece que o detector pode
responder de maneira diferente para cada substncia e, para uma mesma quantidade em massa de
substncias diferentes, fornecer, como resultado, reas completamente dspares. Quando isso ocorre,
o que a maioria dos casos, a rea obtida precisa ser corrigida. Essa correo feita pela
determinao do valor da constante de proporcionalidade k para cada um dos componentes da
amostra, que conhecida como fator de correo ou fator de resposta (f), a partir do cromatograma
obtido de padres das substncias que compem a amostra.
O procedimento adotado para determinar os fatores de resposta :
Preparar uma soluo padro contendo todos os componentes da amostra, de preferncia, na
mesma concentrao.
Injetar essa soluo e determinar as reas dos picos.
Considerar uma das substncias como referncia no cromatograma.
Determinar os demais fatores a partir da relao entre as reas da substncia desejada e da
substncia escolhida como referncia no cromatograma do padro.
Por exemplo, para calcular os fatores de resposta das substncias A, B e C de uma amostra
contendo somente essas trs substncias pode-se, a partir das reas dos picos no cromatograma da
soluo padro, empregar as seguintes expresses:

3
A tcnica de adio-padro no ser discutida neste texto.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



29
S
A
= k
A
x C
A
x V
inj
/At S
B
= k
B
x C
B
x V
inj
/At S
C
= k
C
x C
C
x V
inj
/At
Onde segue-se a mesma notao do tem anterior. Nesse caso, se a substncia B for
escolhida como referncia o seu fator ( f
B
= K
B
/K
B
) ser 1 j que:
S
S
k C V At
k C V At
A
B
A A inj
B B inj
=
/
/

S
S
k C V At
k C V At
B
B
B B inj
B B inj
=
/
/

S
S
k C V At
k C V At
C
B
C C inj
B B inj
=
/
/

E tem-se, ento: f
A
= S
A
/ S
B
; f
B
= S
B
/ S
B
= 1 ; f
C
= S
C
/ S
B

admitindo que, no padro, C
A
= C
B
= C
C
.
Depois de determinar os fatores de resposta das substncias a partir dos padres, deve-se
corrigir cada rea no cromatograma da amostra, e o clculo da concentrao similar ao clculo
percentual da normalizao interna, s que neste caso utiliza-se as reas corrigidas
4
. Assim, o
clculo percentual de uma amostra contendo as substncias A, B e C fica:
( )
%A =
A
A
A
A
B
B
C
C
S
f
S
f
S
f
S
f
+ +

100

( )
%B =
B
B
A
A
B
B
C
C
S
f
S
f
S
f
S
f
+ +

100

( )
%C =
C
C
A
A
B
B
C
C
S
f
S
f
S
f
S
f
+ +

100
As vantagens e limitaes da tcnica de normalizao de reas so, praticamente, as
mesmas da normalizao interna exceto que o resultado obtido mais exato devido correo das
reas (dependendo fundamentalmente da pureza dos padres). uma tcnica um pouco mais
laboriosa e necessita da utilizao de vrios padres, por isso, normalmente s utilizada para
amostras com poucos componentes.

E.3.3. PADRONIZAO EXTERNA
5


Como foi visto anteriormente, ambas as tcnicas de normalizao no servem para amostras
mais complexas. Observe a figura 14:
Cromatograma 1 Cromatograma 2

t
R

(min)
t
R
(min)
Fig. 14 - Cromatograma 1 - injeo de amostra, Cromatograma 2 - injeo de padro


4
rea corrigida = rea calculada / fator de resposta relativo.
5
Tambm conhecida como calibrao absoluta.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



30
No cromatograma 1, relativo uma amostra complexa, so registrados doze sinais. O
cromatograma 2 corresponde a uma soluo padro da substncia que gerou o pico n
o
11.
Supondo que o problema em questo fosse quantificar nessa amostra, um determinado
componente X que gerou o pico n
o
11, voc seria capaz de listar os motivos pelos quais no
possvel lanar mo da tcnica de normalizao nesse caso?
Uma soluo plausvel para casos como esse a tcnica da padronizao externa, onde
preparada uma soluo padro contendo somente a(s) substncia(s) de interesse na amostra. A
comparao com um padro externo possvel, baseando-se no pressuposto de que uma substncia
X ter o mesmo fator de resposta quando presente na amostra ou em uma soluo padro. Pode-se
considerar as relaes matemticas a seguir:
S f C
V
At
x x x
inj
=

no cromatograma 1
S f C
V
A t
x x x
i n j
' '
'
'
=

no cromatograma 2
Onde S
x
e S
x
so, respectivamente, as reas que a substncia X gerou nos cromatogramas
da amostra e do padro; C
x
e C
x
se referem, respectivamente, s concentraes de X nas solues
amostra e padro, f
x
o fator de resposta da substncia X frente ao detector utilizado, V
inj
e
V'
inj
os volumes injetados de amostra e de padro e At e At so as atenuaes de trabalho em cada
cromatograma. f
X
e C'
x
so as incgnitas que podem ser determinadas pelas duas equaes.
Para melhorar a preciso do mtodo e tambm verificar a faixa de linearidade pode-se
construir uma curva de calibrao (rea concentrao). Os volumes injetados e a atenuao a
diferentes concentraes dos padres da substncia de interesse devero ser os mesmos
6
.
O procedimento adotado para fazer a curva de calibrao simples:
a) Prepara-se padres da substncia a ser analisada.
b) Injeta-se os padres, um a um, e determina-se as reas pertinentes substncia de interesse.

6
Obviamente, alguns outros parmetros que podem alterar a rea ou a sensibilidade analtica como a temperatura do
forno do detector, corrente de alimentao para o DCT, vazo do gs de arraste, etc. devero ser constantes. A
atenuao de trabalho e o volume injetado fazem parte da constante no grfico.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



31
Observando-se o exemplo da figura 15 e considerando C
1
< C
2
< C
3
< C
4
< C
n
, tem-se que:








Curva de calibrao - Padronizao Externa
Concentrao
rea

Fig. 15 - Curva de calibrao na padronizao externa.
Como outros mtodos analticos, a determinao da concentrao desconhecida na soluo
injetada, a partir da curva de calibrao, feita por interpolao grfica da rea no cromatograma da
amostra ou pela equao da reta determinada por regresso linear. Como sempre, h incerteza
quanto ao volume injetado, principalmente, quando so utilizadas microsseringas
7
.

Vantagens :
basta determinar a(s) rea(s) do(s) pico(s)
de interesse.
independe da deteco de todos os picos.
serve para amostras mais complexas.
possvel usar essa tcnica quantitativa na
anlise de traos.
pode-se trabalhar com curva de calibrao.
Limitaes :
depende do volume injetado.
depende da estabilidade do cromatgrafo e do
detector.



7
A utilizao de vlvulas de injeo com volumes fixos acarreta menor erro de injeo.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



32
E.3.4. PADRONIZAO INTERNA

Como visto anteriormente, na tcnica de padronizao externa corre-se o risco de no se
analisar a amostra exatamente nas mesmas condies dos padres. Isso pode acarretar erros nos
clculos das concentraes, principalmente com os erros do volume injetado. Por outro lado, isso
no problema na normalizao, j que os clculos (percentual em rea e fator de resposta
relativo) so feitos a partir da relao entre as reas de dois picos num mesmo cromatograma.
Assim, alteraes que ocorram na sensibilidade do detector e, principalmente, no volume injetado,
afetaro os dois picos de modo igual, no interferindo dessa forma no clculo quantitativo final.
A padronizao interna uma tcnica na qual um padro injetado concomitantemente
amostra desconhecida, isto , ele dissolvido na prpria amostra e servir de base para os clculos
quantitativos da substncia a ser analisada a partir de uma relao de reas. A tcnica similar
padronizao externa, porm, como veremos adiante, o volume injetado agora um parmetro que
pouco afeta a anlise. O grande problema escolher um padro interno
8
adequado para a amostra a
ser analisada pois este deve atender aos seguintes requisitos:
No pode estar presente na amostra.
Deve ter comportamento cromatogrfico similar ao da substncia a ser analisada.
Estar numa concentrao conhecida.
Ser estvel termicamente.
No ficar adsorvido permanentemente na fase estacionria.

8
Essa tcnica restrita a solues lquidas, dada a dificuldade em adicionar, com preciso, padres internos gasosos
em amostras gasosas.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



33
Observando-se o exemplo a seguir:





- Cromatograma 2 - Soluo padro do componente X.
- Cromatograma 3 - Soluo padro de uma substncia PI.
- Cromatograma 4 - Amostra complexa + PI.
- Cromatograma 5 - Soluo padro de X + PI.

Fig. 16 - Cromatograma 1 - Amostra complexa contendo o componente de interesse X,
com concentrao desconhecida.
bvio, observando os cromatogramas da figura 16, que a substncia escolhida como
padro um bom padro interno (PI) para essa amostra, pois no est presente originalmente no
cromatograma 1 (no h nenhum pico proveniente da amostra com o mesmo tempo de reteno do
PI), alm disso, o PI tem um comportamento cromatogrfico similar ao do componente X. Fazendo
a relao da rea do componente X (S
X
) com a rea do padro interno (S
PI
), pode-se calcular a
concentrao do componente X na amostra, utilizando a equao final do desenvolvimento a seguir:
S
S
K
K
C V At
C V At
x
PI
x
PI
x inj
PI inj
= Como:
K
K
x
PI
= f
X/PI
A equao fica:
S
S
x
PI
= f
X/PI

C V At
C V At
x inj
PI inj

Como o volume injetado e a atenuao so iguais para o X e para o PI para um mesmo
cromatograma, tem-se a equao simplificada, que vlida tanto para o cromatograma dos
padres de X mais PI quanto para o cromatograma da amostra mais o PI :
S
S
x
PI
=
f
X/PI
C
C
x
PI

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



34
No cromatograma do padro (cromatograma 5), pode-se determinar o fator de resposta
relativo de X em funo de PI ( f
X/PI
) j que ambos tm concentraes e reas conhecidas. Como
o fator de resposta relativo ( f
X/PI
) o mesmo para os cromatogramas da amostra (+ PI) e dos
padres (X + PI), utiliza-se a mesma equao, relacionando as reas da amostra mais PI (crom. 4) e,
como se conhece a concentrao do padro, calcula-se a concentrao de X na amostra.
Assim como na padronizao externa, essa anlise pode ser realizada mediante a construo
de uma curva de calibrao. Essa curva de calibrao feita da seguinte forma:
Preparam-se vrios padres com vrias concentraes conhecidas da substncia a ser analisada.
Em cada um desses padres adicionada uma quantidade tal de padro interno, de modo que a
rea de X no fique muito maior do que a rea do PI ou vice-versa
9
.
Cada um desses padres injetado em condies semelhantes e so medidas as reas da
substncia que se quer analisar e do padro interno.
Constri-se um grfico em que a abcissa (x) a razo da concentrao (ou massa) da substncia
em anlise pela concentrao (ou massa) do padro interno e a ordenada (y) a relao entre as
reas da substncia X e do padro interno.
Para a anlise da amostra desconhecida introduz-se, de preferncia, a mesma quantidade de
padro interno utilizada no preparo dos padres.
Injeta-se a mistura, calculam-se as reas da substncia X e do PI e as relaes entre elas e
interpola-se no grfico obtido anteriormente, de modo a se obter a relao de concentrao. E, a
partir do resultado obtido, calcula-se a concentrao de X na amostra desconhecida.
Pode-se expressar o eixo X somente como C
x
, se a concentrao do PI for mantida constante
para todos os padres e amostra.
Curva de calibrao -
Padronizao Interna
0
10
20
30
40
0 0,1 0,2 0,3 0,4
Cx/Cpi
S
x
/
S
p
i
Vantagens :
So as mesmas da padronizao externa,
acrescentando-se o fato de que o volume injetado
e a estabilidade do cromatgrafo deixam de ser um
fator limitante.
No so necessrios vrios padres, como
acontece na normalizao de reas.
Limitaes :
Dificuldade na escolha de um padro interno que
atenda a todos os requisitos necessrios.

9
Se possvel, interessante manter a concentrao do padro interno fixa enquanto a de X varia.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



35

EXERCCIOS

1)Uma amostra de trs substncias A, B e C foi analisada cromatograficamente e foram obtidos 3
picos distintos. O papel que registrou estes picos foi recortado no formato de cada um deles, de
modo que cada pico foi pesado numa balana analtica e obteve-se 0,5710 g, 0,2230 g e 0,1240 g
para A, B e C, respectivamente. Supondo que o papel tenha peso uniforme, calcule a % de B na
amostra, levando em conta que o fator de resposta do detector igual para as trs substncias.

2)H possibilidade de se fazer uma anlise por cromatografia gasosa se a constante k for diferente
para cada componente da amostra? Justifique, descrevendo o procedimento a ser efetuado.

3)O cromatograma A corresponde a uma alquota de 1,5 mL de uma amostra contendo somente as
substncias A, B, C, D e E, e o cromatograma B a uma alquota de 1,0 mL de uma mistura padro
(em %p/p) de A (32%), B (38%) e C (30%).
Considerando que B tem o mesmo fator de resposta que E e que C tem o mesmo que D,
determine os valores de rea por triangulao e o teor de A na amostra.

REAS



4) Uma amostra de 3 substncias A, B e C foi analisada cromatograficamente, obtendo-se trs picos
distintos. Estes picos apresentaram reas iguais a 57,10 mm
2
, 22,30 mm
2
e 12,40 mm
2

respectivamente. Calcule a porcentagem de B na amostra, levando em conta que A, B e C tm
fatores de resposta iguais a 1,0; 1,5 e 2,0 respectivamente.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



36
5) 1,0 mL de uma mistura de 0,537 g de n-butanol e 0,497 g de dioxano foi injetada em uma coluna
carbowax em um cromatgrafo gs com atenuao na posio (50), obtendo-se reas de 104
mm
2
para o n-butanol e 127 mm
2
para o dioxano. 1,0 mL de uma mistura desconhecida das mesmas
substncias forneceu em atenuao (10) as reas de 400 mm
2
e 228 mm
2
, respectivamente.
Determine a concentrao % v/v de cada solvente na mistura desconhecida.
Dados de densidade (g/mL) : n-butanol= 0,810; dioxano= 1,034.

6) Deseja-se quantificar, por CG, uma determinada amostra, para tanto pesou-se 4,28 g da amostra
e diluiu-se com solvente adequado a 250,00 mL. Injetou-se 1,5 mL e obteve-se reas de 23678 para
A, 18245 para B e 3228 para C. Sabendo-se que os fatores de resposta, determinados a partir do
cromatograma de uma soluo com pesos conhecidos de A, B e C, so f
A
=1,60; f
B
=1,00 e f
C
=1,23,
responda os tens abaixo, considerando que a amostra contem somente A, B e C.
a) O teor de A na amostra ____________%.
b) A massa de B presente na amostra __________g.
c) Em uma soluo padro com concentraes iguais de A, B e C, a rea maior dever ser a da
substncia _________.

7) Para analisar uma mistura de benzeno e acetona, misturaram-se massas iguais de cada substncia
e 1,50 mL desse padro foram injetados num cromatgrafo a gs, obtendo-se dois picos distintos nas
condies utilizadas. Em seguida foram injetados 3,00 mL da amostra a ser analisada. As reas
obtidas foram:
amostra (cm
2
) padro (cm
2
)
benzeno 20,32 12,50
acetona 35,62 15,00
a) Qual a concentrao em % p/p de acetona na amostra?
b) Refaa os clculos usando a padronizao externa, ou seja, considerando apenas os dados
reverentes acetona.
c) Por que nesse caso, a tcnica de normalizao de reas melhor do que a padronizao externa ?

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



37

8) Um frasco de metanol foi contaminado com gua. A fim de
utilizar esta mistura para fins analticos, um qumico decidiu analisar
por cromatografia gasosa o teor de gua no MeOH. Para tanto,
realizou 2 injees com o cromatgrafo nas mesmas condies. O
cromatograma (A) foi a amostra e o cromatograma (B) foi uma
mistura padro de 5,00 g de gua destilada com 5,00 g de metanol
PA, contendo 1,50% de gua. Considerando a coluna polar, pede-se:
Cromatograma A

Cromatograma B

a) A identificao dos picos da amostra. Justifique.
b) Qual o teor de gua no metanol ?

9) Numa anlise cromatogrfica, foram obtidos os seguintes resultados em percentual em rea a
partir do integrador eletrnico:
% em rea
A B C
Padro 1:1:1 em massa 32 40 28
Amostra 36 40 24
Sabendo-se que o volume injetado em ambos os casos foi de 1,0 mL e a amostra composta
somente por A, B e C, a concentrao percentual corrigida de C na amostra _______________%.
Se o volume injetado fosse 2,0 mL para a amostra e 3,0 mL para o padro, a concentrao
percentual de A seria __________________ %.

10) Deseja-se determinar o teor de cnfora e de carvona, monoterpenos encontrados em leos
essenciais. Para tal, 2,90 g do leo contendo cnfora e carvona foram dissolvidos e diludos em
100,00 mL de clorofrmio PA (sol. A). Uma alquota de 5,00 mL da sol. A foi transferida para um
balo volumtrico de 100,00 mL e diluda com clorofrmio PA at o trao de aferio (sol. B). 2,00
mL da sol. B foram injetados em um cromatgrafo com DIC e a rea obtida no integrador pertinente
cnfora foi de 55420 e de 18020 relativa carvona.
Uma soluo padro de cnfora e de carvona contendo 3,58 g e 4,05 g de cada substncia,
foi preparada diluindo-as em b.v. de 100,00 mL em clorofrmio PA (sol. C). Em seguida, uma
alquota de 10,00 mL da sol. C foi transferida para um b.v. de 100,00 mL e avolumada em
clorofrmio PA (sol. D). Depois misturou-se 20,00 mL da sol. D e 50,00 mL de clorofrmio PA
(sol. E). Injetou-se 1,00 mL da soluo E e as reas de cnfora e de carvona foram 40877 e 43001.
Determine o teor de cnfora e de carvona no leo essencial.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



38
11) A fim de analisar o teor de acetaldedo em vinho, um analista fez 2 injees em um
cromatgrafo a gs operando com DCT. A primeira era constituda de uma mistura de 16,00 g de
vinho com 0,0200 g de propanol (substncia que o vinho no contm). A segunda injeo era
constituda de uma soluo aquosa de n-propanol a 0,058% e acetaldedo a 0,062%. As condies
foram:


Programa de temperatura :

Picos:
1- ar
2- gua
3- acetaldedo
Coluna : porapak Q 4- etanol
Atenuao : x 50 5- n-propanol
Volume de amostra : 1,0 mL 6- provavelmente, um lcool
Velocidade do papel : 0,25 pol./min superior
Os cromatogramas obtidos foram:

Baseado nestes dados, calcule o teor de acetaldedo em vinho. Para melhorar esta anlise
poderia mudar-se o tipo de detector utilizado. Explique.

12)Determinou-se o teor de benzeno em tolueno comercial (toluol) por cromatografia gasosa a
partir do seguinte procedimento:
1. Injetou-se uma alquota de 2,00 mL da amostra em um cromatgrafo com DIC e atenuao ( 30)
e obteve-se o cromatograma abaixo, donde verificou-se que o sinal n
o
2 corresponde ao benzeno.
2. Preparou-se seis padres em bales volumtricos de 25,00 mL, a partir de uma soluo estoque
de benzeno em tolueno a 0,100 g/L feita recentemente a partir dos solventes
cromatograficamente puros, conforme a tabela abaixo.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



39
3. Injetou-se, com auxlio de uma vlvula de injeo, 2,00 mL de cada padro no mesmo
cromatgrafo, com atenuao (50).
4. Calculou-se a rea correspondente ao benzeno em cada cromatograma por triangulao.
Os volumes de alquotas da soluo estoque usada para preparar os padres, medidos em
bureta, e as reas encontradas para o benzeno encontram-se na tabela abaixo:
rea (cm
2
)

0,51
0,41
0,32
0,21
0,13
0,055

Volume de alquota da
soluo estoque (mL)
15,00
12,00
10,00
6,00
4,00
1,50

Curva de calibrao do benzeno
Padronizao externa
y = 8,4x + 0,0
0,00
0,10
0,20
0,30
0,40
0,50
0,60
0 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06
Conc. (g/L)

r
e
a

a) Faa uma tabela de valores para a curva de calibrao e determine a rea do benzeno na amostra
por triangulao.
b) Por interpolao grfica, determine a concentrao em ppm de benzeno no toluol.
c) Por que, neste caso, a metodologia de normalizao de reas no adequada para determinar a
concentrao de benzeno no toluol? Cite pelo menos trs motivos e justifique.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



40
13) Um analista deseja determinar a concentrao de gua residual em THF (tetraidrofurano)
comercial por cromatografia gasosa. O cromatograma A relativo amostra de THF comercial,
onde est assinalado o pico correspondente gua. A fim de escolher um padro interno adequado,
foram coinjetadas vrias substncias com a amostra e obtiveram-se os cromatogramas B (coinjeo
de metanol), C (coinjeo de acetona), D (coinjeo de glicerol) e E (coinjeo de etanol).
Aps optar pelo EtOH como padro interno, o analista preparou vrios padres contendo
EtOH e H
2
O diludos em THF anidro e obteve os cromatogramas F, G, H , I e J.
a) A partir dos dados contidos na tabela abaixo e da curva de calibrao, determine a concentrao
de gua no THF comercial em ppm.
b) Justifique a escolha do EtOH como padro interno.
soluo
analisada
rea dos picos (mm
2
)
EtOH H
2
O
C (ppm)
EtOH
C (ppm)
H
2
O
vol. inj. (mL) cromatograma
amostra 22,9 23,2 25 ? 1,0 E
padro 1 23,0 3,0 25 5,0 1,0 F
padro 2 23,0 8,2 25 10 1,0 G
padro 3 22,5 20,3 25 25 1,0 H
padro 4 22,7 28,7 25 35 1,0 I
padro 5 23,4 41,5 25 50 1,0 J


Curva de calibrao de gua em THF
Padronizao interna
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
0 10 20 30 40 50
Conc. de gua (ppm)
S

g
u
a

/

S


e
t
a
n
o
l




CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



41
14) Desejando determinar o teor de cido lurico (C
12
H
24
O
2
) em leo de milho, um analista optou
pela tcnica de cromatografia gasosa. Procedeu ao tratamento da amostra, pesando 1,250 g do leo
de milho e dissolvendo-o em CHCl
3
, completando o volume a 100,00 mL em balo volumtrico
(sol. A). Em seguida, uma alquota de 2,00 mL foi tratada com excesso de diazometano
9
, misturada
com 2,00 mL de uma soluo a 0,0500 g/L de amilato de metila (substncia que o leo de milho
no contm) e diluda em balo volumtrico at 100,00 mL com CHCl
3
(sol. B). Injetou-se 1,5 mL
da soluo B no cromatgrafo, obtendo um cromatograma complexo, onde a rea correspondente ao
laurato de metila foi 15900 e ao amilato de metila foi 15850. Injetou-se, tambm, 1,0 mL de uma
soluo padro contendo 2,30 ppm de laurato de metila e 1,00 ppm de amilato de metila, obtendo-se
reas de 10950 e 11720, respectivamente.
Determine o teor de cido lurico no leo de milho.
15) Um alcolatra teve morte sbita provocada aps a injesto de whisky falsificado. O laudo
mdico deu como causa da morte intoxicao por metanol. O qumico do laboratrio tinha,
portanto, que dosar o metanol na bebida para servir de prova no processo de falsificao. Fez-se
uma soluo contendo 50,0 mg/mL de MeOH em EtOH puro ( sol. A) e outra contendo 40,0
mg/mL de benzeno em EtOH puro (sol. B). A partir dessas solues foram preparados padres em
balo volumtrico de 100,00 mL (ver os volumes de alquota correspondentes na tabela abaixo).
Pesou, ento, 10,3520 g do whisky, adicionou 20,00 mL da soluo B e avolumou a 100,00 mL com
etanol puro (sol. H). Injetou-se 1,0 mL dos padres C, D, E , F e G e da soluo H, obtendo-se as
seguintes reas pelo integrador eletrnico:
Soluo Soluo A (mL) Soluo B (mL) rea de MeOH rea de benzeno
C 10,00 20,00 4050 8114
D 20,00 20,00 6120 8120
E 30,00 20,00 8200 8105
F 40,00 20,00 10010 8100
G 50,00 20,00 12120 8090
H - 20,00 7200 8050

a) Determine graficamente o teor de metanol no whisky.
b) Por que as reas correspondentes ao benzeno em todas as solues analisadas no so exatamente
as mesmas, apesar das concentraes serem iguais? Explique, tambm, porque isso no afeta o
clculo quantitativo.

9
Diazometano (CH
2
N
2
) um reagente que transforma, quantitativamente, cidos carboxlicos nos respectivos steres
metlicos derivados. A reao : R-COOH + CH
2
N
2


RCOOCH
3
+ N
2

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



42
G. BIBLIOGRAFIA

1-Carol, H. C., Braga, G. L.; Bonato, P. S.; Introduo a Mtodos Cromatogrficos, Ed.
UNICAMP, Campinas, 4
a
Ed., 1990
2-Ciola, R.; Introduo Cromatografia em Fase Gasosa, Ed. Edgard Blucher, So Paulo, 1973
3-Kennedy, J. H.; Analytical Chemistry - Principles, Harcourt Brace Jovanovich, Flrida, 1984
4-Willard, H.; Merritt, Jr. L.; Dean, J.; Anlise Instrumental, Fundao Calouste
Gulbenkiam, Lisboa, 2
a
Edio, 1979
5-Ohlweiler, O. A.; Fundamentos da Anlise Instrumental, L.T.C., Rio de Janeiro, 2
a
Edio, 1976
6-Ewing, G. W.; Mtodos Instrumentais de Anlise Qumica, Vol. I e II, Ed. Edgard Blucher, So
Paulo, 1972.


GABARITO
Item B:
1 O que mais interage com a fase estacionria e/ou tem menor presso de vapor.
3 C
4 sujeira na seringa ou impureza depositada na coluna.
5 A) injeo de padres e comparao de Tr.
B) Intensidade da luminosidade da chama.

Item C:
1- C
2 - A
4 Crom. A - maior atenuao
Crom. B maior velocidade do papel
Crom. C menor temperatura da coluna e/ou menor presso de vapor.
5 D
7 A) os tempos de reteno aumentariam.
B) Injetaramos padres de tolueno e benzeno nas mesmas condies e compararamos os
Trs.
C) Os tempos de reteno diminuiriam.
D) Provavelmente apareceria somente o sinal do hexano.
E) Os sinais ficariam maiores e proporcionais ao fator de atenuao.

10 A polar
B C
10
, C
11
e C
12
C aumentar a temperatura e/ou a vazo do gs de arraste.
D Co-injecao de padres.

CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003



43
11 A) As presses de vapor ficariam baixas e alguns picos poderiam ficar assimtricos ou
deformados ou at mesmo no apar4ecer no cromatograma.
B) Os sinais ficariam muito intensos e provavelmente haveria perda de resoluo devido a
limitada capacidade da coluna. Poderia tambm ser observada assimetria nos picos.
C) Haveria sangramento da fase e perda definitiva da eficincia da coluna.
D) Certamente no haveria alterao nos Trs, mas dependendo do detetor poderia haver
alterao na sua sensibilidade. Alem disso, algumas substncias de menor presso de vapor poderia
condensar no detetor, podendo causar danos ao equipamento.
E) No seria muito sensato, at porque o NaOH no voltil. O melhor seria tratar a amostra
convenientemente para injetar somente a sua frao voltil ou semi-voltil.
F) No h problemas, desde que haja a separao cromatogrfica desejada.
G) Certamente haveria vazamento, que poderia prejudicar o funcionamento do equipamento
ou perda de amostra. Lembre-se que o septo deve ser trocado periodicamente.
H) Se o ponto de ebulio dos componentes da amostra for atingido, esta tudo bem.
Entretanto, no seria conveniente exagerar na dose, pois h de convir que algumas substncias so
termo-labeis e poderiam se decompor no injetor. Alem disso, alguns tipos de septos no toleram
temperaturas muito altas, o que poderia provocar muito rudo no e sujeira no sistema.
12 Ordem de polaridade das fases: Esqualano: SE-30; DEGS; Carbowax; Glicerol.
13 A) 1 MeI; 2 III; 3 II; 4 I.
B) Permaneceu mais tempo no sistema cromatogrfico, portanto sofreu difuso.
C) S sobrariam os picos do reagente (MeI) e dos produtos (II e III) ou ento somente o
reagente e o produto dimetilado (III).
14 a) 1,7
b) etano, etanol e gua.
c) 1 15 s; 2 24 s; 3 37,5 s.
d) emtre os picos 1 e 2.
e) mudar a fase estacionaria ou diminuir a temperatura da coluna.

Item D:
4 Sim, pois o pico da gua que o mais intenso iria praticamente desaparecer, alem do mais a
deteco dos outros componentes seria melhor, pois o DIC mais sensvel para substancias
orgnicas.
5 2; 4; 1; 5; 6; 3.
6 a) maior; b) maior; c) maior; d) H
2
O.
7 E
8 D
9 C
10 A

Item E
1 24,3%
2 sim
3 9,3%
4 29%
5 n-BuOH = 74,7% e dioxano = 25,3%.
6 a) 41,5%; b) 2.19g; c) A
7 59,4%
8 b) 9,24%
9 a) 29%; b) 38%.
10 Cnfora = 47,6%; Carvona = 16,6%.
11 0,11%
12 23 mg/mL
13 28 mg/mL
14- 0.92%
15 12,7%.