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(ASTERACEAE) Thiago Ferreira Pacheco1, Michele Soares Tacchi Campos1, Alex Sandro Oliveira Santana1, Valdenir Jos elinelo!, Silvia Amaral Pimenta de P"d#a$ %elinelo&p'(cnp'(%r )niversidade Federal do *sp+rito Santo
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olsistas de ,nicia-.o Cient+/ica do C*)0*S, )niversidade Federal do *sp+rito Santo( rasil( ! 1 2o#tor, Pro/essor do Programa de P3s45rad#a-.o em Agric#lt#ra Tropical, C*)0*S, )niversidade Federal do *sp+rito Santo, S.o Mate#s, *S( *4mail6 %elinelo&p'(cnp'(%r $ Mestre, C*)0*S, )niversidade Federal do *sp+rito Santo, *S(
2ata de rece%imento6 7!8798!711 4 2ata de aprova-.o6 $18798!711
RESUMO Foi avaliada a atividade do extrato a'#oso lio/ili:ado das /olhas de Emilia sonchifolia ;<(= 2C( ;Asteraceae= na ini%i-.o do crescimento do /#ngo Colletotrichum musae ; er>( ? C#rt(= Arx, ca#sador da podrid.o p3s4colheita da %anana, Penicillium sp, ind#tor da podrid.o p3s4colheita em /r#tos de laran@a, Fusarium solani /( sp( Phaseoli, associado A podrid.o4radic#lar do /ei@oeiro e Fusarium solani /( sp( Piperis Al%(, respons"vel pela /#sariose da pimenta4do4reino( O%tido por t#r%oextra-.o de /olhas secas e posterior lio/ili:a-.o, o extrato a'#oso /oi s#%metido A tcnica de dil#i-.o em microplacas de BC po-os para determina-.o da concentra-.o ini%it3ria m+nima ;C,M=( O material dos po-os onde n.o /oi o%servado crescimento /Dngico /oi replicado para placas com agar Sa%o#ra#d dextrose, para determina-.o da concentra-.o /#ngicida m+nima ;CFM=( Atravs dos testes /oi veri/icado '#e o extrato a'#oso de Emilia sonchifolia poss#i propriedade anti/Dngica em rela-.o A Colletotrichum musae e Fusarium solani sp(, com C,M de 19,C Eg8m< e 1!9,7 Eg8m<, respectivamente( 0as concentra-Fes de at 1777 Eg8m<, este extrato n.o apresento# atividade contra Penicillium sp( Os dados o%tidos indicaram a presen-a de constit#intes ativos no extrato a'#oso de E. sonchifolia, revelando #m potencial e/eito anti/Dngico para trGs espcies testadas( PALAVRAS-CHAVE 6 Emilia Penicillium sp, Fusarium sp( sonchifolia, Fungicida, Colletotrichum musae,
IN VITRO EVALUATION OF ANTIFUNGAL ACTIVITY OF AQUEOUS EXTRACT OF Emilia sonchifolia (L.) DC. (Ast !"# " ) A$STRACT Has eval#ated the anti/#ngal activitI o/ lIophili:ed a'#eo#s extract /rom leaves o/ Emilia sonchifolia ;<(= 2C( ;Asteraceae= in groJth inhi%ition o/ Colletotrichum musae ; er>( ? C#rt(= Arx, ind#ctor o/ postharvest rot o/ %anana, Penicillium sp, that ca#ses postharvest rot in citr#s /r#its, Fusarium solani /( sp( Phaseoli, Jhich ca#ses root rot
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o/ %ean and Fusarium solani /( sp( Piperis Al%(, associated to /#sariosis o/ %lac> pepper( The lIophili:ed extract o%tained %I t#r%oextraction o/ dried leaves Jas s#%mitted to dil#tion techni'#e in BC4Jell microplate to determine the minim#m inhi%itorI concentration ;M,C=( Then, /rom the Jell Jhere no /#ngal groJth Jas o%served, the material Jas replicated to plates Jith Sa%o#ra#d dextrose agar medi#m to /ind the minim#m /#ngicidal concentration ;CFM=( Thro#gh the tests Jas veri/ied that the a'#eo#s extract o/ E. sonchifolia have anti/#ngal properties in relation to Colletotrichum musae and Fusarium sp(, Jith M,C o/ 19(C Eg8m< and 1!9 Eg8m<, respectivelI( ,n concentrations #p to 1777 Eg8m<, the a'#eo#s extract Jas inactive against Penicillium sp( The o%tained res#lts indicated the presence o/ active constit#ents in the a'#eo#s extract o/ E. sonchifolia revealing potential anti/#ngal e//ect /or the three species tested( %EY&ORDS6 Emilia sonchifolia, Fungicide, Colletotrichum musae, Penicillium sp, Fusarium sp(
E'( ! )* +"!" #*!! s+*'(,'#-"6 Pro/( 2r( Valdenir Jos elinelo L#a Pedro 5eraldino, C1$, airro Par> Hashington, S.o Mate#s, *S, C*P !BB$P4797 4 Tele/one6 ;!N= P1Q!9!PB *4mail6 %elinelo&p'(cnp'(%r o# %elinelo1&Iahoo(com(%r
INTRODUO 0a agric#lt#ra, os /#ngos Colletotrichum musae ; er>( ? C#rt(= Arx s.o os respons"veis pela podrid.o p3s4colheita da %anana, o Penicillium sp o ca#sador da podrid.o p3s4colheita em /r#tos de laran@a ;RAM O<,M et al(, !77!=, o Fusarium solani /( sp( Phaseoli o agente da podrid.o4radic#lar do /ei@oeiro ;M,LA02A et al(, !77NO *PAM,5 !717= e o Fusarium solani /( sp( piperis est" associado A /#sariose da pimenta4do4reino( A participa-.o %rasileira no mercado internacional de %anana ainda relativamente pe'#ena, em%ora se@a o seg#ndo prod#tor m#ndial( Por diversos /atores, entre eles o vol#me de perdas em p3s4colheita no pa+s, estimado em 1,BP milhFes de toneladas8ano, '#e corresponde a $7S da prod#-.o nacional ; *0ATO, 1BBB=( As principais perdas em p3s4colheita s.o decorrentes de inDmeros /atores /+sicos, /isiol3gicos e micro%iol3gicos ;P*SSOA ? O<,V*,LA, !77C=( 0o '#e di: respeito A patologia p3s4colheita, os /#ngos s.o respons"veis pela maioria das doen-as '#e a/etam a %anana( *ntre essas doen-as, destacam a antracnose, a podrid.o4da4coroa, a podrid.o4de4char#to e podrid.o4por4 Lasiodiplodia ;P*SSOA ? O<,V*,LA, !77C=( As perdas s.o signi/icativas, principalmente na comerciali:a-.o de %ananas mad#ras, acarretando srios pre@#+:os para os mercadistas e cons#midores( 2entre as doen-as citadas, as lesFes de antracnose em %anana, ca#sadas por Colletotrichum musae, representam o mais grave pro%lema '#e ocorre p3s4colheita dessa /r#ta( *m%ora os e/eitos se@am notados somente d#rante esse per+odo, o pro%lema inicia no campo, na ocasi.o em '#e os con+dios prod#:idos em /olhas velhas, %em como em restos c#lt#rais e /lorais, s.o li%erados por meio da "g#a de ch#va o# pela irriga-.o e disseminados por ventos e insetos ;RAM O<,M et al(, !77!=(
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As tecnologias dispon+veis '#e permitem a#mentar a vida p3s4colheita, estender o per+odo livre desta doen-a e manter a '#alidade dos /r#tos s.o a '#imioterapia e re/rigera-.o ;<A AV,TCT, 1BBP=( Os /#ngicidas tia%enda:ol, tio/anato met+lico e prochlora: constit#em a principal /orma de controle da maioria das doen-as em p3s4colheita '#e acometem m#itos /r#tos( *ntretanto, a /orma de aplica-.o e o s#rgimento de pat3genos resistentes tGm limitado o #so dos at#ais '#imioter"picos( 2esse modo, v"rios mtodos para o controle de doen-as, como /+sicos, %iol3gicos e alternativos onde s.o #tili:ados 3leos essenciais e extratos de plantas, vem sendo est#dados para minimi:ar o# s#%stit#ir o #so de /#ngicidas ; ASTOS ? A< )U)*LU)*, !77QO C,A et al(, !77N=( A pimenta4do4reino /oi introd#:ida no 0orte do *sp+rito Santo e S#l da ahia como /onte alternativa para melhorar a renda dos pe'#enos e mdios prod#tores agr+colas '#e associada As c#lt#ras da mandioca, /ei@.o, ca/ conilon e da %anana garantem a /ixa-.o no campo e a so%revivGncia de m#itos agric#ltores( A pimenta4do4reino ;Piper nigrum <(= #ma planta trepadeira, pertencente A /am+lia Piperaceae( *la origin"ria do S#deste Asi"tico, mais precisamente da Vndia, sendo a mais com#m e importante das especiarias ;COSTA ? M*2*,LOS, !777=( K #ma das espcies '#e apresenta #m c#rto per+odo de imat#ridade, iniciando a prod#-.o comercial a partir do seg#ndo ano( 0o entanto, a pimenta4do4reino m#ito s#scet+vel ao /#ngo Fusarium solani /( sp( piperis Al%(, '#e respons"vel por grandes danos as plantas, red#:indo o per+odo Dtil de explora-.o desta c#lt#ra para apenas '#atro anos( 2e /orma similar ao '#e ocorre com as /r#t+/eras, o #so intensivo dos /#ngicidas metalaxIl, manco:e%, /osetil4Al o# de derivados cDpricos leva a restri-.o para exporta-.o do prod#to, e com isso, o desenvolvimento de mtodos alternativos para o controle da /#sariose tem sido proposto ; *0CT,MO< et al(, !77P=( A Emilia sonchifolia ;<(= 2C(, espcie da /am+lia Asteraceae, pop#larmente conhecida por W/alsa4serralhaX, WpincelX, Wpincel de est#danteX e Wserralha4%ravaX, #ma erva an#al, ereta, po#co rami/icada, medindo de $7 a C7 cm de alt#ra, com /olhas mem%ran"ceas dispostas de maneira ros#lada e /lores vermelhas dispostas em cap+t#los( K #ma espcie '#e se m#ltiplica apenas por sementes( *m%ora se@a origin"ria na Ysia tropical torno#4se %em adaptada As condi-Fes clim"ticas de todo o territ3rio %rasileiro, passando a ser considerada como #ma planta daninha( Atravs de est#dos /ito'#+micos /oram encontrados em Emilia sonchifolia alcal3ides pirroli:id+nicos com propriedades t#morogGnicas ;F) et al(, !77!O <OL*0R, ? MATOS, !77P=( O$.ETIVOS O o%@etivo deste tra%alho /oi avaliar a atividade anti/Dngica do extrato a'#oso lio/ili:ado o%tido de /olhas de Emilia sonchifolia ;<(= 2C( ;Asteraceae= em rela-.o aos /#ngos /itopatogGnicos Colletotrichum musae ; er>( ? C#rt(= Arx, Penicillium sp, Fusarium solani /( sp( Phaseoli e Fusarium solani /( sp( piperis Al%( MATERIAL E M/TODOS
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M"t !-"0 1 2 t"0( Emilia sonchifolia ;<(= 2C( ;Asteraceae= /oi coletada no Torto de Plantas Medicinais do Centro Com#nit"rio Franco Lossetti, Pedro Can"rio, *S( As /olhas /oram lavadas, secadas em est#/a com ventila-.o /or-ada A temperat#ra de Q7 9 ZC, e posteriormente mo+das e arma:enadas em recipiente de vidro hermeticamente /echado( O3t ')4* (* 5t!"t* t!-"2 6 7"!6"#*2'8st-#" ( Para o%ten-.o do extrato a'#oso, o p3 de Emilia sonchifolia ;!9 g= /oi trit#rado com "g#a destilada ;!97 m<=, em li'#idi/icador ind#strial t#r%oextrator, d#rante $7 min#tos, com intervalos de 9 min#tos( A sol#-.o res#ltante /oi /iltrada em tecido de malha /ina ; voil=, depois em papel de /iltro e, novamente em papel de /iltro inserido em /#nil de #chner acoplado a >itassato, neste caso so% press.o red#:ida( O /iltrado /oi concentrado em evaporador rotativo, re/rigerado a 4$7 ZC e posteriormente lio/ili:ado d#rante N! horas, /ornecendo o extrato a'#oso de Emilia sonchifolia ;*A*S= [!,1!1Q g ;P,9S=\( A triagem /armacogn3stica do extrato *A*S para detec-.o das classes '#+micas6 saponinas, "cidos orgMnicos, a-Dcares red#tores, polissacar+deos, /en3is e taninos, /lavon3ides, alcal3ides, glicos+deos card+acos, ester3ides, triterpen3ides e caroten3ides, /oi reali:ada con/orme a literat#ra ; AL OSA, !77Q=( E's"-*s "'t-79'2-#*s. Os testes %iol3gicos /oram reali:ados por microdil#i-.o em caldo Sa%o#ra#d dextrose con/orme metodologia padr.o para /#ngos por microdil#i-.o ;0CC<S, !77!=( O in3c#lo /oi preparado com cepas recentes de Colletotrichum musae ; er>( ? C#rt(= Arx, Penicillium sp, Fusarium solani /( sp( Phaseoli e o Fusarium solani /( sp( Piperis Al%( mantidas em agar Sa%o#ra#d dextrose a !P ] ! ZC por QPh( O in3c#lo /oi preparado em sol#-.o salina, c#@a s#spens.o /oi padroni:ada pelo t#%o 7,9 na escala Mc Farland, para se o%ter s#spens.o com 1,7x17C a 9,7x17C esporos8m<( Os testes /oram reali:ados em microplacas de BC po-os, partindo da concentra-.o inicial de 1777,7 Eg8m< at a /inal de $,B Eg8m< de *A*S, para determina-.o da concentra-.o ini%it3ria m+nima ;C,M=( Para garantir a a#sGncia de contaminantes o# a ine/iciGncia do meio para o crescimento /Dngico, os trGs Dltimos po-os /oram destinados ao controle do meio, do *A*S e do /#ngo em '#est.o( O experimento /oi reali:ado em '#int#plicata com inc#%a-.o a !P ] ! ZC por C7h para determina-.o da C,M( A concentra-.o /#ngicida m+nima ;CFM= /oi reali:ada em placas ap3s leit#ra do C,M nos po-os onde n.o /oi o%servado crescimento /Dngico( O controle positivo /oi reali:ado com cetocona:ol com concentra-.o de 97,7 Eg8m<( A an"lise estat+stica /oi reali:ada #tili:ando teste de an"lise de variMncia, considerando signi/icativos os valores para p ^ 7,79( RESULTADOS E DISCUSSO A triagem /ito'#+mica do extrato das /olhas de Emilia sonchifolia ;Asteraceae= indico# a presen-a de m#cilagem, c#marinas, cromonas, xantonas, alcal3ides, /lavon3ides e saponinas( 2esde 1PP!, '#ando Pierre4Marie4Alexis Millardet introd#:i# a calda %ordalesa como /#ngicida no controle de pragas agr+colas, os pes'#isadores proc#ram por novas s#%stMncias, tanto por via sinttica como por meio de o%ten-.o
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de extratos de plantas e microrganismos, para vencerem a resistGncia ad'#irida pelos /#ngos aos prod#tos em #so na agric#lt#ra( As plantas por meio do meta%olismo sec#nd"rio prod#:em s#%stMncias '#e est.o relacionadas ao se# mecanismo de de/esa, em resposta ao ata'#e por predadores como /#ngos, %actrias, v+r#s, parasitas, insetos, mol#scos o# animais s#periores ; AL OSA, !77QO F*00*L et al(, !77CO S,<VA et al(, !717=( Atravs dos res#ltados o%tidos dos testes com extrato a'#oso de Emilia sonchifolia veri/ico#4se atividade ini%it3ria do crescimento do /#ngo Colletotrichum musae ; er>( ? C#rt(= Arx e Fusarium solani sp(, com C,M ig#al a 19,C Eg8m< e 1!9 Eg8m<, respectivamente ;Ta%ela 1=( 0as concentra-Fes de at 1777 #g8m<, o *A*S n.o apresento# atividade contra o Penicillium sp( TA$ELA :. Les#ltados dos testes de avalia-.o pelo mtodo de placas de microdil#i-.o da atividade do extrato a'#oso de Emilia sonchifolia( ;Asteraceae= contra /#ngos /itopatogGnicos
S#%stMncia ;Eg8m<= Controle1 Controle! Controle$ *xtratoQ Cetocona:ol9
1 Q
Fusarium solani /( Fusarium solani sp( Phaseoli /( sp( piperis C,M CFM C,M CFM 4 _ 4 1!9,7 4 4 _ 4 1!9,7 4 4 _ 4 1!9,7 4 4 _ 4 1!9,7 4
Controle do extrato8drogaO !Controle microorganismoO $Controle caldo Sa%o#ra#dO *xtrato a'#oso nas concentra-Fes 1777 a $,B #g8m<O 9Controle anti/Dngico 97 #g8m<O ;4= A#sGncia de crescimento micro%iano, ;_= Crescimento micro%iano( P,0TO et al( ;!717= no est#do com v"rias c#ltivares de %ananeira mostra '#e todas s.o s#scept+veis A antracnose ca#sada pelo /#ngo Colletotrichum musae, o '#e exige aplica-Fes de /#ngicidas d#rante todo o processo de prod#-.o( *ste /ato tam%m /oi o%servado com a podrid.o da laran@a e do /ei@oeiro e com a /#sariose da pimenta4do4reino, c#@os /#ngos aca%am ad'#irindo resistGncia ;RAM O<,M, !77!O M,LA02A et al(, !77N=( 0a perspectiva de o%ter novos agentes anti/Dngicos, SCTALMA * TL,PAT, ;!77C=, o%servaram '#e o 3leo de Citrus sinensis na concentra-.o de $,9 `g8m< /oi capa: de ini%ir 177S do crescimento micelial do Aspergillus niger ap3s N dias de exposi-.o( O<,V*,LA et al( ;!717= est#daram a atividade anti/Dngica de extratos o%tidos de QB cepas de Streptomyces spp( isolados de solos parai%anos( L*5AS,0, et al( ;!717= na pes'#isa com extratos da planta Pterogyne nitens T#l( o%servaram '#e as /ra-Fes extra+das com %#tanol apresentaram atividade anti/Dngica com C,M a partir de 19,C `g8m< para /#ngos C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis e C. neoformans( *xtratos vegetais tGm sido %astante #tili:ados na agric#lt#ra de /orma ecologicamente correta, /a:endo parte da chamada agric#lt#ra orgMnica( 2entre estes, citam4se os extratos de cavalinha ;E uisetum pyramidale 5oldm(=, nim ;A!adirachta indica A( J#ss=, #rtiga ;"rtiga dioica <(= e de alho ;Allium sativum <(=
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#tili:ados no controle de pragas agr+colas ;A L*) Ja0,OL, 1BBPO TAM*LSCT,M,2T, 1BBBO 2*FF)0*, !771O SA0TOS et al(, !717=( *ste tra%alho corro%ora a necessidade de se contin#ar %#scando s#%stMncias anti/Dngicas na /lora %rasileira( CONCLUS;ES O extrato a'#oso das /olhas de Emilia sonchifolia ;<(= 2C( ;Asteraceae= apresento# atividade anti/Dngica signi/icativa ;p ^ 7,79S= em rela-.o As espcies Colletotrichum musae ; er>( ? C#rt(= Arx, Fusarium solani /( sp( Phaseoli e o Fusarium solani /( sp( piperis Al%( AGRADECIMENTOS Ao C0P', FAP*S, CAP*S e )F*S ;PLO*b e PLPP5= pela concess.o de %olsas e s#porte /inanceiro( REFER<NCIAS $I$LIOGR=FICAS A L*) J)0,OL, T( P!>t-#"s "0t !'"t-1"s ( #*'t!*0 ( +!"2"s "2!-#?0t?!"6 coletMnea de receitas( Campinas6 *MOP,, 1BBP( 119 p( AL OSA, <( C( A( Os + st-#-("s@ * A*6 6 !77Q( !19p(
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<A AV,TCT, J( M( Fr#it ripening and de/ense against pathogens4loss o/ resistance or gain o/ s#scepti%ilitI( ,n6 JOT0SO0, 5(O T,5T<*e, *(O JOeC*, 2( C( ;*ds(=( D-s "s ! s-st"'# -' 7!?-t( A#stralia6 AC,AL, v( P7, 1BBP( p( 9$49B( <OL*0R,, T(O MATOS, F( J( A( P0"'t"s 6 (-#-'"-s '* $!"s-0I nativas e ex3ticas( ! ed( 0ova Odessa6 *ditora Plantar#m, !77P, 9NCp( M,LA02A, ( A(O <O O Ja0,OL, M(O C)0TA, M( 5( Lea-.o de c#ltivares do /ei@oeiro com#m As podridFes radic#lares ca#sadas por #hi!octonia solani e Fusarium solani /( sp( Phaseoli( P sJ?-s" A2!*+ #?>!-" T!*+-#"0, v( $N, n( Q, p( !!14!!C, !77N( 0AT,O0A< COMM,TT** FOL C<,0,CA< <A OLATOLe STA02AL2S( M!N4A!( Mtodo de re/erGncia para testes de dil#i-.o em caldo para determina-.o da sensi%ilidade de leved#ras A terapia anti/Dngica( v( !!, n( 19, p( 1Q4Q!, !77!( 0AT,O0A< COMM,TT** FOL C<,0,CA< <A OLATOLe STA02AL2S( MKL-A( Mtodo de re/erGncia para testes de dil#i-.o em caldo para determina-.o da sensi%ilidade a terapia anti/Dngica de /#ngos /ilamentosos( v( !!, n( 1C, p( 1497, !77!( O<,V*,LA, T( <(O <,MA, *( O(O SO)RA, ,( A(O COL0*JO, <( C( R( Atividade anti/Dngica e cintica de morte micro%iana de extratos o%tidos de Streptomyces spp( isolados de solos parai%anos( R 1-st" $!"s-0 -!" ( F"!6"#*2'*s-" , v( !7, n( 1, p( C74CQ, !717( P*SSOA, H( L( <( S(O O<,V*,LA, S( M( A( 2oen-as da %anana( ,n6 O<,V*,LA et al, P"t*0*2-" +8s-#*0A -t"I F!?t"s@ *0 !B#*0"s *!'"6 't"-s t!*+-#"-s ( ras+lia6 *m%rapa ,n/orma-.o Tecnol3gica, !77C( p( 9Q7499$(
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P,0TO, 2( (O M,RO )TS,, *( T(O S,<VA, S( O(O L*,S, S( T(O M,RO )TS,, 5( P(O bAV,*L, A( A(O L, *,LO, L( C( F(O MA,A, V( M( Avalia-.o de gen3tipos de %ananeira A Colletotrichum musae em p3s4colheita( R 1-st" $!"s-0 -!" ( F!?t-#?0t?!" , v( $!, n( $, p( NPC4NB7, !717( L*5AS,0,, <( O(O P,VATTO, M(O SCOLRO0,, <( *0A2)CC,, T(O F)SCO4 A<M*,2A, A( M(O 5,A00,0,, M( J( S( M(O ALL*,LO, *( J(O S,<VA, 2( T( S(O O<RA0,, V( S( Antimicro%ial activitI o/ Pterogyne nitens T#l(, Fa%aceae, against opport#nistic /#ngi( R 1-st" $!"s-0 -!" ( F"!6"#*2'*s-", v( !7, n( !, p( !7P4!1Q, !717( SA0TOS, M( (O SA0TOS, C( e(O A<M*,2A, M( A(O SA0TOS, C( L( S(O SA0TfA00A, T( <( S(O SA0TOS, O( S( 0(O S,<VA, F(O MALT,0S, 5( 0( */eito ini%it3rio in vitro de extrato vegetal de Allium sativum so%re Aspergillus niger Tiegh( R 1-st" $!"s-0 -!" ( P0"'t"s M (-#-'"-s, v( 1!, n( 1, p( 1$41N, !717( SCTALMA, 0(O TL,PAT,, A( *//ects o/ Citrus ;<= Os%ec> epicarp essencial oil on groJth and morphogenesis o/ Aspergillus niger. C"'"(-"' .*?!'"0 *7 M-#!*3-*0*2C, v( QN, n( 1, p( B41N, !77C( S,<VA, <( <( S(O <,MA, *( O(O 0ASC,M*0TO, S( C(O MOTA, 2( <(O S,<VA, 0( T(O A<M*,2A, *( L(O S,<VA, M( 5( S( Avalia-.o da atividade antimicro%iana de extratos de $ioclea grandiflora Mart( *x( enth, Fa%aceae( R 1-st" $!"s-0 -!" ( F"!6"#*2'*s-", v( !7, n( !, p( !7P4!1Q, !717( RAM O<,M, <(O VA<*, F( b( L(O MO0T*,LO, A( J( A(O COSTA, T(( C*'t!*0 (* ')"s ( +0"'t"sI F!?t -!"s( Vi-osa, )FV, !77!( v( !( 1$1$p( RAM O<,M, <(O VA<*, F( b( L(O MO0T*,LO, A( J( A(O COSTA, T(( C*'t!*0 (* ')"s ( +0"'t"sI F!?t -!"s( Vi-osa, )FV, !77!( v( 1( CNQp( ( (
*0C,C<OPK2,A ,OSF*LA, Centro Cient+/ico Conhecer 4 5oiMnia, vol(N, 0(1!O !711 P"g( 8