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PEPTONAS E HIDROLIZADOS Ngeli ha sido al que se le ha atribudo ser el primer bacterilogo en descubrir que los organismos quimio-organotrofos crecen

mejor en medios de cultivo que contienen materiales proteicos parcialmente digeridos. Peptona es un trmino qumicamente indefinido, usado para describir productos solubles en agua, obtenidos despus de la hidrlisis de protenas. Contiene una mezcla de aminocidos libres y polmeros de aminocidos (pptidos) incrementando su nmero como pptidos de mayor tamao (proteosas), que pueden quedar en la solucin despus del calentamiento a 100C. Las peptonas se fabrican por el uso de enzimas o cidos minerales fuertes, que hidrolizan las protenas. Los problemas asociados a la produccin de peptonas fueron rpidamente identificados y los productores de peptonas comenzaron a relacionarse con los proveedores comerciales. La peptona fue el primer ingrediente de un medio de cultivo complejo provisto por la industria y el disparador de la gran variedad de ingredientes de medios comerciales disponibles hoy. Oxoid comenz su investigacin en la produccin de peptonas en 1924. La variedad de peptonas producidas refleja las diversas demandas de los microorganismos, con respecto a aminocidos y pptidos. Las protenas usadas para la produccin de peptonas, pueden ser divididas entre protenas de la carne (includas casena y gelatina) y protenas de plantas (como la protena de soja). Las peptonas producidas a partir de estos productos, pueden a su vez ser subdivididas en aquellas obtenidas por cidos, o por enzimas como pepsina, tripsina o papana. Las diferentes enzimas rompen las uniones peptdicas en la molcula proteica en diferentes lugares, liberando una gran variedad de pptidos y aminocidos libres. Dondequiera que la hidrlisis cida rompa cada unin peptdica y produzca aminocidos libres, desafortunadamente tambin destruye algunos valiosos aminocidos como el triptofano. Los aminocidos pueden ser usados por los microorganismos como ladrillos para la construccin de las protenas o tambin pueden ser usados como fuente de energa, formando compuestos como el sulfuro de hidrgeno, indol, aminas, etc. En los tests diagnsticos las peptonas pueden ser seleccionadas segn sus virtudes predominantes, as las peptonas ricas en triptofano son seleccionadas

para los tests de indol. Las peptonas con alto contenido en sulfuro pueden ser usados para tests de hidrgeno sulfurado. En los desarrollos a gran escala de microorganismos ellos mismos son cosechados ( produccin de vacunas) o sus metabolitos son retenidos (como la produccin de antibiticos o exotoxinas), por lo que se requieren peptonas especiales para estos propsitos , y la investigacin constante va hacia la produccin de peptonas que den mayor rendimiento en nmero de microorganismos o mayores concentraciones de metabolitos. Las peptonas aportan otros factores adems de los aminocidos a los medios de cultivo; fracciones de cidos nucleicos, minerales, vitaminas, que tambin es necesario suministrar. Las peptonas de plantas proveern tambin carbohidratos que pueden estimular el crecimiento de los microorganismos. Es la presencia de metales alcalino trreos y fosfatos en peptonas, lo que causa precipitados , que aparecen cuando el pH es ajustado hacia la neutralidad. Por eso es la ventaja de las peptonas fabricadas a pH neutro. Hidrolizado cido de Casena: Tcnicamente este hidrolizado es preparado por la hidrlisis de la casena con cido clorhdrico, seguido de la neutralizacin con bicarbonato de sodio. Mucho del cloruro de sodio resultante, es removido por un proceso especial. El Hidrolizado cido de Casena provee el Nitrgeno necesario para el medio de cultivo o puede ser usado cuando se especifican mezclas de aminocidos. A este hidrolizado se le han encontrado una serie de aplicaciones, incluyendo su uso en estudios de crecimiento en cultivos sumergidos y contnuos. Hidrolizado de Lactalbmina: Es una peptona preparada por digestin pancretica de lactalbmina proteica obtenida de la leche. Los altos niveles de aminocidos esenciales la hacen un suplemento valioso en los medios de cultivo de tejidos. Sirve tambin, como un sustrato altamente nutritivo para algunos microorganismos como Lactobacillus. Digerido de Hgado Neutralizado: Es un digerido papanico estandarizado de hgado bovino, para uso como fuente de nutrientes en medios de cultivo microbiolgicos. El Digerido de Hgado provee factores esenciales de crecimiento y aminocidos para el cultivo de Tricomonas vaginalis, y otros protozoos

exigentes, hongos saprfitos y patgenos, bacterias, y microorganismos tipo PPLO. El digerido es soluble en agua y compatible con otros ingredientes de medios de cultivo, pudiendo ser esterilizado por filtracin o autoclavado; esto lo hace muy aceptable como parte integral de muchos medios de cultivo y valioso suplemento. A menuodo es usado como reemplazo de ingredientes ms costosos: por ej. En algunos medios puede usarse como alternativa de la infusin de hgado, peptonas, extracto de levadura o sangre calentada. Como gua general, el Digerido de Hgado reemplazara a la peptona peso a peso. Es un ingrediente esencial del Medio de Tricomonas CM161 que es empleado para el cultivo y deteccin de Tricomonas y especies de Candidas. Peptona Micolgica: Es una peptona que se usa para el cultivo de dermatofitos, hongos saprfitos y levaduras. La cuestin de la nomenclatura en los hongos patgenos ha sido clarificada por la publicacin del Medical Research Council (1949). Esta confusin fue debida a pequeas diferencias morfolgicas, probablemente causadas por variaciones en el valor nutricional de los medios, que hicieron que algunos microorganismos fueran errneamanete asignados en otras especies. Esto demuestra la importancia, particularmente en el trabajo diagnstico, de emplear un medio estandar incorporando una peptona estandarizada como nutriente. Esto ha sido enfatizado por Hodges (1928), quien ha demostrado las variaciones en la apariencia macroscpica de un mismo organismo gobernadas por la peptona usada. Carlier (1948) demostr que un medio satisfactorio puede ser preparado con peptona, glucosa y agar, y ste puede ser usado como un servicial sustituto del Medio Standard Americano de Hodges. Con estas consideraciones, fue desarrollada la Peptona Micolgica, para su incorporacin en medios slidos para el aislamiento y diagnstico de hongos patgenos y no patgenos. Da un desarrollo rpido y lujurioso con una morfologa y pigmentacin tpicas. Aunque no se recomienda para el cultivo microbiano por su acidez, los medios conteniendo esta peptona son tiles para el aislamiento de hongos patgenos de material altamente contaminado con bacterias. Peptona Bacteriolgica: Es una peptona multipropsito con un amplio rango en aplicaciones de rutina, diagnstico e investigacin bacteriolgica. Adems de ser usada como componente de muchos medios Oxoid, hay muchas

referencias publicadas de su uso como ingrediente de medios de investigacin de: Escherichia coli y coliformes, especies de Bacillus, Staphilococcus aureus y otras Micrococcaceae, Aerobacter y Klebsiella, estreptococos, clostridios, patgenos vegetales, Vibrio, Proteus, Pseudomonas, Nocardia, Corynebacterium, Lactobacillus, Spirillum, Leptotrichia, Photobacterium, Salmonella, Bordetella pertussis, Serratia marcescens, algunos hongos y flagelados (Strigonomonas). Peptona Bacteriolgica Neutralizada: Es una peptona muy nutritiva, multipropsito, preparada por digestin enzimtica de protenas animales seleccionadas. Fue especialmente preparada para usarla con otros ingredientes refinados de medios de cultivo, con los cuales puede ser mezclada en cualquier proporcin para dar una solucin libre de bruma, niebla o precipitacin. Tiene un amplio rango de aplicaciones en la rutina diagnstica y en la investigacin bacteriolgica. Puede ser usada con confianza en cualquier medio que se requiera una peptona de alta calidad bacteriolgica. Peptona P: Es un digerido ppsico de carne fresca, para uso en medios de cultivo bacteriolgicos, que cumple con los requerimientos de la USP para los digeridos ppsicos de tejidos animales. Es un constituyente del Medio Saboureaud lquido CM147, que es el equivalente al medio pata test de esterilidad de la USP. Esta peptona puede ser incorporada en una gran variedad de medios lquidos y slidos, incluyendo aquellos para las reacciones hemolticas. Debido a su alto contenido en sulfuro, es tambin recomendable para los medios de prueba de formacin de sulfuro. Leche Peptonizada: Es una peptona usada en medios para el aislamiento y cultivo de Lactobacilos, y para el anlisis bacteriolgico de productos lcteos. Es un polvo soluble en agua preparado por la digestin pancretica de leche en polvo descremada. Esta preparacin constituye una fuente ms rpidamente disponible de N2 que la leche o la leche en polvo. Puede ser usada (como una solucin simple, solidificada con agar, o como constituyente de medios ms complejos) para la investigacin de bacterias cido-lcticas como Lactobacillus acidophilus y Lactobacillus bifidus. Proteosa Peptona:

Es una peptona especial, preparada por digestin enzimtica de carne fresca seleccionada, para uso en medios para produccin de toxinas bacterianas. Es especialmente adecuada para la produccin de toxina diftrica, inclusive en medios para el test de Elek para el reconocimiento de especies toxignicas; como tambin en medios para la produccin de toxinas de estafilococos, clostridios y salmoneras. Los medios que incorporan esta peptona altamente nutritiva son adecuados para el cultivo de diferentes bacterias con un amplio rango de requerimientos nutricionales, como por ej.: Neisseria, Staphylococcus, Haemophilus, Salmonella, Pasteurella, Corynebacterium y especies de Histoplasma. Tambin puede ser usada con xito en medios para reacciones de Rojo de Metilo y Voges-Proskauer. Peptona Especial: Es una mezcla de peptonas especialmente preparada, que incluye digeridos de carne, plantas y levaduras, destinada a mejorar el desarrollo de microorganismos ms exigentes. Contiene un alto espectro de pptidos de diferentes tamaos disponibles en cada peptona, junto a minerales, vitaminas, nucletidos y otros compuestos carbonados presentes en las peptonas individuales. Peptona de Soja Neutralizada: Es una peptona vegetal, preparada por digestin enzimtica de porotos enteros de soja, para ser usada en el cultivo de microorganismos, incluyendo hongos. Tiene un alto contenido de carbohidratos, lo que la hace adecuada para mltiples propsitos adems de los estudios de fermentacin. Los medios conteniendo esta peptona son empleados para el cultivo de algunos microorganismos fastidiosos, donde se requiere un desarrollo rpido y profuso, adems de para otros ensayos microbiolgicos. Triptona: Es un hidrolizado trptico de casena. Puede ser usada en cualquier frmula que requiera un digerido trptico o pancretico de casena, cumpliendo con las especificaciones para el digerido pancretico de casena de la USP. Es una fuente extremadamente rica en aminocidos, N2, y puede ser recomendada para los medios de los tests de esterilidad, medio de Dubos, y, por su alto contenido en triptofano, en medios para la produccin de indol. La triptona es paticularmente aceptable para su inclusin en algunos medios en la industria de los enlatados; un ejemplo de esto es el medio Agar Dextrosa Triptona CM75, que es

usado para la deteccin de termfilos deteriorantes de productos. El hidrolizado se menciona a menudo donde, en trabajos, como constituyente de medios para estudios metablicos o de crecimiento o para otros propsitos donde la alta perfomance y la uniformidad de composicin, son parmetros de importancia. Triptona T Esta triptona T fue especialmente desarrollada de la Tristona L42 y es particularmente aceptable para su inclusin en medios de cultivo de produccin de toxina de Clostridium tetani, o para uso en medios donde se requiere un alto rendimiento de toxina. El digerido se produce desde una casena de mxima pureza por hidrlisis controlada enzimtica y purificada por el mtodo de Mueller y Miller. Mueller y Millar encontraron que, si era empleado un digerido pancretico de casena impurificado en medios de produccin e toxina tetnica, haba ocasionales variaciones en los rendimientos de toxina debidos a sustancias inhibitorias. Este problema fue solucionado por el tratamiento con sulfato de calcio, que remueve efectivamente los inhibidores de la produccin de toxina. Triptosa La triptosa es una mezcla de peptonas con propiedades nicas nutricionales que la hacen aceptable para el uso en medios de aislamiento y cultivo de especies de Brucella, estreptococos y otros microorganismos exigentes. Esta composicin altamente nutritiva la hace apta para el uso en medios de aislamiento de las bacterias ms exigentes donde se requiere un rpido y profuso crecimiento, por ej. cultivo de sangre. La triptosa es tambin recomendada para el uso en agar sangre y otros medios para la determinacin de reacciones hemlticas, y en medios para produccin de indol. Ctedra Inmunologa II Parte Manual Oxoid 1987