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Universidad de Concepcin

Facultad de Farmacia
Departamento de Farmacia










ANLISIS DE MEDICAMENTOS

MODULO 4






















Dra. C. Gloria Godoy Mosciatti
M.Sc. Marta de Diego Glara
Dr. Ricardo Godoy Ramos

Dra. C. Gloria Godoy M., M.Sc. Marta de Diego G., Dr. Ricardo Godoy R.
Departamento de Farmacia. Facultad de Farmacia. Universidad de Concepcin
1
I n d i c e

Contenidos N pgina

Introduccin 2

Mtodos Espectroscpicos Esquema 4

Espectroscopa de absorcin Ultravioleta-Visible
- Niveles y transiciones energticas 5
- Factores que afectan la absorcin 7
- Absorcin de los grupos funcionales 10
- Utilidad en el anlisis de medicamentos 14
- Bibliografa 15

Espectroscopa de Infrarrojo
- Introduccin 16
- Vibraciones moleculares 17
- Preparacin de las muestras 19
- Utilidad del anlisis Infrarrojo 19
- Espectroscopa Infrarroja de alcanos 21
- Bibliografa 24

Espectroscopa de Fluorescencia
- Introduccin 25
- Factores que afectan la fluorescencia 27
- Estructura qumica y fluorescencia 28
- Usos de la Espectrofluorimetra 29
- Bibliografa 30

Espectroscopa de Masas
- Introduccin 31
- Etapas 32
- Analizador de masas:
Sector magntico o Enfoque simple 36
Filtro de Masas de cuadrupolo 37

- Detectores 37
- Inyectores 38
- Anlisis cualitativo 38
- Bibliografa 39



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2

Introduccion

La espectrofotometra es un mtodo de anlisis en el cual se mide la absorcin de
radiacin electromagntica de un compuesto en un rango de longitud de onda
definido (1).

Absorcin UV (200-400 nm)
VIS (400-750 nm)
IR (4000-600 cm
-1
).

Todas las molculas y tomos son capaces de absorber energa de acuerdo con
ciertas restricciones y estas limitaciones son dependientes de la estructura del
compuesto. El tipo y cantidad de radiacin absorbida por una molcula dependen
de su estructura y tambin del nmero de molculas que interactan con la
radiacin (2).

Es un mtodo ampliamente utilizado para el anlisis cuali y cuantitativo de
frmacos. La principal aplicacin de la espectrofotometra en la regin de
absorcin a luz UV-VIS es el anlisis cuantitativo, ya sea para frmacos solos o
mezcla de ellos. El anlisis cualitativo tiene limitada aplicacin, puesto que el
estudio de su espectro se basa en picos de mxima y mnima absorcin y para
esta regin el nmero de ellos es relativamente pequeo. An as es de utilidad
para el control de la purificacin y especificacin de la pureza de los compuestos,
ya que pequeas alteraciones en la composicin qumica de la substancia produce
variaciones en el espectro de absorcin (4, 5).

A pesar de que no permite una identificacin certera del compuesto orgnico es
til para determinar la presencia de ciertos grupos funcionales, como la presencia
de dobles enlaces y de grupos aromticos. Generalmente el espectro de
absorcin UV sirve como evidencia de identidad en apoyo a otros datos (3).

Los espectros de absorcin IR tienen una alta aplicacin en el anlisis cualitativo
de las substancias y es casi sinnimo con la determinacin de grupos funcionales,
ya que los compuestos orgnicos ms simples revelan sus grupos funcionales en
el espectro IR al entregarnos informacin de las vibraciones moleculares. Estos
espectros son complejos con un gran nmero de bandas de absorcin
observndose un espectro nico para cada compuesto lo que permite la
identificacin de ste. De hecho, es el mtodo de identificacin utilizado en las
Farmacopeas actuales (2,6).

En un espectro de absorcin IR la identificacin de los compuestos comienza con
la determinacin de grupos funcionales al examinar la regin de "frecuencias de
grupo" (3600-1200 cm
-1
), luego se analiza la zona de "huella digital" (1200-600
cm
-1
) la que manifiesta notorios cambios en el aspecto y distribucin de los picos
cuando existe en la molcula pequeas diferencias estructurales y
constitucionales (4,7).

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3

Los espectros de IR pueden entregarnos una variedad de informacin de una
estructura: simetra, grupos funcionales, pureza, ismeros estructurales y
geomtricos, asociaciones intra e inter moleculares (6).

Otro mtodo analtico relacionado a la espectrofotometra es la medida de la
fluorescencia, fenmeno de emisin slo posible para las molculas que al
absorber energa (luz de una determinada longitud de onda) y ser excitadas desde
su estado de reposo hasta un estado de excitacin, luego son capaces de emitir
esta energa como radiacin, de manera que retornan a su estado de reposo. La
radiacin emitida se llama fluorescencia (2).

La ventaja del anlisis de fluorescencia es su sensibilidad. Como la cantidad de
frmaco presente en las dosis farmacutica es pequea, la concentracin de
frmacos y sus metabolitos en la sangre, orina y otras muestras biolgicas puede
ser extremadamente baja y por ello los anlisis de fluorescencia encuentran gran
aplicacin para conocer los mecanismos de absorcin, metabolismo y excrecin
de frmacos. Entre los frmacos que pueden analizarse fluorimtricamente estn
las vitaminas, esteroides, sedantes, tranquilizantes, antihistamnicos y muchos
otros (2).




BIBLIOGRAFA.


(1) USP XIX. 1975. USP Convention, Inc. USA. Pg: 662.

(2) Connors, K. 1975. A textbook of Pharmaceutical analysis. 2
nd
Ed. John Wiley
& sons Inc. USA.

(3) Moffat, A.C; Jackson, V.T; Moss, M.S; Widdop, B. 1986. "Clarke's isolation
and identification of Drugs". 2 Ed. The Pharmaceutical Press, London. Pg:
224.

(4) Skoog, D; Learly, J. 1996. "Anlisis Instrumental". 4 Ed. Saunders College
Publ. Copyright. Espaa. Pg: 184.

(5) Rao, C.N. 1970. "Espectroscopa UV-VIS". 1 Ed. Butterworth and Co. Ltda.
Espaa. Pg: 124.

(6) Lambert, J.B; Shurvell, F.H; Lawrence, V; Cooks Graham, R; Stout, G.H.
"Organic Structural Analysis".

(7) Drug Evaluations Annual. 1995. American Medical Association, USA. Pg:
126.

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4
METODOS ESPECTROSCOPICOS DE ANALISIS


Campo elctrico

Onda

Campo magntico
R.E.M

Partcula Fotones

R.E.M: radiacin electromagntica.


I. Radiacin ultravioleta.
UV de vaco 10-190 nm.
UV cercano 190-380 nm.

II. Radiacin visible. 380-800 nm.

III. Radiacin infrarroja.
IR cercano 0,8-2,5 .
IR fundamental 2,5-25 .
IR lejano 25-400 .



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5
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION
ULTRAVIOLETA-VISIBLE


NIVELES ENERGTICOS MOLECULARES.
Nivel electrnico.
Nivel vibracional. Disminuye la energa.
Nivel rotacional.

Para producir la modificacin en alguno de estos niveles, la energa del fotn
incidente debe ser igual a la energa necesaria para originar la transicin
electrnica deseada en la molcula en estudio.

M + h M
*


La molcula M al absorber la energa de un fotn, donde h = constante de Planck
(6,626176 x 10
-34
) y = frecuencia, llega a formar la especie electrnicamente
excitada.


TIPOS DE ELECTRONES EXCITABLES.
La absorcin de radiacin ultravioleta o visible proviene de la excitacin de los
electrones enlazantes, por esto las de los picos de absorcin pueden
relacionarse con los tipos de enlace que existen en la molcula.

Electrones : forman parte de enlaces simples.
Electrones : forman parte de enlaces dobles.
Electrones n: electrones no compartidos de tomos electronegativos.


n








H
C
H
O
. .
. .

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6


TRANSICIONES ENERGTICAS.
*.
*.
n *.
n *.

Las transiciones n * y n * ocurren solo con especies que
presentan electrones sin compartir.

* Antienlazante
* Antienlazante
ENERGIA n No enlazante
Enlazante
Enlazante

*: Necesitan mayor energa para ocurrir, y por esto corresponden a
las frecuencias en la regin del ultravioleta de vaco y estas son del orden de
125 a 135 nm.
n *: Requieren de menor energa que las anteriores, pero igual se
ubican en el ultravioleta de vaco con entre 150 y 200 nm. Son responsables
de estas transiciones los electrones sin compartir o no enlazantes.
n * y *: La mayora de las aplicaciones de la espectroscopa
ultravioleta-visible se basan en estas transiciones ya que las energas
requeridas se ubican a en la zona de 200 a 700 nm. Las absorbilidades
molares asociadas con la transicin n * por lo general son bajas, con
valores del orden de 10 a 100 L / cm
*
mol, en cambio las asociadas a la
transicin * son de medianas a altas, oscilando entre 1.000 y 10.000
L / cm
*
mol.

bajo : < 200
mediano : 200 -1500
alto : >1500

Las transiciones n * y * requieren la presencia de un grupo
funcional que suministre los orbitales necesarios para la transicin, a estos grupos
se les denomina Cromforos.

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7


CROMFOROS.
Grupos funcionales aislados responsables de una absorcin caracterstica de
radiacin en la regin ultravioleta visible. Entre estos tenemos:

Alquenos -C=C- Alquinos -CC-
Aldehdos (Ar)RCHO Cetonas (Ar)R
2
CO
Carboxilo -COOH Ester -COOR
Amidas -CONH
2
Azo -NH-NH-
Hidrazo -N=N- Nitro -NO
2

Nitroso -NO Sulfnico -SO
3


AUXOCROMOS.
Grupo funcional que no absorbe por si solo en la regin ultravioleta visible, pero al
estar asociado a un cromforo tiene la capacidad de modificar la absorcin de
ste.
Esto se debe a que los auxocromos tienen al menos un par de electrones n que
tambin participan en las transiciones electrnicas, algunos de estos son:

-OH -SH
-OR -NH
2

-R -NHR
-X -NR
2


Los fenmenos que pueden originar los grupos auxocromos son.
a) Efecto Batocrmico: Desplazamiento del pico de absorcin hacia longitudes
de onda mayores (menor energa).
b) Efecto Hipsocrmico: Desplazamiento del pico de absorcin hacia longitudes
de onda menores (mayor energa).
c) Efecto Hipercrmico: Aumento de la intensidad de la absorcin de una banda
(mayor )
d) Efecto Hipocrmico: Disminucin de la intensidad de la absorcin de una
banda (menor )


FACTORES QUE AFECTAN LA ABSORCIN.
1. Solvente.
a) Polaridad.
Este fenmeno es de importancia en aquellos casos en que una sustancia
presenta diferente polaridad entre su estado fundamental y su estado
excitado.
Si el estado excitado es ms polar que el estado fundamental:
solventes polares solvatan el estado excitado y originan as una

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8
Es caracterstico de transiciones
*.
Conviene usar solventes polares.
Es caracterstico de transiciones
n *
Conviene usar solventes apolares.
estabilizacin de ste, con lo cual se produce una disminucin en la
energa necesaria para su transicin: efecto batocrmico.

E
1


E
1



E
0



Si el estado fundamental es el ms polar: se necesitara de mayor
energa para excitarlo ya que se estabiliza este, teniendo as un efecto
hipsocrmico producido por un solvente polar.

E
1



E
0
E
0


b) pH.
Es de gran importancia en sustancias ionizables que se encuentran en
solucin acuosa, ya que la conjugacin de la molcula puede presentar
grandes diferencias segn el pH de trabajo, con lo cual se observan
variaciones tanto de la de mxima absorcin como de el valor de la
intensidad de la absorcin.

Ejemplo: Fenobarbital

















N
N
O
O
H
C
2
H
5
C
6
H
5
O
H
N
N
O
O
C
2
H
5
C
6
H
5
OH
H
OH
OH
N
N
O
C
2
H
5
C
6
H
5
OH
OH
HCl 0,1 M (1) Tampn pH 9,2 (2) Tampn pH 13 (3)

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9
3
2
1
Cis-estilbeno
307 nm 32,100
294 nm 33,200
276 nm 10,900
223 nm 20,600
Trans-estilbeno
La Absorcin de estas tres especies ser diferente:


A













Otras molculas que se ven muy afectadas por cambios de pH son las aminas
aromticas que en medio cido por la formacin de la sal pierden resonancia, con
lo cual se origina un efecto hipocrmico e hipsocrmico.

2. Geometra de la molcula.
Los ismeros cis y trans presentan diferencias pequeas tanto en la como en la
intensidad de la absorcin de la radiacin UV-visible.
El ismero trans presenta un efecto tanto hipercrmico como batocrmico
respecto al cis, esto se debe a que en el ismero cis el grado de conjugacin de
los electrones es algo menor que en el ismero trans, por lo tanto para producir
la transicin se necesitara de mayor energa.














3. Sustituyentes.
a) Cromforos no conjugados
Dos o ms cromforos iguales: , se mantiene .
Dos o ms cromforos diferentes : o aperece otra banda.



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10
b) Cromforos conjugados.
Por lo general origina un aumento del y de de mxima absorcin de la
molcula

1-Hexeno CH
3
-CH
2
-CH
2
-CH
2
-CH=CH
2
180 nm 10.000
1,5-Hexadieno CH
2
=CH
2
-CH
2
-CH
2
-CH=CH
2
180 nm 20.000
1,3-hexadieno CH
3
-CH
2
-CH=CH-CH=CH
2
227 nm 25.000



ABSORCIN DE LOS GRUPOS FUNCIONALES.

1. Alcanos.
Los compuestos saturados requieren de radiaciones altamente energticas para
producir sus transiciones que son del tipo *.


Metano 125 nm -

2. Alquenos y Alquinos.
Los electrones de estos compuestos experimentan transiciones electrnicas del
tipo *. Esta transicin se asocia a un alto (algo mayor en el alqueno que
en el alquino) y la banda de absorcin se ubica levemente bajo los 200 nm.


1-Penteno CH
3
-CH
2
-CH
2
-CH=CH
2
184 nm ~10.000
1,3-Butadieno CH
2
=CH-CH=CH
2
217 nm 21.000

3. Benceno y derivados.
Los espectros ultravioleta de los hidrocarburos aromticos se caracterizan por
poseer tres bandas de absorcin generadas a partir de las transiciones *.


184 nm ~60.000
(banda 1) 204 nm 7.900
(banda 2) 256 nm 200


La sustitucin del anillo aromtico afecta fuertemente la absorcin del compuesto,
lo que se ve claramente marcado en las bandas de mayor del benceno (banda
1 y 2), que en general presentan tanto efecto batocrmico como hipercrmico.
Los compuestos aromticos por lo general absorben en el rea comprendida entre
230 y 270 nm con un mediano.



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11
NH
2
COOH
NH
2
NH
2
NO
2
a) Efecto de la monosustitucin
Grupos dadores de electrones.

-CH
3
-NH
2

-OCH
3
-NHR
-OH -NR
2




230 nm 8.600
280 nm 1.430

Grupos atractores de electrones.

-COOH -X
-CHO -CN
-NO
2
-C=O


230 nm 11.600
273 nm 970




En general la monosustitucin ya sea con dadores o atractores de electrones
origina siempre un efecto batocrmico e hipercrmico, que vara en intensidad
exclusivamente segn el tipo de sustituyente. Estos efectos se deben a que el
sustituyente auxocrmo tiene al menos un par de electrones capaces de
interaccionar con los electrones del anillo, de esta interaccin resulta una
aparente estabilizacin del estado excitado *.

b) Efecto de la disustitucin.
Un dador ms un aceptor de electrones.
max max
(Banda 2) 280 nm 1.430






(Banda 2) 358 nm 1.450




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12
NH
2
NO
2
OH

Cuando se tiene mayor simetra de los sustituyentes (el segundo
sustituyente en posicin para respecto al primero).

max max
(Banda 2) 381 nm 13.500






4. Alcoholes.
Por presentar transiciones solo de los tipos * y n * no presentan
absorcin al ultravioleta til, por esto son ampliamente utilizados como disolventes
de otros compuestos orgnicos para el anlisis al ultravioleta-visible.

max max
-OH n * 180 - 185 nm 200



Metanol CH
3
-CH
2
OH 174 nm -
1-Propanol CH
3
-CH
2
-CH
2
OH 183 nm -

5. Fenoles.
Absorben al ultravioleta til, ya que el anillo aromtico es un cromforo que lleva
asociado un grupo auxocrmo (OH).


211 nm 6.200
270 nm 1.450


6. Carbonilo.
De acuerdo a los electrones presentes posee las siguientes transiciones
electrnicas.

n * 150 - 160 nm -
* 180 - 195 nm ALTO
n * 270 - 295 nm BAJO

La banda correspondiente a la transicin de n * que se ubica en el
ultravioleta til solo sirve para fines cualitativos debido a su bajo (~15), esta
banda caracterstica del carbonilo se encuentra entre 270 y 300 nm.

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13
C
H
O
CH
CH CH
2
...
NH
2
Con fines cuantitativos lo ideal es llegar a tener el grupo carbonilo conjugado a un
grupo cromforo, para lograr desplazar la banda correspondiente a la transicin
* sobre los 200 nm. Esta asociacin es caracterstica de muchos
compuestos orgnicos de origen biolgico que presentan una insaturacin , .




, .


Algunos compuestos que presentan este grupo caracterstico son las hormonas
esteroidales y los corticoides.
7. Derivados del Carbonilo.
(n *)
Acidos carboxlicos -COOH 195 - 210 nm 20 - 100
Amidas -CONH
2
~ 175 nm 7.000
Haluros de cido -COX ~ 260 nm 15
Esteres -COOR 195 - 210 nm 20 - 100

Los derivados del carbonilo presentan un efecto electronegativo atractor de
electrones, esto origina una modificacin del enlace C=O y especficamente una
alteracin en los electrones n sin compartir del oxigeno, lo que produce un
desplazamiento de la banda de la transicin n * hacia longitudes de onda
menores, efecto hipsocrmico. As los derivados del carbonilo presentan una
banda caracterstica entre 200 y 230 nm con un bajo.

8. Aminas.
Las aminas alifticas I, II o III no absorben al UV til, presentan una banda
caracterstica bajo los 200 nm.
max max
RNH
2
, R
2
NH, R
3
N 185 - 200 nm 2.500 - 4.500

En las aminas aromticas, el fenmeno es similar a los fenoles, en que el grupo
amino es un auxocrmo sobre el anillo aromtico que es un cromforo.

230 nm 8.600
280 nm 1.430






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14
RESUMEN
1. No absorben al ultravioleta til.
Hidrocarburos saturados y sus derivados con grupos auxocrmos.
Alcoholes.
Aminas.
derivados halogenados.
Heterociclos saturados.

2. Absorben al ultravioleta til con bajo.
Compuestos con un grupo cromforo.
Cetonas.
Aldehdos.
Derivados de los anteriores.

3. Absorben al ultravioleta til con mediano a alto.
Sistemas conjugados.
Compuestos con dobles
enlaces conjugados.
Anillos aromticos.
Cromforos conjugados.
Heterociclos no saturados.

UTILIDAD DE LA ESPECTROSCOPA UV-VISIBLE EN EL ANLISIS DE
MEDICAMENTOS.
1. Anlisis cualitativo:
a) Comparacin de los espectros entre la muestra y el estndar.
b) Clculos:
Coeficiente de absorbilidad.

A
a =
b
*
c (c = g/L).

Coeficiente de extincin molar.

A
=
b
*
c (c = moles/L).

Calculo de A
1
1
.

A
1%
1cm
= 10a (c = g%).

2. Anlisis cuantitativo.
Se calcula por la proporcionalidad existente entre la concentracin de una solucin
y su absorbancia cuando se cumple la ley de Lambert-Beer.
A = a x b x c



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15
a) Espectrofotometra directa.
Se realiza sin originar cambios en la muestra en estudio, para esto su
absorcin en el ultravioleta-visible debe ser con un mediano a alto.
b) Espectrofotometra indirecta.
En este caso el compuesto en estudio se somete a una reaccin qumica
para originar un compuesto de mayor o que sea capaz de absorber al
ultravioleta til.
c) Como detector en cromatografa de lquidos

3. Otras aplicaciones.
Determinacin de mezclas de compuestos que absorban al UV los
espectros deben ser diferentes.







BIBLIOGRAFA.

1.- A Textbook of Pharmaceutical Analysis.
Kenneth Connors
2 edicin, 1967, pg: 171-226.

2.- A Textbook of Pharmaceutical Analysis.
Kenneth Connors
3 edicin, 1982, pg: 173-234.

3.- Anlisis Instrumental.
Douglas Skoog; James Leary
4 edicin, 1994, pg: 173-200.

4.- Modern Methods of Pharmaceutical Analysis.
Roger E. Schirmer
Vol. 1, 1982, pg: 31-125.

5.- Handbook of Pharmaceutical Analysis
Lena Ohannesian; Anthony J. Streeter.
2002, pg: 187-224.

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16
ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO


La energa interna de la molcula es la suma de las energas electrnica,
vibracional y rotacional.

E
t
= E
e
+ E
v
+ E
r


Dentro del espectro de radiaciones electromagnticas (REM) podemos observar
que existen varias radiaciones de distintos intervalos de longitudes de onda que
se pueden aplicar al anlisis.
E electrnica: corresponde a la energa de los electrones en la molcula.
Absorben la REM en el visible y UV cercano.
E vibracional: se debe a vibraciones interatmicas de la molcula. Pueden ser
vibraciones de tensin y o de flexin. Absorben la REM del IR cercano y medio
o fundamental.
E rotacional: es la energa asociada a la rotacin de la molcula alrededor de
su centro rotacional. Absorbe la radiacin del IR lejano y microondas.

E elect > E vibr > E rot

La espectroscopa de infrarrojo (IR) es una herramienta indispensable para
conocer la estructura de una sustancia orgnica. La mayor parte de la aplicacin
analtica se realiza en el IR medio o fundamental. Se usa tanto en el anlisis
cualitativo como en el cuantitativo. Para el anlisis de medicamentos, su
importancia radica en la identificacin.

Los espectros IR generalmente se grafican en un registro de absorbancia frente a
longitud de onda en micrones o frecuencia ( Hz) nmero de ondas (cm
-1
).

Para absorber radiacin infrarroja, una molcula debe experimentar un cambio
neto en el momento dipolar como consecuencia de su movimiento de vibracin o
de rotacin. Este momento dipolar depende de la distribucin de carga alrededor
de la molcula que a su vez depende de la densidad electrnica de cada tomo y
est determinado por:
Magnitud de la diferencia de carga.
Distancia entre las cargas.

Las molculas permanentemente vibran, produciendo una fluctuacin regular del
momento dipolar que oscila a una frecuencia determinada.
Al hacer llegar una radiacin de igual frecuencia que la vibracin natural de la
molcula se produce un cambio en la amplitud de la vibracin molecular
originando una absorcin.
A mayor diferencia de electronegatividad en los tomos > momento dipolar >
intensidad de absorcin. Las especies homonucleares como el O
2
, N
2
, o Cl
2
no
poseen momento dipolar y por lo tanto no absorben al IR.

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17
TIPOS DE VIBRACIONES MOLECULARES

1. Vibracin de tensin.
Cambio continuo en la distancia interatmica a lo largo del eje de enlace entre los
tomos. Existen dos tipos de vibracin de tensin.

Simtrica Asimtrica.





2. Vibracin de flexin.
Cambio en el ngulo entre dos enlaces. Existen cuatro tipos:

Balanceo (rocking)() Tijereteo (scissoring) (s)



En el plano.


Aleteo (wagging) () Torsin (twisting).


Fuera del plano.




NUMERO DE BANDAS DE ABSORCIN.

En una molcula que tiene ms de dos tomos pueden tener lugar todos los
tipos de vibraciones.
Pueden producirse interacciones como acoplamiento de las vibraciones.
Tericamente se puede calcular el nmero de vibraciones que van a tener
lugar en una molcula conociendo el nmero de tomos:

N vibraciones = 3x N-6 molcula no lineal. N = n de tomos
N vibraciones = 2x N-6 molcula lineal.

En la prctica el nmero de bandas es diferente que las calculadas.
1. Disminucin del nmero de bandas.
a) Bandas fundamentales muy dbiles (bajo momento dipolar), y por lo tanto,
la intensidad de absorcin es muy baja por lo que es difcil de detectar.
+ +
-
+
-

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18
b) Molculas muy simtricas. La vibracin no produce cambios en el momento
dipolar.
c) Las energas de 2 vibraciones son idnticas o muy parecidas, se llama
banda degenerada.

2. Aumento en el nmero de bandas.
Tericamente, en el espectro aparecer un solo pico de absorcin por cada
vibracin. Por lo tanto, una transicin entre niveles vibracionales origina una banda
fundamental. Sin embargo, se pueden encontrar ms picos que los esperados
debido a:
a) Bandas armnicas o sobretonos: Se producen por una transicin de mayor
energa entre niveles vibracionales vecinos. Se observa a valores de
frecuencia que son mltiplos de las bandas fundamentales.

ej: C = O 1700 cm
-1
fuerte
3400 cm
-1
dbil banda armnica.

b) Bandas de combinacin: se producen cuando se excitan simultneamente 2
modos de vibracin. La frecuencia a la que aparecen es aproximadamente
la suma o diferencia de las bandas fundamentales. Ocurre en molculas
complejas y raramente aparecen.


FRECUENCIA DE LA VIBRACIN.

Se puede calcular la frecuencia a la cual se va a producir la vibracin con el
modelo mecnico de dos masas unidas por un resorte oscilador armnico.
La frecuencia a la cual se produce la vibracin va a depender de las masas de los
tomos y de la constante de fuerza del enlace (rigidez del resorte).

K


m1 m2

= x k /


Si se puede predecir el nmero de vibraciones o bandas que se producen y la
frecuencia a la cual aparecen, tambin se puede realizar el anlisis inverso:
teniendo el espectro de una molcula desconocida se puede predecir su
estructura. Esta es la base del anlisis cualitativo en el infrarrojo.




K= rigidez del resorte.
m= masa.
= m
1
m
2
m
1
+ m
2



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19
PREPARACIN DE LAS MUESTRAS.

1. Gases.
Se usan celdas grandes.

2. Lquidos.
Lquidos puros: se coloca una fina capa de lquido entre dos ventanas de KBr
o KCl.
Soluciones: en lquidos transparentes al IR. Se deben elegir solventes que no
interaccionen con el soluto los menos polares, CS
2
, CCl
4
, ciclohexano,
CHCl
3
.

3. Slidos.
En solucin: sirve para anlisis cuantitativo. Concentracin conocida y espesor
de la celda para lquidos conocido.
En suspensin: se usa aceite de nujol (aceite mineral).
En comprimido: con KBr KCl se usa mucho para el anlisis cualitativo,
permite observar pequeas diferencias estructurales.
Directamente, por reflexin.


UTILIDAD DEL ANLISIS INFRARROJO.

1. Uso Cualitativo.
Identificacin de compuestos.
Diagnosis estructural interpretacin de espectros.
No existen dos compuestos con el mismo espectro IR a no ser que sean ismeros.
Se realiza el espectro IR de la muestra y se compara con estndar paralelo o con
espectros de literatura.
Algunos autores establecen la comparacin de las seis bandas ms importantes
que deben coincidir en frecuencia nmero de onda e intensidad relativa.
Tambin es posible digitalizar un espectro, introducirlo en un disco y compararlo
con espectros de banco de datos. Tambin existen tablas de correlacin.

2. Uso cuantitativo.
Se debe cumplir la ley de Beer.
Muy til en cuantitativa de mezclas en que no es necesario separar, se elige la
banda ms adecuada para cada componente. Pero existen desventajas
principalmente por la baja sensibilidad.








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20

DIAGNOSIS ESTRUCTURAL.

Una de las principales aplicaciones de la espectroscopa de infrarrojo es la
diagnosis estructural, es decir la determinacin cualitativa de las principales
caractersticas estructurales.

Las frecuencias caractersticas de los diversos grupos funcionales se encuentran
tabulados en tablas de correlacin.

Estas correlaciones son valores medios y por eso se entregan intervalos de
frecuencia. Las bandas se clasifican segn su intensidad de absorcin en fuertes,
medianas o dbiles.

Se utilizar el IR MEDIO para registrar el espectro de absorcin del analito, donde
se pueden distinguir 3 regiones:

1. Regin A o Regin de Frecuencias de Grupo: (desde 4000 a 1400 cm-1).
La frecuencia a la cual ocurre una vibracin de un grupo funcional se puede
calcular a partir de las masas de los tomos y de la constante de fuerza del enlace
entre ellos. Pero los efectos son pequeos por lo que se puede asignar un
intervalo de frecuencias dentro de los cuales se puede encontrar el pico de
absorcin del grupo.

2. Regin B o regin de la huella digital (desde 1400 a 900 cm
-1
).
En esta regin del espectro, una pequea diferencia en la estructura y la
constitucin de una molcula origina cambios importantes en la distribucin de los
picos de absorcin.
Cuando dos espectros son indnticos en esta regin constituye una evidencia de
la identidad de los compuestos.
Es ms difcil de interpretar ya que es una zona de muchos picos, pero esa misma
complejidad es la que conduce a su utilidad para la identificacin.

3. Regin C (bajo los 900 cm
-1
).
Slo algunas bandas son interpretables.

Informacin adicional al espectro.
Composicin elemental C, H, N, O.
Frmula global C
2
H
4
O
2
(proporcin
entre los elementos).
Reacciones qumicas.
Peso molecular.
Otros datos.







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21


ESPECTROSCOPIA INFRARROJA DE ALCANOS.

Las vibraciones de alcanos y grupos alquilo consisten en movimientos de tensin y de
flexin de las uniones C-C y C-H.
La flexin C-C se produce a muy baja frecuencia, bajo los 500 cm-1.
La tensin C-C produce bandas entre 800 y 1.200 cm-1 pero son dbiles y difciles
de interpretar.
La flexin C-H y tensin C-H produce bandas ms intensas:

A los 720 cm-1 se producen bandas del movimiento de rocking de los grupos metileno
-CH2- que pueden ser fuertes o dbiles.

Entre los 1365 y 1395 cm-1 se producen bandas debidas al grupo metilo.
El grupo metilo R-CH
3
, presenta una banda fuerte a 1380- 1370 cm
-1
.
El grupo isopropilo RCH(CH
3
)
2
produce un doblete de igual intensidad debido a la
flexin tipo tijereteo
El grupo terbutilo RC-(CH
3
)
3
produce un doblete tambin cerca de 1370 cm
-1
pero
las bandas no son de igual intensidad.

El grupo metilo y el metileno contribuyen ambos a una banda entre 1460 y 1470 cm
-1
,
es decir, se observa como una sola banda.

Las bandas correspondientes a la tensin C-H aparecen entre 2840 y 3000 cm
-1
para
los hidrocarburos saturados; y para los insaturados entre 3000 y 3140 cm
-1
.

1. Espectro del n-hexano.
2899 tensin C-H simtrica y asimtrica de hidrocarburos alifticos.
1471 flexin CH2 tijereteo.
1381 flexin C-CH3.
725 flexin (CH2)4- d.

2. Espectro del 2-metilpentano .
Es un ismero ramificado del n-hexano. La ramificacin no afecta a las vibraciones de
tensin C-H ni a las de tijereteo del -CH2-.
Sin embargo, la vibracin de flexin C-CH3 produce un doblete fuerte a 1377 y 1361.
Este doblete y una banda a 1166 son caractersticas del grupo isopropilo.

3. Espectro del ciclohexano.
Comparndolo con el hidrocarburo normal, se observa que la tensin C-H no cambia
y que la flexin de tijereteo -CH2- se desplaza a longitudes de onda mayores, 1451 en
vez de 1471.
Cuando el anillo es rgido, las vibraciones aparecen a frecuencias mayores. No est el
grupo metilo (dato importante de observar en cualquier espectro).


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22



4. Espectro del 1-hexeno.
En comparacin con el n-hexano, aparecen 2 tipos de vibraciones de tensin CH.
3067 tensin C-H caracterstica del grupo vinilo -CH-CH2.
(3030 - 3012 alqueno no terminal).
1637 tensin C=C.
992 y 903 flexin C-H grupo alqueno.
Las otras bandas son las tpicas de los alifticos.
2900 C-H
1380 C-CH3
1471 -CH2-

5. Espectro del benceno.
3030 tensin C-H aromtico.
1613 a 1471 tensin -C=C- del esqueleto del anillo.
bajo 770 flexin C-H fuera del plano banda ancha.

6. Espectro del n-hexanol.
Se observan bandas nuevas. Cuando se reemplaza un tomo de H en un
hidrocarburo aliftico por un grupo O-H, se incluyen absorciones nuevas debido a las
vibraciones de las uniones O-H y C-O.
El espectro del n-hexanol muestra una banda de tensin intensa a 3356. Se trata de
una banda ancha, Esto se debe a la unin puente H entre las molculas del alcohol.
La banda de absorcin a 1062 es caracterstica de la tensin C-O para alcoholes
primarios.
Las vibraciones de tensin y flexin C-H son idnticas a aquellas del alcano no
sustitudo.

7. Espectro del fenol.
3333 tensin O-H banda muy ancha
3030 tensin C-H aromtico, se observa como un hombro.
1595
1497 tensin C=C aromtico.
1468
1359 flexin O-H.
1218 tensin C-OH intensa y ancha.
750 monosustitucin del anillo bencnico.
685

8. Espectro de la n-hexilamina.
Cuando un H terminal de una cadena se reemplaza con un grupo amino, aparecen en
el espectro tensin C-N y N-H y flexin N-H.
3333 y 3247 tensin N-H doblete.
1230 tensin C-N muy dbil, no se observa.

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23
1592 flexin N-H banda ancha e intensa (robusta).
909 - 714 flexin N-H banda muy ancha.


9. Espectro de n-butilmetilter .
Se distingue una absorcin intensa de la tensin C-O-C alrededor de 1126.

10. Espectro del n-hexanal.
2924 a 2841 tensin C-H alcano.
2710 tensin C-H aldehdo, con la presencia de esta banda
se decide si es aldehdo o cetona.
1727 tensin C=O carbonilo, no diferencia si CO o CHO.
1464 flexin CH2.
1393 flexin CH3.

11. Espectro de la acetofenona.
1692 tensin C=O en sistemas conjugados, esta banda se
desplaza hacia estos valores menores.

12. Espectro del n-butilacetato y del etilbenzoato.
1739 tensin C=O steres alifticos.
1724 tensin C=O steres aromticos.
1242 tensin C-O propia de los acetatos, en formiatos,
propionatos y butiratos, aparece a 1189.
1277 y 1109 tensin C-O para aromticos y , no saturados.

13. Espectro del cido n-hexanoico.
3330 a 2500 tensin O-H de carboxilo, es una banda ancha.
2915 tensin C-H aliftico.
1698 tensin C=O carbonilo.
1460 flexin -CH2- tijereteo.
1408 flexin O-H.
1330 a 1190 tensin C-OH banda ancha.

14. Espectro del cido benzoico.
3230 a 2500 tensin O-H banda ancha.
3012 tensin C-H aromtico, superpuesta.
1678 tensin C=O conjugado, banda intensa.
1605
1587 bandas de aromaticidad.
1456
1425 flexin O-H banda intensa.
1325 y 1285 tensin C-O.
706 aromtico monosustitudo.



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24

BIBLIOGRAFA.

1.- Modern Methods of Pharmaceutical Analysis
Roger Schirmer.
Vol 1, 1982, pg: 127-187.

2.- Anlisis Instrumental.
Douglas Skoog; James Leary
4 edicin, 1994, pg: 296-347.

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25
ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA

Su base se encuentra en que una molcula orgnica al absorber un fotn de energa
adecuada pasa a un estado electrnicamente excitado.

M + h > M*

La molcula en estado excitado M* es inestable y puede volver a su estado
fundamental de dos formas:
Procesos no radiantes
Procesos radiantes

Fluorescencia y fosforescencia son procesos radiantes que se originan por la
absorcin de energa (E) de parte de una molcula, esta energa permite el paso de
un estado singlete fundamental a uno de singlete excitado o triplete excitado.

Segn la teora del espn electrnico:








E

singlete fundamental singlete excitado triplete excitado





FLUORESCENCIA.
Es la emisin instantnea de luz correspondiente a transiciones entre el estado
singlete excitado al estado de singlete fundamental.
Su vida media es muy corta, del orden de 10
-8
segundos, y una vez terminada la
excitacin de la molcula el fenmeno finaliza.


FOSFORESCENCIA.
Esta es la emisin retardada de luz por transiciones desde el estado triplete excitado
a singlete fundamental.
Su vida media es mucho mayor que la fluorescencia (>10
-4
), adems persiste por
algn tiempo an sin haber excitacin.
(electrones apareados)
(un electrn excitado
pero sigue apareado)

Fluorescencia
(el electrn excitado
ha cambiado su espn)

Fosforescencia

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26
A

Las molculas emiten desde el nivel fundamental del estado excitado respectivo,
luego esta emisin llevar asociada una energa determinada, la que se relacionar
con una longitud de onda caracterstica.


Absorcin o Excitacin Emisin
(Fluorescencia, Fosforescencia)

> energa; < < energa; >













excitacin emisin


Fluorescencia depende de la cantidad de fotones absorbidos por la molcula
irradiada, lo que se mide por la eficiencia cuntica (
F
).

N fotones emitidos

F
= (vara entre 0 y 1)
N fotones absorbidos


Para medir fluorescencia de un compuesto, usamos el porcentaje de fluorescencia
(%F), que para soluciones diluidas es:

F =
F
(I
0
- I
T
) I
0
= Intensidad del haz incidente
I
T
= Intensidad del haz transmitido






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27
Si I
0
y I
T
siguen la ley de Beer:

I
T

= 10
-bc
I
o


F=
F
2,303 b c I
0
= absorbilidad molar del
compuesto fluorescente

Si
F
; 2,303; y b son constantes F = k c I
0



FACTORES QUE AFECTAN LA FLUORESCENCIA
1. Temperatura.
Bajas temperaturas mayor intensidad de fluorescencia, debido a menor
prdida de energa por colisiones de las molculas en solucin y otros
fenmenos no radiantes.
2. Viscosidad.
En medios viscosos disminuyen los movimientos moleculares aumentando as la
fluorescencia.
3. Solventes.
Poco afectada por polaridad del solvente, excepto cuando se presentan uniones
puente hidrgeno en el estado excitado de la molcula disminucin de la
fluorescencia del compuesto.
4. pH.
Compuestos cido dbil o base dbil diferencia de pK de sustancia entre
estado fundamental y estado excitado puede variar 4 5 unidades la
extensin de la protonacin afecta la fluorescencia que presente el compuesto.
5. Fotodescomposicin.
Cambios fisicoqumicos en estructura por gran energa excitacin.
6. Presencia de solutos.
a) Filtro interno: molculas que absorben radiacin disminucin de luz
incidente (I
0
) o de %F.
b) Quenching: inhibicin de fluorescencia por formacin de complejos
Quenching esttico (E fundamental)
Quenching dinmico (E excitado)

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28
7. Concentracin de la solucin.
Soluciones muy concentradas excitacin incompleta emisin no
homognea.


%F
C1 C2



ESTRUCTURA QUMICA Y FLUORESCENCIA.

Fluorescencia compuestos con transiciones electrnicas > *
molculas altamente conjugadas.
Caractersticas.
a. Sustituyentes capaces de absorber sobre los 200 nm.
b. Coeficiente de absorcin mediano a alto.
c. Rigidez en estructura: evita prdida de energa por fenmenos no radiantes.

Sustituyentes.
a. Activantes
- R - NH
2

- OR - NHR
- OH - NR
2

Aumentan longitud de onda de excitacin y de fluorescencia.
Pueden aumentar o mantener la eficiencia cuntica.

b. Desactivantes
- COOH - X - NR
3
+

- NO
2
- R-C=O - NHCOR
- N=N- - R-CHO
Aumentan longitud de onda de excitacin y de fluorescencia.
Disminuyen eficiencia cuntica.


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29
Tabla ejemplos de ncleo aromtico sustituido.

Compuesto exc (nm) emi (nm)
F
Benceno 248 270 0.040
Fluorobenceno 257 289 0.007
p-fluorofenol 276 315 0.030

Fluorgenos.
Molculas que presentan fluorescencia
1.- Fluorgenos directos: presentan fluorescencia directa en el estado en que se
encuentran (Quinina, Vitamina A).
2.- Fluorgenos inducidos: molculas no fluorescentes reacciones especficas
transformados en compuestos fluorescentes.
Reactivos empleados para originar compuestos fluorescentes.
a) Fluorescamina: aminas primarias, secundarias y aminocidos.
b) Cloruro de dansilo: aminas y aminocidos, origina dansil derivados.

USOS DE LA ESPECTROFLUORIMETRA.
HPLC y HPTLC con detector de fluorescencia.
Espectroscopa de Fluorescencia

1. Anlisis cualitativo.
Identificar o reconocer fluorgenos.
Detectar compuestos en forma directa o inducidos, en anlisis por CCF o
Cromatografa en Papel.
2. Anlisis cuantitativo.
Anlisis de productos farmacuticos.
Cuantificacin de frmacos y sus metabolitos en lquidos biolgicos:
-

FLUORESCENCIA CON RESPECTO A ESPECTROSCOPIA UV-VISIBLE.
Ventajas.
Mayor sensibilidad.
Mayor especificidad por el uso de dos longitudes de onda.

Desventajas
Gran nmero de variables a controlar: pH, temperatura, solvente, etc.






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30
BIBLIOGRAFA.

1.- A Textbook of Pharmaceutical Analysis.
Kenneth Connors
2 edicin, 1967, pg: 227-238.

2.- A Textbook of Pharmaceutical Analysis.
Kenneth Connors
3 edicin, 1982, pg: 235-247.

3.- Anlisis Instrumental.
Douglas Skoog; James Leary
4 edicin, 1994, pg: 201-226.

4.- Modern Methods of Pharmaceutical Analysis.
Roger E. Schirmer
Vol. 1, 1982, pg: 189-248.



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31
ESPECTROMETRIA DE MASA


Es un mtodo espectroscpico en el que se generan espectros caractersticos y
nicos para las molculas de los distintos compuestos orgnicos.

Cuando a una molcula se la hace interaccionar con una fuente de alta energa se
provoca la ionizacin de ella al salir un electrn del orbital molecular, generando un
ion molecular; si este ion queda con exceso de energa que no es capaz de
estabilizar, se fragmentar expulsando un fragmento neutro y formando un ion
fragmento de menor masa. Este a su vez, si contina poseyendo un exceso de
energa que no pueda estabilizar, continuar fragmentndose produciendo iones de
masa cada vez menor.

Definicin
Mtodo analtico que permite obtener informacin de analitos orgnicos e
inorgnicos de muestras complejas: composicin cuali y cuantitativa, estructuras
moleculares complejas y relaciones isotpicas de los tomos.
Consiste en la fragmentacin de una molcula en iones gaseosos (generalmente
cargados positivos) que se mueven rpidamente y que se separan en funcin de
su relacin masa /carga (m/z).
Se obtiene un ion molecular que est formado por grandes fragmentos cuyas
estructuras (deducidas a partir de los valores m/z) pueden relacionarse con la
molcula intacta.
Los pesos atmicos y moleculares se expresan generalmente en trminos de
Unidad de Masa Atmica (uma). En espectrometra de masas, el enfoque est en
la masa exacta m de los istopos de un elemento o la masa exacta de los
compuestos que contienen un grupo particular de istopos.
Relacin masa/carga: relacin entre la masa atmica o molecular de un ion (m) y
el nmero de cargas (z) que posee el ion.
Espectro de masas: registro o grfico de abundancia relativa de un ion
fragmento en funcin de su relacin masa/carga.
Ej. Espectro de masas para Cloroformo (CH
3
Cl)
CH
3
Cl

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32
Espectrmetro de Masa


























El sistema de entrada introduce una pequea cantidad de muestra en el espectrmetro,
siendo esta convertida en iones gaseosos. Posteriormente, estos iones son acelerados
en el analizador de masas que va seleccionando los iones segn la relacin
masa/carga. Los iones llegan a un detector que los convierte en una seal elctrica que
puede ser procesada. Todo esto es mantenido en un sistema de alto vaco adecuado
para mantener bajas presiones.


ETAPAS

1. Formacin o Generacin de Iones.
2. Separacin de Iones.
3. Deteccin de Iones.


FORMACIN O GENERACIN DE IONES (IONIZACIN)

Formacin del Ion Molecular

ABC + e
-
ABC
+
+ 2 e
-

ion molecular



Introduccin
de muestra
Fuente de
Ionizacin
Analizador
de Masa

Detector
Sistema
de vaco
Procesador
de seal

Registrador
Presin = 10
-5
a 10
-8
Torr

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33

Fragmentacin del ion molecular:

ABC
+
AB

+ C
+
prdida de un radical
A
+
+ BC


AB
+
+ C prdida molcula neutra
AC
+
+ B

reordenamiento

TCNICAS DE IONIZACIN
EI Electron Impact o Impacto Electrnico
CI Chemical Ionization o Ionizacin Qumica
FI Field Ionization o Ionizacin de Campo
FD Field Desorption o Desorcin de Campo
FAB Fast Atom Bombardment
TIMS Thermal Ionization
LIMS Laser Ionization
MALDI Matrix Assisted Laser Desorption Ionization
ESI Electrospray Ionization
TSI Termospray Ionization
PD Plasma Desorption Ionization
SIMS Secondary Ionization
RIMS Resonance Ionization


(EI) IMPACTO ELECTRNICO

M + e
-
M.
+
+ 2e
-

radical catin
o ion molecular

Mtodo de ionizacin de mayor aplicacin.
Muestra gaseosa es impactada por un haz de electrones de alta energa.
Se formar el ion molecular que posteriormente (debido a la alta energa) se
fragmentar en iones ms pequeos y de abundancia relativa variable.
Impacto electrnico no siempre permite visualizar ion molecular en el espectro
de masa.









muestra gaseosa
+
+
+
-
-
-

= Filamento de Tungsteno
= Haz de electrones
= Electrodos de aceleracin
= Haz de iones

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34
quasi ion
molecular

(CI) CHEMICAL IONIZATION
Generalmente se aplica cuando al ionizar por impacto electrnico no se visualiza el
ion molecular.
Adems de la muestra se introduce otro gas que interacciona con los iones y se
producen nuevos iones. La cantidad de fragmentos inicos producidos es menor
que en el impacto electrnico debido a que la energa interna impartida sobre la
molcula es pequea (soft ionisation).
El gas ms empleado es el metano CH
4
, al ionizarlo (a 0.1 a 1.0 torr), se tendr:

CH
4
+ e
-
CH
4
+
+ 2 e
-
ionizacin del gas

m/z 16

Sin embargo, el metano est a presin alta, por lo que existir la posibilidad de que
el ion molecular (CH
4
+
) con otras molculas de metano:

CH
4
+ CH
4
+
CH
5
+
+ CH
3

reaccin ion-molcula

m/z 17

Al introducir una pequea cantidad de muestra (M) a la fase vapor, la especie CH
5
+

actuar como medio de ionizacin de la muestra:

CH
5
+
+ M CH
4
+ (MH)
+
reaccin ion-muestra



El cuasi ion molecular (MH)
+
tiene un valor de m/z 1 uma mayor que el ion
molecular, y una mucho ms baja energa interna, por lo que su fragmentacin es
escasa y su abundancia relativa en el espectro de masa es la mayor.



(FI) FIELD IONIZATION O IONIZACIN DE CAMPO
Se aplica a molculas muy polarizables.
La muestra es sometida a un campo elctrico intenso que arranca un electrn de
la molcula.
El campo elctrico intenso se logra con un alto voltaje entre un nodo y un ctodo,
lo que adems, produce la aceleracin de los iones formados.
El nodo se conoce como emisor.




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(FD) FIELD DESORPTION O DESORCIN DE CAMPO

Se aplica a compuestos no voltiles o trmicamente inestables.
Emplea un emisor (filamento) a alta temperatura con respecto al ctodo.
La muestra slida se coloca sobre la superficie del emisor y los iones son
directamente desorbidos desde el slido hacia el ctodo.
El emisor est recubierto por microagujas de carbono que aumentan la eficiencia
de ionizacin.


(FAB) FAST ATOM BOMBARDMENT
Generalmente se aplica a molculas grandes (biolgicas)
Un haz de alta energa de tomos neutros (Xe o Ar) impacta una muestra slida
produciendo la desorcin y la ionizacin



ANALIZADORES DE MASA
1. Sector Magntico o Enfoque Simple.
2. Doble Enfoque.
3. Filtro de Masas de Cuadrupolo.
4. Trampa de Iones.
5. Tiempo de Vuelo o Time of Flight.
6. Combinacin de analizadores (mejorar resolucin).


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SECTOR MAGNTICO O ENFOQUE SIMPLE


























Los iones que entran al analizador son deflectados por el campo magntico H.
Slo los iones que tienen igual fuerza centrfuga y centrpeta pasan a travs del
analizador.
El proceso se rige por:

m/z = H
2
r
2
por lo tanto, se puede variar H o V para seleccionar
2V segn m/z.


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FILTRO MASAS DE CUADRUPOLO
Posee 4 electrodos metlicos paralelos y conectados diagonalmente en pares.
Cada par de barras recibe una combinacin de voltajes de radiofrecuencia y de
corriente continua de amplitudes crecientes.
Barriendo los voltajes de RF y CC, los iones pasan por el filtro segn su orden de
m/z.



















DETECTORES
La mayora son de tipo electrnicos.
Bsicamente corresponden a fotomultiplicadores.
Algunos son:
- Channeltron.
- Tubo Multiplicador de Electrones.
- Arreglo de Fotodiodos.
- Copa de Faraday.
- Plato Microchannel.
- Daly.


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INYECTORES
Inyeccin en Fro
Inyeccin en Caliente
Inyeccin Directa
Tandem CG/MS (usar interfases)


ANLISIS CUALITATIVO
Confirmar identidad.
Determinar el peso molecular.
Identificacin (determinacin de la frmula molecular).
Relacin isotpica de los tomos.
Anlisis de espectros por grupo funcional.
TIC *, SIM **.
Detector en cromatografa (es la mayor utilidad).

* TIC = Total Ion Chromatogram (considera el total de los iones presentes).
** SIM = Selective Ion Monitoring (monitoreo de un solo ion).





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BIBLIOGRAFA.

1.- Anlisis Instrumental.
Douglas Skoog; James Leary
4 edicin, 1994, pg: 491-538.

2.- Interpretation of Mass Spectra.
Fred Mc Lafferty, Frantisek Turecek.
4 edicin, 1993.

3.- A Textbook of Pharmaceutical Analysis.
Kenneth Connors.
2 edicin, 1967, pg: 293-309.

4.- A Textbook of Pharmaceutical Analysis.
Kenneth Connors.
3 edicin, 1982, pg: 303-320.

4.- Mass Spectrometry.
Barker J.
2 ed, 1999, pg: 27-36.

5.- Handbook of Pharmaceutical Analysis
Lena Ohannesian; Anthony J. Streeter.
2002, pg: 151-170.