GUIA DE EJERCICIOS CINETICA ENZIMATICA 1- Una reaccin enzimtica se realiza usando una [S] = 10-5 M.

El Km para el sustrato es de 2x103 M. Despus de un minuto se ha transformado el 2% del sustrato en producto. A) Calcular el Kobs (constante cintica). B) Si la concentracin de [S] fuera 10-5 M. Que porcentaje de S se ha transformado en producto despus de un minuto? C) Si la concentracin de S fuera 10-6 M. Qu porcentaje de S se ha transformado en producto a los 3 minutos? D) Cul es la V mx. estimada a la concentracin de enzima utilizada cuando [S] = 10-5 M? E) Cul es la concentracin de S necesaria para alcanzar la V mx.? F) Que porcentaje de sustrato se convierte en producto a los 3 minutos considerando el resultado del punto E? 2- Una reaccin enzimtica se realiza utilizando una concentracin de S de 2x10-5M. A los 6 minutos, la mitad del sustrato se ha utilizado. El Km de la reaccin para este sustrato es de 5x10-3M. Calcular: A) La constante cintica de la reaccin B) V mx. C) [P] a los 15 minutos de reaccin 3- De acuerdo a los siguientes datos determine la Velocidad inicial (Vo), realizando los grficos [P] vs tiempo y trazando la pendiente de la cual obtiene la velocidad inicial a cada concentracin de sustrato y determine los parmetros cinticos V mx. y Km. [S]o Tiempo (min) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 mM [P] 0.095 0.185 0.26 0.33 0.395 0.45 0.505 0.555 0.595 0.63 2 mM [P] 0.18 0.34 0.49 0.62 0.74 0.85 0.95 1.04 1.12 1.2 5 mM [P] 0.37 0.71 1.01 1.29 1.56 1.8 2.02 2.22 2.4 2.5 10 mM [P] 0.56 1.08 1.57 2.04 2.47 2.87 3.23 3.59 3.92 4.22 20 mM [P] 0.76 1.5 2.2 2.88 3.5 4.12 4.66 5.24 5.74 6.24

4- En una reaccin enzimtica se obtienen los siguientes datos. De acuerdo a ellos calcule el Km y el V mx. de la reaccin.

Vo (moles/hora) 0.1230 0.1212 0.1192 0.1177 0.1160 0.1143 0.1127 0.1111 0.1096 0.1081

[S]M 5 2.5 1.667 1.250 1 0.833 0.715 0.625 0.555 0.5

5- Se cree que la diseminacin de la L-serina y la L-treonina por E. coli es catalizada por la misma enzima. Usando preparaciones purificadas de la enzima se obtuvieron las curvas de saturacin de la enzima con el sustrato de la manera siguiente. Se incubaron a 37C durante 10 minutos en un volumen final de 1 ml. la enzima, el sustrato, los cofactores (glutatin y AMP) y el tampn fosfato 7,8, determinndose la produccin de cetocido. Se obtuvieron los siguientes resultados. [S] mg/ml 0.05 0.15 0.25 0.5 1 5 L-serina Vo 0.14 0.37 0.40 0.58 0.71 0.89 L-serina Vo 0.29 0.45 1 1.25 1.55 1.6

A) A partir de estos datos determine Km can cada aminocido. B) Cual aminocido resulta ser mas especifico para la enzima C) Que sustrato se consumira ms rpido si se aadiera a la enzima una mezcla equimolar de ambos aminocidos. 6- Se detect actividad de una determinada enzima de extractos de hgado y de cerebro para delucidar si la actividad detectada era atribuible a la misma enzima presente en ambos rganos o a especies distintas propias de cada rgano, se llevaron a cabo estudios cinticos con idnticos sustratos. Uno de los sustratos ensayados, bajo idnticas condiciones en 1 ml de volumen total incluyendo 0.1 ml de extracto de cada rgano, result ser transformado a las siguientes velocidades iniciales: [S] umol/min Vo hgado umol/min Vo cerebro umol/min 1 2 5 10 0.14 0.23 0.39 0.5 0.085 0.14 0.23 0.3

Dense las caractersticas que pueden ser determinantes a partir de estos datos y mustrese cuales de ellas son de inters en relacin a la cuestin de la identidad de las dos enzimas. Fundamente su respuesta.