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Universidad Nacional

Facultad de Ciencias Exactas y


Naturales
Escuela de Qumica
Laboratorio de Bioqumica
Nombre: Lauren Campos Campos
Pro!: "na #alindo Bernab$u
%ema: Extracci&n del "'N del ()ado de
pollo
Fec*a: +,- .unio- /0+,
1 2emestre3 /0+,
Extraccin de ADN del hgado de pollo
Objetivo
Extraer ADN de clulas animales, observando su estructura fibrilar y el
grado de enrollamiento de la cadena.
Marco terico
El ADN se encuentra en el interior del ncleo celular, disperso y muy replegado,
unido a protenas para formar la cromatina. As, para extraerlo ser necesario
omogenei!ar el te"ido y romper las clulas para separar el ncleo, romper
tambin la envoltura nuclear para liberar su contenido, luego separar el ADN de
las protenas #ue lo protegen y, por ltimo, precipitarlo para extraerlo de la
soluci$n. %na ve! reali!ado esto, el ADN aparecer como un agregado de fibras
blan#uecinas #ue se adieren a la varilla de vidrio. &or ltimo, se puede situar
sobre un porta, te'irlo con un colorante bsico y observarlo al microscopio.
El ADN es un polmero de nucle$tido. %n polmero es un compuesto formado por
mucas unidades simples conectadas entre s. En el ADN, esta conectados por
varios nucle$tidos, y cada nucle$tido, a su ve!, est formado por un a!car (la
desoxirribosa), una base nitrogenada (#ue puede ser adenina A, timina, citosina o
guanina) y un grupo fosfato #ue acta como engance de cada vag$n (*cribd
+,--).
.o #ue distingue a cada nucle$tido de otro es su base nitrogenada, y por ello la
secuencia del ADN se especifica nombrando s$lo la secuencia de sus bases. En
los organismos vivos, el ADN se presenta como una doble cadena de nucle$tidos,
en la #ue las dos ebras estn unidas entre s por unas conexiones denominadas
puentes de idrogeno (/ortes +,--). Existen dos tipos de cidos nucleicos los
cuales son el cido desoxirribonucleico (ADN) y el cido ribonucleico (A0N).
El ADN contiene la informaci$n gentica de un organismo y controla el crecimiento
y divisi$n de las clulas y a su ve! el A0N encargado de transferir la informaci$n
vital durante la sntesis de protenas (1ruice +,,2)
Es posible extraer el ADN de las clulas por medio de las propiedades
fisico#umicas de dicos compuestos, las cuales son3
PROPIEDADES DEL ADN
4 5nsoluble en soluciones diluidas de Na/l,
4 *oluble en soluciones concentradas de Na/l.
4 5nsoluble en alcool.
4 &uede ser disociado de la protena por tratamiento con un detergente o un fenol
Materiale
6e"ido animal (7gado de pollo) &apel filtro.
Detergente l#uido. Alcool 89:
1atidora *oluci$n de Na/l.
Embudo ;ugo de papaya.
<aso de precipitado
Procedi!iento
-. 6riturar en fro la muestra de =,, g gado de pollo y a'adir unos >,, ml
de agua destilada o, en su defecto, agua mineral, agregar media
cucaradita de sal, esto tiene varios efectos. En primer lugar provoca un
co#ue osm$tico #ue es capa! de romper algunas membranas no
afectadas por el tratamiento anterior. Adems, las cargas positivas de
los iones Na
?
atraern luego las cargas negativas del ADN
mantenindolo en la disoluci$n.
+. /olocar en una batidora para omogenei!ar el te"ido. Este procedimiento
tambin rompe mucas clulas liberando su contenido. &arecer ser ms
efica! el empleo de una batidora, con la #ue se obtiene una me!cla ms
omognea y fcil de filtrar despus.
@. Ailtrar varias veces el resultado de la me!cla. Este filtrado es lento y difcil,
pero se retendr el s$lido.
>. A'adir aora >, ml de detergente l#uido y remover suavemente,
me!clando bien pero evitando #ue se forme espuma.
El detergente completa la rotura de las membranas plasmtica y nuclear
al disolver y separar los lpidos de las mismas. 6ambin interviene en la
separaci$n de las protenas #ue rodean al ADN. *i es posible volver a
filtrar, se obtendr una soluci$n ms limpia de restos.
5. Agregar @ cucaradas de "ugo de papaya, #ue contienen un en!ima, la
papana, #ue contribuye a eliminar las protenas #ue puedan contaminar el
ADN.
9. Aora se a'aden unos =, ml de alcool !"# $ro, teniendo cuidado de
acerlo ladeando el tubo o vaso de precipitados y de"ando resbalar muy
lentamente el alcool por la pared de a#uel para formar una capa sobre
la soluci$n anterior. Es muy importante evitar #ue se me!clen ambas
soluciones, pues ser en la interfase donde precipitar el ADN.

2. El ADN ir apareciendo poco a poco en la interfase aguaBalcool en
forma de grumos blancos. *e favorece la precipitaci$n y recolecci$n si
se va recogiendo mediante la varilla de vidrio, u otro instrumento similar,
introducindola ligeramente ba"o la interfase y acindola girar
suavemente mientras se extrae. As se irn pegando en la varilla unas
ebras blancas #ue corresponden a miles de fibras de ADN.
Re$erencia
;os A. /ortes +,--. Extracci$n casera de ADN CEn lneaD
Ettp3FFGGG."oseacortes.comFpracticasFextraccionADN.tmH C;unio +,--D.
.earn Ienetics +,--. /JKL EM60AE0 ADN DE /%A.N%5E0 /L*A <5<5EN6E
CEn lneaD Ettp3FFlearn.genetics.uta.eduFesFunitsFactivitiesFextractionFH C;unio
+,--D.
*cribd. +,--. Extracci$n de DNA CEn lneaD
Ettp3FFes.scribd.comFdocF+8O+-2O=FExtraccionBdeBDNAH C;unio +,--D.
4 1ruice, &. +,,2. Aundamentos de Numica Lrgnica. Kxico. Editorial
&EA0*LN. =+,B=+- pp.