Todas las posibles combinaciones, se define sinergismo cuando las combinaciones de los dos

antimicrobianos, cada uno a un cuatro de la CMI, o menos inhiben el crecimiento bacteriano. Este
resultado se expresa como índice de concentración inhibitoria fraccionaria (CIF). Hay sinergismo
cuando el índice es ≤ 0,5 y antagonismo si es ≥ 2. Con este método también se pueden determinar
interacciones bactericidas y la CMB, mediante el cultivo a partir de cada combinación de
concentraciones o de cada concentración de antibiótico solo, respectivamente.
Estudian el efecto bactericida a lo largo del tiempo para cada antibiótico solo o en combinación.
Consiste en la siembra repetida en el tiempo a partir de tubos que contienen antibióticos solos o
en combinación. Posteriormente, se realiza un recuento de las colonias de bacterias que
sobreviven con el tiempo y se representa gráficamente (1Fig. 4). Se define sinergismo cuando hay
un aumento de letalidad ≥ 100 ufc/ml a las 24 horas en la curva de la asociación frente a la del
antimicrobiano más activo en solitario; hay antagonismo cuando existe un aumento en el
crecimiento ≥ 100 ufc/ml a las 24 horas en la curva de la asociación frente a la del antimicrobiano
más activo en solitario, y se denomina indiferencia si entre la curva del antimicrobiano más activo
y la de la asociación no hay una diferencia de letalidad mayor de 10 veces a las 24 horas.

4.2.3. Método de difusión
Se basa en la misma técnica que el antibiograma de disco-plata: la colocación de discos o tiras de
papel absorbente con concentraciones conocidas de antibióticos. Se colocan los discos de los dos
antibióticos a estudiar a una distancia que debe ser igual o ligeramente superior a la del radio de la
zona de inhibición de los antimicrobianos cuando se examinan por separado. En el sinergismo se
ve una zona de inhibición que une los halos de los dos antimicrobianos, mientras que en el
antagonismo, esta zona de unión aparece con crecimiento, incluso en las zonas de inhibición de
los dos antimicrobianos. (Fig. 2).
4.2.4. Método Etest
Consiste en la utilización de tiras de Etest de cada antibiótico por separado y de los dos
antibióticos conjuntamente. Para realizar la prueba de la combinación de antibióticos se aplica la
tira del antibiótico. A sobre el agar y se deja actuar 1 hora. Posteriormente, se retira y se coloca la
tira del antibiótico B sobre la impronta de la primera tira. Se define sinergismo cuando la CMI de
los antibióticos en combinación es ≥ 2 diluciones inferior a la CMI de los antibióticos en
combinación es ≥ 2 diluciones superior a la CMI de los antimicrobianos por separado y adicion o
indiferencia cuando la CMI de la combinación se diferencia en ± 1 dilución con las de los
antibióticos por separado.
5. Conclusiones Prácticas
 El estudio de la sensibilidad de los microorganismos a los antimicrobianos se realiza,
principalmente, por técnicas de dilución o de difusión. La elección de un método u otro se
basa en la facilidad de realización, la flexibilidad y la utilización de sistema automáticos o
semiautomáticos.
 Las técnicas de dilución proporcionan resultados cuantitativos (CMI) y las de difusión,
cualitativos (sensible, intermedio, resistente). Ambos métodos son parecidos, ya que
existe una correlación directa entre el diámetro del halo de inhibición y la CMI.
 Las técnicas bioquímicas y genéticas permiten detectar el mecanismo o el gen de
resistencia (producción de β-lactamasas, detección de la PBP2a, detección del gen mecA)
en poco tiempo (minutos u horas).
 La utilización del antibiograma mediante Etest directamente sobre muestras clínicas
(hemocultivos, LCR, muestras del tracto respiratorio inferior) proporciona resultados
preliminares en menos de 24 horas.
 La lectura interpretada del antibiograma analiza los fenotipos de sensibilidad y permite
deducir posibles mecanismos de resistencia. Además, permite deducir la sensibilidad de
antibióticos no estudiados en el antibiograma.
 El estudio de interacciones entre antibióticos en el laboratorio puede ser de utilidad
cuando en clínica se pretende utilizar una combinación antimicrobiana para conseguir
sinergismo bactericida.