You are on page 1of 16

552 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80

ARTIGO DE REVISO
Recebido em 27/08/2010. Aprovado, aps reviso, em 23/09/2010. Declaramos a inexistncia de conitos de interesse.
Universidade Federal de So Paulo UNIFESP.
1. Doutorando em Reumatologia da Universidade Federal de So Paulo UNIFESP
2. Mestre em Reumatologia pela Universidade Federal de So Paulo UNIFESP
3. Mestrando em Reumatologia da Universidade Federal de So Paulo UNIFESP
4. Mdico Assistente da Disciplina de Reumatologia da Universidade Federal de So Paulo UNIFESP
5. Doutorando em Reumatologia da Universidade Federal de So Paulo UNIFESP e Professor-assistente de imunologia dos cursos de Medicina e Biomedicina
da Pontifcia Universidade Catlica de Gois PUC-Gois
6. Professor Adjunto da Disciplina de Reumatologia da Universidade Federal de So Paulo (UNIFESP).
Endereo para correspondncia: Neusa Pereira da Silva. Rua Botucatu, 740, 3 andar, CEP: 04023-900, So Paulo, Brasil.
Tel/fax: 55 (11) 5576-4239. Email: npsilva@unifesp.br.
Sistema Imunitrio Parte II
Fundamentos da resposta imunolgica
mediada por linfcitos T e B
Danilo Mesquita Jnior
1
, Jlio Antnio Pereira Arajo
2
, Tnia Tieko Takao Catelan
3
,
Alexandre Wagner Silva de Souza
4
, Wilson de Melo Cruvinel
1
,
Lus Eduardo Coelho Andrade
6
, Neusa Pereira da Silva
6
RESUMO
O sistema imunolgico constitudo por uma intrincada rede de rgos, clulas e molculas, e tem por fnalidade manter
a homeostase do organismo, combatendo as agresses em geral. A imunidade inata atua em conjunto com a imunidade
adaptativa e caracteriza-se pela rpida resposta agresso, independentemente de estmulo prvio, sendo a primeira linha
de defesa do organismo. Seus mecanismos compreendem barreiras fsicas, qumicas e biolgicas, componentes celulares
e molculas solveis. A primeira defesa do organismo frente a um dano tecidual envolve diversas etapas intimamente
integradas e constitudas pelos diferentes componentes desse sistema. A presente reviso tem como objetivo resgatar os
fundamentos dessa resposta, que apresenta elevada complexidade e constituda por diversos componentes articulados
que convergem para a elaborao da resposta imune adaptativa. Destacamos algumas etapas: reconhecimento molecular
dos agentes agressores; ativao de vias bioqumicas intracelulares que resultam em modifcaes vasculares e teciduais;
produo de uma mirade de mediadores com efeitos locais e sistmicos no mbito da ativao e proliferao celulares,
sntese de novos produtos envolvidos na quimioatrao e migrao de clulas especializadas na destruio e remoo
do agente agressor, e fnalmente a recuperao tecidual com o restabelecimento funcional do tecido ou rgo.
Palavras-chave: imunidade inata, infamao, autoimunidade, PAMPs, receptores toll-like.
ORIGEM
Clulas tronco pluripotentes da medula ssea do origem s
clulas progenitoras mieloides e linfoides. Os progenitores
linfoides, por sua vez, do origem aos linfcitos T, B e clulas
NK. As clulas que vo se diferenciar em linfcitos T (LT)
deixam a medula ssea e migram para o timo, onde ocorre
todo o processo de seleo e maturao. Apenas os linfcitos
T maduros deixam o timo e caem na circulao. As clulas,
que vo se diferenciar em linfcitos B (LB), permanecem na
medula ssea e, ao fnal de sua maturao, deixam a medula
e entram na circulao, migrando para os rgos linfoides
secundrios (Figura 1).
LINFCITOS B
Os LB so inicialmente produzidos no saco vitelino, posterior-
mente, durante a vida fetal, no fgado e fnalmente na medula
ssea. As clulas que vo se diferenciar em LB permanecem
na medula ssea durante sua maturao e os LB maduros
RBR 50_5.indb 552 21/10/2010 15:46:45
Aspectos moleculares e celulares da imunidade inata
553 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
deixam a medula e entram na circulao, migrando para os
rgos linfoides secundrios
1,2,3
(Figura 1).
As molculas responsveis pelo reconhecimento de ant-
genos nos LB so as imunoglobulinas de membrana, IgM e
IgD. Estas so a contrapartida dos receptores de linfcitos T
(TCR) e por analogia so denominadas receptores de linfcitos
B (BCR) em alguns contextos.
CARACTERSTICAS DAS IMUNOGLOBULINAS
Cada molcula de imunoglobulina (Ig) constituda por
duas cadeias pesadas e duas cadeias leves ligadas por pontes
Figura 1. Estgios de maturao da clula B na medula ssea a
partir da clula tronco pluripotente. Inicialmente os linfcitos B
passam por ciclos de proliferao com concomitante expresso
das cadeias do receptor da clula B (BCR). Clulas que falham
na expresso do BCR so eliminadas e clulas que reconhecem
protenas prprias com elevada afnidade so estimuladas a
sofrer morte apopttica (seleo negativa). Na parte inferior
da fgura esto esquematizados os estgios de desenvolvimento
das clulas T a partir da migrao de seus precursores da me-
dula ssea para o timo. Na parte inferior direita temos a viso
esquemtica de uma molcula de IgG secretada.
dissulfeto. Existem cinco tipos de cadeias pesadas denominadas
, , , e , que defnem as classes de imunoglobulina IgA,
IgG, IgD, IgE e IgM. As cadeias leves so de dois tipos, appa
() e lambda (). A especifcidade de ligao ao antgeno
defnida pela poro varivel (Fab) da molcula, constituda
pela unio das regies variveis das cadeias leve e pesada da
imunoglobulina. As propriedades caractersticas de cada classe
de Ig podem ser vistas na Tabela 1.
1,3
Tabela 1 Caractersticas bsicas das
classes de imunoglobulinas
Classe Estrutura Propriedades
IgA Dimrica
Monomrica
Encontrada em mucosas do trato
gastrointestinal, respiratrio e urogenital.
Previne colonizao por patgenos. Presente
tambm na saliva, lgrimas e leite.
IgD Monomrica Imunoglobulina de membrana. Faz
parte do receptor de membrana
de linfcitos B virgens (BCR).
IgE Monomrica Envolvida em processos alrgicos e
parasitrios. Sua interao com baslos e
mastcitos causa liberao de histamina.
IgG Monomrica Principal imunoglobulina da imunidade
adquirida. Tem capacidade de
atravessar a barreira placentria.
IgM Monomrica
Pentamrica
Faz parte do receptor de membrana
de linfcitos B virgens (BCR).
Forma encontrada no soro, secretada
precocemente na resposta imune adquirida.
ORGANIZAO DOS GENES
DAS IMUNOGLOBULINAS
Cada cadeia de imunoglobulina formada a partir de segmen-
tos gnicos que se rearranjam em uma sequncia especfca
para constituir a cadeia completa (Figura 1). A poro varivel
da cadeia pesada das imunoglobulinas codifcada pelos seg-
mentos VH, DH e JH. H mais de 50 genes VH, ~25 DH e 6
JH dispostos sequencialmente no cromossomo, seguidos das
regies constantes C, C, C3, C1, C1, C4, C2, C1 e
C2. Nas cadeias leves os segmentos so: ~35 V, 5 J e um
s segmento C; ~30 V e 4 conjuntos JC.
2
MATURAO DOS LINFCITOS B
A maturao dos linfcitos B tem incio a partir das clulas
pr-B que expressam trs genes, TdT, RAG1 e RAG2, que
comandam a recombinao gnica necessria para a produo
de imunoglobulinas. A montagem da cadeia pesada se inicia
com a combinao aleatria de um segmento D e um J, que a
seguir se unem a um segmento V, defnindo a especifcidade de
RBR 50_5.indb 553 21/10/2010 15:46:46
Mesquita et al.
554 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
reconhecimento do anticorpo que ser formado, independente-
mente da poro constante que far parte da cadeia completa.
Essa cadeia pesada se associa a uma cadeia invarivel e
expressa na superfcie como um pr-BCR, juntamente com
as molculas assessrias Ig e Ig. Em seguida ocorre o rear-
ranjo da cadeia leve k e, na falha desta, da cadeia . Cada LB
apresenta, portanto, um nico tipo de cadeia leve associado
cadeia pesada. O sucesso na expresso de uma IgM completa
na superfcie do LB leva progresso da maturao com sub-
sequente produo de IgD de membrana.
3
importante ressaltar que todo rearranjo gnico ocorre no
incio da maturao do LB, no estgio pr-B, ainda na medula
ssea, e de modo totalmente independente de qualquer contato
com antgeno.
2
O processo combinatrio dos diferentes segmentos que
compem as pores variveis das cadeias pesadas e leves e
as diferentes possibilidades de associao entre elas resultam
em cerca de 10
11
especifcidades diferentes de reconhecimento
pelas imunoglobulinas.
1
A fm de restringir esse repertrio, mecanismos de seleo
positiva e negativa atuam durante a maturao dos LB. Na
Figura 2. Estgios de maturao das clulas B com exemplos de marcadores imunofenotpicos expressos no desenvolvimento
normal destas clulas.
CyIg - cadeia citoplasmtica; SmIgM - IgM de superfcie; CyIg - imunoglobulina citoplasmtica.
seleo positiva, os LB imaturos expressando molculas fun-
cionais de Ig de membrana recebem sinais de sobrevivncia
para prosseguir a maturao. No processo de seleo negativa,
os LB imaturos, ainda na medula ssea, que reconhecem ant-
genos prprios com alta afnidade sofrem apoptose ou entram
em um processo denominado edio de receptor, no qual os
genes RAG so novamente ativados e outra combinao V-J de
cadeia leve gerada em substituio anterior, auto-reativa.
1,2,3

Alguns detalhes da dinmica de maturao das clulas B esto
apresentados na Figura 1.
CARACTERIZAO IMUNOFENOTPICA
Os estgios de maturao dos LB so caracterizados por um
padro especfco de expresso de genes de imunoglobuli-
nas e de outras protenas de membrana que servem como
marcadores fenotpicos desses estgios de desenvolvimento
(Figura 2). Essas molculas de superfcie cumprem funes
especfcas importantes nas diferentes fases de maturao do
LB. A existncia de anticorpos monoclonais especfcos para
cada um desses marcadores permite que sejam feitos estudos
RBR 50_5.indb 554 21/10/2010 15:46:46
Aspectos moleculares e celulares da imunidade inata
555 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
sobre a distribuio e a dinmica da linhagem de LB. Ademais,
monoclonais contra algumas dessas molculas de superfcie
tambm podem ser utilizados com fnalidade teraputica, atin-
gindo determinadas subpopulaes de clulas da linhagem B.
ATIVAO DOS LINFCITOS B
Os LB so responsveis pela imunidade humoral que se ca-
racteriza pela produo e liberao de anticorpos capazes de
neutralizar, ou at mesmo destruir, os antgenos (Ag) contra
os quais foram gerados. Para tal, os LB devem ser ativados,
o que acarreta um processo de proliferao e diferenciao,
que culmina na gerao de plasmcitos com produo de
imunoglobulinas com alta afnidade para o eptopo antignico
que originou a resposta. Para ativao, preciso que o BCR
ligue-se a um eptopo antignico, o que desencadeia uma se-
quncia de eventos intracelulares. Alm do reconhecimento do
antgeno, a ativao dos LB depende tambm de um segundo
sinal ativador.
1,2
O complexo do receptor de LB (BCR) inclui, alm da
imunoglobulina de membrana, duas cadeias peptdicas, Ig
e Ig, que tm funo de dar incio sinalizao intracelular
aps o encontro com o antgeno.
1,2
As molculas Ig e Ig
contm motivos de ativao (ITAMs) que so fosforilados aps
ligao do antgeno ao complexo BCR, e ativam fatores que
promovem a transcrio de genes envolvidos na proliferao
e diferenciao dos LB (Figura 3-A).
2,7
Os LB funcionam tambm como clulas apresentadoras
de antgeno, aps interiorizarem e processarem o Ag ligado
ao receptor de superfcie (BCR). Os peptdeos gerados pelo
processamento so expressos na membrana dos LB ligados s
molculas do complexo maior de histocompatibilidade (MHC)
classe II, para apresentao aos LTCD4+ (auxiliares). A inte-
rao do complexo peptdeo/MHC classe II com o receptor
de LT (TCR) inicia uma cadeia de eventos que levam os LT
auxiliares expanso clonal e produo de citocinas que esti-
mulam a proliferao e diferenciao dos LB (Figura 3-B).
1,2,7
Protenas do complemento tambm fornecem sinais secun-
drios para ativao por meio do receptor para o fragmento
C3d, denominado CR2 ou CD21, expresso na superfcie dos
LB. O CD21 forma um complexo com outras duas protenas
de membrana, CD19 e CD81, permitindo o reconhecimento
simultneo do C3d e do antgeno pelo BCR. Esta ligao pro-
move o incio da cascata de sinalizao de ambos os receptores,
gerando uma resposta muito maior se comparada resposta
do antgeno no ligado molcula C3d.
1,2
A possibilidade da
ligao C3d/CR2 atuar como o segundo sinal para a ativa-
o dos LB garante o desencadeamento da resposta frente a
microorganismos e antgenos que ativam o complemento. Esse
tambm um mecanismo de amplifcao da resposta imune
humoral, uma vez que anticorpos capazes de ativar o comple-
mento vo resultar em maior estmulo dos LB.
1,8
Recentemente tem sido destacado o potencial dos LB em
desempenhar suas funes aps ativao de outros receptores
relacionados resposta imune inata, tais como os Toll-Like
Receptors (TLRs). Foi demonstrado que os LB expressam a
maioria dos TLRs, tais como TLR-2, TLR-3, TLR-5 TLR-7
e TLR-9, respondendo a uma enorme variedade de ligantes
que podem ser proteicos, polissacardicos, lipdicos e outros.
8
Figura 3. A. Complexo BCR e ativao da clula B. A partir
da ligao cruzada das imunoglobulinas na superfcie do LB
so desencadeados eventos bioqumicos que iniciam com a
fosforilao dos ITAMS (Motivos de ativao de imunore-
ceptores baseado em tirosina) com consequente ativao de
enzimas e intermedirios bioqumicos que culminaro na
ativao de fatores de transcrio que promovem a ativao
celular. B. Interao do linfcito B com linfcito T auxiliar
aps processamento antignico pelas clulas B. A produo
de citocinas pelos linfcitos T auxiliares resultar na ativao
da Resposta Imune Humoral. Destaque para as molculas de
superfcie envolvidas no processo de ativao.
RBR 50_5.indb 555 21/10/2010 15:46:46
Mesquita et al.
556 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
A resposta dos LB a antgenos peptdicos requer a
ajuda dos LT auxiliares e esses antgenos so, por isso,
denominados antgenos T dependentes. Muitos antgenos
no proteicos, com eptopos repetitivos, no necessitam
da cooperao dos LT e so denominados antgenos T
independentes.
1
CARACTERSTICAS DA RESPOSTA T DEPENDENTE
A resposta humoral frente a Ag proteicos requer o reconheci-
mento do antgeno pelos LT auxiliares e sua cooperao com
os LB antgeno-especfcos, estimulando a expanso clonal
dos LB, a mudana de classe, a maturao de afnidade e a
diferenciao em LB de memria.
1
Os LT expressam na sua superfcie molculas CD40L,
que interagem com seu ligante, CD40, presente na superfcie
de LB, e expressam tambm CD28 que se liga s molculas
B7-1 (CD80) e B7-2 (CD86), cuja expresso na membrana
dos LB ativados signifcantemente aumentada. Esses dois
pares de molculas, CD40/CD40-L e CD28/B7, permitem a
transmisso dos sinais de estmulo e induzem a produo de
enorme variedade de citocinas (Figura 3-B).
1,2
MUDANA DE CLASSE DE IMUNOGLOBULINAS
A etapa de diferenciao caracteriza-se por alteraes signif-
cativas na morfologia dos LB e tambm pela troca da poro
constante da cadeia pesada de IgM ou IgD para IgG, IgA ou
IgE, processo conhecido como mudana de classe. Esta etapa
envolve eventos moleculares complexos como rearranjo ao
nvel do DNA genmico e splicing alternativo ao nvel do RNA
mensageiro. Neste processo as pores variveis das cadeias
pesada e leve permanecem as mesmas e consequentemente a
especifcidade antignica do anticorpo no alterada, mas a
resposta imune torna-se mais diversifcada, uma vez que as
diferentes classes de Ig apresentam diferentes caractersticas
funcionais.
1,2
O sinal gerado pela interao CD40/CD40L parece atuar
de forma global no incio do processo de mudana de classe.
Pacientes com um tipo de defcincia de imunoglobulinas
ligada ao X apresentam baixa expresso de CD40L em LT
ativados, consequentemente os LB apresentam um defeito no
processo de mudana de classe de imunoglobulinas com au-
mento nos nveis sricos de IgM mas no de IgG, IgA ou IgE,
tornando o paciente mais susceptvel a infeces piognicas
e ao desenvolvimento de doenas autoimunes e linfoma.
1,2
MATURAO DA AFINIDADE
No incio da resposta, h Ag sufciente para interagir com
LB tanto de alta quanto de baixa afnidade e os anticorpos
produzidos so heterogneos. No decorrer da resposta,
quantidades maiores de anticorpos se ligam ao Ag dimi-
nuindo sua disponibilidade. Nessa fase, os LB com Ig de
maior afnidade, que interagem melhor com o determinante
antignico, so preferencialmente estimulados. Esse pro-
cesso denominado maturao da afnidade. O aumento
da afnidade de anticorpos para um dado Ag, durante a
progresso da resposta humoral T dependente, resultado
de mutao somtica nos genes de Ig durante a expanso
clonal. Algumas destas mutaes vo gerar clulas capazes
de produzir anticorpos de alta afnidade, contudo, outras
podem resultar na diminuio ou mesmo na perda da capa-
cidade de ligao com o antgeno. A seleo positiva garante
a sobrevivncia seletiva de LB produtores de anticorpos de
afnidade progressivamente maior. Nesse processo fun-
damental a interao CD40/CD40L bem como a presena
de fatores solveis derivados dos linfcitos T e por isso
a maturao de afnidade ocorre somente na resposta aos
antgenos T dependentes.
1,2,3

Pelo fato de que persistem LB de memria aps uma ex-
posio a antgenos T dependentes, os anticorpos produzidos
numa resposta secundria apresentam afnidade mdia mais alta
que os produzidos na primria. Esse processo importante na
eliminao de antgenos persistentes ou recorrentes.
1,2

CARACTERSTICAS DAS RESPOSTAS PRIMRIAS
E SECUNDRIAS DE ANTICORPOS
As respostas primrias e secundrias dos anticorpos para os
antgenos proteicos diferem qualitativa e quantitativamente.
Resposta Primria
O primeiro contato com um antgeno, por exposio natural
ou vacinao, leva ativao de LB virgens, que se diferen-
ciam em plasmcitos produtores de anticorpos e em clulas
de memria, resultando na produo de anticorpos especfcos
contra o antgeno indutor. Aps o incio da resposta, observa-
se uma fase de aumento exponencial dos nveis de anticorpos,
seguida por uma fase denominada plat, na qual os nveis no
se alteram. Segue-se a ltima fase da resposta primria, a fase
de declnio, na qual ocorre uma diminuio progressiva dos
anticorpos especfcos circulantes.
1,2

RBR 50_5.indb 556 21/10/2010 15:46:46
Aspectos moleculares e celulares da imunidade inata
557 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
Resposta Secundria
Ao entrar em contato com o antgeno pela segunda vez, j
existe uma populao de LB capazes de reconhecer esse ant-
geno devido expanso clonal e clulas de memria geradas
na resposta primria. A resposta secundria difere da primria
nos seguintes aspectos: a dose de antgeno necessria para
induzir a resposta menor; a fase de latncia mais curta e a
fase exponencial mais acentuada; a produo de anticorpos
mais rpida e so atingidos nveis mais elevados; a fase de
plat alcanada mais rapidamente e mais duradoura e a fase
de declnio mais lenta e persistente (Figura 4).
1,2,3
A magnitude da resposta secundria depende tambm do
intervalo de tempo desde o contato inicial com o antgeno. A
resposta ser menor se o intervalo for muito curto ou muito
longo. Se for muito curto, os anticorpos ainda presentes for-
mam complexos Ag/Ac que so rapidamente eliminados; se
for muito longo, possvel que as clulas de memria tenham
diminudo gradualmente com o tempo, embora a capacidade
para defagrar uma resposta secundria possa persistir por
meses ou anos. O perodo timo para a induo de resposta
secundria logo aps a queda do nvel de anticorpos da res-
posta primria abaixo dos limites de deteco.
1,2
Nos dois tipos de resposta, primria e secundria, h a
produo dos istipos IgM e IgG, porm, na resposta prim-
ria IgM a principal Ig e a produo de IgG menor e mais
tardia. Na resposta secundria, a IgG a imunoglobulina
predominante. Nas duas respostas, a concentrao de IgM
srica diminui rapidamente de maneira que, aps uma ou duas
semanas, observa-se queda acentuada enquanto a produo de
IgG persistente.
1,2
Vale a pena enfatizar que os testes imuno-
enzimticos muito sensveis podem registrar nveis baixos ou
residuais de IgM por meses em alguns casos.
CARACTERSTICAS DA RESPOSTA
T INDEPENDENTE
Antgenos T independentes podem estimular a produo de
anticorpos na ausncia total ou relativa de LT. Esses antgenos
so usualmente molculas no proteicas, polimricas, que es-
timulam a produo de Ig de baixa afnidade pertencentes, na
sua maioria, classe IgM. Como, geralmente, no h ativao
de LT, no sero geradas as citocinas necessrias para a mu-
dana de classe, maturao de afnidade ou formao de LB de
memria. Raramente na resposta a antgenos T independentes
ocorre mudana para outros istipos.
1,2,3
Figura 4. Viso esquemtica
das fases primria e secundria
da resposta imune adaptativa
humoral. As clulas B virgens
nos tecidos linfoides perifricos
so ativadas a partir do contato
com o antgeno, proliferam e
diferenciam-se em clulas secre-
toras de anticorpos e clulas B de
memria. A resposta secundria
mais rpida e ocorre a partir
da ativao das clulas B de
memria promovendo a produ-
o de maiores quantidades de
anticorpos.
RBR 50_5.indb 557 21/10/2010 15:46:47
Mesquita et al.
558 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
Um exemplo da importncia da resposta a antgenos T
independentes a imunidade humoral frente a polissacardeos
bacterianos, um mecanismo decisivo na defesa do hospedeiro
contra infeces por bactrias encapsuladas. Por essa razo,
indivduos com defcincias congnitas ou adquiridas que
prejudiquem a resposta humoral so especialmente suscetveis
a infeces, muitas vezes fatais, por bactrias encapsuladas.
Outro exemplo de resposta aos antgenos T independentes so
os anticorpos naturais, presentes na circulao de indivduos
normais e produzidos aparentemente sem exposio antignica.
Muitos destes anticorpos naturais reconhecem carboidratos
com baixa afnidade e acredita-se que sejam produzidos por
LB peritoneais, isto , clulas B1, estimuladas por bactrias
que colonizam o trato gastrointestinal, e por LB da zona
marginal dos rgos linfoides. Anticorpos contra antgenos
glicolipdicos A e B do grupo sanguneo so outro exemplo de
anticorpos naturais.
1,3
CLULAS B REGULADORAS (B
REGS
)
O conceito de LB reguladores (B
REGS
) foi introduzido por
Bhan e Mizoguchi
11
a partir de estudo com camundongos LB
defcientes (B
-
) cruzados com camundongos que no expressa-
vam TCR (TCR
-/-
) e desenvolviam espontaneamente colite
crnica. Os camundongos duplamente afetados (B
-
/TCR
-/-
)
apresentaram doena mais precocemente e infamao mais
exacerbada do que animais TCR
-/-
, mas que tinham LB. De
modo surpreendente foi comprovado que, naquele modelo ex-
perimental, era possvel minimizar o efeito da colite no grupo
B
-
/TCR
-/-
, pela administrao de imunoglobulinas purifcadas
e de autoanticorpos anticlulas epiteliais colnicas. A melhora
observada foi acompanhada de aumento no clearance de c-
lulas apoptticas favorecido pelos autoanticorpos produzidos
pelos LB
REGS
.
Outros estudos em modelos experimentais comprovaram
a existncia de clulas com capacidade imunomoduladora no
pool de LB que, em um ambiente cronicamente infamado,
se diferenciam em um fentipo com alta expresso de CD1d,
capacidade de produo de IL-10 e habilidade para suprimir
a resposta infamatria. Os LB
REGS
dependem de interao
antignica e estimulao via molcula CD40L e B7, mas, uma
vez ativadas, produzem IL-10 e TGF- suprimindo a ativao
e diferenciao de LTCD4
+
, LTCD8
+
e clulas NK/T, inibem
a ativao de clulas dendrticas e estimulam a diferenciao
de LT reguladores. Mediante contato dos LB
REGS
com LT
virgens h inibio da ativao do LT e da diferenciao em
TH1 (Figura 5).
12,13

Figura 5. Mecanismos de regulao da resposta imune indu-
zidos por clulas B reguladoras (BREGs). Os mecanismos de
supresso sobre diferentes alvos celulares so dependentes da
secreo de IL-10 e TGF-.
RBR 50_5.indb 558 21/10/2010 15:46:47
Aspectos moleculares e celulares da imunidade inata
559 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
O estudo dos LB
REGS
em modelos animais deixa claro o
papel regulador dessas clulas nas diferentes enfermidades. A
comprovao da existncia dessas clulas no homem ser de
grande relevncia para a compreenso das doenas autoimunes.
Mais do que entender a diversidade de efeitos das citocinas
anti-infamatrias que asseguram as funes dos LB
REGS
, o seu
estudo refora as evidncias da produo de autoanticorpos de
modo fsiolgico com fnalidade protetora.
11,12,13
SUBTIPOS ESPECIAIS DE
LINFCITOS B EFETORES
Alm do LB convencional (B2) existem outros subtipos de
LB como os B1 e os LB da zona marginal (MZ-B) do bao,
que atuam como verdadeiras sentinelas em stios anatmicos
especfcos como: cavidade peritoneal, cavidade pleural e
zona perifrica do bao, respectivamente. Estes subtipos
assemelham-se muito aos linfcitos T e aos linfcitos NK/T
por sua localizao em regies especfcas e funo efetora com
a utilizao de receptores altamente conservados, mas capazes
de reconhecer uma variedade limitada de patgenos. Ambos
os subtipos exercem tanto as funes de clulas da imunidade
inata como da resposta adaptativa. Por pertenceram aos dois
tipos de resposta, provavelmente essas clulas representam
uma forma primitiva e conservada de imunidade.
1,2,14
LINFCITOS B1
Os LB1 constituem uma subpopulao distinta dos LB con-
vencionais (B2). Possuem forte capacidade autorrenovadora e
so encontrados principalmente na cavidade pleural, peritoneal
e em menor quantidade no bao. So responsveis pela pro-
duo da maior parte das IgM naturais e tambm da maioria
dos anticorpos de classe IgM, incluindo anticorpos contra LT,
dsDNA, eritrcitos e anticorpos que reconhecem constituintes
bacterianos comuns. Tem sido sugerido que os LB1 represen-
tam uma relquia evolutiva originada de uma linhagem primi-
tiva da imunidade inata que se tornou uma clula linfoide do
sistema adaptativo, mas ainda mantm muitas caractersticas
de uma clula do sistema inato. Os LB1 parecem representar
a primeira linha de defesa contra infeces sistmicas por
vrus e bactrias e so de fundamental importncia para o
equilbrio homeosttico do organismo. Produzem anticorpos
polirreativos e de baixa afnidade, importantes para remoo
de clulas envelhecidas e/ou que sofreram estresse celular e
proteo contra o desenvolvimento de doenas autoimunes e
arterosclerose.
15,16

Os LB1 expressam baixos nveis dos marcadores B220/
CD45R, CD19, Mac-1 e IgD de superfcie, altos nveis de IgM
de superfcie e so subdivididos em 2 grupos principais: B1a
e B1b. Os LB1a expressam a molcula CD5 de superfcie em
nveis intermedirios, enquanto os LB1b so CD5
-
e capazes
de diferenciao em clulas com caractersticas mielomono-
cticas com funo e morfologia semelhante ao macrfago.
Foi verificado que a secreo de IL-10 pelos LB1 modula a
atividade fagoctica do macrfago in vitro, e a apresentao de
antgenos na presena de IL-10 induz tolerncia ou diferen-
ciao de LT em clulas supressoras, indicando um possvel
papel imunomodulador dessa populao celular.
Linfcitos B da zona marginal
As principais populaes de LB efetoras do bao so os LB da
zona marginal (MZ-B) e os LB foliculares (FC-B). Os MZ-B
so populaes especializadas de LB localizadas na regio
perifrica ou marginal do bao, regio denominada sinusoide
esplnico. Neste stio esto localizados tambm os macrfa-
gos da zona marginal que junto com os MZ-B representam a
primeira linha de defesa rpida, contra antgenos particulados
da corrente sangunea. No entanto, fenotipicamente, estes
linfcitos so muito semelhantes aos LB convencionais, sendo
classifcadas tambm no grupo LB2.
14

Os FC-B, localizados nos folculos linfoides, atuam em
um estgio mais avanado da resposta adquirida, gerando LB
de memria e plasmcitos por meio da resposta humoral T
dependente comentada anteriormente nesta reviso.
14

Os MZ-B, assim como os LB1, possuem um repertrio de
reconhecimento antignico limitado, normalmente autorrea-
tivo. Mas, ainda que autorreativos, eles so tambm polirre-
ativos, com especifcidade importante tanto para remoo de
restos celulares, como para o reconhecimento de antgenos
bacterianos e virais. Outra caracterstica importante destas
clulas a propriedade que elas tm de gerar as chamadas
respostas humorais T independentes, ou seja, podem responder
avidamente a estmulos antignicos e se diferenciarem em
clulas secretoras de anticorpos sem a necessidade de auxilio
de LT. Juntos, MZ-B e LB1 fazem parte das chamadas repostas
de memria natural, pois geram rapidamente clulas efetoras
nos estgios iniciais da resposta imune.
14

LINFCITOS T
As clulas pr-T entram no crtex tmico pelas artrias e
durante o processo de seleo e maturao migram em di-
reo medula, de onde saem para a circulao. O processo
RBR 50_5.indb 559 21/10/2010 15:46:47
Mesquita et al.
560 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
de maturao dos LT envolve a expresso de um receptor de
clulas T (TCR) funcional e dos co-receptores CD4 e/ou CD8.
1

Os LT s reconhecem antgenos processados, apresentados
por molculas de MHC na superfcie de uma clula apresenta-
dora de antgeno. O TCR expresso na membrana dos LT em
associao com um complexo denominado CD3, composto
por cinco diferentes protenas da famlia das imunoglobuli-
nas. O TCR responsvel pelo reconhecimento do complexo
peptdeo-molcula de MHC, e o CD3, pela sinalizao celular
subsequente.
1
RECEPTOR DE CLULAS T (TCR)
O TCR formado por duas cadeias peptdicas da superfamlia
das imunoglobulinas, com uma regio varivel e uma regio
constante, formadas a partir de segmentos gnicos que durante
a maturao dos LT sofrem recombinao de forma semelhan-
te do BCR. Em cerca de 95% dos LT circulantes o TCR
formado pelas cadeias e . Uma pequena porcentagem de
LT apresenta TCR composto por cadeias e . As cadeias
e so formadas pela combinao de trs tipos de segmentos
(V, J e C) e as cadeias e , quatro tipos (V, D, J e C). H ~70
diferentes segmentos V, 60 J e 1 nico C. Para a cadeia ,
h ~50 V seguidos de dois conjuntos compostos de 1 D, 6-7
J e 1 C. Nas cadeias e a variabilidade menor.
17
A grande diversidade de repertrio dos LT maduros gera-
da pelo processo de recombinao somtica na qual um dado
gene V, entre os diversos possveis, liga-se a um dado gene J
ou combinao DJ. A diversidade de repertrio potencial dos
LT algo em torno de 10
16
. A recombinao entre os diferentes
segmentos mediada por enzimas expressas apenas durante a
fase de maturao dos linfcitos.
1,17
MATURAO DOS LINFCITOS T
O processo de maturao dos LT ocorre em etapas sequenciais
que envolvem a recombinao somtica e expresso do TCR,
proliferao das clulas, expresso dos co-receptores CD4 e
CD8 e seleo positiva e negativa induzida por apresentao
de antgenos prprios por clulas do estroma tmico.
17
Inicialmente ocorre o rearranjo dos genes da cadeia do TCR
e, em seguida, da cadeia . Os timcitos, ou linfcitos imaturos,
comeam a expressar baixos nveis de CD4 e CD8 na superf-
cie, sendo, portanto, duplo-positivos. Nesta fase, os timcitos
migram em direo medula tmica e entram em contato com
Ag prprios apresentados pelas clulas epiteliais do estroma t-
mico. Apenas aqueles que se ligam ao complexo MHC/Ag com
afnidade adequada recebem estmulo para sobreviver (seleo
positiva). Os timcitos cujo TCR no apresenta afnidade pelo
MHC prprio sofrem apoptose pela falta de estmulo (morte por
negligncia).
17
A i nterao com molculas MHC de classe I ou
II determina a diferenciao do timcito em LT CD8
+
ou CD4
+
,
respectivamente. Continuando a maturao, os timcitos que
sobreviveram seleo positiva e expressam apenas CD4 ou CD8
entram em contato na medula com clulas dendrticas e macrfa-
gos, clulas apresentadoras de antgenos (APCs) extremamente
efcientes, que apresentam Ag prprios associados ao MHC. Os
timcitos imaturos que interagem com muita afnidade com esses
complexos morrem por apoptose (seleo negativa). As clulas
que sobrevivem tornam-se LT maduros, prontos para deixarem o
timo e exercerem suas funes na periferia. Apenas cerca de 5%
das clulas que entram no timo tornam-se LT maduros
17
(Figura 1).
Este processo de educao tmica visa garantir que os LT
circulantes sejam tolerantes aos Ag prprios, mas capazes de
reconhecer Ag estranhos ao organismo quando apresentados
pelo MHC prprio. Entretanto, os mecanismos centrais de
tolerncia no so absolutos uma vez que LT autorreativos
podem ser encontrados na periferia. Entre outros mecanismos
de regulao perifrica, destacam-se diferentes populaes de
LT reguladores que atuam na periferia impedindo o desenvol-
vimento de autoimunidade.
17

LT EFETORES
Existem diversos subtipos de LT efetores. Classicamente os
dois principais subtipos so os auxiliares (Th) e os citotxicos,
que apresentam um receptor TCR e as molculas correcep-
toras, CD4 ou CD8, respectivamente. Os LT CD4 (Th) so
responsveis por orquestrar outras clulas da resposta imune
na erradicao patgenos e so tambm muito importantes
na ativao dos LB, macrfagos ou mesmo LT CD8. Os LT
CD8 esto envolvidos principalmente nas respostas antivirais
e possuem tambm atividade antitumoral. Ambos os subtipos
apresentam papel muito importante no controle de patgenos
intracelulares. Outros subtipos de LT efetores, encontrados
especialmente nas barreiras de mucosa e na pele, so os LT
. Essas clulas so importantes nas respostas imunes contra
antgenos comumente encontrados nesses stios anatmicos e
representam um elo entre a resposta imune inata e adaptativa
(Figura 6).
18
Linfcitos T CD4 Auxiliares (Th)
Os LTh so subdivididos funcionalmente pelo padro de ci-
tocinas que produzem. Durante o estmulo fornecido por uma
RBR 50_5.indb 560 21/10/2010 15:46:47
Aspectos moleculares e celulares da imunidade inata
561 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
APC, um linfcito precursor Th0 pode se tornar um linfcito
Th1, Th2 ou Th17, na dependncia do ambiente de citocinas
presente. Embora morfologicamente indistinguveis essas
clulas apresentam distintos padres de citocinas secretadas e,
consequentemente, diferentes respostas efetoras
19
(Figura 6).
Linfcitos Th1
Os LTh1 produzem grandes quantidades de IL-2, que induz
proliferao de LT (incluindo os prprios LTCD4 de maneira
autcrina) e tambm induz a proliferao e aumenta a capa-
cidade citotxica dos LT CD8. A outra citocina produzida
em grandes quantidades pelos LTh1 o INF-, uma citocina
muito importante na ativao de macrfagos infectados com
patgenos intracelulares como micobactrias, protozorios e
fungos, que apresenta tambm um papel relevante na ativao
de LT CD8.
18
Os pacientes com sndrome de imunodefcincia
em que o receptor de INF- est ausente sofrem de infeces
graves por micobactrias.
20
Existe um ciclo de retroalimentao
positiva na ao do INF- sobre outros LTh0, induzindo sua
polarizao para a via de diferenciao Th1 e inibindo a via
Th2.
19
A resposta Th1 essencial para o controle de patgenos
intracelulares, sendo possvel que contribua para a patognese
de doenas reumticas autoimunes como artrite reumatoide
(AR) e esclerose mltipla (EM). Entretanto, nos ltimos anos,
uma nova subpopulao de LT, os LTh17, tem sido responsa-
bilizada pelo processo fsiopatolgico dessas enfermidades.
21

Linfcitos Th2
A segunda populao Th muito importante nas respostas imu-
nes humorais o LTh2, que produz IL-4, IL-5, IL-6 e IL-10,
favorecendo a produo de anticorpos.
18
As respostas Th2 esto
associadas com as doenas alrgicas e infeces por helmintos,
uma vez que a IL-4 induz a troca de classe de imunoglobulinas
nos linfcitos B para IgE e a IL-5 induz a produo e ativao
de eosinflos. De forma anloga ao INF-, a IL-4 tambm
promove retroalimentao positiva para a via Th2 e suprime
a via Th1. Em situaes de hipersensibilidade imediata, como
nas doenas alrgicas, a terapia visa a dessensibilizao imune
Th2 e induo de respostas Th1 alrgeno-especfcas.
18,19
J em
doenas sabidamente causadas por LTh1, as citocinas Th2 tm
sido consideradas protetoras, portanto a busca pela alterao
no padro de resposta imune de Th1 para Th2 tem sido muito
estudada, visando a melhora ou o restabelecimento da tole-
rncia imunolgica. Entretanto, este paradigma bipolar tem
sido reformulado recentemente em funo do reconhecimento
de novos subtipos de LT, principalmente as clulas Th17.
18,19

Figura 6. Caractersticas gerais das clulas T com des-
taque para os linfcitos T auxiliares (subtipos TH1 e
TH2), clulas TH17, linfcitos T citolticos, linfcitos
T e clulas T reguladoras naturais (TREGs) e induzidas
(TR-1 e Th3).
RBR 50_5.indb 561 21/10/2010 15:46:47
Mesquita et al.
562 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
Linfcitos Th17
Os LTh17 representam um novo subtipo de LT efetores im-
portantes na proteo contra infeco por microorganismos
extracelulares. Foram originalmente descritos em modelos
experimentais de doenas autoimunes como encefalite autoi-
mune e artrite induzida por colgeno, que antes se acreditava
serem mediadas predominantemente por clulas Th1. Esta
nova via de diferenciao Th comeou a ser elucidada com a
descoberta da citocina IL-23 que, juntamente com IL-1 e IL-
6, pode levar ao desenvolvimento de doenas autoimunes em
modelos murinos por seu importante papel pr-infamatrio
e indutor da diferenciao e ativao de LTh17.
21
Os LTh17
produzem citocinas IL-22, IL-26 e citocinas da famlia IL-17.
As citocinas da famlia IL-17 so potentes indutoras da infa-
mao, induzindo infltrao celular e produo de outras
citocinas pr-infamatrias.
21,22
A produo desregulada de IL-17 est associada a vrias
condies autoimunes, como: esclerose mltipla, doena intes-
tinal infamatria, psorase e lpus. Em pacientes com artrite
reumatoide, nveis aumentados de IL-17 foram encontrados
na sinvia, onde atua como um importante fator na ativao
dos osteoclastos e reabsoro ssea.
21,22

A via de diferenciao Th17 antagonizada pelas citocinas
Th1 e Th2 e, em alguns modelos experimentais de autoimu-
nidade causada por LTh17, as citocinas Th1 e Th2 tm se
mostrado protetoras. A exata compreenso dos mecanismos
de polarizao Th em humanos fundamental para um melhor
entendimento dos mecanismos fsiopatolgicos das doenas
infamatrias crnicas e para o possvel desenvolvimento de
formas mais efcazes de imunoterapia.
21
LT CITOTXICOS (CD8)
Os LT CD8 reconhecem antgenos intracitoplasmticos apre-
sentados por molculas MHC de classe I, que so expressas
por praticamente todas as clulas nucleadas. Clulas infectadas
por vrus e clulas tumorais normalmente so reconhecidas
pelos LT CD8.
18
Aps adeso s clulas alvo apresentando
um antgeno associado ao MHC e coestmulo adequado, os
LT CD8 proliferam e, em um encontro subsequente, podem
eliminar por citotoxicidade qualquer clula que apresente esse
antgeno especifco, independente da presena de molculas
coestimulatrias. Os LT CD8 induzem a via de morte celular
programada (apoptose) na clula alvo pela ao de perforinas
e granzimas e tambm podem levar apoptose pela expresso
do receptor Fas L (CD95) que interage com a molcula Fas
nas clulas alvo.
18

LT
Uma pequena populao de LT perifricos possui TCR com
diversidade limitada, composto por cadeias . Essas clulas
so comumente encontradas nas primeiras linhas de defesa do
organismo, como as barreiras mucosas e a pele, onde atuam
como verdadeiras sentinelas de reconhecimento de padres
moleculares, reconhecendo e apresentando antgenos, respon-
dendo a eles e contribuindo tambm para ativao e prolifera-
o de clulas do sistema imune.
23
Essas clulas diferem dos
LT , pois seu TCR pode reconhecer antgenos mesmo na
ausncia de apresentao pela molcula de MHC, sendo ento
consideradas verdadeiras sentinelas do organismo.
23,24
Os LT
apresentam tambm memria imunolgica, respondendo
mais vigorosamente em um segundo encontro antignico. Os
LT exercem suas funes efetoras de maneiras variadas,
podendo, por exemplo, apresentar citotoxicidade (caracterstica
primria de LTCD8). Estudos teraputicos tm explorado esta
caracterstica citotxica contra antgenos tumorais. Os LT
exercem tambm funo auxiliadora liberando citocinas como
INF- (Th1) ou IL-4 (Th2), podendo inclusive atuar como
APCs efcientes, pois possuem alta capacidade de apresentar
antgenos aos LT, mediando sua ativao e proliferao. Os
LT so tambm capazes de ativar clulas dendrticas e LB,
ampliando assim tanto a resposta imune celular como humoral.
Os LT trazem tona a discusso de um dos dogmas
contemporneos da imunologia, a diviso do sistema imune
em sistema inato e adaptativo. O sistema imune inato responde
rapidamente ao reconhecer padres moleculares derivados de
patgenos e capaz de induzir repostas imunes adaptativas
pela liberao de citocinas e apresentao de antgenos. Em
contraste, a reposta adaptativa age lentamente em um encontro
antignico inicial, mas desenvolve memria imunolgica e
responde rpida e vigorosamente em um encontro subsequente
(Figura 4). Os LT podem ser includos em ambos os braos
da resposta imune, uma vez que exercem tanto as funes de
clulas da imunidade inata como da resposta adaptativa. Sua
participao nos dois tipos de resposta sugere que essas clulas
representam uma forma primitiva e conservada de imunidade.
23

LT REGULADORES
Vrias evidncias demonstram a importncia das diferentes
populaes de LT reguladores na manuteno da autotolerncia
imunolgica e no controle das respostas autoimunes. Assim,
h grande interesse no estudo dessas clulas e de sua potencial
aplicao no tratamento das doenas autoimunes.
25

RBR 50_5.indb 562 21/10/2010 15:46:47
Aspectos moleculares e celulares da imunidade inata
563 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
As clulas com funo imunorreguladora apresentam como
caracterstica bsica a capacidade de produo de citocinas
imunossupressoras, como IL-4, IL-10 e TGF-. Atuam em
uma complexa rede de mecanismos reguladores destinados
a assegurar a modulao das respostas imunolgicas frente
aos diversos antgenos provenientes de agentes infecciosos,
tumores, aloantgenos, autoantgenos e alrgenos. Entre os
LT com funo reguladora esto os LT reguladores de ocor-
rncia natural (T
REGS
CD4
+
CD25
+
), descritos por Sakaguchi
et al (1995),
26
os LT
R1
que produzem IL-10 e suprimem o
desenvolvimento de algumas respostas de LT in vivo, e os
LTh3, capazes de impedir o desenvolvimento de enfermida-
des autoimunes mediante a produo de TGF- (Figura 6)
(27)
. Outros LT com funo reguladora so os LT , clulas
CD8
+
Qa-1
+
, os LT CD8
+
CD28
-
(CD8
+
T
R
), as clulas NK/T e
os LT duplo-negativos.
23,28,29

LT REGULADORES DE OCORRNCIA
NATURAL - TREGS

As clulas T
REGS
representam 5 a 10% do total de LT CD4
+
no
sangue perifrico, podendo tambm ser isoladas diretamente
do timo. As T
REGS
presentes no timo so clulas naive que,
quando saem para a periferia, se tornam ativadas, adquirindo
fentipo de memria.
25
As T
REGS
apresentam altos nveis de CD25 (CD25
HIGH
ou
CD25
BRIGHT
) e expressam CD45RO, CD62L, CD122, HLA-DR,
CD69, CD71 e o receptor para TNF induzido por glicocor-
ticoides (GITR) entre outros. Expressam tambm o fator de
transcrio Foxp3, encontrado predominantemente nas T
REGS
tmicas e perifricas, que parece ter grande importncia no
desenvolvimento e funo das T
REGS
tanto em camundongos
quanto em humanos.
25
Pacientes com mutao no gene FOXP3
apresentam a sndrome denominada IPEX (Desregulao imune,
Poliendocrinopatia, Enteropatia, Sndrome ligada ao X), um
distrbio autoimune que afeta mltiplos rgos com desenvolvi-
mento de alergia e doena infamatria intestinal. Aparentemente
esses pacientes tm comprometimento no desenvolvimento das
T
REGS
e consequente defeito na funo supressora, levando a um
estado de hiperativao de LT, que se tornam reativos contra
autoantgenos, bactrias comensais do intestino ou antgenos
ambientais incuos, desenvolvendo poliendocrinopatia autoimu-
ne, doena infamatria intestinal ou alergia, respectivamente.
30

H interesse no estudo dos LT reguladores por sua funo
chave na manuteno dos mecanismos de autotolerncia e regu-
lao da resposta imune. Alm dos distrbios autoimunes asso-
ciados ausncia/defcincia de sua funo, existe interesse no
seu estudo em situaes de exacerbao da resposta imunitria
como nos transplantes, na doena do enxerto versus hospedeiro
(GVHD), nos processos alrgicos e outras condies. Nessas
situaes, uma abordagem teraputica seria estimular o nmero
e a funo dessas clulas a partir da administrao de frmacos,
citocinas, molculas coestimulatrias ou outros elementos que
potencialmente atinjam esta fnalidade.
25

Linfcitos T Reguladores Duplo Negativos
A maioria dos LTCD3+ TCRb expressam tambm molcu-
las CD4 ou CD8. Entretanto, uma nova subpopulao de LT
reguladores com receptor TCRb mas CD4
-
CD8
-
foi descrita
por Strober et al, em 1989.
29
Os LT

duplo-negativos naturais
perifricos com atividade supressora, denominados clulas
T
REG
DN constituem uma subpopulao de clulas presentes
em tecidos linfoides e no linfoides. Existem em pequeno n-
mero, representando 1% - 2% dos LT perifricos em humanos,
podendo estar aumentados em algumas doenas autoimunes.
As T
REG
DN produzem predominantemente INF-, TNF- e
pequena quantidade de TGF-b e so capazes de suprimir a
reposta imune alognica e xenognica mediada por LT CD4+
e CD8+, assim como a resposta a antgenos prprios.
29,31

O estmulo dos LT
REG
DN por antgenos especfcos atravs
do TCR importante para o desenvolvimento da atividade
reguladora. Os LT
REG
DN so capazes de adquirir alopeptdeos
a partir de complexos peptdeo-MHC de APCs e apresentar
esses peptdeos na sua superfcie. Essa apresentao permite
a interao especfca dos LT
REG
DN com LT efetores reativos
ao aloantgeno, que aps esse contato progridem para morte
celular.
32
Similarmente aos LT
REGs
CD4+CD25+, a supresso
pelos LT
REG
DN tambm requer o contato clula-clula.
Na sndrome linfoproliferativa autoimune (ALPS) tipo Ia,
os pacientes tm um acmulo de LT CD3+TCR
+
DN na pe-
riferia como resultado de um defeito de apoptose. Acredita-se
que o aumento do nmero de clulas DN nesses casos se deva
perda das molculas CD4 e CD8 pelos LT senescentes que
falham em morrer por apoptose.
32
Neste caso especfco no
h evidncia de que essas clulas tenham atividade reguladora.
Dados recentes indicam que os LT
REG
DN podem estar
aumentados em algumas doenas autoimunes, talvez como
uma tentativa de controlar as clulas efetoras. A completa
caracterizao dos LT
REG
DN humanos poder ter implicaes
importantes no entendimento e tratamento de doenas autoi-
munes e na rejeio de transplantes.
32

Linfcitos T Reguladores CD8+CD28-
As clulas caracterizadas imunofenotipicamente como
CD8
+
CD28
-
reconhecem especifcamente antgenos expressos
RBR 50_5.indb 563 21/10/2010 15:46:48
Mesquita et al.
564 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
principalmente por APCs em associao ao MHC de classe I,
mas no so ativadas por carecerem do receptor CD28. Ao
invs, suprimem a resposta proliferativa de LTCD4+ alo-
reativas nas imediaes. Este efeito supressor no mediado
por citocinas, mas requer a interao clula-clula entre LTh
CD4+, LT supressores CD8
+
CD28
-
e APCs apresentando an-
tgenos alogeneicos.
33

O mecanismo de ao das clulas reguladoras CD8
+
CD28
-

no est completamente esclarecido e poucos estudos tm
caracterizado a funo dessas clulas regulatrias in vitro.
Clulas NK/T
Praticamente todas as clulas que expressam TCR so restritas
ao MHC, ou seja, reconhecem o antgeno apenas em associao
a molculas do MHC prprio, e expressam co-receptores CD4
ou CD8. Uma pequena populao de LT expressa marcadores
encontrados em clulas NK e so conhecidas como clulas
NK/T, que parecem tambm ter papel importante na regulao
da resposta imune. As clulas NK/T apresentam expresso de
TCR com cadeias de diversidade limitada. Esse TCR reconhe-
ce lipdeos ligados a molculas no-polimrfcas, denominadas
CD1 e semelhantes ao MHC da classe I.
34

As clulas NK/T parecem surgir do mesmo precursor que
origina LT convencionais, mas so selecionadas positivamente
aps interaes de alta avidez com glicolipdeos associados a
molculas CD1d expressas por clulas epiteliais ou medulares
do tecido tmico.
35

Apesar do repertrio limitado, as clulas NK/T apresentam
duas estratgias diferentes no reconhecimento de patgenos.
A primeira, observada no reconhecimento de bactrias Gram-
negativas, ocorre pela sinalizao de receptores do tipo Toll
(TLR) pelo LPS. A segunda ocorre pelo reconhecimento espe-
cfco de glicosilceramidas presentes na parede celular bacte-
riana, apresentadas por CD1d. Essa ltima via de sinalizao
assegura o reconhecimento de patgenos que no apresentam
ligantes para TLRs em sua parede celular.
36

Devido ao reconhecimento de glicolipdios conservados,
tanto endgenos (iGbeta3) quanto exgenos, essas clulas
esto envolvidas em respostas alrgicas, infamatrias, tumo-
rais e na autoimunidade, alm de participarem da regulao
da resposta imune.
36

APRESENTAO DE ANTGENOS
E ATIVAO DE LT
A apresentao de antgenos aos LT inicia-se com o processa-
mento antignico pelas APCs. O processamento consiste na
captura do antgeno, sua degradao proteoltica a fragmentos
menores, transporte e acomodao dos peptdeos antignicos
na fenda das molculas do MHC e fnalmente na transposio
do complexo MHC-peptdeo para a superfcie celular para
reconhecimento pelo TCR. Os LT reconhecem o complexo
MHC-peptdeo via TCR, independente do compartimento
celular onde esse antgeno foi captado.
37

Normalmente os antgenos exgenos, fagocitados ou en-
docitados, so acomodados em molculas de MHC classe II,
que interagem com o TCR e o co-receptor CD4 na superfcie
celular de LT.
1

No processamento de antgenos intracelulares, molculas
proteicas do citosol, como por exemplo os antgenos virais, so
integradas protena ubiquitina e direcionadas para o proteas-
somo, uma unidade cataltica capaz de converter os antgenos
citoslicos em peptdeos. Os peptdos assim produzidos so
conduzidos para o retculo endoplasmtico e associados s
molculas de MHC I. Os complexos MHC I e peptdeo so
transportados para a superfcie celular para posterior apresen-
tao aos LT CD8
+38.

Para que ocorra a ativao dos LT, aps o reconhecimento
do peptdeo pelo TCR, h necessidade de um segundo sinal,
que mediado pela interao de vrias outras molculas coes-
timulatrias presentes na superfcie do LT e da APC. Por sua
importncia na regulao da resposta imune, destacamos as mo-
lculas coestimuladoras participantes da interao CD28-CD80
ou CD28-CD86, que resulta em sinais estimuladores, e da inte-
rao CD28-CTLA4, que promove sinalizao inibitria.
(39,40)

CONSIDERAES FINAIS
Existem diferentes populaes de clulas B maduras, que
podem ser encontradas em diferentes stios anatmicos, com
funes muitas vezes diversifcadas. As clulas B-1 e MZ-B
parecem ser pr-selecionadas para reagirem a antgenos capa-
zes de gerar respostas T independentes, atuando como clulas
B de memria inata. As clulas B foliculares atuam como
percussoras das repostas imunes T dependentes e podem sofrer
adaptaes celulares e moleculares em resposta ao estmulo
antignico. Como resultado, temos as repostas mediadas por
plasmcitos maduros de vida longa capazes de sintetizar uma
quantidade substancial de anticorpos de alta avidez por vrios
anos. Estas respostas T dependentes tambm elaboram um
compartimento de clulas B de memria no secretoras de anti-
corpos, que responde vigorosamente reexposio antignica.
As clulas T tm como uma de suas principais caractersti-
cas a atividade efetora auxiliar na ativao de outros subtipos
celulares, principalmente via secreo de citocinas e ao
RBR 50_5.indb 564 21/10/2010 15:46:48
Aspectos moleculares e celulares da imunidade inata
565 Rev Bras Reumatol 2010;50(5):552-80
efetora direta sobre clulas alvo, cujos exemplos emblemti-
cos so os LT CD8 citotxicos. Vrias subpopulaes de LT,
classifcadas principalmente pelo padro de citocinas secretado,
vm sendo descritas. Os principais subtipos efetores so os
LTh1 (secretor de INF- e IL-2), LTh2 (secretor de IL-4,IL-10
e IL-13) e LTh17 (secretor de IL-17, IL-21 e IL-22). Outras
subpopulaes como os linfcitos NKT e LT representam
populaes muito heterogneas quanto a sua capacidade
funcional, atuando ora como efetoras, ora como reguladoras. LT
reguladores so fundamentais no controle de praticamente todas
as respostas imunes, atuando sobre todos os subtipos celulares da
imunidade inata e adaptativa. As T
REGS
naturais originadas no timo
e as populaes de LT reguladoras induzidas na periferia, incluin-
do as clulas CD8
+
Qa-1
+
, LT CD8
+
CD28
-
e LT duplo-negativas,
fazem parte deste diverso pool de linfcitos imunomoduladores.
No somente os LT podem exercer imunoregulao, mas
muitas vezes durante uma reposta efetora as clulas B podem
se comportar tanto como clulas efetoras ativas quanto como
clulas imunomoduladoras, denominadas B
REGS
. Estas ltimas
so capazes de controlar a magnitude da resposta humoral e
celular, trazendo de volta a homeostase imune e auxiliando na
manuteno da tolerncia perifrica.
Assim, compartimentos distintos de clulas T e B antgeno-
especfcas podem ser recrutados na resposta efetora aps um
estmulo local ou sistmico. Os eventos moleculares necess-
rios para seu desenvolvimento, seleo, migrao e ativao
ainda esto sendo investigados e a compreenso destas vias
permitir no futuro a manipulao especfca de vias efetoras
celulares e humorais, facilitando a imunidade a microorganis-
mos e prevenindo doenas.
RBR 50_5.indb 565 21/10/2010 15:46:48
Molecular and cellular aspects of innate immunity Mesquita et al.
579 578 Bras J Rheumatol 2010;50(5):552-80 Bras J Rheumatol 2010;50(5):552-80
The action mechanism of the CD8
+
CD28
-
regulatory cells is
not completely elucidated and few studies have characterized
the function of these regulatory cells in vitro.
NK/T CELLS
Practically all cells that express TCR are MCH-restricted,
that is, they recognize the antigen only in association with
self-MHC molecules and express the co-receptors CD4 or
CD8. A small population of TL express markers found in NK
cells and are known as NK/T cells, which also seem to have
an important role in the regulation of the immune response.
The NK/T cells present expression of TCR with chains with
limited diversity. This TCR recognizes lipids bound to non-
polymorphic molecules, called CD1, which are similar to the
MHC class I.
34
The NK/T cells seem to arise from the same precursor that
originates conventional TL, but are positively selected after
high-avidity interactions with glycolipids associated with
CD1d molecules expressed by the epithelial or medullary cells
of the thymic tissue.
35
In spite of the limited repertoire, the NK/T cells present two
different strategies to recognize pathogens. The frst, observed
in the recognition of Gram-negative bacteria, occurs through
the signaling of Toll type receptors (TLR) by the LPS. The
second occurs through the specifc recognition of glycosyl
ceramides present on the bacterial cell wall, presented by
CD1d. The last signaling pathway guarantees the recognition of
pathogens that do not present ligands for TLR on the cell wall.
36
Due to the recognition of conserved glycolipids, both en-
dogenous (iGbeta3) and exogenous, these cells are involved
in allergic, infammatory and tumor responses, as well as in
autoimmunity, in addition to participating in the regulation of
the immune response.
36
PRESENTATION OF ANTIGENS
AND TL ACTIVATION
The presentation of antigens to the TL starts with the antigen
processing by the APC. The processing consists in the capture
of the antigen, its proteolytic degradation to smaller fragments,
transportation and accommodation of the antigenic peptides in
the MHC molecule groove and fnally its transposition from
the MHC-peptide complex to the cell surface, for recognition
by the TCR. The TL recognize the MHC-peptide complex
via TCR, regardless of the cell compartment from where this
antigen was obtained.
37
Normally, the exogenous antigens, phagocyted or en-
docyted, are accommodated in MHC molecules class II,
which interact with the TCR and the CD4 co-receptor on the
TL surface.
1

During the processing of intracellular antigens, protein
molecules of cytosol, such as for instance the viral anti-
gens, are integrated to the ubiquitin protein and directed to
the proteasome, a catalytic unit capable of converting the
cytosolic antigens in peptides. The peptides thus produced
are conducted to the endoplasmic reticulum and associated
with the MHC I molecules. The MHC I-peptide complexes
are transported to the cell surface for posterior presentation
to the CD8
+
T cells.
38
For the activation of the TL to occur, after the recognition
of the peptide by the TCR, a second signal is necessary, which
is mediated by the interaction of several other co-stimulatory
molecules present on the surface of the TL and the APC. Due
to its importance in the regulation of the immune response, it is
worth mentioning the co-stimulatory molecules that participate
in the CD28-CD80 or CD28-CD86 interaction, which results
in stimulation signals and the CD28-CTLA4 interaction, which
promotes inhibitory signaling.
39,40
FINAL CONSIDERATIONS
There are different populations of mature B cells that can
be found in different anatomic sites, which very often pre-
sent diversifed functions. The B-1 and MZ-B cells seem
to be pre-selected to react to antigens capable of generating
T-independent responses, acting as innate-memory B cells. The
follicular B cells act as precursors of the T-dependent immune
responses and can undergo cell and molecular adaptations in
response to antigen stimulation. As a result, there are responses
mediated by long-lived mature plasmocytes, capable of syn-
thesizing a substantial amount of antibodies that remain avid
for several years. These T-dependent responses also create a
B-cell memory compartment that does not secrete antibodies
but responds vigorously to antigenic re-exposure.
The T cells have as one of their main characteristics,
the auxiliary effector activity in the activation of other cell
subtypes, mainly through the secretion of cytokines and the
direct effector action on target cells, of which representative
examples are the cytotoxic CD8 TL. Several subpopulations
of TL, classifed mainly by the pattern of secreted cytokines,
have been described. The main effector subtypes are the Th1
lymphocytes (secretes INF- and IL-2), Th2 lymphocytes (se-
cretes IL-4,IL-10 and IL-13) and Th17 lymphocytes (secretes
IL-17, IL-21 and IL-22). Other subpopulations such as NKT
REFERNCIAS
REFERENCES
1. Abbas AK, Lichtman AH, Pillai S. Cellular and Molecular
Immunology, 6
a
ed, Editora Saunders 2007.
2. Janeway CA, Travers P, Walport Mark, Shlomchik M. Imunobiologia
O sistema imune na sade e na doena, 5 ed, Editora Artmed, 2002.
3. Rudin CM, Thompson CB. B-Cell Development and Maturation.
Seminar in Oncology 1998; 25(4):435-46.
4. Van Zelm M, Reisli I, Van der Burg M, Castao D, Van Noesel
CJM, Van Tol MJD et al. An antibody defciency syndrome due to
mutations in the CD19 gene. N. England J Med 2006; 354:1901-12.
5. Lszl M, Notarangelo LD. Immunological and genetic bases of
new primary immunodefciencies. Nature Rev Immunology 2007;
7:851-61.
6. Van Lochem EG, Van der Velden VHJ, Wind HK, Te Marvelde
JG, Westerdaal NAC, Van Dongen JJM. Immunophenotypic
Differentiation Patterns of Normal Hematopoiesis in Human
Bone Marrow: Reference Patterns for Age-Related Changes And
Disease-Induced Shifts. Cytometry Part B (Clinical Cytometry)
2004; 60B:1-13.
7. McHeyzer-Williams MG: B cells as effectors. Curr Opin Immunol
2003; 15(3):354-61.
8. Gray D, Gray M, Barr T. Innate responses of B cells. Eur J Immunol
2007; 37(12):3304-10.
9. Wen L, Roberts SJ, Viney JL, Wong FS, Mallick C, Findly RC.
Immunoglobulin synthesis and generalized autoimmunity in
mice congenitally defcient in alpha beta(+) T cells. Nature 1994;
369:654-8.
10. Peng SL, Madaio MP, Hughes DP, Crispe IN, Owen MJ, Wen L.
Murine lupus in the absence of alpha beta T cells. J Immunol 1996;
156:4041-9.
11. Mizoguchi A, Bhan AK. A case for regulatory B cells. J Immunol
2006; 176(2):705-10.
12. Mauri C, Ehrenstein MR. The short history of regulatory B cells.
Trends Immunol 2008; 29(1):34-40.
13. Mizoguchi A, Mizoguchi E, Smith RN, Preffer FI, Bhan AK.
Suppressive role of B cells in chronic colitis of T cell receptor alpha
mutant mice. J Exp Med 1997; 186(10):1749-56.
14. Allman D, Pillai S. Peripheral B cell subsets. Curr Opin Immunol
2008; 20(2):149-57.
15. Hardy RR: B-1 B cell development. J Immunol 2006; 177(5):2749-
54.
16. Duan B, Morel L. Role of B-1a cells in autoimmunity. Autoimmun
Rev 2006; 5(6):403-8.
17. Stutman O. Intrathymic and extrathymic T cell maturation. Immunol
Rev 1978; 42:138-84.
18. Parkin J, Cohen B. An overview of the immune system. Lancet
2001; 357: 1777-89.
19. Bradley LM. Migration and T-lymphocyte effector function. Curr
Opin Immunol 2003; 15(3):343-8.
20. Tuerlinckx D, Vermylen C, Brichard B, Ninane J, Cornu G.
Disseminated Mycobacterium avium infection in a child with
decreased tumour necrosis factor production. Eur J Pediatr 1997;
156(3):204-6.
21. Mesquita Jr. D, Cruvinel WM, Cmara NOS, Kllas EG, Andrade
LEC. Autoimmune diseases in the TH17 era. Braz J Med Biol Res
2009; 42(6):476-486.
22. Chen Z, Tato CM, Muul L, Laurence A, OShea JJ. Distinct
Regulation of Interleukin-17 in Human T Helper Lymphocytes.
Arthritis & Rheumatism 2007; 56(9):2936-46.
23. Modlin RL, Sieling PA. Now Presenting: T Cells. Science 2005;
309:252-3.
24. Holtmeier W, Kabelitz D. Gammadelta T cells link innate and
adaptive immune responses. Chem Immunol Allergy 2005; 86:151-
83.
25. Cruvinel WM, Mesquita Jr. D, Araujo JAP, Salmazi KC, Kllas EG,
Andrade LEC. Natural Regulatory T cells in Rheumatic Diseases.
Rev Bras Reumatol 2008; 48(6):342-355.
26. Sakaguchi S, Sakaguchi N, Asano M, Itoh M, Toda M. Immunologic
self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2
receptor alpha-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism
of self-tolerance causes various autoimmune diseases. J Immunol
1995; 155(3):1151-64.
27. Jiang H, Chess L. An integrated view of suppressor T cell subsets in
immunoregulation. J Clin Invest 2004; 114(9):1198-208.
28. 28. Lu L, Werneck MBF, Cantor H. The immunoregulatory effects
of Qa-1 Immunological Reviews 2006; 212:51-9.
lymphocytes and TL represent very heterogeneous populations
regarding their functional capacity, sometimes acting as effectors and
sometimes as regulatory lymphocytes. Regulatory lymphocytes are
crucial for the control of practically all immune responses, acting
on all cell subtypes of the innate and adaptive immunity.
The natural T
REGS
originated in the thymus and the populations
of regulatory TL induced in the periphery, including the CD8
+
Qa-1
+
,
TL CD8
+
CD28
-
and TL double-negative cells, are part of this pool
of immunomodulating lymphocytes.
Not only the TL can exercise immunoregulation, but many times,
during an effector response, the B cells can behave as both active
effector cells and immunomodulating cells, called B
REGS
. The latter
are capable of controlling the magnitude of the humoral and cell
response, bringing back the immune homeostasis and helping the
maintenance of peripheral tolerance.
Hence, distinct compartments of antigen-specifc T and B cells
can be recruited in the effector response after a local or systemic
stimulation. The molecular events necessary for their development,
selection, migration and activation are still being investigated and the
understanding of these pathways will allow, in the future, the specifc
manipulation of the cell and humoral effector pathways, facilitating
the immunity against microorganisms and preventing diseases.
Mesquita et al.
580 Bras J Rheumatol 2010;50(5):552-80
29. Sttrober S, Dejbachsh-Jones S, Van Vlasselaer P, Duwe G, Salimi S,
Allison JP . Cloned natural supressor cell lines express CD3+ CD4-
CD8- surface phenotype and the alpha, beta heterodimer of the T
cell antigen receptor. J Immunol 1989; 143:1118-22.
30. Levings MK, Sangregorio R, Sartirana C, Moschin AL, Battaglia
M, Orban PC et al. Human CD25+CD4+ T suppressor cell clones
produce transforming growth factor beta, but not interleukin 10,
and are distinct from type 1 T regulatory cells. J Exp Med 2002;
196(10):1335-46.
31. Murison JG, Quaratino S, Londei M. Phenotypic and functional
heterogeneity of double negative (CD4-CD8-) alpha beta TcR+ T
cell clones. Curr Top Microbiol Immunol 1991; 173:215-20.
32. Wang R, Wang-Zhu Y, Grey H. Interactions between double positive
thymocytes and high affnity ligands presented by cortical epithelial
cells generate double negative thymocytes with T cell regulatory
activity. Proc Natl Acad Sci USA 2002; 99:2181-6.
33. Ben-David H, Sharabi A, Dayan M, Sela M, Mozes E. The role of
CD8+CD28- regulatory cells in suppressing myasthenia gravis
associated responses by dual altered peptide ligand PNAS 2007;
104(44):17459-64.
34. Godfrey DI, Berzins SP. Control points in NKT-cell development.
Nature Rev. Immunol 2007; 7:505-18.
35. MacDonald HR. Development and function of natural killer 1+
T-cells. Biochem Soc Trans 1997; 25(2):696-9.
36. Yokoyama WM. Betting on NKT and NK cells. Immunity 2004;
20(4):363-5.
37. Granucci F, Zanoni I, Ricciardi-Castagnoli P. Central role of dendritic
cells in the regulation and deregulation of immune responses. Cell
Mol Life Sci 2008; 65:1683-97.
38. Cruz PD Jr, Bergstresser PR. Antigen processing and presentation
by epidermal Langerhans cells. Induction of immunity or
unresponsiveness. Dermatol Clin 1990; 8(4):633-47.
39. Shortman K, Wu L, Sss G, Kronin V, Winkel K, Saunders D et al.
Dendritic cells and T lymphocytes: developmental and functional
interactions. Ciba Found Symp 1997; 204:130-8.
40. Banchereau J, Briere F, Caux C, Davoust J, Lebecque S, Liu YJ et
al. Immunobiology of dendritic cells. Annu Rev Immunol 2000;
18:767-811.