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PRACTICA N° 06 VIAS RESPIRATORIAS BAJAS

Las infecciones del tracto respiratorio bajos son las más frecuentes y las que tienen mayor
morbimortalidad.
Limitaciones
- Baja sensibilidad de los cultivos, ya que requieren procedimientos y medios especiales.
- Valoración clínica baja, porque no todos los microorganismos tienen importancia clínica.
MUESTRA
- Esputo
- También podemos tener muestras por aspirado bronquial y lavado broncoalveolar
Los medios de cultivo van a depender de que enfermedad estemos sospechando. (Espacio)
Mycobacterium tuberculosis
Es una bacteria responsable de la mayor cantidad de casos de tuberculosis en el mundo.
Tienen más de 100 especies. Es una bacteria alcohol-ácido resistente, frecuentemente
incolora, aeróbica estricta. Su crecimiento está subordinado a presencia de oxígeno y al valor
del pH circundante. Es muy resistente a las condiciones de frío, congelación y desecación. Por el
contrario, es muy sensible a las de calor, luz solar y luz ultravioleta.
(Espacio)
Para su estudio
BACILOSCOPIA. La baciloscopia, es la técnica fundamental en toda investigación bacteriológica
de la tuberculosis, en la detección de casos y control de tratamiento. Con un costo bajo y de rápida
ejecución (Espacio)
PROCEDIMIENTO
1. Se la extensión de la muestra de esputo controlando la calidad del extendido.
2. Coloración de Ziehl Neelsen
o Fuccina 5 min
o Flameado
o Alcohol acido 3 min
o Azul metileno 1 min
(Espacio)

3. Lectura al microscopio
o Leer 100 campos para reportar “no se observa bacilos acido alcohol resistentes”
o Se informa el numero de bacilos del 1-9 bacterias acido alcohol resistentes.
o De 10-99 en 100 campos (+)
o En 20 campos (pos 3+)
o En 50 campos (pos 2+)
(Espacio)

CULTIVO
Descontaminación.- antes de realizar el cultivo descontaminar la muestra con NaOH al 4%.
- Con 1 ml de la muestra mas 3ml de NaOH, homogenizar y reposar 10-15 min.
- Resuspender y colocar 2 gotitas en el cultivo y esperar que se disemine.
Incubación.- con la tapa semiabierta, este cultivo dura de 2-4 semanas.
PREPARACIÓN DEL MEDIO OGAWA
Medio selectivo para aislamiento y cultivo de microorganismos del género Mycobacterium
El medio se presenta en tubo tapa rosca de 16x 150 mm en una superficie inclinada que se inicia a 1
cm del fondo y termina a 2 cm de la boca del tubo.
Este medio permite el cultivo de microorganismos del género Mycobacterium y es uno de los
medios recomendados par a aislamiento de Mycobacterium tuberculosis.
Este medio se utiliza para sembrar una muestra positiva.
- Lavar los huevos (Espacio)
- Con alcohol al 70% limpiar la cascara de los huevos. (Espacio)
- Romper los huevos, mezclarlos y luego filtrarlos, y obtener una solución de 200ml.
(Espacio)
Preparación de sales.- 100 H2O2
 1 gr glutamato de Na (ajino moto).
 2gr sal monopotasico.
 Se autoclava y se deja a temperatura ambiente.
 Agregar 5ml de verde de malaquita y 6ml de glicerol a las sales, luego homogenizar.
(Espacio)
 Coagulador: coagula las proteínas del medio y las solidifica 85 a 90°c.
 Control x 1h.
 Control de calidad 48h.
 Coger una pequeña mx del cultivo y observar al microscopio y luego informar.
(Espacio)


PRACTICA N° 7 HEMOCULTIVO
Es un examen de laboratorio para verificar si hay bacterias u otrosmicroorganismos en una muestra
de sangre. La mayoría de los cultivos verifican si haybacterias. Un cultivo se puede llevar a cabo
empleando una muestra de sangre, tejido, materia fecal, orina u otro líquido del cuerpo.

OBJETIVOS:
- Detectar la presencia tanto de bacteremia y fungemia en pacientes con o sin sospecha de procesos
infecciosos en la sangre con o sin sin sintomatología.
Origen
(bacteremia)
- Foco infeccioso.- extra o intravascular
( fungemia)
Pacientes inmunocomprometidos
Vías de entrada
- Es a través de los vasos linfáticos.La entrada directa ocurre en infeccionesintravasculares
como:
- Endocarditis
- Flebitis supurativa
- Catéteres intravenosos infectados
- Catéteres arteriales permanentes

CLASIFICACION
 Según tipo de paciente:
Niños, inmunosuprimidos, inmunocompetentes
 Según tipo de bacteria.-
Aerobios, anaerobios, hongos, micobacterias y hay medios de cultivo para cada
uno.
 Según su metodología
MANUAL.- En la forma convencional, se realiza en medios líquidos.
SEMIAUTOMATIZADA.- mediante lisis centrifugación, concentrar la cantidad
de anticoagulante saponina.
AUTOMATIZADA.-
TOMA DE MUESTRA.-
Periferia o central
 La muestra debe obtenerse por punción periférica (venosa o arterial), siempre por una nueva
punción.
 El mejor momento para obtener la muestra de sangre es entre 2 horas a 30 minutos antes del
peak febril. (Espacio)

PROCEDIMIENTO:
Toma de mx
 Neonatos: 2ml (10ml)
 Pediátrico: 4ml (20ml)
 Adultos: 10ml (60ml)
- Los hemocultivos se ha de 2 a 3 veces
- La dilución de la mx debe de ser de 10/1 o 5/1
- Transporte a temperatura ambiente hasta 18 h y sino se incuba a 30°C
Luego se:
- Resiembra
- Tinción gram (Espacio)