You are on page 1of 18

AÞLlCAClCn CuAn1l1A1lvA uL LA

LSÞLC18ClC1CML18lA Ln CulMlCA CLlnlCA
1M. PL88L81 PL8Ll1Z ClluLn1LS
CulMlCA CLlnlCA 2014
"# $%#& '#()%*# +, -).
/#%0',1%). 23)45*'36). 45, .,
#&#-37#& ,& 5& -#2)%#1)%3) 6-*&36)
., 2#.#& ,& -# #2.)%638& +, -579
/)% -) 65#- ,- ':1)+) #&#-*;6)
'0. #'/-3#',&1, 5;-37#+) ,. -#<

=>?=@ABCDCACE=ABFG H=
GI>CB@FCJ KF>FI"= L
M"ABGKFC"=AG
LSÞLC18ClC1CML18lA uL A8SC8ClCn
uv-vlSl8LL
N"# ,./,61%)O)1)',1%*# ., 2#.# ,& -# 6#/#63+#+ +, 5&# .5.1#&63# +,
#2.)%2,% ,&,%$*# ,-,61%)'#$&:;6#9 +, 1#- O)%'# 45, -# 6#&;+#+ +,
,&,%$*# #2.)%23+# ., !"#$%&'($ *!'*'!%&'($#+"(," %'( #$-
%'(%"(,!$%&.( /" #$ -0-,$(%&$P
LL? uL LAM8L81-8LL8
ºLa concenLraclón de la susLancla es dlrecLamenLe proporclonal a la canudad de
luz absorblda o lnversamenLe proporclonal al logarlLmo de la luz Lransmluda"
=.1# ",( ., 65'/-, 6)& -#. .3$53,&1,. 6)&+363)&,.<
La radlaclón lncldenLe sobre la susLancla de lnLeres debe ser monocromáuca.
La absorclón del solvenLe debe ser lnslgnlñcanLe.
La concenLraclón del soluLo esLa denLro de llmlLes esLablecldos.
no esLe presenLe la lnLerferencla ópuca.
no ocurran reacclones qulmlcas enLre la molecula de lnLeres y oLros soluLos o solvenLe de la
soluclón.
8ASLS uLL AnÁLlSlS CuAn1l1A1lvC
La radlaclón de la poLencla radlanLe lnlclal !
"
es aLenuada y se Lransforma en energla
Lransmluda ! medlanLe una soluclón que conuene $ moles por llLro de soluclón
absorbenLe con una longlLud de LrayecLorla de % cenumeLros.
1 Q ?R?
S


l = l
0
10
-cbc
&'()*+ l = lnLensldad de luz Lransmluda
l
0
= lnLensldad de luz lncldenLe
c = CoeñclenLe de exunclón molar
b = LrayecLo de luz en la soluclón (ancho de cubeLa)
c = concenLraclón de soluLo
l/l
0
= 10
-!bc
/Log
Log (l/l
0
) = -!bc /x-1
-Log (l/l
0
) = !bc
-Log (l/l
0
) = -Log L = A
G Q !26
8LLAClCn Ln18L 18AnSMl1AnClA ? A8SC88AnClA
AnÁLlSlS CuAn1l1A1lvC
Ln la especLroscopla de absorclón se requlere de soluclones coloreadas para
cuanuñcar una susLancla.
ue esLa forma a esLe upo de meLódlca Lamblen se le denomlna como
ColorlmeLrla.
CCLC8lML18lA
Ls una forma de revelar la presencla de una susLancla a Lraves de una reacclón
qulmlca que produce un color, %01$ &(,"(-&/$/ "- /&!"%,$+"(," *!'*'!%&'($# $ #$
%'(%"(,!$%&.( /" /&%2$ -0-,$(%&$.
Þara esLa ñnalldad se deben uullzar reacuvos especlñcos para la susLancla que se
qulere deLermlnar
lunuAMLn1C uL LAS 8LACClCnLS CulMlCAS
u1lLlZAuAS ÞA8A LA CuAn1lllCAClCn
3"$%%&'("- /" *0(,' 4($#5
"# 3&1,&.3+#+ +, -57 ',+3+# ., %,-#63)&# 6)& ,- /%)+561) T&#- +, -#
%,#6638&U ?5,+,& .,%<
• ,*-.( */ (.0*1' )* 1*2$$3'(*45
• únlcas o Acopladas
• ,*-.( /2 (26712/*82 )* /2 1*2$$39(5
• ColorlmeLrlcas
• Lnzlmáucas-ColorlmeLrlcas

3"$%%&'("- %&(67%$-5
@#'23). +, 3&1,&.3+#+ +, -57 V#2.)%2#&63#W # 1%#X:. +,- ;,'/) .,
%,-#63)&# 6)& -# 6#&;+#+ ) #6;X3+#+ +, 5&# .5.1#&63#U
B,#6638& Y&36# +, /5&1) T&#-<




Ll comple[o creaunlna/plcraLo es de color amarlllo/naran[a y presenLa una
lnLensldad de color cuya absorbancla a 492nm es dlrecLamenLe
proporclonal a la concenLraclón de creaunlna
L[emplo: ueLermlnaclón de Creaunlna
* MeLodo colorlmeLrlco (meLodo de !añe)
B,#663)&,. #6)/-#+#. +, /5&1) T&#-
Ll comple[o coloreado es de color rosado y presenLa una lnLensldad de
color cuya absorbancla a 346 nm es dlrecLamenLe proporclonal a la
concenLraclón de glucosa.
L[emplo: ueLermlnaclón de Clucosa
* MeLodo colorlmeLrlco- enzlmáuco (meLodo de Clucosa Cxldasa-Þeroxldasa)
B,#663)&,. #6)/-#+#. 63&:;6#
Ll aumenLo de nAÞP+P
+
a Lraves del uempo, medldo a 340 nm, es
proporclonal a la acuvldad de la enzlma.
L[emplo: ueLermlnaclón de la acuvldad de la Creaun-Culnasa
* MeLodo foLomeLrlco-uv
CK-NAC FS - Página 1 *Fluid Stable = líquido estable


CK-NAC FS*
IFCC
Reactivo de diagnóstico para la determinación cuantitativa In Vitro de creatin-quinasa
(CK) en suero o plasma en equipos fotométricos

Información de Pedido
Nº de pedido Tamaño del envase
1 1601 99 10 021 R1 5 x 20 mL + R2 1 x 25 mL
1 1601 99 10 026 R1 5 x 80 mL + R2 1 x 100 mL
1 1601 99 10 023 R1 1 x 800 mL + R2 1 x 200 mL
1 1601 99 10 704 R1 8 x 50 mL + R2 8 x 12,5 mL
1 1601 99 10 917 R1 8 x 60 mL + R2 8 x 15 mL
1 1601 99 10 930 R1 4 x 20 mL + R2 2 x 10 mL
1 1601 99 10 191 R1 4 x 36 mL + R2 4 x 9 mL
1 1601 99 10 940 R1 8 x 60 mL + R2 8 x 15 mL
1 1601 99 90 305 R1 10 x 12 mL + R2 2 x 20 mL
1 1601 99 10 950 2750 Pruebas en ADVIA 1650/1800
Resumen [1,2]
La creatin-quinasa (CK) es una enzima formada por isoenzimas
principalmente del músculo (CK-M) y el cerebro (CK-B). La CK
existe en el suero en forma dimérica como CK-MM, CK-MB, CK-BB y
como macroenzima. Los valores elevados de CK son observados en
daños y lesiones del músculo cardíaco y en enfermedades del
músculo esquelético. La medición de CK se usa sobre todo
conjuntamente con el CK-MB para el diagnóstico y vigilancia del
infarto de miocardio.
Método
Test UV optimizado de acuerdo a DGKC (Sociedad Alemana de
Química Clínica) y la IFCC (Federación Internacional de Química
Clínica y Medicina de Laboratorio).
Principio
Fosfato de creatina + ADP <
CK
> Creatina + ATP

Glucosa + ATP <
HK
> Glucosa-6-fosfato + ADP

Glucosa-6-fosfato + NADP
+
<
G6P-DH
> Gluconato-6-fosfato +
NADPH + H
+

Reactivos
Componentes y Concentraciones
R1 Imidazol pH 6,5 60 mmol/L
Glucosa 27 mmol/L
N-Acetilcisteína (NAC) 27 mmol/L
Acetato de magnesio 14 mmol/L
EDTA-Na
2
2 mmol/L
NADP 2,7 mmol/L
Hexoquinasa (HK) 5 kU/L
R2 Imidazol 160 mmol/L
ADP 11 mmol/L
AMP 28 mmol/L
Deadenosina pentafosfato 55 µmol/L
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6P-DH) 14 kU/L
EDTA-Na
2
2 mmol/L
Fosfato de creatina 160 mmol/L
Instrucciones de Almacenamiento y Estabilidad del Reactivo
Los reactivos son estables hasta el final del mes indicado de
expiración, si se almacena entre 2 - 8 °C, protegidos de la luz y si
se evita la contaminación. ¡No congelar los reactivos!

Advertencias y Precauciones
1. Los reactivos contienen azida de sodio (0.95 g/L) como
preservo. ¡No ingerir! Evitar el contacto con la piel y las
membranas mucosas.
2. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar
todas las medidas de precaución necesarias para la
manipulación de reactivos de laboratorio.
Manipulación de Desechos
Por favor remítase a los requerimientos legales locales.
Preparación del Reactivo
Inicio con Sustrato
Los reactivos están listos para usar.
Inicio con muestra
Mezclar 4 partes de R1 + 1 parte de R2
(p. ej. 20 mL R1 + 5 mL R2) = monoreactivo
Estabilidad: 3 semanas de 2 a 8 °C
2 días de 15 a 25 °C
¡El monoreactivo debe ser protegido de la luz!
Materiales requeridos pero no provistos
Solución de NaCl 9 g/L
Equipo General de Laboratorio
Tipo de muestra
Suero, plasma heparinizado o con EDTA
Estabilidad [7]: 2 días de 20 a 25 °C
7 días de 4 a 8 °C
4 semanas (en oscuridad) a - 20 °C
Desechar las muestras contaminadas!
Procedimiento del Ensayo
Hay disponibles a petición aplicaciones para sistemas
automáticos.
Longitud de onda 340 nm, Hg 365 nm, Hg 334 nm
Paso Óptico 1 cm
Temperatura 37 °C
Medición Contra blanco de reactivo
Inicio con sustrato
Blanco Muestra
Muestra/Calibrador - 50 µL
Agua destilada 50 µL -
Reactivo 1 1000 µL 1000 µL
Mezclar, incubar durante aprox. 3 min., luego añadir:
Reactivo 2 250 µL 250 µL
Mezclar, leer la absorbancia después de 2 min. y empezar a
cronometrar. Leer la absorbancia nuevamente después de 1, 2 y
3 min.
A/min = A/min Muestra/Calibrador
Inicio con muestra
Blanco Muestra
Muestra/Calibrador 40 µL
Agua destilada. 40 µL
Monoreactivo 1000 µL 1000 µL
Mezclar, leer la absorbancia después de 3 min. y empezar a
cronometrar. Leer la absorbancia nuevamente después de 1, 2 y
3 min.
A/min = A/min Muestra/Calibrador
lundamenLo
8eacuvos
Condlclones de
lecLura
Lsquema de
plpeLeo
1lpo de
muesLras
valores de
referencla
Þrecauclones
8eferenclas
blbllográñcas
Cu8vA uL CALl88AClCn
Ll anállsls cuanuLauvo puede
reallzarse a Lraves de:
- Curva de callbraclón
- Lcuaclón de la recLa
- lacLor mulupunLo
- lacLor de callbraclón de un punLo
CbLenclón de facLor de callbraclón a parur de una
curva de callbraclón
@)&6,&1%#638& V'$R+"W G2.)%2#&63#
30 0,123
100 0,271
130 0,403
200 0,604
300 0,863
400 1,163
300 1,433
600 1,360
700 1,337
800 1,444
900 1,333
1000 1,326
Consldere los valores de la Labla, correspondlenLes a resulLados de absorbancla para
el procedlmlenLo de medlda del meLodo de Clucosa Cxldasa Þeroxldasa.
1) Crañque los valores.
2) LsLablezca el cumpllmlenLo
de l a L e y de 8e e r e
l denuñque el rango de
llnealldad y llmlLe de dlluclón.
3) C a l c u l e e l f a c L o r d e
callbraclón mulupunLo y la
ecuaclón de la recLa.