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POINTE SCIENTIFIC ACIDO URICO

REACTIVO DE ACIDO URICO
USO:
Para la determinación cuantitativa de Acido Urico en
suero.
HISTORIA DEL METODO:
El ácido úrico ha sido determinado por métodos de
fosfotungstato,
1
variantes de este método y por
métodos de reducción de hierro, estos son
influenciados por muchas sustancias en el proceso.
a en!ima uricasa ha sido ampliamente usada para
la determinación del ácido úrico por su
especificidad. "ecientemente el peró#ido de
hidrógeno $producto de la reacción uricasa%ácido
úrico&. se a unido a otras reacciones en!imáticas para
dar un producto final de color, 'ue se puede medir a
()*nm.
PRINCIPIOS:
Acido Urico O H O Alantoin CO H O
Uricasa
+ +  →  + + ) ) ) ) ) )
) + + ) ) ) H O Aminoantipirina DHBS crom geno H O
HPD
+ − +  →  + ó
El ácido úrico es o#idado por la uricasa Alantoin
y peró#ido de hidrógeno.
,-./ 0 +%Aminoantipirina 0 Peró#ido de
hidrógeno, en presencia de pero#idasa, produce un
cromógeno coloreado 'ue es medido a ()* nm. a
intensidad y color a ()* nm es proporcional a la
concentración del ácido úrico en la muestra.
REACTIVOS:
"eactivo de ácido úrico $las concentraciones se
refieren al reactivo reconstituido& +%
Aminoantipirina *.1 m2, 1%( ,icloro%)%
-idro#i3en!enosulfanato )m2, uricasa 1(*U4
Pero#idasa (*** U4, .uffer 5.( ± *.1,
Esta3ili!adores no reactivos y llenado.
PRECAUCIONES:
Usar el reactivo solamente para diagnostico 67n
8itro6
PREPARACION DEL REACTIVO:
"econstituya el reactivo con el volumen de agua
destilada 'ue se9ale el vial, disolver suavemente.
ALMACEN DEL REACTIVO:
1. 2anténgalo a )%:
o
;. en almacenamiento.
). El reactivo reconstituido es esta3le por dos
d<as a temp. am3iente y 11 d<as a )%:
o
;.
DETERIORO DEL REACTIVO: NO USE EL
REACTIVO SI:
1. -a entrado agua al vial y se ha formado una
pasta.
). El 3lanco tiene una a3sor3ancia mayor de
*.+** o mayor a ()* nm. un color rosa es
normal.
COLECCION DE LA MUESTRA:
1. El suero no hemoli!ado se recomienda.
). El ácido úrico en suero es esta3le por 1 d<as )%:
o
;. y mas de = meses congelado.
INTERFERENCIAS:
1. a 3ilirru3ina y el ácido ascór3ico dan niveles
3a>os de ácido úrico.
). as prue3as lipémicas dan niveles de ácido
úrico muy elevados.
1. 8ea young para una lista de sustancias 'ue
interfieren
MATERIALES PROVEIDOS:
1. "eactivo ácido úrico.
MATERIALES REQUERIDOS Y NO
PROPORCIONADOS:
1. 7nstrumentos de pipeteo.
). ?u3os4@radilla
1. "elo>.
+. .locA térmico.
(. Espectro capa! de leer ()* nm.
PROCEDIMIENTO MANUAL:
1. "econstituya de acuerdo a instrucciones.
). Eti'uete los tu3os $.lanco, Estándar, Pacientes y
;ontroles&.
1. Pipetee 1.* ml. de reactivo en todos los tu3os.
+. Pre%7ncu3e los tu3os a 15
o
;. por cinco minutos.
(. Agregue *.*)( ml.$)( ul& de muestra en los tu3os
respectivos.
=. 7ncu3e los tu3os a 15
o
;. por ( minutos.
5. Ponga en cero con 3lanco de reactivo a ()* nm y
lea la a3sor3ancia de todos los tu3os.
:. Para determinar los resultados vea cálculos.
NOTAS:
1. /i re'uiere un volumen mayor de 1.* ml. use
*.*( ml. $(* ul& de muestra y ).( ml. de
reactivo.
). as muestras con valores mayores 'ue )(
mg4dl diluya 1B1 con solución salina.
1. as muestra lipémicas de3en correrse con un
3lanco de suero
+. .lanco de sueroB Agregue *.*)( ml. $)( ul& de
muestra a 1 ml. de agua ;olo'ue el cero con
agua en el espectofotómetro, leer y anotar las
a3sor3ancias, hacer los calculos necesarios.
CALIBRACION:
Use estándar de ácido úrico $( mg4dl& o use un
cali3rador apropiado.
CONTROL DE CALIDAD:
Use suero control normal y anormal para el
monitoreo de la reacción.
CALCULOS:
A Absorbancia
A desconocida Conc del Estandard Acido Urico mg dl
A estándard
=
× =
.
. $ 4 &

Ejemplo A Desconocida A Estandard
Conc Std mg dl
Entonces mg dl
B . .
. . 4
B . 4
.


1)=

= =
=
× =
* 1)= * 1**
(
( = 1
* 1**
UNIDADES SI (mM/L):
2ultipli'ue el resultado $mg4dl& por 1* para
convertir dl por y divida entre 1=: $Peso molecular
del ac. úrico&.
mg 4 dl # 1* C m24 mg4dl # .*(D( C m24
1=:
VALORES ESPERADOS:
).( % 5.5 mg4dl
DESEMPEÑO:
1. inearidad B )( mg4dl
). PrecisiónB
Entre r!e"#$
C%n&' D'E . C'V'(
(.: *.*( *.D
D.+ *.*( *.(
C%n%&' D'E' C'V'(
(.D *.*= 1.*
D.( *.*= *.=
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