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UNIERSIDAD DEL VALLE DE


MXICO

MEDICINA
AGRESION Y DEFENSA HUMANA

COPROCULTIVO

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TO
A
EQUIPO #2
(20%) - GABRIELA AYALA RODRIGUEZ
(20%) - ARIENNE MARTNEZ JASSO
(20%) - ELOY EMMANUEL ROMERO MARTNEZ
(20%) - MIGUEL MORALES GALINDO
(20%) - RICARDO MILAN AGUIRRE

M.C. HCTOR DANIEL FLORES CHAVEZ

23 DE MAYO DEL 2014

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2. NDICE




1. Portada

2. ndice

3. Resumen

4. Marco terico

5. Objetivos

6. Materiales y Mtodos

7. Resultados

8. Discusin

9. Conclusiones

10. Referencia




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RESUMEN
En esta prctica se realiz la tcnica de coprocultivo, para poder identificar
diversas enterobacterias que se pueden llegar a encontrar en las heces de una
persona. Paso a paso, a lo largo del documento se explicaran todos los
procedimientos, as como tambin los resultados ms importantes que se
obtuvieron.
Para empezar, se obtuvo la muestra de heces de la persona, por medio de una
deposicin normal; ya la muestra en el laboratorio, primero que nada se realiz
un examen macroscpico, tomando en cuenta que la muestra tena una
consistencia pastosa, color caf claro, con presencia de fibras de alimentos no
digeridos del todo.
Para el examen microscpico se realiz la tcnica de Willis-Molloy, que se trat
de colocar un fragmento de las heces, aproximadamente de un gr en el tubo de
ensayo, posteriormente se diluyo en una solucin salina saturada (hasta el tope
del tubo de ensayo), y ya que quedo completamente homognea, se dej
reposar.
Todo este procedimiento se utiliza principalmente, como ya se haba
mencionado, para identificar la presencia de patgenos en el tubo digestivo
(heces); como bien podran ser salmonela, shigella, campylobacter, e. Coli,
Vibrio cholera, estos entre otros. En este paciente tambin se observaron al
microscopio restos de polen, lo que indica que tal vez viva o se desarrolle en
un ambiente donde halla flores silvestres, etc.
Se realizaron procedimientos de siembra en las cajas Petri con diferentes
agares y posteriormente con las colonias que resultaron de estas se realiz
siembra en caldos; tambin realizamos dos tinciones Gram de las muestras de
los agares, dando como resultado Gram negativo. De todos estos
procedimientos se obtuvo como resultado presencia de E. Coli, lo cual muestra
una flora normal en el paciente.

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MARCO TEORICO
Las enterobacterias se tratan de microorganismos Gram negativas que
principalmente se caracterizan por tener una morfologa de lo que se conoce
como bacilos o cocos. Este tipo de bacterias se encuentran principalmente en
la flora intestinal del paciente; aunque tambin pueden llegar a ser transitorias
ya que se pueden encontrar en diversas estructuras, ms que nada en
regiones hmedas, como lo son la cavidad bucal, perineo, fosas nasales y
genitales femeninas.
Estos se expulsan por medio de las heces, as que su manera de contagio es la
va ano-mano-boca, o si el paciente ha tenido contacto con objetos inanimados
previamente contaminados. Estos se expulsan por medio de las heces.
La enterobacteria ms comn es la Escherichia Coli ya que constituye casi el
80% de la flora aerbica intestinal, por lo que siempre se encuentra en la
materia fecal.
El coprocultivo o tambin llamado coproparacitoscopico se trata de un examen
de laboratorio llevado a cabo en forma de cultivo de la materia fecal. Este se
utiliza principalmente para un diagnostico microbiolgico e identificar diversos
organismos causantes de las enfermedades gastrointestinales.
Este examen est indicado cuando se sospecha de infecciones en sistema
gastrointestinal, principalmente todas aquellas que son provocadas por
bacterias o las enterobacterias; estas infecciones la mayora de las veces
presentan sintomatologa y las ms comunes de estas es la diarrea severa,
persistente o recurrente sin alguna causa conocida.




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OBJETIVOS
Conocer las bases para realizar un estudio coproparasitolgico
Conocer el mtodo de Willis
Conocer las caractersticas microscpicas y macroscpicas de las heces

MATERIALES Y MTODOS
En esta prctica se utilizaron varios materiales para poder llegar a determinar
qu tipo de parsitos se encontraban en el contenido fecal, que fueron los
siguientes:
Solucin fisiolgica de NaCl
Solucin sobresaturada de NaCl
Lugol
Agar salmonella- Shigella (SS)
Agar Sulfito de Bismuto
Agar EMB
Agar MacConkey
Agar Sulfa
Caldo tetrationato
Palillos
Guantes de Ltex
Cubrebocas
2 Matraces de 250 ml
2 Portaobjetos
Cubreobjetos
Microscopio
2 cajas de Petri
Tubo para cultivo
12 tubos de ensayo
Pruebas bioqumicas de: TSI, SIM, LIA, MIO, Citrato de Simmons, Urea.
5 gr de heces

Toma de Muestras
Toma de Heces
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Para que la toma de heces sea recogida adecuadamente se le pide al paciente
que 72 horas antes reduzca en la dieta las fculas y verduras, en cuanto a
medicamentos no ingiera sales de bario, magnesio, bismuto y pergantes
oleosos.

Examen macroscpico
El anlisis macroscpico las heces presentaron los siguientes aspectos:
a) Consistencia fecal:
Las heces tenan consistencia semislida, de color caf claro, un olor
ftido
b) Presencia de elementos no fecales
Tena presencia de granos de elotes
c) Presencia de parsitos y pseudoparasitos
Con la presencia del parasito de E. Coli
Examen microscpico
1. Colocar en un tubo de ensayo un 1gr (tamao de chcharo) de las heces
a examinar
2. Aadir poco a poco solucin salina fisiolgica hasta que se homogenizan
las heces, todo esto con ayuda del abate lenguas.
3. Colocar en un portaobjetos limpio, una gota de suspensin fecal
4. Sobre la gota de suspensin, colocar una gota de Lugol concentrado
5. Cubrir con un cubreobjetos y observar al microscopio

Mtodo de Willis
1. Diluir 1 o 2 g de heces en solucin sobresaturada
2. Verter la suspensin fecal homognea en un recipiente de unos 2.5 cm
de dimetro hasta que est totalmente lleno y forme un menisco en la
superficie
3. Colocar un portaobjetos en contacto con el menisco liquido de 30-35
minutos
4. Ya pasados los 30-35 minutos, retirar rpidamente el portaobjetos,
cubrirlo y observar los posibles elementos parasitarios retenidos en la
porcin liquida adherida al portaobjetos.
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Coprocultivo
1. Preparar caldo tetrationato con .915 gr de polvo y 10 ml de solucin
salina
2. Se tom 1 ml de la mezcla principal de heces con solucin salina
3. Se deja incubar por 5 das

Agares
1. Agar EMB: se tom .72 gr
2. Agar MacConkey: 1 gr
3. Agar Salmonella- Shigella: 1.2 gr
4. Agar Sulfito de Bismuto: 1.4 gr
Se prepar 4 cultivos en los cuales el agar EMB y MacConkey se esterilizan
por 15 minutos y el sulfito y salmonella.

Pruebas Bioqumicas
SIM: .363 gr
MIO: .460 gr
TSI: .890 gr
LIA: .490gr
Urea: .580 gr
Citrato de Simmons: .363 gr
Se preparan las pruebas bioqumicas para poder determinar los tipos de
parsitos, se colocan en tubos de ensayo.

RESULTADOS
De los agares se encontr:
EMB: se encontr colonia verdes metlicos y otros rosas lo cual es
caracterstico de Coli: circulares convexos y enteros
SS: se observ color rosado en todo el medio. Son circulares y convexos con
margen entero.
SB: colonia con un cultivo negro y opaco en forma puntiforme con elevacin
convexa y margen entero
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MacConkey: colonias de color rosados y fiusha, en forma puntiforme elevacin
convexa y margen entero.


Pruebas bioqumicas
EMB
TSI: K/A
SIM: + I: -
LIA: K/K
M:+ I: + O:+
CITRATO: -
UREA: -
CON RESULTADO CARACTERISTICO DE E. COLI

SULFITO
TSI: A/A
SIM: + I: +
LIA: -
M: + I: + O:+
CITRATO: -
UREA: -
CON REULTADO DE E. COLI TRADICIONAL

DISCUSION
Con esta prctica pudimos observar y descubrir que las bacterias que se
encontraban en las muestras fecales de nuestro compaero, eran E. Coli, de
acuerdo a las distintas caractersticas que presentaba macroscpicamente y a
cmo reaccion ante las pruebas qumicas que preparamos.
CONCLUSIN
Esta prctica nos ayud a conocer la forma en cmo se realizan las distintas
pruebas para realizar correctamente un coprocultivo, aprendimos a realizar el
mtodo de Willis, al momento de preparar las muestras fecales para poder
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estudiarlas. Aprendimos a identificar las caractersticas principales de la
bacteria ms comn en heces, E. Coli. Adems de practicar otra vez las
pruebas bioqumicas las cuales tuvimos que preparar 2 para los cultivos que
ms llamaban la atencin.
BIBLIOGRAFIA
Cabello, R. R. (2007). Microbiologia y parasitologia humana / Microbiology and Human
Parasitology: Bases etiologicas de las enfermedades infecciosas y parasitarias. Ed. Mdica
Panamericana.
Jimenez, L. M. (2002). Ayudas diagnsticas: anlisis e interpretacin. caldas.
Santiago Escalante, J.-M. G. (1999). Atlas coprocultivo: manual de procedimientos:
ilustraciones. Ecuador.